Bahan : Akar Wangi Chrysopogon zizanioides (L.) Roberty, syn. Vetiveria zizanioides (L.

Proses :

1. Pra Proses :
waktu penyimpanan yang terlalu lama mengurangi jumlah minyak yang
dihasilkan. Suhu saat panen untuk rendemen maksimum adalah 27C.
waktu penyimpanan hanya sampai 12-14 jam untuk nilai hasil minyak yang
optimal (Aggarwal dkk.,2008).
2. Ekstraksinya : Metode ekstraksi konvensional senyawa dari bahan tanaman termasuk
hidrodistilasi, distilasi uap dan ekstraksi pelarut. Cairan superkritis ekstraksi
(SFE), teknologi pemisahan baru dan ramah lingkungan.
2.2.1 Hidrodistilasi
Hidrodistilasi akar akar wangi menggunakan Clevenger-apparatus sebagai
dijelaskan dalam (Danh dkk., 2010) . Proses ini dilakukan dalam 12 jam.
2.2.2. Ekstraksi etanol
Ekstraksi etanol akar wangi dengan menggunakan alat Soxhlet yang
terhubung ke tabung bulat mengandung 500 ml etanol. Ekstraksi dilakukan
saat mendidih suhu etanol selama 5 jam. Setelah ekstraksi, etanol dihapus
oleh evaporasi pada titik didih.
2.2.3. Ekstraksi cairan superkritis
SCE etanol dimodifikasi dari minyak akar wangi yang dilakukan dengan
menggunakan versi modifikasi dari alat eksperimen. Katup mikro-metering
(MV1) dan mixer statis (SM) disisipkan pada sistem sebelumnya yaitu antara
katup V2 dan koil pemanas HC. Sebuah pompa HPLC mengantarkan etanol
yang terhubung antara MV1 dan SM. CO2 ditekan dalam kompresor (Model
ISCO 260D Syringe pump) pada tekanan 4 ◦C hingga yang ditentukan
sebelumnya. MV1 digunakan untuk mengontrol laju aliran CO2 bertekanan
dari kompresor. CO2 dan etanol bertekanan dipompa menjadi ekstraktor
melalui SM dan HC pada rasio volume yang berbeda etanol / CO2 (vol%).
SM meningkatkan pencampuran etanol dan CO2. Desain novel ini
memastikan rasio volume konstan etanol / CO2 digunakan dalam proses
ekstraksi keseluruhan. Tekanan dalam ekstraktor diisi dengan 10 g vetiver
kering akar agar sama dengan tekanan di pompa CO2. Sistem itu kemudian
 disetimbangkan selama 15 menit (panggung statis) pada suhu operasi dan
tekanan. Sistem ini kemudian diubah menjadi operasi dinamis selama laju
aliran CO2 dan dijaga pada 2ml/min diukur pada tekanan operasi dan 4 ◦C
untuk semua percobaan, dan laju alir etanol disesuaikan dengan spesifik
rasio volume etanol / CO2. Campuran ekstrak akar wangi etanol
dikumpulkan dalam tabung gelas selama tahap dinamis.
2.2. Microwave hydrodistillation method
Dalam menggunakan microwave hydrodistillation, kami menggunakan oven
microwave domestik (EMM2308X, Electrolux, daya kirim maksimum 800 W)
dengan frekuensi gelombang 2450 MHz. Dimensi dari rongga yang dilapisi
PTFE dari oven microwave adalah 48,5 cm x 37,0 cm x 29,25 cm. Microwave
oven dimodifikasi dengan mengebor lubang di bagian atas. Labu alas bulat
dengan kapasitas 1000 mL ditempatkan di dalam oven dan terhubung ke
aparat Clevenger melalui lubang. Kemudian, lubang itu ditutup dengan PTFE
untuk mencegah hilangnya panas di dalamnya.
Serbuk campur beberapa rasio pelarut (0,30; 0,40; 0,50 g / mL) ditempatkan
dalam tabung reaksi dan dipanaskan oleh radiasi gelombang mikro dengan
berbagai daya (300; 450; 600 W) dan berbagai waktu ekstraksi (60; 120; 180
min). Kepadatan yang berbeda dan ketidaksempurnaannya mengharuskan
air dan minyak vetiver dipisahkan dari satu sama lain dengan memisahkan
corong dan kelebihan air akan direfluks ke bejana ekstraksi secara
berurutan untuk memberikan kondisi yang seragam dari umpan ke rasio
pelarut untuk ekstraksi. Minyak vetiver dikumpulkan di botol kuning,
dikeringkan di bawah natrium sulfat anhidrat dan disimpan pada suhu 4oC.

