PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA

METODA POCT DAN METODA GOD-PAP DENGAN

METODA HEKSOKINASE

TUGAS AKHIR

Oleh :
Deka Wulansari Herviyani
NIM : 09160538N

PROGRAM STUDI D-IV ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2017
PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA
METODA POCT DAN METODA GOD-PAP DENGAN
METODA HEKSOKINASE

TUGAS AKHIR

Untuk memenuhi sebagian persyaratan sebagai

Sarjana Sains Terapan

Oleh :
Deka Wulansari Herviyani
NIM : 09160538N

PROGRAM STUDI D-IV ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS SETIA BUDI
SURAKARTA
2017

i
ii
iii
 MOTTO

“Siapa Yang Bersungguh-Sungguh Pasti Akan Berhasil”

“Pantang Menyerah Adalah Kunci Meraih Sukses”

“Selalu Berdoa dan Berusaha Untuk Mencapai Tujuan Yang

Ingin Diraih”

iv
 PERSEMBAHAN

Skripsi ini penulis persembahkan untuk :

1. Allah SWT sebagai penuntun langkah hidupku

menuju jannahnya.

2. Suami dan anakku yang selalu memberi doa,

dukungan, motivasi untuk keberhasilan setiap

langkahku

3. Bapak, Ibu dan Adik-adikku yang selalu

memberikan doa dan semangat

4. Teman-teman seangkatan D-IV Analis Kesehatan

5. Teman-teman laboratorium RSJD Surakarta yang

selalu memberikan semangat dan motivasi

6. Serta semua pihak yang telah membantu dalam

penyusunan Tugas Akhir ini.

v
vi
 KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena atas berkat,

rahmat dan hidayahNya penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan judul

“ PERBANDINGAN KADAR GLUKOSA DARAH ANTARA METODA POCT

DAN METODA GOD-PAP DENGAN METODA HEKSOKINASE”.

Tugas akhir ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam

menyelesaikan studi di jurusan D-IV Analis Kesehatan, Fakultas Ilmu Kesehatan.

Penulisan tugas akhir ini disusun berdasarkan studi pustaka dan penelitian

di laboratorium untuk memenuhi syarat guna memperoleh gelar Sarjana Sains

Terapan (S.Si.T) pada program Diploma IV Analis Kesehatan Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.

Terlaksananya penyusunan skripsi ini adalah berkat bimbingan, petunjuk,

bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, maka dalam kesempatan ini penulis

mengucapkan terimakasih kepada yang terhormat :

1. Dr. Ir. Djoni Tarigan, MBA., selaku Rektor Universitas Setia Budi Surakarta.

2. Prof. Dr. Marsetyawan HNE Soesatyo, M.Sc., Ph.D., selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.

3. Tri Mulyowati, SKM., M.Sc., selaku Ketua Program Studi D-IV Analis

Kesehatan Universitas Setia Budi Surakarta.

4. dr. Amiroh Kurniati, Sp.PK., M.Kes., selaku pembimbing utama yang telah

memberikan bimbingin, arahan dan motivasi yang sangat membantu

kelancaran dalam pembuatan dan penyusunan tugas akhir

vii
5. dr. Ratna Herawati selaku pembimbing pendamping yang telah banyak

memberikan bimbingan, masukan dan saran dalam penyusunan tugas akhir

6. Suami dan anakku yang selalu memberikan doa, semangat, dorongan,

motivasi dalam setiap langkah dan usahaku dalam menyelesaikan penyusunan

tugas akhir

7. Bapak, Ibu dan adik-adik yang selalu memberikan doa, semangat, dan

motivasi

8. Teman-teman seangkatan D-IV analis Kesehatan Universitas Setia Budi

Surakarta yang banyak memberikan bantuan dan masukan dalam penyusunan

tugas akhir

9. Teman-Teman Laboratorium RSJD Surakarta yang selalu memberikan

semangat, dorongan dan motivasi.

Penulis menyadari bahwa dalam penulisan Tugas Akhir ini masih jauh dari

sempurna karena keterbatasan pengetahuan dan pengalaman penulis. Maka untuk

itu dengan segala kerendahan hati penulis meminta maaf atas segala kesalahan

baik dalam penulisan maupun penyajian. Saran dan kritik yang bersifat

membangun sangat penulis harapkan. Akhir kata penulis berharap semoga karya

tulis ini dapat bermanfaat bagi penulis, pembaca, dan masyarakat pada umumnya.

Surakarta, Agustus 2017

Penulis

viii
 DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN SAMPUL DEPAN

HALAMAN JUDUL .................................................................... i

HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ...................................................... iii

HALAMAN MOTTO ................................................................... iv

HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................... v

HALAMAN PERNYATAAN ...................................................... vi

KATA PENGANTAR .................................................................. vii

DAFTAR ISI ................................................................................. ix

DAFTAR GAMBAR .................................................................... xii

DAFTAR TABEL ......................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................. xiv

DAFTAR SINGKATAN .............................................................. xv

INTISARI...................................................................................... xvii

ABSTRACT .................................................................................... xviii

BAB 1 PENDAHULUAN................................................. 1

A. Latar Belakang ......................................................... 1

B. Rumusan Masalah .................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ..................................................... 4
D. Manfaat Penelitian ................................................... 4
1. Bagi Institusi ....................................................... 4
2. Bagi Peneliti ........................................................ 4
3. Bagi Masyarakat ................................................. 4

ix
BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................ 5

A. Karbohidrat .............................................................. 5
1. Pengertian Karbohidrat ....................................... 5
2. Fungsi Karbohidrat ............................................. 6
3. Metabolisme Karbohidrat ................................... 6
4. Penggolongan Karbohidrat ................................. 7
B. Glukosa Darah ......................................................... 8
1. Definisi Glukosa Darah ....................................... 8
2. Metabolisme Glukosa ......................................... 9
3. Sumber Glukosa .................................................. 9
4. Pengaturan Metabolisme Glukosa
Oleh Hormon ...................................................... 10
5. Macam-macam Pemeriksaan Glukosa ................ 11
6. Nilai Rujukan Glukosa ........................................ 13
7. Sampel Pemeriksaan Glukosa ............................. 13
8. Faktor-faktor yang Dapat
Mempengaruhi Hasil Glukosa Darah .................. 16
9. Metode Pemeriksaan Glukosa ............................. 16
10. Kelebihan dan Kekurangan
Masing-masing Metoda...................................... 19
C. Kerangka Teori ........................................................ 21
D. Hipotesis .................................................................. 22

BAB III METODE PENELITIAN........................................ 23

A. Tempat dan Waktu Penelitian .................................. 23

1. Tempat Penelitian ............................................... 23
2. Waktu Penelitian ................................................. 23
B. Populasi dan Sampel ................................................ 23
1. Populasi ............................................................... 23
2. Sampel ................................................................. 24
C. Jenis Penelitian ........................................................ 26
D. Variabel Penelitian................................................... 26
1. Variabel Bebas .................................................... 26
2. Variabel Terikat .................................................. 26
3. Definisi Operasional ........................................... 26
E. Bahan dan Alat ........................................................ 28
1. Bahan Penelitian ................................................. 28
2. Alat Penelitian ..................................................... 28
3. Reagen Penelitian ................................................ 28
4. Cara Kerja ........................................................... 30
F. Analisis Data ............................................................ 37
G. Kerangka Alur Penelitian ........................................ 38

x
BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .......... 39

A. Karakteristik Hasil Penelitian ................................ 39

B. Pembahasan ........................................................... 42

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN.................................... 45

A. KESIMPULAN ..................................................... 45

B. SARAN ................................................................. 45

DAFTAR PUSTAKA ................................................................... 46

LAMPIRAN .................................................................................. 48

xi
 DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Kerangka Teori...................................................................... 22

Gambar 2. Kerangka Alur Penelitian ...................................................... 40

xii
 DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai

patokan penyaring dan diagnosa DM (mg/dl) ................ 13

Tabel 2. Data karakteristik dasar subyek penelitian ..................... 39

Tabel 3. Hasil Transformasi Data ................................................. 40

Tabel 4. Uji beda 3 kelompok metoda .......................................... 41

Tabel 5. Uji beda 2 kelompok metoda .......................................... 42

xiii
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Data Subyek............................................................. 48

Lampiran 2. Data Penelitian Kadar Glukosa ............................... 50

Lampiran 3. Data Uji Statistik ..................................................... 52

Lampiran 4. Formulir Persetujuan Mengikuti Penelitian............. 56

Lampiran 5. Surat Ijin Penelitian ................................................. 57

Lampiran 6. Surat Pernyataan Selesai Penelitian......................... 58

Lampiran 7. Hasil QC Bulan Maret ............................................. 59

Lampiran 8. Hasil QC Bulan April .............................................. 60

Lampiran 9. Hasil QC Bulan April .............................................. 61

Lampiran 10. Foto Alat dan Bahan Penelitian .............................. 62

xiv
 DAFTAR SINGKATAN

ADP Adenosine Diphosphat

ATP Adenosin Trifosfat
C Karbon
(CH2O)2 Karbohidrat
(CH2O)n Rumus Karbohidrat (sakarida)
CO2 Karbondioksida
Depkes Departemen Kesehatan
dl desi liter
dll dan lain-lain
DNA Dioksiribonukleat
FAD Flavin Adenine Dinucleotide
G-6-P Glukosa-6-Fosfat
G-6-PDH Glukosa-6-Fosfat dehydrogenase
GDH Glukose Dehidrogenase
GDH FAD Glukose Dehydrogenase Flavin Adenine Dinucleotide
GDH Mut. Glukose Dehydogenase varian Mutant
GDH NAD Glukose Dehydrogenase Nicotinamide Adenine Dinucleotide
GDH PQQ Glukose Dehydrogenase Pyrroloquinoline Quinone
GOD Glukosa Oksidase
GOD-PAP Glukosa Oksidase-Phenol Amino Peroksidase
gr gram
H Hidrogen
H20 Hydrate
H2O2 Peroksida
IFCC International Federation Clinical Chemistry
Kemenkes Kementerian Kesehatan
mg miligram
Mut Mutan
NAD Nicotinamide Adenine Dinucleotide
NADPH Nicotinamid Adenine Dinucleotide Phosphate Hidrogen

xv
NADP Nicotinamid Adenine Dinucleotide Phosphate
O Oksigen
O2 Oksigen
-OH gugus hidroksil
PAP Phenol aminophenazone
PC Personil computer
PERKENI Perkumpulan Endokrinologi Indonesia
PNPME-K Pemantapan Mutu Eksternal
POCT Point of Care Testing
POD Peroxidase
PQQ Pyrroloquino Line Quinone
QC Quality Control
RNA Ribonukleat
rpm Rotasi per menit
RSDM Rumah Sakit dr. Moewardi
RSJD Rumah Sakit Jiwa Daerah Surakarta
RTT Round trip time
SD Standar deviasi
SPSS Statistical Package for the Social Science
TAT Turn Arround Time
TTGO Tes Toleransi Glukosa Oral
WHO World Health Organization

xvi
 INTISARI

Deka Wulansari Herviyani. 2017. Perbandingan Kadar Glukosa Darah antara Metoda
POCT dan Metoda GOD-PAP dengan Metoda Heksokinase. Program Studi D-IV Analis
Kesehatan, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Setia Budi.

