UNIVERSITAS NEGERI MEDAN

ESSAY MIKROTEKNIK

Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat Lulus Mata Kuliah

Mikroteknik

Oleh:

Gresia Palentina Hutagaol

NIM 4193342003
Program Studi Pendidikan Biologi Billingual

JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
MEDAN
2021
 “PENCITRAAN DIGITAL DALAM PATOLOGI”

Pencitraan digital secara radikal berbeda dari pencitraan fotografi. Pada dasarnya gambar itu
virtual, disimpan sebagai serangkaian angka. Itu hanya terlihat saat ditampilkan, dan secara fisik hanya
ada saat dicetak. Keuntungan besar dari gambar digital adalah kemudahannya untuk dimanipulasi. Sebuah
analogi yang berguna adalah dengan teks. Pengolah kata menangani data dalam bentuk digital dan telah
sepenuhnya diambil alih dari mesin tik, saat ini barang langka di kantor modern. Dua karakteristik
gambar digital adalah jumlah elemen gambar (piksel) yang terdiri dari gambar dan kedalaman bit,
menjadi jumlah digit biner yang tersedia untuk menyandikan intensitas. Gambar berwarna biasanya
merekam 256 tingkat intensitas untuk setiap data merah, hijau dan biru dalam 24 bit informasi. Misalnya
gambar dapat digambarkan memiliki 1200]1000 piksel, total 1,2 juta. Setiap piksel dari gambar seperti itu
dapat memiliki salah satu dari 28]28]28 atau sekitar 16 juta warna berbeda. Ukuran gambar seperti itu
adalah 3,6 megabyte (Mb), ada delapan bit hingga satu byte. Ukuran gambar saat dilihat, output ke film
atau dicetak diatur oleh resolusi perangkat output. Ini biasanya didefinisikan dalam titik per inci (dpi).
Nilai tipikal untuk layar komputer adalah 72D96 dpi, untuk printer 300 dpi dan perekam film 1300 dpi.

Fotomikrografi berkualitas tinggi secara teknis cukup menuntut dan selalu sangat memakan
waktu. Pencitraan elektronik memiliki begitu banyak keunggulan dibandingkan fotografi konvensional
sehingga bidang inilah yang pertama kali berubah dari fotografi, jauh sebelum kamera digital tersedia.
Mikroskop cahaya majemuk adalah alat penting ahli patologi dan harus dipasang dengan benar, baik
digunakan untuk pencitraan digital atau tidak. Banyak instrumen ilmiah tidak akan berfungsi kecuali
digunakan dengan benar. Mikroskop cahaya berbeda, dan biasanya akan memberikan gambar namun
diatur dan digunakan. Penjelasan tentang menyelaraskan mikroskop cahaya diberikan di Evennett.

Resolusi gambar Ada beberapa faktor yang menentukan detail yang diselesaikan dalam gambar
mikroskopis digital: (1) resolusi gambar yang dibuat oleh lensa objektif yang merupakan fungsi dari
aperture numerik objektif dan panjang gelombang cahaya; (2) ukuran elemen sensor individu; (3) jumlah
sensor dalam susunan, yang pada gilirannya mengatur ukuran sensor dan bidang pandang efektif kamera.
Misalnya, sensor resolusi rendah khas 1280]1024 6,8akum elemen adalah 8,7 mm.

Sensor resolusi rendah yang dijelaskan di atas memiliki ukuran elemen yang hampir tidak
mencukupi (6,8 akum) dan memiliki bidang pandang yang jauh lebih kecil daripada kamera film 35 mm
yang akan memiliki dimensi 14]9,5 mm pada bidang gambar mikroskop. Jika kamera ingin mengambil
sampel gambar pada bidang pandang seperti itu, idealnya dibutuhkan dari 2400 (10]objektif) hingga 1300
(100]objektif) piksel di sepanjang sumbu panjang. Modifikasi bidang pandang sensor agar sesuai dengan
resolusi gambar dicapai dengan menggunakan adaptor, memperbesar gambar untuk mengurangi bidang
atau sebaliknya. Jadi ahli hematologi atau sitologi yang menggunakan objektif daya tinggi mungkin dapat
bekerja dengan gambar digital yang relatif kecil, ahli histologi yang menggunakan daya rendah seringkali
membutuhkan gambar digital yang sangat besar. Gambar seperti itu membutuhkan kamera berkinerja
tinggi yang baru-baru ini tersedia dengan harga terjangkau.

