Hidrokinon PDF

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
PENETAPAN KADAR HIDROKUINON DALAM LARUTAN PENCERAH

MEREK “A” YANG BEREDAR DI PASARAN DENGAN METODE
SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh:
Shinta Lia Dewi Handoyo
NIM : 048114096
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
PENETAPAN KADAR HIDROKUINON DALAM LARUTAN PENCERAH

MEREK “A” YANG BEREDAR DI PASARAN DENGAN METODE
SPEKTROFOTOMETRI VISIBEL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh:
NIM : 048114096
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2010
ii
iii
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Papa dan mama yang mengubah kisah hidupku
dengan berbagai cara mereka mengubah kekuranganku
menjadi kelebihan yang mengagumkan
dan membuatku mampu berjalan dengan tenang,
dan bahagia atas bayang-bayang kepedihanku
dan penderitaan yang kujalani.
Karya ini yang kupersembahkan untuk:
Papa dan mama yang selalu sabar dan membimbing saya

Kakak dan adikku yang selalu mendukung saya
Serta almamaterku
v
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang telah
melimpahkan segala berkat, kasih, dan karunia-Nya untuk menyelesaikan penelitian dan
penulisan skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Larutan Pencerah
Merek”A” yang Beredar di Pasaran dengan Metode Spektrofotometri Visibel.” Skripsi
ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat tugas akhir untuk memperolehi gelar Sarjana
Farmasi (S.Farm.) Program studi Ilmu Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Dalam menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini, penulis telah banyak
mendapat bantuan baik moral maupun spiritual dan dukungan yang berupa bimbingan,
dorongan, sarana, maupun fasilitas dari berbagai pihak dalam penulisan skripsi ini. Oleh
karena itu penulis ingin mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada:
1. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
2. Christine Patramurti, S.Si, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing atas kesabarannya
membimbing, memberi saran dan kritik, dan pengarahan selama penyusunan proposal
hingga selesainya skripsi ini.
3. Lucia Wiwid Wijayanti, M. Si., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktu
untuk masukan, saran, dan kritik yang membangun selama penelitian.
4. Jeffry Julianus, M. Si., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktu untuk
masukan, saran, dan kritik yang membangun bagi penulis.
vi
5. Rekan tim penelitian hidrokuinon (Leo dan Lian) yang selama ini telah membantu,
menemani, mendukung dan menyemangati penulis selama penelitian dan penyusunan
skripsi ini.
6. Segenap staf laboran terutama laboran lantai IV atas masukan, bantuan, kebersamaan
dan kerjasamanya selama penelitian.
7. Acay telah membantu mencari teman yang dapat membuat gambar dan tata tulis.
8. Tris dan Putut telah membantu membuat gambar dan mengatur tata tulis selama ini.
9. Teman-teman FST 2004 atas persahabatan dan kekompakan selama kuliah.
10. Semua pihak lain yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu
penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penelitian dan penyusunan skripsi ini masih memiliki
kekurangan mengingat keterbatasan kemampuan dan pengetahuan penulis, maka penulis
sangat mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari semua pihak demi kemajuan
dan kesempurnaan penelitian yang telah dilakukan. Semoga skripsi ini memberikan manfaat
bagi orang lain yang membutuhkan.
Yogyakarta, 10 April 2010
Penulis
vii
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA
Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini tidak
memuat karya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam kutipan
dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.
Yogyakarta, 10 April 2010

Penulis

NIM : 048114096
viii
ix
INTISARI
Hidrokuinon merupakan salah satu zat aktif yang digunakan secara luas pada
produk pencerah kulit. Penggunaan hidrokuinon harus dibatasi kadarnya karena
penggunaannya dalam jumlah yang berlebihan akan menimbulkan efek samping yang
berbahaya. Untuk melindungi kenyamanan dan keamanan bagi konsumen, hal itu sangat
diperlukan kontrol kualitas produk larutan pencerah untuk mengetahui mutu produk yang
dihasilkan sehingga kandungan hidrokuinonnya dapat diketahui dan hasilnya dapat
dipertanggungjawabkan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kadar
hidrokuinon dalam larutan pencerah merek “A” yang beredar di pasaran dengan metode
spektrofotometri visibel.
Penelitian ini merupakan penelitian non eksperimental deskriptif menggunakan
metode spektrofotometri visibel dengan pereaksi o-fenantrolina. Pemilihan metode ini
didasarkan atas pembentukan komplek warna antara Fe 2+ dan o-fenantrolina dengan
adanya hidrokuinon sebagai agen pereduksi yang baik.
Berdasarkan analisis hasil, diperoleh kadar rata-rata hidrokuinon yang terkandung
dalam sampel adalah 3,583 ± 0,085 % b/v. Dari data ini dapat disimpulkan bahwa sampel
lebih besar dari persyaratan yang telah ditentukan oleh BPOM.
Kata kunci: hidrokuinon, larutan pencerah, spektrofotometer visibel.
x
ABSTRACT
Hydroquinone is one of active agent that can be used widely at product of

bleaching skin. The uses of hydroquinone must be limited because abundant usage in a
big concentractions can cause dangerous adverse effect. For protect consument
confortabel and safety, so that quality control product is very needed to know quality of
product is producted so that the hydroquinone content is knowable and the result can be
guaranteed. Purpose of this research was know hydroquionone concentraction of
bleaching solution merek”A” was revolved in market with visible spectophotometry
method.
This study was a non experimental descriptive which was using visible
spectrophotometry method with o-phenanthroline reagent. The choice the methods based
on form a coloured complex ion from that amount of Fe 2+ and o-phenanthroline with
hydroquinone as a good reducing agent.
Based on the result analysis, it was found that the average concentraction of
hydroquinone in the sample with the trade mark was 3,583 ± 0,085 % b/v. Based on the
data, it can be concluded that sample was not conditional fulfilled in BPOM.
Keywords: hydroquinone, bleaching solution, visible spectrophotometry.
xi
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .......................................................................................................... ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................................ iii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................................... iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................................... v
PRAKATA ......................................................................................................................... vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................................................................... viii
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ............................................ ix
INTISARI ........................................................................................................................... x
ABSTRACT ........................................................................................................................ xi
DAFTAR ISI ..................................................................................................................... xii
DAFTAR TABEL ............................................................................................................. xv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................................... xvi
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................................... xvii
BAB 1. PENDAHULUAN ................................................................................................. 1
A. Latar Belakang ........................................................................................................ 1
1. Permasalahan .................................................................................................... 3
2. Keaslian Penelitian............................................................................................ 3
3. Manfaat Penelitian ............................................................................................ 4
B. Tujuan Penelitian .................................................................................................... 5
xii
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ................................................................................ 6
A. Larutan .................................................................................................................... 6
1. Pengertian larutan ............................................................................................. 6
2. Penggolongan tipe larutan................................................................................. 7
3. Faktor yang mempengaruhi kelarutan............................................................... 9
4. Kelebihan dan kekurangan sediaan larutan..................................................... 11
B. Larutan Pencerah................................................................................................... 13
C. Hidrokuinon .......................................................................................................... 14
1. Struktur dan sifat hidrokuinon ........................................................................ 14
2. Penggunaan dan mekanisme kerja hidrokuinon ............................................. 15
3. Efek samping hidrokuinon .............................................................................. 16
D. Spektrofotometri Visibel ....................................................................................... 17
1. Deskripsi umum .............................................................................................. 17
2. Interaksi elektron dengan radiasi elektromagnetik (REM) ............................. 18
3. Analisis kuantitatif dengan spektrofotometri visible ...................................... 25
4. Instrumentasi spektrofotometri visibel............................................................ 29
E. Senyawa kompleks.................................................................................................30
F. Hipotesis ............................................................................................................... 37
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ........................................................................ 38
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................................ 38
B. Definisi Operasional.............................................................................................. 38
xiii
C. Bahan Penelitian.................................................................................................... 38
D. Alat Penelitian ....................................................................................................... 39
E. Tata Cara Penelitian .............................................................................................. 39
1. Pembuatan larutan baku hidrokuinon ............................................................. 39
2. Pembuatan larutan besi (III) ............................................................................ 39
3. Pembuatan larutan o-fenantrolina ................................................................... 40
4. Pembuatan larutan natrium asetat ................................................................... 40
5. Penetapan kadar hidrokuinon dalam sampel larutan pencerah ....................... 41
F. Analisis Hasil ........................................................................................................ 42
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................................... 43
A. Optimasi Metode ................................................................................................... 43
1. Penentuan Operating Time (OT) .................................................................... 46
2. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum........................................ 48
3. Pembuatan kurva baku .................................................................................... 52
B. Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Sampel Larutan Pencerah ......................... 55
1. Pemilihan sampel ............................................................................................ 55
2. Preparasi sampel ............................................................................................. 56
3. Penetapan kadar hidrokuinon .......................................................................... 56
BAB V. KESIMPULAN .................................................................................................. 59

DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 60
LAMPIRAN ...................................................................................................................... 64
BIOGRAFI PENULIS ...................................................................................................... 75
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I. Kategori kelarutan ............................................................................................. 7
Tabel II. Data replikasi seri baku hidrokuinon ................................................................ 3
Tabel III. Kadar rata-rata hidrokuinon dalam sampel larutan pencerah ......................... 57
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Struktur hidrokuinon ..................................................................................... 14
Gambar 2. Reaksi oksidasi hidrokuinon menjadi kuinon ............................................... 15
Gambar 3. Tingkat energi elektronik molekul ................................................................ 19
Gambar 4. Pengaruh pelarut polar pada transisi n → π* ................................................ 21
Gambar 5. Pengaruh pelarut-pelarut pada transisi π → π* ............................................. 22
Gambar 6. Instrumentasi spektrofotometer visibel ......................................................... 29
Gambar 7. Reaksi pembentukan senyawa kompleks [(C12H8N2)3Fe]2+ ......................... 32
Gambar 8. Spliting orbital d pada senyawa kompleks oktahedral .................................. 34
Gambar 9. Spliting orbital d pada Fe2+ dengan adanya ligan o-fenantrolina .................. 35
Gambar 10. Transisi elektron dari orbital d ke π* ............................................................ 36
Gambar 11. Pembentukan ikatan koordinasi pada senyawa kompleks ............................ 36
Gambar 12. Reaksi Redoks antara besi (III) dan hidrokuinon.......................................... 44
Gambar 13. Reaksi pembentukan senyawa kompleks berwarna ...................................... 46
Gambar 14. Hasil penetapan operating time pada panjang gelombang 510,0 nm............ 48
Gambar 15. Hasil pembacaan panjang gelombang serapan maksimum ........................... 51
Gambar 16. Kurva baku hidrokuinon dari replikasi II ...................................................... 54
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Data penimbangan hidrokuinon baku untuk kurva baku ............................ 64
Lampiran 2. Perhitungan seri kadar baku hidrokuinon ................................................... 64
Lampiran 3. Hasil scanning Operating Time (OT) ......................................................... 65
Lampiran 4. Data Operating Time (OT) ......................................................................... 66
Lampiran 5. Hasil scanning λ max kadar hidrokuinon ................................................... 66
Lampiran 6. Data scanning λ max kadar hidrokuinon .................................................... 67
Lampiran 7. Hasil scanning kurva baku hidrokuinon ..................................................... 67
Lampiran 8. Data kurva baku hidrokuinon ..................................................................... 68
Lampiran 9. Kurva baku dari 3 replikasi ........................................................................ 68
Lampiran 10. Komposisi sampel larutan pencerah hidrokuinon ...................................... 69
Lampiran 11. Gambar kemasan larutan pencerah merek”A” telah beredar di pasaran .... 70
Lampiran 12. Hasil pembacaan serapan sampel ............................................................... 71
Lampiran 13. Data serapan sampel ................................................................................... 73
Lampiran 14. Contoh perhitungan kadar hidrokuinon dalam sampel larutan pencerah ... 74
Lampiran 15. Data perhitungan KV (%) ........................................................................... 74
Lampiran 16. Foto larutan sampel dan blangko ................................................................ 74
xvii
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Penggunaan produk kosmetik semakin berkembang di masyarakat terutama
produk pencerah yang biasa digunakan untuk menjaga penampilan dan mempercantik
penampilan tubuh seseorang. Produk pencerah ini dipercaya konsumen dapat
membuat penampilan tubuh seseorang tampak putih dan bersih seri sehingga lebih
percaya diri.
Sediaan pencerah kulit yang beredar di pasaran dalam bentuk larutan paling
disukai oleh konsumen karena mudah menyebar rata di permukaan kulit, tidak
lengket, tidak meninggalkan bekas, dan lebih mudah dibersihkan. Salah satu zat aktif
yang banyak terkandung dalam larutan pencerah kulit adalah hidrokuinon yang
berfungsi untuk menyerap UV dan mengurangi produksi melanin atau
menghilangkan bercak-bercak hitam pada kulit sehingga membuat kulit tampak lebih
putih (Anonim, 2005 b).
Penggunaan hidrokuinon sebagai agen pencerah kulit dapat dikategorikan
menjadi dua yaitu dua yaitu sebagai produk kosmetik dan sebagai obat. Dalam
produk kosmetika, kadar hidrokuinon ≤ 2% biasanya dijual secara bebas di pasaran.
Sedangkan dalam produk obat, hidrokuinon dijual berdasarkan resep dan pengawasan
dari dokter karena kadar yang digunakan umumnya lebih besar dibandingkan pada
produk kosmetik. Daya kerja pemucatan hidrokuinon sangat cepat dengan kadar
2
tinggi tetapi dapat menimbulkan efek samping yang tidak diinginkan, misalnya:
kemerahan, rasa terbakar (panas), gatal, dan iritasi kulit ringan pada wajah. Oleh
karena itu penggunaan hidrokuinon harus dibatasi kadarnya.
Ada produk larutan pencerah yang mengandung hidrokuinon yang telah
beredar di pasaran namun tidak mencantumkan kadarnya. Dengan demikian, tidak
diketahui apakah kadar hidrokuinon dalam berbagai merek memenuhi persyaratan
BPOM atau tidak. Untuk melindungi kenyamanan dan keamanan bagi konsumen, hal
itu sangat diperlukan kontrol kualitas produk larutan pencerah untuk mengetahui
mutu produk yang dihasilkan sehingga kandungan hidrokuinonnya dapat diketahui
dan hasilnya dapat dipertanggungjawabkan. Pemilihan metode penetapan kadar
sangat penting karena dapat memberikan pengaruh hasil yang diperoleh. Metode
pilihan untuk menetapkan kadar harus merupakan metode yang sensitif, selektif, dan
praktis bagi senyawa tertentu. Metode-metode tersebut harus memenuhi kriteria
validitas metode uji di antaranya adalah akurasi dan presisi, sehingga hasil yang
diperoleh dapat dipertanggungjawabkan.
Pada penelitian ini digunakan metode spektrofotometri visibel menggunakan
pereaksi o-fenantrolina yang digunakan untuk analisis kuantitatif hidrokuinon.
Teknik spektrofotometri visibel mempunyai keunggulan karena senyawa yang
bersama-sama dengan hidrokuinon yang mengabsorpsi radiasi di daerah ultraviolet,
tidak akan mengganggu pengukuran serapan radiasi pada daerah sinar tampak. Selain
itu, pemilihan metode ini didasarkan atas pembentukan senyawa kompleks berwarna
merah-orange antara Fe2+ dan o-fenantrolina dengan adanya hidrokuinon sebagai

