Lampiran 4.

Skema Kerja Penelitian

Buah Belimbing wuluh segar

sebanyak 9,4 Kg

 rajang, dimasukkan ke dalam

oven kemudian dihaluskan

Simplisia Buah Belimbing wuluh kering

sebanyak 450 gram
 Maserasi dengan etanol 70%
 Rendam 6 jam sambil sesekali diaduk
 Kemudian diamkan 18 jam lalu disaring

Filtrat I Ampas

 Maserasi dengan etanol 70%

 Rendam 6 jam sambil sesekali diaduk
 Kemudian diamkan 18 jam lalu disaring


Filtrat II Ampas

 Maserasi dengan etanol 70%

 Rendam 6 jam sambil sesekali diaduk
 Kemudian diamkan 18 jam lalu disaring

Filtrat III Ampas

Filtrat I, II, III dicampurkan

 Diuapkan dengan rotary evaporator
Ekstrak kental

Uji karakterisasi Uji farmakologi

Gambar 16. Skema kerja ekstraksi buah belimbing wuluh

88
 Lampiran 4. (Lanjutan)

Ekstrak Kental Buah Belimbing wuluh

Karakterisasi Karakterisasi Uji Kandungan Skrining Fitokimia

Spesifik Non Spesifik Kimia

 Susut  Alkaloid
 Identitas  Uji KLT
 Flavonoid
 Organoleptis Pengeringan
 Saponin
 Kadar senyawa  Kadar abu total  Steroid
larut air  Terpenoid

 Kadar senyawa
larut etanol

Gambar 17. Skema kerja Karakterisasi ekstrak buah belimbing wuluh.

89
Lampiran 4 (lanjutan)

Hewan percobaan

 Aklimatisasi selama seminggu

 Bagi kedalam 5 kelompok
 Perlakuan selama 60 hari

Kontrol Dosis I Dosis II Dosis III

Kontrol 100 mg/Kg
positif 50 mg/Kg 200 mg/Kg
Negatif BB
(makanan (MLT + BB BB
PTU) (MLT+
standar) (MLT + PTU (MLT + PTU
PTU +
+ Ekstrak + Ekstrak
Ekstrak
Buah Buah Buah
Belimbing Belimbing Belimbing
wuluh) wuluh) wuluh)

Hewan dikorbankan setelah

perlakuan 60 hari

Ambil jantung dan hati

Jantung, ginjal dan hati di timbang

Organ jantung untuk pembuatan preparat

Gambar 18. Skema Kerja Uji Aterosklerosis Ekstrak Buah Belimbing wuluh pada
Aorta Burung Puyuh Jantan.

90
Lampiran 4 (lanjutan)

Jantung Hewan Percobaan

Cuci dengan larutan NaCl Fisiologis 0,9 %

Fiksasi dengan larutan formalin buffer 10 % 20 jam

Dehidrasi dengan aceton (3 kali), 1 jam

Clearing dengan xylol (2 kali), 1 jam

Infiltrasi keparafin cair selama 1 jam

Inkubasi selama 3,5 jam pada suhu 56oC

Proses embedding

Potong blok jaringan dengan rotary micromotom setebal

5 µm

Letakan pada water batch yang berisi air pada

suhu 50oC

Letakan pada gelas objek yang telah di oleskan

mayer’s albumin

 Kering anginkan
Proses pewarnaan

Gambar 19. Skema Kerja Pembuatan Preparat Histopatologi

91
Lampiran 4 (lanjutan)

Sayatan pada objek gelas

Defarafinisasi dengan xylol (2 kali), 5 menit

55mmenitmenit

Dehidrasi dengan alkohol 96 % (3 kali), 2 menit

menitMmmenit meeeemmenit

Cuci dengan air mengalir

Warnai dengan Haematoxyllin, 2 menit

Cuci dengan air mengalir

Celupkan ke dalam larutan HCL 0,4 % 2 – 3 celupan

Cuci dengan air mengalir

Warnai dengan eosin, 5 menit

Dehidrasi dengan alkohol 96 % (3 kali), 2 menit

Clearing dengan xylol I ,5 menit dan Xylol II , 2 menit

Proses mounting

Amati di bawah mikroskop

Analisa data

Gambar 20. Skema Kerja Proses Pewarnaan Haematoxyllin-Eosin

92
Lampiran 4. (lanjutan)

Gambar 21. Burung puyuh jantan

Gambar 22. Tissue processor

93
Lampiran 4. (lanjutan)

Gambar 23. Tissue embedding center

Gambar 24. Rotary microtom

94
Lampiran 4. (lanjutan)

Gambar 25. Waterbath

Gambar 26. Lemari asam

95