║Journal Caninus Denstistry Volume 2, Nomor 1 (Februari 2017): 20 - 30

Pengaruh Ekstrak Daun Tapak Dara (Catharanthus Roseus) Terhadap Jumlah Fibroblas
Pada Proses Penyembuhan Luka Di Mukosa Oral

Risa Rahma Putri, Rachmi Fanani Hakim, Sri Rezeki

Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Syiah Kuala

ABSTRAK
Luka merupakan diskontinuitas dari suatu jaringan. Setiap luka yang terjadi selalu diikuti dengan
proses penyembuhan luka yang terdiri atas fase-fase yang saling berhubungan satu dan lainnya yaitu
hemostasis, inflamasi, proliferasi dan remodeling. Daun tanaman tapak dara (Catharanthus roseus)
memiliki aktivitas penyembuhan luka karena memiliki kandungan zat kimia seperti alkaloid,
flavonoid, tanin, polifenol dan steroid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak
daun tapak dara (Catharanthus roseus) terhadap jumlah fibroblas pada proses penyembuhan luka di
mukosa oral. Luka dibuat dengan cara menginsisi mukosa labial Tikus Wistar (Rattus
norvegicus). Pada kelompok kontrol, luka diaplikasikan akuades sedangkan pada kelompok
perlakuan, luka diaplikasikan ekstrak daun tapak dara (Catharanthus roseus) dengan variasi
konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%, 50%, dan 100%. Hari ke-7 tikus dieutanasia dan dilakukan
pengambilan jaringan mukosa labial tikus untuk selanjutnya dilakukan proses pengamatan jaringan
histologi. Hasil penelitian dianalisis menggunakan uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan dengan uji
Mann-Whitney. Hasil penelitian menunjukkan jumlah fibroblas pada kelompok kontrol lebih sedikit
dibandingkan dengan kelompok perlakuan dengan nilai rata-rata sebanyak 20,0±1,4. Kelompok
perlakuan dengan aplikasi ekstrak daun tapak dara dengan konsentrasi 6,25% mempunyai rata-rata
jumlah fibroblas sebanyak 27,7±0,5, konsentrasi 12,5% sebanyak 28,1±0,4, konsentrasi 25%
sebanyak 30,1±0,5, konsentrasi 50% sebanyak 35,0±1,0 dan konsentrasi 100% sebanyak 33,0±1,1.
Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak daun tapak dara (Catharanthus roseus)
berpengaruh terhadap jumlah fibroblas pada proses penyembuhan luka di mukosa oral dengan
konsentrasi terbaik adalah 50%.

Kata kunci: Catharanthus roseus, Rattus norvegicus, aktivitas penyembuhan luka, penyembuhan
luka, fibroblas

ABSTRACT
Wound is a discontinuity of a tissue. Every wound that occurs is always followed by the wound
healing process consists of phases that are related to one another, namely hemostasis, inflammation,
proliferation, and remodelling. Tapak dara (Catharanthus roseus) leaf has wound healing
activity because containing chemical compounds such as alkaloids, flavonoids, tannins, polyphenols
and steroids. This study aimed to know the effects of tapak dara leaf extracts to the number of
fibroblasts in the wound healing process in the oral mucous. Wound was made by incised the labial
mucous of rats (Rattus norvegicus). In the control group, aquades was applied to the wound, while in
the treatment group, the tapak dara leaf extracts was applied with variations concentration 6.25%,
12.5%, 25%, 50% and 100%. On the day 7th, rats was euthanatized and the labial mucous tissue was
used to the next process of histological tissue observation. Results of the study were analyzed using
Kruskal-Wallis test and Mann-Whitney test. The results showed the number of fibroblasts in the
control group is less than the value of the treatment group with an average of 20.0 ± 1.4. The
treatment group with tapak dara leaf extract application at concentration of 6.25% has an average
number of fibroblasts as much as 27.7 ± 0.5, concentration of 12.5% as much as 28.1 ± 0.4,
concentration of 25% as much as 30.1 ± 0.5, concentration of 50% as much as 35.0 ± 1.0 and
concentration of 100% as much as 33.0 ± 1.1. It conclude that tapak dara (Catharanthus roseus) leaf
extracts has an effect to the number of fibroblasts in the wound healing process in the oral mucous
with 50% as the best concentration.