Glukosa yang merupakan hasil metabolisme karbohidrat di dalam darah adalah

sumber energi bagi sebagian besar sel tubuh. Untuk mengetahui kadar glukosa dalam
darah perlu dilakukan pemeriksaan glukosa darah. Pemeriksaan kadar glukosa dapat
dilakukan dengan berbagai metoda enzimatik antara lain metoda POCT dan GOD-PAP
yang menggunakan enzim glukosa oksidase, dan metoda heksokinase yang menggunakan
enzim heksokinase. Dari masing-masing metoda tersebut terdapat kelebihan dan
kekurangan, dimana metoda heksokinase merupakan metoda standar dalam pemeriksaan
glukosa. Tujuan dari penelitian ini adalah membandingkan hasil pemeriksaan kadar
glukosa darah antara metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase.

Penelitian ini dilakukan terhadap 66 subyek penelitian pada pasien rawat inap
Rumah Sakit Jiwa Daerah Surakarta. Penelitian ini menggunakan desain penelitian Cross
sectional. Data dalam penelitian ini diolah dengan menggunakan Uji One Sample
Kolmogorov Smirnov, Uji Wilcoxon dan Uji Friedman.

Terdapat perbedaan yang bermakna antara kadar glukosa menggunakan metoda

POCT, GOD-PAP dan Heksokinase dengan nilai signifikansi sebesar 0.000. Hal ini dapat
disebabkan karena adanya berbagai faktor yang mempengaruhinya. Pemeriksaan kadar
glukosa darah menggunakan metoda POCT dan GOD-PAP diperoleh nilai signifikansi
0.00, pada metoda POCT dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.076, sedangkan
pada metoda GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.00.

Kata kunci: Glukosa Darah, GOD-PAP, Heksokinase, POCT.

xvii
 ABSTRACT

Deka Wulansari Herviyani. 2017. The Comparison of Blood Sugar Levels Examined
using POCT, GOD-PAP, and Hexokinase Method. D-IV Health Analyst Study Program,
Health Science Faculty, Setia Budi University.

Glucose resulted from carbodydrate metabolism in the blood is the source of

energy for most of cells in the body. To measure blood glucose level, examination has to
be carried out. The examination of blood glucose level can be done with various
enzymatic methods, such as POCT and GOD-PAP methods using glucose oxidase
enzyme and hexokinase method using hexokinase enzyme. Each method has their
strengths and drawbacks and hexokinase method is standard method for examining
glucose level. This study aims at comparing the results of blood glucose level
examination using POCT, GOD-PAP, and hexokinase method.

This study was carried out to 66 research subjects of inpatients of Regional

Mental Health Hospital (RSJD) Surakarta. This study applied cross-sectional design.
Data were processed using Kolmogorov Smirnov test, Wilcoxon test and Friedman test.

There are significant differences of blood glucose levels examined using POCT,
GOD-PAP and Hexokinase methods with significance value 0.000. This is so due to
various contributing factors. The significance level of blood glucose level measured with
POCT and GOD-PAP methods is 0.00, that measure with POCT and Hexokinase method
is 0.076, and that measured with GOD-PAP and Hexokinase method is 0.00.

Keywords: Blood glucose, GOD-PAP, Hexokinase, POCT.

xviii
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Glukosa merupakan bahan bakar untuk kebanyakan fungsi sel dan

jaringan, proses penyediaan glukosa menjadi prioritas utama dari

homeostasis. Sel-sel memperoleh sebagian kecil kebutuhan energi oleh

pembakaran asam lemak, tetapi energi ini kurang efisien dibandingkan

dengan pembakaran glukosa, proses ini menyusun asam-asam lemak yang

dapat merugikan tubuh bila sampai terjadi penimbunan. Berbagai macam

hormon ikut serta dalam regulasi kadar glukosa dalam darah. Dengan

mengukur kadar glukosa dalam darah dapat diketahui apakah regulasi

berhasil atau tidak. Jika kadar itu jelas menyimpang dari nilai normal, baik

terlalu tinggi atau terlalu rendah, hal itu menandakan bahwa homeostasis

terganggu dan hasil pengukuran kadar glukosa seharusnya menjadi dorongan

untuk memeriksa etiologi penyimpangan ini (Widmann, 1999).

Terdapat dua metoda utama untuk mengukur glukosa. Metoda yang

pertama adalah metoda kimiawi yang memanfaatkan sifat mereduksi dari

glukosa, dengan bahan indikator yang akan berubah warna apabila tereduksi.

Metoda ini tidak spesifik karena senyawa-senyawa lain yang ada dalam darah

juga dapat mereduksi misalnya urea yang dapat meningkat cukup bermakna

pada uremia (Sacher, 2004). Sebagian besar pengukuran dengan metoda

kimia yang didasarkan atas kemampuan reduksi sudah jarang dipakai karena

spesifitas pemeriksaan kurang tinggi (Depkes RI, 2005).

1
 2

Metoda yang kedua adalah enzimatik yang umumnya menggunakan

enzim glukosa oksidase (GOD) atau heksokinase, yang bekerja pada glukosa

tetapi tidak pada gula lain dan tidak pada bahan pereduksi lain (Sacher,

2004). Pemeriksaan kadar glukosa sekarang sudah diisyaratkan dengan cara

enzimatik, tidak lagi dengan prinsip reduksi untuk menghindari ikut

terukurnya zat-zat lain yang akan memberikan hasil tinggi palsu. Cara

enzimatik dapat dilakukan dengan cara otomatis seperti dengan GOD-PAP,

heksokinase dan cara Strip (Suryaatmadja, 2003).

Metoda GOD-PAP adalah metoda enzimatik yang paling banyak

digunakan di laboratorium yang ada di Indonesia. Metoda heksokinase

merupakan metoda enzimatik untuk mengukur kadar glukosa darah yang

dianjurkan oleh WHO dan IFCC (Depkes RI, 2005). Metoda Heksokinase

merupakan metoda referen karena enzim yang digunakan spesifik untuk

glukosa (PERKENI, 2011).

Alat pengukur glukosa darah strip biasanya menggunakan metoda dari

alat POCT (point of care testing), pertama kali diperkenalkan di rumah sakit

pada tahun 1986. Penggunaan POCT glukosa mempunyai keunggulan yaitu

mempercepat TAT (turn arround time) dan memperbaiki pelayanan pasien.

Salah satu metoda dari alat POCT adalah GOD (Aulia, 2016). Diluar

laboratorium klinik, saat ini tersedia beberapa merk monitor glukosa pribadi

yang dapat digunakan pasien diabetes untuk mengukur kadar gula darah

mereka dalam setetes darah dari tusukan diujung jari. Alat pengukur gula

darah ini sangat bermanfaat untuk memberikan umpan-balik yang cepat dan
 3

terus menerus bagi pasien sehingga mereka dapat melakukan penyesuaian

dalam pengobatan maupun terapi (Sacher, 2004).

Penelitian yang dilakukan oleh Hilda et al. (2011) tentang

pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda

GOD-PAP didapatkan hasil adanya perbedaan kadar glukosa darah yang

diperiksa menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP. Menurut

penelitian yang dilakukan oleh Indah (2016) pemeriksaan kadar glukosa

darah menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase didapatkan

hasil tidak adanya perbedaan kadar glukosa darah yang diperiksa

menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase. Menurut

Baharuddin et al. (2012) pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan

metoda POCT dan metoda heksokinase didapatkan hasil yaitu tidak ada

perbedaan glukosa darah yang diperiksa menggunakan metoda POCT dan

metoda heksokinase. Berdasarkan penelitian di atas peneliti ingin

membandingkan kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan

metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase yang merupakan metoda

standar untuk pemeriksaan glukosa darah.

B. RUMUSAN MASALAH

Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan masalah sebagai

berikut : “Bagaimanakah perbandingan hasil pemeriksaan glukosa darah

antara metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase ?”

 4

C. TUJUAN PENELITIAN

1. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda

POCT dengan metoda heksokinase.

2. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda

GOD-PAP dengan metoda heksokinase.

3. Membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah antara metoda

POCT dan metoda GOD-PAP dengan metode heksokinase.

D. MANFAAT PENELITIAN

1. Bagi Institusi

Penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai referensi dan

dapat menerapkan ilmu di bidang kimia klinik pada institusi kesehatan.

2. Bagi Peneliti

Peneliti dapat membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa

darah menggunakan tiga metoda pemeriksaan yang berbeda, dimana

metoda heksokinase merupakan metoda standar dari pemeriksaan glukosa.

3. Bagi Masyarakat

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada

masyarakat dalam hal pemeriksaan glukosa darah, sehingga masyarakat

dapat mengetahui metoda apa yang paling baik digunakan untuk

pemeriksaan glukosa darah.

 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Karbohidrat
1. Pengertian Karbohidrat

Karbohidrat merupakan molekul organik terdiri dari karbon (C) dan air

atau hydrate (H2O). Secara sederhana karbohidrat didefinisikan sebagai

polimer sakarida (polimer gula) yang paling banyak ditemukan di alam dalam

bahan nabati berupa gula sederhana. Karbohidrat adalah senyawa C yang

mengandung sejumlah besar gugus hidroksil (-OH). Karbohidrat paling

sederhana bisa berupa aldehid (disebut polihidroksi aldehid atau aldosa) atau

berupa keton (disebut polihidroksi keton atau ketosa). Berdasarkan pengertian

di atas berarti diketahui bahwa karbohidrat terdiri atas atom C, H, dan O.

Rumus umum dari karbohidrat adalah (CH2O)2 disebut juga sakarida (Harti,

2014).

Karbohidrat adalah suatu senyawa yang terdiri dari atom-atom C, H,

dan oksigen. Karbohidrat memiliki rumus (CH2O)n. Sebagai contoh molekul

glukosa mempunyai rumus kimia C6H12O6. Karbohidrat yang berasal dari

makanan, dalam tubuh mengalami perubahan atau metabolisme. Hasil

metabolisme karbohidrat antara lain glukosa yang terdapat dalam darah,

sedangkan glikogen adalah karbohidrat yang disintesis dalam hati dan

digunakan oleh sel-sel pada jaringan otot sebagai sumber energi (Poedjiadi,

2007).

