Tesis: Muhammad Isman Sandira P1502216010

TESIS
HUBUNGAN ANTARA KADAR ENDOTHELIN-1 SERUM

DENGAN KEJADIAN LESI ATEROSKLEROSIS PADA TIKUS
WISTAR OBESITAS
THE CORRELATION OF ENDOTHELIN-1 SERUM LEVEL WITH

THE ATHEROSCLEROSIS LESION OF OBESE WISTAR RAT
MUHAMMAD ISMAN SANDIRA

P1502216010
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

SEKOLAH PASCASARJANA
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2018
i
TESIS
HUBUNGAN ANTARA KADAR ENDOTHELIN-1 SERUM
DENGAN KEJADIAN ATEROSKLEROSIS PADA TIKUS
WISTAR OBESITAS
THE CORRELATION OF ENDOTHELIN-1 SERUM LEVEL WITH

THE ATHEROSCLEROSIS LESION OF OBESE WISTAR RAT
Sebagai persyaratan untuk mempereh gear Magister
Disusun dan diajukan oleh
MUHAMMAD ISMAN SANDIRA

P1502216010
Kepada
PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

SEKOLAH PASCASARJANA
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2018
ii
iii
PERNYATAAN KEASLIAN TESIS
Yang bertanda tangan dibawah ini :
Nama : Muhammad Isman Sandira
NIM : P1502216010
Program Studi : Biomedik
Menyatakan dengan sebenarnya bahwa tesis yang saya tulis ini benar-benar
merupakan hasil karya saya sendiri, buka merupakan pengambilalihan tulisan atau
pemikiran orang lain. Apabila dikemudian hari terbukti atau dapat dibuktikan bahwa
sebagian atau keseluruhan tesis ini hasil karya orang lain, saya bersedia menerima
sanksi atas perbuatan tersebut.
Makassar, July 2018
Yang Menyatakan
Muhammad Isman Sandira
iv
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala nikmat dan
karunia yang Dia berikan kepada kami sehingga kami dapat menyelesaikan
penyususnan tesis ini. Selama penyusunan tesis ini, tidak lepas dari bantuan banyak
pihak. Penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada
1. Prof.Dr. Muhammad Ali, S.E., M.S selaku Dekan Sekolah Pascasarjana
Universitas Hasanuddin, Dr. dr. Andi Mardiah Tahir, Sp.OG (K) selaku ketua
program studi biomedik yang telah menginjinkan penulis menempuh pendidikan
di sekolah pascasarjana Universitas Hasanuddin.
2. dr. Aryadi Arsyad, M.Biomed, Ph.D selaku ketua konsentrasi Fisiologi dan
pembimbing kedua, Dr. dr. Irfan Idris, M.Kes selaku pembimbing pertama, yang
dengan penuh keikhlasan telah memberikan waktu, tenaga dan pemikiran dalam
membimbing penulis, sehingga tesis ini dapat diselesaikan dengan baik.
3. Prof. Dr. dr. Andi Wardihan Sinrang, MS., dr. Muhammad Husni Cangara, Ph.D.,
Sp.PA., DFM., dan Dr. dr. Ika Yustisia, M.Sc selaku penguji, yang telah
memberikan arahan dan bimbingan selama penyelesaian tesis ini.
4. dr. Isra Wahid, Ph.D. selaku kepala laboratorium entomologi FK Unhas
memberikan izin kami untuk melakukan penelitian di laboratorium Entomologi.
Seluruh staff laboratorium Entomologi Fakultas Kedokteran Universitas
Hasanuddin, Fadly, Umi, dan k Nana yang sangat membantu penulis selama
melakukan penelitian.
5. Kepala ruangan laboratorium Patologi Klinik RSUH, mba Yaumil, staf Patologi
Anatomi, k Tati, dan staf Laboratorium Mikrobiologi, k Safri, yang telah banyak
v
membantu kami dalam melakukan pemeriksaan varibel-variabel yang kami
lakukan.
6. Seluruh dosen kosentrasi Fisiologi, yang telah mendidik, membagikan ilmu dan
pengalaman Selama penulis menempuh pendidikan di Sekolah Pascsarjana
Universitas Hasanuddin. Seluruh staff dan pegawai akademik sekolah
Pascasarjana Universitas Hasanuddin yang telah membantu administrasi penulis
selama menempuh pendidikan.
7. Kepada Istri dan Anakku, Syadza Firdausiah dan Aika Hanifa Sandira, yang telah
memberikan motivasi dan semangat kepada saya dalam menjalani program
magister ini. Terkhusus istriku, Syadza, yang telah berbagi pengalaman dan
memberikan begitu banyak saran dan masukan kepada saya hingga saya bisa
melewati segala proses magister dengan lancar.
8. Teman-teman seperjuangan S2 Fisiologi angkatan 2016 untuk kebersamaan,
kekompakan, dan dorongan semangat selama penulis menempuh pendidikan S2.
9. Terima kasih paling mendalam untuk mama, k Ikbal, k Indah, k Mila, k Aswar, k
Iksan, dan k Raidah serta semua keluarga untuk banyak hal yang telah diberikan
bagi penulis selama ini. Baik doa, dana, semangat, pujian, teguran dan kasih
sayang yang memenuhi setiap langkah perjuangan penulis.
10. Semua pihak yang tak sempat penulis sebutkan satu persatu yang telah
membantu penulis menyelesaikan tesis ini.
Penulis menyadari bahwa tesis ini masih jauh dari kesempurnaan, Untuk itu
kritik, saran, dan penelitian selanjutnya sangat penulis harapkan untuk melengkapi
tesis ini. Akhir kata, semoga tesis ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Makassar, July 2018
Muhammad Isman Sandira
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL .............................................................................................................. i
HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................................. iii
PERNYATAAN KEASLIAN TESIS ......................................................................................... iii
PRAKATA .............................................................................................................................. iv
DAFTAR ISI ......................................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................................... x
ABSTRAK BAHASA INDONESIA ........................................................................................ xii
ABSTRAK BAHASA INGGRIS ............................................................................................. xiii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang ...................................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................. 2
1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................................... 2
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................................. 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Obesitas ................................................................................................................ 4
2.2 Aterosklerosis ....................................................................................................... 10
2.3 Endotelin-1 .......................................................................................................... 21
2.4 Hubungan Obesitas, Aterosklerosis, dan Endotelin-1 ............................................ 26
2.5 Kerangka Teori ...................................................................................................... 33
2.6 Kerangka Konsep .................................................................................................. 34
vii
2.7 Variabel Penelitian ................................................................................................. 34
2.8 Defenisi Operasional ............................................................................................. 34
2.9 Hipotesis Penelitian ................................................................................................ 3
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian .................................................................................................. 36
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................................ 36
3.3 Populasi ................................................................................................................ 36
3.4 Sampel dan Besaran Sampel ............................................................................... 36
3.5 Alat dan Bahan Penelitian ..................................................................................... 37
3.6 Izin Penelitian dan Kelaikan Etik ........................................................................... 37
3.7 Prosedur Kerja ...................................................................................................... 37
3.8 Alur Penelitian ...................................................................................................... 39
3.9 Rencana Pengolahan dan Analisis Data ............................................................... 39
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian ..................................................................................................... 41
4.2 Pembahasan ......................................................................................................... 47
4.3 Keterbatasan Penelitian ........................................................................................ 51
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan ........................................................................................................... 52
6.2 Saran ..................................................................................................................... 52
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN
viii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
2.1 Klasifikasi Histologi Aterosklerosis Berdasarkan AHA ......................................... 21
4.1 Hasil Pemeriksaan Indeoks Obestas Kontrol ....................................................... 40
4.2 Hasil Pemeriksaan Indeoks Obestas Perlakuan .................................................. 41
4.3 Hasil Pemeriksaan Kadar ET-1 Serum ................................................................ 42
4.4 Hasil Analisis Deskriptif Data Kadar ET-1 antar Kelompok .................................. 42
4.5 Hasil Analisis Pengaruh Obesitas Terhadap Kadar ET-1 .................................... 43
4.6 Hasil Penilaian Aterosklerosis ............................................................................. 45
4.7 Hasil Analisis Uji T Independen Obesitas dan Aterosklerosis