Penyimpanan : Sifat fisiko-kimianya, komposisi kimia dan bau minyak wangi Indian
Selatan berubah selama penyimpanan jangka panjang. Viskositas, berat
jenis, indeks bias, gabungan alkohol, nilai ester dan konten ester
meningkat, sementara transparansi, rotasi optik. nilai asam, nilai ester
setelah asetilasi. Alkohol bebas, alkohol total, nilai karbonil dan kelarutan
(dalam alkohol 80%) dari minyak yang disimpan menurun selama periode
penyimpanan dari 6 bulan hingga 30 bulan.

Komponen Utama/penyusun: Seratus empat belas senyawa diidentifikasi 73,7-89,4% dari total minyak.
Komponen utama adalah hidrokarbon yaitu β-vetivenene (50, 3,1% av.), β-
vetispirene (31, 2,6% av.), Α-amorphene (28, 2,4% av.) Dan khusimene (21,
1,5% av.). Alkohol utama adalah khusimol (100, 9,0% av.) dan vetiselinenol
(104, 4,9% av.). Tiga keton utama adalah α-vetivone (111, 4.1% av.), β-
vetivone (107, 3,2% av.) dan khusimone (62, 0,8% av.). Apa pun asal
geografisnya (Brasil, China, Haiti, India, Jawa, Madagaskar, Meksiko,
Reunion, dan Salvador), data analisis statistik menegaskan komposisi kimia
dari minyak V. zizanioides relative sama (Champagnat dkk.,2014).
 Zizanoic acid, khusimol, α and β-vetivone and isovalencenol adalah
komponen utama. Minyak vetiver terdiri dari campuran kompleks
sesquiterpene alkohol dan hidrokarbon dengan lebih dari 300 senyawa
(Danh dkk., 2010). cedr-8-en-13-ol (12.4%), and the other major
compounds are a-amorphene (7.80%), b-vatirenene, (5.94%) and a-
gurjunene (5.91%) (Chou dkk., 2012).

Sebagai alkohol utama, selain itu khusimol (1), seseorang dapat

mempertimbangkan (E) -isovalencenol (3), vetiselinenol (5), spirovetiva-3,7
(11) -dien-12-ol (7), cyclocopacamphanol A (9), dan cyclocopacamphanol B
(11)

Sebagai alkohol sekunder, seseorang dapat mempertimbangkan khusian-2-

ol (13), bvetivol (15), isonootkatol (17), ziza-6 (13) -en-3a-ol (19), ziza- 6 (13)
-en-3b-ol (21), dan acor-4-en-3-ol (23) Sebagai alkohol tersier, seseorang
dapat mempertimbangkan cis-eudesm-6-en-11-ol (25), 10-epi-g-eudesmol
(27), cis-eudesm-6-en-4-ol (A dan B) (29), juniper kamper (31), a-eudesmol
(33), dan a-cadinol (35)

Manfaat dan Bioaktivitas : digunakan untuk memadukan parfum oriental, kosmetik dan kosmetik
aromaterapi. Baru-baru ini, penemuan aktivitas biologis baru minyak akar wangi dan komponennya,
seperti antijamur, antibakteri, antikanker, anti-inflamasi dan aktivitas antioksidan, buat vetiver
mengekstrak kandidat yang menjanjikan untuk aplikasi di farmasi industry (Danh dkk, 2010).