5
 6

2. Fungsi karbohidrat

Fungsi dari karbohidrat antara lain adalah sebagai energi tersimpan

dalam bentuk tepung (fotosintesis dalam tumbuhan) atau glikogen (hewan dan

manusia), sebagai sumber energi melalui jalur dan siklus metabolisme, supply

karbon untuk sintesis komponen lain, membentuk komponen struktural dalam

sel dan jaringan, komunikasi interseluler, kerangka struktural RNA dan DNA

yaitu gula ribose dan deoksiribosa (Harti, 2014).

3. Metabolisme Karbohidrat

Karbohidrat sebagian besar adalah polimer heksosa, diantaranya yang

paling penting adalah glukosa, galaktosa, dan fruktosa. Kebanyakan

monosakarida yang terdapat di dalam tubuh adalah isomer D. Produk utama

pencernaan karbohidrat dan gula adalah glukosa. Begitu masuk ke dalam sel,

glukosa secara normal difosforilasi untuk membentuk glukosa-6-fosfat. Enzim

yang mengkatalisis reaksi ini adalah heksokinase. Di dalam hati, disamping

enzim tersebut terdapat enzim yang disebut glukokinase. Glukokinase

mempunyai spesifitas lebih tinggi untuk glukosa, tidak seperti heksokinase

kadarnya meningkat oleh insulin dan menurun pada keadaan kelaparan dan

diabetes. Glukosa-6-fosfat kemudian dipolimerisasi menjadi glikogen atau

dikatabolisme, sebagai bentuk glukosa yang dapat disimpan, terdapat disemua

jaringan tubuh, tetapi terutama dalam hati dan otot rangka (Ganong, 2002).

Metabolisme oksidatif glukosa menghasilkan sebagian besar energi

yang digunakan dalam tubuh. Glukosa dalam makanan sebagian besar terdapat

dalam bentuk disakarida. Dalam mukosa usus halus, disakarida diuraikan

 7

menjadi konstituen-konstituen monosakarida oleh enzim yang disebut

disakaridae. Enzim-enzim ini (laktose, sukrose, dan maltose) bersifat spesifik

untuk satu jenis disakarida. Gula diserap oleh usus dalam bentuk monosakarida

(Sacher, 2004).

4. Penggolongan Karbohidrat

Berdasarkan kelompoknya karbohidrat dibedakan menjadi empat

golongan yaitu : monosakarida, disakarida, oligosakarida, dan polisakarida.

a. Monosakarida

Monosakarida adalah karbohidrat paling sederhana karena

molekulnya hanya terdiri atas beberapa atom C, tidak dapat diuraikan

dengan cara hidrolisis menjadi karbohidrat lain. Monosakarida dibedakan

menjadi aldose dan ketosa. Contoh dari aldose yaitu glukosa dan galaktosa.

Contoh dari ketosa yaitu fruktosa terdiri atas 3 - 6 atom C dan zat ini tidak

lagi dihidrolisis oleh larutan asam dalam air menjadi karbohidrat yang lebih

sederhana. Monosakarida yang terpenting adalah glukosa, galaktosa, dan

fruktosa (Harti, 2014).

b. Disakarida

Disakarida adalah produk kondensasi dua unit monosakarida,

contohnya laktosa, maltosa,dan sukrosa (Murray, 2014).

c. Oligosakarida

Oligosakarida merupakan polimer dengan derajat polimerisasi 2

sampai 10 dan biasanya bersifat larut dalam air dan dapat diperoleh dari

hidrolisis polisakarida dengan asam atau enzim tertentu. Oligosakarida yang

 8

terdiri dari 2 molekul disebut disakarida bila 3 molekul disebut triosa.

Oligosakarida yang paling sederhana adalah disakarida (Harti, 2014).

d. Polisakarida

Polisakarida adalah produk kondensasi lebih dari sepuluh unit

monosakarida, contohnya pati dan dekstrin yang mungkin merupakan

polimer linier atau bercabang. Polisakarida kadang-kadang diklasifikasikan

sebagai heksosan atau pentosan, tergantung pada identitas monosakarida

pembentuknya (masing-masing heksosa dan pentosa) (Murray, 2014).

B. Glukosa Darah

1. Definisi Glukosa Darah

Glukosa merupakan gula sederhana berisi enam atom C terdapat dalam

makanan sebagai sakarosa, laktosa, maltosa. Glukosa menjadi penyusun utama

dari polisakarida majemuk yang dikenal dengan nama zat pati atau amilum

dalam makanan. Enzim-enzim melepaskan glukosa dari senyawa-senyawa

majemuk dan glukosa itu dapat langsung dimetabolisme atau dapat juga diubah

bentuknya untuk disimpan (Widmann, 1999).

Glukosa terbentuk dari karbohidrat dalam makanan dan disimpan

sebagai glikogen di hati dan otot rangka. Insulin dan glukagon, dua hormon

yang berasal dari pankreas, dapat mempengaruhi kadar glukosa darah. Insulin

diperlukan untuk permeabilitas membran sel terhadap glukosa dan untuk

transportasi glukosa ke dalam sel. Glukagon menstimulasi glikogenesis

(pengubahan glikogen cadangan menjadi glukosa) dalam darah ( Kee, 2007).

 9

Glukosa digunakan oleh sebagian besar sel tubuh sebagai sumber

energi. Beberapa sel (misalnya sel otak) hanya dapat menggunakan glukosa

sebagai sumber energi. Sedangkan sel lemak dan otot membutuhkan suatu

pembawa yang difasilitasi oleh insulin untuk mentranspor glukosa melewati

membran sel (Price, 2005).

2. Metabolisme Glukosa

Metabolisme glukosa menghasilkan asam piruvat, asam laktat, dan

asetil koenzim A (asetil-KoA) sebagai senyawa-senyawa antara. Oksidasi

lengkap glukosa menghasilkan karbohidrat, air, dan energi yang disimpan

sebagai senyawa fosfat berenergi tinggi (Sacher, 2004).

Glukosa tak bisa dimetabolisme lebih lanjut sampai glukosa

dikonversikan menjadi glukosa 6 fosfat oleh reaksi adenosin trifosfat. Reaksi

ini dikatalisis oleh enzim heksokinase yang tak spesifik dan juga oleh

glukokinase yang spesifik di dalam hati. Reaksi ini dalam arah sebaliknya,

hidrolisis sederhana glukosa 6 fosfat ke glukosa, dikatalisis oleh glukosa 6

fosfatase. Ketika glukosa menjadi glukosa 6 fosfat, dapat dipolimerisasi

menjadi glikogen untuk disimpan dan tidak dapat berdifusi keluar dari sel ini

(Baron, 1990).

Apabila tidak segera dimetabolisme untuk menghasilkan energi,

glukosa dapat disimpan di hati atau otot sebagai glikogen, suatu polimer yang

terdiri dari banyak residu glukosa dalam bentuk yang dapat dibebaskan dan

dimetabolisme sebagai glukosa (Sacher, 2004).

 10

3. Sumber Glukosa

a. Makanan

Sebagian besar karbohidrat dalam makanan membentuk glukosa,

galaktosa, atau fruktosa pada pencernaan, diangkut ke hati melalui vena

porta. Galaktosa dan fruktosa mudah dikonversi menjadi glukosa dalam

darah (Ganong, 2002).

b. Senyawa Glukogenik yang Mengalami Glukogenesis

Senyawa ini masuk ke dalam dua kategori senyawa yang

memerlukan konversi bersih yang langsung menjadi glukosa tanpa

pengolahan (recycling) yang bermakna seperti asam amino dan propionat,

dan senyawa yang merupakan produk metabolisme parsial glukosa dalam

jaringan tertentu dan diangkut ke hati dan ginjal, dimana ini disintesis

kembali menjadi glukosa. Ikatan yang terbentuk dengan oksidasi glukosa

dalam otot rangka dan oleh eritrosit, diangkut ke hati dan ginjal dimana ia

membentuk kembali glukosa (Ganong, 2002).

c. Glikogenolisis

Glikogenolisis adalah reaksi pemecahan glikogen menjadi glukosa

(Harti, 2014). Konsentrasi glukosa dalam darah merupakan faktor penting

yang mengendalikan kecepatan pengambilan glukosa dalam hati maupun

jaringan ekstrahepatik 5% dari glukosa yang dikonsumsi langsung

dikonversi menjadi glikogen di dalam hati, dan 30-40% dikonversi menjadi

lemak. Sisanya dimetabolisme dalam otot dan jaringan-jaringan lain. Pada

saat tubuh mendadak membutuhkan glukosa misalnya pada saat puasa,

 11

glikogen hati dipecah dan hati menambahkan glukosa ke dalam aliran darah

(Ganong, 2002).

4. Pengaturan metabolisme glukosa oleh hormon

a. Insulin

Insulin, suatu polipeptida yang disekresi oleh sel-sel pulau

Langerhans, disintesis sebagai proinsulin, mengandung dua rantai insulin

yang dihubungkan oleh peptida C, serta merupakan hormon utama yang

mengatur metabolisme karbohidrat serta interaksinya dengan metabolisme

protein dan lipid. Apapun mekanisme tepatnya yang mungkin bertanggung

jawab, efek total insulin adalah mempermudah metabolisme glukosa

selanjutnya untuk penyimpanan dan untuk oksidase (Baron, 1990).

b. Glukokortikoid

Glukokortikoid disekresikan oleh korteks adrenal dan sangat penting

dalam metabolisme karbohidrat. Dalam melaksanakan semua kegiatan,

glukokortikoid bekerja secara antagonistik terhadap insulin (Murray, 2014).

c. Tiroksin

Tiroksin meningkatkan pembebasan glukosa dari glikogen, juga

meningkatkan penyerapan glukosa dari usus (Sacher, 2004).

d. Epinefrin

Epinefrin disekresikan oleh medula adrenal sebagai akibat dari

rangsangan yang menimbulkan stres (ketakutan, kegembiraan, pendarahan,

hipoksia, hipoglikemia, dll) dan menimbulkan glikogenesis didalam hepar

serta otot karena stimulasi enzim fosforilase (Murray, 2014).