………………………….... 46
4.8 Hasil Analisis Pearson Hubungan Kadar ET-1 dengan Lesi Aterosklerosis ......... 46
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Keseimbangan Energi ......................................................................................... 6
2.2 Etiologi Obesitas ................................................................................................. 10
2.3 Peran ox-LDL dalam pembentukan ateroskerosis ............................................... 18
2.4 Struktur susunan asam amino masing-masing endothelin................................... 22
2.5 Peran Fisiologis ET-1 di masing-masing organ ................................................... 23
2.6 Proses biosintesis ET-1 ...................................................................................... 24
2.6 Proses biosintesis ET-1 ...................................................................................... 24
2.7 Efek ET-1 terhadap reseptornya ......................................................................... 26
2.8 Perubahan metabolik pada jaringan adipose....................................................... 27
2.9 Kerangka Teori ................................................................................................... 33
2.10 Kerangka Konsep ............................................................................................... 34
3.1 Alur Penelitian .................................................................................................... 39
4.1 Histologi Kontrol 1 ............................................................................................... 43
4.2 Histologi Obesitas 1 ............................................................................................ 43
x
4.11 KORELASI ANTARA JUMLAH DAN DIAMETER SEL BUSA DENGAN
KADAR ET-1 SERUM ...................................................................................................... 47
xi
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui hubungan antara kadar endotelin-1 serum
dengan lesi aterosklerosis aorta. Subjek penelitian menggunakan Tikus Putih (Ratus
Norvegicus) Wistar jantan yang berusia 30 hari sebanyak 10 ekor yang dibagi ke
dalam dua kelompok yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Kelompok
kontrol diberikan pakan standar sedangkan kelompok perlakuan diberikan pakan
tinggi lemak dan tinggi karbohidrat selama 150 hari. Pemeriksaan secara berkala
pada berat badan dan panjang tikus dilakukan untuk menghitung indeks obesitas.
Pemeriksaan ELISA dilakukan untuk menghitung kadar endotelin-1 sedangkan
pemeriksaan hitopatologi dilakukan untuk menghitung jumlah dan diameter sel busa
pada aorta. Data dianalisa dengan uji T Independen, MANOVA, dan Korelasi
Pearson. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat jumlah dan diameter sel
busa aorta yang lebih banyak (p>0.05) pada tikus obese, namun tidak terdapat
perbedaan yang bermakna pada kadar endotelin-1 serum pada kedua kelompok
(p>0.05). Lebih lanjut, terdapat hubungan positif yang cukup kuat antara kadar
endotelin-1 serum dengan jumlah (r=0.558) dan diameter (r=0.493) sel busa
walaupun kurang bermakna secara statistic (p>0.05). Penelitian ini memperlihatkan
bahwa obesitas berkaitan erat dengan terjadinya lesi aterosklerosis yang
berhubungan cukup kuat dengan kadar endotelin-1 serum.
Kata kunci: Obesitas, Endotelin-1, Aterosklerosis, Tikus Wistar
xii
ABSTRACT
This study aims to reveal the relation between level of endothelin-1 serum and aorta
atherosclerosis lesion. The subjects of this study were 10 male Wistar White Rats
(Ratus Norvegicus) divided in 2 groups namely control group and treatment group.
The control group was given standard feed while treatment group was given high fat
and carbohydrate feed for 150 days. The measurements of their weight and body
length were done routinely to calculate their obesity index. ELISA examination was
done to measure the endothelin-1 serum levels and histopathology examination was
used to count the quantity and diameter of aorta foam cells. The data was analyzed
by using Independent T, Mannova, and pearson correlation tests. The result shows
that there are more quantity and diameter of foam cells (p<0.05) in obese rats,
however there is no significant difference of endothelin-1 serum level in both of
group (p>0,05). Furthermore, there are enough strong positive correlation between
endothelin-1 serum levels and the foam cells quantity (r=0.558) and diameter
(r=0.493) though statistically it was less meaningful (p>0.05). This research reveals
that obesity is related with the event of atherosclerosis lesions which have enough
strong correlation with the level of endothelin-1 serum.
Keywords: Obesity, Endothelin-1, Atherosclerosis, Wistar Rat
xiii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Obesitas semakin menjadi persoalan kesehatan yang besar di seluruh dunia. Menurut
data WHO, pada tahun 2014 lebih dari 1.9 miliyar orang dewasa menderita kelebihan berat
badan dan 600 juta diantaranya mengalami obesitas (Who, 2017). Di Indonesia sendiri
terjadi kecenderungan peningkatan jumlah penderita obesitas baik pada laki-laki maupun
perempuan. Pada tahun 2013, terdapat 19.7% laki-laki menderita obesitas, dimana jumlah
ini meningkat dari 2010 yaitu 13.9%. Serupa dengan hal itu, terdapat 32.9% perempuan
menderita obesitas naik dua kali lipat dari tahun 2010 yang hanya 15.5% (Riskesdas,
2013).
Semakin meningkatnya jumlah penderita obesitas menjadi permasalahan besar
karena telah diketahui bahwa obesitas merupakan faktor resiko berbagai kondisi masalah
kesehatan seperti penyakit kardiovaskular, diabetes tipe 2, kanker, sindorom metabolik,
hipertesi, komplikasi dalam kehamilan, dll (Uzogara 2017; Kadouh & Acosta 2016).
Obesitas juga telah dikaitkan dengan peningkatan resiko mortalitas (Serra-majem et al.
2013). Selain itu, meningkatnya penyakit-penyakit yang merupakan komplikasi dari
obesitas telah menjadi beban ekonomi yang sangat besar di setiap negara (Kadouh &
Acosta 2016).
Telah diketahui bahwa obesitas merupakan salah satu faktor resiko kuat terjadinya
aterosklerosis. Aterosklerosis merupakan mekanisme utama yang mendasari terjadinya
penyakit jantung koroner dan serebrovaskular pada obesitas (Tabas et al. 2015; Lovren et
al. 2015). Penelitian yang dilakukan pada remaja dan dewasa muda mengungkap bahwa
obesitas mempercepat kejadian aterosklerosis pada arteri koroner (Mcgill et al. 2002). Timo
1
A. Lakka dkk, menemukan bahwa obesitas abdominal terutama ketika dikombinasi dengan
peningkatan level LDL serum berkaitan dengan percepatan pogresifitas kejadian
aterosklerosis arteri karotis pada pria (Mcgill et al. 2002).
Penyebab meningkatnya progresifitas aterosklerosis pada obesitas masih belum
diketahui dengan pasti, tetapi dapat diduga bahwa terdapat keterlibatan Endothelin 1 (ET-
1) terhadap terjadinya aterosklerosis pada obesitas. ET-1 adalah vasokonstriktor endogen
yang sangat kuat yang diproduksi utamanya oleh sel endotel vaskuler dan menstimulasi
kontraksi dari otot polos vaskuler dan otot jantung melalui interkasinya dengan reseptor
endotelin pada permukaan sel otot (Perez et al. 2016). Di berbagai organ tubuh, ET-1
bekerja sebagai parakrin ataupun autokrin terhadap dua buah reseptornya, yaitu Reseptor
Endotelin A (ETa) dan Reseptor Endotelin B (ETb) (Vignon-Zellweger et al. 2012; Shihoya et
al. 2016).
Keterlibatan ET-1 terhadap proses terjadinya aterosklerosis pada objek obesitas
didasarkan pada beberapa penelitian yang melaporkan bahwa terdapat peningkatan kadar
ET-1 pada penderita overwight dan obesitas (Weil et al. 2011; C. Ferri et al. 1995; Cardillo
et al. 2004) dan di lain sisi, telah diketahui bahwa ET-1 terlibat langsung dalam proses
terjadinya aterosklerosis baik pada hewan maupun pada manusia melalui berbagai
mekanisme, seperti inflamasi, stress oksidatif dll (Pernow et al. 2012; Fan et al. 2000).
Walaupun telah diketahui bahwa overweight dan obesitas dapat meniingkatkan kadar
ET-1 dan peran ET-1 dalam menyebabkan terjadinya proses aterosklerosis juga telah
dilaporkan oleh beberapa penelitian, namun penulis belum mendapatkan satupun
penelitian yang mengungkapkan hubungan langsung antara obesitas, peningkatan kadar
ET-1, dan kejadian aterosklerosis, sehingga hal inilah yang mendasari peneliti untuk
melihat hubungan antara kadar ET-1 dengan kejadian aterosklerosis pada tikus wistar
obesitas.
2
1.2 Rumusan Masalah
Bagaimana hubungan antara kadar ET-1 dengan aterosklerosis pada tikus wistar
obesitas?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan Umum
Dalam penelitian ini adalah untuk mengetahui hubungan kadar ET-1 dengan
kejadian aterosklerosis pada tikus wistar obesitas.
1.3.2. Tujuan Khusus
Tujuan khusus dalam penelitian ini adalah:
1.3.2.1 Mengetahui kadar ET-1 pada tikus wistar obesitas.
1.3.2.2 Mengetahui kejadian aterosklerosis pada tikus wistar obesitas.
1.3.2.3 Mengetahui hubungan kadar ET-1 dengan kejadian aterosklerosis pada tikus
wistar obesitas.
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Akademis
Jika pada penelitian ini terbukti bahwa peningkatan kadar ET-1 pada obesitas
meningkatkan kejadian aterosklerosis, maka dapat memberikan kontribusi ilmiah
berkaitan dengan kadar ET-1 sebagai pemicu terjadinya atrerosklerosis pada obesitas.
1.4.2 Manfaat Praktis
Jika terbukti peningkatan kadar ET-1 yang disebabkan oleh obesitas
meningkatkan kejadian aterosklerosis, maka dapat dilakukan usaha-usaha untuk
menekan kejadian aterosklerosis yang disebabkan oleh obesitas melalui pengontrolan
kadar ET-1.
3
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Obesitas
2.2.1 Defenisi Obesitas
Obesitas adalah kelebihan akumulasi lemak yang terjadi akibat ketidakseimbangan
antara asupan dan pengeluaran energi (Uzogara 2017). Obesitas merupakan sebuah
penyakit kronik dengan karakteristik perubahan komposisi tubuh dengan peningkatan
komponen adiposa yang meningkatkan berat badan (Serra-majem et al. 2013). Menurut
WHO, obesitas adalah kondisi medis yang kompleks yang dikarakteristikkan sebagai
kelebihan akumulasi lemak yang abnormal sebagai hasil dari peningkatan energi
makanan yang masuk dan menurunnya aktivitas fisik.
Body mass index (BMI) atau Index Massa Tubuh (IMT) adalah salah satu metode
yang paling popular untuk menilai obesitas. Seseorang dikatan menderita obesitas, jika
memilik IMT lebih dari atau sama dengan 30 kg/m2 (Uzogara 2017). Untuk kriteria Asia
Pasifik, seseorang dikategorikan sebagai overweight jika memiliki IMT 23-24,9 dan
seseorang dikatakan obesitas jika memiliki IMT ≥ 25.
Sedangkan menurut Depkes RI, Seseorang dikategorikan overweight jika BMI > 25
dan obesitas jika BMI > 27 (Kemenkes, 2013). Namun, pengukuran IMT hanya menilai
berat badan bukan komposisi lemak tubuh. Padahal diketahui bahwa komplikasi dari
obestas seperti diabetes, hipertensi, penyakit jantung dll adalah disebabkan oleh
kelebihan lemak bukan berat badan (Kadouh & Acosta 2017).
Sehingga menjadikan BMI sebagai faktor utama dari munculnya komplikasi masih
menjadi perdebatan. Distribusi lemak dan fungsi jaringan adiposa pada setiap individu
memiliki peran penting dalam menyebabkan munculnya komplikasi. Seseorang yang
memiliki berat badan normal dengan massa lemak di daerah subkutan yang rendah
4
tetapi memilik massa lemak viseral yang tinggi memiliki peningkatan resiko terjadinya
penyakit kardiometabolik, sedangkan penderita obesitas yang sensitif terhadap insulin
masih terlindungi terhadap penyakit metabolik terkait obesitas (Marinou et al. 2010).
Pada penelitian lain juga menunjukkan bahwa pengurangan secara signifikan massa
lemak pada subkutan melalui liposuction tidak memperbaiki sirkulasi metabolik dan
parameter inflmasi, sedangankan pengurangan massa lemak visceral oleh
omentotectomy memiliki keuntungan signifikan dan efek jangka panjang pada sensitfitas
insulin terhadap orang-orang yang obesitas. (Kadouh & Acosta 2017).
2.2.2 Etiologi Obesitas
Keseimbangan energi ditentukan oleh energi yang masuk, energi yang keluar, dan
energi yang disimipan. Energi diperoleh melalui makronutrien (karbohidrat, protein,
lemak) yang terdapat dalam makanan. Energi dikeluarkan melalui tiga proses metabolik
yaitu basal metabolic rate (BMR) atau laju metabolik basal, metabolismee yang terjadi
untuk mencerna makanan, dan metabolismee untuk aktifitas fisik yang merupakan faktor
terpenting dalam pengeluaran energi (Kayser & Verges 2013; Kadouh & Acosta 2016).
Homeostasis energi tercapai ketika energi yang masuk seimbang dengan energi
yang dikeluarkan yang dapat terlihat dari berat badan yang stabil. Apabila energi yang
masuk lebih besar dari pada energi yang keluar, maka akan menyebabkan
keseimbangan energi positif dan berdampak pada peningkatan berat badan, khususnya
didominasi oleh massa lemak (Comuzzie et al. 2012).
Obesitas merupaka penyakit kronik yang sangat kompleks dimana peran gen,
prilaku dan interaksi antara keduanya sangat mempengaruhi yang menghasilkan
kesimbangan energi positif (Comuzzie et al. 2012). Semakin dipahami dengan baik
bahwa terdapat peran genetik terhadap obesitas. Namun, peningkatan angka kejadian
obesitas yang begitu signifikan dalam dua dekade terakhir tampaknya tidak dapat
dijelaskan oleh perubahan genetik karena tejadi dalam waktu singkat. Oleh karena itu,
5
selain faktor genetik, kejadian obesitas sangat dipengaruhi oleh faktor lingkungan dan
prilaku, khususnya meningkatnya konsumsi kalori dan menurunnya aktifitas fisik
(Kadouh & Acosta 2017; Atkinson 2014; Serra-majem et al. 2013).
Gambar 2.1: Keseimbangan Energi (Kadouh & Acosta 2017)
2.1.2.1 Faktor Biologi
2.1.2.1 Genetik
Terdapat bukti yang kuat bahwa BMI salah satunya sangat ditentukan oleh
gen dengan estimasi kira-kira antara 40%-70%. Heritabilitas (daya waris) obesitas
berimplikasi terhadap semua aspek homeostasis energi seperti asupan makanan,
metabolismee dalam pencernaan makanan, dan laju metabolik dasar. Selain itu,
terdapat bukti bahwa genebehavior memiliki peran dalam obesitas. Hal tersebut
menunjukkan bahwa bervariasinya gen yang terlibat dalam terjadinya obesita
(Hinney et al. 2010; Ramachandrappa & Farooqi 2011).
Mutasi dari gen ob (leptin) yang mengkode peptida leptin diketahui dapat
menyebabkan obesitas yang berat pada tikus. Selain itu, para peneliti telah
menemukan lebih dari 300 jenis gen dan penanda gen yang terkait dengan
6
obesitas dan tampaknya berinteraksi dengan lingkungan untuk dieskpresikan dan
menghasilkan obesitas (Ramachandrappa & Farooqi 2011; Marinou et al. 2010;
Kadouh & Acosta 2016).
2.1.2.2 Gangguan Aksis Otak-Usus
Aksis otak-usus mengontrol konsumsi makan sebagai respon pada sinyal
homeostasis dan nonhomeostasis. Pada keadaan homeostasis, nukleus arkuata
pada hipotalamaus mengintegrasikan saraf, nutrisi dan signal hormonal untuk
meregulasi rasa lapar dan kenyang melalui pusat yang lebih tinggi di daerah
korteks yang menyampaikan sinyal ini untuk menstimulasi sistem persarafan
simpatis dan parasimpatis, fungsi lambung, dan sekresi hormone (Hussain &
Bloom 2012; Kayser & Verges 2013).
Terdapat bukti bahwa perubahan pada aksis otak-usus dapat menyebabkan
terjadinya obesitas. Obesitas dikaitkan dengan penurunan rasa lapar, volume
lambung puasa yang tinggi, pengosongan lambung yang cepat, menurunnya
kadar hormon yang terkait rasa lapar, menurunnya kadar glucagon-like peptide-1
dan kolesistokinin, kadar acyl-ghrelin yang meningkat dan resistensi lepitin
(downregulasi reseptor). Namun, masih belum jelas apakah perubahan aksis otak-
usus yang berkaitan dengan kelebihan konsumsi makanan merupakan penyebab
atau efek dari obesitas. Masih dibutuhkan banyak penelitian untuk mengungkap
hal tersebut (Hussain & Bloom 2012; Kadouh & Acosta 2017).
2.1.2.3 Mikrobioma Usus
Terdapat sekitar 100 trilyun mikroorganisme di dalam usus manusia dan
hewan. Mikrobiota ini mampu untuk mensekresi atau merubah produksi dari
molekul-molekul yang berefek pada keseimbangan energi (pertambahan atau
7
penurunan berat badan) dan penyimpanan energi (massa lemak). Dalam konteks
ini, mikrobiata dapat dianggap sebagai organ entero-endocrine (endokrin didalam
usus) (Rosenbaum et al. 2015).
Firmicutes dan bacteroidates merupaka dua spesies bakteri yang paling
banyak dalam usus manusia, dimana proprosi jumlah dari keduanya diketahui
berpengaruh terhadap obesitas. Selain itu, probiotik seperti lactobacillus diketahui
dapat menurunkan berat badan dan lemak tubuh tanpa mempengaruhi masukan
energi. Beberapa mekanisme telah diketahui bagaiamana mikoribiota usus dalam
mempengaruhi keseimbangan energi walaupun belum banyak diteliti (Rosenbaum
et al. 2015).
2.1.2.4 Penyebab Biologikal Lainnya
Selain beberapa penyebab diatas, faktor prenatal, kehamilan, menopause,
beberapa obat tertentu, virus, kondisi neuronedokrin tertentu, dan disabilitas juga
berberpan penting dalam perkembangan obesitas.
2.1.2.2 Faktor Lingkungan
2.1.2.2.1 Lingkungan Obesogenik
Lingkungan obesogenik adalah sejumlah pengaruh seperti lingkungan,
peluang, atau kondisi yang mendukung seseorang atau populasi menderita
obesitas. Lingkungan obesogenik dianggap sebagai pendorong utama semakin
meningkatnya kejadian obesitas diseluruh dunia. Salah satu aspek dari
lingkungan obesogenik adalah built environment (lingkungan binaan) (Caballero
2017; Sciences et al. 2006).
Built environment merepresentasikan kindisi kerja dan tempat tinggal dimana
hal tersebut bersama-sama akan mempengaruhi terhadap konsumsi makanan
dan aktivitas fisik. Salah satu contoh yang menunjukkan bagaiaman built
envorenment berefek pada keseimbangan energi adalah mekanisasi dan
8
otomatisasi yang sangat mengurangi jumlah energi yang kita keluarkan untuk
menjalankan aktivitas dasar dan pada kerja (Caballero 2017).
2.1.2.2.2 Sosial dan Budaya
Terdapat hubungan terbalik antara status sosioekonomi dan kejadian
obesitas di Amerika atau ditempat lainnya. Hubungan ini dilihat dari dampak
faktor sesioekonomi seperti melimpahnya makanan pada lingkungan yang telah
disebutkan di atas selain fakotr social lainnya seperti pendidikan khususnya
pendidikan gizi. Tingkat obesitas juga dipengaruhi oleh etnis dan jenis kelamin.
Misalnya, morbiditas pada obesitas lebih banyak terjadi pada wanita daripada
pria, dan umunya terjadi orang dewasa kulit hitam, diikuti oleh orang dewasa kulit
putih, Asia, dan Hispanik (Kadouh & Acosta 2016).
Factor budaya juga terlihat berperan dalam kejadian obesitas. Budaya yang
dimaksud adalah kepercayaan, dan perilaku berbagai kelompok sosial, etnis,
atau usia yang berbeda. Oleh karena itu, budaya dapat membentuk nilai dan
norma yang pada gilirannya mempengaruhi perilaku kesehatan seseorang dan
berat badan. Misalnya, wanita kulit putih lebih cenderung mengalami
ketidakpuasan terhadap tubuh mereka dan merasa kelebihan berat badan
dibanding wanita kulit hitam dan Hispanik (Kadouh & Acosta 2016).
2.1.2.2.3 Kimia Lingkungan
Sebuah hipotesis lingkungan obesogenik menyatakan bahwa seseorang
yang mulai terekspos pada masa kehamilan atau awal kehidupan terhadap
berbagai substan seperti endocrine-disrupting chemicals (EDCs) dapat menjadi
predisposisi meningkatnya massa lemak dan berat badan berlebih. Beberapa zat