Resolusi tinggi idealnya seorang ahli histologi menginginkan kamera yang mampu memperoleh
gambar mungkin 3000]2000 piksel dengan kesetiaan warna yang baik. Seseorang dapat membeli kamera
dengan susunan CCD seukuran ini tetapi harganya sangat mahal (@50.000). Fotografer studio, yang juga
membutuhkan gambar digital resolusi tinggi, telah lama menggunakan kamera yang memindai gambar.
Ini bekerja dengan cara yang sama seperti pemindai flatbed yang sudah dikenal atau mesin fotokopi
modern, secara mekanis memindai larik CCD linier (satu dimensi) di seluruh gambar. Bahkan, satu
kamera studio, Leaf Lumina, telah dimodifikasi untuk fotomikroskopi. Meskipun gambar yang dihasilkan
oleh kamera seperti itu sangat bagus12 mereka memiliki keterbatasan operasi lambat. Pada mikroskop,
Leaf Microlumina membutuhkan waktu hingga 2 menit untuk mendapatkan gambar. Selain itu,
kurangnya output video tingkat tinggi membuat pemfokusan cukup sulit. Solusi untuk masalah ekstraksi
resolusi tinggi dari CCD kecil ditemukan dengan mengurangi area sensitif setiap elemen CCD dengan
melapisi topeng dengan lubang kecil. Untuk mengambil sampel gambar di antara lubang kecil, seluruh
larik CCD dipindahkan. Karena jarak yang terlibat berada dalam kisaran mikron, ini dapat dicapai dengan
menggunakan transduser piezioelektrik yang cepat dan akurat. Bahkan dengan CCD mosaik warna,
algoritma pemindaian yang mengambil sampel setiap bagian gambar dengan lebih dari satu warna
memberikan resolusi warna yang sangat baik. Kamera ini, Kontron ProgRes, menetapkan standar kinerja
baru. Dalam 2 tahun terakhir banyak produsen mikroskop utama telah mengadopsi strategi larik dua
dimensi pemindaian ini.

Dua varian baru telah muncul yang melibatkan penggunaan perangkat difraksi (Pixera dan
Olympus) dan sesuatu yang mirip dengan aslinya (Nikon) tetapi jelas tidak tercakup dalam paten
Kontron. Zeiss telah memodifikasi desain aslinya di bawah lisensi. Kamerakamera ini telah diintegrasikan
ke dalam sistem perangkat lunak pencitraan digital yang sering kali menyertakan kontrol mikroskop
otomatis. Meskipun cukup mahal, sistem tersebut mewakili keadaan seni untuk fotomikroskopi digital.
Kamera tersebut mampu menghasilkan gambar hingga 4000]3000 piksel. Mereka biasanya digunakan
dengan adaptor ]0,63 untuk mengurangi ukuran gambar agar sesuai dengan sensor.

