S1 2016 331128 Introduction PDF

Optimasi Faktor Ekstraksi (Komposisi Solven, Ukuran Serbuk dan Rasio Serbuk-Solven) pada Daun
Randu
(Ceiba pentandra Gaertn.) Menggunakan Response Surface Methodology
WEDITA DESTRIANI
Universitas Gadjah Mada, 2016 | Diunduh dari http://etd.repository.ugm.ac.id/
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Penggunaan bahan alam dibidang kesehatan maupun bidang lain seperti
kosmetik hingga saat ini mulai meningkat, terlebih dengan adanya isu back to
nature serta anggapan masyarakat terkait efektivitas dan keamanan produk herbal
yang dianggap lebih menjamin dengan efek samping yang lebih ringan
dibanding dengan produk sintetis. Hal ini mendorong penilitian tentang efektivitas
tanaman obat terus meningkat dari tahun ke tahun (Gunawan dan Mulyani, 2004).
Tanaman randu merupakan salah satu tanaman yang banyak terdapat di
Indonesia dan biasanya dimanfaatkan sebagai bahan pengisi kasur dibeberapa
daerah (Pratiwi, 2011). Tanaman ini mengandung berbagai macam komponen
kimia seperti vitamin A, C dan E, elemen makro dan mikro, asam-asam lemak,
asam siklopropenoat (Lestari, 2008), alkaloid, flavonoid, fenolik, saponin, tanin,
phytate, oksalat (Friday dkk, 2011) karotenoid dan lain sebagainya (Rina, 2014).
Salah satu kandungan dari tanaman ini yaitu senyawa flavonoid. Menurut Friday
dkk, kandungan senyawa golongan flavonoid pada daun randu yaitu sekitar 26,06
± 0,16 mg/g. Senyawa golongan flavonoid telah banyak dikembangkan dan teliti
khasiatnya dalam bidang pengobatan. Senyawa flavonoid yang tersebar berbagai
tanaman diketahui menunjukkan aktivitas antioksidan, antibakteri, antimutagenik,
1
Randu
WEDITA DESTRIANI
Universitas Gadjah Mada, 2016 | Diunduh dari http://etd.repository.ugm.ac.id/ 2
antiinflamasi, antialergi, antiviral, antineopastik, antitrombotik serta vasodilator
dan lain sebagainya ( Alan dan Miller, 1996; Friday dkk, 2011).
Tanaman ini memiliki banyak potensi yang dapat dimanfaatkan diberbagai
bidang terutama dibidang kesehatan seperti sebagai antidiabetes, antifungi,
hepatoprotektor, antihipoglikemia, antidiare, antihelmintik dan manfaat lainnya
yang telah terbukti secara uji praklinis oleh peneliti-peneliti terdahulu sehingga
tanaman ini dapat dijadikan sebagai bahan baku obat herbal (Pratiwi, 2011;
Elumalai 2012).
Produk herbal telah diterima secara luas di hampir seluruh negara di dunia.
Menurut WHO negara-negara di Afrika, Asia dan Amerika Latin menggunakan
obat herbal sebagai pelengkap pengobatan primer yang mereka terima. Bahkan di
Afrika sebanyak 80% dari populasi menggunakan obat herbal untuk pengobatan
primer (WHO, 2003). Tren produk herbal yang tengah berkembang dan diminati
dikalangan masyarakat ini merupakan peluang bagi produsen baik industri kecil
maupun industri besar untuk mengembangkan dan menghasilkan produk berbasis
bahan alam. Namun, komponen-kompenen kimia yang terkandung didalam suatu
tumbuhan sangat beragam dan kompleks sehingga menyulitkan dalam proses
isolasi atau ekstraksinya. Variasi metode-metode ekstraksi belum bisa menjamin
kuantitas senyawa yang terekstraksi tinggi. Sedangkan untuk pengembangan serta
pemanfaatan ekstrak tumbuhan misal untuk formulasi sediaan produk herbal
merupakan produksi skala besar dan membutuhkan ekstrak yang berjumlah besar
pula sehingga dalam mengembangkan obat herbal, kebanyakan industri

Randu
WEDITA DESTRIANI
mengusahakan untuk mendapatkan rendemen serta kandungan senyawa aktifnya
dalam jumlah yang tinggi. Untuk itu, perlu dilakukan proses optimasi pada
kondisi ekstraksi sehingga dapat menghasilkan senyawa aktif dalam jumlah yang
optimal. Optimasi kondisi ekstraksi ini dilakukan pada beberapa faktor ekstraksi
yang berpengaruh pada efektivitas ekstraksi seperti konsentrasi solven, rasio
solid-solven dan ukuran serbuk simplisia. Ukuran serbuk simplisia akan
mempengaruhi tebal lapis batas yang akan mempengaruhi jarak yang harus
ditempuh pelarut untuk menembus dinding sel serbuk dan mencapai kandungan
kimia aktif didalam sel (BPOM RI, 2000). Sedangkan rasio serbuk-solven juga
berpengaruh pada efektivitas esktraksi, umumnya jumlah senyawa yang terekstrak
akan meningkat dengan meningkatnya jumlah pelarut. Faktor lain seperti
komposisi penyari juga berpengaruh pada efektivitas ekstrakasi karena dapat
mempengaruhi tingkat polaritas cairan penyari sehingga akan mempengaruhi jenis
senyawa aktif yang dilarutkan juga.
Metode optimasi seperti single factor experiment atau one factor at a time
(OFAT) terdapat banyak kekurangan karena hanya dapat memantau satu variabel
saja pada satu waktu sedangkan faktor lain dibuat konstan. Disamping itu, metode
ini tidak dapat menunjukkan interaksi antar faktor terhadap variabel respon. Selain
itu jumlah eksperimen yang perlu dilakukan untuk mendapatkan informasi yang
diinginkan jauh lebih banyak sehingga memerlukan waktu dan biaya yang lebih
banyak pula (Sin dkk, 2006). Salah satu metode yang dapat digunakan untuk
mengatasi keterbatasan dari metode diatas yaitu dengan menggunakan tehnik

Randu
WEDITA DESTRIANI
statistika multivariat. Salah satu metode yang banyak diterapkan untuk
mengoptimasi proses ekstraksi yaitu dengan Respon Surface Methodology
(RSM) dengan desain eksperimen Central Composite Design (Anuar dkk, 2013).
Metode RSM merupakan gabungan dari teknik matematika dan statistika yang
digunakan untuk membuat model dan menganalisis suatu respon yang
dipengaruhi oleh beberapa variabel bebas atau faktor, dengan tujuan
mengoptimalkan respon tersebut (Montgomery, 2009). Ide dasar metode ini
adalah memanfaatkan desain eksperimen berbantuan statistika untuk mencari nilai
optimal dari suatu respon (Nuryanti, 2008). Pendekatan ini dapat mengembangkan
desain eksperimen yang cocok serta dapat mengintegrasikan semua variabel
independen dan menggunakan semua data yang di-input dari eksperimen untuk
dibuat suatu persamaan yang dapat memberikan nilai teoritis sebagai output-nya
(Said dkk, 2015). Beberapa contoh penerapan RSM dalam proses ekstraksi yaitu
seperti optimasi faktor ekstraksi senyawa flavonoid yaitu konsentrasi etanol, rasio
liquid-solid dan kecepatan mikrowave pada tanaman Physalis alkekengi var.
Frachetii oleh Pin-yi dkk (2015), optimasi konsentrasi etanol, waktu ekstraksi
dan temperatur ekstraksi pada daun henna dengan parameter fenolik total oleh Ho
dkk (2010), optimasi waktu ekstraksi, konsentrasi solven serta temperatur
ekstraksi pada kacang kedelai dengan kadar polifenolik sebagai respon oleh
Banerjee dkk (2011) dan lain sebagainya.