kimia yang telah diteliti yang memungkinkan bekembangnya obesitas adalah
9
dietylsilbestrol, bisphenol A, phthalates, organotins, polybrominated diphenyl
eters, polyfluoroalkyl chemicals, Peroxisome proliferator-activated receptors dan
banyak lagi yang masih dalam tahap penelitian (Desvergne et al. 2009; Kelishadi
et al. 2013).
2.1.2.3 Faktor Prilaku
Peningkatan kejadian obesitas dalam dua dekade terakhir di banyak Negara
menunjukkan bahwa genetik bukanlah menjadi faktor utama, melainkan akibat
dari perubahan sikap dan gaya hidup di berbagai sektor kehidupan pada populasi
yang menyebabkan ketidakseimbangan antara total energi yang masuk dan
energi yang dikeluarkan (Kearney 1999). Berdasarkan pada indikator biologi,
banyak faktor dari gaya hidup yang diasosiasikan dengan pertumbuhan obesitas
pada remaja, sepert aktivitas fisik, pola makan, merokok, minuman, dan kejadian
awal pada masa janin dan pertumbuhan pada masa kanak-kanak (Kemper et al.
1999).
10
Gambar 2.2 : Etiologi Obesitas (Kadouh & Acosta 2016)
2.2 Aterosklerosis
2.2.1 Defenisi
Aterosklerosis merupakan penyakit multifaktorial yang melibatkan genetik, diet,
dan gaya hidup (Zaina et al. 2014). Walaupun penyebab pasti terjadinya aterosklerosis
masih belum diketahui, tetapi beberapa keadaan ataupun perilaku tertentu dikaitkan
dengan peningkatan kejadian aterosklerosis, seperti faktor genetik (Gisterå & Hansson
2017), peningkatan kadar LDL, penurunan kadar HDL darah, hipertensi, obesitas,
merokok, diabetes militus, gaya hidup yang tidak aktif secara fisik (Aziz 2016; Kopaei et
al. 2014; Rocha & Libby 2009), apolipoprotein b dan penuaan (Wang & Bennett 2012).
Adapun proses-proses yang mendasari tejadinya aterosklerosis adalah inflamasi kronik,
disfungsi endotel (Mudau et al. 2012; Jr & García-cardeña 2016), stress oksidatif (Idris-
Khodja et al. 2016), infeksi virus atau bakteri, faktor pembekuan darah, dll (Aziz 2016).
2.2.2 Faktor Resiko dan Kondisi Yang Mendasari
2.2.2.1 Genetik
Faktor genetik memiliki peran penting pada aterosklerosis dan genome-wide
association studies (GWAS) telah mengidentifikasi beberapa single nucletida
polymorphisms (SNPs) yang dihubungkan dengna peningkatan resiko penyakit
arteri koroner. Telah diidentifikasi bahwa gen lokus 9p21 sangat erat berkaitan
dengan ateroskelrosis. Makanisme dari kebanyakan gen yang diidentifikasi
masih belum diketahui, walaupun beberapa gen diduga memainkan peran pada
metabolisme lipoprotein atau aterotrombosis (Gisterå & Hansson 2017).
11
Beberapa dari gen yang telah diidentifikasi oleh GWAS dapat diakaitkan
dengan inflamasi, seperti gen pada major histocompability complex (MHC).
Regulasi dari ekspesi MHC juga dihubungkan dengan infark miokard dan human
leukosit antigen (HLA) tertentu akan meningkatkan resiko terjadinya infark
miokard. Semua temuan ini menunjukkan bahwa, terdapat peran yang sangat
kompleks dari berbagai gen terhadap kejadian aterosklerosis (Gisterå & Hansson
2017).
2.2.2.2 Peningkatan Kadar Kolesterol
Kolesterol merupakan zat larut lemak dan bahan dasar dari hormone-
hormon steroid. Kolesterol juga merupakan komponen utama dari membrane sel.
Terdapat dua sumber kolesterol, sintetik dan yang diperoleh dari makanan.
Setengah dari kolesterol tubuh diperoleh dari proses sintesis utamanya oleh hati.
Walaupun hampir semua jaringan juga dapat memproduksi kolesterol (Kopaei et
al., 2014; Nasri, 2013;).
Kolesterol diserap melalui saluran limfa usus halus dalam bentuk kilomikron
kemudian dirubah menjadi asam lemak dan gliserol di dalam kapiler oleh enzim
protein lipase dan ketika masuk ke dalam sel akan diesterifikasi. Esterifikasi
meningkatkan sintesis kolesterol dan menurunkan sintesis resptor LDL. Jika
kolesterol dalam tubuh berlebih, sintesis kolesterol akan dihambat oleh 3-
hidroksil-3-metilglutaril-CoA reduktase. Semua tahapan itu diregulasi oleh sistem
kontrol umpan balik negatif (Kopaei et al. 2014).
Hiperkolesterolemia dapat menyebabkan disfungsi endotel melalui beberapa
mekanisme yaitu meningkatkan produksi radikal bebas di pembulih darah seperti
NADPH oksidase dan meningkatkan produksi asymmetric dimethylarginine
(ADMA) dimana merupakan inhibitor endogen dari eNOS yang pada akhirnya
akan menurunkan sintesis dan pelepasan zat-zat vasodilator dari sel endotel.
12
Selain itu, kolesterol juga akan meningkatkan deaktifasi nitric oxide (NO) setelah
dilepaskan dari sel endotel (Mudau et al. 2012; Kopaei et al. 2014).
2.2.2.3 Apolipoprotein dan Lipoprotein
Kadar kolesterol total menunjukkan keseluruhan kadar kolesterol
teresterfikasi dan kolesterol tidak terserfikasi. Kadar Trigliserida dan kolesterol
memberikan informasi tentang lipoprotein serum. Konsenterasi yang tinggi dari
beberapa lipoprotein plasma dikaitkan dengan aterogenesis (Glass & Witztum
2001; Kopaei et al. 2014). Lipoprotein ateromagen termasuk very low density
lipoprotein (VLDL), low density lipoprotein (LDL), dan lipoprotein densitas
sedang. Kolesterol ester ditemukan pada sel atheroma dan matiks ekstraseluler.
Mereka dapat meyebabkan fibroblast memproduksi kolagen (Kopaei et al. 2014).
Terdapat beberapa kategori utama dan berbagai subkategoi untuk
apolipoprotein. Apolipoprotein B atau ApoB bertanggung jawab dalam
pembentukan LDL yang dikenal sebagai kolesterol jahat yang secara ireversibel
berasosiasi dengan lipid droplets. ApoB merupakan transporter utama untuk
membawa kolesterol ke berbagai kompartemen tubuh. Fungsinya adalah
berikatan dengan reseptor LDL. Peningkatan kadar ApoB dapat membentuk plak
yang menyebabkan aterosklerosis. Telah diteliti bahwa kadar ApoB plasma
mengindikasikan resiko penyakit jantung lebih akurat dari pada kadar LDL serum
atau kolesterol total (Williams & Bore 2016; Kopaei et al. 2014).
Kadar HDL serum dihubungkan dengan resiko pertumbuhan aterosklerosis
melalui mekanisme yang kompleks. Efek utama dari HDL adalah sebagai
transporter untuk membawa kolesterol dari jaringan perifer menuju ke hati,
dimana akan di eksresikan melalui sistem biliaris. Selain itu, HDL memiliki
beberapa efek fisiologis lain yang berperan dalam menurunkan resiko
aterosklerosis. HDL tampak memberikan efek menguntungkan pada fungsi
13
trombosit, fungsi sel endotel, parameter koagulan, inflamasi dan berinteraksi
dengan lipoprotein kaya trigliserida. Beberapa penelitian juga menunjukkan
bahwa kolesterol HDL memiliki efek antioksidan yang signifkan yang dapat
berkontribusi besar untuk mencegah berkembangnya aterosklerosis (Feig et al.
2014; Bandeali & Farmer 2012).
Selanjutnya, LDL teroksidasi juga memainkan peran penting dalam proses
aterosklerosis, dimana LDL teroksidasi akan mengaktifasi sel T dan makrofag,
menstimulasi ekspresi adhesi molekul, manarik makrofag menuju retikulum
sarkoplasma dan memproduksi sel foam (Gómez et al. 2014; Wang & Bennett
2012; Gisterå & Hansson 2017; Kopaei et al. 2014).
2.2.2.4 Disfungsi Endotel
Sel endotel memainkan peran penting dalam regulasi fungsi vaskuler
dengan memprodiksi beberapa substansi biologi aktif yang berpartisipasi pada
tonus vaskuler, pertumbuhan sel, inflamasi, dan homeostasis. Disfungsi pada sel
endotel vaskuler merupakan temuan awal dari pertumbuhan penyait
kardiovaskuler dan dikaitkan erat dengan kejadian aterosklerosis dan hipertensi
(Böhm & Pernow 2007).
Disfungsi endotel merujuk pada kondisi penurunan bioavailabilitas yang
menyebabkan kerusakan efek vasodilator dari faktor relaksasi yang berasal dari
sel endotel seperti nitric oxide, prostasiklin, atau faktor hiperpolariasasi yang
berasal dari sel endotel. Perubahan penting lainnya dari disfungsi endotel adalah
peningkatan produksi dan aktivitas biologi dari vasokonstriksi kuat dan peptida
proinflamasi, ET-1 (Böhm & Pernow 2007).
2.2.2.5 Inflamasi
Terdapat banyak bukti yang menunjukkan bahwa penanda inflmasi dikaitkan
dengan penyakit arteri koroner. Sebagai contoh salah satu protein pentraxin,
14
CRP, dapat menunjukkan informasi yang lebih akurat daripada faktor resiko lain.
CRP diketahui meningkat pada pasien dengan infark miokard, menunjukkan
bahwa terdapat peran inflamasi pada iskemik miokardium. Peningkatan kadar
reaktan fase akut seperti fibrinogen dan CRP dapat menggambarkan inflmasi
ekstravaskuler yang dapat mempercepat aterosklerosis dan komplikasinya,
namun CRP tampaknya bukan merupakan faktor peyebab aterosklerosis.
(Gisterå & Hansson 2017; Kopaei et al. 2014).
Kadar CRP meningkat selama inflamasi karena pengaruh dari IL-6 yang
diproduksi oleh makrofag dan adiposit dimana CRP meningkatkan kemampuan
makrofag untuk memfagosit sel yang rusak. Penelilitian terbaru menunjukkan
bahwa pasien dengan kadar CRP yang tinggi memeiliki kecenderungan untuk
terkena diabtes militus, hipertensi, dan penyakit kardiovaskuler. Sel-sel yang
berperan dalam pembentukan plak aterosklerosis (monosit, sel otot polos, dan
sel T) menstimulasi produksi IL-6, complement faktors (C19-C3-C5-C9), sitokin,
CRP, dan NO (Kopaei et al. 2014).
CRP terutama diproduksi di hati dan produksinya diatur oleh IL-6. Sejumlah
kecil CRP juga diproduksi secara lokal pada sel limfosit. Makanisme inflamasi
memiliki peran yang penting pada setiap proses aterosklerosis. CRP memiliki
peran pada setiap tahap melalui proses langsung yang efektif seperti aktivasi
sistem imun komplemen, absorbsi, aktivitas dan modulasi selular, akumulasi
lemak dan trombosis (Setorki et al. 2011).
2.2.2.6 Stress Oksidatif
Stress oksidatif merupakan ketidakseimbangan antara produksi dan
inaktivasi dari reactive oxygen species (ROS) atau antara produksi ROS dan
antioksidan. Ketidakseimbangan tersebut adalah salah satu faktor penting yang
dapat menyebabkan penyakit vaskuler (Peluso et al. 2012; Idris-Khodja et al.
15
2016).. Produksi ROS berlebih akan merusak fungsi sel endotel dengan
menurunkan bioavibilitas NO dan merangsang remodeling vaskuler dengan
meningkatkan proliferasi dan hipertrofi sel (Idris-Khodja et al. 2016).
ROS merupakan sebuah terminologi yang bukan hanya diperuntukkan
kepada radikal oksigen, seperti superoxide, hydroxyl radical, dan peroxyl, tetapi
juga untuk beberapa turunan oksigen yang tidak mengandung elektron tidak
berpasangan seperti hydrogen peroxide dan hypochlorous acid yang diproduksi
oleh sel inflamasi. Meningkatnya produksi ROS dapat berasal dari proses
eksogen seperti polusi dan rokok atau dapat bersumber dari sumber endogen
seperti respon inflamasi terhadap leukosit termasuk NADPH-oksidase yang
dapat menginduksi nitric oxide synthase (iNOS) dan aktivasi myeloperoxidase
(MPO) (Peluso et al. 2012; Singh & Jialal 2006).
2.2.3 Patomekanisme
Proses aterosklerosis merupakan penyakit inflamasi kronis dan melalui beberapa
tahapan, yaitu pembentukan Fatty Streak, pembentukan Ateroma, dan yang terakhir
pembentukan plak aterosklerosis (Aziz 2016; Kopaei et al. 2014).
2.2.3.1 Pembentukan Fatty Streak
Penelitian pada hewan dan manusia menunjukkan bahwa fatty streak
adalah tanda awal dari aterosklerosis. Lesi permulaan biasanya disebebakan
oleh peningkatan fokal pada lipoprotein di lapisan intima arteri. Partikel-partikel
lipoprotein tersusun atas protein, fosfolipid, dan beberapa jenis lemak seperti
kolesterol dan trigliserida. Kolesterol yang paling berpengaruh pada aterogenik
adalah low density lipoprotein (LDL). Lipoprotein ini dapat terakumulasi di lapisan
intima vaskuler disebebkan oleh kemampuannya untuk menginfiltrasi ke dalam
16
endotel dan melekat pada komponen matriks ekstra selular seperti proteoglikan
(Aziz 2016; Kopaei et al. 2014).
Lesi awal dari ateroskelrosis pada arteri karotis berkembang pada area
lengkungan utama (sinus karotis) yang mudah mengalami tubrulensi aliran
darah. Sel endotel pada daerah ini menunjukkan sebuah fenotip ateroprone,
dimana akan mendorong lingkungan yang proinflamasi melalui jalur NF-ĸB yang
kemudian terus menerus akan berespon terhadap apoB lipoprotein subendotel.
Aktivasi NF-ĸB akan menyebabkan sel monosit dapat melewati celah di antara
sel endotel dan masuk ke dalam sel intima vaskuler (Tabas et al. 2015; Aziz
2016).
Sealain itu, turbulensi aliran darah juga menyebabkan gangguan
keseimbangan pada berbagai komponen dari matriks pada daerah percabangan
tersebut. Sebagai contoh, diantara tiga kelompok utama dari proteoglikan,
terdapat peningkatan relatif pada molekul heparin sulfat dibandingkan dengan
keratin sulfat dan kondroitin sulfat yang menyebabkan perlekatan lipoprotein dan
memperlambat proses keluarnya dari lapisan intima. Hal tersbut akan
menyebabkan LDL akan terakumulasi dengan lebih cepat di dalam vaskuler
(Kopaei et al. 2014).
Walaupun telah dikatakan bahwa sel foam merupakan tanda awal dari
pertumbuhan aterosklerosis, namun pada bebereapa penelitian ditemukan
bahwa sifat dari sel foam adalah sebuah proses yang reversible. Penilaian
aterosklerosis yang dilakukan pada usia muda, menunjukkan dengan jelas
bahwa lesi pada aorta throcic, aorta abdominal ventral, dan lesi pada arteri
koroner kanan dapat berukurang dengan meningkatnya umur. Beberapa
penelitian yang menggunakan mikorskop video telah menunjukkan bahwa
17
makrofag foam dapat meninggalkan dinding arteri dari daerah antara sel endotel
menuju ke lumen (Sakakura et al. 2013).
Berikut tahapan pembentukan fatty streak (Kopaei et al. 2014):
2.2.3.1.1 Retensi dan Oksidasi LDL
Tahap pertama dari aterogenesis adalah terjebaknya lipoprotein ke
dalam lesi. Waluapun LDL tidak dapat melewati sel endotel, LDL dapat
masuk dengan cepat ke dalam sel endotel dengan endositosis. Pada
kondisi normal, terdapat keseimbangan antara konsentrasi LDL plasma
dan LDL intraseluler. Dengan peningkatan lemak plasma, lipoprotein yang
masuk ke dalam vaskuler secara biokimia akan dimodifikasi oleh enzim
protease dan lipase, sehingga banyak dari partikel ini yang terjebak ke
dalam lapisan intima (karena peningkatan matriks proteoglikan yang
memiliki afinitas yang tinggi dengan LDL). (Gisterå & Hansson 2017;
Kopaei et al. 2014).
LDL tersebut kemudian dioksidasi oleh platelet (Carnevale et al.
2014), myeloperoxidase, lipooxigenase, dan ROS yang menyebabkan
terbentukannya LDL teroksidasi (ox-LDL) (Gisterå & Hansson 2017). Ox-
LDL merupakan zat utama yang merangsang terjadinya aktivasi dan
cedera pada sel endotel yang akan menghasilkan respon inflamasi. Hal
tersebut kemudian menyebabkan rekrutmen, aktivasi, dan migrasi dari
monosit melalui celah sel endotel menuju daerah subendotel. Selain itu
ox-LDL juga menghambat ekspresi NOS, menginduksi ekspresi molekul
adhesi dan menstimulasi pembentukan kolagen di jaringan fibroblast
(Mitra et al. 2011).
18
Gambar 2.3: Peran ox-LDL dalam pembentukan ateroskerosis (Mitra et al. 2011)
2.2.3.1.2 Aktivasi Sel Endotel
Aktivasi sel endotel adalah kondisi dimana sel endotel
mengekspresikan berbagai molekul adhesi pada permukaan sel seperti,
Vascular cell adhesion protein 1 (VCAM-1), ICAM-1 dan molekul adhesi
leukosit endotel (ELAM, dikenal sebagai E-selection). Aktivasi sel endotel
disebabkan oleh rangsangan sitokin-sitokin proinflamasi seperti TNF-α
dan IL-6, ox-LDL, dan ET-1 yang menyebabkan leukosit pada sirkulasi
akan diarahkan dan melekat pada dinding vaskuler (Liao 2013; Gisterå &
Hansson 2017).
Selain molekul adhesi, beberapa chemokines juga terlibat dalam
rekrutmen monosit seperti monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1),
dimana ekspresinya dirangsang oleh ox-LDL (Pirillo et al. 2013).
Penurunan kadar MCP-1 dilaporkan dapat mencegah rekrutmen
makrofag dan berefek terhadap perkembangan lesi aterosklerosis. Hal
19
tersebut menunjukkan peran MCP-1 pada tahap awal pertumbuhan
ateroskerosis (Wilson et al. 2015).
Monosit yang masuk kemudian akan berdeferensiasi menjadi
makrofag sebagai respon terhadap macrophage colony-stimulating faktor
dan granulocyte-macrophage colony stimulating faktor, yang diproduksi
oleh sel endotel dan beberapa sel lainnya (Gisterå & Hansson 2017).
Diferensiasi monosit menjadi makrofag menyebabkan mereka memfagosit
LDL yang teroksidasi (Ox-LDL) menjadi bentuk sel foam. Proses ini
tergantung pada ekspresi dari reseptor untuk membersihkan enzim yang
disekresi dan berbagai sitokin (Swirski & Nahrendorf 2013; Kopaei et al.
2014).
2.2.3.1.3 Pembentukan Sel Foam
Makrofag yang memfagosit lipid bertujuan sebagai respon protektif
untuk mencegah perkembangnya aterosklerosis, namun jika kadar LDL
berlebih dapat memberikan efek buruk bagi tubuh. Beberapa lemak yang
difagosit oleh makrofag akan meninggalkan dinding arteri dan membawa
lemak keluar dari arteri. Namun, ketika kadar lemak yang masuk lebih
banyak dari pada sel fagosit akan menyebabkan akumulasi lemak dan
kecenderungan untuk membentuk atheroma akan meningkat. Peran
makrofag dalam memfagosit Ox-LDL tergantung pada scavenger
receptors (Swirski & Nahrendorf 2013; Kopaei et al. 2014).
Beberapa sel foam saat pertumbuh lesi di lapisan intima akan mati
melalui proses apoptosis. Apoptosis ini membentuk nukleus yang mati
kaya akan lemak pada inti dari plak aterosklerosis. Selain memproduksi
sel foam, monosit dapat memproduksi beberapa substan sitotoksik seperti
tumor necrosis faktor (TNF), faktor pertumbuhan, substan prakoagulan,
20
dan radikal bebas. Substan-substan tersebut dapat menyebabkan
kerusakan yang lebih banyak pada sel endotel dan juga Ox-LDL yang
akan menyebabkan perubahan metabolic (Kopaei et al. 2014).
2.2.3.2 Pembentukan Ateroma
Pada tahap selanjutnya adalah migrasi dari sel otot polos vaskuler dari
lapisan media menuju intima, proliferasi, dan pembentukan plak. Migrasi sel otot
polos vaskuler ini difasilitasi oleh matrix metalloproteinases (MMPs) khususnya
MMP-9 (Johnson 2017). Selain itu, beberapa sitokin dan faktor pertumbuhan
seperti interleukin 1 (IL-1) dan TNF yag disekresi oleh perbatasan antara sel otot
polos dan endotel juga diduga berperan dalam memfasilitasi migrasi sel otot
polos (Kopaei et al. 2014).
Sel otot polos yng bermigrasi ini akan memproduksi matriks ekstraseluler
oleh rangsangan dari transforming growth faktor (TGF)-β untuk membentuk
kepala fibrosus (Sakakura et al. 2013). TGF- β juga mematangkan kolagen
ekstraseluler (Gisterå & Hansson 2017). Hal ini bertujuan untuk mempertahankan
stabilitas plak melalui pembentukan kepala fibrosus yang akan melapisi inti
lemak (Johnson 2017). Kepala fibrosus terdiri dari jaringan serat kaya kolagn, sel
otot polos, makrofag, dan limfosit T. Kesemuanya membentuk plak aterosklerotik
yang matang dan menonjol ke dalam lumen vaskuler (Johnson 2017; Lim & Park
2014; Kopaei et al. 2014).
Makrofag dan limfosit T ditemukan di tepi dari plak. Makrofag mensekresi
metaproteinase yang berkontribusi untuk melisiskan matriks ekstra seluler. Sel T
memproduksi TNF-α yang mencegah sintesis kolagen di sel otot polos vaskuler.
Proses ini akan memperlemah kepala fibrous dan dapat menghancurkannya.
Kerusakan dari kepala fibous menyebabkan kolagen dan lemak terekspos
dengan aliran darah yang akan berkontribusi terhadap akumulasi dan perlekatan
21
trombosit dan pembentukan gumpalan darah yang dapat secara tiba-tiba
menyumbat aliran darah (Kopaei et al. 2014).
2.2.3.3 Klasifikasi Histologi Ateroskelrosis
Berikut adalah klasifikasi histologi aterosklerosis berdasarkan American Heart
Association (AHA) (Stary 2000; Porwal et al. 2016):
Tabel 2.1
Klasifikasi Histologi Aterosklerosis Berdasarkan AHA
Tipe Lesi Karakteristik

