Aktivitas antimikroba dan sifat fitokimia daun Annona muricata

Abstrak: Annona muricata adalah tanaman ekonomi dan tradisional Nigeria yang
terkenal. Penelitian ini meneliti sifat-sifat unsur penyusun dan aktivitas antimikroba
ekstrak daun A. muricata. Ekstrak diuji terhadap Escherichia coli, Pseudomonas
aeuroginosa, Staphylococcus aureus dan Candida albicans dengan metode difusi agar
baik pada konsentrasi 20 mg / mL. Ekstrak metanol (AM2) dan etil asetat (AM4)
dicirikan dengan spektroskopi UV dan IR. Struktur morfologi daun A. muricata
diamati pada pembesaran 20.000 X menggunakan SEM dan kemudian dianalisis EDX.
Hasil skrining fitokimia mengungkapkan adanya senyawa fenolik, flavonoid, tanin,
alkaloid, saponin dan glikosida jantung pada ekstrak. Anthraquinone ditemukan tidak
ada. Ekstrak etil asetat sangat aktif terhadap bakteri gram positif, S. aureus (ZI 42 mm;
AI = 1,31) dan gram positif gram aerobin gram positif (ZI 34 mm; AI = 1,13).
Spektrum IR ekstrak AM2 dan AM4 A. muricata menunjukkan puncak pada frekuensi
3377 cm-1 sampai 3440 cm-1 yang menunjukkan adanya peregangan OH fenolik. Ini
mendukung fenolat yang terdeteksi secara kimiawi. Spektrum UV ekstrak metanol
menunjukkan puncak yang khas flavonoid dan fenolat. SEM mengungkapkan ukuran
partikel daun sebagai inhomogeneous. Hasil EDX menunjukkan konsentrasi oksigen
tinggi 73,5% dan konsentrasi karbon 26,5%. Temuan ini membuktikan potensi
antiinfektif daun Annona muricata dan membentuk marker fisiko-kimia untuk ekstrak
aktif.

pengantar
Annona muricata termasuk keluarga Annonaceae. Ini terkenal dengan buahnya yang
dapat dimakan yang biasa disebut sirsak [1]. Buahnya memiliki sedikit rasa asam saat
matang. Annona muricata digunakan dalam pengobatan tradisional di banyak daerah.
Daun segar saat dihancurkan dioleskan pada erupsi kulit untuk penyembuhan cepat.
Sebuah tapal daun A. muricata muda dioleskan pada kulit untuk meringankan rematik
dan kulit lainnya seperti eksim. Bila dioleskan selama penyembuhan luka, hasilnya
hanya sedikit atau tidak ada bekas luka kulit [2]. Rebusan juga bisa digunakan sebagai
kompres basah pada kaki bengkak dan radang lainnya. Jus buah diambil secara oral
sebagai obat herbal artritis, hematuria dan penyakit hati [3]. Teh daun digunakan
untuk katarak di Andes Peru. Ekstrak biji digunakan untuk membunuh parasit
eksternal, kutu kepala, dan cacing [4, 5]. Di Amazon Peru, kulit kayu, akar dan daun
digunakan untuk pengobatan diabetes serta obat penenang dan antispasmodik. Teh
daun atau kulit kayu atau kombinasi keduanya digunakan sebagai obat penenang dan
tonik jantung oleh orang-orang pribumi Guyana. Di Amazon Brasil, teh daun
digunakan untuk masalah hati dan minyak daun dan buah mentah dicampur dengan
minyak zaitun dan digunakan secara eksternal untuk neuralgia, rematik, dan nyeri
artritis [3]. Dilaporkan bahwa sampel sampel kasar A. muricata menunjukkan tingkat
sitotoksisitas yang berbeda terhadap garis sel kanker payudara. B1 AMCE yang
dipilih mengurangi ukuran dan berat tumor, menunjukkan ciri-ciri anti-metastasis, dan
apoptosis yang diinduksi secara in vitro dan in vivo dari 4 sel T1. Selanjutnya, ia
menurunkan tingkat oksida nitrat dan malondialdehida dalam tumor sementara juga
meningkatkan tingkat sel darah putih, sel T, dan populasi sel pembunuh alami. Pada
penelitian lain, A. muricata telah diselidiki dan melaporkan bahwa ekstrak daun
kloroform / metanol (1: 1) menunjukkan penghambatan 67% plasmodium falciparum
F32 in vitro pada 20 μg / mL. Penelitian ini mengevaluasi potensi antimikroba,
konstituen fitokimia dan karakteristik fisiko-kimia dari ekstrak daun A. muricata.