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 20
Key words : Catharanthus roseus, Rattus norvegicus, wound healing activity, wound healing,
fibroblas
PENDAHULUAN
Luka merupakan keadaan hilang atau
terputusnya kontinuitas dari suatu jaringan.1
Ketika pembuluh darah terputus, beberapa
komponen seperti histamin, bradikinin, serotonin
dan prostaglandin akan dilepaskan oleh
trombosit yang rusak.2,3 Selanjutnya tubuh
akan memberikan reaksi atas terjadinya luka yaitu
proses penyembuhan yang merupakan proses
kompleks dan dinamis dan melibatkan interaksi
berbagai jenis sel dan molekul.1,4,5 Luka yang
umumnya terjadi pada rongga mulut disebabkan
oleh pembedahan atau trauma dan
penyembuhan luka dapat terjadi lebih cepat
dibandingkan luka pada kulit dengan
pembentukan luka parut minimal.5,6 Luka pada
mukosa oral mengandung lebih sedikit mediator
imun, pembuluh darah, dan mediator
profibrotik tetapi memiliki lebih banyak sel-sel
sumsum tulang, tingkat re-epitelisasi yang lebih
tinggi dan proliferasi fibroblas yang lebih cepat
dibandingkan dengan luka pada kulit.5
Proses penyembuhan luka terdiri atas
fase- fase yang saling berhubungan satu dan
lainnya yaitu hemostasis, inflamasi, proliferasi
dan remodeling jaringan.4,5,7 Tahap hemostasis
dimulai segera setelah terjadinya luka sebagai
upaya untuk mencegah pendarahan lebih
lanjut.2,4,7 Pada hari ke-1 sampai hari ke-4
setelah terjadi luka, proses penyembuhan
memasuki fase inflamasi yang ditandai dengan
adanya leukosit PMN terutama neutrofil dan
makrofag.4,7,8 Fase proliferasi umumnya dimulai
4 hari hingga 21 hari setelah terjadi luka.4 Secara
klinis, proliferasi ditandai dengan angiogenesis,
pembentukan jaringan granulasi, deposisi kolagen
dan epitelisasi. Kemudian setelah melalui fase
proliferasi, penyembuhan luka memasuki fase
remodeling yang dapat menghabiskan waktu
hingga 2 tahun setelah terjadi luka.4,7,8
Tujuan utama pengobatan luka adalah
mengembalikan fungsi dan bentuk jaringan
kulit kembali normal dengan komplikasi lokal
seminimal mungkin.1 Penggunaan obat-
obatan alami atau herbal telah banyak
digunakan di seluruh dunia, seiring dengan
meningkatnya pemenuhan permintaan akan
obat-obatan, harga obat herbal yang
terjangkau dan efek samping yang minimal
bersamaan dengan resistensi obat yang
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 21
ditemukan pada obat sintetis.9,10,11 Data WHO
menunjukkan 70-80% populasi dunia
menggunakan obat herbal sebagai
pengobatan alternatif. 10
Tanaman herbal
diminati di negara maju serta negara- negara
berkembang karena aktivitas obat, tingkat
keamanan yang lebih tinggi dan biayanya
yang terjangkau, salah satunya adalah
Catharantus roseus (C.roseus).12 Di Indonesia
tanaman ini dikenal dengan nama tapak dara.13
Catharanthus roseus telah digunakan untuk
mengobati berbagai macam penyakit, seperti sakit
kepala, luka bakar, hingga obat tradisional untuk
penderita diabetes.14,15 Tanaman ini kaya akan
kandungan alkaloid, polifenol dan turunannya,
flavonoid, tanin dan juga steroid.13,16
Penelitian yang dilakukan Nayak,
ekstrak etanol bunga tapak dara yang
diaplikasikan sebanyak 100 mg per kg berat
badan pada luka di kulit tikus Sprague dawley
menunjukkan percepatan aktivitas
14,17-20
penyembuhan luka.
Penelitian lainnya yang dilakukan Ida
Ayu menunjukkan aplikasi ekstrak daun tapak
dara dengan konsentrasi 15% secara topikal
dapat mempercepat proses penyembuhan luka
dibandingkan dengan tikus kontrol atau yang
tidak diobati (dilihat dari perubahan luas luka
dan periode epitelisasi). Hasil penelitian di
atas memperlihatkan bahwa kandungan tanin,
alkaloid, polifenol dan steroid yang dimiliki oleh
ekstrak dari tumbuhan tapak dara baik daun
maupun bunga mempunyai khasiat dalam
mempercepat proses penyembuhan luka di
kulit.13
Berdasarkan hal tersebut maka peneliti
tertarik untuk melakukan penelitian guna
mengetahui pengaruh ekstrak daun tapak dara
(Catharanthus roseus) dengan konsentrasi
6,25%, 12,5%, 25%, 50% dan 100% terhadap
jumlah fibroblas pada proses penyembuhan
luka di mukosa oral.
BAHAN DAN METODE
Jenis penelitian ini berupa penelitian
eksperimen laboratoris dengan desain
penelitian post-test only controlled group
design untuk menentukan pengaruh ekstrak daun
tapak dara (Catharanthus roseus) dengan
konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%, 50% dan
100% terhadap jumlah fibroblas pada proses
penyembuhan luka di mukosa oral.
Sampel penelitian ini adalah daun tapak
dara (Catharanthus roseus) yang diperoleh
dari Desa Alue Naga, Banda Aceh dan tikus
putih Rattus norvegicus diperoleh dari
kandang hewan Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Syiah Kuala. Jumlah sampel dari
tiap kelompok perlakuan akan dihitung
menggunakan rumus Federer dengan
memasukkan nilai koreksi 1/(1-f) untuk
mengantisipasi hilangnya sampel eksperimen dan
berdasarkan rumus tersebut, jumlah sampel