Gambar fotografi yang ada dapat didigitalkan dalam berbagai cara. Kebanyakan ahli patologi
akan memiliki koleksi besar transparansi 35 mm dan ini dapat didigitalkan dengan memindai film.
Pemindai film dapat dibeli atau transparansi dapat dikirim ke biro untuk dipindai. Pertimbangkan hanya
pemindai film spesifikasi tinggi dengan resolusi lebih dari 2500 dpi. Pemindai film beresolusi lebih
rendah dan semua kecuali pemindai flatbed paling mahal harus dihindari. Layanan pemindaian Kodak
PhotoCD yang tersedia secara luas di gerai ritel yang berbeda direkomendasikan. Periksa apakah
transparansi bersih sebelum dikirim untuk pemindaian. Penggunaan lain untuk pemindai slide adalah
pemindaian langsung spesimen pada slide mikroskop.14 Slide dilampirkan ke mount transparansi yang
dipotong (versi komersial PathScan Enabler, tersedia dari Meyer Instruments, Inc., Houston, Texas, USA.
www. meyerinst.com). Ini setara dengan menggunakan objektif 1 atau 0,5 pada mikroskop dan dapat
memberikan hasil yang sangat baik pada bagian yang besar. Cetakan fotografi, dan memang semua
aslinya datar, dapat dipindai dengan pemindai flatbed yang relatif murah. Resolusi 800D1200 dpi cukup
untuk sebagian besar tujuan kecuali transparansi 35 mm. Secara umum pemindaian pada resolusi yang
sama dengan resolusi keluaran tetapi memperhitungkan pembesaran atau pengurangan, misalnya untuk
menghasilkan cetakan 6]8 cm pada printer 300 dpi dari pemindaian asli 3]4 cm pada 600 dpi (300]6/ 3).
Penggunaan pemindai flatbed untuk mencitrakan spesimen kasar telah dijelaskan.

Pilihan sistem operasi komputer bisa jadi sulit. Tentukan ketersediaan perangkat lunak: jika
program yang Anda suka hanya berjalan pada mesin Windows maka itulah yang harus Anda dapatkan.
Secara umum yang menjadi isu adalah dukungan dan kearifan lokal. Untuk sebagian besar tujuan,
pilihannya adalah antara sistem operasi Windows dan Macintosh. Untuk menggeneralisasi, keahlian
Windows lebih luas tetapi Macintosh lebih diarahkan untuk pencitraan. Persyaratan penting dari paket
perangkat lunak pencitraan digital adalah membaca/menulis dalam berbagai format file yang berbeda,
melakukan kontras dasar dan manipulasi warna, serta menyediakan anotasi teks. Beberapa paket
mengizinkan lebih banyak operasi, seperti analisis citra. Untuk menghindari degradasi dari kompresi
berulang, hanya kompresi lossless yang harus digunakan untuk menyimpan gambar selama pemrosesan.
Kamera sering menggunakan format JPEG; segera simpan gambar dalam format lossless, biasanya TIFF,
atau format kepemilikan perangkat lunak. Jangan tinggalkan file dalam format JPEG saat sedang
diproses. Setelah gambar diedit, gambar dapat diarsipkan dalam format terkompresi. Ada banyak pilihan
perangkat lunak manipulasi gambar generik. Berikut adalah beberapa contohnya: Adobe PhotoShop
(www.adobe.com) adalah perangkat lunak manipulasi gambar standar de facto. Ini menyediakan fasilitas
manipulasi dan pengeditan yang komprehensif.

Mikrograf dapat disajikan di layar atau diproyeksikan dengan proyektor digital. Kekuatan khusus
adalah bahwa banyak gambar dapat disajikan secara bersamaan sehingga memungkinkan perbedaan yang
halus untuk diilustrasikan. Gambar dapat dimasukkan ke dalam presentasi Microsoft Powerpoint tetapi
berhati-hatilah untuk menambahkan gambar berukuran besar yang tidak tepat; paling banyak gambar
layar penuh tidak boleh lebih dari 2 Mb dan 1 Mb baik-baik saja untuk sebagian besar tujuan: sampel
ulang salinan gambar ke ukuran yang sesuai sebelum penyisipan. Ingatlah bahwa presentasi yang sarat
gambar akan terlalu besar untuk dimasukkan ke dalam floppy disk dan mungkin memerlukan komputer
berkinerja tinggi untuk menampilkannya dengan kecepatan yang masuk akal. Output di world wide web
cukup mudah. Informasi tentang pembuatan halaman web dapat diperoleh dari berbagai sumber misalnya
www. referensi web.com. Secara umum gambar JPEG memberikan kualitas terbaik dan, karena biasanya
tidak digunakan sebagai reproduksi asli, kompresi tingkat tinggi dapat digunakan. Bagaimanapun, gambar
harus dibatasi dalam ukuran file hingga beberapa ratus kb paling banyak untuk menghindari waktu
pengunduhan yang lama. Strategi seperti penggunaan gambar mini yang dapat diklik dan format gambar
progresif dapat digunakan. Aplikasi seperti Adobe ImageReady membuat persiapan gambar menjadi
sangat mudah.
METODE PENGUKURAN UNTUK PERBESARAN TOTAL AKTUAL MIKROSKOP METALOGRAFI — METODE
CITRA DIGITAL