3
agen pereduksi yang baik. Senyawa kompleks ini dapat diukur serapannya pada
panjang gelombang daerah visibel (Haris, 1999).
1. Permasalahan
Dari latar belakang tersebut di atas, permasalahan yang akan diteliti adalah:
a) Berapa kadar hidrokuinon dalam larutan pencerah merek “A” yang telah
beredar di pasaran dengan metode spektrofotometri visibel?
b) Apakah kadar hidrokuinon dalam sediaan kosmetik yang berbentuk larutan
memenuhi persyaratan yang ditentukan oleh BPOM?
2. Keaslian Penelitian
Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian yang telah
dilakukan berjudul ”Penetapan Kecermatan dan Keseksamaan Metode Kolorimetri
Menggunakan Pereaksi Floroglusin untuk Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Krim
Pemutih” (Ibrahim, dkk., 2004), “Validasi Metode Spektrofotometri Visibel
Menggunakan Pereaksi O-fenantrolina Pada Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam
Krim Simulasi” (Leo, 2008), dan “Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Krim
Pemutih Berbagai Merk yang Beredar di Yogyakarta” (Liancy, 2008). Sedangkan
sepengetahuan penulis, penelitian tentang “Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam
Larutan Pencerah Merek ”A” yang Telah Beredar di Pasaran dengan Metode
Spektrofotometri visibel” belum pernah dilakukan.

4
3. Manfaat Penelitian
a. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk memberi dan menambah
informasi bagi ilmu pengetahuan, khususnya dalam dunia kefarmasian
mengenai penetapan kadar hidrokuinon dalam larutan pencerah merek”A”
yang telah beredar di pasaran dengan menggunakan metode spektrofotometri
visibel”.
b. Manfaat metodologis
Penelitian ini dapat menjadi acuan tentang penggunaan metode
spektrofotometri visibel dengan pereaksi o-fenantrolina dalam penetapan
kadar hidrokuinon dan dapat digunakan untuk memberikan informasi bagi
konsumen mengenai mutu, keamanan, dan kemanfaatan hidrokuinon dalam
larutan pencerah merek “A” yang telah beredar di pasaran.
c. Manfaat praktis
Penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk memberi informasi kepada
masyarakat mengenai kadar hidrokuinon dalam larutan pencerah yang
bermanfaat bagi kecantikan dan kesesuaiannya dengan nilai yang tercantum
dalam label.
5
B. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui informasi besarnya kadar hidrokuinon yang terkandung di
dalam larutan pencerah merek”A” yang telah beredar di pasaran dengan metode
2. Untuk mengetahui apakah kadar tersebut memenuhi persyaratan yang ditentukan
oleh BPOM.
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Larutan
1. Pengertian larutan
Larutan adalah sediaan cair yang mengandung satu atau lebih zat kimia yang
terlarut, misalnya: terdispersi merata secara molekuler dalam pelarut yang sesuai atau
campuran pelarut yang saling bercampur. Karena molekul-molekul dalam larutan
terdispersi secara merata, maka penggunaan larutan sebagai bentuk sediaan,
umumnya memberikan jaminan keseragaman dosis dan mempunyai ketelitian yang
baik jika larutan yang diencerkan atau dicampurkan (Anonim, 1995).
Larutan adalah campuran yang bersifat homogen antara molekul, atom
ataupun ion dari dua zat atau lebih. Disebut campuran karena susunannya atau
komposisinya dapat berubah. Disebut homogen karena susunannnya begitu seragam
sehingga tidak dapat diamati adanya bagian-bagian yang berlainan, bahkan dengan
mikroskop optis sekalipun (Anonim, 2010 b). Suatu larutan mengandung satu zat
terlarut atau lebih dari satu pelarut. Zat terlarut merupakan komponen yang
jumlahnya sedikit, sedangkan pelarut adalah komponen yang terdapat dalam jumlah
yang banyak. Komponen dari larutan ialah solute (solvendum) bersinggungan dengan
cairan (solvens), maka solute terbagi homogen atau terdispersi secara molekuler
dalam pelarut yang sesuai (Ahmad, 2001).

7
Larutan topikal adalah larutan yang biasanya mengandung air tetapi seringkali
mengandung pelarut lain, seperti etanol dan poliol, untuk penggunaan topikal pada
kulit. Larutan pencerah ini tergolong dalam larutan topikal karena larutan ini
mengandung pelarut air (Anief, 2000).
Pernyataan kelarutan zat dalam bagian tertentu pelarut adalah kelarutan pada
suhu 200C, kecuali dinyatakan lain menunjukkan 1 bagian bobot zat padat atau bagian
zat cair larut dalam bagian volume tertentu pelarut. Pernyataan bagian dalam
kelarutan berarti 1 g zat padat atau 1 ml zat cair dalam sejumlah ml pelarut (Anief,
2000).
Tabel I. Kategori kelarutan (Anief, 2000)
Istilah kelarutan Jumlah bagian pelarut yang diperlukan untuk

melarutkan
Sangat mudah larut Kurang dari 1
Mudah larut 1 – 10
Larut 10 – 30
Agak sukar larut 30 – 100
Sukar larut 100 – 1.000
Sangat sukar larut 1.000 – 10.000
Praktis tidak larut Lebih dari 10.000
2. Penggolongan tipe larutan
Berdasarkan pengenceran, macam-macam tipe larutan dapat dibagi menjadi 2 yaitu:
a. Larutan encer yaitu jumlah zat A yang terlarut kecil.
b. Larutan pekat yaitu larutan yang mengandung fraksi zat A yang besar (Anonim,
1995).
8
Berdasarkan kejenuhan, macam-macam tipe larutan dapat dibagi menjadi 3 yaitu:
a) Larutan tak jenuh (unsaturated)
Adalah jika jumlah solute yang terlarut kurang dari kelarutannya. Larutan tak jenuh
lebih encer (kurang pekat) dibandingkan dengan larutan jenuh (Anonim, 2010 b).
b) Larutan jenuh (saturated)
Adalah larutan yang mengandung zat terlarut dalam jumlah yang diperlukan
untuk adanya kesetimbangan antara solute yang terlarut dan yang tak terlarut.
Banyaknya solute yang melarut dalam pelarut yang banyaknya tertentu untuk
menghasilkan suatu larutan jenuh disebut kelarutan zat itu (Anonim, 2010 b).
Larutan yang telah mengandung zat terlarut dalam jumlah maksimal, sehingga
tidak dapat ditambahkan lagi zat terlarut. Pada keadaan jenuh telah terjadi
kesetimbangan antara solut yang larut dan tak larut atau kecepatan pelarutan sama
dengan kecepatan pengendapan. Kelarutan NaCl adalah 36 gram/100 gram air
(pada suhu 20oC). Apabila kita letakkan 40 gram NaCl dalam 100 gram air (pada
suhu pada 20oC), 36 gram akan larut dalam air tersebut.Yang selebihnya (4 gram)
masih dalam keadaan yang tidak larut sehingga terjadi larutan jenuh (Anonim,
2010 b).
c) Larutan lewat jenuh (supersaturated)
Adalah jika jumlah solute yang terlarut lebih banyak dari kelarutannya. Larutan lewat
jenuh lebih pekat daripada larutan jenuh. Larutan lewat jenuh biasanya dibuat dengan
cara membuat larutan jenuh pada temperatur yang lebih tinggi. Pada cara ini zat
terlarut harus mempunyai kelarutan yang lebih besar dalam pelarut panas daripada
9
dalam pelarut dingin. Jika dalam larutan yang panas itu masih tersisa zat terlarut yang
sudah tak dapat melarut lagi, maka sisa itu harus disingkirkan dan tidak boleh ada zat
lain yang masuk. Kemudian larutan itu didinginkan hati-hati dengan cara didiamkan
untuk menghindari pengkristalan. Jika tidak ada solute yang memisahkan diri
(mengkristal kembali) selama pendinginan, maka larutan dingin yang diperoleh
bersifat lewat jenuh. Larutan lewat jenuh yang dapat dibuat dengan cara ini misalnya
larutan dari sukrosa, natrium asetat dan natrium tiosulfat (hipo). Larutan lewat jenuh
merupakan suatu sistem metastabil. Larutan ini dapat diubah menjadi larutan jenuh
dengan menambahkan kristal yang kecil (kristal inti/bibit) umumnya kristal dari
solute. Kelebihan molekul solute akan terikat pada kristal inti dan akan mengkristal
kembali (Anonim, 2010 b).
3. Faktor yang mempengaruhi kelarutan
Faktor-faktor yang mempengaruhi kelarutan yaitu:
a. Bahan zat yang dilarutkan (solute) dan bahan pelarut (solven) yang digunakan.
Bahan solut dan solven dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu:
1) Perbandingan antara solute dan solven.
Daya larut maksimal dari suatu zat padat dalam suatu cair dinyatakan di
dalam buku resmi (Farmakope). Contohnya: daya larut zat X dalam air = 1 :
10 berarti 1 gram zat X dengan 10 ml air sudah merupakan larutan yang jenuh
(jadi lebih dari perbandingan tersebut tidak mungkin larut).

10
2) Pengaruh Jenis Zat pada Kelarutan
Prinsipnya adalah like dissolves like. Zat-zat dengan struktur kimia yang mirip
umumnya dapat saling bercampur dengan baik, sedangkan zat-zat yang
struktur kimianya berbeda umumnya kurang dapat saling bercampur
(Anonim, 2010 b).
3) Sifat polaritas zat terlarut dan pelarut
Prinsipnya adalah like dissolves like. Senyawa yang bersifat polar akan mudah
larut dalam pelarut polar, sedangkan senyawa nonpolar akan mudah larut
dalam pelarut nonpolar. Contohnya alkohol dan air bercampur sempurna
(completely miscible), air dan eter bercampur sebagian (partially miscible),
sedangkan minyak dan air tidak bercampur (completely immiscible) (Anonim,
2010 b).
b. Suhu
Umumnya meningkatkan suhu sehingga meningkatkan kecepatan daya larut.
Kelarutan gas umumnya berkurang pada temperatur yang lebih tinggi. Misalnya
jika air dipanaskan, maka timbul gelembung-gelembung gas yang keluar dari
dalam air, sehingga gas yang terlarut dalam air tersebut menjadi berkurang.
Kebanyakan zat padat yang kelarutannya lebih besar pada temperatur yang lebih
tinggi. Ada beberapa zat padat yang kelarutannya berkurang pada temperatur
yang lebih tinggi, misalnya natrium sulfat dan serium sulfat. Pada larutan jenuh
terdapat kesetimbangan antara proses pelarutan dan proses pengkristalan
kembali. Jika salah satu proses bersifat endoterm, maka proses sebaliknya
11
bersifat eksoterm. Jika temperatur dinaikkan, maka sesuai dengan azas Le
Chatelier kesetimbangan itu bergeser ke arah proses endoterm. Jadi jika proses
pelarutan bersifat endoterm, maka kelarutannya bertambah pada temperatur yang
lebih tinggi. Sebaliknya jika proses pelarutan bersifat eksoterm, maka
kelarutannya berkurang pada suhu yang lebih tinggi (Anonim, 2010 b).
c. Ukuran partikel dan kecepatan difusi
Ukuran partikel besar yang mengakibatkan kecepatan larutan kecil sehingga
menurunkan kecepatan difusi, sedangkan ukuran partikel kecil yang dapat
mengakibatkan kecepatan kelarutan besar sehingga menaikkan kecepatan difusi
karena adanya luas permukaannya besar (Anief, 2000).
d. Sifat-sifat fisika dan kimia
Faktor yang mempengaruhi sifat-sifat fisika dalam kelarutan yaitu penggojokan
selama proses pelarutan. Sedangkan faktor yang mempengaruhi sifat-sifat kimia
dalam kelarutan yaitu keasaman dan kebasaan (Anief, 2000).
4. Kelebihan dan kekurangan sediaan larutan
Kelebihan sediaan larutan yaitu:
a. Murah dalam biaya produksi dan biaya produk
b. Mudah diaplikasikan pada kulit dan mudah didistribusikan pada kulit secara
merata dan cepat pada permukaan kulit yang luas karena tidak lengket
c. Segera kering pada kulit setelah pemakaian dan meninggalkan lapisan tipis dari
komponen obat pada permukaan obat