2.3 Endoteli
Tipe I Sel foam intima yang terisolir (perubahan minimal)
n1
Tiep II Beberapa sel foam intima di beberapa lapis vaskuler (fatty
End
streaks)
othelin
Tipe III Pools of Extracellular lipids tanpa bentuk inti yang jelas
merupak
Tipe IV Intik lemak dengan inti yang jelas dengan lapisan intima
an
yang normal
kelompo
Tipe V Inti lemak dengan sebuah kepala fibrosus dengan atau
k peptida
tanpa kalsifikasi (fibroateroma)
endogen
Tipe VI Fibroateroma dengan kerusakan kepala sepeti perdarahan
yang
atau thrombosis
memiliki
Tipe VII Kalsifikasi yang menonjol
efek
Tipe VIII Perubanhan jaringan fibrosus yang menonjol
vasokon
striksi
kuat dan lama yang disekresikan oleh sel endotel. Pertama kali diidentifikasi oleh
Yanasigawa dkk pada tahun 1988 (Unic et al. 2011; Yanagisawa et al. 1988). Terdiri dari
tiga kelompok isopeptida yaitu Endothelin-1, Endothelin-2, dan Endothelin-3 yang memiliki
22
rantai peptida 21 asam amino homolog dan mirip secara structural (Chester & Yacoub
2014). Gen-gen dari ET-1, ET-2, dan ET-3 berlokasi pada kromosan yang berbeda, dimana
gen ET-1 berada pada kromosom 6, gen ET-2 pada kromosom 1, dan gen ET-3 pada gen
20 (Kawanabe & Nauli 2011).
Gambar 2.4: Struktur susunan asam amino masing-masing endothelin (Chester & Yacoub
2014)
Endothelin 1 adalah hormon peptida dengan berbagai peran biologi. Pada awal
ditumukannya, ET-1 dikenal sebagai faktor vasokonstriktor yang kuat dan dapat
meningkatkan tekanan darah. Sifat vasoaktif dari ET-1 ini telah diketahui perannya dalam
hipertensi. Namun, penelitian selanjutnya telah menjelaskan berbagai peran fisiologis yang
23
penting lainnya dari ET-1, seperti pada fungsi neurologis, fisiologi paru, transport electron
dan cairan, penyakit autoimun dan bilogi kanker (Kawanabe & Nauli 2011).
Gambar 2.5: Peran Fisiologis ET-1 di masing-masing organ (Kawanabe & Nauli 2011)
2.3.1 Biosintesis Endotelin 1
Pada awalnya, ET-1 diketahui diproduksi pada sel endotel, lapisan dalam dinding
vaskuler. Namun, beberapa tipe sel lain ternyata dapat juga memproduksi ET-1, seperti
sel otot polos vaskuler, sel epitel ginjal dan neuron. Gen ET-1 berasal dari kromosom 6
24
yang mengandung 5 exon yang mengkode 2026 nuklotida mRNA (Houde et al. 2016;
Yanagisawa et al. 1988). ET-1 tidak tersimpan di dalam sel endotel, dimana produksinya
tergantung pada kecepatan transkripsi gen yang dipengaruhi oleh faktor perangsang
atau penghambat tertetu (Chester & Yacoub 2014).
Terdapat beberapa faktor yang diketahui mempengaruhi ekspresi ET-1, seperti
kekuatan mekanik (shear stress), angiotensin II, transforming growth faktor-β, thrombin,
bradikinin, hipoksia, LDL (baik yang teroksidasi maupun yang tidak), sislosporin, insulin,
kortisol, dan epinefrin. Di lain pihak, NO, prostanoid dilator, estrogen dan peptida
natriuretik adalah penghambat dari ekspresi gen ET-1 (Houde et al. 2016; Kawanabe &
Nauli 2011; Chester & Yacoub 2014).
Gen endotelin mengkode sejumlah 203 asam amino yang dikenal sebagai
preproendotelin-1. Prepro-ET-1 akan dipecah menjadi big ET-1 yang menyisakan 38
asam amino oleh furin-like endopeptidase (furin convertase). Big ET-1 belum aktif
secara biologi. Mereka selanjutnya akan dimodifikasi oleh salah satu dari ET converting
enzyme (ECE) menjadi bentuk ET-1 yang hanya memiliki 21 peptida asam amino
(Kohan et al. 2011).
25
Gambar 6: Proses biosintesis ET-1 (Kohan et al. 2011; Chester & Yacoub 2014)
2.3.2 Mekanisme Kerja Endotelin 1
ET-1 bekerja pada dua jenis reseptor untuk menjalankan fungsi fisiologisnya, yaitu
endotelin reseptor a (ETa) dan endotelin reseptor b (ETb). Reseptor ETa berlokasi
terutama di sel otot polos pada pembuluh darah, dan bertanggungjawab untuk respon
kontraktil dan proliferasi. Peran dari reseptor ETb pada regulasi vaskuler lebih kompleks.
Sebagai contoh, reseptor ETb yang berlokasi di sel endotel memediasi vasodilatasi
dengan melepaskan faktor ralaksasi seperti Nitric Oxide (NO) dan Prostacyclin (PG12)
(Ergul 2011).
Reseptor ETb juga dapat menyebabkan vasokonstriksi ketika reseptor berlokasi
pada sel otot polos pembuluh darah tertentu, seperti aorta, arteri koroner, arteri dan
vena mesenterika. (Chalovich & Eisenberg 2005). Lebih lanjut, reseptor ETb juga
menghambat pertumbuhan sel dan vasokonstriksi pada sistem vaskuler dan berfungsi
26
sebagai reseptor pembersih dari ET-1. Peran reseptor ETb untuk membersihkan ET-1
dari tubuh khususnya pada paru yang akan mengeluarkan sekitar 80% dari sirkulasi ET-
1 (Kawanabe & Nauli 2011).
Kedua resptor tersebut merupakan keluarga dari G protein, yang akan
menyebabkan Ca2+ masuk ke dalam sitosol. Peningkatan Ca 2+ bersifat bifasik, dimulai
dengan pelepasan kalsium yang berasal dari simpanan intraseluler dan diikuti oleh
masuknya kalsium dari cairan ekstraseluler. Setelah ET-1 beriktan dengan reseptornya,
phsopolipase C (PLC) akan teraktivasi dan akan memproses phosphatidylinositol 4,5-
biphosphate (PIP2), menjadi diacylglicerol (DAG) dan inositol 3,4,5-triphosphate (IP3)
(Houde et al. 2016).
IP3 kemudian akan mengaktivasi reseptornya pada membrane reticulum
sarko/endoplasma untuk melepaskan Ca 2+ masuk ke sitosol. Sementara itu, DAG akan
mengaktivasi protein kinase C (PKC), yang akan memfosforilasi berbagai protein yang
ditargetkan termasuk myosin light-chain kinase (MLCK). MLCK di sel otot polos vaskuler
kemudian akan memfosforilasi rantai berat myosin dan akan berinteraksi dengan aktin
dan myosin untuk memulai kontraksi (Unic et al. 2011; Houde et al. 2016).
Di sel endotel, kalmodulin kinase II diaktivasi oleh peningkatan Ca 2+ di dalam sitosol
dan akan memfosforilasi PKC. PKC kemudian akan merangsang kerja eNOS,
phospholipase A2, dan cyclooxygenase-2 (COX-2) yang menyebabkan pembentukan NO
dan prostasiklin. Selain itu, PKC yang berpindah lokasi menuju ke membran plasma
akibat dari stimulasi ET-1, dapat memfosforilasi protein spesifik yang lain dan
menghasilkan berbagai efek bologi lainnya (Unic et al. 2011; Houde et al. 2016).
27
Gambar 2.7: Efek ET-1 terhadap reseptornya (Houde et al. 2016)
2.4 Hubungan Obesitas, Aterosklerosis, dan Endotelin 1
Beberapa penelitian menunjukkan peningkatan kadar ET-1 pada kondisi kelebihan
berat badan dan obesitas. Weil dkk (2011) melaporkan bahwa pada kondisi obesitas,
terjadi peningkatan kadar ET-1. Lebih lanjut mereka menemukan bahwa ET-1 juga
menurunkan kerja vasodilatasi yang bergantung pada sel endotel. Selain itu, Catar dkk
(2015) melaporkan bahwa terjadi peningkatan ekspresi gen sistem endotelin yang pada
28
akhirnya akan meningkatkan kadar ET-1 plasma dimana peningkatannya diduga berperan
dalam beberapa penyakit kardiovaskuler.
Penyebab peningkatan kadar ET-1 pada obesitas masih belum sepenuhnya difahami,
namun diduga beberapa kondisi pada obesitas berkaitan erat dengan peningkatan ET-1
(Campia et al. 2014; Weil et al. 2011). Pada beberapa dekade terakhir telah diketahui
bahwa jaringan adiposa bukan hanya bekerja sebagai tempat penyimpanan sel lemak
tetapi juga berfungsi sebagai organ endokrin yang mensekresi beberapa molekoul bioaktif
yang dikenal sebagai adipokin (Blüher 2013). Perbuahan yang terjadi pada sel adiposa ini
diduga kuat berkaitan dengan perubahan metabolik pada obesitas termasuk pada
perubahan produksi ET-1 (Lafontan 2014).
Gambar 2. 8: Perubahan metabolik pada jaringan adipose (Lafontan 2014)
29
Pada obesitas, terdapat peningkatan aktivitas dari sel adiposa untuk mensekresi
mediator-mediator inflamasi yang dapat meningkatkan produksi ET-1 seperti TNF-α, IL-1,
dan IL-6 (Blüher 2013). Perivascular adiposa tissue (PVAT) telah diketahui memiliki peran
yang penting terhadap peningkatan kadar ET-1. Pada kondisi sehat, PVAT mensekresi
adiponektin yang akan merangsang pembentukan NO pada sel endotel. Namun sebaliknya
pada obesitas, PVAT justru melepaskan mediator-mediator inflamasi seperti TNF-α dan IL-
6 yang akan mengaktivasi sistem ET-1 sehingga akan menyebabkan vasokonstriksi dan
juga merangsang produksi TNF-α (Virdis 2016).
Selain itu, TNF-α bersama dengan non-esterefied fatty acid (NEFA) yang juga
merupakan molekul adipokin berperan penting terhadap terjadinya resistensi insulin pada
obesitas, dimana NEFA melemahkan PI3-kinase dan TNF-α menghambat fosforilasi IRS-1,
yang pada gilirannya ikut berpartisipasi dalam meningkatkan kadar insulin plasma (Tesauro
& Cardillo 2011). Ferri C. dkk (1995) menemukan bahwa insulin merangsang sel endotel
untuk mensekresi ET-1 pada percobaan in vitro dan in vivo. Serupa dengan itu, peneltian
yang dilakukan Oliver, J.F.dkk, transkripsinya (1991) menunjukkan bahwa insulin dapat
meningkatkan ekspresi gen ET-1 dengan meningkatkan kecepatan.
Sebenarnya pada kondisi fisiologis, insulin tetap dapat meningkatkan kadar ET-1
plasma seperti yang dilaporkan oleh cardillo dkk, dimana penginfusan insulin pada subjek
sehat diikuti oleh peningkatan kadar ET-1. Tetapi, selain ET-1, bioavaibilitas NO juga
meningkat setelah pemberian insulin. Hal tersebut menunjukkan bahwa terjadi
keseimbangan yang akan menghasilkan respon hemodinamik yang netral antara
vasodilatasi dan vasokonstriksi. Namun, pada keadaan obesitas, keseimbangan tersebut
terganggu dan menyebabkan peningkatan ET-1 tetapi dengan penurunan NO (Tesauro &
Cardillo 2011).
30
Telah banyak penelitian menyatakan bahwa terjadi peningkatan aktivitias renin-
angiotensin-aldosteron pada obesitas (Rahmouni et al. 2005), dimana sel-sel adiposa telah
diketahui mensekresi angiotensinogen, sebuah molekul precursor dari angiotensin-II.
Cassis, L.A dkk (1988) berhasil menginvestigasi keberadaan mRNA angiotensinogen pada
pembuluh darah aorta tikus dan terutama berada pada jaringan adiposa periaorta.
Selanjutnya, Imai T dkk (1992) menemukan bahwa angiotensin II menginduksi ekspresi
dari mRNA preproendotelin-1. Selain meningkatkan produksi ET-1, angiotensin II juga
meningkatkan afinitas antara ET-1 dan ETaR pada sel otot polos vascular (Lin et al. 2014).
Peningkatan kada LDL dan oxLDL pada obesitas juga memiliki peran dalam
meningkatkan produksi ET-1. Boulanger dkk menemukan bahwa oxLDL dapat merangsang
produksi ET-1 yang diobservasi pada hyperlipidemia dan aterosklerosis. Hal tersebut
diperkuat dalam penilitian lain yang menyatakan bahwa pemberian statin, berdasarkan
durasi dan dosisnya, dapat menurunkan secara signifikan kadar ET-1 plasma (Boulanger et
al. 1992; Sahebkar et al. 2015).
Stress oksidatif merupakan ketidakseimbangan antara produksi reactive oxygen
species (ROS) dan antioksidan tubuh (Husain 2015). ROS merupakan molekul yang tidak
stabil dan memiliki efek oksidatif yang sangat kuat terhadap zat-zat penyusun sel seperti
protein, lemak, dan DNA sehingga dapat merusak berbagai fungsi sel. Pada beberapa
penelitian, baik pada manusia maupun tikus, menunjukkan bahwa terdapat korelasi positif
antara berbagai marker oksidatif stres dengan peningkatan akumulasi massa lemak
(Matsuda & Shimomura 2013).
Peningkatan produksi ROS telah dikatikan dengan produksi ET-1. Cheng dkk
melaporkan bahwa ROS dapat menstimulasi ekspresi gen ET-1 di sel endotel (Cheng et al.
2001). Sejalan dengan itu, penelitian yang dilakukan oleh Kahler dkk (2002) menunjukkan
31
bahwa ROS dapat meningkatkan sintesis dari ET-1 baik pada sel otot polos vaskuler
maupun di sel endotel melalui aktivasi dari promotor preproET-1 dan peningkatan
konsentrasi mRNA. Selain pada sel endotel, ROS juga dapat menstimulasi produksi ET-1
pada sel measangial manusia (Hughes et al. 1996).
Beberapa penelitian menunjukkan bahwa terjadi peningkatan kadar ET-1 pada lesi
aterosklerosis. Borton dkk (1998) melaporkan bahwa terdapat peningkatan ekspresi ET-1
pada aterosklerosis yang selanjutnya menurunakan kerja NO. Hal tersebut dapat
menyebabkan disfungsi endotel dan memperparah ateroskelrosis. Rossi dkk (1999)
menyatakan bahwa ET-1 disintesis di sel otot polos vaskuler pada pasien aterosklerosis.
Lebih lanjut, penelitian yang dilakukan dashwood dan Tsui (2011) pada pasien critical lamb
ischemia (CLI) memperlihatkan bahwa ET-1 disekresikan pada daerah aterosklerosis oleh
sel-sel infamasi.
Perubahan ekspresi ET-1 pada aterosklerosis ini terjadi pada sel endotel, sel otot
polos vaskuler, dan sel inflamasi. Peningkatan kadar ET-1 akan menyebabkan aktivasi sel
endotel untuk menghasilkan molekul adhesi, merangsang aktivasi dan migrasi monosit
yang diregulasi oleh MCP-1. Selain itu, ET-1 juga menstimulasi proliferase sel otot polos
vaskuler, sitokin, dan produksi superoksida di makrofag. Setelah pembentukan foam sel,
terjadi peningkatan inflamasi lokal dan ROS yang kemudian akan memperarah
perkembangan lesi. Foam sel juga dapat memproduksi ET-1 yang melalui ikatannya
dengan ETb akan bekerja pada sel makrofag (Wu et al. 2017).
Pada proses aterogenesis, terdapat interaksi yang penting antara LDL dan oxLDL
dengan ET-1. oxLDL dan LDL, sebagaimana dibahas diatas, dapat menstimulasi produksi
dari ET-1 dan begitu juga sebaliknya (Wu et al. 2017). Morawietz dkk (2001) pertama kali
melaporkan bahwa ET-1, tergantung pada dosis dan durasi, dapat menstimulasi mRNA
32
lectin-like oxLDL receptor-1 (LOX-1) yang dimediasi oleh resptor ETb. Aktivasi LOX-1
kemudian akan memfasilitasi ambilan oxLDL di sel endotel. Selain itu, melalui reseptor ET a,
ET-1 juga memediasi peningkatan ikatan antara proteoglikan dengan LDL dengan
menstimuasi perubahan struktur rantai glycosaminoglycan (GAG) (Ballinger et al. 2009).
ET-1 juga telah diketahui sebagai salah satu zat yang menstimulasi aktivasi sel
endotel yang akan mensekresi molekul adhesi seperti ICAM-1 dan VCAM-1. Studi yang
dilakukan oleh McCarron dkk (1993) pada isolasi sel endotel mikrovaskuler otak manusia
menumukan bahwa ET-1 dapat menstimulasi produksi molekul adhesi pada sel tersebut.
Hal tersebut sejalan dengan penelitian yang dilakukan oleh Li L.dkk (2003) yang lebih jauh
melaporkan bahwa mekanisme stimulasi dari VCAM-1 oleh ET-1 adalah melalui produksi
dari superoksida (O2-) pasien hipertensi.
Peningkatan kadar ET-1 akan berefek pada peningkatan produksi ROS. Penelitian
yang dilakukan pada tikus knockout apolipoprotein E oleh Melissa dkk (2013) menunjukkan
bahwa ekspresi yang berlebihan dari ET-1 akan meningkatkan produksi ROS bukan hanya
pada dinding vascular tetapi juga pada plak aterosklerosis dan PVAT aorta. Pada penelitian
lain disebutkan bahwa pemberian ETa reseptor antagonis pada tikus dapat menurunkan
produksi oksidatif stress (Pu et al. 2003). Beberapa penelitian menujukkan bahwa
peningktan produksi ROS di sel endotel disebabkan oleh aktivasi NADPH oksidase oleh
ET-1 (Idris-Khodja et al. 2016; Duerrschmidt et al. 2000).
Interaksi antara ET-1 dan NO memiliki peranan penting dalam patogenesis terjadinya
aterosklerosis. Peningkatan kadar ET-1 dapat menekan sintesis dan kerja dari NO, hal
tersebut dibuktikan dengan penelitian yang dilakukan oleh Barton M dkk (1998) yang
menemukan bahwa pemberian secara kronik antagonis reseptor ETa dapat memperbaiki
disfungsi endotel yang dimediasi oleh NO dan menurunkan pembentukan atheroma yang
33
independen terhadap kolesterol plasma atau tekanan darah. ET-1 juga berperan dalam
produksi eNOS uncoupling, dimana eNOS cenderung memproduksi peroksinitrit (OONO -)
ketimbang NO akibat defisiensi tetrahydrobiopterin (BH4) yang disebabkan salah satunya
oleh ET-1 (Zheng et al. 2003; Duerrschmidt et al. 2000; Wu et al. 2017).
ET-1 juga terlibat dalam proses inflamasi di dalam dinding vaskuler. Wilson dkk,
(2001) melaporkan bahwa ET-1 mengaktivasi monosit/makrofag melalui stimulus terhadap
faktor transkripsi proinflmasi NF-kB pada manusia melalui reseptor ETb. hal tersebut