Mikroskop banyak digunakan dalam biologi, kedokteran, mineral, metalurgi, mesin dan bidang lainnya.
Pembesaran merupakan parameter penting untuk mikroskop; itu adalah faktor pertimbangan pertama
dalam pembelian dan penggunaan mikroskop. Untuk perbesaran mikroskop, ada penelitian mendalam
di bidang optic. Dalam bidang teknis sistem optik, ada perbesaran visual dan perbesaran lateral.
Perbesaran visual adalah perbesaran bayangan maya yang dihasilkan oleh mikroskop. Perbesaran visual
adalah rasio tangen sudut yang dilihat objek melalui sistem penguatan dan tangen sudut yang dilihat
objek dengan mata telanjang pada jarak visual yang jelas (250mm). Namun dalam penerapannya
mikroskop, perbesaran total mikroskop adalah perbandingan antara panjang atau tinggi bayangan maya
yang dilihat benda melalui lensa okuler mikroskop dan panjang atau tinggi sebenarnya benda yang
sama.

Dengan melihat mikrometer okuler dan mikrometer panggung melalui lensa okuler mikroskop, dapat
diketahui bahwa perbesaran mikrometer aktual dan perbesaran teoritis tidak dapat konsisten. Sulit
untuk menentukan bahwa penyimpangan tersebut berasal dari tujuan, faktor tabung atau lensa mata.
Bayangan yang diamati pada lensa okuler mikroskop adalah bayangan maya sampel yang diletakkan di
atas meja benda dan diperbesar oleh lensa objektif dan lensa okuler. Bayangan maya berjarak 250 mm
dari mata. Perbesaran total mikroskop adalah perbesaran visual bayangan yang berjarak 250 mm dari
mata. Perbesaran total sebenarnya mikroskop harus diukur dengan membandingkan panjang skala
250mm.

1. Prinsip Dasar Pengukuran

Sistem akuisisi kamera digital digunakan sebagai mata, diperoleh citra digital
mikrometer okuler dan mikrometer objektif yang dilihat pada lensa okuler mikroskop, diperoleh
citra digital blok pengukur pada jarak 250 mm dari kamera, diagram akuisisi digital gambar
untuk pengukuran lihat Gambar 1. Panjang sebenarnya yang sama AB berada di dua gambar
digital diukur dengan perangkat lunak analisis gambar.
2. Persyaratan Sistem Pengukuran
Sistem pengukuran untuk mengukur perbesaran total mikroskop yang sebenarnya harus
memenuhi persyaratan berikut: 1) blok pengukur yang dikalibrasi dan kelas 5. Panjang
standarnya adalah 0,5 mm hingga 100 mm dan panjang standar dapat dipilih sesuai dengan
perencanaan perbesaran mikroskop untuk diukur[10]; 2) Mikrometer yang dikalibrasi. Jenis
mikrometer panggung adalah 1/100 dan pembagian skala adalah 0,01mm. jenis mikrometer
okular adalah 5/100 atau 10/100 dan pembagian skala adalah 0,05 mm atau 0,1 mm[11]; 3)
Kamera digital harus dapat memperoleh setidaknya 5mm panjang mikrometer okular, dan harus
dengan jelas membedakan blok pengukur 0,5mm pada jarak 250 mm±3 mm dari kamera digital,
dan harus dengan jelas membedakan skala mikrometer panggung 0,01 mm di lensa mata, dan
 harus dengan jelas membedakan skala 0,05 mm mikrometer okular di lensa mata. Gambar
digital harus dalam fokus, tidak ada penyimpangan visual dan tidak ada distorsi visual. Panjang
0,5 mm pada citra digital blok pengukur tidak kurang dari 5 piksel; 4) Perangkat lunak
pengukuran harus dapat mengukur piksel dengan panjang 0,01 mm pada citra digital tahap
mikrometer, dan harus dapat mengukur piksel dengan panjang 0,5 mm pada citra digital blok
pengukur.
3. Metode Pengukuran dan Evaluasi Ketidakpastian Hasil Pengukuran
A. Akuisisi Gambar Blok Pengukur dan Evaluasi Ketidakpastian Resolusi gambar kamera digital
diatur menjadi 3488 piksel × 2616 piksel. Blok pengukur ditempatkan di kanan depan
kamera dan jarak antara kamera dan blok pengukur adalah 250 mm, dan mereka berada di
tengah gambar digital. Citra blok pengukur 0,5 mm dan 5 mm diperoleh dengan sistem
akuisisi kamera digital.
B. Akuisisi Citra Mikrometer dan Evaluasi Ketidakpastian Lensa objektif dan okuler dipasang
pada mikroskop dan mikrometer tahap 1/100 diletakkan di atas meja objek. Ketinggian meja
objek diatur sampai terdapat bayangan yang jelas pada mikrometer tahap 1/100 dan
mikrometer okuler 5/100. Gambar jernih diperoleh dengan sistem akuisisi kamera digital
melalui lensa mata