Randu
WEDITA DESTRIANI
B. Rumusan Masalah
1. Berapakah komposisi solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa
flavonoid pada daun randu (Ceiba pentadra Gaertn.) dalam jumlah yang
optimal?
2. Berapakah ukuran serbuk simplisia yang tepat untuk mengekstraksi senyawa
optimal?
3. Berapakah rasio-serbuk solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa
optimal?
C. Tujuan Penelitian
1. Menentukan komposisi solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa
flavonoid pada daun randu menggunakan Response Surface Methodology?
2. Menentukan ukuran serbuk yang tepat untuk mengekstraksi senyawa
3. Menentukan rasioserbuk-solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

Randu
WEDITA DESTRIANI
D. Manfaat Penelitian
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai
kondisi faktor ekstraksi (komposisi solven, ukuran serbuk dan rasio serbuk-
solven) yang optimal untuk mengekstrakasi senyawa golongan flavonoid pada
daun randu. Hasil penelitian dapat bermanfaat untuk diaplikasikan dalam bidang
industri herbal yang membuat dan mengembangkan daun randu sebagai bahan
bakunya.
Randu
WEDITA DESTRIANI
E. Tinjauan Pustaka
1. Randu
Kapuk randu berasal dari bagian utara Amerika Selatan, Amerika Tengah,
Karibia, dan Afrika (Direktorat Perbenihan Tanaman Hutan, 2001). Randu atau
pohon kapok (C. pentanda) adalah pohon yang banyak tumbuh di daerah rendah
sampai 400 meter dari permukaan laut, di kebun, di tepi jalan, dan di tempat lain
yang berhawa panas (Heyne, 1987 dalam Kumarawati, 1998). Tanaman ini dapat
tumbuh di daerah tropis yang curah hujannya sekitar 1500 - 3000 mm (Heyne,
1987) atau antara 16 0LU sampai 16 0LS termasuk di Indonesia (Pratiwi, 2014).
Pada ketinggian dan iklim yang curah hujannya terlalu tinggi, tanaman ini masih
dapat tumbuh subur serta bertambah tinggi akan tetapi hasil panennya tidak tetap
dan buahnya muda membusuk. Selain itu, tanaman ini juga tahan pada musim
kering yang cukup kuat (Heyne, 1987).
a. Klasifikasi
Klasifikasi tanaman (Ceiba pentandra Garertn.) Sebagai berikut:
Devisi : Spermatophyta
Sub devisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledoneae
Bangsa : Malvales
Suku : Malvaceae
Marga : Ceiba
Randu
WEDITA DESTRIANI
Jenis : Ceiba pentandra (L.) Gaertn.
Sinonim :Eriodenderon afractuuosum Dc.
(BPOM RI, 2009)
b. Nama lain
Aceh : Panju
Melayu : Kakabu
Jawa tengah : Randu
Makasar : Kau-kau
Madura : Kapo
(BPOM RI, 2009)
c. Deskripsi
Merupakan tanaman habitus berupa pohon, tinggi ± 30 m, batang berkayu
bulat, hijau kecoklatan serta daun majemuk, membundar sedangkan anak daun
melanset panjang 5-16 cm, lebar 1,5-4,5 cm. Selain itu, kapuk randu (C.
pentandra Gaertn.) dapat tumbuh diberbagai macam kondisi tanah baik dari tanah
berpasir sampai tanah liat berdrainase baik, tanah aluvial, tanah sedikit asam
sampai netral (Pratiwi, 2012) serta masih dapat tumbuh pada tanah-tanah lempung
liat dan margalit (Heyne, 1987) namun hasilnya sangat sedikit. Kapuk randu (C.
pentandra Gaertn.) dapat juga hidup pada daerah kering dan temperatur di bawah
nol dalam jangka pendek serta peka terhadap kebakaran (Direktorat Pembenihan
Tanaman Hutan ,2001).

Randu
WEDITA DESTRIANI
d. Kandungan Kimia
Berbagai komponen yang terkandung didalam tanaman randu yaitu seperti
vitamin A, C dan E, elemen makro dan mikro seperti Fe, Ca, Mg, Zn, Cu, K, Na,
asam-asam lemak, protein, karbohidrat, mineral, serat, serta komponen kimia
seperti alkaloid, fenolik, flavonoid, saponin, tanin, karotenoid, tripsin inhibitor,
phytate, oksalat dan lainnya dalam berbagai jumlah (Pratiwi, 2011; Friday dkk,
2011). Berikut tabel daftar kandungan kimia daun randu berdasarkan penelitian
Friday dkk (2011) :
Tabel 1. Komposisi kandungan daun randu (Friday dkk, 2011)
Komposisi daun randu (Ceiba pentandra leaf)

Moisture Protein Lemak Serat Karb. Vitamin
content (%) (%) kasar (%) (%) A C E (mg/g)
(%) (µg/g) (mg/g)
4,89±0,35 12,97± 4,35± 4,35± 52,06± 18,15± 4,91± 0,18±
1,60 0,60 0,46 2,10 0,05 0,16 0,02
Komposisi elemen makro dan mikro
Fe Ca Mg K Na Mn Cu Zn
(mg/100g)
0,35±0,05 7,66± 2,46± 11,40± 5,53± 0,02± 0,03± 0,04±
1,40 0,46 2,41 0,95 0,01 0,01 0,02
Komponen bioaktif
Fen. Alk. Flav. Tanin Sap. HUI TI Oksalat Phytate
(mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g) (mg/g)
173,94 4,54± 26,06± 0,48± 1,55± 9,65± 14,54± 0,10± 0,15±
± 0,20 0,16 0,03 0,03 1,28 0,50 0,01 0,02
3,09
Komposisi Asam lemak
As. Laurat As. Miristat As. Palmitat As. Oleat As. Linoleat As. Stearat
(%) (%) (%) (%) (%) (%)
- - 15,92±0,17 - 0,72±0,02 -
Randu
WEDITA DESTRIANI
Salah satu kandungan daun randu yaitu senyawa golongan flavonoid. Pada
daun randu sendiri senyawa flavonoid ini dibuktikan memiliki efektivitas sebagai
antiinflamasi (Elumalai, 2012). Senyawa flavonoid yang terdapat pada daun randu
yaitu isoflavon glikosida dan aglikonnya yaitu 5-hidroksi-7,4’,5’-trimetoksi-3’-O-
α-L-arabinofurasil-(16)-β- D-glukopiranosida; 5-hidroksi-7,4’,5’-trimetoksi-3’-
O-α-D-glukosida dan aglikon 5,3’-dihidroksi-7,4’,5;-trimetoksiisoflavon yang
mana strukturnya dapat dilihat pada gambar 1.
Gambar 1. Struktur flavonoid daun randu
Pada bagian biji randu diketahui mengandung gosipol, asam siklopropenoat
(Lestari, 2008), asam lemak tidak jenuh, senyawa fenolik, karbohidrat, protein,
enzim (Kiran et al., 2011:048), karotenoid, flavonoid, alkaloid dan tanin (Rina,
2014). Ekstrak etanol pada daun mengandung zat bioaktif seperti gula pereduksi,
Randu
WEDITA DESTRIANI
poliuronoid, tanin, dan plobatanin (Asare & Oseni, 2012:44 dalam Pratiwi, 2014).
Daun mudanya mengandung fenol, alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, phytate,
oksalat, trypsin inhibitor, dan hemagglutinin (Friday et al.,2011:95).
Ekstrak etanol pada kulit batang mengandung zat bioaktif seperti gula
pereduksi, saponin, poliuronoid, polifenol, tanin, plobatanin (Asare & Oseni,
2012:44 dalam Pratiwi, 2014), glikosida isoflavon (isoflavon vavain) (Ueda et
al.,2002:403), antrakinon dan alkaloid (Doughari & Ioryue,2009:1333).
Ekstrak etanol pada batang C. pentandra mengandung flavonoid, tanin,
saponin, alkaloid, asam borat, klorbutanol, benzalkonium klorida, sedangkan
simplisia (serbuk) batangnya mengandung hidrokuinon, triterpenoid (Pratiwi et
al.,2012:246), dan pentosan yang lebih tinggi nilainya dibandingkan Pinus patula
dan Anthocephalus indicus (Walia et al.,2009:15 dalam Pratiwi, 2014).
e. Kegunaan
Tanaman kapok atau randu secara tradisional hanya digunakan sebagai bahan
pembuat atau pengisi kasur, bantal atau selimut (Pratiwi, 2014). Namun, di
beberapa negara sudah banyak kebiasaan tradisional yang menggunakan tanaman
ini untuk pengobatan penyakit-penyakit yang disebabkan oleh bakteri, jamur,
parasit serta gangguan inflamasi, aprodisia, sebagai diuretik bahkan mencegah
diabetes (Asare & Oseni,2012:44 dalam Pratiwi, 2014; Elumalai 2012). Friday
dkk (2011) menyatakan bahwa tanaman randu mengandung berbagai nutrient dan
fitokimia yang dapat mendukung penggunaan sebagai obat tradisional.