menekan respon inflamasi dari stimulasi LPS RAW 264,7 makrofag, termasuk produksi NO dan apoptosis
sel, melalui pengaturan ekspresi peradangan- enzim terkait HO-1, iNOS dan COX-2 dan sitokin inflamasi
TNF-a, IL-1b dan IFN-b. Selain itu, aktivitas anti-inflamasi VZ-EO berkorelasi dengan antioksidan aktivitas,
yang menurunkan produksi anion superoksida yang diinduksi oleh LPS dan tingkat MDA (Chou dkk.,
2012)

Lainnya : Rumput Vetiver telah berhasil digunakan untuk perlindungan lahan,

seperti konservasi tanah dan air, rehabilitasi lahan dan stabilisasi tanggul,
dalam 30 tahun terakhir(Danh dkk, 2010). Vetiveria zizanioides (rumput
vetiver), tanaman yang tumbuh cepat rumput tussock keluarga
Gramineae, dikenal sebagai ecofriendly tanaman yang mencegah erosi
tanah dan berguna dalam rehabilitasi lahan tercemar logam karena
toleransinya untuk meningkatkan kadar logam berat (Chou dkk., 2012).
Minyak esensial Vetiver juga digunakan sebagai bahan awal untuk
menyediakan bahan pewangi seperti vetiveryl acetate, vetiverol, dan
vetiverol acetate. Produksi minyak esensial vetiver di seluruh dunia,
sebagian besar dari Haiti, Indonesia, dan India, diperkirakan 80–120 ton
per tahun, dan sekitar 10% diubah menjadi vetiveryl acetate (Francesco
dkk.,2017).
Bahan : Minyak Biji Pala (Myristica fragrans Houtt.)

Proses :