Dalam aplikasi praktis mikroskop metalografi, lensa okuler atau objektif tidak digunakan
sendiri. Dalam hal perbesaran total aktual untuk memenuhi persyaratan, penyimpangan
sebenarnya dari tujuan dan lensa okuler tidak akan mempengaruhi penggunaan mikroskop
metalografi. Untuk mikroskop metalografi besar MM6, ada layar proyeksi, 135 kamera, kamera
video, dan tampilan mata telanjang 4 jalur optik. Penentuan perbesaran yang ditandai dari
tujuan dan lensa mata dapat memperhitungkan jalur optik keseluruhan mikroskop untuk
memastikan perbesaran total sebenarnya dari 4 jalur. Ini juga menunjukkan bahwa lensa
mikroskop yang berbeda tidak dapat dipertukarkan.
Selain itu, standar ISO 8578 [16] menetapkan persyaratan penandaan perbesaran dari
objektif mikroskop dan lensa okuler, tidak ada persyaratan untuk deviasi perbesaran aktual dan
tidak ada persyaratan penandaan faktor tabung. Menurut persamaan perhitungan perbesaran
total yang dinyatakan dalam standar ISO 8039 standar ASTM E1951, dan standar GB/T 22059
faktor tabung default biasanya dari Standar ASTM E1951 juga dengan jelas
menunjukkan:Perbesaran yang dihitung, menggunakan peringkat yang disediakan pabrikan,
hanyalah perkiraan perbesaran sebenarnya, karena komponen optik individu dapat berbeda dari
perbesaran yang ditandai. Dalam arti ini,sangat diperlukan untuk mengukur perbesaran total
mikroskop yang sebenarnya. Dalam makalah ini, perbesaran teoritis mikroskop metalografi
MM6 adalah 160 ×. Menurut Persamaan 2, perbesaran total sebenarnya adalah 155 ×, dan
simpangan relatifnya adalah -3,2%. Menurut Persamaan 8, perbesaran total aktual adalah 154,9
×, dan deviasi relatif juga -3,2%. Kedua hasil pengukuran tersebut sama, sehingga metode citra
digital untuk mengukur perbesaran total sebenarnya dari mikroskop metalografi harus dapat
diandalkan. Untuk pengukuran 160x mikroskop metalografi MM6, parameter pengukuran
langsung, hasil pengukuran, dan ketidakpastian hasil pengukuran ditunjukkan pada Tabel 5.
Hasil pengukuran dan ketidakpastian perbesaran okuler, perbesaran objektif dan faktor tabung,
serta total aktual perbesaran mikroskop.