 12

5. Macam-macam pemeriksaan glukosa

a. Glukosa darah sewaktu

Pemeriksaan gula darah yang dilakukan setiap waktu sepanjang hari

tanpa memperhatikan makanan terakhir yang dimakan dan kondisi tubuh

orang tersebut (Depkes RI, 2005).

b. Glukosa darah puasa

Kadar glukosa darah puasa memberikan petunjuk terbaik mengenai

homeostasis glukosa keseluruhan, dan sebagian besar pengukuran rutin

harus dilakukan pada sampel puasa selama 10-12 jam (Sacher, 2004).

c. Glukosa darah postprandial

Pemeriksaan gula darah 2 jam postprandial biasanya dilakukan

untuk mengukur respon klien terhadap asupan tinggi karbohidrat 2 jam

setelah makan (sarapan pagi atau makan siang). Pemeriksaan ini dilakukan

untuk diagnosis diabetes, normalnya dianjurkan jika kadar gula puasa

normal tinggi atau sedikit meningkat. Glukosa serum > 140 mg/dl atau

kadar glukosa darah lebih besar dari 120 mg/dl merupakan kadar yang

abnormal, bila demikian, diperlukan pemeriksaan lebih lanjut (Kee, 2007).

d. Tes Toleransi Glukosa Oral

Pemeriksaan tradisional yang digunakan untuk menilai buangan

glukosa adalah tes toleransi glukosa oral (TTGO). Pada TTGO kadar

glukosa serum diukur sebelum dan sesudah mengkonsumsi 75 gram

glukosa. Kadar glukosa diukur setiap ½ jam selama 2 jam setelah pemberian

glukosa. Pada keadaan sehat, kadar glukosa puasa individu yang dirawat
 13

jalan dengan toleransi glukosa normal adalah 70 hingga 110 mg/dl. Setelah

pemberian glukosa, kadar glukosa akan meningkat pada awalnya namun

akan kembali ke keadaan semula dalam waktu 2 jam.

Kadar glukosa serum yang kurang dari 200 mg/dl setelah ½, 1, dan 1

½ jam pemberian glukosa dan kurang dari 140 mg/dl setelah 2 jam

ditetapkan sebagai nilai TTGO normal (National Diabetes Data Group

eriteria) (Price, 2005).

6. Nilai rujukan Glukosa

Menurut PERKENI (2015) nilai rujukan glukosa darah sewaktu dan

puasa dapat dilihat pada tabel 1.

Tabel 1. Kadar glukosa darah sewaktu dan puasa sebagai patokan penyaring dan
diagnosa DM (mg/dl)

Bukan DM Belum Pasti DM DM

Kadar Plasma Vena < 100 100-199 ≥ 200

Glukosa
Darah Darah Kapiler < 90 90-199 ≥ 200
Sewaktu
(mg/dl)

Kadar Plasma Vena < 100 100-125 ≥ 126

Glukosa
Darah Darah Kapiler < 90 90-99 ≥ 100
Puasa
(mg/dl)

Sumber: (PERKENI, 2015).

7. Sampel Pemeriksaan Glukosa

Dahulu pengukuran glukosa darah lebih sering dilakukan terhadap

darah lengkap, tetapi sekarang sebagian besar laboratorium melakukan

pengukuran kadar glukosa dalam serum atau plasma (Sacher, 2004).

 14

Serum merupakan hasil pemisahan antara komponen cair dan seluler

dari darah (whole blood). Proses pemisahan komponen darah untuk

mendapatkan serum dapat dilakukan dengan menggunakan dua cara. Cara

pertama dengan mendiamkan darah selama 1-2 jam sehingga terjadi

pemisahan dengan sendirinya (pemisahan spontan), namun dengan

membiarkan darah terlalu lama memungkinkan terjadinya metabolisme

glukosa dalam sampel oleh sel-sel darah. Kadar glukosa dalam tabung akan

menurun setelah 10 menit pengambilan darah, karena proses glikolisis

dengan kecepatan kurang lebih 7 mg/dl per jam (Sadikin, 2002).

Cara kedua yaitu dengan mendiamkan darah hingga membeku

kemudian dilanjutkan dengan sentrifugasi hingga terjadi pemisahan secara

total kemudian dipisahkan dari sel-sel darah untuk mencegah terjadinya

proses metabolisme sel hidup yang dapat mengakibatkan penurunan kadar

glukosa darah. Serum harus segera dipisahkan dari bahan bekuan darah

dalam sampel paling lambat 2 jam setelah pengambilan darah untuk

menghindari perubahan-perubahan dari zat-zat yang terlarut di dalamnya

oleh pengaruh glikolisis darah (Hardjoeno, 2003).

Plasma darah merupakan bagian cair darah yang sebagian besar

terdiri atas 90% air, elektrolit, dan protein darah. Plasma darah juga

mengangkut zat-zat terlarut seperti zat-zat makanan, oksigen dalam sirkulasi

darah. Berfungsi mengangkut protein yang diperlukan untuk pembentukan

jaringan, menyebarkan cairan nutrisi ke seluruh tubuh serta mengatur

keseimbangan asam basa (Sadikin, 2002).

 15

Plasma memisahkan sel darah dalam bentuk endapan sel utuh, yang

dapat disuspensi kembali dan digunakan untuk berbagai tujuan. Sel-sel

tersebut dapat dipelajari secara mikroskopis, dapat digunakan untuk analisis

biokimia sel yang rinci, untuk tujuan penyelidikan imunologi sel darah dan

sebagainya. Dalam skala besar sel-sel darah yang diendapkan dalam

pembuatan plasma dapat dipakai kembali untuk tujuan transfusi dan sel-sel

darah yang dipisahkan dari plasma tersebut dinamakan packed cell.

Sebaliknya sel-sel yang terjebak dalam anyaman serat-serat fibrin ketika

pembuatan serum dimanpatkan dan diperas oleh retraksi serat-serat fibrin

ketika serat-serat ini membentuk ikatan lintas serat dalam rangka menyusun

anyaman fibrin. Jelas bahwa sel-sel darah yang menggumpal dalam

pembentukan serum tidak dapat digunakan lagi untuk berbagai tujuan

pemeriksaa (Sadikin, 2002).

Pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan sampel darah

kapiler biasanya diambil dari ujung jari atau anak daun telinga (Depkes RI,

1995).

Pengumpulan darah dalam tabung bekuan (bertutup merah) untuk

analisis kimiawi serum memungkinkan terjadinya metabolisme glukosa

dalam sampel oleh sel-sel darah sampai terjadi pemisahan melalui

pemusingan. Pada suhu lemari pendingin, glukosa tetap stabil selama

beberapa jam di dalam serum. Pada suhu kamar, diperkirakan terjadi

penurunan 7 mg/dl. Penurunan ini tidak bermakna untuk laboratorium

rumah sakit yang melakukan pemrosesan sampel darah segera setelah

 16

diterima. Namun, apabila sampel darah dikirim ke laboratorium rujukan

yang terletak jauh, dapat terjadi penurunan glukosa yang substansial akibat

glikolisis oleh sel-sel darah. Masalah ini dapat diatasi dengan menggunakan

tabung yang ditambah dengan antikoagulan natrium fluorida (bertutup abu-

abu) yang menghambat glikolisis sehingga kadar glukosa dapat

dipertahankan bahkan dalam suhu kamar (Sacher, 2004).

8. Faktor-faktor yang Dapat Mempengaruhi Hasil Glukosa Darah

a. Adanya bilirubin atau galaktosa dalam darah dapat menyebabkan kadar

glukosa lebih rendah.

b. Merokok dapat meningkatkan kadar glukosa darah

c. Obat kortison, tiazin dan diuretik dapat menyebabkan peningkatan kadar

glukosa darah

d. Stres emosional, demam, infeksi, trauma, dan obesitas dapat

meningkatkan kadar glukosa darah

e. Aktivitas berlebihan dapat menurunkan kadar gula darah (Kee, 2007).

9. Metoda Pemeriksaan Glukosa

a. Metoda Kimia

Metoda kimia yang masih digunakan adalah metoda toluidin.

Sebagian besar pengukuran dengan metoda kimia didasarkan atas

kemampuan reduksi sudah jarang dipakai karena spesifitas pemeriksaan

kurang tinggi, memerlukan langkah pemeriksaan yang panjang dengan

pemanasan memungkinkan terjadinya kesalahan besar bila dibandingkan

dengan metoda enzimatik (Depkes RI, 2005).

 17

b. Metoda Enzimatik

1) Metoda GOD-PAP

Prinsip: Glukosa dioksidasi secara enzimatik menggunakan

enzim GOD, membentuk asam glukonik dan H2O2 kemudian

bereaksi dengan fenol dan 4-aminoantipirin dengan enzim

peroksidase (POD) sebagai katalisator membentuk quinomine.

Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan konsentrasi

glukosa dalam specimen dan diukur secara fotometri pada panjang

gelombang 546 nm

Glukosa + O2 + H2O GOD gluconic acid + H2O2

2H2O2 + 4-aminophenazone + phenol POD quinomine + 4H2O

(Kemenkes RI, 2010).

2) Metoda Heksokinase

Metoda heksokinase merupakan metode pengukuran kadar

glukosa darah yang dianjurkan oleh WHO dan IFCC (International

Federation Clinical Chemistry). Baru sekitar 10% laboratorium yang

ikut dalam Pemantapan Mutu Eksternal (PNPME-K) menggunakan

metoda ini untuk pemeriksaan glukosa darah (Depkes RI, 2005).

Prinsip : Enzimatik

Glukosa (sampel) + ATP (RI) HLK(R2) G-6-P + ADP

Heksokinase mengkatalisis reaksi phosphorilasi dari glukosa

dalam sampel membentuk glukosa-6-phosphat dengan bantuan

ATP.
 18

G-6-P + NADP G6PHD Glukonat-6-P + NADPH + H

Glukosa-6-phosphat dehydrogenase mengoksidasi G-6-p

dengan adanya NADP (nicotinamid adenine dinucleotide phosphate)

membentuk glukonat-6-phosphat. Tidak ada karbohidrat lain yang

teroksidasi. Kecepatan pembentukan NADPH (nicotinamid adenine

dinucleotide phosphate hidrogen) selama reaksi berbanding lurus

dengan konsentrasi glukosa dan dapat diukur secara fotometrik

(Permenkes RI, 2013).

3) Metoda POCT

Merupakan alat pemeriksaan laboratorium sederhana yang

dirancang hanya untuk penggunaan sampel darah kapiler dan whole

blood. Strip katalisator spesifik untuk pengukuran glukosa dalam

darah kapiler (Suryaatmadja, 2003).

Prinsip pemeriksaan metoda ini adalah strip tes diletakkan pada alat,

ketika darah diteteskan pada zona reaksi tes strip. Katalisator

glukosa akan mereduksi glukosa dalam darah. Intensitas dari

elektron yang terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasi

glukosa dalam darah (Suryaatmadja, 2003).

Gagasan yang melatarbelakangi adanya POCT adalah untuk

mempermudah dan mempercepat pemeriksaan laboratorium pasien

sehingga hasil yang didapat akan memberikan pengambilan

keputusan klinis secara cepat oleh dokter.

 19

Ada beberapa metoda yang digunakan untuk POCT, yaitu:

1) Glukosa Oxidase

2) Glukose dehidrogenase (GDH), empat jenis GDH adalah

a. Glukose Dehydrogenase nicotinamide adenine dinucleotide

(GDH NAD)

b. Glukose dehydrogenase flavin adenine dinucleotide (GDH

FAD)

c. Glukose dehydrogenase pyrroloquinoline quinone (GDH

PQQ)

d. Glucose dehydrogenase varian mutant (Mut Q-GDH/GDH

Mut.)