Bahan dan metode

Daun Annona muricata dikumpulkan dari Ota, Nigeria. Tanaman itu diidentifikasi di
herbarium di Biological Department, Covenant University, Ota. Nigeria. Daun
tanaman dikeringkan selama dua minggu lalu dihancurkan dan disimpan dalam wadah
bersih
pada suhu kamar untuk analisis lebih lanjut. Ekstraksi: Daunnya dihilangkan dan
diekstraksi dengan metanol pada maserasi dingin. Ekstrak disaring dan disaring di
atas natrium sulfat anhidrat dan kemudian diuapkan dalam vakum pada suhu 45o C.
Ekstrak kasar dipecah menjadi kloroform, etil asetat dan lapisan berair yang
berturut-turut menggunakan corong pemisah. Fraksi pekat dikeringkan pada desikator
dan disimpan untuk analisis lebih lanjut.
Penapisan dan analisis fitokimia: Sampel A. muricata (AM) yang dikeringkan
diekstraksi dengan campuran air metanol 50:50 dan ekstrak daun diuji untuk phenin
tannin, antrakuinon, flavonoid, alkaloid, saponin dan glikosida jantung sesuai dengan
yang dimodifikasi. prosedur standar [8]. Spektrum UVVisible diperoleh pada MeOH
pada spektrofotometer UV Genesys 10 sementara pengukuran FTIR dijalankan pada
spektrometer Perkin-Elmer 2. Pemindaian mikroskop elektron dijalankan pada
pembesaran 20 pm untuk mengamati gambar bening dari partikel daun tanaman
dalam koloid yang terdispersi dengan ukuran seragam. Konsentrasi unsur dari spesies
tanaman ditentukan oleh EDX. Uji coba antimikroba: Aktivitas antimikroba diuji
terhadap strain mikro organisme berikut ini: Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, Staphylococcus aureus, dan Candida albicans. Prosedur standar yang
dimodifikasi [9, 10] diadopsi untuk pengujian.
Uji aktivitas antibakteri:
Aktivitas antibakteri ekstrak ditentukan dengan metode difusi yang baik pada medium
nutrien agar. Media agar hara dituang ke petri-plate. Setelah media dipadatkan,
inokulum disebarkan di piring padat dengan sapuan steril yang dibasahi dengan
suspensi bakteri. Penggerek gabus standar berdiameter 9 mm digunakan untuk
menghasilkan dosis yang baik dan dosis yang sama (20 mg / mL) dari masing-masing
sampel uji dipindahkan ke sumur dengan semprit jarum suntik. Gentamicin diambil
sebagai kontrol positif. Pelat diinkubasi pada suhu 37 ºC selama 24 jam. Kemudian
aktivitas antibakteri ditentukan dengan mengukur diameter zona penghambatan dan
Indeks Aktivitas dihitung.
Uji aktivitas antijamur: Aktivitas antijamur ekstrak ditentukan dengan metode difusi
yang baik pada medium Sabouraud Dextrose agar (SDA). Media Sabreaud Dextrose
agar (SDA) dituangkan ke piring petri. Setelah media dipadatkan, inokulum
disebarkan di piring padat dengan sapuan steril yang dibasahi dengan suspensi jamur.
Dan 0,2 ml sampel uji dimasukkan ke dalam sumur pada konsentrasi 20 mg / mL.
Pelat diinkubasi pada suhu kamar 25 0C selama 48 jam. Kemudian aktivitas antijamur
ditentukan dengan mengukur diameter zona penghambatan dan Indeks Aktivitas
dihitung.

Hasil dan Diskusi

Penapisan fitokimia
Hasil skrining fitokimia (Tabel 1) menunjukkan adanya senyawa fenolik, flavonoid,
tanin, alkaloid, saponin dan glikosida jantung sebagai metabolit sekunder pada ekstrak
daun Annona muricata. Namun, Anthraquinone ditemukan tidak ada dalam sampel
daun. Karya sebelumnya [3, 11] setuju dengan temuan penelitian ini. Berbagai
laporan menunjukkan tanin, flavonoid dan fenolat sebagai pemulung radikal bebas
yang memiliki sifat anti-oksidatif, sifat antimikroba serta sifat anti-kanker yang kuat.

Tabel 1. Kelas metabolit sekunder pada daun Annona muricata

Analisis spektral UV-Terlihat

Spektrum UV-Vis ekstrak metanol menunjukkan puncak pada 280, 325 dan 664 nm
yang khas flavonoid dan fenolat. Puncak pada 325 nm menghilang dalam spektrum
ekstrak etil asetat yang menunjukkan bahwa metabolit di daerah tersebut cenderung
lebih polar dan hidroksilasi.