yang diperlukan per kelompoknya adalah lima
ekor tikus putih. Total sampel yang digunakan
adalah 30 ekor tikus putih. Adapun kriteria
inklusi subjek penelitian yaitu tikus putih Rattus
norvegicus dengan jenis kelamin jantan, umur 2-3
bulan dan memiliki berat badan 200-250 gram.
Alat dan bahan penelitian
Pada penelitian ini alat dan bahan yang
digunakan adalah sebagai berikut: masker,
handscoon, timbangan analitik, blender, kertas
saring, erlenmeyer, mesin maserator, vacum
rotary evaporator, gelas ukur, oven, stirer, daun
tapak dara (Catharanthus roseus) 1 kg, etanol
96%, 30 ekor tikus putih Rattus norvegicus
(jantan), Xylazine hydrochloride (2 mg/kg),
Ketamin hydrochloride (20 mg/kg), Syringe
disposible, Scalpel dan blade No. 11, arteri klem,
cotton buds, gunting bedah, inkubator, pinset,
lampu spiritus, mikrotom, waterbath, object
glass, mikroskop elektrik (Olympus), cover
glass, hot plate, buffer neutral formaldehide
10%, hematoksilin- eosin, ether, alkohol
bertingkat 70%, 80%,
90%, 100%, parafin, xylol, larutan
albumin, gliserin, balsem kanada dan acid
alcohol.
CARA PENELITIAN
Pembuatan Ekstrak Daun Tapak Dara
Daun tapak dara (Catharanthus
roseus) diperoleh dari Desa Alue Naga. Sebanyak
1 kg daun tapak dara dipetik dan dicuci bersih
kemudian dikeringkan dengan cara diangin-
anginkan dan tidak terkena sinar
13
matahari. Setelah itu, daun tersebut dihaluskan
dengan menggunakan blender. Setelah menjadi
bubuk, daun tersebut direndam dengan
menggunakan etanol 96% sebanyak 2 Liter.14
Kemudian, hasil rendaman daun disaring dengan
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 22
kertas saring hingga bebas dari partikel
kasar.13,14Hasil larutan ekstrak daun tapak dara
dengan konsentrasi 100% selanjutnya
dievaporasi untuk memisahkan pelarut etanol
dengan ekstrak tapak dara menggunakan alat
penguap (rotary evaporator) pada temperature
37oC selama kurang lebih 6 jam untuk
mendapatkan ekstrak kental dari daun tapak dara.
13
Setelah didapat ekstrak kental, dilakukan
pengenceran dengan menambah akuades hingga
mendapat konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%, 50%
dan 100%. Pengenceran dilakukan dengan rumus:
C1 . V1 = C2 . V2
Keterangan:
C1 = Konsentrasi awal
C2 = Kosentrasi akhir
V1 = Volume zat terlarut
V2 = Volume total
Pembuatan luka insisi pada tikus putih
Tikus putih dengan usia 8-12 minggu
dan berat 200-250 gram diperoleh dari
Kandang Hewan Fakultas Kedokteran
Hewan Universitas Syiah Kuala. Tikus-tikus ini
disimpan pada ruangan dengan kondisi
laboratorium standar (dengan suhu ruangan
sekitar 250C) serta diberi minum dan makanan
secara ad libitum.13 Sebelum dilakukan
perlukaan, semua tikus dianestesi secara
injeksi intramuscular menggunakan 2 mg/kg
xylazine hydrochloride dan 20 mg/kg ketamine
hydrochloride. Perlukaan dibuat pada mukosa
labial bawah dengan menggunakan blade dan
scalpel sepanjang ± 10 mm dengan kedalaman
luka ± 1 mm.21
Pengaplikasian ekstrak daun tapak dara
Pada kelompok perlakuan diaplikasikan
ekstrak daun tapak dara dengan konsentrasi
6,25%, 12,5%, 25%, 50% dan 100% secara
topikal sebanyak 100µL dengan menggunakan
bantuan cotton buds selama 1 menit setiap
harinya sampai hari ke tujuh. Aplikasi dilakukan
2 kali sehari, yaitu pada pagi hari pukul
08.00 dan sore hari pukul 16.00 selama 7 hari.
22,23
Pada kelompok kontrol, luka diberikan
akuades.22,23,24
Pembuatan dan pengamatan preparat
histologi
 Tikus di euthanasia di hari ketujuh
setelah pembuatan luka dan pengaplikasian
ekstrak daun tapak dara dengan konsentrasi
6,25%, 12,5%, 25%, 50% dan 100%,
menggunakan ether, yaitu dengan kapas yang
dibasahi ether diletakkan dalam satu wadah yang
sesuai dengan besar hewan cobanya.23,24,25
Kemudian dilakukan pemotongan jaringan dan
setelah pemotongan jaringan tikus
dikuburkan.26,27 Pembuatan spesimen dari hasil
pemotongan jaringan mukosa labial bawah tikus
dilakukan dengan ukuran 5x5 mm dan ketebalan
2-3 mm menggunakan scalpel dan gunting
bedah.22,28,29,30 Setelah pembuaan spesimen
selesai, jaringan tersebut akan difiksasi terlebih
dahulu dengan Buffered Netral Formaldehide
(BNF) 10 % selama 24 jam dan diikuti dengan
proses histoteknik selanjutnya.22,25,31
Preparat histopatologi diperiksa di bawah
mikroskop masing-masing pada 5 lapang pandang
mikroskopik. Pemeriksaan dengan mikroskop
dilakukan dengan pembesaran 100 kali kemudian
dilanjutkan dengan pembesaran
400 kali.28,30
HASIL PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan daun tapak
dara (Catharanthus roseus) yang diambil di
Pantai Alue Naga, Banda Aceh. Daun tapak dara
segar berwarna hijau tua dipetik sebanyak 1 kg.
Daun kemudian dicuci bersih dan
dikeringkan di dalam ruangan selama 10 hari.
Daun yang telah mengering kemudian dihaluskan
menggunakan blender sehingga didapatkan bubuk
halus sebanyak 300 gram. Ekstraksi dilakukan
dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol
96% sebanyak 2 liter selama 6 jam dan
didapatkan ekstrak daun sebanyak 42 ml. Proses
selanjutnya yaitu dilakukan pengenceran
dengan konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%, 50%
dan 100%. (Gambar1)
Gambar 1. Hasil ekstrak daun tapak dara
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 23
Penelitian ini menggunakan tikur
putih galur wistar sebanyak 24 ekor yang dibagi
menjadi 5 kelompok perlakuan dan 1
kelompok kontrol. Perlukaan dilakukan pada
mukosa labial tikus dengan menggunakan scalpel
dan blade no.11 sepanjang 10 mm dengan
kedalaman 1-2 mm. Setelah dilakukan perlukaan,
pada 5 kelompok perlakuan diaplikasikan ekstrak
daun tapak dara (Catharanthus roseus) dengan
konsentrasi 6,25%, 12,5%, 25%, 50% dan
100% secara topikal sebanyak 100 µl
menggunakan cotton buds (Gambar 2). Aplikasi
dilakukan 2 kali sehari selama 1 menit pada
pagi hari pukul 08.00 dan sore hari pukul
16.00. Kelompok kontrol diaplikasikan akuades.
Gambar 2. Aplikasi ekstrak pada luka
Setelah perlakuan berakhir pada hari ke-
7, tikus-tikus di euthanasia dengan
menggunakan inhalasi eter 5%, dengan cara
tikus dimasukkan kedalam wadah berisi kapas
yang telah dibasahi eter. Selanjutnya dilakukan
pemotongan labial mandibula tikus
menggunakan gunting jaringan dan kemudian
hasil pemotongan direndam ke dalam larutan
buffer neutral formaldehide (fiksasi) 10%
selama 1x24 jam. Setelah fiksasi selesai,
kemudian jaringan dipotong dengan ketebalan
2-3 mm (trimming). Selanjutnya dilakukan
proses dehidrasi yaitu dengan cara potongan
jaringan tersebut diletakkan dalam wadah
tertutup dan kemudian dimasukkan ke dalam
alkohol bertingkat (70%, 80%, 90%, 95%,
absolut I dan absolut II) secara berurutan
masing-masing selama 2 jam. Setelah itu
dilakukan proses clearing menggunakan xylol
I, II dan III masing-masing selama 30 menit
dan kemudian dilanjutkan dengan proses
infiltrasi jaringan menggunakan paraffin
(paraffin I,II dan III) masing-masing selama
30 menit. Selanjutnya dilakukan proses
embedding dan pemotongan jaringan
menggunakan mikrotom dengan ketebalan 5 kelompok kontrol (Gambar 3).
mikron. Hasil potongan jaringan yang
berbentuk pita (ribbon) diletakkan pada water
bath dengan suhu 400-500C sampai jaringan
merentang dan kemudian jaringan diangkat
menggunakan object glass dan dikeringkan
dengan glass warmer. Proses deparafinisasi
menggunakan tiga tabung xylol, alkohol
absolut I, alkohol absolut II, alkohol 96%,
alkohol 90% dan alkohol 80% dan waktu yang
dibutuhkan masing-masing selama 2 menit.
Proses selanjutnya yaitu pewarnaan dengan A
hematoxylin – eosin melalui 3 tahap, yaitu
pewarnaan, dehidrasi dan penjernihan. Pewarnaan
dilakukan menggunakan hematoxylin selama 5
menit, setelah itu dicuci dengan air mengalir
sampai bersih dan dilanjutkan dengan
mencelupkan preparat ke dalam acid alcohol,
kemudian dicelupkan ke dalam air sebanyak satu
kali celup dan dilakukan pewarnaan
pembanding dengan eosin selama 3 menit.
Dehidrasi dilakukan dengan menggunakan
alkohol 96% I, alcohol 96% II, alkohol absolut
I dan alkohol absolut II masing-masing selama 1 B
menit. Penjernihan dilakukan dalam 2 tabung Gambar 3. Gambaran fibroblas pada kelompok
xylol selama 2 menit. Sediaan preparat kontrol (A) dan salah satu kelompok perlakuan (50%)
dikeringkan dan ditetesi dengan perekat entelan, dilihat secara makroskopis (B)
kemudian ditutup dengan cover glass dan
ditunggu hingga perekatnya mengering. Data hasil penelitian terlebih dahulu
Proses pengamatan dan perhitungan dianalisis melalui uji normalitas data
jumlah fibroblas dilakukan dengan menggunakan uji one way ANOVA dikarenakan
menggunakan mikroskop Olympus BX 41 kelompok pada penelitian ini berjumlah lebih
dengan 400x pembesaran dan dengan 5 lapang dari dua kelompok. Berdasarkan uji normalitas
pandang setiap preparat. Pengamatan ini juga data diketahui data yang diperoleh dalam
dilengkapi dengan kamera digital DP-12. Data penelitian terdistribusi dengan normal, yakni
hasil perhitungan jumlah fibroblas tersaji 0,689 untuk kelompok perlakuan dengan
dalam tabel dibawah ini (Tabel 1). aplikasi ekstrak daun tapak dara 6,25%, 0,086
untuk kelompok perlakuan
12,5%, 0,220 untuk kelompok perlakuan 25%,
0,677 untuk kelompok perlakuan 50%, 0,951
untuk kelompok perlakuan 100% dan 0,405
untuk kelompok kontrol (p>0,05). Hasil uji
varian menunjukkan bahwa varian data
penelitian tidak sama, yakni 0,325 (p<0,05).
Hasil dari uji varian data diketahui tidak
memenuhi syarat ANOVA, maka alternatif
selanjutnya adalah melakukan uji Kruskal-
Wallis. Hasil yang didapatkan yakni terdapat
pengaruh yang signifikan dengan nilai 0,001
Berdasarkan pengamatan histologi yang (p<0,005). Setelah itu, untuk melihat pengaruh
telah dilakukan, terlihat bahwa jumlah signifikan antar kelompok maka dilakukan uji
fibroblas pada kelompok perlakuan lebih banyak Mann-Whitney. (Tabel 2)
dibandingkan dengan jumlah fibroblas pada