10. Kelebihan dan Kekurangan Masing-masing Metoda

a. Metoda POCT

1) Kelebihan

- Hasil pemeriksaan dapat segera diketahui

- Hanya butuh sampel sedikit

- Tidak membutuhkan reagen khusus

- Praktis dan dapat digunakan jadi dapat dilakukan oleh siapa saja

tanpa butuh keahlian khusus

2) Kekurangan

- Akurasi belum diketahui

- Memiliki keterbatasan yang dipengaruhi oleh kadar hematokrit,

interfensi zat lain (vitamin C, bilirubin, dan hemoglobin)

 20

- Strip bukan untuk menegakkan diagnosis klinis melainkan hanya

untuk pemantauan kadar glukosa (Suryaatmadja, 2003).

b. Metoda GOD-PAP

1) Kelebihan

- Akurasi tinggi

- Presisi tinggi

- Spesifik

- Relatif bebas dari gangguan (kadar hematokrit, vitamin C, lipid,

volume sampel dan suhu)

2) Kekurangan

- Memiliki ketergantungan pada reagen

- Memerlukan sampel darah yang banyak

- Pemeliharaan alat dan reagen memerlukan tempat yang khusus

- Membutuhkan biaya yang cukup mahal (Suryaatmadja, 2003).

c. Metoda Heksokinase

1) Kelebihan

- Akurasi sangat baik

- Presisi sangat baik

- Merupakan metoda referensi karena enzim yang digunakan

spesifik untuk glukosa (PERKENI, 2011).

2) Kekurangan

- Biaya relatif mahal

 21

C. Kerangka Teori

Faktor yang Pemeriksaan

mempengaruhi kadar Glukosa Darah
glukosa darah:

1. Bilirubin dalam
darah
2. Galaktosa dalam
darah
3. Merokok
4. Obat kortison, tiosin,
deuretik
5. Stres emosional,
demam, infeksi,
trauma, dan obesitas
6. Aktivitas berlebihan Metoda pemeriksaan
7.

GOD-PAP Heksokinase POCT

- Sampel Serum/ - Sampel - Sampel darah

plasma Serum/Plasma kapiler/whole
- Metode enzimatik - Metode enzimatik blood
- Enzim Glukosa - Enzim heksokinase - Metode enzimatik
oksidase - Enzim glukosa
oksidase
Gambar 1. Kerangka Teori

Ket.

Lingkup penelitian

Bukan lingkup penelitian

 22

D. Hipotesis

1. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan glukosa

darah menggunakan metoda POCT dan heksokinase

2. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan kadar

glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan metoda heksokinase

3. Tidak ada perbedaan yang signifikan antara hasil pemeriksaan kadar

glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP dengan

metoda heksokinase
 BAB III
METODE PENELITIAN

A. Tempat dan Waktu Penelitian

1. Tempat penelitian

a) Pengambilan sampel darah vena dilakukan di RSJD Surakarta dan

penelitian kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda

GOD-PAP dilakukan di Laboratorium RSJD Surakarta.

b) Penelitian kadar glukosa darah menggunakan metoda heksokinase

dilakukan di Laboratorium RSDM Surakarta.

2. Waktu penelitian

Penelitian dilaksanakan pada bulan April 2017

B. Populasi dan Sampel

1. Populasi

Populasi adalah semua objek yang menjadi sasaran penelitian.

Populasi dibagi menjadi dua yaitu populasi target yang ditentukan oleh

karakteristik klinis dan demografis, dan populasi terjangkau yang merupakan

bagian populasi target yang dibatasi tempat dan waktu.

Populasi dalam penelitian ini adalah pasien rawat inap RSJD

Surakarta. Populasi target dalam penelitian ini adalah semua pasien rawat

inap yang melakukan pemeriksaan laboratorium, sedangkan populasi

terjangkau dalam penelitian ini adalah semua pasien rawat inap yang

23
 24

melakukan pemeriksaan laboratorium glukosa darah. Subjek penelitian ini

adalah kadar glukosa darah pasien rawat inap RSJD Surakarta. Populasi

diambil dari pasien bangsal Puntadewa, bangsal Sumbadra dan bangsal

Wisanggeni RSJD Surakarta.

2. Sampel

Sampel adalah sebagian dari populasi yang ciri-cirinya diteliti atau

diukur, dipilih dengan menggunakan prosedur tertentu dan keberadaanya

diharapkan mampu mewakili populasi yang sebenarnya (Sabri et al.,2014)

Sampel dalam penelitian ini adalah pasien rawat inap RSJD Surakarta

yang melakukan pemeriksaan glukosa darah.

Pengambilan sampel dengan teknik simple random sampling yaitu

teknik pengambilan secara acak sederhana tanpa memperhatikan strata yang

ada dalam populasi sehingga setiap anggota populasi memiliki kesempatan

yang sama untuk dipilih sebagai sampel (Prasetyo, 2013).

Perhitungan jumlah sampel ditetapkan dengan rumus :

λ2. N. P. Q
S=
d2. (N-1) + λ2. N. P. Q

Keterangan :

S = Ukuran sampel

N = Ukuran populasi

λ2 = harga table chi kuadrat dengan dK = 1, taraf kesalahan 5% = 3,481

P = Proporsi dalam populasi

 25

Q = 0,5

d2 = Ketelitian (error) 0,05

Berdasarkan rumus di atas, maka besarnya sampel minimal yang

digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:

3,481 x 75 x 0,5 x 0,5

S=
0,052 x (60-1) + 3,481 x 0,5 x 0,5

52,215
S=
1,01775

= 61,85 62 (batas minimal)

Jumlah sampel yang diambil adalah 66, sehingga sudah memenuhi batas

minimal sampel yang akan digunakan dalam penelitian ini dengan

mempertimbangkan faktor-faktor berikut:

a. Kriteria Inklusi :

Sampel pemeriksaan laboratorium glukosa darah

b. Kriteria Eksklusi :

1) Sampel plasma ikterik

2) Sampel plasma hemolisis

3) Sampel plasma lipemik

4) Hasil melebihi atau kurang dari pembacaan alat

 26

C. Jenis Penelitian

Penelitian ini menggunakan desain penelitian cross sectional yang

membandingkan hasil pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda

POCT dan metoda GOD-PAP dengan metoda heksokinase.

D. Variabel Penelitian

Variabel didefinisikan sebagai karakteristik subjek penelitian yang

berubah dari satu subjek ke subjek lain. Adapun variabel penelitian ini adalah:

1. Variabel Bebas (Independent)

Variabel bebas adalah variabel yang bila berubah akan mengakibatkan

perubahan variabel lain (Prasetyo, 2013).

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah metoda POCT, metoda GOD-

PAP, dan metoda heksokinase.

2. Variabel Terikat (dependent)

Variabel terikat adalah variabel yang diakibatkan atau dipengaruhi

oleh variabel bebas (Prasetyo, 2013).

Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar glukosa darah.

3. Definisi Operasional

Kadar glukosa darah adalah istilah yang mengacu kepada tingkat

glukosa didalam darah. Konsentrasi gula darah diatur dengan ketat didalam

tubuh. Glukosa yang dialirkan melalui darah sumber utama energi untuk sel-

sel tubuh.
 27

Kadar glukosa darah diperiksa dengan menggunakan metoda POCT,

metoda GOD-PAP dan metoda Heksokinase.

a. Metoda POCT

Metoda POCT adalah metoda pemeriksaan kadar glukosa darah

menggunakan alat digital atau POCT dengan reagen kering (Strip). Kadar

glukosa darah diperiksa menggunakan metoda GOD dengan

menggunakan alat GES GD-013. Sampel yang digunakan adalah whole

blood, diukur dalam skala rasio dengan satuan miligram per desi liter

(mg/dL) atau mili mol per liter (mmol/L). Rentang pengukuran alat antara

20 s/d 600 mg/dl, jika hasil pemeriksaan glukosa melebihi 600 mg/dL

maka pada layar akan muncul “HI” jika hasil pemeriksaan glukosa kurang

dari 20 mg/dl pada layar akan muncul “Lo”.

b. Metoda GOD-PAP

Metoda GOD-PAP adalah metode pengukuran kadar glukosa darah

menggunakan alat StarDust MC15. Sampel yang digunakan adalah

plasma NaF, diukur dalam skala rasio dengan satuan mg/dl atau mmol/L.

Rentang pengukuran alat antara 1 s/d 400 mg/dL.

c. Metoda Heksokinase

Metoda heksokinase adalah metode pemeriksaan glukosa

menggunakan alat automatic analyzer ILab 650 clinical chemistry system.

Sampel yang digunakan adalah plasma NaF, diukur dalam skala rasio

dengan mg/dL atau mmol/L. Rentang pengukuran alat antara 2 s/d 600

mg/dL.
 28

E. Bahan dan Alat

1. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan untuk pemeriksaan kadar glukosa darah

adalah plasma dan whole blood

2. Alat Penelitian

- Vacutainer

- Spuit 5cc

- Lancet

- Alkohol swab

- Plester

- Kapas

- Torniquet

- Tabung NaF

- Clinipet 1000 μl

- Clinipet 10 μl

- Yellow Tip

- Blue Tip

- GES GD-013

- Stardust MC15

- ILab 650 clinical chemistry system

 29

3. Reagen Glukosa

a. Metoda POCT

Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda POCT

adalah strip glukosa

b. Metoda GOD-PAP

Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda GOD-

PAP adalah Reagen kit Glukose GOD FS*

Komponen dan konsentrasi :

Phosphate buffer pH 7.5 250 mmol/L, Phenol 5 mmol/L, 4-

Aminoantipyrine 0,5 mmol/L, GOD ≥ 10 kU/L, dan Peroxidase (POD) ≥ 1

kU/L

Standard : 100 mg/dL (5.55 mmol/L)

c. Metoda Heksokinase

Reagen yang digunakan untuk pemeriksaan glukosa dengan metoda

heksokinase adalah reagen kit GLUH 3

1) R1 : ATP 4 mmol/L, NAD 3,21 mmol/L, sodium azide 0,05% dan

buffer

2) R2 : ATP 4 mmol/L, NAD 3,21 mmol/L, hexokinase (mokrobial

source) > 6,25 U/ml, G6PD (mokrobial source ) > 11,25 U/ml, sodium

azide 0,05% dan buffer

Persiapan reagen : reagen dan larutan standar siap pakai tanpa dilakukan

pengenceran
 30

Stabilitas reagen : reagen stabil sampai masa kadaluarsa bila disimpan

pada suhu 2-8°C. Setelah dibuka untuk analisis reagen stabil 60 hari di

dalam lemari es.