kemudian akan menyebabkan monosit mensekresi beberapa mediator inflamasi seperti,
TNF-α, IL-1, IL-6,IL-8, dan Metalloproteinase (MMP), yang berperan dalam pertumbuhan
aterosklerosis dan tidak stabilnya plak aterosklerosis (Wilson et al. 2001; Böhm & Pernow
2007). Selain itu, sebuah studi yang dilakukan pada sel endotel otak menunjukkan bahwa
ET-1 bersama dengan TNF-α dan IL-1b meningkatkan produksi IL-8 yang berperan dalam
migrasi PMN ke dalam sel endotel (F.M. Hofman, P. Chen, R. Jeyaseelan, F. Incardona, M.
Fisher 1998).
ET-1 juga diduga kuat terlibat dalam proliferasi dan migrasi sel otot polos vaskuler.
Hal tersebut didukung dengan penelitian yang dilakukan oleh Yoshizumi dkk (1998).
Mereka menemukan bahwa ET-1 menstimulasi proliferasi sel otot polos vaskuler manusia
melalui aktivasi ERK ½ tergantung PKC. Selain itu, ET-1 juga terlibat dalam menyebabkan
migrasi sel otot polos vaskuler melalui reseptor ETa (Kyotani et al. 2016).
34
2.5 Kerangka Teori
Gambar 2.9: Kerangka Teori
35
Keterangan:
: Aktivasi/Menstimulasi
: Menghambat
2.6 Kerangka Konsep
Gambar 2.10: Kerangka Konseptual
2.7 Variabel Penelitian
2.7.1 Variabel bebas : Obesitas
2.7.2 Variable terikat : Kadar ET-1 dan Variabel Aterosklerosis
2.7.3 Variabel kontrol : Usia dan Jenis Kelamin
2.7.4 Variabel antara : Disfungsi Endotel
2.8 Defenisi Operasional
2.8.1 Obesitas
Obesitas yang dimaksud penelitian ini adalah berdasarkan pada indeks
indeks rohrer ≥ 30.
2.8.2 Kadar ET-1
Kadar ET-1 yang dimaksud dalam penelitian ini adalah Konsentrasi ET-1
dalam fmol/ml yang terdapat di dalam darah tikus menggunkan metode
36
ELISA.
2.8.3 Lesi Aterosklerosis
Lesi aterosklerosis yang dimaksud adalah adanya lesi permulaan
aterosklerosis yang ditandai dengan jumlah dan jumlah diameter sel busa
aorta yang dilihat secara histologi dengan pewarnaan Hematoxylen Eosin
(HE).
2.8.4 Usia
Usia yang dimaksud dalam penelitian ini adalah umur tikus wistar pada saat
dilakukan pengamatan.
2.8.5 Jeis Kelamin
Jenis kelamin dinilai berdasarkan struktur morfologi tikus wistar.
2.9 Hipotesis
Beberapa hipotesis dalam penelitian ini adalah:
4.1 Terdapat peningkatan kadar ET-1 plasma pada tikus wistar obesitas
dibandingkan kadar ET-1 plasma pada tikus wistar non obesitas.
4.2 Terdapat lebih banyak sel busa pada aorta tikus wistar obesitas
dibandingkan nonobesitas.
4.3 Terdapat hubungan yang signifikan antara kadar ET-1 dengan lesi
aterosklerosis pada tikus wistar obesitas.
37
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan desain Posstest-Only
Kontrol Design, dengan mengamati tikus yang diberi makan pakan biasa dan
pakan tinggi lemak hingga usia 120-150 hari kemudian diterminasi dan diukur
variabel-variabel yang direncakan.
3.2 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada tahun 2017 dan 2018 di Laboratorium
Entomologi Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin Makassar.
3.3 Populasi
Populasi dalam penelitian ini adalah semua tikus wistar obesitas dan non
obesitas dengan karakteristik fisik sehat, yang diperoleh dari Laboratorium
Entomologi Fakultas Kedoteran Universitas Hasanuddin Makassar.
3.4 Sampel dan Besaran Sampel
3.4.1 Sampel
Kriteria sampel dalam penelitian ini adalah sebagai berikut.
a. Tikus wistar dengan nilai indeks rohrer < 30 untuk kelompok non
obesitas.
b. Tikus galur wistar dengan nilai indeks rohrer ≥ 30 untuk kelompok
obesitas.
c. Sehat dan tidak cacat
38
d. Jenis kelamin jantan
e. Usia tikus wistar saat dipisahkan dari induk adalah 3 minggu lalu
dibiakkan hingga berumur 6 bulan
f. Bergerak aktif
3.4.2 Besaran Sampel
Besaran sampel disesuaikan dengan kriteria WHO yaito minimal 5 ekor
setiap kelompok.
3.5 Izin Penelitian dan Kelaikan Etik
Pembrian izin penelitian akan dilakukan pada Komisi Etik Penelitian
Kedokteran pada sampel tikus di Fakultas Kedokterann Universitas Hasanuddin
Makassar. Setelah mendapatkan izin, penelitian ini akan segera dilaksanakan
dengan memenuhi persyaratan-persyaratan etik yang telah diberikan.
3.6 Prosedur Kerja
3.6.1 Alat Penelitian
1. Kandang Tikus
2. Reader ELISA
3. Reagen ELISA KIT Endotelin-1, reseptor ETA dan ETB
4. Minor Set Surgery
5. Tabung EDTA
6. Spoit 1 dan 3 cc
7. Ependorf Tube
8. Alat Centrifuge
3.6.2 Bahan Penelitian
39
1. Tikus Wistar (Rattus Norvegicus) jantan
2. Pakan standar AD2
3. Pakan tinggi lemak CP551
4. Susu Dancow Fortigro Instan
3.6.3 Persiapan Subjek Penelitian:
1. Tikus wistar yang telah berusia 21 hari akan dipisah dari induknya
kemudian dipindahkan ke kandangnya masing-masing dan diberikan pakan
biasa kepada seluruh kelompok tikus selama 7 hari sebagai proses
adaptasi.
2. Setiap satu tikus menempati satu kandang sendiri
3. Tikus kelompok obesitas diberi diet tinggi karbohidrat dan lemak pada usia
30 hari hingga 90 hari agar menjadi obesitas, sedangkan tikus kelompok
non obesitas diberi diet standar.
4. Setelah berusia 90 hari, dikur nilai indeks obesitas Lee pada kelompok yang
diberi diet tinggi karbohidrat dan lemak. Jika nilai Indeks rohrer ≥ 30, maka
kondisi obesitasnya akan dipertahankan hingga umur 180 hari. Sedangkan
tikus kelompok non obesitas tetap diberikan diet standar hingga usia 180
hari.
5. Pada usia 180 hari kedua kelompok tikus kemudian diterminasi. Untuk
pemeriksaan ET-1, digunakan sampel darah tikus dengan menggunakan
metode ELISA yang dilakukan Laboratorium Hewan Fakultas Kedokteran
Universitas Hasanuddin.
6. Pembuluh darah arkus aorta kedua kelompok tikus diambil untuk
pemeriksaan histopatologi aterosklerosis dengan menggunakan pewarnaan
Hematoxyelin Eosin di Laboratorium Patologi Anatomi Rumah Sakit
40
Universitas Hasanuddin.
3.6.4 Pemeriksan ELISA (berdasarkan prosedur Kit Elisa)
1. Setelah 30 menit, sampel darah tikus sebanyak 4 cc disentrifus selama 20
menit dengan kecepatan 3000 rpm.
2. Kumpulkan seluruh serum yang terbentuk diatas plasma dan simpan
segera runag pendingin pada suhu -20oC.
3. Ketika pemeriksaan ELISA akan dilakukan, siapkan sampel pada suhu
ruangan (18oC-25oC) selama 30 menit. Hindari penggunan air panas untuk
menghangatkan sampel.
4. Atur wells standar, wells sampel, dan wells kosong/kontrol, tambahkan 50 μl
Standar pada setiap well standar, dan tambahkan 50 μl sampel ke setiap
well sampel, dan tambahkan 50 μl sampel pengencer untuk setiap well
kosong/kontrol.
5. Tambahkan 100 μl reagen HRP-conjugate ke setiap well, lalu tutup plate
dengan closure plate membrane dan inkubasi selama 60 menit pada suhu
37oC.
6. Bersihkan plate sebanyak 4 kali dengan menggunakan cairan pembersih
(wash solution) masing-masing 1 menit.
7. Tambahkan cairan kromagen A 50 μl dan cairan kromagen B 50 μl di setiap
well berturut-turut. Kemudian lindungi dari cahaya dan inkubasi selama 15
menit pada suhu 37oC.
8. Tambahkan 50 μl stop solution pada setiap well. Warna pada wells
seharusnya berubah dari biru ke kuning,
41
9. Baca hasil Optical density (DO) pada 450 nm dengan menggunakan ELISA
reader dalam 15 menit setelah ditambahkan stop solution. (5 menit adalah
waktu yang terbaik).
10. Gunakan software untuk membuat kurva standar (biasanya dalam bentuk
kurva linear dan beberapa berbentuk kurva quadratic atau cubic) dan hitung
kadar dari analisa ini.
3.6.5 Pemeriksaan Histopatologi Dengan Pewarnaan Hematoxyelin-Eosin
(prosedur pemeriksaan Lab Patologi Anatomi RSUH)
1. Deparafinisasi preparat yang telah kering dalam xylol sebanyak 2 kali
(masing-masing selama 5 menit).
2. Masukkan ke dalam alkohol 96% sebanyak 2 kali (masing-masing selama 5
menit). Lalu cuci dengan air mengalir sampai alkohol hilang.
3. Masukkan ke dalam larutan hematoxylin selama 5-10 menit. Lalu cuci
dengan air mengalir selama 10 menit.
4. Celupkan ke dalam larutan HCl 0.4% sebanyak 3 kali celup untuk
dekolorisasi. Lalu cuci kembali dengan air mengalir selama 10 menit.
5. Masukkan ke dalam larutan Lithium Carbonat selama 30 detik lalu cuci
dengan air mengalir selama 10 menit.
6. Masukkan ke dalam larutan Eosin selama 1-2 menit, lalu cuci dengan air
mengalir selama 10 menit.
7. Masukkan ke dalam larutan Ethanol selama 15 detik sebanyak 3 kali dan
selama 1 menit sebanyak 2 kali.
8. Rendam ke dalam larutan Xylol selama 5 menit sebanyak 3 kali.
9. Tetesi dengan Entelan dan tutup dengan deck glass.
10. Preparat dibaca dibawah mikroskop cahaya.
42
3.8 Alur Penelitian
Gambar 3.1: Alur Penelitian
3.9 Rencana Pengolahan Data dan Analisa Data
Data yang diperoleh dari hasil pengukuran akan dikelompokkan ke dalam
data numerik dan kategori lalu dilakukan uji statistik yang sesuai dengan
menggunakan program SPSS. Uji independent t test akan digunakan untuk
menilai perbedaan kadar ET-1, dan lesi aterosklerisis pada kelompok obesitas
dan kelompok non obesitas. Uji hubungan (Uji Pearson/Spearmann) juga akan
43
dilakukan untuk mengamati hubungan ET-1, lesi aterosklerosis pada tikus
obesitas dan non obesitas.
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan sistem
Posttest Only Control Group Design, dimana perhitungan variable dependen
dilakukan hanya setelah dilakukan perlakuan. Kami menggunakan 10 ekor tikus
putih (Rattus Norvegicus) galur wistar, jantan, sehat, dengan usia 150-180 hari
sebagai sampel penelitian. Sampel dibagi menjadi dua kelompok, yaitu
kelompok obesitas dan non obesitas berdasarkan indeks obesitasnya (indeks
lee dan/atau indeks Rohrer) yang masing-masing berjumlah 5 ekor sampel.
Pengukuran indeks obesitas dilakukan antara hari ke 30-60 untuk melihat
apakah sampel tersebut telah memenuhi kriteria obesitas berdasrkan indeks
obesitas tersebut dan kemudian dipertahankan hingga berusia 150-180 hari.
Pemeriksaan kadar ET-1 serum dilakukan dengan metode ELISA melalui darah
yang diambil melalui jantung tikus. Lesi aterosklerosis dilihat dengan
menggunakan pewarnaan Red-Oil O dan pemeriksaan histopatologi
Hematoxelyn Eosin.
4.1.1 Hasil Pemeriksaan Indeks Obesitas
4.1.1.1 Pemeriksaan Indeks Obesitas Kelompok Kontrol
44
Tabel 4.1
Hasil Pemeriksaan Indeks Obesitas Kontrol
Indeks Obesitas
Kontrol (K)
No Subjek Panjang Badan
Berat Badan (gr) Indeks Rohrer Interpretasi
(cm)
Hari- Hari-
Hari-45 Hari-45 Hari-45 Hari-150 Hari-45 Hari-150
150 150
1 Tikus 1 Non-
157 190 18 20 26.92 23.75 Non-obese
obese
2 Tikus 2 Non-
167 236 18 20.5 28.64 27.40 Non-obese
obese
3 Tikus 3 Non-
170 264 18.5 21 26.85 28.51 Non-obese
obese
4 Tikus 4 Non-
151 186 17.5 19 28.17 27.18 Non-obese
obese
5 Tikus 5 Non-
154 219 18 20 26.41 27.38 Non-obese
obese
Sumber : Data Primer 2018
4.1.1.2 Pemeriksaan Indeks Obesitas Kelompok Perlakuan
Tabel 4.2
Hasil Pemeriksaan Indeks Obesitas Perlakuan
Indeks Obesitas
Perlakuan (K)
No Subjek Panjang Badan
Berat Badan (gr) Indeks Rohrer Interpretasi
(cm)
Hari- Hari-
Hari-45 Hari-45 Hari-45 Hari-150 Hari-45 Hari-150
150 150
1 Tikus 1 315 413 20.5 22 36.56 38.79 Obesitas Obesitas
2 Tikus 2 335 460 21 23 36.17 37.82 Obesitas Obesitas
5 Tikus 5 367 459 21.5 23 36.93 37.72 Obesitas Obesitas
Sumber : Data Primer 2018
4.1.2 Analisis Deskriptif Indeks Obesitas
45
Berdasarkan pada tabel 4.1, setelah pemberian pakan biasa (AD-2)
selama 45 hari, keseluruhan tikus wistar menunjukkan indeks rohrer yang
kurang dari 30. Hal tersebut bermakna bahwa keseluruhan tikus wistar yang
digunakan sebagai kontrol dalam penelitian ini memenuhi kriteri non-obese.
Sedangkan pada tabel 4.2, keseluruhan tikus wistar yang diberikan pakan tinggi
lemak dan tinggi karbohidrat (CP-551 dan susu Dancow Fortigro Instant)
menunjukkan indeks rohrer yang lebih dari 30. Hal tersebut bermakna bahwa
keseluruhan tikus wistar yang digunakan sebagai perlakuan dalam penelitian ini
memenuhi kriteri tikus obesitas.
4.1.3 Hasiil pemeriksaan kadar ET-1 Serum
Tabel 4.3
Hasil Pemeriksaan Kadar ET-1 Serum
Subjek Kadar ET-1 Subjek Kadar ET-1
Kontrol (pg/ml) Obesitas (pg/ml)
1 14.71 1 17.89
2 12.58 2 12.06
3 22.77 3 12.40
4 19.97 4 35.54
5 10.21 5 19.61
Mean 16.05 Mean 19.50
Sumber: Data Primer 2018
4.1.4 Analisis Deskriptif Data Kadar ET-1
Tabel 4.4
Hasil Analisis Deskriptif Data Kadar ET-1 antar Kelompok
Rerata
Kelompok Uji n ET-1 SD Maks Min
(pg)
Kontrol 5 16.05 5.21 22.77 10.21
Perlakuan 5 19.5 9.56 35.54 12.06
46
Tabel 4.4 menunjukkan bahwa rerata kadar ET-1 serum pada tikus non
obese adalah 16.05 ± 5.21 pg/ml dengan nilai maksimal 22.77 pg/ml dan nilai
minimal 10.21 pg/ml, sedangkan pada tikus obesitas adalah 19.5 ± 9.56 pg/ml
dengan nilai maksimum 35.54 pg/ml dan nilai minimum 12.06 pg/ml.
Berdasarkan pada tabel 4.1 dan 4.3.
4.1.5 Uji Komparatif Analisis Pengaruh Obesitas Terhadap Kadar ET-1
Tabel 4.5
Hasil Analisis Pengaruh Obesitas Terhadap Kadar ET-1
Kelompok n Kadar ET-1 (pg/ml)
Kontrol
5 16.05 (5.21)
(SD)
Obesitas
5 19.5 (9.56)
(SD)
Nilai p = 0.498
Uji Unpaired T-Test
Tabel 4.5 di atas menunjukkan pengaruh obesitas terhadap rerata ET-1
serum. Kadar ET-1 serum pada tikus kontrol adalah 16.05 ± 5.21, sedangkan
pada tikus obesitas 19.5 ± 9.56. Berdasarkan uji unpaired T-Test
menunjukkan nilai p 0.498, hal tersebut menunjukkan bahwa secara statistik
tidak terdapat keterkaitan antara obesitas dengan kadar ET-1 Plasma
walaupun terjadi sedikit peningkatan kadar ET-1 serum pada kelompok
obesitas dibanding kelompok non-obese.
4.1.6 Hasil pemeriksaan Aterosklerosis
Pemeriksaan lesi aterosklerosis dilakukan melalui pemeriksaan Histologi
dengan pewarnaan Hematoxylin Eosin, lalu dihitung jumlah sel busanya.
47
Gambar 4.1 Histologi Kontrol 1 Gambar 4.2 Histologi Obesitas 1
48
Tabel 4.6
Hasil Penilaian Aterosklerosis
Variabel Aterosklerosis Variabel Aterosklerosis
Subjek Subjek
Kontrol Jumlah Diameter Obesitas Jumlah Sel Diameter Sel
Sel Busa Sel Busa Busa Busa (cm)
1 0 1 10
0 2.6
2 0 2 15
0 4.9
3 5 3 30
1.2 6.4
49
4 3 4 43
1 9.6
5 0 5 37
0 10.2
Tabel 4.6 menunjukkan penilaian lesi aterosklerosis pembuluh darah
aorta tikus kontrol dan obesitas dengan menghitung jumlah dan diameter
sel busa pada aorta. Pada tikus kontrol terlihat bahwa tikus kontrol 1, 2, dan
5 menunjukkan hasil negatif terhadap keberadaan sel busa. Sedangkan
pada tikus kontrol 3 dan 4 terdapat sedikit (perubahan minimal) dengan
ditemukannya 5 sel busa pada kontrol 3 dan 3 buah sel busa pada kontrol
4 dengan jumlah diameter total sel busa 1.2 cm pada kontrol 3 dan 1 cm
pada kontrol 4. Sedangkan pada tikus obesitas, tikus obesitas 1 terdapat 10
sel busa dengan jumlah diameter 2.6 cm, tikus obesitas 2 terdapat 15 sel
busa dengan jumlah diameter 4.9 cm, tikus obesitas 3 terdapat 30 sel busa
dengan jumlah diameter 6.4 cm, dan yang terbanyak pada tikus obesitas 4
dengan 43 sel busa dengan jumlah diameter 9.6 cm, serta yang terakhir
tikus obesitas 5 berjumlah 37 sel busa dengan jumlah diameter 10.2 cm
4.1.7 Analisis Hubungan Obesitas Dengan Kejadian Aterosklerosis
Tabel 4.7
Hasil Analisis Uji T Independen Obesitas dan Aterosklerosis
Kelompo Rerata Signifikans Diameter Signifikans
n SD SD
k Uji Jumlah Sel Busa i Sel Busa i
14.1
Perlakuan 5 27 6.74 3.19
2 p 0.004 p 0.002
Kontrol 5 1.6 2.3 0.44 0.6
Uji MANOVA
Dari hasil uji MANOVA yang ditunjukkan pada tabel 4.7 diperoleh nilai
p untuk jumlah dan diameter sel busa berturut-turut adalah 0.004, dan
0.002 yang menunjukkan bahwa terdapat hubungan yang bermakna secara
50
statistik antara obesitas dan keseluruhan variabel yang kami gunakan untuk
menilai lesi awal aterosklerosis.
4.1.8 Analisis Hubungan Kadar ET-1 Serum dengan Kejadian Lesi
Aterosklerosis
Tabel 4.8
Hasil Analisis Pearson Hubungan Kadar ET-1 dengan Lesi Atarosklerosis
Variabel Aterosklerosis
Jumlah Sel Busa Diameter Sel Busa
Kadar r= 0.558 r= 0.493
ET-1 P=0.094 (>0.5) p= 0.148 (>0.05)
N=10 N=10
Uji Korelasi Pearson
Gambar 4.11
Grafik Korelasi Antara Jumlah Sel Busa dan Kadar ET-1 Serum
KORELASI ANTARA JUMLAH DAN DIAMETER SEL BUSA