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 24
 ║Journal Caninus Denstistry Volume 2, Nomor 1 (Februari 2017): 20 - 30

Tabel 2. Pengaruh antar kelompok dengan uji Mann-Whitney.

Kelompok Uji 6,25% 12,5% 25% 50% 100% Akuades

6,25% - 0,200 0,029* 0,029* 0,029* 0,029*
12,5% 0,200 - 0,029* 0,029* 0,029* 0,029*
25% 0,029* 0,029* - 0,029* 0,029* 0,029*
50% 0,029* 0,029* 0,029* - 0,057 0,029*
100% 0,029* 0,029* 0,029* 0,057 - 0,029*
Akuades 0,029* 0,029* 0,029* 0,029* 0,029* -
Keterangan: *= p<0,005, terdapat perbedaan yang bermakna

PEMBAHASAN jumlahnya dalam ekstrak.36 Setelah didapat

Penelitian ini dirancang untuk
mengetahui pengaruh ekstrak daun tapak dara
terhadap jumlah fibroblas pada proses
penyembuhan luka di mukosa oral. Bagian
daun yang digunakan dari tanaman tapak dara
(Catharanthus roseus) adalah yang berwarna
hijau tua dan segar. Daun yang berwarna hijau
tua ini dipilih karena kandungan senyawa aktif
lebih banyak dibandingkan dengan daun muda.20
Daun tapak dara diperoleh dari Desa
Alue Naga. Desa Alue Naga dipilih karena
berdasarkan hasil penelitian Watiniasih tentang
pengaruh air dan nutrisi tanah, dijelaskan bahwa
pertumbuhan tanaman tapak dara lebih baik pada
lahan yang tidak terlalu basah. Kemudian
habitus tanaman yang tumbuh di dataran
rendah lebih besar dan lebih tinggi dibandingkan
dengan tanaman yang tumbuh di dataran tinggi
dan juga jumlah daun yang dihasilkan oleh
tanaman tapak dara yang tumbuh di dataran
rendah lebih banyak dibandingkan dengan
tanaman yang tumbuh di dataran tinggi.32
Bubuk daun tapak dara sebanyak 300
gram diekstraksi dengan metode maserasi
menggunakan pelarut etanol untuk mendapatkan
ekstrak kental dari daun tapak dara.14 Ekstraksi
dilakukan dengan metode maserasi karena
proses pengerjaan yang mudah, peralatan yang
digunakan sederhana dan tidak menggunakan
pemanasan yang dapat merusak komponen
aktif daun.33,34,35
Pemilihan etanol sebagai pelarut
dikarenakan etanol memiliki sifat semipolar
sehingga komponen aktif dengan kepolaran
yang beragam dapat terekstrasi lebih sempurna.
Selain itu, etanol memiliki titik didih yang
rendah, sehingga memudahkan pemisahannya
dengan komponen aktif daun dan mengurangi
ekstrak kental, dilakukan pengenceran dengan
menambah akuades hingga didapatkan
konsentrasi ekstrak daun tapak dara 6,25%,
12,5%, 25%, 50% dan 100%. Hasil dari proses
ekstraksi dengan menggunakan metode
maserasi ini diperoleh ekstrak daun tapak dara
sebanyak 42 ml.
Sampel penelitian ini menggunakan
tikus wistar (Rattus norvegicus) jantan sebanyak
24 ekor. Penentuan besar sampel berdasarkan
rumus federer. Penggunaan tikus wistar
dikarenakan lebih mudah didapatkan dalam
jumlah banyak, mudah ditangani, mudah
perawatannya dan lebih cepat berkembang
biak. Selain itu, tikus jantan memiliki kondisi
biologis tubuh yang lebih stabil dibandingkan
tikus betina.37,38
Pembuatan luka insisi dilakukan pada
labial mandibula tikus wistar sepanjang 10 mm
dengan kedalaman 1-2 mm menggunakan
blade No. 11 dan scalpel. Sebelum dilakukan
perlukaan, tikus terlebih dahulu dianestesi
dengan menggunakan kombinasi ketamine dan
xylazine. Ketamin merupakan jenis obat anestesi
yang dapat digunakan pada hampir semua jenis
hewan. Ketamin dapat menimbulkan efek yang
membahayakan, yaitu takikardia, hipersalivasi,
meningkatkan ketegangan otot, peningkatan
aliran darah ke otak dan peningkatan tekanan
darah intrakranial. Efek samping ini dapat
diatasi dengan mengkombinasikan obat-obatan.
Kombinasi yang paling sering digunakan
untuk ketamine adalah xylazine. Ketamine
memberikan efek analgesik sedangkan
xylazine menyebabkan relaksasi otot yang
baik.39,40
Dua puluh empat ekor tikus wistar
jantan dibagi ke dalam 6 kelompok, yaitu
kelompok perlakuan 6,25%, 12,5%, 25%,