4. Cara Kerja

a. Prosedur Pengambilan Darah Vena

Langkah - langkah pengambilan darah vena :

1) Menyiapkan tabung dan peralatan yang sesuai untuk prosedur flebotomi

2) Mencuci tangan dan memakai sarung tangan

3) Membersihkan tempat tusukan dengan alkohol 70% dan biarkan sampai

kering.

4) Jika memakai vena fossa cubiti, ikatan pembendung dipasang pada

lengan atas dan pasien diminta mengepal dan membuka tangannya

berkali-kali agar vena jelas terlihat.

5) Regangkanlah kulit di atas vena itu dengan jari-jari tangan kiri supaya

posisi vena stabil.

6) Menusuk kulit dengan jarum dan spuit dengan tangan kanan sampai

ujung jarum masuk ke dalam lumen vena.

7) Melepaskan atau merenggangkan pembendungan dan perlahan-lahan

menarik penghisap spuit sampai jumlah darah yang dikehendaki

didapat.

8) Melepas pembendungan jika masih terpasang.

9) Meletakkan kapas di atas jarum dan mencabut spuit dan jarum itu.
 31

10) Meminta pasien supaya menekan vena bekas tusukan selama beberapa

menit dengan kapas kering.

11) Darah dialirkan ke dalam wadah atau tabung yang tersedia melalui

dinding tabung (Depkes RI, 1995).

b. Prosedur Pembuatan Plasma

1) Tabung NaF dibolak-balikkan dengan segera secara pelan-pelan.

2) Pemisahan plasma dapat langsung dilakukan dengan menggunakan

sentrifus kecepatan 3000 rpm selama 5-15 menit.

3) Plasma yang memenuhi syarat harus tidak kelihatan merah dan keruh

(lipemik) (Permenkes, 2013).

c. Prosedur penyimpanan Spesimen

Sampel yang sudah dipisahkan menjadi plasma sebagian diperiksa

kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan sisanya

disimpan untuk diperiksa menggunakan metoda heksokinase.

Sampel yang disimpan dibekukan dalam frezeer pada suhu -20°C

(jangan sampai terjadi beku ulang). Apabila sampel sudah terkumpul

segera dikirim ke Laboratorium Patologi Klinik RSDM untuk diperiksa

kadar glukosa darah menggunakan metoda heksokinase.

d. Prosedur Pemeriksaan

1. Metoda POCT

a) Prinsip pemeriksaan metoda ini adalah strip tes diletakkan pada alat,

darah diteteskan pada zona reaksi tes strip. Katalisator glukosa akan

mereduksi glukosa dalam darah. Intensitas dari elektron yang

 32

terbentuk dalam alat strip setara dengan konsentrasi glukosa dalam

darah

b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa darah metoda POCT

1. Memasang strip tes ke dalam slot strip yang ada di alat.

2. Darah diteteskan langsung dari spuit ke strip tes.

3. Kemudian tetesan darah dibiarkan mengalir pada tes strip sampai

berbunyi beep dan darah akan mengisi sampai batas indikator.

4. Hasil tes akan muncul di layar dalam waktu 7 detik.

5. Mencatat hasil di buku catatan sementara.

6. Mencabut tes strip dari alat.

2. Metoda GOD-PAP

a) Prinsip: Glukosa dioksidasi secara enzimatik menggunakan enzim

glukosa oksidase (GOD), membentuk asam glukonik dan H2O2

kemudian bereaksi dengan fenol dan 4-aminoantipirin dengan

enzim peroksidase (POD) sebagai katalisator membentuk

quinomine. Intensitas warna yang terbentuk sebanding dengan

konsentrasi glukosa dalam specimen dan diukur secara fotometri

pada panjang gelombang 340 nm

Glukosa + O2 + H2O GOD Gluconic acid + H2O2

2H2O2 + 4-aminophenazane + phenol POD quinomine +

4H2O
 33

b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa darah metoda GOD-PAP

Pengukuran kadar glukosa darah menggunakan alat Stardust

MC15.

Panjang Gelombang : 500 nm, Hg 546 nm

Temperatur : 20-25°C / 37°C

Parameter pemipetan : Reagen 1000 μL

Sampel 10 μL

Standart 10 μL

c) Prosedur pengoperasian alat

1. Hidupkan alat sampai muncul menu utama.

2. Dari menu utama tekan no.1 (Methods)

3. Masukkan nomor program dari parameter yang akan diukur

[CODE (...)]

4. Masukkan jumlah sampel yang akan diukur [N. SAMPLE (...)]

5. Masukkan posisi kuvet pertama yang akan diukur [INITIAL

POS (...)]

6. Masukkan nomor sampel / pasien [IDENT (...)]

7. Pipetkan reagensia posisi kuvet pertama yang akan diukur

8. Letakkan mikrokuvet ke inkubator 10 menit, untuk mencapai

temperatur 37°C

9. Pipetkan serum kontrol dan sampel ke dalam multikuvet

10. Letakkan multikuvet di mixer dan tekan MIX

11. Letakkan multikuvet di tempat pembacaan dan tekan READ

 34

3. Metoda Heksokinase

a) Prinsip : Enzimatik

Glukosa (sampel) + ATP (RI) HLK(R2) G-6-P + ADP

Heksokinase mengkatalisis reaksi phosphorilasi dari glukosa dalam

sampel membentuk glukosa-6-phosphat dengan bantuan ATP.

G-6-P + NADP G6PHD Glukonat-6-P + NADPH + H + glukosa-

6-phosphat dehydrogenase mengoksidasi glukosa-6-phosphat

dengan adanya NADP membentuk glukonat-6-phosphat.

Tidak ada karbohidrat lain yang teroksidasi. Kecepatan

pembentukan NADPH selama reaksi berbanding lurus dengan

konsentrasi glukosa dan dapat diukur secara fotometrik

b) Prosedur pemeriksaan kadar glukosa metode heksokinase

Pengukuran kadar glukosa menggunakan alat otomatis ILab 650.

Panjang Gelombang : 340/410 nm

Tipe Reaksi : endpoint

Unit : mg/dl

Parameter pemipetan : R1 80 μL

R2 18 μL

Sampel 3,4 μL

c) Prosedur pengoperasian alat :

1. Hidupkan personal computer (PC) computer dan monitor

tunggu sampai masuk ke software ILab 650 Clinical Chemistry

System
 35

2. Ketik user name : ILab, password : ILab

3. Pastikan sistem date sudah sesuai – New Start/Re-Start-Ok

4. Pada analyser panel set alat dari operate/Standby putar ke

operator (on). Maka indikator power menyala dan start, ready

akan kedip-kedip.

5. Pada saat indikator start dan ready sudah tidak menyala tunggu

sampai initilize aktif, klik initialize.

6. Lakukan Daily Maintenance :

- Cek secara visual larutan :

Cuvette wash, cuvette conditioner, 0,9% normal saline jika

diganti klik prime-prime 2-execute.

- Cek volume pada posisi 53 berisi Probe Wash 1 dan 56 berisi

DI (Dieionized) Water Round Trip Time (RTT 1 & RTT 2)

- Cek level Lamp Coolant.

- Cek Probe dan mixing rad bersihkan jika kotor dengan tissue

bebas serat.

- Cek WUD dan DWUD, probe wash station, jika kotor

bersihkan dengan tissue bebas serat.

- Cek posisi tutup reagen tertutup dengan rapat.

7. Menu Panel: Maint-System Monitor cek apakah kondisi alat

OK.

8. Menu panel: Reagent-Reagent Inventory cek jumlah test pada

RTT 1 & RTT 2 ganti jika sudah habis-Barcode Scan.

 36

9. Lakukan Start-Up Wash (Wash 3).

Menu Panel: Wash-Wash 3-Execute

Wash 3 CTT RTT 1 RTT 2

Posisi 51 56 56

Material DI Water DI Water DI Water

10. Masukkan data pasien dan menjalankan pemeriksaan.

11. Menu Panel: Request-Order Entry-Routine-New

12. Pada Routine :

- Posis.No : masukkan posisi sampel Tray dan Cup...

- Samp.No : masukkan nomor sampel

- Pastikan : System Dilution Mode, Container, Samp.Type,

Dil.Faktor, Comment(Nama), Sex. Blood Collection Date.

13. Order Test :

- Test table : pilih test yang akan dijalankan-Enter-New-

Exit
 37

F. Analisis Data

Data yang telah terkumpul dianalisis secara statistik menggunakan

Statistical Package for the Social Science (SPSS) untuk mendapatkan

rerata, standar deviasi (SD), nilai maksimum dan minimum. Kemudian

dilakukan uji normalitas untuk mengetahui distribusi data tersebut normal

atau tidak dengan menggunakan uji statistik Kolmogorov-Smirnov Test.

Jika data tidak terdistribusi normal maka dilakukan transformasi data. Dari

hasil transformasi data jika terdistribusi normal selanjutnya dilakukan uji

parametrik untuk menguji tiga sampel berpasangan menggunakan Uji

Repeated Anova, sedangkan jika data tidak terdistribusi normal

menggunakan Uji Friedman. Untuk menguji dua sampel berpasangan jika

data terdistribusi normal menggunakan uji Paired Sample T-Test untuk

membandingkan antara kadar glukosa darah menggunakan metoda POCT

dan metoda GOD-PAP dengan metoda Heksokinase. Jika data tidak

terdistribusi normal dilakukan uji nonparametrik Wilcoxon.

 38

G. Kerangka alur penelitian

Populasi

Sampel

Darah vena dengan Whole blood

NaF

Sentrifus 3000 rpm

15 menit

Plasma

Metoda GOD-PAP Metoda Metoda POCT

Heksokinase

Hasil

Analisis

Gambar 2. Kerangka Alur Penelitian

 BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Karakteristik Hasil Penelitian

Penelitian kadar glukosa darah dilakukan di Laboratorium RSJD

Surakarta dan Laboratorium Patologi Klinik Rumah Sakit Umum Daerah Dr.

Moewardi, pada pasien rawat inap RSJD Surakarta. Subyek penelitian

berjumlah 66 yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi. Karakteristik

subyek penelitian dapat dilihat pada tabel dibawah ini:

Tabel 2. Data karakteristik dasar subyek penelitian

Variabel SB Rerata Min Max

Jumlah 66
Hasil Pemeriksaan
Glukosa
- Metoda Heksokinase 45.12 129.5 70 280
- Metoda GOD-PAP 42.03 114 65 260
- Metoda POCT 41.24 126 78 278

Ket: SB = Simpang Baku, Min = Nilai Terendah, Maks = Nilai Tertinggi

Karakteristik subyek penelitian didapatkan bahwa dari 66 subyek, kadar

glukosa darah menggunakan metoda Heksokinase memiliki rerata 129.5

mg/dL, simpang baku 45.12 mg/dL, nilai terendah 70 mg/dL, nilai tertinggi

280 mg/dL. Kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP diperoleh

rerata 114 mg/dL, simpang baku 42.03 mg/dL, nilai terendah 65 mg/dL, nilai

tertinggi 260 mg/dL. Kadar glukosa darah dengan metoda POCT didapatkan

rerata 126 mg/dL, simpang baku 41.24 mg/dL, dengan nilai terendah 78 mg/dL

dan nilai tertinggi 278 mg/dL.