Randu
WEDITA DESTRIANI
Berbagai macam penelitian telah dilakukan untuk mengetahui efektivitas
tanaman ini pada berbagai kondisi seperti Nwachukwu dkk (2008) melaporkan
bahwa ekstrak alkohol dan ekstrak air dari tanaman ini memiliki efektivitas
sebagai antifungi. Selain itu Bairwa dkk (2011) melaporkan bahwa fraksi etil
asetat dari ekstrak metanol kulit kayu randu memiliki efektivitas hepatoprotektor
pada mencit yang diinduksi kerusakan hati dengan parasetamol. Penelitian lain
menunjukkan macam-macam efektivitas tanaman randu seperti ekstrak
metanolnya memiliki efektivitas anti ulcer pada mencit yang diinduksi etanol dan
Pyloros ligated (Bhushan dkk, 2011), serta menunjukkan aktivitas hipolipidemia
dan hipoglikemia (Aloke dkk, 2011), antidiare (Sule dkk, 2001), antihelmintik
(Dielh dkk, 2011) dan lain sebagainya.
Berbagai sumber lain juga menyebutkan bermacam-macam bagian tanaman
ini dilaporkan memiliki manfaat melawan diabetes tipe II, hipertensi, sakit kepala,
pusing, konstipasi, penyakit mental, deman, peptic ulcer dan lepra serta sebagai
diuretik (Elumalai dkk, 2012). Pemanfaatan lainnya yaitu daunnya dapat
digunakan untuk mengobati batuk (pengencer lendir) dan diare (Pratiwi, 2014)
serta memiliki khasiat untuk menghilangkan bekas luka dan mengobati panas
dalam (Perhutani, 2011). Sari daun yang masih muda digunakan untuk membantu
pertumbuhan rambut dengan cara digosokkan pada kulit kepala kemudian dipijat-
pijat (Kumarawati, 2010). Selain itu, daunnya juga digunakan untuk obat kompres
mata jika lelah atau panas, obat asma, dan peradangan rectum dan usus, disentri
dan radang kandung kemih (Perry,1980:253 dalam pratiwi, 2014; Affandi et al,
Randu
WEDITA DESTRIANI
2012). Sedangkan minyak dari biji digunakan untuk obat kudis dan membantu
pertumbuhan rambut, bunganya untuk mengobati konstipasi, serbuk buahnya
untuk mengatasi nyeri perut serta serat kapuk digunakan untuk membersihkan
luka bakar (Pratiwi, 2014). Getahnya berkhasiat sebagai astrigent dan untuk
mengobati luka dan radang selaput lendir usus (enteritis) (Affandi et al, 2012).
2. Ekstraksi dan Ekstrak
a. Metode Ekstraksi
Ekstraksi merupakan proses penarikan zat atau komponen kimia yang dapat
larut dari suatu bahan (simplisia) dengan menggunaka pelarut yang sesuai
sehingga terpisah dari komponen yang tidak larutnya (BPOM RI, 2013). Pada
proses penyarian ini terjadi pemindahan massa zat aktif yang semula berada dalam
sel, ditarik oleh cairan penyari tertentu sehingga zat aktif terlarut dalam cairan
penyari (Harborne, 1987). Pada proses ekstraksi, terjadi fase pencucian
(pembasahan) dan fase ekstraksi. Fase pecucian atau pembasahan terjadi pada saat
cairan penyari kontak atau bersentuhan dengan simplisia serbuk sehingga pelarut
akan menembus kedalam sel yang mengkerut dan membuat sel menjadi
mengembang serta mudah diekstraksi (Voigt, 1994). Fase kedua yaitu fase
ekstraksi, pada fase ini sel-sel yang telah mengembang mudah untuk ditembus
oleh pelarut sehingga dengan mengalirnya bahan pelarut kedalam ruang sel juga
menyebabkan protoplasma membengkak dan zat aktif akan terlarut sesuai dengan
kelarutannya dan berdifusi keluar sel dimana tingkat konsentrasinya masih

Randu
WEDITA DESTRIANI
rendah. Proses difusi ini akan terus terjadi sampai terjadinya keseimbangan
konsentrasi antara diluar dan didalam sel (Voigt,1994). Metode ekstraksi dipilih
berdasarkan beberapa faktor seperti sifat dari bahan mentah obat, daya
penyesuaian dengan tiap macam metode ekstraksi dan kepentingan dalam
memperoleh ekstrak yang sempurna atau mendekati sempurna (Ansel, 1989).
Pembagian metode ekstraksi menurut Ditjen POM (2000) adalah :
1) Cara Dingin
Ekstraksi cara dingin yaitu ekstraksi yang tidak menggunakan panas dalam
proses penyariannya. Berikut metode-metode ekstraksi cara dingin
a) Maserasi
Maserasi merupakan proses penyarian komponen kimia pada simplisia
dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengadukan pada temperatur
ruangan (kamar). (Depkes RI, 2000). Cairan penyari akan menembus dinding sel
dan masuk ke rongga sel kemudian melarutkan zat aktif yang terkandung
didalamnya dan oleh karena adanya perbedaan konsentrasi sehingga zat aktif akan
ditarik keluar sel hingga tercapai kesetimbangan. Maserasi kinetik berarti
perlakuan pengadukan secara terus-menerus selama proses maserasi sedangkan
remaserasi berarti pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyarian
maserat pertama dan seterusnya ( Depkes RI, 2000). Pada maserasi tidak
memungkinkan terjadinya ekstraksi absolut, tetapi semakin besar perbandingan
simplisia terhadap cairan penyari makan semakin banyak hasil yang diperoleh
(Voigth, 1994). Metode maserasi digunakan untuk simplisia kering dan cairan
Randu
WEDITA DESTRIANI
penyari yang direkomendasikan untuk metode ini adalah etanol atau campuran
etanol air. Keuntungan dari maserasi adalah pengerjaannya mudah dan
peralatannya murah dan sederhana. Sedangkan kekurangannya yaitu waktu yang
diperlukan untuk mengekstraksi bahan cukup lama, penyarian kurang sempurna,
serta pelarut yang digunakan jumlahnya banyak jika harus dilakukan remaserasi
(BPOM RI, 2013).
b) Perkolasi
Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna
(Exhaustiva extraction) yang umumnya dilakukan pada temperatur ruangan.
Proses terdiri dari tahapan pengembangan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi
sebenarnya (Penetesan atau penambungan ekstrak) terus-menerus sampai
diperoleh ekstrak atau perkolat yang jumlahnya 1-5 kali bahan (Depkes RI, 2000).
Pada perkolasi, melalui suplai bahan pelarut yang segar, perbedaan konsentrasi
selalu dipertahankan. Dengan demikian ekstraksi total secara teoritis
dimungkinkan (praktis jumlah bahan yang dapat diekstraksi mencapai 95%)
(Voigt, 1995).
Perkolasi umumnya digunakan untuk mengekstraksi serbuk kering terutama
simplisia yang keras seperti kulit batang, kulit buah, biji, kayu dan akar. Penyari
yang digunakan umumnya adalah etanol atau campuran etanol-air. Metode ini
tidak memerlukan tahapan penyaringan perkolat, hanya saja kerugian dari metode
ini yaitu waktu yang dibutuhkan lebih lama dan jumlah penyari yang digunakan
lebih banyak (Depkes RI, 2013)