12
d. Mudah mengalami modifikasi dosis apabila diperlukan atau dosis dapat diubah-
ubah dalam pembuatan.
e. Konsentrasi zat atau obat dalam takaran tertentu dapat tepat karena larutan
homogen.
f. Kejernihan larutan dapat memberikan kesan yang menyenangkan.
g. Dapat diberikan dalam larutan encer.
h. Kerja awal obat lebih cepat karena obat cepat diabsorpsi.
i. Mudah diberi pewangi, pewarna, dan lain-lain (Ansel, 1989; Sri et al., 2001).
Kelemahan sediaan larutan yaitu:
a. Tidak cocok untuk obat-obat yang tidak stabil dalam cairan.
b. Sukar menutupi bau dan rasa yang tidak enak.
c. Tidak cocok untuk obat-obat yang tidak larut dalam cairan.
d. Larutan bersifat voluminous dan tidak praktis, sehingga kurang menyenangkan
untuk diangkut dan disimpan. Apabila kemasan rusak, keseluruhan sediaan tidak
dapat dipergunakan.
e. Stabilitas dalam bentuk sediaan larutan biasanya kurang baik jika dibandingkan
dengan bentuk sediaan lain, terutama jika bahan mudah terhidrolisis.
f. Kemungkinan terjadinya reaksi kimia dalam bentuk larutan di mana air sebagai
katalisator.
g. Larutan merupakan media ideal untuk pertumbuhan mikroorganisme, oleh karena
itu memerlukan penambahan pengawet (Yohana et al., 2009; Sri et al., 2001).
13
B. Larutan Pencerah
Larutan pencerah merupakan campuran bahan kimia dan atau
bahan lainnya dalam sediaan larutan yang berkhasiat mampu memucatkan noda hitam
(cokelat) pada kulit. Dalam jangka waktu lama, larutan tersebut dapat menghilangkan
atau mengurangi hiperpigmentasi pada kulit. Namun, penggunaan yang terus-
menerus justru akan menimbulkan pigmentasi dengan efek permanen (Anonim, 2006
a).
Larutan pencerah yang mengandung zat aktif hidrokuinon dapat berubah
warna dari putih menjadi warna coklat selama 3 – 4 bulan (Maibach, 2000). Larutan
pencerah dapat disimpan dalam botol berwarna coklat dan putih. Larutan pencerah
yang disimpan botol berwarna coklat, karena hal ini digunakan untuk menghindari
kerusakan obat karena cahaya sehingga tidak dapat terjadi degradasi obat oleh
cahaya. Sedangkan larutan yang disimpan dalam botol putih untuk menghambat
oksidasi.
Larutan hidrokuinon merupakan produk yang baik dalam mengatasi melasma
dengan atau tanpa bahan kimia untuk pengelupasan kulit (Maibach, 2000). Menurut
Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia nomor
HK.00.05.4.1745 Bab II Pasal 3, Larutan pencerah dengan kandungan hidrokuinon
termasuk kosmetika golongan Ic yaitu kosmetika yang mengandung bahan dengan
persyaratan kadar dan penandaan seperti termuat pada lampiran I no 47 (Anonim,
2003).
14
C. Hidrokuinon
1. Struktur dan sifat hidrokuinon
Hidrokuinon atau 1,4 benzendiol adalah senyawa organik aromatik dengan
tipe fenol yang mempunyai rumus kimia C6H6O2, dan memiliki dua gugus hidroksil
(-OH) yang berikatan dengan cincin aromatik/benzene pada posisi para (Wenninger
et al., 2000). Rumus bangun hidrokuinon adalah
HO OH
hidrokuinon
Gambar 1. Struktur hidrokuinon
Hidrokuinon mengandung tidak kurang dari 99,0% dan tidak lebih dari
100,5% C6H6O2 dihitung terhadap zat anhidrat. Hidrokuinon merupakan substansi/zat
kristal berbentuk jarum halus, putih, mudah menjadi gelap jika terpapar cahaya dan
udara (Anonim, 1995). Hidrokuinon mudah larut dalam air (1 dalam 17 bagian air),
dalam etanol (1 dalam 4 bagian etanol), dalam kloroform (1 dalam 51 bagian
kloroform), dan dalam eter (1 dalam 16,5 bagian eter) (Anonim, 1995).
Larutan hidrokuinon akan berwarna coklat dikarenakan proses oksidasi
dengan adanya udara. Dalam suasana basa, hidrokuinon akan mengalami oksidasi
dengan cepat, oksidasi ini bersifat reversibel yaitu senyawa dikarbonil (kuinon)
mudah direduksi kembali menjadi senyawa dihidroksi (hidrokuinon), karena
hidrokuinon merupakan agen pereduksi (Anonim, 1996). Reaksi yang terjadi adalah:
15
- OH
HO OH O O + H2O
Hidrokuinon Kuinon
Gambar 2. Reaksi oksidasi hidrokuinon menjadi kuinon (Anonim, 1996)
2. Penggunaan dan mekanisme kerja hidrokuinon
Hidrokuinon yang digunakan sebagai agen pencerah atau depigmentasi untuk
memutihkan kulit dan menghilangkan kulit yang dalam kondisi hiperpigmentasi
seperti melasma, bercak-bercak atau bintik–bintik hitam, dan lentigines. Karena
mampu mengelupas kulit bagian luar dan menghambat pembentukan melanin pada
kulit (Anonim, 2006a). Melanin adalah pigmen pada kulit yang memberikan warna
gelap atau coklat (Anonim, 2010b). Penggunaannya membutuhkan waktu beberapa
minggu sebelum muncul suatu efek, tapi depigmentasi terjadi setelah 2-6 bulan.
Aplikasi hidrokuinon harus dihentikan jika tidak ada peningkatan setelah melindungi
2 bulan perawatan. Hidrokuinon harus digunakan dua hari sekali hanya untuk kulit
dari sinar matahari dan mengurangi depigmentasi (Anonim, 1999). Selain itu,
kegunaan hidrokuinon adalah sebagai antioksidan dalam fotografi (pencucian film)
untuk mereduksi ion perak menjadi logam perak halida, sebagai penghambat
polimerisasi, sebagai bahan dasar herbisida, karet antioksidan, dan bahan pewarna
rambut (Wenningner et al., 2000).
Hidrokuinon sendiri merupakan zat aktif yang paling banyak digunakan dalam
sediaan pencerah wajah. Hal ini dikarenakan efektivitas kerja dari hidrokuinon yaitu
16
dapat menginaktivasi enzim tirosinase melalui penghambatan reaksi oksidasi
enzimatik dari tirosin ke 3,4-dihidroksifenilalanin (Wilkinson et al., 1982). Enzim
tirosinase ini merupakan enzim utama dalam pembentukan melanin, sehingga jika
kerjanya dihambat maka jumlah pigmen melanin pemberi warna gelap atau cokelat
kulitpun menjadi berkurang sehingga menjadi kulit lebih putih (Anonim, 2006 a).
Hidrokuinon bekerja menghalangi pengeluaran melanin oleh enzim tirosinase pada
melanosit yang terletak di lapisan epidermis kulit, mendegradasi melonosom pada
kulit, menembus lapisan kulit, dan menyebabkan penebalan pada lapisan kolagen.
Produksi melanin oleh enzim tirosinase pada melanosit ini biasanya diaktifasi oleh
sinar matahari, hormonal, penyakit, obat, alergi dan iritasi yang akhirnya membuat
kulit menjadi berflek, berwarna tak merata dan lebih gelap dari sebelumnya (Daniel,
2010).
3. Efek samping hidrokuinon
Kosmetik hidrokuinon boleh dipasarkan tetapi harus berdasarkan resep dari dokter.
Penggunaan dalam kosmetika bebas tidak boleh lebih dari 2% dan penggunaan
hidrokuinon lebih dari 2% b/b termasuk golongan obat keras yang hanya dapat
digunakan berdasarkan resep dokter sebab dapat mengakibatkan iritasi kulit, kulit
menjadi merah dan terbakar, kelainan pada ginjal (nephropathy), kanker darah
(leukemia) dan kanker sel hati (hepatocelluler adenoma) (Anonim, 2007). Selain itu,
penggunaan hidrokuinon yang berlebihan juga dapat menyebabkan oochronosis (kulit
berbintil seperti pasir dan berwarna coklat kebiruan, serta terasa gatal dan seperti
terbakar) terhadap orang yang berkulit gelap (Anonim, 2006 a).

17
D. Spektrofotometri Visibel
1. Deskripsi Umum
Spektrofotometer visibel adalah anggota teknik analisis spektroskopik yang
memiliki sumber radiasi elektromagnetik sinar tampak (380-780 nm) dengan
memakai instrumen spektrofotometer. Radiasi elektromagenetik dalam rentang
panjang gelombang 380 – 780 nm merupakan radiasi yang dapat dilihat indera
penglihatan manusia sehingga disebut cahaya tampak (visible) (Suharman, 1995).
Spektrofotometer visibel termasuk dalam spektrofotometri serapan yang
melakukan pengukuran suatu interaksi antara radiasi elektromagnetik (REM) dan
materi (atom zat kimia, ion, atau molekul) sehingga mengalami peningkatan energi
elektronik dari tingkat dasar (ground state) ke tingkat energi yang lebih tinggi
(excited state) saat peralihan atau transisi elektronik. Transisi ini terjadi bila energi
yang dihasilkan oleh radiasi sama dengan energi yang diperlukan untuk melakukan
transisi. Transisi elektronik ditentukan oleh konfigurasi elektron pada molekul
senyawa tersebut, maka transisi ditentukan struktur molekul. Oleh karena itu molekul
yang berbeda strukturnya mempunyai tingkat energi yang berbeda dan setiap jenis
molekul menyerap radiasi pada daerah spektrum tertentu karena hal ini yang menjadi
dasar analisis kualitatif dengan metode ini. Sedangkan banyaknya cahaya yang
diserap di frekuensi atau panjang gelombang tertentu sesuai transisi elektron yang
terjadi karena hal ini menentukan intensitas serapan yang menjadi dasar analisis
kuantitatif menggunakan metode ini (Williard et al., 1988).

18
Pada kenyataannya, spektrum visibel yang merupakan korelasi antara serapan
(sebagai ordinat) dan panjang gelombang (sebagai absis) tidak merupakan garis
spektrum, tetapi sebagai pita spektrum. Terbentuknya pita spektrum visibel tersebut
disebabkan transisi energi yang tidak sejenis dan terjadinya eksitasi elektronik lebih
dari satu macam pada gugus molekul yang kompleks (Rohman, 2007).
2. Interaksi elektron dengan radiasi elektromagnetik (REM)
Dalam spektrofotometri, larutan sampel akan mengabsorpsi REM dengan
energi yang sesuai dan jumlah yang diserap tersebut berhubungan dengan konsentrasi
dari analit dalam larutan. Suatu molekul mengabsorpsi foton dengan energi yang
sesuai untuk menjalani suatu transisi (Christian, 2004). Jenis-jenis absorpsi yang
dapat terjadi antara lain:
a. Absorpsi yang melibatkan transisi elektron ikatan dan elektron anti ikatan.
Semua molekul organik mampu menyerap REM karena semua molekul organik
mempunyai elektron valensi yang dapat dieksitasikan ke tingkat energi yang lebih
tinggi yang dikenal sebagai elektron anti bonding. Transisi-transisi elektronik yang
terjadi di antara tingkat-tingkat energi di dalam suatu molekul ada 4 yaitu: transisi
sigma-sigma star (ϭ → ϭ*), transisi n – sigma star (n → ϭ*), transisi n – phi star (n
→ π*), dan transisi phi – phi star (π → π*) (Rohman, 2007).

19
σ* Anti Bonding
π* Anti bonding
Σ
Non Bonding
n
Bonding
π
Bonding
σ
Gambar 3. Tingkat energi elektronik molekul
1) Transisi atau eksitasi elektron ϭ → ϭ*
Dibutuhkan energi paling besar untuk menginduksi terjadinya transisi ϭ → ϭ*
dan terjadi pada daerah ultraviolet jauh (λ <180 nm) yang dihasilkan oleh ikatan
tunggal kovalen dan menduduki orbital ϭ, sebagai contoh pada alkana yang
memiliki ikatan karbon-karbon dan karbon-hidrogen (Skoog et al., 1994).
2) Transisi n → ϭ*
Senyawa-senyawa organik jenuh yang mengandung atom dengan pasangan
elektron bebas, seperti oksigen, nitrogen, belerang atau halogen dan struktur
molekul kimia yang mengandung senyawa kromofor organik berupa gugus
karbonil-karbonil mampu melakukan transisi n → ϭ*. Secara umum, energi
transisi yang dibutuhkan lebih kecil daripada transisi ϭ → ϭ* dan memiliki
panjang gelombang antara 150 – 250 nm (Skoog et al., 1998).
Akibatnya adalah nilai absorbsitivitas molar (€) antara 100-3000 liter.cm-1.mol-1
dan pergeseran biru (hipsokromik) dari pelarut yang lebih polar (pergeseran
puncak serapan ke arah panjang gelombang yang lebih pendek) (Rohman, 2007).
20
3) Transisi n → π*
Transisi dari jenis ini meliputi transisi elektron-elektron heteroatom tak berikatan
ke orbital anti ikatan π*. Serapan ini terjadi pada panjang gelombang yang
panjang dan intensitas rendah (Skoog et al., 1998). Struktur molekul kimia yang
mengandung senyawa kromofor organik berupa gugus karbonil-karbonil,
karboksil, amida, azo, nitro, nitroso, dan nitrat; dan gugus auksokrom organik
merupakan gugus fungsional yang mempunyai elektron bebas, seperti –OH, -O, -
NH2, dan –OCH3 yang mampu melakukan transisi n → π* (Rohman, 2007).
Dalam kebanyakan molekul-molekul yang menunjukkan transisi n → π* dari
keadaan dasar lebih polar dibandingkan dengan keadaan tereksitasi. Secara
khusus, pelarut-pelarut yang berikatan hidrogen akan berinteraksi secara lebih
kuat dengan pasangan elektron yang tidak berpasangan pada molekul dalam
keadaan dasar dibanding pada molekul dalam keadaan tereksitasi. Akibatnya
adalah transisi n → π* mempunyai energi yang lebih besar sehingga
menimbulkan pergeseran hipsokromik (pergeseran biru) dari pelarut yang polar
dan nilai absorbsitivitas molar (€) antara 10-100 liter.cm-1.mol-1. Karena adanya
kemampuan untuk membentuk ikatan hidrogen (polaritas) pelarut yang
meningkat (Rohman, 2007).

21
Menjadi
Energi kekurangan elektron
..
π* *
C O .
π
2 ..
Stabilisasi pelarut
yang besar karena
ikatan hidrogen
n
..
n
} C O
.. H
O
H
π
π
Pelarut Pelarut
non polar polar
Gambar 4. Pengaruh pelarut polar pada transisi n → π*
4) Transisi π → π*
Transisi ini dihasilkan oleh ikatan rangkap dua dan tiga dari senyawa organik
apabila molekul menyerap energi di daerah ultraviolet jauh yaitu dapat berupa
alkena dan alkuna yang lebih mudah untuk tereksitasi dengan adanya radiasi
elektromagnetik. Transisi ini juga paling mudah terbaca dan bertanggung jawab
terhadap spektra elektronik pada panjang gelombang antara 200 – 700 nm
(Skoog et al., 1998).
Dalam kebanyakan transisi π → π*, molekul dalam keadaan dasar relatif non
polar, dan keadaan tereksitasinya lebih polar dibanding keadaan dasar. Jika
pelarut polar digunakan pada molekul yang mengalami transisi ini, maka akan
menyebabkan pelarut polar berinteraksi (stabilisasi) lebih kuat dengan keadaan
tereksitasi dibandingkan dengan keadaan dasar, sehingga perbedaan energi
transisi π → π* pada pelarut yang polar ini lebih kecil. Akibatnya adalah
menimbulkan pergeseran batokromik (pergeseran merah) dari pelarut yang polar
(pergeseran pita absorpsi panjang gelombang serapan maksimum ke arah panjang

22
gelombang yang lebih panjang) dan nilai absorbtivitas molar (€) antara 1.000-
10.000 liter.cm-1.mol-1. Karena adanya terikatnya gugus auksokrom pada gugus
kromofor atau adanya konjugasi antara dua atau lebih kromofor. Semakin
panjang ikatan terkonjugasinya, maka panjang gelombang maksimalnya makin
besar (Rohman, 2007).