39
 40

Analisis data meliputi uji normalitas data dengan menggunakan uji

Kolmogorov-Smirnov. Pada penelitian kadar glukosa darah menggunakan

metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi sebesar

0.00 (P<0.05) sehingga data pada penelitian ini tidak terdistribusi normal.

Karena data tidak terditribusi normal selanjutkan dilakukan

transformasi data untuk menormalkan data yang tidak terdistribusi normal.

Tabel 3. Hasil transformasi data

Metoda sig

Heksokinase 0.200
GOD-PAP 0.014
POCT 0.001

Dari transformasi data pada metoda Heksokinase diperoleh nilai

signifikansi 0.200, pada metoda GOD-PAP diperoleh nilai signifikansi 0.014

sedangkan pada metoda POCT diperoleh nilai signifikansi 0.001. Karena

terdapat dua hasil sig yang kurang dari 0.05 maka dapat disimpulkan bahwa

data tidak terdistribusi normal sehingga dilanjutkan dengan uji nonparametrik

Friedman dan Wilcoxon.

Hasil analisis data dengan uji beda Friedman pada perbandingan kadar

glukosa darah menggunakan metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase

didapatkan nilai signifikansi sebesar 0.00 (p<0.05) berarti bahwa kadar glukosa

darah menggunakan metoda POCT, GOD-PAP dan Heksokinase terdapat

perbedaan yang bermakna.

 41

Tabel 4. Uji Beda 3 Kelompok Metoda

Variabel Rerata Sign

Heksokinase 129.5
POCT 126 0,000*
GOD-PAP 114

Ket. p < 0.05 bermakna

Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan

metoda GOD-PAP dan POCT diperoleh nilai signifikansi 0.00 (p<0.05).

Karena nilai signifikansi kurang dari 0.05 berarti terdapat perbedaan yang

bermakna antara kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP dan

POCT.

Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan

metoda GOD-PAP dan Heksokinase diperoleh nilai signifikansi 0.00 (p<0.05).

Karena nilai signifikansi kurang dari 0.05 berarti terdapat perbedaan yang

bermakna antara pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda

GOD-PAP dan Heksokinase.

Hasil uji wilcoxon pada pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan

metoda POCT dan Hekokinase diperoleh nilai signifikansi 0.076 (p>0.05). Hal

ini menunjukkan bahwa nilai signifikansi lebih besar dari 0.05 berarti tidak ada

perbedaan yang bermakna antara pemeriksaan kadar glukosa darah

menggunakan metoda POCT dan Heksokinase.

 42

Tabel 5. Uji beda 2 kelompok metoda

Heksokinase POCT

GOD p = 0.000* p = 0.000*

POCT p = 0.076*

Ket. P < 0.05 bermakna

B. Pembahasan

Berdasarkan hasil uji statistik menunjukkan bahwa penelitian yang

dilakukan terhadap 66 subyek sampel didapatkan perbedaan kadar glukosa

darah yang signifikan antara ketiga metoda pemeriksaan.

Hasil analisis data didapatkan kadar glukosa darah menggunakan

metoda Heksokinase, GOD-PAP dan POCT menunjukkan perbedaan yang

signifikan. Sedangkan pada penelitian yang dilakukan oleh Bahruddin et.al.

tahun 2012 menunjukkan hasil yang berbeda yaitu tidak didapatkan perbedaan

yang signifikan dari hasil kadar glukosa darah menggunakan tiga metoda. Hal

ini dapat disebabkan karena kondisi pada saat pemeriksaan, baik kondisi

laboratorium itu sendiri (suhu, kelembaban), pemantapan mutu internal

(kalibrasi, quality control), maintenance alat laboratorium.

Hasil analisis data didapatkan kadar glukosa darah menggunakan

metoda GOD-PAP dan POCT menunjukkan perbedaan yang signifikan. Hal ini

sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Hilda et.al. tahun 2011 diperoleh

hasil nilai signifikansi sebesar 0.000 ( p<0.05) yang berarti ada perbedaan yang

signifikan antara hasil pemeriksaan glukosa darah dengan metoda GOD-PAP

dan POCT. Alat yang digunakan dalam kedua metoda ini yaitu

spektrofotometer dan glukometer sama-sama menggunakan metoda enzimatik

 43

dalam penggunaannya, akan tetapi masing-masing alat mempunyai perbedaan

bila ditinjau dari prinsip kerja dan sampel pemeriksaan. Pemantapan mutu

untuk alat POCT yaitu kalibrasi dan QC belum dilakukan dan dianalisis karena

masih mengikuti petunjuk QC dari reagen kit.

Hasil analisis data kadar glukosa darah menggunakan metoda

Heksokinase dan GOD-PAP menunjukkan perbedaan yang signifikan hal ini

dapat disebabkan karena pada metoda GOD-PAP enzim glukosa oksidase

dapat bereaksi dengan oksigen dalam darah, sehingga dapat menyebabkan

kesalahan pengukuran kadar glukosa darah/intervensi oksigen pada hasil

pengukuran kadar glukosa. Pada metoda GOD-PAP pemeriksaan telah

dilakukan sesuai dengan standar operasional, akan tetapi kontrol rutin dan

maintenance alat blm dilakukan dengan baik dan maksimal.

Hasil analisis data kadar glukosa darah menggunakan metoda

Heksokinase dan POCT menunjukkan tidak ada perbedaan yang signifikan.

Hal ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Bahruddin et.al. tahun

2012 didapatkan nilai signifikansi p>0.05 yang berarti tidak terdapat perbedaan

yang signifikan antara pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda

Heksokinase dan POCT. Pada metoda POCT terdapat kesesuaian dengan

metoda Heksokinase akan tetapi pemantauan terhadap pemantapan mutu harus

diperbaiki dan dilakukan secara berkala, karena tidak dilakukan dengan bahan

kontrol khusus yang spesifik untuk pemantauan quality control internal alat.

Metoda POCT hanya untuk screening dan pemantauan kadar glukosa darah,

bukan untuk menegakkan diagnosis klinis.

 44

Faktor interferensi yang menyebabkan kesalahan pembacaan di

glukometer digolongkan menjadi dua kelompok, yaitu: gula dan zat yang dapat

mengganggu. Reaksi silang dapat terjadi antara enzim di uji strip dan zat dalam

darah yang mirip dengan glukosa seperti maltosa dan galaktosa. Faktor lain

yang berpengaruh pada pemeriksaan glukosa darah antara lain ialah pengaruh

oksigen, asetaminofen, asam askorbat dan urat, bilirubin, hematokrit serta

tekanan darah rendah (Astuti, 2012)

Dari masing-masing kelompok penelitian dengan alat dan metoda yang

berbeda ternyata didapatkan hasil yang berbeda hal ini dapat disebabkan karena

perbedaan metoda, perbedaan alat, kondisi yang menunjang ( seperti faktor

akomodasi laboratorium, suhu, kelembaban), pengaturan suhu penyimpanan

reagen, kurangnya maintenance alat laboratorium ( Harian, Bulanan,

Mingguan) serta kualitas kontrol yang kurang baik ( kalibrasi, quality control,

standar operasional pengerjaan meliputi manusia, alat)

Keterbatasan dari penelitian ini adalah tidak dilakukan penggolongan

pemeriksaan glukosa darah dari kadar rendah, normal, dan tinggi. Penelitian

dilakukan di dua laboratorium yang berbeda juga merupakan keterbatasan dari

penelitian ini.
 BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN

Berdasarkan hasil penelitian pada uji beda tiga kelompok metoda

didapatkan kesimpulan bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar

glukosa darah menggunakan metoda POCT dan metoda GOD-PAP

dibandingkan dengan metoda Heksokinase sebagai metoda standar. Pada uji

beda dua kelompok metoda yaitu metoda Heksokinase dengan metoda GOD-

PAP terdapat perbedaan yang signifikan. Pada metoda Heksokinase dengan

metoda POCT tidak terdapat perbedaan yang signifikan. Sedangkan pada

metoda GOD-PAP dengan metoda POCT terdapat perbedaan yang signifikan.

B. SARAN

Berdasarkan penelitian ini maka:

- Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mungkin dengan jumlah sampel

yang lebih besar.

- Analisis dapat digolongkan dengan kadar yang bertingkat (kadar glukosa

rendah, normal, tinggi).

- Perlu dilakukan perbaikan kondisi laboratorium secara umum dan

peralatan yang ada didalamnya.

- Pemilihan metoda sebisa mungkin menggunakan metoda rujukan atau

paling tidak dilakukan uji kesesuaian dengan metoda standar/rujukan.

- Perlu dilakukan pemantapan mutu baik internal maupun eksternal.

- Perlu dilakukan maintenance dan kalibrasi alat secara rutin dan berkala.

45
 DAFTAR PUSTAKA

Aulia, D. 2016. POCT (Point Of Care Testing) Pada Pemeriksaan Glukosa dan
Keton Darah. Departemen Patologi Klinik FKUI-RSCM.

Baron, D.N., 1990. Kapita Selekta Patologi Klinik. Jakarta: EGC.

Dahlan, M.S., 2014. Statistik Untuk Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta:

Epidemiologi Indonesia
Departemen Kesehatan RI. 2005. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium Untuk
Penyakit Diabetes Mellitus. Jakarta.
Ganong, W.F. 2010. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Guyton and Hall. 2007. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Jakarta: EGC.
Hardjoeno. 2003. Interpretasi Hasil Tes Laboratorium Diagnostik. Jakarta: EGC.
Kee, J.L. 2007. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium dan Diagnostik. Jakarta:
EGC.
Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 1792 Tahun 2010
Tentang Pedoman Pemeriksaan Kimia Klinik. Jakarta.
Murray, R.K. 2014. Biokimia Harper. Jakarta: EGC.
Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 43 Tahun 2013 Tentang
Cara Penyelenggaran Laboratorium Klinik yang Baik. Jakarta.
Poedjiadi, A. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: Penerbit Universitas
Indonesia.
Prasetyo, Lina Miftahul Jannah. 2013. Metode Penelitian Kuantitatif. Jakarta: PT.
RajaGrafindo Persada.
Price, S.A. 2005. Konsep Klinis Proses-proses Penyakit. Jakarta: EGC.
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan
diabetes Mellitus tipe II di Indonesia. Jakarta: PB PERKENI; 2011.
Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan
diabetes Mellitus tipe II di Indonesia. Jakarta: PB PERKENI; 2015.
Robey, R.B.; Hay, N. 2006.“Mitokondria Hexokinase, mediator novel dengan efek
antiapoptotic faktor pertumbuhan dan Akt” Onkogen. Jakarta: 2006.
Sabri. et al. 2014. Statistik Kesehatan. Jakarta: Rajawali Pers.