Randu
WEDITA DESTRIANI
2) Cara Panas
a) Refluks
Refluks merupakan metode ekstraksi dengan pelarut pada temperatur titik
didihnya selama wakrtu tertentu dan jumlah pelarut yang relatif konstan dengan
adanya pendingin balik. Cairan penyari akan menguap, uap tersebut akan
diembunkan dengan pendingin tegak dan akan kembali menyari zat aktif dalam
simplisia tersebut, demikian seterusnya. Umumnya dilakukan dengan
pengulangan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali (Depkes RI, 2000)
b) Sokletasi
Sokletasi adalah ekstraksi dengan menggunakan pelarut yang selalu baru
yang umumnya dilakukan dengan menggunakan alat yang khusus sehingga terjadi
ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut yang relatif konstan dengan adanya
pendinginan balik (Depkes RI, 2000). Sokletasi merupakan metode ekstraksi
untuk bahan baku yang tahan terhadap pemanasan dengan meletakkan bahan yang
akan diekstraksi dalam sebuah kantung ekstraksi (kertas saring) didalam sebuah
alat ekstraksi dari gelas yang bekerja konstan (Voigt, 1995)
c) Infundasi
Merupakan metode ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur penangas air
(bejana infus tercelup dalam penangas air mendidih, temperatur terukur 900C)
selama 15 menit (Depkes RI, 2000).
d) Dekok
Randu
WEDITA DESTRIANI
Merupakan ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90 0C selama 30
menit (Depkes RI, 2000).
e) Digesti
Merupakan maserasi dengan pengadukan secara kontinu pada tempertur yang
lebih tinggi dari temperatur kamar yaitu biasanya 40-50 0C (Depkes RI, 2000).
b. Ekstrak
Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif
dari simplisia menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir
semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang terisi diperlulakukan
sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Depkes RI, 1995). Macam-
macam ekstrak berdasarkan sifatnya yaitu :
1) Ekstrak encer, yaitu sediaan yang memiliki konsistensi semacam madu
dan dapat dituang.
2) Ekstrak kental, sediaan yang dilihat dalam keadaan dingin dan tidak
dapat dituang. Kandungannya air yang berjumlah sampai 30%.
Tingginya kandungan air menyebabkan ketidakstabilan sediaan obat
karena cemaran bakteri
3) Ekstrak kering, sediaan yang memiliki konsistensi kering dan mudah
dituang, sebaiknya memiliki kandungan lembab tidak lebih dari 5%.
4) Ekstrak cair, ekstrak yang dibuat sedemikiannya sehingga 1 bagian
simplisia sesuai dengan bagian ekstrak cair.
c. Faktor-faktor Ekstraksi
Randu
WEDITA DESTRIANI
Faktor-faktor seperti komposisi solven, waktu ekstraksi, temperatur, pH, rasio
serbuk-solven dan ukuran serbuk merupakan faktor-faktor yang dapat
mempengaruhi efektivitas penyarian komponen kimia dari suatu simplisia (Dent
dkk, 2012).
1) Komposisi solven
Cairan penyari dalam proses pembuatan ekstrak adalah pelarut yang baik
untuk senyawa kandungan yang berkhasiat atau yang aktif dari bahan, dengan
demikian senyawa tersebut dapat dipisahkan dari bahan dan dari senyawa
kandungan lainnya, serta ekstrak hanya mengandung sebagian besar senyawa
kandungan yang diinginkan. Dalam hal ekstrak total, maka cairan pelarut dipilih
yang melarutkan hampir semua metabolit sekunder yang terkandung. Pelarut
sebaiknya merupakan pelarut terbaik untuk bahan yang akan diekstraksi dan harus
dapat terpisah dengan baik setelah pengocokan (Amiarsih, 2005). Berdasarkan
Departemen Kesehatan Indonesia, faktor utama untuk pertimbangan pada
pemilihan cairan penyari adalah selektivitas, kemudahan bekerja dan proses
dengan cairan tersebut, ekonomis, ramah lingkungan dan keamanan (Depkes RI,
2000).
Pelarut polar melarutkan zat terlarut atau solut ionik atau zat yang bersifat
polar lainnya, begitu juga dengan pelarut non polar. hal ini disimpulkan dalam
pernyataan like dissolve like (Martin, 2009). Semakin tinggi berat molekul solven,
maka semakin rendah polaritasnya dan akan meyebabkan senyawa lain yang
Randu
WEDITA DESTRIANI
memiliki berat molekul hampir sama dengan solven tersebut akan lebih mudah
terekstraksi. Hal ini bisa dihubungkan dengan prinsip like dissolve like.
Komposisi solven mempengaruhi tingkat polaritas cairan penyari sehingga
akan mempengaruhi jenis senyawa aktif yang dilarutkan juga. Kelarutan senyawa
sebagian besar disebabkan oleh polaritas pelarut, yaitu oleh dipol momennnya
(Martin, 2009). Kelarutan senyawa dipengaruhi juga oleh struktur senyawanya
sehingga sulit untuk menemukan pelarut yang benar-benar tepat untuk
mengekstraksinya apalagi untuk mengekstraksi senyawa dari bahan alam yang
diketahui sangat kompleks disamping itu, keberadaan analit didalam bahan alam
juga bervariasi dalam beberapa bentuk, ada yang dalam bentuk bebas,
terkonjugasi dengan gula, karbohidrat, protein dan lain sebagainya yang secara
tidak langsung mempengaruhi solubilitasnya (Luthtria, 2006).
Kombinasi dari dua atau lebih solven dengan perbandingan tertentu akan
menghasilkan tingkat kepolaran yang lebih bervariasi dan lebih selektif dari pada
satu komponen solven saja. Air dan etanol memiliki kelarutan yang hampir sama
karena memiliki gugus hidriksil yang menyebabkan keduanya bersifat hidrofilik.
Akan tetapi, campuran etanol – air menunjukankan hasil yang lebih efisien untuk
mengekstraksi senyawa fenolik jika dibandingkan dengan monosolvennya
(Spigno dk, 2007). Menurut Spigno (2007), penambahan air dalam jumlah yang
kecil pada pelarut organik akan menyebabkan medium lebih polar dan dapat
memfasilitasi proses ekstraksi senyawa fenolik. Flavonoid merupakan salah satu

Randu
WEDITA DESTRIANI
senyawa fenolik yang memiliki kepolaran yang bervariasi. Berikut merupakan
macam-macam pelarut dan golongan senyawa yang dapat dilarutkannya :
Tabel 2. Pelarut dan jenis senyawa yang terlarut didalamnya (Pramono, 2012)
Jenis cairan penyari Jenis/ golongan kandungan kimia

