Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Teknik dan Teknologi Kardiovaskular (- 2018) https://

doi.org/10.1007/s13239-018-0361-2

Pengaruh Transportasi Sistem Tubing Pneumatik pada Unit Apheresis Trombosit

JEVGENIAZILBERMAN-RUDENKO,1,2FPANGKATZ.ZHAO,1STEPHANIEE. REITSMA,2SEBUAHNACHIARAMITRUGNO,2
JIAQINGPANG,2JOSEPJ. SHATZEL,3BETHRICK,1CHISTINATYRRELL,4WOHAIBHASAN,4
1
HAIWENJT MCCARTY,2dan MARTINSEBAGAICHRIBER
1Divisi Trauma, Perawatan Kritis dan Bedah Perawatan Akut, Departemen Bedah, Oregon Health & Science University,
Portland, OR, USA;2Departemen Teknik Biomedis, Fakultas Kedokteran, Universitas Kesehatan & Sains Oregon, 3303 SW
Bond Ave., Portland, OR, USA;3Divisi Hematologi & Onkologi Medis, Departemen Kedokteran, Oregon Health & Science
University, Portland, OR, USA; dan4Institut Kardiovaskular Knight, Universitas Kesehatan & Sains Oregon, Portland,
ATAU, AS

(Diterima 21 Januari 2018; diterima 8 Mei 2018)

Associate Editor Keefe B. Manning dan Ajit P. Yoganathan mengawasi ulasan artikel ini.

Abstrak-Unit apheresis trombosit ditransfusikan ke pasien untuk Kata kunci—Unit apheresis trombosit, Fungsi trombosit,
mengurangi atau mencegah perdarahan. Di rumah sakit, unit apheresis Hemodinamik, Hemostasis, Sistem tubing pneumatik.
trombosit diangkut dari layanan transfusi ke tim kesehatanmelaluidua
metode: sistem tabung pneumatik (PTS) atau transportasi rawat jalan.
Apakah transportasi PTS mempengaruhi aktivitas dan utilitas unit apheresis
trombosit tidak jelas. Kami menghitung gaya gravitasi dan waktu
transportasi yang terkait dengan PTS dan transportasi rawat jalan di rumah SINGKATAN
sakit kami. Trombosit dan supernatan yang dicuci dibuat dari unit aferesis
trombosit sebelum transportasi serta setelah transportasi rawat jalan atau PTS Sistem tabung pneumatik
PTS. Untuk setiap kelompok, kami membandingkan aktivitas trombosit yang AMB Transportasi rawat jalan
diinduksi oleh agonis dan istirahat dan pembentukan agregat trombosit PRP Plasma kaya trombosit
pada kolagen atau faktor von Willebrand (VWF) di bawah geser, ekspresi
cPRP Faktor von Willebrand plasma kaya
reseptor VWF trombosit dan tingkat multimer VWF. Penundukan unit
apheresis platelet terhadap gaya akselerasi/deselerasi yang cepat selama
VWF trombosit terkonsentrasi
transpor PTS tidak mengaktivasi platelet sebelumnya atau kemampuannya GPIb Glikoprotein Ib
untuk mengaktivasi sebagai respons terhadap agonis platelet dibandingkan CD62P P-selectin
dengan transpor rawat jalan. Trombosit dalam unit apheresis trombosit ECM Matriks ekstraselular
diangkutmelaluiPTS mempertahankan kemampuannya untuk melekat pada
permukaan VWF dan kolagen di bawah geser, meskipun agregasi trombosit
pada kolagen dan VWF berkurang dibandingkan dengan transportasi rawat
PENGANTAR
jalan. Level multimer VWF dan ekspresi reseptor GPIb platelet tidak
terpengaruh oleh transpor PTS dibandingkan dengan transpor rawat jalan.
Pada cedera pembuluh darah, protein matriks
Subjeksi unit apheresis trombosit pada transpor PTS tidak secara signifikan
mempengaruhi tingkat aktivasi trombosit yang diinduksi oleh agonis atau ekstraseluler (ECM) yang terpapar, seperti kolagen fibrilar,
awal dibandingkan dengan transpor rawat jalan. Studi kasus kami memicu serangkaian peristiwa yang mengarah pada
menunjukkan bahwa transportasi PTS mungkin tidak secara signifikan pembentukan sumbat hemostatik untuk menghentikan
mempengaruhi potensi hemostatik trombosit dalam unit apheresis
kehilangan darah.25,26Proses hemostasis tergantung pada
trombosit.
pengikatan trombosit ke ECM dengan adanya geseran, yang
menyebabkan adhesi trombosit, aktivasi seluler yang cepat,
dan akumulasi trombosit tambahan.68Faktor von Willebrand
(VWF) yang terikat ECM memainkan peran penting dalam
deposisi trombosit awal melaluiglikoprotein reseptor platelet
(GP) Ib yang bergantung pada geser yang mengikat VWF.46,51,
Alamat korespondensi dengan Jevgenia Zilberman-Rudenko, Divisi 54Reseptor trombosit GPVI dansebuah2b1memediasi aktivasi
Trauma, Perawatan Kritis dan Bedah Perawatan Akut, Departemen
trombosit yang menyebabkan pelepasan mediator sekunder
Bedah, Oregon Health & Science University, Portland, OR,
AMERIKA SERIKAT. Surat elektronik: zilberma@ohsu.edu dan agregasi trombosit berikutnya. Agregasi trombosit
J. Zilberman-Rudenko dan F. Zhao adalah penulis pendamping pertama. OJT diaktifkan oleh integrin trombositsebuahIIbb3dan fibrinogen.30
McCarty dan MA Schreiber dan merupakan penulis senior bersama.