3.3. Transformasi spektrum infra merah Fourier: Pengukuran FTIR adalah

dilakukan untuk identifikasi kelompok fungsional (Tabel 2). Spektrum IR ekstrak etil
asetat dan ekstrak metanol A. muricata menunjukkan puncak pada frekuensi 3377
cm-1 sampai 3500 cm-1 yang mengindikasikan kelompok hidroksil yang luas karena
molekul ikatan hidrogen. OH luas sangat tumpang tindih dengan C = C-Hstr
(3100-300 cm-1) pada spektrum umpan MeOH (Gambar 2) namun sedikit punuk
ditunjukkan pada spektrum ekstrak EtoAC (Gambar 3) karena penurunan efek ikatan
hidrogen. Juga adanya puncak pada frekuensi 1612 cm-1 - 1450 cm-1 oleh ekstrak
menunjukkan adanya cincin aromatik C-C = C str. Kedua kelompok fungsional
tersebut bersama-sama mengumpulkan kemungkinan adanya senyawa fenolik. Data
pendukung adanya fenolat yang terdeteksi secara kimiawi. Senyawa fenolik diketahui
memiliki sifat antioksidan yang baik [15]. Dalam studi yang dilakukan oleh Muthu
dan Durairaj [5], mereka melaporkan bahwa ekstrak hydroalcohol dari daun Annona
muricata memiliki nilai antioksidan total (TAC) dengan nilai IC50 44,2474 μg / mL.
Potensi pembilasan radikal melawan superoksida, oksida nitrat, hidroksil, dan
hidrogen peroksida ternyata efektif dengan nilai IC50 masing-masing 59,05, 0,103,
70,12 + 0,023, 134,21 + 0,063 dan 43,4 + 0,102 μg / mL. Temuan ini menyarankan
agar daun Annona muricata menjadi sumber antioksidan dan agen pemulung yang
baik yang cocok untuk pencegahan penyakit manusia yang disebabkan oleh stres
oksidatif.
Scanning Electron Microscope
Gambar mikroskop elektron pemindaian (SEM) pada pembesaran 20.000 X yang
menunjukkan topografi permukaan sampel ditunjukkan pada Gambar 4. Ini
menunjukkan tekstur sebagai partikel kasar dan daun menunjukkan ukuran yang tidak
homogen.

Energi Dispersive X-Ray

Analisis EDX (Gambar 5 dan Tabel 3) memberikan informasi tentang komposisi
elemen dalam sampel. Hasil EDX menunjukkan konsentrasi oksigen tinggi 73,5% dan
konsentrasi karbon 26,5%.

Aktivitas antimikroba
Aktivitas antimikroba ekstrak daun Annona muricta ditunjukkan pada Tabel 4. Hasil
antimikroba ekstrak uji pada potensi 20 mg / mL dibandingkan dengan aktivitas
standar, Gentamicin (20 關 g / mL). Hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak
menunjukkan aktivitas antimikroba tinggi sampai sedang kecuali ekstrak air (AM5).
Ekstrak etil asetat (AM4) ditemukan sangat aktif terhadap bakteri gram positif, S.
aureus (ZI 42 mm; AI = 1,31) dan gram positif gram aerobinus gram positif (ZI 34
mm; AI = 1,13). Selain itu, AM4 menunjukkan aktivitas sedang melawan E. coli (ZI
22 mm; AI = 0,73) dan C. albicans (ZI 28 mm; AI = 0,89). Ekstrak heksana Annona
muricata (AM1) memiliki zona hambatan tertinggi (42 mm) dan indeks aktivitas (1,40)
melawan E.coli diikuti oleh ekstrak MeOH (ZI = 38 mm; AI = 1,27). Fraksi berair
umumnya menunjukkan aktivitas rendah terhadap patogen uji, indeks aktivitas
berkisar antara 0,73 sampai 0,63 dibandingkan dengan obat referensi.
Solomon-Wisdom dkk. (2014) melaporkan bahwa ekstrak metanol daun tanaman
menunjukkan aktivitas antibakteri maksimal dari pada ekstrak air. Dalam penelitian
ini, di antara berbagai ekstrak pelarut yang dipelajari etil asetat dan heksana
menunjukkan sifat antimikroba tertinggi. Studi ini mendukung penggunaan
etnomedikinal Annona muricata untuk pengobatan infeksi.

Kesimpulan
Dalam penelitian ini, daun Annona muricata telah ditemukan kaya akan senyawa
fenolik, flavonoid, tanin, alkaloid, saponin dan glikosida jantung sebagai sekunder.
metabolisme. Namun, Anthraquinone ditemukan tidak ada dalam sampel daun.
Penelitian antimikroba menunjukkan bahwa di antara berbagai ekstrak pelarut yang
dipelajari etil asetat dan heksana menunjukkan sifat antimikroba tertinggi. Hasilnya
menunjukkan bahwa pemurnian ekstrak metanol yang merupakan ekstrak kasar
meningkatkan potensi fraksinya. Oleh karena itu, dari indeks aktivitas, ini
membuktikan bahwa fraksi etil asetat dan heksana A. muricata memiliki sifat
antiinfektif yang baik.
Temuan ini menunjukkan potensi anti infeksi dari daun Annona muricata dan
membentuk penanda kimia-fisika (Analisis UV-Vis, IR, SEM, EDX) untuk ekstrak
aktif yang dapat berharga dalam fraksinasi dan standardisasi obat nabati. Sifat
antimikroba yang bagus yang ditunjukkan oleh daun Annona muricata akan
memberikan manfaat yang berharga bagi manajemen kesehatan jika diproses lebih
lanjut.