BAB I
PENDAHULUA
Tinjaun Pustaka
Hard Skill
Soft Skill
Sejarah Pendidikan Kedokteran
Dokter Bintang Lima
Metodologi
3.1 RANCANGAN PENELITIAN
3.1.1 Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental rancang acak lengkap dengan desain
posttest only control group. Penelitian ini merupakan langkah awal dalam penelitian sebelum
hasil penelitian diterapkan pada manusia (trial clinic). Penelitian memberikan perlakuan
terhadap subyek hewan coba di laboratorium.
Wa
ktu
dan
Lok
asi Penelitian
Tabel 3.1 Jadwal Penelitian
Penyusunan Pen
proposal √ eliti
Seminar an
proposal √ ini
Pembuatan dila
ekstrak √ ksa
Persiapan nak
hewan uji √ an
Uji terhadap √ di
tikus Lab
Pengolahan orat
Data √ oriu
Penyusunan m
laporan √ Bio
kim
ia dan Teknologi Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura dari bulan September-Desember
2014.
Pengukuran aktivitas enzim GPx menggunakan kit RANDOX. Bahan yang digunakan
berasal dari supernatan homogenat jaringan hepar yang merupakan bahan biologis tersimpan
sejak agustus 2014. Reagen yang digunakan untuk mengukur aktivitas enzim GPx pada
kelompok perlakuan adalah reagen RANSEL dan jaringan yang telah ditambahkan reagen dibaca
pada panjang gelombang 340 nm. Reagen ini memiliki prinsip dalam keadaan GR dan NADPH
yang tersedia, GSSH diubah dengan cepat menjadi GSH dengan bersamaan oksidasi dari
NADPH menjadi NADP+.
Komposisi reagen dalam kit ini terdiri atas reagen (GSH, GR, NADPH), buffer (buffer
phospat, EDTA), cumene hydroperoxide, diluting agent. Prinsip reaksi sebagai berikut :
GPx
2GSH + ROOH → ROH + GSSG + H2O
GR
GSSG + NADPH + H+ → NADP+ + 2GSH
Prosedur pemeriksaan aktivitas spesifik GPx adalah dengan menambahkan 0,05 ml
sampel kedalam kuvet pertama dan 0,02 ml sampel kedalam kuvet 2. Akuades ditambahkan 0,05
ml dalam kuvet blanko pertama dan 0,02 ml dalam kuvet blanko kedua Kemudian tambahkan
reagen 2,50 ml pada semua kuvet pertama dan 1,0 ml pada semua kuvet kedua. Tambahkan 0,1
ml cumene dalam semua kuvet pertama dan 0,04 ml dalam semua kuvet kedua. Larutan tersebut
dicampur dengan baik kemudian diinkubasi pada suhu 37oC. Setelah dicampur dengan baik dan
segera dibaca baca pada serapan 340 nm, serapan dicatat setelah 1 dan 2 menit. Pengukuran
aktivitas spesifik GPx didapatkan dengan membagi aktivitas GPx dengan kadar protein total dan
dinyatakan dalam U/mg protein.
3.8 ALUR PENELITIAN
Sampel (S)n = 14
Randomisasi
Adaptasi selama 7 hari
Subjek