Energi
π2
π* } perbedaan energi yang cukup besar

yang disebabkan oleh interaksi pelarut
π
π
Pelarut
non polar Pelarut
polar
Gambar 5. Pengaruh pelarut pelarut pada transisi π → π*
Transisi elektron yang berguna dalam eksperimen adalah transisi π → π* dan n
→ π* karena memberikan spektra di daerah 200 – 700 nm dan membutuhkan
adanya kromofor dalam struktur molekulnya (Skoog et al., 1998).
Kromofor adalah gugus kovalen yang tidak jenuh menyediakan orbital π yang
dapat menyerap radiasi elektromagnetik di daerah ultraviolet dan sinar tampak.
Molekul yang mengandung kromofor disebut kromogen. Auksokrom merupakan
gugus fungsional yang tidak menyerap radiasi elektromagnetik di daerah
ultraviolet dan sinar tampak bila berdiri sendiri, tetapi kehadirannya dalam
molekul dapat menyebabkan perubahan puncak kromofor ke panjang gelombang
yang lebih panjang (pergeseran merah = batokromik) dan meningkatkan

23
intensitasnya (efek hiperkromik) ketika terikat langsung pada kromofor
(Christian, 2004; dan Sastrohamidjojo, 1991).
b. Absorpsi yang melibatkan transisi elektron d dan f dari molekul kompleks.
Transisi ini kebanyakan terjadi pada logam transisi. Untuk golongan lantanida dan
aktanida, proses absorbsi dihasilkan oleh transisi elektronik dari elektroni 4f dan 5f.
Untuk logam transisi seri pertama dan kedua, transisi elektronik dari elektron 3d dan
4d yang bertanggung jawab terhadap proses absorpsinya. Logam transisi memiliki
orbital d yang masih kosong sebagian (3d dan 4d) yang masing-masing dapat
mengakomodasi sepasang elektron dan berikatan dengan suatu ligan membentuk
kompleks serta menghasilkan spektra tertentu. Berikut ini merupakan urutan ligan
berdasarkan kekuatan medan yang ditimbulkannya I- < Br- < Cl- < F- < OH- < C2O42-
< H2O < SCN- < NH3 < etilendiamina < o-fenantrolina < NO2- < CN-. Semakin besar
kekuatan medannya maka panjang gelombang serapan maksimumnya menurun sebab
energinya meningkat (Skoog et al., 1998).
c. Absorpsi yang melibatkan charge transfer (perpindahan muatan).
Penyerapan radiasi oleh senyawa kompleks logam berbeda dengan senyawa organik
karena melibatkan perpindahan muatan dari donor elektron ke akseptor elektron yaitu
pergerakan elektron dari ion logam ke ligan atau sebaliknya. Absorpsi tipe ini sangat
penting dalam suatu analisis, karena perpindahan muatan dari spesies-spesies
mempunyai daya serap molar yang sangat besar (Ɛmax >10.000). Oleh karena itu,
kompleks ini mempunyai sensitifitas yang tinggi. Kompleks-kompleks anorganik

24
yang melakukan absorpsi dengan charge transfer biasanya disebut kompleks
perpindahan muatan. Contoh dari kompleks ini yaitu kompleks tiosianat dan fenol
dengan besi (III), kompleks o-fenantrolina dengan besi (II), kompleks heksasianoferat
(II)/heksasianoferat (III) yang bertanggung jawab atas warna Prussian blue (Skoog et
al., 1998).
Pada umumnya kompleks charge transfer yang melibatkan suatu ion logam,
logam bertindak sebagai penerima elektron (acceptor) dan ligan sebagai donor
elektron terkecuali untuk kompleks besi (II) dengan o-fenantrolina dimana ligannya
merupakan penerima elektron sedangkan ion logam berperan sebagai donor elektron
(Skoog et al., 1998).
Saat transisi, terjadi reduksi-oksidasi antara ion logam dan ligan. Biasanya,
ion logam tereduksi dan ligan teroksidasi. Ion logam berada pada status oksidasi
terendah, dikompleks oleh ligan dengan afinitas elektron tinggi yang dapat
teroksidasi tanpa merusak kompleks (Christian, 2004). Kecenderungan perpindahan
elektron akan meningkat jika energi radiasi yang dibutuhkan untuk terjadinya proses
perpindahan muatan kecil. Kompleks yang dihasilkan akan menyerap pada panjang
gelombang yang besar (Rohman, 2007).
Secara eksperimental sangat mudah untuk mengukur banyaknya radiasi yang
diserap oleh suatu molekul sebagai fungsi frekuensi radiasi. Suatu grafik yang
menghubungkan antara banyaknya sinar yang diserap dengan frekuensi (atau panjang
gelombang) sinar merupakan spektrum absorpsi. Transisi yang dibolehkan untuk
suatu molekul dengan struktur kimia yang berbeda adalah tidak sama sehingga
25
spektra absorpsinya berbeda. Dengan demikian spektra dapat digunakan sebagai
bahan informasi yang bermanfaat untuk analisis kualitatif. Banyaknya sinar yang
diabsorbsi pada panjang gelombang tertentu sebanding dengan banyaknya molekul
yang menyerap radiasi, sehingga spektra absorpsi juga dapat digunakan untuk analisis
kuantitatif (Rohman, 2007).
3. Analisis kuantitatif dengan spektrofotmetri visibel
Dalam aspek kuantitatif, suatu berkas radiasi dikenakan pada cuplikan
(larutan sampel) dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya. Radiasi
yang diserap oleh cuplikan ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang
diteruskan bila spesies penyerap yang tidak ada dengan intensitas sinar radiasi yang
diteruskan bila penyerap ada. Intensitas sinar yang diteruskan bila tidak ada spesies
penyerap merupakan intensitas sinar yang masuk dikurangi dengan yang hilang oleh
penghamburan, pemantulan, dan serapan oleh konsituen lain (Sastrohamidjojo, 1991).
Besarnya radiasi elektromagnetik (monokromatik) yang dapat diserap oleh
kromofor dapat digambarkan dengan dua hukum klasik, yaitu hukum Lambert dan
Beer. Hukum Lambert menyatakan bahwa bila cahaya monokromik melewati
medium tembus cahaya, laju berkurangnya intensitas oleh bertambahnya ketebalan,
berbanding lurus dengan intensitas cahaya. Hukum Beer menyatakan bahwa
intensitas berkas cahaya monokromatik berkurang secara eksponensial dengan
bertambahnya konsentrasi zat penyerap secara linier (Basset et al., 1994).
Syarat-syarat penggunaan Hukum Beer yaitu:
a. Syarat konsentrasi
26
Pada konsentrasi tinggi, jarak rata-rata di antara zat pengabsorbsi kecil,
sehingga masing-msing zat mempengaruhi distribusi muatan tetangganya.
b. Syarat kimia
Zat pengabsorbsi tidak boleh berdisosiasi, berasosiasi, atau bereaksi
dengan pelarut menghasilkan suatu produk pengabsorpsispektrum yang berbeda
dari zat yang dianalisis.
c. Syarat cahaya
Hukum Beer hanya berlaku untuk cahaya yang betul-betul monokromatik.
d. Syarat kejernihan
Kekeruhan larutan akan menyebabkan penyimpangan Hukum beer.
Sebagian cahaya akan dihamburkan oleh partikel. Akibatnya, kekuatan cahaya
yang diabsorbsi akan berkurang (Skoog, 1998).
Bouger, Lambert dan Beer membuat formula secara matematik hubungan
antara transmitan atau serapan terhadap intensitas radiasi atau konsentrasi zat yang
dianalisis dan tebal kuvet yang mengabsorpsi. Hukum Lambert-Beer menyatakan
bahwa intensitas yang diteruskan oleh larutan zat penyerap berbanding lurus dengan
konsentrasi larutan. Rumus ini yang dapat dinyatakan sebagai:
It abc
T 10 (1)
Io
1
A log abc (2)
T
27
Dimana: T = persen transmitan; Io = intensitas radiasi yang datang; It =
intensitas radiasi yang diteruskan; a = daya serap molar (Lt.mol -1cm-1); c =
konsentrasi (mol Lt-1); b = tebal kuvet (cm); dan A= serapan (Suharman, 1995).
Daya serap (a) merupakan suatu konstanta yang tidak bergantung pada
konsentrasi, tebal larutan dan intesitas radiasi yang mengenai sampel. Daya serap
tergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi.
Satuan a ditentukan oleh satuan-satuan b dan c. Jika satuan c dalam molar (M) maka
daya serap disebut dengan daya serap molar dan disimbolkan Ɛ dengan satuan M-1cm-
1
atau L.mol-1cm-1 (Rohman, 2007).
Menurut Farmakope Indonesia edisi ke-IV tahun 1995, hubungan antara
transmitan atau serapan terhadap intensitas radiasi atau konsentrasi zat yang dianalisis
dan tebal kuvet dinyatakan sebagai berikut:
Log (1/T) = A= a b c atau A= Ɛ b c
Dimana: A = serapan (logaritma dasar 10 dari kebalikan transmitan (T), a =
daya serap (hasil bagi serapan (A) dibagi dengan hasil perkalian kadar yang
dinyatakan dalam g per liter zat (c) dan panjang sel dalam cm (b)), Ɛ = daya serap
molar (hasil bagi serapan (A) dengan perkalian kadar zat, dinyatakan dalam mol per
liter, dan panjang serapan dalam cm).
Serapan jenis didefinisikan sebagai serapan dari larutan 1% zat terlarut dalam
sel dengan ketebalan 1 cm dan diberi lambang A (1%, 1 cm). Harga serapan jenis
28
pada panjang gelombang tertentu dalam suatu pelarut merupakan sifat dari zat
terlarut. Hubungan antara nilai A (1%, 1 cm) dengan daya serap molar (Ɛ) yaitu:
Ɛ = A (1%, 1cm) x (Anonim, 2005 a)
Dalam hukum Lambert-Beer tersebut ada beberapa pembatasan yaitu:
1. Sinar yang digunakan harus monokromatis
2. Penyerapan terjadi dalam suatu volume yang mempunyai penampang luas yang
sama
3. Senyawa yang menyerap dalam larutan tidak tergantung terhadap senyawa lain
dalam larutan tersebut
4. Tidak terjadi peristiwa fluoresensi atau fosforesensi
5. Indeks bias tidak tergantung pada konsentrasi larutan (Rohman, 2007).
6. Tidak diikuti oleh larutan yang pekat dan terlalu encer. Pada larutan yang pekat
dan terlalu encer terjadi kesalahan fotometrik. Pada larutan yang encer, cahaya
yang diteruskan hampir sama dengan sumber cahayanya. Pada larutan yang pekat
(>0,01M), terjadi penyimpangan antara serapan dan konsentrasi, hal ini dapat
terjadi karena pada larutan pekat, yang diteruskan sedikit sehingga sedikit cahaya
mencapai detektor sehingga serapan terukur berkurang (Skoog et al., 1994)

29
4. Instrumentasi spektrofotometri visibel
Instrumen yang digunakan untuk mempelajari serapan atau emisi radiasi
elektromagnetik sebagai fungsi dari panjang gelombang disebut spektrofotometer.
Diagram sederhana dari spektrofotometer adalah sebagai berikut:
Sumber cahaya monokromator sel sampel
pembaca respon detector

atau recorder detektor
Gambar 6. Instrumentasi spektrofotometer visisbel (Christian,2004)
Sumber cahaya terdiri dari benda yang tereksitasi hingga ke tingkat tenaga
yang tinggi oleh sumber listrik bertegangan tinggi atau oleh pemanasan listrik. Benda
atau materi yang kembali ke tingkat dasarnya, melepaskan foton dengan tenaga-
tenaga yang karakteristik yang sesuai dengan ΔΕ yaitu perbedaan tenaga antara
tingkat tereksitasi dan tingkat dasar rendah. Sumber radiasi yang ideal untuk
pengukuran serapan harus menghasilkan spektrum kontinu dengan intensitas yang
seragam pada keseluruhan kisaran panjang gelombang yang sedang dipelajari
(Sastrohadmidjojo, 1991). Sumber cahaya untuk daerah tampak ialah tungsten
filament incandescent lamp (Christian, 2004). Monokromator berfungsi untuk
mengubah atau mengurai sinar polikromatis menjadi monokromatis (panjang
gelombang tunggal) sesuai yang diinginkkan (Sastrohadmidjojo, 1991). Sel sampel
untuk visibel dari gelas atau kuarsa. Senyawa yang dapat menyerap radiasi cahaya
30
tampak ialah senyawa yang berwarna dimana elektronnya lebih mudah dipromosikan
(Christian, 2004). Detektor berfungsi untuk mengubah tenaga radiasi menjadi arus
listrik atau pengubah panas lainnya (sinyal elektronik) dan biasanya terintegrasi
dengan pencatat (printer). Syarat detektor yang baik yaitu sensitivitas tinggi hingga
dapat mendeteksi tenaga cahaya yang mempunyai tingkatan-tingkatan sekalipun,
respon pendek, stabilitas lama atau panjang untuk menjamin respon secara kuantitatif,
dan sinyal elektronik mudah diperjelas. Agar dapat diukur, sinyal detektor diperbesar
dengan recorder (Sastrohadmidjojo, 1991).
D. Senyawa Kompleks
Senyawa kompleks adalah senyawa yang dibentuk oleh reaksi antara suatu ion
logam (kation) dengan ligan (suatu anion atau molekul netral). Ion kompleks
merupakan senyawa koordinasi bermuatan yang terbentuk antara ion logam dan ligan
(Day and Underwood, 1996). Dalam zat-zat ini, ion logam berperilaku sebagai asam
lewis dan terikat secara kovalen koordinasi kepada ligan yang berperan sebagai basa
lewis (Brady, 1994).
Valensi koordinasi itu sebagai tingkat kecenderungan ion-ion logam mencapai
susunan elektron gas mulia berikutnya. Akibatnya, ion-ion logam itu cenderung
menerima elektron (pasangan elektron) sehingga disebut akseptor. Pemberi pasangan
elektron kepada ion logam itu adalah ligan sehingga disebut donor. Karena ligan
adalah zat yang memiliki satu atau lebih pasangan elektron bebas. Dengan demikian
intisari proses pembentukan senyawa kompleks koordinasi adalah pembentukan