1. Pra Proses : Benih pala kering yang matang digiling menjadi bubuk halus dan kemudian
disimpan dalam wadah kedap udara pada 4C hingga digunakan
(Morsy,2016).
2. Ekstraksinya :
Metode yang paling umum untuk penentuan miristisin dalam basis
bahan tanaman pada analisis minyak atsiri yang diperoleh hidrodistilasi
atau ekstraksi cairan superkritis (SFE), Ekstraksi padat-cair, teknik,
seperti maserasi dan ekstraksi refluks, serta ekstraksi ultrasonik-assisted
(UAE), yaitu dalam ultrasonic. Keuntungan yang jelas dari
hydrodistillation dan SFE adalah kurangnya ekstraksi pelarut organic
namun, kedua teknik tersebut membutuhkan banyak pertimbangan
sejumlah besar sampel dan mereka agak memakan waktu.
Di sisi lain, ekstraksi padat-cair dapat disesuaikan untuk memungkinkan
analisis jumlah sampel kecil, dan waktu ekstraksi dapat secara signifikan
dipersingkat, terutama jika teknik persiapan sampel lanjutan digunakan.
bekerja, kami menyajikan tiga persiapan sampel yang cepat dan efektif
metode penentuan miristisin pada pala dan fuli
sampel, menggunakan teknik UEA: ultrasonic (UAE-B) dan probe
ultrasonik atau sonotrode (UAE-S), serta ekstraksi dengan bantuan
gelombang mikro (MAE) (Nowak dkk.,2016).
1. Oleoresin Maserasi
Bubuk biji pala kering diekstraksi menggunakan teknik maserasi (teknik
1) dengan etanol absolute selama 3 hari pada suhu kamar menurut
Handa dkk. (2008). Ekstraksi dilakukan menggunakan pala bubuk untuk
rasio pelarut 1: 4 (b / v) dan, selanjutnya, Campuran disaring dan
dipekatkan dengan menggunakan vakum sebuah evaporator berputar
pada 40 C(Morsy,2016).
2. Ultrasound assisted extraction (UAE)
Alternatif baru untuk teknik konvensional untuk ekstraksi senyawa
target dari berbagai matriks termasuk mereka yang dibantu dengan
ultrasound atau microwave dan pra-perawatan yang meliputi
pemrosesan pengepresan tinggi dan konsumsi listrik. Teknik baru ini
menghilangkan penggunaan pelarut beracun, meningkatkan efisiensi
proses dan meningkatkan hasil ekstraksi dalam waktu yang lebih singkat
dengan lebih sedikit degradasi termal dan rasa ekstrak berkualitas tinggi.
Aplikasi ekstraksi dengan bantuan ultrasound meningkat baru-baru ini
karena kerugian yang terkait dengan konvensional dan beberapa teknik
ekstraksi baru lainnya, seperti investasi modal tinggi, konsumsi energi
 tinggi dan residu dari pelarut organik beracun dalam ekstrak (Tiwari
2015; Morsy 2015). Komponen makanan seperti aroma, pigmen,
antioksidan, dan senyawa bioaktif alami telah diekstraksi, dari berbagai
matriks dengan ultrasound- ekstraksi terbantu (Chemat et al. 2017).
Ultrasonication menghasilkan gelembung kavitasi yang runtuh.
Keruntuhan ini menimbulkan mikro-jet untuk melepaskan minyak
esensial dari kelenjar minyaknya. Efek kavitasi ini tergantung pada
frekuensi dan intensitas ultrasonik, suhu, waktu perawatan, yang sangat
penting untuk operasi ultrasonic.
Oleoresin diperoleh dengan mengekstraksi 10 g serbuk halus pala
dengan 40 mL etanol absolut. Campuran itu menjadi sasaran radiasi
ultrasonik dalam generator ultrasound (Fisher Sonic Dismemberator,
Model 300, 50 Hz, USA), dilengkapi dengan ujung diameter 19 mm.
Probe ultrasound direndam hingga kedalaman sekitar 5 mm. Ekstraksi
dibantu ultrasound dilakukan pada 20% dari daya output maksimal (60
W) selama 10 dan 25 menit (teknik 2 dan 3, masing-masing) dan pada
40% dari kekuatan output maksimal (120 W) selama 10 dan 25 menit.
(teknik 4 dan 5, masing-masing), pada suhu kamar. Setelah langkah
ultrasonik, ekstrak disaring, dan filtrat diuapkan hingga kering pada suhu
40 ° C di bawah tekanan tereduksi (Morsy,2016).
Dalam penelitian ini, tiga metode ekstraksi memanfaatkan MAE, UAE-S
dan UEA-B dikembangkan dan dioptimalkan untuk penentuan myristicin
dalam pala dan fuli. Prosedurnya cepat dan sederhana dan
membutuhkan volume rendah pelarut organik dan hanya 4– 8 mg
sampel, dan tidak diperlukan perawatan ekstrak tambahan. Di sisi lain,
jumlah sampel yang lebih besar dapat digunakan jika diperlukan, karena
berbagai linearitas metode GC-MS, dan metode yang dikembangkan
dapat ditingkatkan hingga 20 mg sampel.
Metode divalidasi dengan hasil yang baik, terbukti cocok untuk analisis
rempah-rempah, meskipun UAE-S dicirikan oleh presisi rendah dari
metode lain. Analisisnya sampel alami menunjukkan bahwa teknik MAE
adalah yang paling cocok satu untuk ekstraksi miristin dari pala dan
mungkin sampel lain yang kaya selulosa dan lignin (Nowak dkk.,2016)..
3. Penyimpanan : Kandungan myristicin, elemicin, dan safrole dianalisis. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa myristicin, elemicin, dan safrole dalam oleoresin pala yang dikemas
menurun selama penyimpanan sampai 28 hari penyimpanan dan kemudian mereka relatif stabil
sampai 63 hari. Energi aktivasi myristicin, elemicin, dan safrole adalah 2,21 kJ / mol K, 2,71 kJ /
mol K dan 3,22 kJ / mol K, masing-masing. dari 30C hingga 70 ° C menghasilkan sebuah
peningkatan laju degradasi myristicin senyawa dalam pala yang dienkapsulasi oleoresin. Itu
sekitar 86,58%. Degradasi myristicin mengikuti reaksi orde pertamamenunjukkan bahwa semakin
tinggi suhu penyimpanan enkapsulasi pala oleoresin dari 30oC ke 70 ° C sehingga tingkat
pengurangan senyawa safrole lebih tinggi, yang mencapai 142,68%. Dengan suhu penyimpanan
 pala oleoresin encapsulated yang lebih tinggi dari 30oC ke 70 ° C, tingkat penurunan senyawa
elemisin lebih besar yang mencapai 104,03% (Amrih dkk.,2017).