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 25
50%, 100% dan kelompok kontrol.
Masing-masing kelompok terdiri dari 4 ekor
tikus. Kelompok perlakuan diaplikasikan
ekstrak daun tapak dara secara topikal
sebanyak 100µL dengan menggunakan bantuan
cotton buds selama 1 menit. Aplikasi dilakukan
2 kali sehari, yaitu pada pagi hari pukul 08.00
dan sore hari pukul
16.00.22,23 Pada kelompok kontrol, luka diberikan
akuades.22,23,24 Pengaplikasian
ekstrak daun tapak dara dan akuades dilakukan
hingga hari ke-7.
Pengaplikasian ekstrak daun tapak dara
dan akuades dilakukan hingga hari ke-7
terjadinya luka karena pada hari tersebut luka
sudah masuk ke dalam fase proliferasi.4 Fibroblas
merupakan elemen utama pada fase proliferasi
yang muncul pertama kali secara bermakna pada
hari ke 3 dan mencapai puncak pada hari ke 7.31
Pada penelitian ini, proses pengamatan dan
perhitungan jumlah fibroblas dilakukan dengan
mikroskop, menggunakan perbesaran 400x
dengan 5 lapang pandang.23
Hasil perhitungan jumlah fibroblas
didapatkan dengan menghitung nilai rata-rata
luka tikus kelompok perlakuan dan nilai rata- rata
kelompok kontrol. Berdasarkan tabel 5.1, aplikasi
ekstrak daun tapak dara 6,25% mempunyai rata-
rata jumlah fibroblas sebanyak 27,7±0,5,
aplikasi ekstrak daun tapak dara 12,5%
sebanyak 28,1±0,4, aplikasi ekstrak daun
tapak dara 25% sebanyak
30,1±0,5, aplikasi ekstrak daun tapak dara
50% sebanyak 35,0±1,0 dan aplikasi ekstrak
daun tapak dara 100% sebanyak 33,0±1,1.
Sementara rata-rata luka tikus kelompok
kontrol sebanyak 20,0±1,4. Antara kelompok
perlakuan dan kontrol terdapat pengaruh yang
signifikan dengan nilai 0,001 (p<0,005) setelah
dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis. Jumlah
fibroblas pada kelompok perlakuan lebih banyak
dari pada jumlah fibroblas yang terdapat pada
kelompok kontrol.
Hal ini mendukung penelitian
sebelumnya yang dilakukan oleh Ida Ayu Laksmi
(2013) mengenai bioaktivitas ekstrak daun tapak
dara terhadap proses epitelisasi pada proses
penyembuhan luka tikus wistar, dimana proses
epitelisasi kelompok perlakuan terjadi lebih cepat
dibandingkan pada kelompok kontrol.13
Proses epitelisasi sendiri merupakan salah satu
ciri khas dari fase proliferasi, dimana fibroblas
merupakan elemen dominan pada fase ini.4,7,41
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 26
Proses penyembuhan luka merupakan
proses yang kompleks dan dinamis dalam
pemulihan struktur sel dan lapisan jaringan yang
rusak untuk kembali normal.13 Setelah
terjadinya luka, proses penyembuhan dan
regenerasi sel terjadi secara otomatis sebagai
respon fisiologis tubuh.41,42
Penyembuhan luka yang berlangsung
pada kelompok kontrol merupakan proses
penyembuhan luka normal yang melibatkan
beberapa proses yang saling berhubungan satu
dan lainnya yaitu hemostasis, inflamasi,
proliferasi, dan remodeling.1,5,7,42 Pada fase
hemostasis, platelet sebagai sel akan menutup
pembuluh darah yang terluka. Pembuluh darah
akan vasokonstriksi, sementara platelet akan
membentuk bekuan darah pada pembuluh
darah yang putus.4,7 Selanjutnya pada fase
inflamasi, neutrofil dan makrofag sebagai sel
yang dominan pada fase ini akan bermigrasi ke
area luka dan memfagositosis mikroorganisme
dan sel-sel mati.43,44 Pada fase proliferasi akan
terlihat peningkatan jumlah sel dan faktor-
faktor penyembuhan luka, salah satunya
fibroblas. Jumlah fibroblas dapat dianggap
sebagai parameter penyembuhan luka.45
Fibroblas akan menghasilkan kolagen yang akan
menautkan luka, memengaruhi proses
reepitelisasi, bermigrasi dan berproliferasi
untuk membentuk jaringan ikat baru dan
mensintesis kolagen yang mempengaruhi
tensile strength dan kekuatan pada tempat
penyembuhan luka.1,7,41,23,45 Proliferasi dari
fibroblas menentukan hasil akhir dari
penyembuhan luka.45
Walaupun proses penyembuhan luka
merupakan proses yang natural dan secara
alamiah dimiliki makhluk hidup, namun untuk
mempercepat proses penyembuhan luka
diperlukan kondisi tertentu yang mendukung
keberlangsungan proses penyembuhan luka,
salah satunya adalah nutrisi.7,45 Pada kelompok
perlakuan terjadi peningkatan jumlah fibroblas
dikarenakan zat-zat yang terkandung dalam
ekstrak daun tapak dara (Catharanthus roseus)
mempunyai pengaruh dalam proses
13,14,41
penyembuhan luka. Alkaloid diketahui
dapat membantu mempercepat proses
penyembuhan luka karena terdapatnya
aktivitas antimikroba dan antioksidan.
Mekanisme yang terjadi pada proses
penyembuhan luka adalah dengan cara
mengganggu komponen penyusun peptidoglikan
pada sel bakteri, sehingga lapisan dinding konsentrasi 50% dengan 100% menunjukkan
sel tidak terbentuk secara utuh dan perbedaan yang tidak bermakna (p>0,05).
menyebabkan kematian sel tersebut.46 Nilai p yang terlihat antara kelompok konsentrasi
Adapun senyawa polifenol dan 6,25% dengan konsentrasi 12,5% adalah 0,200,
flavonoid dikenal mempunyai kemampuan sedangkan antara kelompok konsentrasi 50%
sebagai antioksidan dan antiinflamasi.23 dengan konsentrasi 100% adalah 0,057.
Mekanisme flavonoid dalam menghambat Perbedaan tidak bermakna yang dihasilkan antara
proses terjadinya inflamasi melalui dua cara, konsentrasi 6,25% dengan 12,5% mungkin
yaitu dengan menghambat permeabilitas kapiler dikarenakan selisih konsentrasi tersebut tidak
dan menghambat metabolisme asam banyak.50 Jika dilihat dari nilai rata-rata jumlah
arakidonat dan sekresi enzim lisosom dari sel fibroblas pada kelompok perlakuan menggunakan
neutrofil dan sel endothelial, menghambat ekstrak daun tapak dara antara konsentrasi 6,25%
aktivitas enzim siklooksigenase dan dan konsentrasi 12,5% diketahui bahwa antara
lipooksigenase, menghambat akumulasi
ekstrak daun tapak dara antara kedua konsentrasi
leukosit, menghambat degranulasi neutrofil,
tersebut memiliki daya aktivas penyembuhan luka
menghambat pelepasan histamin dan
menstabilkan Reactive Oxygen Species yang tidak berbeda secara signifikan. Selain itu,
(ROS). 47,48
Flavonoid juga berperan penting hal tersebut juga dapat disebabkan oleh larutan
dalam menjaga permeabilitas serta yang terlalu encer, sehingga molekul senyawa
meningkatkan resistensi pembuluh darah kimianya besar dan penetrasi ekstrak ke dalam
kapiler. Oleh karena itu, flavonoid digunakan jaringan menjadi sukar. Hal ini mempengaruhi
pada keadaan patologis seperti terjadinya proses reepitelisasi dan jumlah fibroblas pada
gangguan permeabilitas dinding pembuluh proses penyembuhan luka.51
darah.47 Tanin berperan dalam peningkatan Perbedaan tidak bermakna yang
daya tarik luka pada proses penyembuhan ditunjukkan antara konsentrasi 50% dengan
luka. Tanin berfungsi sebagai astringen yang 100 bisa saja karena perlakuan menggunakan
dapat menyebabkan penciutan pori-pori kulit, ekstrak daun tapak dara (Catharanthus roseus)
memperkeras kulit, menghentikan eksudat dan dengan konsentrasi yang utuh dan pekat
pendarahan yang ringan, sehingga mampu (100%) menyebabkan sel-sel mengalami
menutupi luka dan mencegah pendarahan yang kejenuhan (saturasi) sehingga proses
biasa timbul pada luka serta mempercepat 42
reepitelisasi hanya sedikit. Ekstrak yang lebih
epitelisasi.13,41 Steroid mempunyai sifat kental akan mempermudah terjadinya oksidasi
astrigen dan antimikroba dan mempunyai yang menghalangi hidroksiprolin dan lisin
aktivitas antiinflamasi, efek analgesik, yang sehingga fibroblas tidak bisa memproduksi
berperan dalam proses penyembuhan luka.35,49 kolagen.52
Aktivitas antiinflamasi dapat mencegah KESIMPULAN
terjadinya inflamasi yang berkepanjangan, Berdasarkan hasil penelitian yang telah
sehingga mempercepat proses penyembuhan dilakukan, dapat diambil kesimpulan bahwa
luka.23 ekstrak daun tapak dara (Catharanthus roseus)
Secara statistik, rerata jumlah fibroblas mempunyai pengaruh terhadap jumlah
(Tabel 1) kelompok perlakuan ekstrak daun tapak fibroblas pada luka mukosa oral tikus wistar
dara (Catharanthus roseus) meningkat (Rattus norvegicus) dengan konsentrasi terbaik
bersamaan dengan peningkatan konsentrasi adalah 50% pada hari ke-7.
ekstrak kecuali pada konsentrasi 100% yang
menunjukkan hasil yang berbeda. Rerata SARAN
jumlah fibroblas yang diaplikasikan ekstrak daun 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut
tapak dara dengan konsentrasi 100% mengenai pengaruh ekstrak daun tapak
menunjukkan jumlah lebih rendah dara terhadap jumlah fibroblas dengan
dibandingkan dengan konsentrasi 50%. Pada persentase diantara 50%-100%.
tabel 5.2, perbedaan jumlah fibroblas yang 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut
bermakna antar kelompok perlakuan dan mengenai persentase tiap komponen zat
kelompok kontrol terlihat pada konsentrasi aktif yang terdapat dalam ekstrak daun
6,25% - 100 %, sementara antara konsentrasi tapak dara.
6,25% dengan konsentrasi 12,5% dan antara