Heksan, petroleum eter, Mono dan seskuiterpen (komponen minyak atsiri), di dan
benzen, toluen triterpen, steroid, flavon polimetoksi, lemak, resin, klorofil
Kloroform, diklorometana Semua yang larut diatas, aglikon antrakinon, kumarin, alkaloid
bebas, kurkumin, fenol bebas
Dietil eter Semua yang diatas, aglikon flavonoid polihidroksi, asam fenolat,
Etil asetat Semua yang diatas, flavonoid monoglikosida, kuasinoid,
glikosida lain
Etanol, metanol, isopropanol, Semua yang diatas, flavonoid diglikosida, tanin, saponin
butanol
Air panas Semua yang diatas mulai dari dietil eter, flavonoid poliglikosida,
garam alkaloid, mono dan disakharida, asam amino dan protein
2) Ukuran serbuk
Penyarian perlu memperhatikan sifat fisika dan kimia simplisia atau bahan
yang digunakan serta kandungan zat aktifnya. Simplisia yang lunak dapat dengan
muda ditembus oleh cairan penyari sedangkan simplisia yang keras susah
ditembus oleh cairan penyari dan sebaiknya diserbuk terlebih dahulu sampai halus
sebelum dilakukan penyarian (Depkes RI, 1986). Derajat halus serbuk
berpengaruh terhadap efektivitas penyarian karena mempengaruhi tebal lapisan
batas (TLB). TLB merupakan jarak yang harus ditempuh oleh cairan penyari
untuk mencapai kandungan kimia aktif didalam sel bahan (Pramono, 2012).
Semakin besar TLB, artinya semakin besar ukuran serbuk sehingga semakin tidak
efektif proses penyarian yang terjadi. Sebaliknya, semakin kecil ukuran serbuk
maka luas permukaan area per unit massa serbuk akan semakin besar sehingga
Randu
WEDITA DESTRIANI
TLB akan semakin kecil dan efektivitas penyarian juga semakin baik kecuali jika
terjadi penggumpalan (Luthria, 2012; Pramono, 2012; Velioglu, 2011). Akan
tetapi serbuk yang terlalu halus dapat menyebabkan beberapa kerugian
diantaranya (Pramono, 2012) :
a. Mengakibatkan banyak sel yang pecah sehingga menyebabkannya
kehilangan kandungan kimia yang mudah menguap seperti minyak atsiri.
b. Banyak kandungan kimia yang seharusnya tidak larut dalam cairan
penyari dan tetap tinggal didalam sel menjadi tertarik keluar sel dan
mengotori sari.
c. Butiran serbuk yang terlalu halus jika terkena cairan penyari dapat
menggumpal sehingga dapat menyumbat dan menghambat cairan penyari
pada proses perkolasi.
d. Pada bahan berupa biji dan rimpang, jika diekstraksi menggunakan air
atau etanol encer dan dipanaskan makan akan menggumpal dan
membentuk bubur bahkan kanji karena banyak mengandung amilum.
Selain itu ukuran partikel yang terlalu halus akan menyulitkan pada saat
penyaringan karena akan membentuk suspesi yang susah dipisahkan (Depkes RI,
1986)
3) Rasio solid-soven
Penentuan rasio solid-solven merupakan salah satu tahap yang penting dalam
proses ekstraksi karena kandungan kimia bahan tidak bisa terekstraksi secara
sempurna jika rasionya terlalu kecil, walaupun jika terlalu tinggi akan
Randu
WEDITA DESTRIANI
menyebabkan kenaikan biaya (Du dkk, 2015). Semakin tinggi rasio solid-solven
maka semakin tinggi pula solut yang didapat walaupun penggunaan solven
berdasarkan prinsip transfer massa (Spigno, 2006). Semakin tinggi rasio antara
serbuk dan solven maka semakin tinggi gradien konsentrasi yang tersedia untuk
menarik senyawa aktif dari dalam simplisia sehingga dapat meningkatkan kinetika
ekstraksi (Quan dkk, 2013). Berdasarkan penelitian sebelum-sebelumnya
dijelaskan bahwa semakin tinggi rasio perbandingan solid-liquid maka efektivitas
penyarian juga semakin baik (Luthria, 2007), akan tetapi rasio solid-liquid ini
perlu dioptimasi dan dipertimbangkan terlebih dahulu untuk keefisienan
penggunaan solven atau campuran solven agar tidak terjadi pemborosan solven
(Luthria, 2007)
3. Response Surface Methodology
Optimasi merupakan proses untuk meningktakan performa dari suatu sistem,
proses atau suatu produk dengan tujuan untuk memperoleh keuntungan
maksimum dari proses tersebut. Salah satu metode optimasi yang menggunakan
analisis statistik multivariat yang cukup relevan yaitu metode permukaan respon
(Response Surface Methodology) (Bazerra dkk, 2008).Response surface
methodology (RSM) pertama kali dikenalkan oleh Box dan Wilson (1951) dan
telah diterapkan untuk mengatasi kekurangan dan keterbatasan dari metode
konvensional (single factor experiment) (Ho dkk, 2009). Response Surface
Methodology (RSM) merupakan gabungan dari teknik matematika dan statistika

Randu
WEDITA DESTRIANI
yang digunakanuntuk membuat model dan menganalisis suatu respon yang
dipengaruhi oleh beberapa variabel bebas atau faktor, dengan tujuan
mengoptimalkan respon tersebut. Metode response surface menggunakan teknik
statistika untuk mengembangkan model yang dapat menjelaskan keseluruhan
proses serta menjelaskan interaksi antar variabel sehingga dapat untuk
mengoptimalkan respon (Montgomery, 2009; Sundari, 2015).
Tujuan utama metode response surface adalah mendapatkan komposisi taraf
perlakuan yang menghasilkan respon optimum. Secara umum, metode response
surface dapat digambarkan secara visual melalui response surface plot dan kontur
plot. Melalui plot tersebut dapat diketahui bentuk hubungan antara respon dengan
variabel bebasnya (Bradley, 2007). Keuntungan menggunakan RSM ini adalah
dapat mempermudah pencarian wilayah optimum. Bila tidak menggunakan
metode tersebut, harus dilakukan eksperimen berulang-ulang dimana eksperimen
tersebut membutuhkan biaya dan waktu yang banyak sehingga tidak efektif dan
efesien (Ernawati, 2012).
Sebelum menerapkan metode respon permukaan, hal penting yang pertama
perlu dilakukan adalah memilih desain eksperimen yang akan digunakan dalam
menentukan eksperimen seperti apa yang akan dipelajari dalam region
eksperimen. Desain eksperimen orde pertama seperti factorial desain dapat
digunakan jika hubungan variabel menunjukkan fungsi linier atau tidak terjadi
curvature. Akan tetapi jika pendekatan respon tidak menunjukan fungsi linier
maka desain eksperimen yang digunakan yaitu persamaan orde kedua, seperti
Randu
WEDITA DESTRIANI
faktorial desain 3 level, Box-Behnken, Central Composite dan Doehlert designs.
Perbedaan dari beberapa desain eksperimen tersebut terletak pada pemilihan titik
eksperimental, jumlah level faktor, jumlah eksperimen serta blok (Bazerra dkk,
2008).
RSM digunakan untuk menyelidiki faktor-faktor yang berpengaruh pada
proses ekstraksi dan dengan pendekatan ini keseluruhan percobaan beserta
interaksi antar variabelnya dapat diketahui dan dipertimbangkan. Pendekatan ini
digunakan untuk mendapatkan respon permukaaan dengan cara memasukkan data
percobaan pada model polinomial serta mengevaluasi pengaruh dari masing-
masing faktor dan interaksi antara masing-masing faktor (Palma, 2016). Apabila
semua faktor yang dipertimbangkan akan dievaluasi, maka persamaan RSM dapat
dituliskan sebagai berikut :
yang mana adalah respon dan adalah faktor-faktor yang merupakan variabel
terkontrol selama eksperimen.. Biasanya persamaan yang digunakan adalah model
orde kedua :
Dimana Y = fungsi respon; β0adalah intersep, β1, β2, dan β3, adalah koefisien
linier;β11, β22, dan β33 adalah koefisien kuadratik dan β12, β13, dan β23 merupakan
koefisien interaksi, sedangkan ε merupakan komponen residual yang bersifat
random dan terdistribusi secara identik dan saling bebas (Independent Identically
Randu
WEDITA DESTRIANI
Distributed-IID) dengan terdistribusi normal pada nilai rataan 0 dan varian σ2 –
secara matematis dinyatakan dengan ε ≈ IID normal (0, σ2 ) (Bazerra, 2008;
Nuryanti, 2008).
Oleh karena bertujuan untuk menentukan respon y optimal, perlu untuk
menemukan estimasi yang paling mendekati dari korelasi antara variabel
independen dengan respon permukaan dengan cara mencari titik stasioner. Titik
stasioner merupakan titik dari variabel independent yang menghasilkan respon
didaerah optimum. Penentuan titik stasioner diperoleh dengan mendiferensiasikan
persamaan polinomial orde dua kedalam bentuk matriks terhadap variabel x:
̂ ̂ ̂
...........................................................................(1)
dalam notasi matriks dinyatakan sebagai :
̂ ̂ .................................................................................................(2)
dengan matriks :
̂ ̂ ̂ ̂
̂ ̂ ̂ ̂
[ ] dan
[̂ ] [̂ ̂ ̂ ]
Turunan ̂ terhadap vektor adalah sama dengan 0, sehingga dapat
dinyatakan dengan :
̂
..............................................................................................(3)
didapat titik stasioner .................................................................(4)