Komponen Utama/penyusun: Analisis GC-MS mengarah pada identifikasi dan kuantifikasi dari 53
senyawa berbeda yang mewakili [90% dari oleoresins konstituen yang mudah menguap. Secara total, 15
monoterpene hidrokarbon, 7 hidrokarbon seskuiterpena, 9 aromatik, 7 alkohol monoterpene, satu
oksida, satu sesquiterpene alkohol, 8 ester, satu keton dan 4 asam diidentifikasi. Hidrokarbon
monoterpene menunjukkan rerata tertinggi persentase diikuti dalam urutan menurun oleh aromatic
senyawa, asam, alkohol monoterpene dan ester dalam sampel oleoresin diperoleh dengan teknik
maserasi atau UEA 2 dan 3, sedangkan asam melebihi aromatik dalam oleoresin diperoleh dengan teknik
UEA 4 dan 5. Utama komponen dalam oleoresin pala adalah hidrokarbon monoterpena, asam
monoterpena, dan aromatik eter. Senyawa teroksigenasi sangat bau (paling berharga) sedangkan
hidrokarbon monoterpene hanya berkontribusi sedikit untuk aroma (kurang berharga) (Lucchesi et al.
2004). Tertinggi tingkat senyawa beroksigen tercatat di oleoresin diperoleh dengan teknik UEA 4.
Sabinene, myristicin, elemicin, a-pinene, b-pinene, limonene, terpinen-4-ol dan asam miristat ditemukan
sebagai senyawa utama. Analisis GC-MS ekstrak alkohol pala menunjukkan adanya empat senyawa
utama: myristicin, asam miristat, terpinen-4-ol dan methoxyeugenol. myristic kandungan asam mungkin
berfungsi sebagai indikator usia Biji pala. Teknik UEA mempengaruhi komposisi kimia oleoresin pala.
Beberapa komponen baru terbentuk seperti b-sesquiphellandrene, piperitol isomer dan ionone tidak
diidentifikasi pada oleoresin pala diperoleh dengan teknik maserasi(Morsy,2016).

Minyak atsiri biji pala diisolasi dengan hasil 6,85% b / b. Senyawa utama dalam minyak adalah sabinene
(21,38%), 4-terpineol (13,92%) dan miristisin (13,57%). Di sisi lain, turunan allylbenzene dan
propylbenzene (myristicin, safrole, eugenol, dan turunannya) adalah senyawa utama dalam biji pala
(subarnas dkk.,2010).

Manfaat dan Bioaktivitas : dan kosmetik. Pala oleoresin digunakan dalam persiapan hidangan daging
dan sayuran. Penelitian farmakologi mengungkapkan berbagai kegiatan pala seperti antioksidan,
antibakteri, antidiabetes, hipolipidemik, hepatoprotektif dan analgesik. Ekstrak etanol buah M. fragrans
menunjukkan rendah aktivitas antiproliferatif (efek penghambatan pertumbuhan B53%) terhadap paru-
paru, usus besar, prostat, kepala dan leher dan payudara garis sel kanker manusia. Rasa dan tindakan
terapeutik adalah karena minyak yang mudah menguap (Morsy,2016).