31
ikatan kovalen koordinasi dari ligan ke ion logam dengan perpindahan satu atau lebih
pasangan elektron (Rivai, 1995).
Salah satu contoh senyawa kompleks adalah senyawa kompleks besi (II)
dengan o-fenantrolina. Menurut Basset et al., besi (II) dapat ditetapkan kadarnya
menggunakan o-fenantrolina. Besi (II) bereaksi dengan o-fenantrolina membentuk
kompleks merah-jingga [(C12H8N2)3Fe]2+ dalam larutan sedikit asam. Besi (III) tidak
bereaksi membentuk kompleks dengan o-fenantrolina (Anonim, 2001). Dalam
analisis ini, perlu ditambahkan suatu agen preduksi seperti hidrokuinon sebab besi
(II) dapat mudah tereduksi menjadi besi (III) dengan adanya suatu asam dan air
(Anonim, 2001). Menurut Daniel, pH dijaga agar mendekati nilai 3,5 agar kompleks
yang dihasilkan dapat optimal dan stabil. Namun demikian intensitas dari larutan
senyawa kompleks tersebut tidak bergantung pada pH 2-9. Untuk mengontrol tingkat
keasaman dari larutan dan menjaga pH dapat ditambahkan larutan natrium asetat
(Anonim, 2008).
Reaksi pembentukan senyawa kompleks [(C12H8N2)3Fe]2+ adalah sebagai
berikut (Harris, 1999) :

32
2Fe3+ + HO OH 2Fe2+ + O O + 2H+
Hidrokuinon Kuinon
2+
Fe2+ + 3 Fe
N N N
O-fenantrolina 3
Lambda max = 508 nm
Gambar 7. Reaksi pembentukan senyawa kompleks [(C12H8N2)3Fe]2+
Daya serap molar dari kompleks [(C12H8N2)3Fe]2+ adalah 11.100 L/mol-cm
pada panjang gelombang serapan maksimum λmax = 508 nm (Harris dan Atkins, 1975;
dan Skoog et al., 1994) atau 510 nm (Harris, 1999; Dean, 1995; Singh et al., 2004;
dan Ibrahim 2004). Nilai yang sangat besar ini menandakan bahwa kompleks
menyerap sangat kuat. Kompleks ini sangat stabil dan intensitas warnanya tidak
berubah dalam waktu yang lama (Anonim, 2005a).
Penyerapan radiasi elektromagnetik oleh senyawa kompleks [Fe(o-
fenantrolina)32+ atau [(C12H8N2)3Fe]2+ yang disebabkan satu atau lebih transisi
elektron pada panjang gelombang daerah visibel yaitu:
1. Eksitasi elektron suatu ion logam
Eksitasi elektron suatu ion logam memiliki daya serap molar (Ɛ) rendah 1-100
(L.mol-1.cm-1). Oleh karena itu, tidak dapat digunakan untuk analisis kuantitatif
(Christian, 2004).
33
2. Eksitasi elektron di dalam ligan
Ada dua transisi elektron yang dapat terjadi di dalam ligan, yakni transisi
elektron dari π → π* dan n → π* (Christian, 2004). Dengan adanya eksitasi n →
π* yang membutuhkan energi yang kecil, maka dapat menggeser panjang
gelombang yang lebih panjang dari senyawa kompleks tersebut menuju ke
panjang gelombang yang lebih panjang sehingga senyawa kompleks tersebut
dapat menjadi berwarna.
3. Transisi transfer muatan
Warna suatu senyawa kompleks terbentuk karena adanya transisi transfer
muatan. Hal ini terjadi karena perpindahan elektron dari ion logam (atau atom
pusat) ke ion ligan dan sebaliknya dari ligan ke ion logamnya. Daya serap molar
(Ɛ) transfer muatan berkisar antara 10.000-100.000 (L.mol-1.cm-1) (Christian,
2004). Donor elektron dalam pembentukan senyawa kompleks [Fe(o-
fenantrolina)32+] atau [Fe(C12H8N2)3]2+ ini adalah ligan yang berupa o-
fenantrolina karena kaya akan elektron yaitu memiliki atom dengan pasangan
elektron bebas, dan akseptor elektron adalah ion logam yang berupa ion Fe 2+
karena miskin akan elektron. Ligan dapat mendonorkan elektronnya kepada ion
logam untuk membentuk ikatan kovalen koordinasi dengan ion logam sehingga
mengakibatkan adanya perpindahan muatan dan perubahan energi pada orbital d
yang dimiliki ion logam. Pasangan elektron bebas yang didonorkan dapat
mendorong elektron tidak berpasangan yang ada pada orbital d yang dimiliki ion
34
logam menjadi berpasangan. Orbital d yang dimiliki ion logam mengalami
splitting dan perubahan energi yang mengakibatkan elektron pada orbital d
tersebut mengalami eksitasi dari n menuju π*.
Senyawa kompleks [Fe(o-fenantrolina)32+] yang berbentuk oktahedral dimana
orbital d akan terspliting menjadi 2 tingkat energi yang berbeda. Orbital t2g untuk
tingkat yang lebih rendah dan eg untuk orbital yang mempunyai energi yang lebih
tinggi. Perbedaan energi ini (hv) tergantung oleh kekuatan medan ligan.
dz 2 dx2 _y2
dxy dxz dyz dz 2 dx2 _y2

hv
dxy dxz dyz
Gambar 8. Spliting orbital d pada senyawa kompleks oktahedral
O-fenantrolina merupakan ligan kuat maka perbedaan energinya (hv) menjadi
besar, sehingga gaya tolak elektron tidak mampu mendorong elektron menempati
orbital dz2 dan dx2 y2.

35
Gambar 9. Spliting orbital d pada Fe2+ dengan adanya ligan o-fenantrolina
Warna intens yang terbentuk pada senyawa kompleks [Fe(o-fenantrolina)3]2+
pada saat transisi d → π*. Pada transisi ini terjadi transisi elektron dari orbital
elektron d yang dimiliki ion logam ke orbital π* yang dimiliki ligannya, sehingga
intensitas warnanya meningkat. Elektron dari t2g pada orbital d yang memiliki energi
yang lebih rendah akan bertransisi ke orbital π* dari ligan. Dengan adanya transisi d
→ π* yang membutuhkan energi kecil sehingga akan menggeser senyawa kompleks
ke panjang gelombang yang lebih panjang sehingga akan menimbulkan warna merah-
jingga. Transisi elektron dari d → π* dapat digambarkan sebagai berikut:

36
π*
eg M L
t2g
d
L M
π
π
L M
σ
σ
Gambar 10. Transisi elektron dari orbital d ke π*
Pembentukan ikatan koordiansi dari Fe 2+ dengan o-fenantrolina dapat
dijelaskan sebagai berikut:
Gambar 11. Pembentukan ikatan koordinasi pada senyawa kompleks [Fe(C12H8N2)3]2+
Setelah terjadi spliting akibat adanya ligan kuat seperti gambar 11, maka orbital 3 d
dari Fe2+ hanya terisi 3 ruangan saja sedangkan 2 ruangan lainnya kosong. Kemudian
terbentuk orbital d2sp3 dari hibridisasi 2 orbital 3d dengan 1 orbital 4s dan 3 orbital
4p, sehingga 6 pasang PEB (pasangan elektron bebas) dari o-fenantrolina akan masuk
dalam orbital d2sp3 sehingga dapat terbentuk ikatan koordinasi dengan Fe 2+.
37
F. Hipotesis
Hidrokuinon merupakan salah satu agen pencerah yang bersifat sebagai
reduktor baik yang dapat mereduksi besi (III) menjadi besi (II). Jumlah hidrokuinon
yang ditambahkan sebanding dengan jumlah besi (II) yang dihasilkan, kemudian besi
(II) dapat direaksikan dengan o-fenantrolina membentuk senyawa berwarna merah-
jingga yang dapat dianalisis secara spektrofotometri visibel. Oleh karena itu,
penelitian ini untuk mengetahui metode penetapan kadar hidrokuinon dengan
pereaksi o-fenantrolina menggunakan spektrofotometri visibel dapat digunakan untuk
menetapkan kadar hidrokuinon dalam larutan pencerah merek ”A” yang beredar di
pasaran.
38
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian non eksperimental deskriptif karena
pada penelitian ini tidak terdapat manipulasi dan perlakuan terhadap subyek
penelitian yang digunakan.
B. Definisi Operasional
1. Kadar hidrokuinon adalah besarnya hidrokuinon (% b/v) yang terdapat dalam
sediaan kosmetik yang berbentuk larutan merek “A”.
2. Sediaan kosmetik pencerah yang berbentuk larutan yang dianalisis adalah produk
sediaan kosmetik berbentuk larutan yang mengandung hidrokuinon dalam label
kemasan yang beredar di Yogyakarta.
3. Spektrofotometri visibel adalah analisis spektroskopik yang menggunakan
sumber radiasi elektromagnetik sinar tampak (380-780nm) dengan menggunakan
instrumen spektrofotometer.
C. Bahan Penelitian
Bahan – bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah hidrokuinon
(p.a., E.Merck), o-phenanthroline (p.a., E.Merck), besi (III) klorida heksahidrat (p.a.,
E.Merck), natrium asetat (p.a., E.Merck), etanol (p.a., E.Merck), metanol (p.a.,
39
E.Merck), asam klorida (p.a., E.Merck), aquadest (Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma).
D. Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah sebagai berikut:
seperangkat spektrofotometer UV-VIS Optima, neraca analitik BP 160 dan scaltec
SBC 22 readability 0,01 mg, mikropipet 10-100 μl dan 100-1000 μl (BioHit), pH
indikator universal, labu ukur, dan alat-alat gelas yang lazim digunakan untuk
penelitian di laboratorium analisis (Pyrex, Germany).
E. Tata Cara Penelitian
1. Pembuatan larutan baku hidrokuinon
a. Larutan stok. Sepuluh miligram hidrokuinon p.a ditimbang lebih kurang
seksama, dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 ml dan diencerkan dengan aquadest
hingga tanda. Larutan ini harus selalu dibuat baru.
b. Larutan intermediet. Sebanyak 0,05 ml larutan stok diambil, dimasukkan
ke dalam labu ukur 10,0 ml dan diencerkan dengan aquadest hingga tanda. Larutan
ini harus selalu dibuat baru.
2. Pembuatan larutan Fe3+
Sebanyak 0,019 g FeCl3.6H2O ditimbang, dimasukkan ke dalam labu ukur
10,0 ml dan diencerkan dengan aquadest hingga tanda. Ke dalam larutan ditambahkan
1 tetes HCl encer dan disimpan dalam tempat yang gelap.

40
3. Pembuatan larutan o-phenanthroline
Sebanyak 0,025 g o-phenanthroline ditimbang, dan dimasukkan ke dalam
labu ukur 10,0 ml dan diencerkan dengan 1 ml etanol p.a dan 9 ml aquadest hingga
tanda. Larutan ini disimpan dalam wadah yang terlindung dari cahaya.
4. Pembuatan larutan natrium asetat
Sebanyak 0,025 g natrium asetat ditimbang, dan dimasukkan ke dalam labu
ukur 10,0 ml dan diencerkan dengan aquadest hingga tanda. Larutan ini dapat
disimpan di lemari pendingin.
5. Optimasi metode
a. Penentuan operating time (OT). Sebanyak 0,2 ml larutan intermediat
hidrokuinon diambil, dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 ml yang mengandung
0,15 ml larutan Fe3+ standar. Beberapa tetes larutan natrium asetat (1-2 tetes)
ditambahkan hingga pH mencapai 3-4, digojog. Larutan o-phenanthroline sebanyak
0,5 ml ditambahkan dan diencerkan dengan aquadest hingga tanda, lalu dicampur
hingga homogen. Serapan diukur pada panjang gelombang maksimum 510,0 nm.
Grafik dibuat antara serapan dan waktu. Operating time dicari yang memberikan
serapan yang stabil.
b. Penetapan panjang gelombang maksimum ( λmaks ). Sebanyak 0,1 ml; 0,2
ml; 0,3 ml larutan intermediat hidrokuinon diambil, dan dimasukkan ke dalam labu
ukur 10,0 ml yang mengandung 0,15 ml larutan Fe3+ standar. Beberapa tetes larutan
natrium asetat (1-2tetes) ditambahkan hingga pH mencapai 3-4, digojog. Larutan o-
phenanthroline sebanyak 0,5 ml ditambahkan dan diencerkan dengan aquadest

41
hingga tanda, lalu dicampur hingga homogen dan didiamkan selama OT. Serapan
diukur pada panjang gelombang antara 450-550 nm. Panjang gelombang maksimum
ditentukan pada panjang gelombang yang memberikan serapan maksimum.
c. Pembuatan kurva baku. Sebanyak 0,1 ml; 0,15 ml; 0,20 ml; 0,25 ml;
0,30 ml larutan intermediat hidrokuinon diambil dan dimasukkan ke dalam labu ukur
10,0 ml yang mengandung 0,15 ml larutan Fe 3+ standar. Beberapa tetes larutan
natrium asetat (1-2 tetes) ditambahkan hingga pH mencapai 3-4, digojog. Larutan o-
phenanthroline sebanyak 0,5 ml ditambahkan dan diencerkan dengan aquadest
hingga tanda, lalu dicampur hingga homogen dan didiamkan selama OT. Serapan
diukur pada panjang gelombang maksimum. Kurva baku dibuat antara serapan dan
konsentrasi kemudian dicari persamaannya.
6. Penetapan kadar hidrokuinon dalam sampel sediaan kosmetik yang
berbentuk larutan
a. Pemilihan sampel. Sampel yang dipilih adalah sediaan kosmetik yang
berbentuk larutan yang beredar di Yogyakarta dan mencantumkan hidrokuinon pada
kemasannya. Larutan pencerah yang diambil sebagai sampel terdiri dari 1 merk dari
golongan kosmetik. Jumlah sampel yang memiliki nomor kode produksi yang sama
adalah enam.
C. Preparasi sampel larutan. Sediaan kosmetik merek “A” yang berbentuk
larutan diambil 6 kemasan dan masing-masing kemasan direplikasi sebanyak dua
kali. Sebanyak ± 1,0 ml sampel sediaan kosmetik berbentuk larutan dimasukkan ke

42
dalam labu ukur 10,0 ml dan diencerkan dengan aquadest hingga tanda untuk
pembuatan larutan intermediet.
D. Penetapan kadar hidrokuinon. Sebanyak 0,05 ml sampel dimasukkan ke
dalam labu ukur 10,0 ml yang mengandung 0,15 ml larutan Fe3+ standar. Beberapa
tetes larutan natrium asetat (1-2 tetes) ditambahkan hingga pH mencapai 3-4, digojog.
Larutan o-phenanthroline sebanyak 0,5 ml ditambahkan dan diencerkan dengan
aquadest hingga tanda, lalu dicampur hingga homogen dan didiamkan selama OT.
Serapan diukur pada panjang gelombang yang memberikan serapan maksimum.
Replikasi dilakukan sebanyak 6 kali.
F. Analisis Hasil
Analisis hasil yang dilakukan yaitu dengan menghitung kadar hidrokuinon
yang terdapat dalam sediaan kosmetik yang berbentuk larutan yang beredar di
pasaran yang dimasukkan dalam persamaan kurva baku hidrokuinon y = bx + a.
Kadar yang diperoleh kemudian dicermati secara deskriptif dengan kadar yang tertera
dalam label kemasan baik itu golongan kosmetik.