Randu
WEDITA DESTRIANI
Substitusikan persamaan (4) ke persamaan (2) maka diperoleh nilai respon
optimal yang diprediksi terjadi pada titik stasioner, yaitu :
̂ ̂ ........................................................................................................(5)
Dengan memasukkan nilai dari titik stasioner ke persamaan (6) dibawah ini,
makan akan didapat nilai sesungguhnya dari variabel-variabel independen yang
menghasilkan respon optimal (Nuryanti, 2008).
.............................................................................................................(6)
Dimana xi adalah nilai kode untuk variabel , X1 merupakan nilai sebenarnya
dari variabel X, X0 merupakan nilai sebenarnya dari titik pusat (centre point)
sedangkan merupakan selisih antar level (Li dkk, 2011).
Setalah ditemukan titik stasioner, ditentukan pula karakteristik permukaan
respon didaerah optimum setelah didapatkan titik stasioner. Penentuan
katakteristik permukaan respon ini digunakan untuk mengetahui apakah jenis titik
stasioner yang didaptkan berupa titik minimum, maksimum atau titik pelana
(Nuryanti, 2008; Montgomery, 1976 ). Karakteristik permukaan respon dapat
diidentifikasi dari gambar kontur dan grafik permukaan responnya atau dengan
menggunakan analisis kanonik jika variabel yang digunakan banyak. Metode
kanonik mentrasnformasikan fungsi respon dari titik asal ke titik
stasioner dan merotasikan sumbuh koordinatnya, sehingga dihasilkan fungsi
respon sebagai berikut :
̂ ̂ ............................................................(7)
Randu
WEDITA DESTRIANI
Dimana :
: Variabel independen baru hasil transformasi
̂ : Harga y pada titik stasioner
: Konstanta yang merupkan eigen value dari matriks B, 1=1,2,...,k
Karakteristik dari permukaan respon ditentukan oleh harga λi. Jika nilainya
semua positif maka x0 adalah titik minimum, sedangkan jika semua negatif maka
x0 adalah titik maksimum, jika harganya berbeda tanda diantara harga λi, maka x0
merupakan titik pelana (Nuryanti, 2008).
4. Central Composite Design
Central Composite Design (CCD) merupakan salah satu desain eksperimen
yang mendukung untuk optimasi proses dengan RSM yang merupakan model
orde kedua (kuadratik). CCD memiliki tiga macam titik desain yang berbeda
yang terdiri dari 2 level faktorial design (±1), 2 level star design (titik aksial) yang
berjarak α dari central point serta bertanggung jawab pada efek kuadratik (±α;
│α│≥1) dan 1 level center point. Dengan demikian setiap variabel pada CCD
terdiri dari lima level yaitu –α, -1, 0, +1 dan +α (Leiviskä, 2013). Hubungan
antara nilai kode dan nilai sebenarnya dapat ditunjukkan dari persamaan (6)
(Bazerra dkk, 2008)
Jumlah faktor yang dapat dioptimasi dengan CCD minimal dua faktor dengan
masing-masing terdiri dari lima level. Keuntungan dari CCD yaitu dapat
mengurangi jumlah eksperimen dengan cara mengeliminasi sejumlah percobaan

Randu
WEDITA DESTRIANI
yang tidak cukup berguna pada model (Simon, 1970).CCD menjelaskan
bagaimana cara menentukan susunan titik eksperimen dengan efesiensi estimasi
orde pertama dan orde kedua dari model matematika. Hal ini menjadi kelebihan
sekaligus kekurangan dari CCD karena dengan jumlah level yang lebih banyak
tersebut keakuratan model menjadi lebih tinggi akan tetapi jumlah eksperimen
juga lebih banyak (Cheng, 2014).
Gambar 2. Central Composite Design untuk optimasi dua (a) dan tiga (b) variabel (Bazerra,
2008)
Untuk mendapatkan model orde dua yang bagus dalam menghasilkan nilai
prediksi, model harus memiliki nilai variansi yang stabil dan konsisten yang layak
pada titik x. Oleh karena itu, rancangan desain harus rotatableartinya pada semua
titik x jaraknya harus sama terhadap titik pusat sehingga variansi pada nilai
pediksi respon adalah konstan di lingkaran. Desain CCD merupakan desain yang
bersifat rotatabledengan pemilihan nilai α yang bergantung pada jumlah variabel
yang digunakan (Ernawati, 2012).

Randu
WEDITA DESTRIANI
5. Box Benkhen Design
Box-Behnken Design (BBD) merupakan desain percobaan pada metode RSM
yang mana kombinasi perlakuan yang diambil yaitu midpoint dari daerah tepi
ruang proses dan pada daerah center (Sundarini, 2015). Box-Behnken Design
digunakan sebagai rancangan percobaan untuk mengevaluasi hubungan yang
nonlinier antara variabel respon dan variabel faktor (Ho dkk, 2009). Sama seperti
CCD, BBD juga menjelaskan bagaimana cara menentukan susunan titik
eksperimental pada faktorial tiga level dengan efesiensi estimasi orde pertama dan
orde kedua dari model matematika, hanya saja level faktor yang digunakan pada
BBD lebih sedikit dari pada CCD (Bazerre dkk, 2008). BBD merupakan desain
eksperimen yang dapat digunakan untuk mengoptimasi proses dengan minimal
tiga variabel faktor dengan masing-masing variabel faktor terdiri dari tiga level (-
1, 0, +1) (Bazerre dkk, 2008; Anuar dkk, 2013). BBD kompetibel dengan RSM
karena dapat mengestimasi parameter model kuadratik, bentuk desain
percontohan, deteksi lack of fit dari model serta menggunakan blok (Pamal dkk,
2016).
BBD memiliki desain yang lebih efiesien karena jumlah eksperimen yang
dilakukan relatif lebih sedikit sehingga lebih ekonomis dibanding desain
eksperimen kuadratik lainnya (Anuar dkk, 2013). Selain itu titik eksperimen
terletak pada daerah yang optimum yaitu diantara level rendah dan level tinggi
sehingga tidak terdapat titik pada daerah kubik (Anuar dkk, 2013). Salah satu
kelebihan lain dari metode ini yaitu tidak memasukkan semua faktor yang terletak
Randu
WEDITA DESTRIANI
pada daerah sangat rendah maupun daerah limit yang tinggi, sehingga tidak
menghasilkan eksperimen yang tidak berguna pada daerah ekspektasi (titik
optimal) (sundarini, 2015).
Gambar 3. Box-Benhken design untuk optimasi tiga variabel (Bazerra, 2008)
6. Flavonoid
a. Pengertian dan Klasifikasi
Flavonoid merupakan senyawa polifenol yang strukturnya merupakan turunan
dari inti aromatik flavon atau 2-fenilbnezopiron (Robinson, 1995). Flavonoid
memiliki struktur dasar C6-C3-C6 dimana bagian C6 adalah cincin benzen yang
dihubungkan dengan tiga atom C yang merupakan rantai alifatik. Cincin diberi
tanda A, B, C dan atom karbon dinamai menurut sistem penomeran dengan
menggunakan angka biasa untuk cincin A dan angka beraksen untuk cincin B
(Markham, 1988).
Randu
WEDITA DESTRIANI
Gambar 4. Struktur kerangka flavonoid (Achmad, 1986)
Gambar 5. Kerangkan tipe-tipe flavonoid (Mabry dkk, 1970)