46
 47

Sacher, R.A. et al. 2004. Tinjauan Klinis Pemeriksaan Laboratorium. Jakarta:

EGC.
Sadikin, H.M. 2002. Biokimia Darah. Jakarta: Widya Medika.
Harti, A.S. 2014. Biokimia Kesehatan. Yogyakarta: Nuha Medika.
Suryaatmadja, M. 2003. Pendidikan Berkesinambungan Patologi Klinik. Jakarta:
Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.
Widmann, F.K. 1995. Tinjauan Klinis Atas Hasil Pemeriksaan Laboratorium.
Jakarta: ECG.
L
A
M
P
I
R
A
N
47
 48

Lampiran 1. Data Subyek

DATA SUBYEK

NO Kode Sampel Hasil

GOD-PAP POCT Heksokinase
1 1 89 103 107
2 2 84 106 98
3 3 124 131 155
4 4 108 123 134
5 5 110 137 140
6 6 123 136 150
7 7 97 119 127
8 8 141 160 148
9 9 95 124 105
10 10 110 137 136
11 11 235 252 280
12 12 147 135 161
13 13 112 128 148
14 14 119 125 148
15 15 89 104 131
16 16 255 260 278
17 17 116 117 124
18 18 75 88 84
19 19 73 85 96
20 20 115 129 136
21 21 101 117 127
22 22 127 143 154
23 23 116 132 104
24 24 84 93 100
25 25 98 119 95
26 26 96 110 120
27 27 93 93 106
28 28 92 110 120
29 29 65 78 80
30 30 94 108 115
31 31 187 190 219
32 32 145 151 184
33 33 104 115 109
 49

34 34 98 114 108
35 35 87 102 94
36 36 125 134 126
37 37 129 138 152
38 38 96 110 105
39 39 129 130 165
40 40 70 81 70
41 41 114 129 123
42 42 114 123 120
43 43 93 108 103
44 44 101 105 136
45 45 97 117 116
46 46 112 115 136
47 47 257 261 234
48 48 149 155 153
49 49 85 95 80
50 50 80 96 89
51 51 70 94 90
52 52 106 123 136
53 53 79 101 92
54 54 140 155 174
55 55 91 102 114
56 56 153 165 157
57 57 107 117 118
58 58 93 97 72
59 59 94 102 93
60 60 133 137 95
61 61 88 99 96
62 62 93 98 104
63 63 88 90 96
64 64 98 103 117
65 65 78 81 90
66 66 260 278 271
Jumlah 7526 8313 8544
Mean 114 126 129.5
SB 42.03 41.24 45.12
Min 65 78 70
Max 260 278 280
 50

Lampiran 2. Data Penelitian Kadar Glukosa

Data penelitian pemeriksaan kadar glukosa darah menggunakan metoda GOD-PAP,

POCT, dan Heksokinase

No. GOD-PAP POCT Heksokinase Trans_MetGOD Trans_POCT Trans_MetHekso

1 89 103 107 1.95 2.01 2.03
2 84 106 98 1.92 2.03 1.99
3 124 131 155 2.09 2.12 2.19
4 108 123 134 2.03 2.09 2.13
5 110 137 140 2.04 2.14 2.15
6 123 136 150 2.09 2.13 2.18
7 97 119 127 1.99 2.08 2.10
8 141 160 148 2.15 2.20 2.17
9 95 124 105 1.98 2.09 2.02
10 110 137 136 2.04 2.14 2.13
11 235 252 280 2.37 2.40 2.45
12 147 135 161 2.17 2.13 2.21
13 112 128 148 2.05 2.11 2.17
14 119 125 148 2.08 2.10 2.17
15 89 104 131 1.95 2.02 2.12
16 255 260 278 2.41 2.41 2.44
17 116 117 124 2.06 2.07 2.09
18 75 88 84 1.88 1.94 1.92
19 73 85 96 1.86 1.93 1.98
20 115 129 136 2.06 2.11 2.13
21 101 117 127 2.00 2.07 2.10
22 127 143 154 2.10 2.16 2.19
23 116 132 104 2.06 2.12 2.02
24 84 93 100 1.92 1.97 2.00
25 98 119 95 1.99 2.08 1.98
26 96 110 120 1.98 2.04 2.08
27 93 93 106 1.97 1.97 2.03
28 92 110 120 1.96 2.04 2.08
29 65 78 80 1.81 1.89 1.90
30 94 108 115 1.97 2.03 2.06
31 187 190 219 2.27 2.28 2.34
32 145 151 184 2.16 2.18 2.26
33 104 115 109 2.02 2.06 2.04
34 98 114 108 1.99 2.06 2.03
 51

35 87 102 94 1.94 2.01 1.97

36 125 134 126 2.10 2.13 2.10
37 129 138 152 2.11 2.14 2.18
38 96 110 105 1.98 2.04 2.02
39 129 130 165 2.11 2.11 2.22
40 70 81 70 1.85 1.91 1.85
41 114 129 123 2.06 2.11 2.09
42 114 123 120 2.06 2.09 2.08
43 93 108 103 1.97 2.03 2.01
44 101 105 136 2.00 2.02 2.13
45 97 117 116 1.99 2.07 2.06
46 112 115 136 2.05 2.06 2.13
47 257 261 234 2.41 2.42 2.37
48 149 155 153 2.17 2.19 2.18
49 85 95 80 1.93 1.98 1.90
50 80 96 89 1.90 1.98 1.95
51 70 94 90 1.85 1.97 1.95
52 106 123 136 2.03 2.09 2.13
53 79 101 92 1.90 2.00 1.96
54 140 155 174 2.15 2.19 2.24
55 91 102 114 1.96 2.01 2.06
56 153 165 157 2.18 2.22 2.20
57 107 117 118 2.03 2.07 2.07
58 93 97 72 1.97 1.99 1.86
59 94 102 93 1.97 2.01 1.97
60 133 137 95 2.12 2.14 1.98
61 88 99 96 1.94 2.00 1.98
62 93 98 104 1.97 1.99 2.02
63 88 90 96 1.94 1.95 1.98
64 98 103 117 1.99 2.01 2.07
65 78 81 90 1.89 1.91 1.95
66 260 278 271 2.41 2.44 2.43
 52

Lampiran 3. Data Uji Statistik

Data Karakteristik Dasar Subyek Penelitian

Descriptives

Std.
Statistic Error
MetGOD Mean 114.03 5.173
95% Lower 103.70
Confidence Bound
Interval for Upper 124.36
Mean Bound
5% Trimmed Mean 108.70
Median 101.00
Variance 1766.399
Std. Deviation 42.029
Minimum 65
Maximum 260
Range 195
Interquartile Range 34
Skewness 2.219 .295
Kurtosis 5.219 .582
POCT Mean 125.95 5.077
95% Lower 115.82
Confidence Bound
Interval for Upper 136.09
Mean Bound
5% Trimmed Mean 120.76
Median 117.00
Variance 1700.998
Std. Deviation 41.243
Minimum 78
Maximum 278
Range 200
Interquartile Range 33
Skewness 2.262 .295
Kurtosis 5.573 .582
MetHeksokinase Mean 129.45 5.554
95% Lower 118.36
Confidence Bound
Interval for Upper 140.55
Mean Bound
5% Trimmed Mean 124.56
Median 120.00
Variance 2035.913
Std. Deviation 45.121
Minimum 70
Maximum 280
Range 210
Interquartile Range 51
Skewness 1.789 .295
Kurtosis 3.644 .582
 53

trans_GOD Mean 2.0353 .01601

95% Lower 2.0034
Confidence Bound
Interval for Upper 2.0673
Mean Bound
5% Trimmed Mean 2.0257
Median 2.0043
Variance .017
Std. Deviation .13003
Minimum 1.81
Maximum 2.41
Range .60
Interquartile Range .14
Skewness 1.243 .295
Kurtosis 1.925 .582
trans_POCT Mean 2.0828 .01436
95% Lower 2.0541
Confidence Bound
Interval for Upper 2.1115
Mean Bound
5% Trimmed Mean 2.0738
Median 2.0682
Variance .014
Std. Deviation .11669
Minimum 1.89
Maximum 2.44
Range .55
Interquartile Range .12
Skewness 1.314 .295
Kurtosis 2.308 .582
trans_Hexo Mean 2.0910 .01615
95% Lower 2.0587
Confidence Bound
Interval for Upper 2.1232
Mean Bound
5% Trimmed Mean 2.0841
Median 2.0792
Variance .017
Std. Deviation .13117
Minimum 1.85
Maximum 2.45
Range .60
Interquartile Range .18
Skewness .811 .295
Kurtosis .873 .582
 54

Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov

Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
MetGOD .193 66 .000 .750 66 .000
POCT .218 66 .000 .751 66 .000
MetHeksokinase .154 66 .000 .828 66 .000

trans_GOD .123 66 .014 .901 66 .000

trans_POCT .146 66 .001 .894 66 .000

trans_Hexo .085 66 .200* .949 66 .008

Hasil Uji Friedman

Ranks
Mean Rank
trans_GOD 1.14
trans_POCT 2.42
trans_Hexo 2.45

Test Statisticsa
N 66
Chi-Square 74.435
Df 2
Asymp. Sig. .000
a. Friedman Test
 55

Hasil Uji Wilcoxon

Test Statisticsb
trans_POCT - trans_Hexo - trans_Hexo -
trans_GOD trans_GOD trans_POCT
Z -6.845a -5.813a -1.776a
Asymp. Sig. (2-tailed) .000 .000 .076
a. Based on negative ranks.
b. Wilcoxon Signed Ranks Test
 56

Lampiran 4.

FORMULIR PERSETUJUAN MENGIKUTI PENELITIAN

Yang bertanda tangan di bawah ini:

Nama .............................................................
Umur .............................................................
Alamat ..........................................................
Telp ...............................................................
Pekerjaan ......................................................
Menerangkan bahwa setelah mendapatkan keterangan yang jelas dan lengkap

tentang tujuan penelitian, menyatakan bersedia mengikuti penelitian dan tidak

berkeberatan untuk dilakukan pemeriksaan fisik dan laboratorium.

Surakarta,

Pasien Peneliti

(............................) (Deka Wulansari Herviyani)

Saksi

(..............................)
 57

Lampiran 5.
 58

Lampiran 6.
59
 60

Lampiran 8.
 61

Lampiran 9.
 62

Lampiran 10. Foto Alat dan Bahan Penelitian

A. Startdust MC15
 63

B. Sentrifuge
 64

C. Alat Sampling Darah

 65

D. Bahan pemeriksaan glukosa darah