43
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Optimasi Metode
Penetapan kadar hidrokuinon pada penelitian ini dilakukan dengan
mengetahui penetapan kadar hidrokuinon dalam larutan pencerah merek “A” yang
telah beredar di pasaran dengan menggunakan pereaksi o-fenantrolina secara
Pada penelitian ini, hidrokuinon selalu dibuat baru dan dilindungi dari cahaya
karena hidrokuinon mudah teroksidasi dari warna putih menjadi warnanya kecoklatan
sehingga tidak bisa dipakai karena hal ini dapat mengganggu pembentukan senyawa
kompleks dan pengukuran serapan maka harus diminimalkan (Svehla, 1979).
Jika membuat larutan Fe(III) (kation) dengan menambah air dan 1tetes asam
klorida encer ke dalam larutan FeCl 3.6H2O, warna larutan ini menjadi semakin kuat
(Svehla, 1979).
Berdasarkan metode ini, hidrokuinon yang terkandung di dalam larutan
pencerah akan diukur dengan cara mereduksi larutan Fe 3+ menjadi Fe2+ lebih dulu
dengan bantuan hidrokuinon sebagai agen pereduksi (reduktor) sehingga menjaga
kestabilan pada keberadaan Fe2+. Karena Fe3+ tidak bisa memberikan warna yang
intens bila bereaksi dengan o-fenantrolina, sehingga menyulitkan penetapan kadar
dengan spektrofotometri visibel. Karena syarat penetapan kadar dengan metode ini,
44
senyawa harus berwarna dengan intensitas yang memadai untuk pengukuran serapan
larutan uji tersebut. Reaksi yang terjadi adalah:
2Fe3+ + HO OH 2Fe2+ + O O + 2H+

>>>
Hidrokuinon Kuinon
Gambar 12. Reaksi redoks antara besi Fe3+ dan hidrokuinon
Dalam reaksi tersebut, hidrokuinon akan mengalami oksidasi menjadi kuinon
dan Fe3+ mengalami reduksi menjadi Fe2+. Besi (III) yang diperoleh dari larutan
FeCl3.6H2O ini harus ditambahkan berlebih agar semua hidrokuinon dapat habis
bereaksi membentuk kuinon dan agar jumlah hidrokuinon yang mereduksi Fe3+ dapat
dihitung dari pembentukan Fe2+ yang terjadi. Akan tetapi, kelebihan jumlah besi (III)
yang ada di dalam larutan tidak boleh terlalu banyak sebab dapat mengganggu pada
waktu pengukuran.
Natrium asetat digunakan sebagai buffer untuk mencegah keasaman yang
terlalu tinggi, dan menjaga nilai pH agar stabil. Mekanisme reaksi yang terjadi adalah
mula-mula natrium asetat terion menjadi Na + dan CH3COO-, sehingga natrium asetat
di dalam buffer asetat hampir terdisosiasi sempurna. Reaksi yang terjadi adalah:
CH3COONa CH3COO- Na+

Natrium asetat ion asetat ion natrium
Menurut Basset, senyawa kompleks warna yang terbentuk dari besi dengan o-
fenantrolina dapat terjadi pada kondisi pH 2-9 dan stabil untuk jangka waktu yang
lama. Menurut Harris, senyawa kompleks ini paling optimal dan stabil terbentuk pada
45
pH sekitar 3,5. Apabila pH larutan dibuat menjadi terlalu basa, dapat membuat besi
menjadi mengendap; sedangkan jika terlalu asam, dapat menyebabkan besi (II)
mudah teroksidasi menjadi besi (III) kembali. Peningkatan pH larutan dari 1-2
menjadi 3-4 dilakukan dengan menambahkan suatu garam bersifat basa, yaitu natrium
asetat. Satu hingga tiga tetes larutan natrium asetat dapat membuat pH larutan
menjadi sekitar 3,5. Jadi pH yang dipilih pada penelitian ini adalah 3-4 karena pH
tersebut dapat menghasilkan pembentukan kompleks Fe 2+ dengan o-fenantrolina
optimal, sehingga pH tersebut direkomendasikan untuk mengukur senyawa kompleks
warna yang terbentuk.
Pada penambahan o-fenantrolina, larutan harus berada pada pH sekitar 3,5
untuk mencegah prespitasi dari logamnya. Penambahan pereaksi senyawa organik o-
fenantrolina secara berlebih agar o-fenantrolina dapat bereaksi membentuk senyawa
kompleks berwarna merah-jingga dengan Fe2+ sehingga kadar hidrokuinon dapat
ditentukan dan dihitung dari banyaknya jumlah Fe2+ yang membentuk komplek
warna dengan o-fenantrolina dengan mengukur serapan dari senyawa kompleks pada
daerah panjang gelombang cahaya tampak. Karena adanya sepasang elektron bebas
dari kedua atom N pada struktur o-fenantrolina, kemudian elektron bebas tersebut
diberikan kepada ion Fe2+ sehingga kedua atom N itu dapat membentuk ikatan
kovalen koordinasi dengan ion Fe2+ dan terbentuk senyawa kompleks antara Fe 2+
dengan 3 molekul o-fenantrolina. Tiga molekul o-fenantrolina dapat bersenyawa
dengan satu ion Fe2+ membentuk senyawa kompleks yang sering disebut ferroin.
Senyawa kompleks [Fe(C12H8N2)3]2+ memiliki beberapa sifat yaitu perubahan

46
warnanya sangat tajam, larutannya mudah dibuat, dan cukup mantap selama
penyimpanan, namun senyawa kompleks ini mudah terurai pada suhu 600C (Rivai
2005). Senyawa kompleks yang terbentuk stabil selama 6 bulan. Mekanisme yang
terjadi dalam metode ini dapat dilihat pada gambar 13:
2+
Fe2+ + 3 Fe
N N N
O-fenantrolina 3
Senyawa kompleks [C12H8N2)3Fe]2+
Gambar 13. Reaksi pembentukan senyawa kompleks berwarna
Seperti senyawa kompleks pada umumnya, senyawa kompleks
[Fe(C12H8N2)3]2+ terdiri dari suatu ion logam dan ligan. Ion logam dari senyawa
kompleks ini adalah lion besi (II), sedangkan ligannya adalah agen pengkompleks o-
fenantrolina sehingga senyawa kompleks yang terbentuk dapat menyerap radiasi
elektromagnetik pada panjang gelombang daerah visibel, yaitu 380-780 nm.
1. Penentuan Operating Time (OT)
Operating time adalah waktu yang diperlukan agar semua analit bereaksi
dengan pereaksi. Penetapan operating time bertujuan untuk menentukan atau
mengetahui waktu pengukuran hasil reaksi kimia pembentukan senyawa kompleks
berwarna yang stabil dan maksimum. Penentuan Operating time (waktu operasional
atau waktu pengukuran) sangat penting dalam pengukuran dengan metode analisis
menggunakan prinsip spektrofotometri visibel karena hasil reaksi kimia pembentukan

47
senyawa kompleks berwarna belum tentu stabil. Apabila hasil reaksi kimia
pembentukan senyawa kompleks berwarna yang belum stabil yang menandakan
bahwa semakin lama waktu pengukuran, maka ada kemungkinan senyawa berwarna
tersebut menjadi rusak dan terurai sehingga intensitas warnanya turun akibatnya
serapannya juga turun. Karena alasan inilah, maka untuk pengukuran senyawa
berwarna (hasil suatu reaksi kimia) harus dilakukan pada saat waktu operasional atau
waktu pengukuran. Jadi saat itu perlu dicari rentang waktu setelah reaksi berlangsung
dimana hasil yang didapat memberikan serapan yang tetap stabil (tidak menaik atau
menurun nilainya) agar data yang dihasilkan tetap reprodusibel dan valid. Reaksi
pembentukan senyawa dapat dikatakan sudah optimal dan sempurna apabila serapan
dari senyawa berwarna tersebut telah stabil, sehingga waktu pada saat serapan yang
stabil inilah yang digunakan sebagai operating time atau waktu pengukuran.
Serapannya dapat meningkat dengan berjalannya waktu. Penentuan operating time
ditentukan dengan mengukur hubungan antara waktu pengukuran dengan serapan
larutan.
Penentuan operating time ini dilakukan dengan mengukur salah satu kadar
dari seri baku yaitu kadar tengah larutan baku hidrokuinon dengan konsentrasi 0,2
ppm setelah pembentukan senyawa warna merah dilakukan, kemudian serapan diukur
pada panjang gelombang teoritis yaitu 510,0 nm selama 30 menit.
Berdasarkan kurva pengukuran operating time dapat dilihat bahwa serapan
warna yang dihasilkan telah stabil dari menit ke-0 sampai menit ke-30 dengan
serapan 0,504. Kestabilan warna ini menandakan reaksi pembentukan warna senyawa
48
kompleks [Fe(C12H8N2)3]2+ sudah optimum, sehingga pengukuran serapan dilakukan
pada rentang waktu tersebut dapat meminimalkan terjadinya kesalahan pengukuran.
Pada penelitian ini, serapan lebih stabil saat menit ke-20 untuk menyamakan waktu
pengukuran, sehingga hal itu yang digunakan sebagai waktu untuk mengukur serapan
dari setiap larutan, baik baku maupun sampel. Pengukuran absorban untuk kurva
baku dan sampel yang dilakukan pada menit ke-20 agar semua pengukuran dilakukan
pada rentang operating time yang sama sehingga semua mendapat perlakuan yang
sama. Hasil pembacaan operating time dapat dilihat pada gambar 14:
Gambar 14. Hasil penetapan operating time pada panjang gelombang 510,0 nm
2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λ maks)
Panjang gelombang maksimum adalah panjang gelombang suatu larutan analit
mempunyai serapan yang maksimum. Penetapan panjang gelombang serapan
maksimum bertujuan untuk menentukan panjang gelombang saat senyawa kompleks
berwarna [Fe(C12H8N2)3]2+ mempunyai serapan yang maksimum. Pengukuran
serapan dilakukan pada panjang gelombang serapan maksimum karena:

49
a. adanya perubahan serapan untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling
besar, sehingga akan diperoleh kepekaan analisis yang maksimum. Artinya adanya
perubahan kecil dari kadar larutan yang hendak dianalisis dapat memberikan hasil
serapan yang besar, sehingga sensitivitas dari metode akan semakin meningkat.
b. bentuk kurva pita atau spektra serapan relatif datar di sekitar panjang gelombang
maksimal, sehingga pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi
dan kesalahan yang terjadi relatif kecil pada pengulangan.
Panjang gelombang serapan maksimum ini digunakan untuk mengukur
serapan dari larutan yang akan dianalisis. Pembacaan serapan pada panjang
gelombang maksimum akan memberikan sensitivitas dan presisi analisis yang
maksimal.
Pengukuran serapan pada daerah sinar tampak dilakukan pada panjang
gelombang 380 nm sampai 780 nm (Suharman, 1995). Pada penelitian ini penetapan
panjang gelombang maksimum tetap harus dilakukan, meskipun panjang gelombang
maksimum hasil pembentukan kompleks berwarna antara Fe2+ dan o-fenantrolina
telah diketahui dengan tujuan untuk mengetahui intermediete precision dari metode
ini yaitu ketepatan pada kondisi percobaan yang berbeda, baik orangnya,
peralatannya, maupun waktunya.
Untuk penentuan panjang gelombang serapan maksimum, dilakukan dengan
membuat kurva hubungan antara serapan dengan panjang gelombang dari suatu
larutan baku pada konsentrasi tertentu. Dalam penelitian, pengukuran panjang
gelombang serapan maksimum senyawa kompleks berwarna dilakukan dengan

50
menggunakan tiga konsentrasi dari seri larutan baku hidrokuinon yang berbeda yaitu:
kadar terkecil 0,1 ppm; kadar tengah 0,2 ppm; dan kadar terbesar 0,3 ppm. Hal ini
bertujuan untuk mengetahui repeatabilitas dari metode ini yaitu presisi metode
analisis yang dilakukan dalam kondisi yang sama dalam interval waktu yang singkat.
Pengukuran panjang gelombang serapan kompleks berwarna diukur pada menit ke-20
yang masih rentang waktu hasil penetapan operating time yaitu pada menit ke-0
sampai menit ke-30. Pada penelitian ini, panjang gelombang yang diukur atau
digunakan melalui scanning adalah dari rentang panjang gelombang 450 nm – 550
nm. Rentang yang dipilih untuk melihat apakah ada pergeseran panjang gelombang
serapan maksimum yang diperoleh dibandingkan dengan panjang gelombang serapan
maksimum teoritis yaitu 510 nm (Harris, 1999; Dean, 1995; Singh et al., 2004; dan
Ibrahim dkk, 2004). Menurut Farmakope Indonesia edisi IV tahun 1995, perbedaan
selisih panjang gelombang tidak boleh lebih dari 2 nm.
Panjang gelombang yang digunakan dalam penelitian ini adalah dari rentang
panjang gelombang 450-550 nm dimana panjang gelombang teoritis yaitu 510,0 nm
masih berada dalam rentang tersebut. Dari pengukuran panjang gelombang serapan
maksimum, hasil spektra yang diperoleh dari penelitian adalah panjang gelombang
serapan maksimum sebesar 510,0 nm. Panjang gelombang serapan maksimum yang
diperoleh telah sesuai dengan panjang gelombang serapan maksimum acuan atau
literatur yaitu 510,0 nm. Hal ini menunjukkan bahwa metode ini memiliki
repeatabilitas dan presisi intermediet yang baik sehingga panjang gelombang 510,0
51
nm dapat digunakan untuk analisis selanjutnya. Dari pengukuran yang dilakukan,
hasil penetapan panjang gelombang serapan maksimum dapat dilihat pada gambar 15:
1. Kadar 0,1 ppm; λ max – 510,0 nm; serapan = 0,279 A
2. Kadar 0,2 ppm; λ max = 510,0 nm; serapan = 0,531 A
3. Kadar 0,3 ppm; λ max = 510,0 nm; serapan = 0,767 A.
Gambar 15. Hasil pembacaan panjang gelombang serapan maksimum