Kandungan myristicin dalam organ tumbuhan bervariasi, tergantung pada keduanya kondisi
pertumbuhan dan penyimpanan, dan itu bisa mencapai hingga 13 mg per 1 g dalam kacang M. fragrans
berkualitas tinggi (pala); itu juga berlimpah dalam aril kacang (mace) dan perikarpnya. Efek psikoaktif
biasanya berkembang setelah pemberian setidaknya 10 g ground pala dan termasuk efek amphetamine
dan halusinasi (Nowak dkk., 2016)

Minyak atsiri pala yang diuji di sini menunjukkan radikal DPPH yang kuat aktivitas scavenging dan
mencegah oksidasi asam linoleat. Penyaringan TLC senyawa antioksidan memimpin untuk identifikasi
elemisin, 4-terpineol, miristisin dan trans-sabinena hidrat sebagai komponen antioksidan utama Minyak
esensial. Nilai-nilai AAV yang diusulkan dalam penelitian ini menegaskan kembali peran tindakan sinergis
di antara berbagai komponen terhadap total aktivitas minyak. Menariknya, tidak ada fraksi diuji
memberi hasil yang sebanding dengan minyak dalam sistem uji asam linoleat. Minyak atsiri pala
memiliki potensi untuk digunakan lebih lanjut sebagai antioksidan dalam produk makanan kaya lipid.
Sejak pala minyak esensial telah terbukti memiliki banyak komponen dengan aktivitas antioksidan kuat
yang mereka miliki diuji sebagai obat yang mungkin untuk penyakit akibat oksidatif menekankan.
Potensi efek radioprotektif dari minyak esensial DNA plasmid ditunjukkan di sini untuk pertama kalinya.
Karena kepadatan rendah dan minyak esensial kelarutan lemak mereka dengan mudah menembus
membran sel. Dalam hal ini penggunaan minyak esensial sebagai agen pelindung DNA terhadap paparan
radiasi yang tidak diinginkan memegang janji (Adiani dkk.,2015).

Lainnya :

Analisis HPLC dari minyak esensial biji pala telah menunjukkan bahwa
alkylbenzes dan arylproanoids mendominasi [4]. Studi perilaku
menunjukkan bahwa senyawa tersebut memiliki efek sedatif yang kuat
[5]. Labirin plus yang ditinggikan adalah model kecanduan tikus yang
digunakan secara luas di mana waktu yang dihabiskan lebih lama di lengan
terbuka (peningkatan waktu yang dihabiskan dalam lengan tertutup)
menunjukkan aktivitas anxiogenik. Sonavanne dkk. [6]. menunjukkan
penurunan yang signifikan dalam jumlah entri ke dalam kedua lengan
yang terbuka dan yang tertutup. Selanjutnya, para penulis
mendokumentasikan penurunan rasio entri ke dalam lengan terbuka
versus jumlah entri ke kedua lengan, yang menunjukkan aktivitas
anxiogenic nutmeg. Selain itu, efek biji pala tergantung pada dosis.
Dengan demikian, pengamatan Sonavanne et al. [3] menegaskan efek
anxiogenic dari MF (subarnas dkk.,2010).

Toksisitas ekstrak pala dilaporkan oleh Hallstrom dan Thuvander [7] dan
Stein et al. [5]. Intoksikasi terjadi pada manusia setelah menelan sekitar 5
g pala, sesuai dengan 1-2 mg myristicin / kg berat badan (b.w.) [7].
Intoksikasi akut dengan pala menyebabkan gejala gastrointestinal [5].
Tujuan utama dari penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi senyawa
aktif yang mudah menguap pada minyak esensial biji pala yang
menghambat gerakan mouse (subarnas dkk.,2010)