Randu
WEDITA DESTRIANI
Penggolongan flavonoid berdasarkan pada penambahan rantai oksigen
heterosiklik dan variasi distribusi gugus hidrofilnya. Variasi oksidasi pada atom
C3 mempengaruhi sifat, khasiat, golongan atau tipe flavonoid. Klasifikasi
flavonoid berdasarkan perbedaan rantai C3 yaitu : flavon, flavonolol, flavonol,
flavonon, isoflavon, auron, dan khalkon (Robinson, 1995).
Flavonoid memiliki aktivitas anti-mutagenik, antibakteri, anti inflamasi,
antialergi, antiviral, antineoplastik, antitrombotik, vasodilator (Alan dan Miller,
1996), antioksidan, antiangiogenik, anti esterogenik, antiprofilatif (Zhang dan
Morris, 2003). Sedangkan yang sering ditemukan dalam tanaman adalah flavon
dan flavonol (Robinson, 1995) yang biasanya dalam bentuk O-glikosida.
Perbedaan keduanya yaitu flavonol memiliki gugus hidroksi pada C3. Flavonol
terdiri atas quercetin yang umumnya merupakan komponen terbanyak dalam
tanaman, kaempferol, dan myricetin. Flavon yang terdiri atas apigenin dan
luteolin, hanya ditemukan pada bahan pangan tertentu, contohnya seledri, lada
(hanya luteolin), dan peterseli (hanya apigenin) (Lee, 2000).
Flavonoid merupakan golongan senyawa fenolik terbesar yang terdapat pada
tumbuhan (Tjandra, 2010). Senyawa flavonoid banyak terdapat didalam famili
Polygonaceae, Rutaceae, Leguminaceae, Umbeliferae dan Compositae (Evans dan
Tease, 2002). Keberadaan flavonoid didalam tanaman kemungkinan berfungsi
sebagai pelindung daun dari efek radiasi sinar ultraviolet dan menekan
fotoperoksidasi lipid oleh penangkapan anion superoksida yang dihasilkan selama
proses peroksidasi dalam kloroplas (Harborne, 1987). Dalam tumbuhan, sangat

Randu
WEDITA DESTRIANI
jarang dijumpai flavonoid dalam bentuk tunggal biasanya terdapat dalam bentuk
campuran dan jenis yang berbeda. Flavonoid dapat berbentuk terikat pada gula
sebagai glikosida dan sebagai aglikon flavonoid (Harbone, 1987). Aglikon
flavonoid (yaitu flavonoid tanpa gula terikat) terdapat dalam berbagai bentuk
struktur (Markham, 1988). Gula juga dapat terikat pada atom karbon flavonoid
dan dalam hal ini gula terikat langsung pada inti benzen dengan suatu ikatan
karbon-karbon yang tahan asam. Glikosida yang demikian disebut C-glikosida.
Oleh karena itu, senyawa golongan flavonoid memiliki polaritas yang bervariasi
mulai dari senyawa polar seperti bentuk glikosida flavonoid, semi polar seperti
flavonoid polihidroksi bahkan sampai senyawa non-polar seperti flavonoid
polimetoksi.
b. Sifat-sifat
Didalam tumbuhan, flavonoid terdapat dalam bentuk aglikon maupun
glikosida sehingga kelarutannya bervariasi sesuai dengan golongan dan
substitusinya (Robinson, 1995) dan relatif sulit untuk mendapatkannya. Bentuk
aglikon flavonoid relatif kurang polar sehingga lebih larut dalam pelarut yang
kurang polar seperti eter, etil asetat, sedikit dalam alkohol dan tidak larut dalam
air. Sedangkan untuk glikosida flavonoid merupakan senyawa polar sehingga
cukup larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton,
dimetilsulfoksida, dimetilformamid dan air (Markham, 1998).
Gugus hidroksi pada flavonoid menyebabkan senyawa flavonoid bersifat
asam dan membentuk asam fenolat yang dapat bereaksi dengan basa membentuk
Randu
WEDITA DESTRIANI
garam fenolat sehingga pada penambahan NH3 warna berubah menjadi kuning dan
menyebabkan bergeseran batokromik (Markham, 1998). Struktur senyawa
flavonoid memiliki karakteristik yang khas pada UV 366 nm sehingga
memungkinkan untuk diidentifikasi dengan kromatografi lapis tipis.
Tabel 3. Penafsiran warna bercak flavonoid pada UV 366 nm

Warna bercak dibawa sinar UV Jenis flavonoid yang mungkin
Sebelum Setelah disemprot
disemprot NH3 NH3
Ungu gelap Kuning, hijau a. Biasanya flavon 5-OH dan 4’-OH atau 3-OH
kuning atau coklat yang tersubtitusi, atau flavonol dengan 5-ON
dan 4’-OH
b. Kadang flavonon dengan 5-OH dan 4’OH
kalkon tanpa hidroksi grup pada cincin B.
Tanpa atau sedikit a. Flavon atau flavonol dengan 5-OH tapi tanpa 4’-
perubahan OH bebas atau tersubtitusi
b. Isoflavon, dihidroflavonol dan kadang flavonon
dengan 5-OH.
c. Kalkon dengan 2’-atau 6’-OH tapi tanpa 2- atau
4-OH.
Biru terang Kadang flavonon dengan 5-OH
Merah atau oranye Kalkon dengan 2- atau 4-OH bebas
Fluoresen biru Fluoresen kuning- a. Flavon dan flavonon tanpa 5-OH bebas
terang hijau atau biru-hijau b. Flavonol tanpa 5-OH bebas tapi dengan 3-OH
tersubstitusi
Tanpa atau sedikit Isoflavon tanpa 5-OH bebas
perubahan
Fluoresens cerah Isoflavon tanpa 5-OH bebas
biru terang
Tidak tampak Fluoresen biru Isoflavon tanpa 5-OH bebas
terang
Kuning tipis Tanpa atau sedikit Flavonols dengan 3-OH bebas dan dengan atau tanpa
dan kuning atau perubahan 5-OH bebas
Fluoresen
oranye
Fluoresen Orange atau merah Auron dengan 4-OH bebas dan kadang kalkon dengan
kuning, hijau- 2-atau4-OH
kuning, biru- Tanpa atau sedikit a. Auron dengan 4’-OH bebas dan flavonon tanpa
hijau atau hijau perubahan 5-OH bebas
b. Flavonols dengan 3-OH bebas dan dengan atau
tanpa 5-OH bebas.
Kuning pucat Kuning terang-ungu Dihidroflavonol tanpa 5-OH bebas
Randu
WEDITA DESTRIANI
Flavonoid memiliki sistem aromatik yang terkonjugasi dan karena itu
menunjukkan pita serapan kuat pada daerah spektrum UV dan spektrum sinar
tampak (Harborne, 1987).
F. Landasan Teori
Salah satu kandungan yang terdapat pada daun randu dan memiliki aktivitas
yang sudah dibuktikan yaitu senyawa golongan flavonoid. Senyawa flavonoid
memiliki polaritas yang bervariasi sehingga kelarutannya juga bervariasi seperti
pada tabel 2. Ditinjau dari tabel 2 bahwa senyawa flavonoid yang bersifat polar
sampai semi polar dapat larut didalam pelarut etanol. Sedangkan senyawa
flavonoid yang polar larut dalam air, sehingga kombinasi antara kedua solven
tersebut akan dapat melarutkan senyawa flavonoid dalam jumlah yang tinggi.
Selain itu, untuk menghasilkan kadar senyawa aktif yang tinggi perlu juga
dilakukan optimasi terhadap faktor ekstraksi lainnya seperti ukuran serbuk san
rasio serbuk-solven. Semakin kecil ukuran serbuk, efektivitas penyarian akan
semakin baik karena tebal lapis batas serbuk semakin rendah sehingga jarak
penyari untuk melarutkan senyawa semakin kecil. Selain itu, rasio serbuk-solven
yang semakin tinggi juga akan menyebabkan efektivitas penyarian semakin baik
karena semakin lama tercapainya kejenuhan sehingga senyawa yang dapat tertarik
semakin banyak. Ketiga kondisi ekstraksi tersebut perlu optimasi untuk
mendapatkan kadar flavonoid dalam jumlah yang maksimal. Optimasi kondisi
ekstraksi pada daun randu bertujuan untuk meningkatkan jumlah ekstrak yang
Randu
WEDITA DESTRIANI
diperoleh dengan cara menemukan kondisi ekstraksi yang paling baik untuk
memperoleh kadar ekstrak dalam jumlah yang optimal. Metode optimasi yang
banyak diterapkan pada optimasi proses ekstraksi dan memiliki keakuratan yang
cukup tinggi dalam menentukan titik optimum yaitu Response surface
methodology (RSM) dengan desain eksperimen CCD. Berbagai penelitian yang
telah dilakukan untuk mengoptimasi berbagai kondisi ekstraksi menggunakan
metode ini seperti optimasi waktu ekstraksi, rasio solven dan temperatur ekstraksi
pada Forsythia suspensa dengan respon yaitu kadar forsythoside yang dilakukan
oleh Li dkk (2011), optimasi konsentrasi etanol, waktu ekstraksi dan temperatur
ekstraksi pada daun henna dengan parameter fenolik total (Ho dkk, 2010),
optimasi waktu ekstraksi, konsentrasi solven serta temperatur ekstraksi pada
kacang kedelai dengan kadar polifenolik sebagai respon (Banerjee, 2011),
optimasi konstrasi etanol, rasio solid-soven dan kekuatan microwave pada kulit
Physalis alkekengi dengan kadar flavonoid sebagai respon (Pin-yi, 2014) dan
banyak penelitian lainnya. Metode RSM merupakan metode optimasi yang
menggunakan analisis statistik multivariat dengan menggabungkan teknik
matematika dan statistika yang cukup relevan dalam menentukan titik optimal
eksperimen serta mengidentifikasi interaksi antar variabel faktor karena setiap
level variabel terletak pada daerah sekitar optimum serta dengan kondisi
eksperimen yang terdiri dari kombinasi faktorial, star point dan titik pusat (center
point) disamping lebih efisien karena jumlah eksperimen yang dilakukan lebih
sedikit (Montgomery, 2009; Bazerra dkk, 2008; Anuar dkk, 2013). Optimasi
Randu
WEDITA DESTRIANI
faktor ekstraksi tersebut dapat menggunakan metode RSM dan desain CCD
dengan bantuan software Design Expert 10.02 seperti yang telah dilakukan
peneliti-peneliti sebelumnya.
G. Hipotesis
1. Campuran pelarut etanol-air dapat melarutkan senyawa flavonoid pada daun
randu dengan lebih baik daripada pelarut tunggalnya.
2. Semakin kecil ukuran serbuk maka semakin banyak senyawa flavonoid pada
daun randu yang terekstraksi.
3. Semakin tinggi rasio antara serbuk dan solven maka semakin banyak senyawa
flavonoid yang terekstraksi.