DENGAN KADAR ET-1 SERUM
50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Diameter Sel Busa (cm) JUMLAH SEL BUSA

KADAR ET-1 SERUM (pg/l)
Pada tabel 4.8 menunjukkan hasil uji korelasi pearson antara jumlah dan
diameter sel busa dengan kadar ET-1 serum. Uji korelasi pearson antara
jumlah sel busa aorta dengan kadar ET-1 serum menunjukkan nilai r 0.558 yang
berarti bahwa terhadap korelasi positif yang cukup kuat antara kedua variabel
dengan nilai p 0.094 yang menunjukkan bahwa korelasi antara kadar ET-1
dengan jumlah sel busa aorta tidak begitu bermakna secara statistik. Untuk uji
51
korelasi pearson antara jumlah diameter sel busa aorta dengan kadar ET-1
serum menunjukkan nilai r 493 yang berarti bahwa terhadap korelasi positif
yang cukup kuat antara kedua variabel dengan nilai p 0.148 yang menunjukkan
bahwa korelasi antara kadar ET-1 dengan jumlah sel busa aorta tidak begitu
bermakna secara statistik.
4.2 Pembahasan
Untuk mengetahui hubungan antara kadar ET-1 serum dengan jumlah sel
busa pada aorta, kami melakukan penelitian eksperimental dengan rancangan
Posttest Only Control Group Desaign dengan menggunakan 10 ekor tikus putih
(Rattus Norvegicus) galus Wistar jantan dengan usia 30 hari. Kemudian,
kesepuluh tikus tersebut dikelompokkan ke dalam dua kelompok, yaitu
kelompok kontrol yang diberikan pakan biasa yaitu ad 2 sebanyak 15 gr/hari dan
kelompok perlakuan yang diberikan pakan tinggi lemak dan tinggi karbohidrat
yaitu cp-551 sebanyak 20gr/hari dan susu dancow fortigro sebanyak 9 gr/hari
yang dilarutkan ke dalam air hangat sebanyak 50 cc.
Pemberian pakan tersebut diberikan selama 45 hari dan kemudian
dihitung indeks obesitas (indeks rohrer) untuk masing-masing tikus. Kelompok
kontrol memiliki indeks rohrer yang kurang dari 30 dan untuk kelompok
perlakuan memiliki indeks rohrer yang lebih dari 30. Pemberian pakan
dilanjutkan hingga hari ke 150 untuk mempertahankan obesitas tikus perlakuan.
Pada hari ke-150, seluruh tikus diterminasi untuk diambil darah dari jantung
untuk memeriksa kadar ET-1 serumnya dan pengambilan pembuluh darah aorta
untuk diperiksa lesi aterosklerosisnya.
52
Untuk menganalisis hubungan antara obesitas dengan kadar ET-1 serum
dilakukan dengan uji Independent T-Test yang menunjukkan nilai p>0.05 yang
artinya, secara statistik tidak ada perbedaan yang signifikan pengaruh obesitas
terhadap perubahan kadar ET-1 serum, walaupun terdapat sedikit peningkatan
kadar ET-1 serum pada tikus kelompok obesitas. Temuan kami sejalan dengan
penelitian yang dilakukan oleh Da Silva A. dkk (2004) yang menemukan bahwa,
walaupun terdapat perubahan komposisi lemak visceral, tidak terjadi
peningkatan kadar ET-1 yang signifikan pada subjek tikus yang diberikan pakan
tinggi lemak selama 12 bulan.
Tetapi, Hal ini sedikit berbeda dengan beberapa penelitian lainnya seperti
yang dilakukan oleh Shancez A. dkk (2014) yang menemukan bahwa terjadi
peningkatan kadar ET-1 pada arteri penile pada tikus obesitas. Traupe T dkk
(2002) juga menemukan bahwa terjadi peningkatan aktivitas mediator
vasokonstriktor yang berasal dari sel endotel, seperti ET-1, pada subjek tikus
obesitas normotensi. Lebih lanjut, Kubota dkk (2017) menyimpulkan bahwa
obesitas merupakan kondisi yang mendasari terjadinya ketidakseimbangan
antara mediator vasorelaksan dan vasokonstrikor yang menyebabkan terjadinya
resistenis insulin.
Tidak signifikannya hasil yang kami temukan diduga akibat belum terjadiya
disfungsi endotel yang berat pada tikus kami (da Silva et al. 2004). Hal tersebut
dapat disebabkan oleh faktor usia tikus yang kami gunakan sebagai subjek
penelitian. Kami menggunakan subjek tikus usia 21-30 hari yang setara kira-kira
2-4 tahun pada usia manusa hingga usia 150-180 hari yang setara dengan 17-
20 tahun usia pada manusia (Quinn 2005; Sengupta 2014), sedangkan subjek
53
penelitian yang digunakan pada beberapa penelitian pada manusia di atas
berkisar antara 50-60 tahun . Hal ini didukung oleh penelitian yang dilakukan
oleh Gery P. dkk (2007), Donato J.A. dkk ( 2009), dan Goettsch dkk (2001) yang
menemukan bahwa terdapat peran yang signifikan usia terhadap peningkatan
kadar ET-1 serum.
Selain itu, sampel yang kami gunakan adalah serum hasi sentrifus dari
darah tikus. Sedangkan diketahui bahwa ET-1 adalah sebuah peptida yang
bekerja sebagai autokrin atau parakrin dengan organ target sel endotel dan sel
otot polos. Hal tersebut menyebabkan ET-1 lebih banyak disekresikan ke sel
endotel atau sel otot polos vaskuler dibandingkan ke bagian lumen vaskuler
(Fan et al. 2000). Maka penggunaan sampel serum, terutama pada usia tikus
yang masih muda, kurang dapat menunjukkan kadar ET-1 yang sebenarnya
diproduksi oleh sel endotel vaskuler.
Untuk menganalisis hubungan antara obesitas dengan jumlah dan
diameter sel busa aorta pada penelitian ini, kami menggunakan uji MANOVA.
Nilai p dari semua variabel tersebut menunjukkan nilai < 0.05 yang
menunjukkan bahwa terdapat hubungan yang signifikan secara statistik antara
obesitas dengan dengan jumlah dan diameter sel busa aorta sebagai variabel
lesi aterosklerosis. Hal tersebut sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh
Mcgill H.C. dkk (2002), Berenson G.S. dkk ( 1998), dan McGill H.C dan
McMahan C.H ( 1998) yang menyatakan bahwa obesitas yang dialami pada
usia remaja dan dewasa muda berkaitan erat dengan kejadian lesi permulaan
aterosklerosis.
54
Untuk melihat hubungan antara kadar ET-1 serum dengan dengan jumlah
dan diameter sel busa aorta dilakukan dengan uji korelasi pearson. Nilai korelasi
pearson yang kami peroleh yaitu 0.558 yang berarti bahwa terdapat korelasi
positif dengan kekuatan yang cukup antara kadar ET-1 plasma dengan kejadian
lesi aterosklerosis aorta, sedangkan nilai p > 0.05 menunjukkan bahwa secara
statistik, tidak terdapat hubungan yang signifikan antara peningkatan kadar ET-1
serum pada tikus obesitas dengan jumlah sel busa aorta. Nilai korelasi pearson
yang kami peroleh yaitu 0.494 yang juga menunjukkan bahwa terdapat
hubungan positif dengan kekuatan yang cukup antara kadar ET-1 plasma
dengan kejadian lesi aterosklerosis aorta, namun kurang bermaknsa secara
statistic (p>0.05). Hal ini sedikit berbeda dengan beberapa penelitian
sebelumnya yang menyatakan bahwa terdapat peran ET-1 yang signifikan
terhadap jumlah sel busa aorta (Wang & Bennett 2012; Kopaei et al. 2014; Fan
et al. 2000).
Hal yang menarik dari penelitian ini adalah walaupun tidak terdapat
peningkatan kadar ET-1 serum yang signifikan pada tikus obesitas
dibandingkahn tikus kontrol, tetapi terdapat jumlah sel busa pada aorta yang
lebih banyak pada tikus obesitas dibandingkan dengan tikus kontrol. Hal
tersebut menunjukkan adanya variabel lain yang berperan dalam menyebabkan
terjadinya lesi awal aterosklerosis pada subjek obesitas. Beberapa variabel
yang kami duga dapat berperan pada proses pembentukan aterosklerosis pada
kondisi obesitas adalah, penurunan biavailabilitas Nitric Oxide (Williams et al.
2002), hiperkolesterolemia (Rooy & Pretorius 2014), hipertrigliserida (Talayero &
55
Sacks 2011), inflamasi (Rocha & Libby 2009), dan terjadinya stres oksidatif
(Nakano et al. 2017).
4.3 Keterbatasan Penelitian
Terdapat beberapa keterbatasan di dalam penelitian ini yang
menyebabkan hasil penelitian ini tidak bermakna secara statistik.
1. Kami menggunakan subjek tikus yang masih berusia sangat muda
sehingga fungsi protektif terhadapa keseimbangan antara vasokonstriktor
dan vasodilator masih baik. Hal tersebut menyulitkan kami untuk menilai
efek obesitas terhadap kadar ET-1 serum
2. Kami menggunakan pakan yang tidak spesifik terhadap karbohidrat
ataupun lemak sehingga sulit untuk menentukan jenis makromolekul yang
berefek terhadap ateroskelrosis pada penelitian ini.
3. Kami menggunakan sampel serum bukan pembuluh darah untuk
memeriksa kadar ET-1 sehingga hasilnya masih belum signifikan.
56
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian ini dapat ditarik beberapa kesimpulan, yaitu:
1) Tidak terdapat perbedaan bermakna kadar ET-1 serum pada tikus
obesitas dan non obesitas.
2) Terdapat hubungan yang signifikan antara obesitas dan lesi
aterosklerosis, dimana pada tikus obesitas terdapat lesi aterosklerosis
yang lebih banyak dibandingkan dengan tikus non obesitas.
3) Terdapat hubungan yang cukup kuat antara antara kadar ET-1 serum
dengan lesi awal aterosklerosis walaupun tidak signifikan secara
statistik.
5.2 Saran
1) Pada penelitian berikutnya disarankan menggunakan tikus berusia
dewasa.
2) Menggunakan pakan yang lebih spesifik terhadap salah satu jenis
makromolekul.
3) Untuk pemeriksaan ET-1 dapat dilakukan dengan menggunakan
sampel vaskuler sebagai organ target dari ET-1.
4) Dapat dilakukan pemeriksaan beberapa variabel lain untuk mencari tau
faktor yang paling berperan terhadap kejadian aterosklerosis pada
obesitas.
57
DAFTAR PUSTAKA
Atkinson, R.L., 2014. Current status of the field of obesity. Trends in Endocrinology &
Metabolism, pp.1–2. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.tem.2014.03.003.
Aziz, M., 2016. iMedPub Journals Pathogenesis of Atherosclerosis A Review