J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 27

DAFTAR PUSTAKA
1. Guy Masir O, Manjas M, Putra AE, Agus
S. Pengaruh cairan cultur filtrate fibroblast
(CFF) terhadap penyembuhan luka:
penelitian eksperimental pada rattus
novergicus galur wistar. Jurnal Kesehatan
Andalas. 2012; 1(3): 112-117.
2. Guyton H. Buku Ajar Fisiologi
Kedokteran. Edisi 11. Jakarta: EGC, 2006.
p. 434; 457.
3. Sloane E. Anatomi dan Fisologi untuk
Pemula. Jakarta: EGC, 2003. p. 224.
4. Orsted HL, Keast D, Lalande LF, Megie
MF. Basic Principles of Wound Healing: An
Understanding of the basic physiology of
wound healing provides the clinician with
the framework necessary to implement the
basic principles of chronic wound care.
Wound Care Canada 2011, 9(2): 4-12.
5. Glim JE, Egmond MV, Niessen FB, Everts
V, Beelen RH. Detrimental dermal wound
healing: What can we learn from the oral
mucosa. International Journal of tissue
repair and regeneration. 2013; 21(5): 648
660.
6. Larjava H. Oral wound healing: cell
biology and clinical management. British
UK: John wiley and sons, 2012. p. 1.
7. Guo S. Dipietro LA. Factors Affecting
Wound Healing. Journal of
Dental Research. 2010; 89(3): 219-229.
8. Hsu A, Mustoe TA. The principles of
wound healing. In: Weinzweig J, editor.
Plastic surgery secrets. 2nd ed. Philadelpia:
Mosby Elsevier, 2010. p.3
9. Chattopadhyay C, Chakrabarti N,
Chatterjee M, Mukherjee S, Sarkar
K, Chaudhuri AR. Black Tea (Camellia
sinensis) decoction shows
immunomodulatory properties on an
experimental animal model and in human
peripheral mononuclear cells.
Pharmacognosy Res. 2012; 4(1): 15-21.
10. Karimi M, Parsaei P, Asadi SY, Ezzati S,
Boroujeni RK, Zamiri A, Kopaei MR.
Effects of Camellia sinensis ethanolic
extract on histometric and
histopathological healing process of burn
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 28
wound in rat. Middle-East Journal of
Scientific Research 2013; 13(1): 14-19
11. Namita P, Mukesh R, Vijay KJ. Camellia
sinensis (green tea): a review. Global
journal of pharmacology 2012; 6(2): 52-
59.
12. Agarwal P, Alok S, Verma A. An update
on ayurvedic herb henna (Lawsonia
inermis L.): a review. International
journal of pharmaceutical science and
research 2014; 5(2): 330-339.
13. Dewi IALP, Damriyasa IM, Dada
IKA.Bioaktivitas ekstrak daun tapak
dara(catharanthus roseus) terhadap
periode epitelisasi dalam proses
penyembuhan luka pada tikus wistar.
Indonesia Medicus Veterinus 2013; 2(1):
58 – 75.
14. Nayak BS, Pereira LMP. Catharantus
roseus flower extracthas wound-healing
activity in Sprague dawley rats. BMC
Complementary and Alternative Medicine
2006; 6(41): 1-6.
15. Vega-Avila E, Cano-Velasco JL, Alarcon-
Aguilar FJ. Hypoglycemic Activity of
Aqueous Extracts from Catharanthus
roseus. Evidence-Based Complementary
and Alternative Medicine Research article
2012; 1-7.
16. 16. Hassan KA, Brenda AT, Patrick V,
Patrick OE. In vivo antidiarrheal activity of
the ethanolic leaf extract of Catharanthus
roseus linn. (apocyanaceae) in wistar rats.
African Journal of Pharmacy and
Pharmacology 2011; 5(15): 1797-1800.
17. 17. Alam G, Singh MPA, Singh A.
Wound healing potential of some medicinal
plants. Review article 2011; 9: 1-10.
18. 18. Sharma G, Jeyabalan Y, Singh R.
Potential wound healing agents from
medical plants: A review. Pharmacologia
2013; 4(5): 349-358.
19. Nagori BP, Solanki R. Role of medical
plants in wound healing. Research Journal
of Medical Plant 2011; 5(4): 392-405
20. Anonymous. Sediaan obat luka luar.
Tersedia pada: http://event
archives.litbang.depkes.go.id/jspui/bitstrea
m/123456789/224/1/ASH7_Sediaan%20o
 bat%20luka%20luar.pdf, 11 Februari
2014: 144.
21. Amalia P. Efektivitas ekstrak batang
pisang mauli 25% pada proses
penyembuhan luka mukosa mulut. Skripsi.
Banjar Baru: 2014. Hal: 20
22. Indraswary R. Efek konsentrasi ekstrak
buah adas (Foeniculum vulgare Mill.)
topical pada epitelisasi penyembuhan luka
gingiva labial tikus sprague dawley in
vivo. Majalah Sultan Agung. Universitas
Islam Sultan Agung.
23. Chairunnisa A. Pengaruh aplikasi ekstrak
daun ceremai (Phyllanthus acidus (L.))
terhadap jumlah fibroblas pada hari ke-7.
Skripsi. Banda aceh: 2015. p. 29.
24. Sulistiawati IDAN. Pemberian ekstrak
daun lidah buaya (aloe vera)
konsentrasi75% lebih menurunkan jumlah
makrofag daripada konsentrasi 50% dan
25% pada radang mukosa mulut tikus putih
jantan. Tesis. Denpasar. 2011. p. 66.
25. Prabakti Y. Perbedaan jumlah fibroblas di
sekitar luka insisi pada tikus yang diberi
infiltrasi penghilang nyeri levobupivakain
dan yang tidak diberi levobupivakain.
Tesis 2005. p. 27.
26. Noorafiqi MI, Yasmina A, Hendriyono
FX. Efek jus buah karamunting
(melastoma malabathricum l.) terhadap
kadar trigliserida serum darah tikus putih
yang diinduksi propiltiourasil. Berkala
Kedokteran 2013; 9(2): 219-227.
27. Sura G, Carabelly AN, Apriasari ML.
Aplikasi ekstrak haruan (channa
striata)100% pada luka punggung mencit
(mus musculus) terhadap jumlah neutrofil
dan makrofag. Jurnal PDGI 2013; 62(2):
41-44.
28. Swarayana IMI, Sudira IW, Berata IK.