52
Keterangan: A = konsentrasi 0,1 ppm; serapan 0,279 A dan λ maks 510,0 nm.
B = konsentrasi 0,2 ppm; serapan 0,531 A dan λ maks 510,0 nm.
C = konsentrasi 0,3 ppm; serapan 0,767 A dan λ maks 510,0 nm.
Berdasarkan spektra di atas, serapan maksimum dari ketiga larutan baku
hidrokuinon adalah relatif sama.
3. Pembuatan Kurva Baku
Pembuatan kurva baku sangat penting dilakukan karena hal ini bertujuan
untuk memperoleh suatu persamaan regresi linier yang digunakan untuk menghitung
dan menetapkan kadar zat analit. Kurva baku yang diperoleh dengan membuat seri
larutan baku dari zat yang dianalisis dengan berbagai konsentrasi. Masing-masing
serapan larutan dengan berbagai konsentrasi diukur, kemudian dibuat kurva yang
merupakan hubungan antara serapan dengan konsentrasi. Dalam penelitian ini, kurva
baku diperoleh dengan membuat lima seri kadar dari tiga replikasi larutan baku
hidrokuinon pada panjang gelombang serapan maksimum hasil optimasi yaitu 510,0
nm.
Pemilihan seri kadar ini dilakukan berdasarkan hasil optimasi, dimana dipilih
kadar yang memberikan serapan antara 0,2 sampai 0,8. Menurut Suharman, pada
rentang serapan 0,2 – 0,8 atau %T (15 - 65%) akan memberikan persentase kesalahan
fotometrik yang kecil dan dapat diterima yaitu 0,5 - 1,0% untuk AT = 1%.
Pengukuran pada panjang gelombang serapan maksimum akan menghasilkan
serapan yang lebih sensitif dan kesalahan yang kecil sehingga akan memperoleh slope
53
yang terbaik. Dari pengukuran kurva baku dari ketiga replikasi seri baku
hidrokuinon, hasil yang dapat dilihat pada tabel II:
Tabel II. Data replikasi seri baku hidrokuinon
Volume Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

(mL) Kadar Serapan Kadar Serapan Kadar Serapan
(ppm) (A) (ppm) (A) (ppm) (A)
0,10 1,05 0,327 1,05 0,279 1,06 0,346
0,15 1,57 0,450 1,58 0,406 1,59 0,456
0,20 2,09 0,635 2,11 0,487 2,11 0,550
0,25 2,62 0,710 2,63 0,651 2,64 0,678
0,30 3,14 0,894 3,16 0,770 3,17 0,730
Y = 0,266 x + 0,045 Y = 0,233 x + 0,028 Y = 0,188 x + 0,155
r = 0,994 r = 0,996 r = 0,994
Dari pengukuran kurva baku dari ketiga replikasi seri baku hirokuinon, hasil
yang diperoleh yaitu tiga buah persamaan kurva baku yang berbeda dari masing-
masing replikasi. Dari ketiga persamaan kurva baku yang diperoleh tersebut, dipilih
persamaan kurva baku yang paling linier dan paling besar. Hasil perhitungan tabel di
atas diperoleh nilai r yang paling besar dan linier yaitu 0,996 dengan persamaan
kurva baku replikasi kedua y = 0,233x + 0,028.
Linieritas merupakan hubungan korelasi antara kadar hidrokuinon dengan
serapan yang dihasilkan sehingga linieritas dinyatakan sebagai koefisien korelasi (r).
Secara statistika, nilai koefisien korelasi (r) dapat dikatakan baik apabila masing-
masing replikasi yang mendekati satu dan rhitung lebih besar daripada nilai rtabel dengan
derajat bebas tertentu dan taraf kepercayaan 99%. Dengan taraf kepercayaan 99% dan
derajat bebas 3 maka rtabel adalah sebesar 0,991. Ketiga persamaan kurva baku di atas
54
sudah memberikan hubungan korelasi yang baik antara kadar dan serapan sebab nilai
r-nya lebih besar daripada rtabel. Persamaan kurva baku yang dipilih untuk digunakan
untuk menghitung kadar hidrokuinon dalam sampel adalah persamaan kurva baku
replikasi kedua y = 0,233x + 0,028 dengan korelasi r = 0,996. Pemilihan ini
dikarenakan nilai r dari persamaan kurva baku kedua ini paling baik dibanding yang
lainnya yaitu nilai r2 ≥ 0,997, sehingga diharapkan dapat memberikan hubungan
korelasi yang baik pula antara kadar hidrokuinon dan serapan yang diperoleh. Dengan
semakin meningkatnya kadar hidrokuinon dalam larutan, maka serapannya juga akan
meningkat secara proporsional sebab hubungan korelasi yang terjadi adalah linier.
Hubungan korelasi antara kadar dan serapan yang diperoleh dapat dilihat pada
gambar berikut:
kurva baku
0,9
0,8 Y = 0,233 x + 0,028
r = 0,996
0,7
serapan (A)
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0, 1 1,5 2 2, 3 3,5
5 5
konsentrasi (ppm)
Gambar 16. Kurva baku hidrokuinon dari replikasi II
Jadi persamaan kurva baku ini berbentuk linier sehingga hukum Lambert-Beer
terpenuhi.
55
B. Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Sampel Larutan Pemutih
1. Pemilihan Sampel
Pemilihan sampel merupakan langkah pertama yang sangat penting untuk
menganalisis atau mengetahui kadar suatu senyawa tertentu dalam sampel hanya
dilakukan terhadap sejumlah kecil sampel. Berapa besarnya sampel yang harus
diambil tidak dapat dirumuskan secara umum karena cara pengambilan sampel
tergantung pada sifat dan jumlah bahan yang dianalisis.
Sampel yang dipilih adalah sampel larutan pencerah bermerk yang telah
beredar di pasaran di wilayah Yogyakarta. Berdasarkan penelusuran yang dilakukan
oleh penulis, di toko kosmetik Yogyakarta terdapat satu macam sampel larutan
pencerah bermerk. Sampel yang dipilih memiliki nomor registrasi karena nomor
registrasi tersebut yang menunjukkan bahwa larutan pencerah tersebut merupakan
produk yang boleh dipasarkan. Sampel yang dipilih memiliki kode produksi kosmetik
dengan nomor batch yang sama yaitu A110709 karena nomor batch yang sama
menunjukkkan bahwa setiap sampel memperoleh perlakuan yang sama pada saat
proses pembuatan di industri. Tujuan pemilihan sampel yang dilakukan yaitu sampel
yang dianalisis dapat memberikan representatif, artinya sampel yang akan dianalisis
benar-benar mewakili populasi yang ada. Pengambilan sampel harus representatif
karena hal ini bertujuan dapat mencegah resiko adanya hasil analisis yang keluar dari
spesifikasi yang ditentukan.

56
2. Preparasi Sampel
Preparasi sampel dimulai dengan mereplikasi 6 jumlah sediaan larutan
pencerah merk “A” dari botol kemasan dengan pengulangan sebanyak 2 kali agar
kandungan hidrokuinon dalam tiap bagian sama karena akan dilakukan 6 kali
replikasi dan diberi perlakuan duplo agar data yang didapatkan lebih representatif.
Sampel larutan pencerah ini tidak memerlukan pemisahan dengan ekstraksi maka
dapat dilakukan secara langsung untuk menetapkan kadar hidrokuinon. Preparasi ini
dilakukan untuk mendapatkan hidrokuinon yang telah terpisah dari komponen lain
dalam sampel larutan pencerah sehingga dapat digunakan untuk penetapan kadar
hidrokuinon dari sampel larutan pencerah.
3. Penetapan Kadar Hidrokuinon
Kadar hidrokuinon ditetapkan secara spektrofotometri visibel dengan pereaksi
o-fenantrolina. Penetapan kadar hidrokuinon dalam sampel larutan pencerah ini
diukur pada panjang gelombang 510,0 nm. Penetapan kadar hidrokuinon ini
dilakukan pada larutan pencerah merek “A” yang mengandung hidrokuinon yang
telah diketahui kadarnya dan dilakukan replikasi sebanyak 6 kali. Kadar yang
diperoleh dari tiap-tiap replikasi dapat dilihat dalam Tabel III:

57
Tabel III. Kadar rata-rata hidrokuinon dalam sampel larutan pencerah
Kadar hidrokuinon KV
Replikasi Serapan X (%b/v) ± SD
(%b/v) (%)
1 0,437 3,52
2 0,452 3,64
3 0,450 3,62
3,583 ± 0,085 2,4
4 0,449 3,62
5 0,455 3,66
6 0,434 3,44
Hasil penetapan kadar hidrokuinon didapatkan kadar rata-rata hidrokuinon
yang terkandung sampel yaitu kadar rata-rata 3,583% b/v sehingga larutan pencerah
merk tersebut tidak memenuhi persyaratan yang telah ditetapkan. Sedangkan kadar
yang tertera pada kemasan adalah 2% b/v untuk sampel sehingga kadar sampel telah
diketahui tidak sesuai dengan kadar yang telah tertera pada kemasan. Selain itu,
makin besar ukuran sampel, maka SD rata-rata makin kecil.
Presisi adalah kedekatan antara hasil yang satu dengan yang lain jika sampel
yang digunakan dalam kondisi yang sama atau selisih tiap hasil pengukuran tidak
berbeda jauh. Presisi menunjukkan keterulangan dan ketertiruan hasil yang diperoleh.
Presisi dinyatakan dalam koefisen variansi (KV). Menurut Harmita, presisi suatu
metode analisis untuk kadar analit ≥ 1% dikatakan baik atau valid bila KV < 2,5%.
Semakin kecil KV yang diperoleh, maka semakin baik presisi metode yang
digunakan.
58
Menurut literatur, besarnya KV tergantung pada konsentrasi yang diuji.
Berdasarkan pengukuran yang dilakukan dari keenam replikasi sampel, diperoleh KV
sebesar 2,4%. Hasil ini menunjukkan bahwa presisi dari metode analisis hidrokuinon
dalam larutan pencerah secara spektrofotometri visibel dengan pereaksi o-
fenantrolina tidak melebihi syarat presisi yang telah ditetapkan.

59
BAB V
KESIMPULAN
1. Kadar rata-rata hidrokuinon dalam larutan pencerah merk “A” adalah 3,583 ±
0,085% b/v.
2. Larutan pencerah tersebut tidak memenuhi persyaratan yang ditentukan oleh
BPOM.
60
DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, H., 2001, Kimia Larutan, 1, PT. Citra Aditya Bakti, Bandung.
Agustio, L., 2008, Validasi Metode Spektrpfotometri Visibel Menggunakan Pereaksi

O-fenantrolina pada Penetapan Kadar Hodrokuinon dalam Krim Simulasi,
Skripsi Fakultas Farmasi Sanata Dharma, Yogyakarta.
Anief, Moh, 2000, Ilmu Meracik Obat Teori dan Praktek, cetakan ke-9, 95-98, Gajah
Mada University Press, Yogyakarta.
Anonim, 1999, Martindale The Complete Drug Reference, 32nd ed.,1083,1116,1123,

edited by Kathleen Parfitt, Pharmaceutical Press, London, UK.
Anonim, 2010 a, Bahaya Merkuri dan Hidrokuinon, http://rara-

carter.blog.friendster.com/2007/05/bahaya-merkuri-dan-hidrokuinon/, diakses
pada tanggal 19 Agustus 2010.
Anonim, 2010 b, Larutan, http://ocw.gunadarma.ac.id/course/diploma-three-

program/study-program-of-computer-engineering-d3/fisika-dasar-2/larutan,
diakses pada tanggal 4 April 2010.
Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, 440, 1061, 1066, 1180, Departemen
Kesehatan, R. I, Jakarta.
Anonim, 1996, Hydroquinone Health and Safety Guide,

http://www.inchem.org/documents/hsg/hsg/hsg101.html, diakses tanggal 6
September 2009.
Anonim, 2001, Spectrophotometric Determination of Iron,

http://rgmlab.chem.ucoon,edu/teaching/chem232/Laboratory_Manual/GA21R
ev201.pdf, diakses pada tanggal 5 April 2010.
Anonim, 2003, Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik
Indonesia Nomor HK.00.05.4.1745 Tentang Kosmetik,
http://www.pom.go.id/, diakses pada tanggal 26 Agustus 2009.
Anonim, 2005a, Molecular Absorption Spectroscopy: Determination of Iron With 1,

10- Phenantroline,
http://www.iupac.org/publications/pac/2003/pdf/7508x1107.pdf, diakses
61
Anonim, 2005b, Skin Whitening, http://www.health-cares.net, diakses tanggal 6

September 2009.
Anonim, 2006a, Cermat Memilih Pemutih Kulit, http://dickna.blog.com/beauty/,

diakses pada tanggal 6 September 2009.
Anonim, 2006b, Spectrophotometric Determination Iron in Vitamin Supplement,

http://sonoma.edu/users/b/brooks/115b/iron.html. diakses pada tanggal 5 April
2010.
Anonim, 2007, Warning Peringatan tentang Kosmetik mengandung Bahan