Pathophysiology. , pp.1–6.
Ballinger, M.L. et al., 2009. Endothelin-1 activates ETA receptors on human vascular
smooth muscle cells to yield proteoglycans with increased binding to LDL. , 205,
pp.451–457.
Bandeali, S. & Farmer, J., 2012. High-Density Lipoprotein and Atherosclerosis : The
Role of Antioxidant Activity. , pp.101–107.
Barton, M. et al., 1998. Endothelin ETA receptor blockade restores NO-mediated

endothelial function and inhibits atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient
mice. Proceedings of the National Academy of Sciences, 95(24), pp.14367–
14372. Available at:
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?artid=24379&tool=pmcentr
ez&rendertype=abstract%5Cnhttp://www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.95.24.1
4367.
Bernson, G.S. et al., 1998. Association between multiple cardiovascular risk factors
and atherosclerosis in children and young adults. The New England Journal of
Medicine, 338(23), pp.1650–1656.
Blüher, M., 2013. Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism
Adipose tissue dysfunction contributes to obesity related metabolic diseases.
Best Practice & Research Clinical Endocrinology & Metabolism, pp.1–15.
Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.beem.2013.02.005.
Böhm, F. & Pernow, J., 2007. The importance of endothelin-1 for vascular
dysfunction in cardiovascular disease. , 76, pp.8–18.
Boulanger, C.M. et al., 1992. Oxidized low density lipoproteins induce mRNA
expression and release of endothelin from human and porcine endothelium.
Circulation Research, 70, pp.1191–1197.
Caballero, B., 2017. The Global Epidemic of Obesity : An Overview. ,

29(September), pp.1–5.
Campia, U. et al., 2014. The vascular endothelin system in obesity and type 2
diabetes: Pathophysiology and therapeutic implications. Life Sciences, 118(2),
pp.149–155. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2014.02.028.
Cardillo, C. et al., 2004. Enhanced Vascular Activity of Endogenous Endothelin-1 in

Obese Hypertensive Patients. Hypertension, 43(1), pp.36–40.
Carnevale, R. et al., 2014. LDL oxidation by platelets propagates platelet activation

via an oxidative stress-mediated mechanism. Atherosclerosis, 237(1), pp.108–
58
116. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.atherosclerosis.2014.08.041.
Cassis, L.A., Lynch, K.R. & Peach, M.J., 1988. Localization of angiotensinogen
messenger RNA in rat aorta. Circulation research, 62, pp.1259–1262. Available
at: http://circres.ahajournals.org/content/circresaha/62/6/1259.full.pdf.
Catar, R.A. et al., 2015. Increased gene expression of the cardiac endothelin system
in obese mice. Hormone and Metabolic Research, 47(7), pp.509–515.
Chalovich, J.M. & Eisenberg, E., 2005. NIH Public Access. Biophysical Chemistry,
257(5), pp.2432–2437.
Cheng, T.-H. et al., 2001. Reactive Oxygen Species Mediate Cyclic Strain-induced
Endothelin-1 Gene Expression via Ras/Raf/extracellular Signal-regulated
Kinase Pathway in Endothelial Cells. Journal of Molecular and Cellular
Cardiology, 33(10), pp.1805–1814. Available at:
http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0022282801914440.
Chester, A.H. & Yacoub, M.H., 2014. The role of endothelin-1 in pulmonary arterial
hypertension.
Comuzzie, A.G. et al., 2012. Novel Genetic Loci Identified for the Pathophysiology of
Childhood Obesity in the Hispanic Population. , 7(12).
Dashwood, M.R. & Tsui, J.C.S., 2011. Further evidence for a role of endothelin-1
(ET-1) in critical limb ischaemia. Journal of Cell Communication and Signaling,
5(1), pp.45–49.
Desvergne, B., Feige, J.N. & Casals-casas, C., 2009. Molecular and Cellular
Endocrinology PPAR-mediated activity of phthalates : A link to the obesity
epidemic ? , 304, pp.43–48.
Donato, A.J. et al., 2009. Vascular endothelial dysfunction with aging : endothelin-1
and endothelial nitric oxide synthase. , 80309.
Duerrschmidt, N. et al., 2000. Endothelin-1 induces NAD(P)H oxidase in human

endothelial cells. Biochemical and Biophysical Research Communications, 269,
pp.713–717.
Ergul, A., 2011. Endothelin-1 and diabetic complications : Focus on the vasculature. ,
63, pp.477–482.
F.M. Hofman, P. Chen, R. Jeyaseelan, F. Incardona, M. Fisher, and R.Z., 1998.

Endothelin-1 Induces Production of the Neutrophil Chemotactic Factor
Interleukin-8 by Human Brain-Derived Endothelial Cells. , 92(9), pp.3064–3072.
Fan, J. et al., 2000. Role of Endothelin-1 in Atherosclerosis a. , pp.84–94.
Feig, J.E. et al., 2014. High-Density Lipoprotein and Atherosclerosis Regression. ,

pp.205–214.
Ferri, C. et al., 1995. Insulin stimulates endothelin-1 secretion from human
59
endothelial cells and modulates its circulating levels in vivo . Journal of Clinical
Endocrinology and Metabolism, 80(February), pp.829–835.
Ferri, C. et al., 1995. Plasma endothelin-1 levels in obese hypertensive and

normotensive men. Diabetes, 44(4), pp.431–436.
Gisterå, A. & Hansson, G.K., 2017. The immunology of atherosclerosis. Nature.
Glass, C.K. & Witztum, J.L., 2001. Atherosclerosis : The Road Ahead Review. , 104,
pp.503–516.
Goettsch, W. et al., 2001. Increased expression of endothelin-1 and inducible nitric

oxide synthase isoform II in aging arteries in vivo: Implications for
atherosclerosis. Biochemical and Biophysical Research Communications,
280(3), pp.908–913.
Gómez, M. et al., 2014. Relationship of lipid oxidation with subclinical atherosclerosis

and 10-year coronary events in general population. Atherosclerosis, 232(1),
pp.134–140. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.atherosclerosis.2013.10.026.
Hinney, A., Vogel, C.I.G. & Hebebrand, J., 2010. From monogenic to polygenic
obesity : recent advances. , pp.297–310.
Houde, M., Desbiens, L. & D’Orlens-Juste, D., 2016. Endothelin-1 : Biosynthesis ,

Signaling and Vasoreactivity. , 77.
Hughes, a K. et al., 1996. Effect of reactive oxygen species on endothelin-1

production by human mesangial cells. Kidney international, 49(1), pp.181–189.
Husain, K., 2015. Inflammation, oxidative stress and renin angiotensin system in
atherosclerosis. World Journal of Biological Chemistry, 6(3), p.209. Available at:
http://www.wjgnet.com/1949-8454/full/v6/i3/209.htm.
Hussain, S.S. & Bloom, S.R., 2012. The regulation of food intake by the gut-brain
axis : implications for obesity. , (December 2011), pp.1–9. Available at:
http://dx.doi.org/10.1038/ijo.2012.93.
Idris-Khodja, N. et al., 2016. Endothelin-1 Overexpression Exaggerates Diabetes-

Induced Endothelial Dysfunction by Altering Oxidative Stress. American Journal
of Hypertension, 29(11), pp.1245–1251.
Imai, T. et al., 1992. Induction of endothelin-1 gene by angiotensin and vasopressin

in endothelial cells. Hypertension (Dallas, Tex. : 1979), 19(6 Pt 2), pp.753–7.
Available at: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1592477.
Johnson, J.L., 2017. Emerging regulators of vascular smooth muscle cell function in
the development and progression of atherosclerosis. , (September), pp.452–
460.
Jr, M.A.G. & García-cardeña, G., 2016. Endothelial Cell Dysfunction and the
Pathobiology of Atherosclerosis. , pp.620–637.
60
Kadouh, H.C. & Acosta, A., 2016. Author ’ s Accepted Manuscript. Techniques in
Gastrointestinal Endoscopy. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.tgie.2016.12.001.
Kadouh, H.C. & Acosta, A., 2017. Techniques in Gastrointestinal Endoscopy Current
paradigms in the etiology of obesity. Techniques in Gastrointestinal Endoscopy,
19(1), pp.2–11. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.tgie.2016.12.001.
Kahler, J. et al., 2002. Endothelin-1 mRNA and protein in vascular wall cells is
increased by reactive oxygen species. Clin.Sci.(Lond), 103, p.176S–178S.
Kawanabe, Y. & Nauli, S.M., 2011. Cellular and Molecular Life Sciences. , pp.195–
203.
Kayser, B. & Verges, S., 2013. Hypoxia , energy balance and obesity : from
pathophysiological mechanisms to new. , pp.1–14.
Kearney, J., 1999. Physical inactivity , sedentary lifestyle and obesity in the
European Union.
Kelishadi, R., Poursafa, P. & Jamshidi, F., 2013. Role of Environmental Chemicals in
Obesity : A Systematic Review on the Current Evidence. , 2013.
Kemper, H.C.G. et al., 1999. Lifestyle and obesity in adolescence and young
adulthood : results from the Amsterdam Growth And Health Longitudinal ...
Lifestyle and obesity in adolescence and young adulthood : results from the
Amsterdam Growth And Health Longitudinal Study ( AGAHLS ). , (May).
Kohan, D.E. et al., 2011. Regulation of Blood Pressure and Salt Homeostasis by
Endothelin. , pp.1–77.
Kopaei, M.R. et al., 2014. Atherosclerosis : Process , Indicators , Risk Factors and
New Hopes. , 5(8), pp.927–946.
Kubota, T., Kubota, N. & Kadowaki, T., 2017. Imbalanced Insulin Actions in Obesity
and Type 2 Diabetes : Key Mouse Models of Insulin Signaling Pathway. Cell
Metabolism, 25(4), pp.797–810. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.cmet.2017.03.004.
Kyotani, Y. et al., 2016. Endothelin-1 ( 1-31 ) Causes the Migration of Vascular