Perubahan histopatologi hati mencit (mus
musculus) yang diberikan ekstrak daun
ashitaba (angelica keiskei). Buletin veteriner
udayana 2012; 4(2): 119-125
29. Kusuma IGE, Arjana AAG, Berata IK.
Pemberian efective microorganism
terhadap gambaran histopatologi hati tikus
putih (rattus norvegicus) betina. Indonesia
medicus veterinus 2012; 1(5): 582-595.
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 29
30. Amalina HA, Muhartono, Fiana DN.
Pengaruh pemberian ekstrak etanol 40%
kulit manggis (garcina mangostana l.)
terhadap gambaran histopatologi ginjal tikus
putih yang diinduksi rifampisin. Jurnal
kedokteran UNILA 2014; 3(2): 91-99.
31. 31. Triyono B. Program perbedaan
tampilan kolagen di sekitar luka insisi
pada tikus wistar yang diberi infiltrasi
penghilang nyeri levobupivakain dan yang
tidak diberi levobupivakain. Tesis 2005. p.
25
32. 32. Watiniasih NL, Sudiarta P, Antara
NS. 2012. Praktek baik budidaya
tanaman tapak dara (Catharanthus roseus
(Linn.) Don). Denpasar: Tropical Plant
Curriculum Project Universitas Udayana.
p. 13-15.
33. Lulail J. Kajian hasil riset potensi
antioksidan di pusat informasi teknologi
pertanian fateta ipb serta aplikasi ekstrak
bawang putih, lada dan daun sirih pada
dendeng sapi. Skripsi. Bogor: 2009. p. 7-9.
34. Mawaddah R. Kajian hasil riset potensi
antimikroba alami dan aplikasinya dalam
bahan pangan di pusat informasi teknologi
pertanian fateta ipb. Skripsi. Bogor: 2008. p.
9-10.
35. Dian NI. Isolasi dan elusidasi struktur
senyawa turunan terpenoid dari kulit
batang slatri (Calophyllum soulattri Burm
f.). Skripsi. 2011. p. 13-14.
36. Fitriannur. Aktivitas antibakteri propolis
lebah Trigona spp. asal pandeglang terhadap
Enterobacter sakazakii. Skripsi. Bogor:
2009. p. 5.
37. Harjana, Tri. Pemanfaatan daun pepaya
(Carica papaya l) untuk pertumbuhan dan
efeknya pada gambaran histologi usus
halus tikus putih (Rattus norvegicus).
Prosiding Seminar Nasional Penelitian,
Pendidikan dan Penerapan MIPA
Yogyakarta: 2009. p. B-239.
38. Harjana, Tri. Kajian tentang penggunaan
tikus putih (Rattus norvegicus) untuk
pengujian bahan kontrasepsi tradisional.
Prosiding Seminar Nasional Penelitian,
Pendidikan dan Penerapan MIPA
Yogyakarta: 2009. p. 1.
39. Yudaniayanti IS, Maulana E, Ma'ruf A.
 Profil penggunaan kombinasi ketamin-
xylazine dan ketamin-midazolam sebagai
anestesi umum terhadap gambaran
fisiologis tubuh pada kelinci jantan.
Veterinaria Medika 2010; 3(1): 23-30.
40. Sayuti A, Maulizar R, Syafruddin, Erwin,
Frengky, Muttaqien et all. Efek
penggunaan ketamin-xilazin dan propofol
terhadap denyut jantung dan pernafasan
pada anjing jantan lokal (Canis familiaris).
Jurnal Medika Veterinaria 2016; 10(1):
34-36.
41. Ferdinandez MK, Dada IKA, Damriyasa
IM. Bioaktivitas Ekstrak Daun Tapak Dara
(Catharantus roseus) Terhadap Kecepatan
Angiogenesis dalam Proses Penyembuhan
Luka pada Tikus Wistar. Indonesia
Medicus Veterinus 2013; 2(2): 180-190.
42. Nurcahaya MI. Pengaruh ekstrak etanol
lidah buaya (Aloe vera) terhadap
peningkatan jumlah fibroblas pada proses
penyembuhan luka mukosa rongga mulut
tikus (Rattus norvegicus) strain wistar.
Skripsi. Surakarta: 2015. p. 35.
43. Velnar T, T Bailey, V Smrkolj. The
wound healing process: an overview of the
cellular and molecular mechanism. The
Jounal of International Medical Research
2009; 37 (5): 1528-1542.
44. Suryadi IA, Asmarajaya AAGN,
Maliawan S. Proses penyembuhan dan
penanganan luka. Denpasar. p. 3-4
45. Oroh CG, Pangemanan DHC,
Mintjelungan CN. Efektivitas lendir
bekicot (Achatina fulica) terhadap jumlah
sel fibroblas pada luka pasca pencabutan
gigi tikus wistar. Jurnal e-GiGi (eG) 2015;
J o u r n a l C a n i n u s D e n t i s t r y V o l . 2 , N o . 1 : 2 0 - 3 0 | 30
3(2): 515-519.
46. Kurniawan B, Aryana WF. Binahong
(Cassia alata L) as inhibitor of
Escherichia coli growth. J Majority 2015;
4(4): 100-1004.
47. Fitriyani A, Winarti L, Muslichah S dan
Nuri. Uji antiinflamasi ekstrak metanol
daun sirih merah (Piper crocatum Ruiz &
Pav ) pada tikus putih. Majalah Obat
Tradisional 2011; 16(1): 34-42.
48. Hidayati NA, Listyawati S, Setyawan AD.
Kandungan kimia dan uji antiinflamasi
ekstrak etanol Lantara camara L. pada
tikus putih (Rattus Novergicus L.) jantan.
Bioteknologi 2008; 5(1): 10-17.
49. Simanjuntak MR. Ekstraksi dan fraksinasi
komponen ekstrak daun tumbuhan
senduduk (Melastoma malabathricum L.)
serta pengujian efek sediaan krim terhadap
penyembuhan luka bakar. Skripsi. Medan:
2008. p. 6.
50. Istanti SF, Endah A, Arbiyanti K.
Pengaruh konsentrasi madu terhadap
perubahan warna gigi pada proses
pemutihan gigi secara in vitro. Odonto
Dental Journal 2014; 1(2): 25-28.
51. Hafidhah N. Pengaruh ekstrak biji kakao
(Theobroma cacao L.) Terhadap
pertumbuhan Enterococcus faecalis pada
berbagai konsentrasi. Skripsi. Banda aceh:
2015. p. 42.
52. Amaliya S, Soemantri B, Utami YW. Efek
ekstrak daun pegagan (Centella asiatica)
dalam mempercepat penyembuhan luka
terkontaminasi pada tikus putih (rattus
novergicus) galur wistar. Jurnal Ilmu
Keperawatan 2013; 1(1): 19-23.