S1 2016 331128 Introduction PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

S1 2016 331128 Introduction PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Optimasi Faktor Ekstraksi (Komposisi Solven, Ukuran Serbuk dan Rasio Serbuk-Solven) pada Daun

Penggunaan bahan alam dibidang kesehatan maupun bidang lain seperti

Tanaman randu merupakan salah satu tanaman yang banyak terdapat di

Indonesia dan biasanya dimanfaatkan sebagai bahan pengisi kasur dibeberapa

daerah (Pratiwi, 2011). Tanaman ini mengandung berbagai macam komponen

asam siklopropenoat (Lestari, 2008), alkaloid, flavonoid, fenolik, saponin, tanin,

khasiatnya dalam bidang pengobatan. Senyawa flavonoid yang tersebar berbagai

tanaman diketahui menunjukkan aktivitas antioksidan, antibakteri, antimutagenik,

antiinflamasi, antialergi, antiviral, antineopastik, antitrombotik serta vasodilator

Tanaman ini memiliki banyak potensi yang dapat dimanfaatkan diberbagai

bidang terutama dibidang kesehatan seperti sebagai antidiabetes, antifungi,

hepatoprotektor, antihipoglikemia, antidiare, antihelmintik dan manfaat lainnya

Menurut WHO negara-negara di Afrika, Asia dan Amerika Latin menggunakan

maupun industri besar untuk mengembangkan dan menghasilkan produk berbasis

bahan alam. Namun, komponen-kompenen kimia yang terkandung didalam suatu

tumbuhan sangat beragam dan kompleks sehingga menyulitkan dalam proses

isolasi atau ekstraksinya. Variasi metode-metode ekstraksi belum bisa menjamin

kuantitas senyawa yang terekstraksi tinggi. Sedangkan untuk pengembangan serta

pemanfaatan ekstrak tumbuhan misal untuk formulasi sediaan produk herbal

pula sehingga dalam mengembangkan obat herbal, kebanyakan industri

mengusahakan untuk mendapatkan rendemen serta kandungan senyawa aktifnya

yang berpengaruh pada efektivitas ekstraksi seperti konsentrasi solven, rasio

solid-solven dan ukuran serbuk simplisia. Ukuran serbuk simplisia akan

berpengaruh pada efektivitas esktraksi, umumnya jumlah senyawa yang terekstrak

akan meningkat dengan meningkatnya jumlah pelarut. Faktor lain seperti

komposisi penyari juga berpengaruh pada efektivitas ekstrakasi karena dapat

mempengaruhi tingkat polaritas cairan penyari sehingga akan mempengaruhi jenis

senyawa aktif yang dilarutkan juga.

mengatasi keterbatasan dari metode diatas yaitu dengan menggunakan tehnik

statistika multivariat. Salah satu metode yang banyak diterapkan untuk

mengoptimasi proses ekstraksi yaitu dengan Respon Surface Methodology

digunakan untuk membuat model dan menganalisis suatu respon yang

dipengaruhi oleh beberapa variabel bebas atau faktor, dengan tujuan

mengoptimalkan respon tersebut (Montgomery, 2009). Ide dasar metode ini

adalah memanfaatkan desain eksperimen berbantuan statistika untuk mencari nilai

desain eksperimen yang cocok serta dapat mengintegrasikan semua variabel

liquid-solid dan kecepatan mikrowave pada tanaman Physalis alkekengi var.

dkk (2010), optimasi waktu ekstraksi, konsentrasi solven serta temperatur

Banerjee dkk (2011) dan lain sebagainya.

1. Berapakah komposisi solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

2. Berapakah ukuran serbuk simplisia yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

3. Berapakah rasio-serbuk solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

1. Menentukan komposisi solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

flavonoid pada daun randu menggunakan Response Surface Methodology?

2. Menentukan ukuran serbuk yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

flavonoid pada daun randu menggunakan Response Surface Methodology?

3. Menentukan rasioserbuk-solven yang tepat untuk mengekstraksi senyawa

flavonoid pada daun randu menggunakan Response Surface Methodology?

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai

solven) yang optimal untuk mengekstrakasi senyawa golongan flavonoid pada

kering yang cukup kuat (Heyne, 1987).

Klasifikasi tanaman (Ceiba pentandra Garertn.) Sebagai berikut:

Sub devisi : Angiospermae

Jenis : Ceiba pentandra (L.) Gaertn.

Sinonim :Eriodenderon afractuuosum Dc.

(BPOM RI, 2009)

Jawa tengah : Randu

(BPOM RI, 2009)

Merupakan tanaman habitus berupa pohon, tinggi ± 30 m, batang berkayu

Tanaman Hutan ,2001).

Berbagai komponen yang terkandung didalam tanaman randu yaitu seperti

asam-asam lemak, protein, karbohidrat, mineral, serat, serta komponen kimia

seperti alkaloid, fenolik, flavonoid, saponin, tanin, karotenoid, tripsin inhibitor,