Smooth Muscle Cells through Endothelin ET A Receptor. , 13(6), pp.1–7.
Lafontan, M., 2014. Adipose tissue and adipocyte dysregulation. Diabetes and
Metabolism, 40(1), pp.16–28. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.diabet.2013.08.002.
Li, L. et al., 2003. Endothelin-1 Stimulates Arterial VCAM-1 Expression Via NADPH
Oxidase – Derived Superoxide in Mineralocorticoid Hypertension. , pp.997–
1004.
Li, M.W. et al., 2013. Endothelin-1 overexpression exacerbates atherosclerosis and

induces aortic aneurysms in apolipoprotein e knockout mice. Arteriosclerosis,
61
Thrombosis, and Vascular Biology, 33(10), pp.2306–2315.
Liao, J.K., 2013. Linking endothelial dysfunction with endothelial cell activation. ,
123(2).
Lim, S. & Park, S., 2014. Role of vascular smooth muscle cell in the inflammation of
atherosclerosis. , 47(1), pp.1–7.
Lin, Y.J. et al., 2014. Angiotensin II enhances endothelin-1-induced vasoconstriction

through upregulating endothelin type A receptor. Biochemical and Biophysical
Research Communications, 451(2), pp.263–269. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.bbrc.2014.07.119.
Lovren, F., Teoh, H. & Verma, S., 2015. Obesity and Atherosclerosis: Mechanistic
Insights. Canadian Journal of Cardiology. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.cjca.2014.11.031.
Marinou, K. et al., 2010. Obesity and cardiovascular disease : From pathophysiology

to risk strati fi cation. International Journal of Cardiology, 138(1), pp.3–8.
Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.ijcard.2009.03.135.
Matsuda, M. & Shimomura, I., 2013. Increased oxidative stress in obesity:

Implications for metabolic syndrome, diabetes, hypertension, dyslipidemia,
atherosclerosis, and cancer. Obesity Research and Clinical Practice, 7(5),
pp.1–12. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.orcp.2013.05.004.
Mccarron, R.M. et al., 1993. Endothelin induction of adhesion molecule expression

on human brain microvascular endothelial cells. , 156, pp.31–34.
Mcgill, H.C. et al., 2002. Clinical Investigation and Reports Obesity Accelerates the
Progression of Coronary Atherosclerosis in Young Men. , pp.2712–2719.
McGill, H.C. et al., 2002. Obesity accelerates the progression of coronary

atherosclerosis in young men. Circulation, 105(23), pp.2712–2718.
Mcgill, H.C. & Mcmahan, C.A., 1998. Determinants of Atherosclerosis in the Young. ,
9149(98).
Mitra, S., Goyal, T. & Mehta, J.L., 2011. Oxidized LDL, LOX-1 and atherosclerosis.
Cardiovascular Drugs and Therapy, 25(5), pp.419–429.
Morawietz, H. et al., 2001. Induction of the OxLDL Receptor LOX-1 by Endothelin-1

in Human Endothelial Cells. Biochemical and Biophysical Research
Communications, 284(4), pp.961–965. Available at:
http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0006291X01950442.
Mudau, M. et al., 2012. Review Article Endothelial dysfunction : the early predictor of
atherosclerosis. , 23(4), pp.222–231.
Nakano, R. et al., 2017. Involvement of oxidative stress in atherosclerosis

development in subjects with sarcopenic obesity. Obesity Science & Practice,
3(2), pp.212–218. Available at: http://doi.wiley.com/10.1002/osp4.97.
62
Nasri, H., 2013. education and prevention ; a nephrology point of view. , 2(2), pp.31–
32.
Oliver, F.J. et al., 1991. Stimulation of endothelin-1 gene expression by insulin in

endothelial cells. Journal of Biological Chemistry, 266(34), pp.23251–23256.
P. Gary et al., 2007. Endothelin-1 vasoconstrictor tone increases with age in healthy
men but can be reduced by regular aerobic exercise. Hypertension, 50(2),
pp.403–409.
Peluso, I. et al., 2012. Oxidative Stress in Atherosclerosis Development : The Central

Role of LDL and Oxidative Burst. , pp.351–360.
Penelitian, B. & Pengembangan, D.A.N., 2013. RISET KESEHATAN DASAR.
Perez, A.L. et al., 2016. Increased mortality with elevated plasma endothelin- 1 in
acute heart failure : an ASCEND-HF biomarker substudy. European Society of
Cardiology, pp.290–297.
Pernow, J., Shemyakin, A. & Böhm, F., 2012. New perspectives on endothelin-1 in
atherosclerosis and diabetes mellitus. Life Sciences, 91(13–14), pp.507–516.
Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2012.03.029.
Pirillo, A., Norata, G.D. & Catapano, A.L., 2013. LOX-1 , OxLDL , and
Atherosclerosis. , 2013(Figure 1).
Porwal, V. et al., 2016. Original Article Histological Classification of Atherosclerosis

and Correlation with Ischemic Heart Disease : A Autopsy Based Study. , (2).
Pu, Q. et al., 2003. Endothelin antagonism on aldosterone-induced oxidative stress

and vascular remodeling. Hypertension, 42(1), pp.49–55.
Quinn, R., 2005. Comparing rat’s to human’s age: How old is my rat in people years?
Nutrition, 21(6), pp.775–777.
Rahmouni, K. et al., 2005. Obesity-associated hypertension: New insights into

mechanisms. Hypertension, 45(1), pp.9–14.
Ramachandrappa, S. & Farooqi, I.S., 2011. Review series Genetic approaches to

understanding human obesity. , 121(6).
Rocha, V.Z. & Libby, P., 2009. obesity , inflammation , and atherosclerosis. Nature
Publishing Group, 6(6), pp.399–409. Available at:
http://dx.doi.org/10.1038/nrcardio.2009.55.
Rooy, M.-J. & Pretorius, E., 2014. Obesity, Hypertension and Hypercholesterolemia
as Risk Factors for Atherosclerosis Leading to Ischemic Events. Current
Medicinal Chemistry, 21(19), pp.2121–2129. Available at:
http://www.eurekaselect.com/openurl/content.php?genre=article&issn=0929-
8673&volume=21&issue=19&spage=2121.
Rosenbaum, M., Knight, R. & Leibel, R.L., 2015. The gut microbiota in human
63
energy homeostasis and obesity. Trends in Endocrinology & Metabolism, pp.1–
9. Available at: http://dx.doi.org/10.1016/j.tem.2015.07.002.
Rossi, G.P. et al., 1999. Human Arteries Ex Vivo.
Sahebkar, A. et al., 2015. Statin therapy reduces plasma endothelin-1

concentrations: A meta-analysis of 15 randomized controlled trials.
Atherosclerosis, 241(2), pp.433–442. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.atherosclerosis.2015.05.022.
Sakakura, K. et al., 2013. Pathophysiology of Atherosclerosis Plaque. Heart, Lung

and Circulation, 22(6), pp.399–411. Available at:
http://dx.doi.org/10.1016/j.hlc.2013.03.001.
Sánchez, A. et al., 2014. Endothelin-1 contributes to endothelial dysfunction and

enhanced vasoconstriction through augmented superoxide production in penile
arteries from insulin-resistant obese rats: Role of ET<inf>A</inf> and
ET<inf>B</inf> receptors. British Journal of Pharmacology, 171(24), pp.5682–
5695.
Sciences, M., Building, L. & Tower, C., 2006. Obesogenic environments : exploring
the built and food environments. , 126(6), pp.262–267.
Sengupta, P., 2014. The Laboratory Rat : Relating Its Age With Human ’ s.
International Journal of Preventive Medicine, 4(6), pp.624–630.
Serra-majem, L. et al., 2013. Etiology of obesity : two “ key issues ” and other
emerging factors. , 28, pp.32–43.
Setorki, M. et al., 2011. Anti atherosclerotic effects of verjuice on

hypocholesterolemic rabbits. , 5(August), pp.1038–1045.
Shihoya, W. et al., 2016. Activation mechanism of endothelin ET B receptor by

endothelin-1. Nature, 537(7620), pp.363–368. Available at:
http://dx.doi.org/10.1038/nature19319.
da Silva, A.A. et al., 2004. Role of Endothelin-1 in Blood Pressure Regulation in a

Rat Model of Visceral Obesity and Hypertension. Hypertension, 43(2), pp.383–
387.
Singh, U. & Jialal, I., 2006. Oxidative stress and atherosclerosis. , 13, pp.129–142.
Stary, H.C., 2000. Natural History and Histological Classification of Atherosclerotic

Lesions. Arteriosclerosis, Thrombosis & Vascular Biology, 20(5), pp.1177–1178.
Swirski, F.K. & Nahrendorf, M., 2013. Leukocyte Behavior in. , 161.
Tabas, I., García-cardeña, G. & Owens, G.K., 2015. Recent insights into the cellular
biology of atherosclerosis. , 209(1), pp.13–22.
Talayero, B.G. & Sacks, F.M., 2011. The role of triglycerides in atherosclerosis.
Current Cardiology Reports, 13(6), pp.544–552.
64
Tesauro, M. & Cardillo, C., 2011. Obesity, blood vessels and metabolic syndrome.
Acta Physiologica, 203(1), pp.279–286.
Traupe, T. et al., 2002. Effects of obesity on endothelium-dependent reactivity during

acute nitric oxide synthase inhibition: modulatory role of endothelin. Clinical
science (London, England : 1979), 103 Suppl, p.13S–15S.
Unic, A. et al., 2011. Endothelins - clinical perspectives. , 21(3).
Uzogara, S.G., 2017. Obesity Epidemic , Medical and Quality of Life Consequences :
A Review. , 5(1), pp.1–12.
V.M.R.a, C.A.. · B.F.. · Q.P.. · D.E.. · B.S.. · F.R.. · P.R.. · S., Non-Lipid-Related
Effects of 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase Inhibitors.
Vignon-Zellweger, N. et al., 2012. Endothelin and endothelin receptors in the renal

and cardiovascular systems. Life Sciences, 91(13–14), pp.490–500. Available
at: http://dx.doi.org/10.1016/j.lfs.2012.03.026.
Virdis, A., 2016. Endothelial Dysfunction in Obesity: Role of Inflammation. High

Blood Pressure & Cardiovascular Prevention, 23(2), pp.83–85. Available at:
http://link.springer.com/10.1007/s40292-016-0133-8.
Wang, J.C. & Bennett, M., 2012. Aging and Atherosclerosis Mechanisms , Functional
Consequences , and Potential Therapeutics for Cellular Senescence.
Weil, B.R. et al., 2011. Enhanced endothelin-1 system activity with overweight and
obesity. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 301(3), pp.H689-95.
WHO, 2017. Obesity and overweight. , pp.1–6.
Williams, I.L. et al., 2002. Obesity, atherosclerosis and the vascular endothelium:
Mechanisms of reduced nitric oxide bioavailability in obese humans.
International Journal of Obesity, 26(6), pp.754–764.
Williams, K.J. & Bore, J., 2016. The central role of arterial retention of cholesterol-
rich apolipoprotein-B-containing lipoproteins in the pathogenesis of
atherosclerosis : a triumph of simplicity.
Wilson, C. et al., 2015. Using Plasma Matrix Metalloproteinase-9 and Monocyte

Chemoattractant Protein-1 to Predict Future Cardiovascular Events in Subjects
with Carotid Atherosclerosis. , 347(6224), pp.882–886.
Wilson, S.H., Simari, R.D. & Lerman, A., 2001. The Effect of Endothelin-1 on Nuclear
Factor Kappa B in Macrophages. , 972, pp.968–972.
Wu, M.-Y. et al., 2017. New Insights into the Role of Inflammation in the
Pathogenesis of Atherosclerosis. International Journal of Molecular Sciences,
18(10), p.2034. Available at: http://www.mdpi.com/1422-0067/18/10/2034.
Yanagisawa, M. et al., 1988. A novel potent vasoconstrictor peptide produced by

vascular endothelial cells.
65
Yoshizumi, M. et al., 1998. Effect of endothelin-1 ( 1-31 ) on extracellular signal-
regulated kinase and proliferation of human coronary artery smooth muscle
cells. , 1, pp.1019–1027.
Zaina, S. et al., 2014. DNA methylation map of human atherosclerosis,
Zheng, J.S. et al., 2003. Gene transfer of human guanosine 5???-triphosphate

cyclohydrolase I restores vascular tetrahydrobiopterin level and endothelial
function in low renin hypertension. Circulation, 108(10), pp.1238–1245.
66
67

Tesis: Muhammad Isman Sandira P1502216010

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Tesis: Muhammad Isman Sandira P1502216010

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

TESIS

HUBUNGAN ANTARA KADAR ENDOTHELIN-1 SERUM

THE CORRELATION OF ENDOTHELIN-1 SERUM LEVEL WITH

MUHAMMAD ISMAN SANDIRA

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

THE CORRELATION OF ENDOTHELIN-1 SERUM LEVEL WITH

Sebagai persyaratan untuk mempereh gear Magister

Disusun dan diajukan oleh

MUHAMMAD ISMAN SANDIRA

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

Yang bertanda tangan dibawah ini :

Nama : Muhammad Isman Sandira

Program Studi : Biomedik

Makassar, July 2018

Muhammad Isman Sandira

pihak. Penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada

1. Prof.Dr. Muhammad Ali, S.E., M.S selaku Dekan Sekolah Pascasarjana

program studi biomedik yang telah menginjinkan penulis menempuh pendidikan

di sekolah pascasarjana Universitas Hasanuddin.

membimbing penulis, sehingga tesis ini dapat diselesaikan dengan baik.

memberikan arahan dan bimbingan selama penyelesaian tesis ini.

4. dr. Isra Wahid, Ph.D. selaku kepala laboratorium entomologi FK Unhas

memberikan izin kami untuk melakukan penelitian di laboratorium Entomologi.

Seluruh staff laboratorium Entomologi Fakultas Kedokteran Universitas

pengalaman Selama penulis menempuh pendidikan di Sekolah Pascsarjana

Universitas Hasanuddin. Seluruh staff dan pegawai akademik sekolah

Pascasarjana Universitas Hasanuddin yang telah membantu administrasi penulis

selama menempuh pendidikan.

memberikan motivasi dan semangat kepada saya dalam menjalani program

melewati segala proses magister dengan lancar.

8. Teman-teman seperjuangan S2 Fisiologi angkatan 2016 untuk kebersamaan,

kekompakan, dan dorongan semangat selama penulis menempuh pendidikan S2.

sayang yang memenuhi setiap langkah perjuangan penulis.

membantu penulis menyelesaikan tesis ini.

Makassar, July 2018

Muhammad Isman Sandira

HALAMAN SAMPUL .............................................................................................................. i

HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................................. iii

PERNYATAAN KEASLIAN TESIS ......................................................................................... iii

DAFTAR ISI ......................................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ................................................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................................... x

ABSTRAK BAHASA INDONESIA ........................................................................................ xii

ABSTRAK BAHASA INGGRIS ............................................................................................. xiii

1.1 Latar Belakang ...................................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................. 2

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................................... 2

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................................. 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Obesitas ................................................................................................................ 4

2.2 Aterosklerosis ....................................................................................................... 10

2.3 Endotelin-1 .......................................................................................................... 21

2.4 Hubungan Obesitas, Aterosklerosis, dan Endotelin-1 ............................................ 26

2.5 Kerangka Teori ...................................................................................................... 33

2.6 Kerangka Konsep .................................................................................................. 34

2.8 Defenisi Operasional ............................................................................................. 34

2.9 Hipotesis Penelitian ................................................................................................ 3

BAB III METODE PENELITIAN

3.1 Desain Penelitian .................................................................................................. 36

3.2 Waktu dan Tempat Penelitian ................................................................................ 36

3.3 Populasi ................................................................................................................ 36

3.4 Sampel dan Besaran Sampel ............................................................................... 36

3.5 Alat dan Bahan Penelitian ..................................................................................... 37