Berbahaya dan Zat Warna yang dilarang,
http://www.pom.go.id/public/peringatan_publik/pdf/PW/KosBB.pdf, diakses
Anonim, 2008, Spectrophotometric Determination of Iron, http://www2.truman.edu/-

blamp/chem222/manual/pdf/ironspec.pdf, diakses pada tanggal 24 Maret
2009.
Ansel, Howard C., 1989, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi IV, 522-524,
Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta.
Bassett, J., Denney, R. C., Jeffrey, G. H., Mendham, J., 1994, Buku Ajar Vogel Kimia
Analisis Kuantitatif Anorganik, edisi IV, 812-813, diterjemahkan oleh
Pudjaatmaka, H. Dan Setiono, L., Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Brady, J. E., 1994, General Chemsitry, 375-376, alih bahasa oleh Pudjaatmaka A. H.,
dan Achmadi S., Erlangga, Jakarta.
Christian, G. D., 2004, Analytical Chemsitry, 6th ed. , 65-66, 458, 483-484, John
Wiley & Sons, Inc., USA.
Daniel, 2010, Merkuri dan Hidrokuinon,

http://danieldokter.multiply.com/journal/item/63, diakses pada tanggal 19
Agustus 2010.
Day, R. A., Underwood, A. L., 1996, Analisis Kimia Kuantitatif, 202-206, 290-291,
293- 294, 413-415, 417, diterjemahkan oleh Pudjaatmaka, A. H., Penerbit
Erlangga, Jakarta.
62
Dean, J. A., 1995, Analytical Chemistry Handbook, 5.28, 5.29, Mc. Graww Hill, Inc,
New York.
Harmita, 2004, Majalah Ilmu Kefarmasian Vol.I, No. 3: Petunjuk Pelaksanaan

Validasi Metode dan Cara, 117-135, Departemen Farmasi FMIPA UI,
Jakarta.
Harris, D. C., 1999, Quantitative Chemical Analysis, 5th Ed., 845-846, 863-864, W.
H. Freeman and Company, New York.
Harris, D.C., dan Atkins, R.C., 1999, Spectrophotometric Determination of Iron in

Vitamin Tablets, J. Chem. Ed., 52, 550.
Ibrahim, S. S., Damayanti, S., Riani, Y., 2004, Penetapan Kecermatan dan
Keseksamaan Metode Kolorimetri menggunakan Pereaksi Floroglusin untuk
Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Krim Pemucat,
http://acta.fa.itb.ac.id/pdf_dir/issue_29_1_4.pdf, diakses pada tanggal 27
Oktober 2009.
Liancy, F., 2008, Penetapan Kadar Hidrokuinon dalam Krim Pemutih Berbagai
Merk yang Beredar di Yogyakarta dengan Metode Spektrofotometri Visibel,
Fakultas Farmasi Sanata Dharma, Yogyakarta.
Maibach, L. H., 2000, Cosmeceuticals Drugs vs Cosmetics, 123-143, edited by Peter

Elsner, Marcel Dekker, Inc., New York.
Rivai, H., 1995, Asas Pemeriksaan Kimia, 33-344, UI Press, Jakarta.
Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, 220-262, Pustaka Belajar, Yogyakarta.
Sastrohadmidjojo, H., 1991, Spektroskopi, Edisi kedua, 1-43, Liberty, Yogyakarta.
Svehla, G., 1979, Textbook of Macro and Semimicro Qualitatif Inorganic Analysis,
diterjemahkan oleh Setiono dan Hayana Pudjaatmaka, Bagian I, 51-52, 257-
260, Kalman, Media Pustaka Jakarta.
Singh, D.K., Srivastava, B., Sahu, A., 2004, Spectrophotometric Determination of

Rauwolfa Alkaloid: Estimation of Reserpine in Pharmaceuticals,
http://www.jstage.jst.go.jp/article/analsci/20/3/571/_pdf, diakses pada 4 April
2010.
Skoog, D. A., West, D. M., Holler, FJ, 1994, Analytical Chemistry an Introduction,
6th Ed., 416-418, Sanders College Publishing, Philadelphia.
63
Skoog, D. A., Holler, F. J., Nieman, T. A., 1998, Principles of Instrumental Analysis,
5th Ed., 182-193, Sanders College Publishing, Philadelphia.
Sri, L. C., Siti, R., Henna, R., Sunardjono, Maisunah, Sri, S., Endang, S. S., 2001,
Seni Menulis Resep: Teori dan Praktek, 100, P. T. Perca, Jakarta.
Suharman, Muhammad Mulja, 1995, Analisis Instrumental, 26-33, Airlangga

University Press, Surabaya.
Wenninger, J. A., Canterbery, R.C., McEwen Jr., G.N., 2000, International

Cosmetics Ingredient Dictionary and Handbook, 8th Ed., Vol I, 673, The
Cosmetics, Toiletry, and Frangrance Association Washington DC.
Wilkinson, J. B., dan Moore R.J., 1982, Harry’s Cosmeticology, 7th Ed., 264-270,
Chemical Publishing Company, Inc., New York.
Williart, H.H., Merrit, J.R.L., Dean, J.A., and Settlr J.F., 1988, Instrumental Methods
of Analysis, 7th Ed, 160, Wadworth Publishing Company, California.
Yohana, C. A., Emma S., Sri S. I., 2009, Farmasetika Dasar: Konsep Teoritis dan
Aplikasi Pembuatan Obat, 88-91, Widya Padjajaran, Bandung.
64
LAMPIRAN
Lampiran 1. Data penimbangan hidrokuinon baku untuk kurva baku
Jenis berat Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3

Berat kertas (g) 0,1877 0,1935 0,1919
Berat kertas + zat 0,1995 0,2044 0,2031
(neraca kasar (g))
Berat kertas + zat 0,19957 0,20442 0,20311
(neraca analitik (g))
Berat kertas + sisa (g)) 0,18911 0,19389 0,19254
Berat zat (g) 0,01046 0,01053 0,01057
 ad 10,0 mL  ad 10,0 mL  ad 10,0 mL
H20 H20 H20
Lampiran 2. Perhitungan seri kurva baku hidrokuinon

Konsentrasi Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
Stok Baku 0,01046 g : 10 ml = 0,01053 g :10 ml = 0,01057 g :10 ml =
(ppm ) 1046 1053 1057
Intermediet 1046 ppm : 10 ml = 105,3 ppm :10 ml = 105,7 ppm :10 ml =
(ppm) 104,6 105,3 105,7
C1 (ppm) 104,6 ppm x 0.10 ml 105,3 ppm x 0.10 105,7 ppm x 0.10
x (1/10 ml) = 1,046 = ml x (1/10 ml) = ml x (1/10 ml) =
1,05 1,053 = 1,05 1,057 = 1,06
x (1/10 ml) = 1,569 = ml x (1/10 ml) = ml x (1/10 ml) =
1,57 1,5795 = 1,58 1,5855 = 1,59
x (1/10 ml) = 2,092 = ml x (1/10 ml) = ml x (1/10 ml) =
2,09 2,106 = 2,11 2,114 = 2,11
x (1/10 ml) = 2,615 = ml x (1/10 ml) = ml x (1/10 ml) =
2,62 2,6325 = 2,63 2,6425 = 2,64
C5 (ppm) 104,6 ppm x 0.30 ml 105,3 ppm x 105,7 ppm x 0.30
x (1/10 ml) = 3,138 = 0.30ml x (1/10 ml) ml x (1/10 ml) =
3,14 = 3,159 = 3,16 3,171 = 3,17
65
Lampiran 3. Hasil Scanning Operating Time (OT)

66
Lampiran 4. Data Operating Time (OT)

Kadar (ppm) Serapan (A) OT (menit)
0,2 0,504 18
Lampiran 5. Hasil Scanning λ max kadar hidrokuinon

1. Kadar 0,1 ppm; λ max – 510,0 nm; serapan = 0,279 A.

67
Lampiran 6. Data scanning λ max kadar hidrokuinon

Volume (ml) Konsentrasi (ppm) Serapan (A) λmaks (nm)
0,1 1,0 0,279 510,0
0,2 2,0 0,531 510,0
0,3 3,0 0,767 510,0
Lampiran 7. Hasil Scanning Kurva Baku Hidrokuinon:

1. Replikasi I
68
Lampiran 8. Data Kurva baku hidrokuinon

Volume Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
(mL) Kadar Serapan Kadar Serapan Kadar Serapan
(ppm) (A) (ppm) (A) (ppm) (A)
0,10 1,05 0,327 1,05 0,279 1,06 0,346
0,15 1,57 0,450 1,58 0,406 1,59 0,456
0,20 2,09 0,635 2,11 0,487 2,11 0,550
0,25 2,62 0,710 2,63 0,651 2,64 0,678
0,30 3,14 0,894 3,16 0,770 3,17 0,730
Y = 0,266 x + 0,045 Y = 0,233 x + 0,028 Y = 0,188 x + 0,155
r = 0,994 r = 0,996 r = 0,994
Lampiran 9. Kurva Baku dari 3 replikasi

Replikasi I
r
69
Replikasi II
kurva baku
0,9
0,8 Y = 0,233 x + 0,028

r = 0,996
0,7
serapan (A)
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5
konsentrasi (ppm)
Replikasi III
r
r
Lampiran 10. Komposisi sample larutan pencerah hidrokuinon

Merk “A”, CD 1006401908, Batch A110709 = Hidrokuinon 2% b/v dalam zat dasar
larutan kosmetik yang cocok.dengan volume botol 60 ml.
70
Lampiran 11. Gambar kemasan larutan pencerah merk”A” yang telah beredar
di pasaran
a. Bagian depan
71
b. Bagian belakang
Lampiran 12. Hasil pembacaan serapan sampel

1. Sampel 1
72
2. Sampel 2
3. Sampel 3
4. Sampel 4
73
5. Sampel 5
6. Sampel 6
Lampiran 13. Data serapan sampel

No Serapan (A)
Sampel 1 Sampel 2 Sampel 3 Sampel 4 Sampel 5 Sampel 6
1 0,437 0,440 0,436 0,427 0,433 0,440
2 0,437 0,464 0,464 0,470 0,477 0,428
Rata-rata 0,437 0,452 0,450 0,449 0,455 0,434
74
Lampiran 14. Contoh perhitungan kadar hidrokuinon dalam sampel larutan

pencerah
Diketahui serapan sampel 1 = o,437
Serapan yang diperoleh dimasukkan dalam persamaan kurva baku
Y = 0,233 x + 0,028
0,437 = 0,233 x + 0,028
X = 0,409 : 0,233 = 1,76 ppm
Konsentrasi intermediet = (1,76 x 10 ml) : 0,05 ml = 352 ppm.
Konsentrasi sampel = (352 ppm x 10 ml) : 0,1 ml = 35200 ppm = 35,2 mg/ml.
3,52 mg/ml = 3520 mg : 100 ml = 3,52 g : 100 ml = 3,52% b/v.
Lampiran 15. Data perhitungan KV (%)
KV hidrokuinon = x 100%
KV sampel = x 100% = (0,085: 3,583) x 100% = 2,37% = 2,4%.
Lampiran 16. Foto larutan sampel dan blangko
Keterangan gambar: larutan blangko (kiri) dan sampel (kanan)

75
BIOGRAFI PENULIS
Shinta Lia Dewi Handoyo, penulis skripsi berjudul “Penetapan

Kadar Hidrokuinon Dalam Larutan Pencerah Merek “A” Yang
Beredar Di Pasaran Dengan Metode Spektrofotometri Visibel”,
dilahirkan di Jakarta pada tanggal 2 Februari 1984 dari pasangan
Bapak Handoyo dan Ibu Ninik Sudrawati. Penulis telah
menyelesaikan pendidikan Taman Kanak-kanak, Sekolah Dasar,
dan Sekolah Kejuruan di SLB/B Dena Upakara Wonosobo pada
tahun 1989 hingga 1998 lalu melanjutkan pendidikan Menengah di SMP Bruderan
Purwokerto pada tahun 1998-2001 dan SMA Bruderan Purwokerto pada tahun 2001 –
2004. Setelah lulus dari SMU, penulis melanjutkan kuliah S1 di Fakultas Farmasi
Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2004 hingga 2010.

Hidrokinon PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Hidrokinon PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PENETAPAN KADAR HIDROKUINON DALAM LARUTAN PENCERAH

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

PENETAPAN KADAR HIDROKUINON DALAM LARUTAN PENCERAH

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Papa dan mama yang mengubah kisah hidupku

dengan berbagai cara mereka mengubah kekuranganku

menjadi kelebihan yang mengagumkan

dan membuatku mampu berjalan dengan tenang,

dan bahagia atas bayang-bayang kepedihanku

dan penderitaan yang kujalani.

Karya ini yang kupersembahkan untuk:

Papa dan mama yang selalu sabar dan membimbing saya

Merek”A” yang Beredar di Pasaran dengan Metode Spektrofotometri Visibel.” Skripsi

karena itu penulis ingin mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada:

hingga selesainya skripsi ini.

untuk masukan, saran, dan kritik yang membangun selama penelitian.

masukan, saran, dan kritik yang membangun bagi penulis.

menemani, mendukung dan menyemangati penulis selama penelitian dan penyusunan

dan kerjasamanya selama penelitian.

9. Teman-teman FST 2004 atas persahabatan dan kekompakan selama kuliah.

penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

kekurangan mengingat keterbatasan kemampuan dan pengetahuan penulis, maka penulis

bagi orang lain yang membutuhkan.

Yogyakarta, 10 April 2010

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.

Yogyakarta, 10 April 2010

Shinta Lia Dewi Handoyo

Kata kunci: hidrokuinon, larutan pencerah, spektrofotometer visibel.

Hydroquinone is one of active agent that can be used widely at product of

Keywords: hydroquinone, bleaching solution, visible spectrophotometry.

HALAMAN JUDUL .......................................................................................................... ii

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................................ iii

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................................... iv

HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................................... v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................................................................... viii

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ............................................ ix

DAFTAR ISI ..................................................................................................................... xii

DAFTAR TABEL ............................................................................................................. xv

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................................... xvi

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................................... xvii

BAB 1. PENDAHULUAN ................................................................................................. 1

A. Latar Belakang ........................................................................................................ 1

3. Manfaat Penelitian ............................................................................................ 4

B. Tujuan Penelitian .................................................................................................... 5

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ................................................................................ 6

1. Pengertian larutan ............................................................................................. 6

2. Penggolongan tipe larutan................................................................................. 7

3. Faktor yang mempengaruhi kelarutan............................................................... 9

4. Kelebihan dan kekurangan sediaan larutan..................................................... 11

1. Struktur dan sifat hidrokuinon ........................................................................ 14

2. Penggunaan dan mekanisme kerja hidrokuinon ............................................. 15

3. Efek samping hidrokuinon .............................................................................. 16

D. Spektrofotometri Visibel ....................................................................................... 17

1. Deskripsi umum .............................................................................................. 17

2. Interaksi elektron dengan radiasi elektromagnetik (REM) ............................. 18

3. Analisis kuantitatif dengan spektrofotometri visible ...................................... 25

4. Instrumentasi spektrofotometri visibel............................................................ 29

BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ........................................................................ 38

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................................ 38

D. Alat Penelitian ....................................................................................................... 39

E. Tata Cara Penelitian .............................................................................................. 39