- Masyarakat Teknik Biomedis 2018

 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.
Unit apheresis trombosit digunakan untuk manajemen
yang efektif dan stabilisasi pasien dengan trombositopenia
dan perdarahan yang signifikan secara klinis terkait dengan
morbiditas dan mortalitas yang tinggi. Di Amerika Serikat, unit
apheresis platelet paling sering dikumpulkan dengan
apheresis yang melibatkan sentrifugasi lembut selama
beberapa jam dari sukarelawan dewasa yang sehat. Pedoman
telah ditetapkan untuk memastikan kualitas unit apheresis
trombosit termasuk durasi penyimpanan, suhu dan
penanganan sebelum pelepasan produk darah terapeutik ini
untuk transfusi pasien.1
Namun, begitu di rumah sakit, tidak ada pedoman
universal atau ketat untuk pengiriman unit apheresis
trombosit ke tim perawatan.
Sistem tabung pneumatik (PTS) banyak digunakan di
rumah sakit untuk memungkinkan pengangkutan sampel
klinis, darah, dan produk terapeutik yang cepat dan
nyaman, termasuk unit aferesis trombosit, di dalam
rumah sakit. Menariknya, penggunaan PTS tidak
dianjurkan untuk pengangkutan sampel klinis yang
dimaksudkan untuk pengujian fungsi trombosit.21,45
Beberapa penelitian telah menyarankan bahwa
pengangkutan sampel PTS dapat mempengaruhi hasil tes
fungsional trombosit termasuk agregometri trombosit
optik dan elektroda darah utuh,7,19,24,65beberapa
parameter tromboelastometri rotasi (ROTEM)2,19dan waktu
penutupan dalam uji fungsi trombosit (PFA-100).15,24,67
Namun tidak jelas apa efeknya jika ada transpor PTS pada
aktivitas atau fungsi trombosit di unit apheresis trombosit.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menentukan
apakah paparan unit apheresis trombosit terhadap
perubahan gaya gravitasi selama transpor PTS
mempengaruhi aktivitas trombosit awal atau respons
terhadap agonis dibandingkan dengan transpor rawat
jalan unit aferesis trombosit.
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Reagen
Protein terkait kolagen / CRP-XL yang terkait silang
dibeli dari University of Cambridge (Cambridge,
Inggris). Tromboksan A2analog/U46619 dan PAR-1
agonis/TRAP6 berasal dari Tocris (Bristol, Inggris).
Epinefrin dan kolagen fibrilar berasal dari Chrono-Log
(Havertown, PA). VWF manusia berasal dari Hematologi
Technologies, Inc (Essex Junction, VT). Fibrinogen
berasal dari Enzyme Research Laboratories (South
Bend, IN). PPACK, antibodi primer anti-VWF kelinci anti-
manusia dan antibodi primer anti-manusia anti-
Vinculin kambing berasal dari Santa Cruz (Dallas, TX).
Anti-CD41-PE, anti-CD62P-APC dan CytofixBDberasal
dari BD Pharmingen (Franklin Lakes, NJ). Anti-CD31-
eFluor450 berasal dari eBioscience (San
Diego, CA). Antibodi primer anti-GPIb/AK2 anti-
manusia tikus berasal dari GeneTex (Irvine, CA) dan
sekunder anti-tikus IgG -AF640 berasal dari
Invitrogen (Carlsbad, CA). Agarose emas seakem
berasal dari Lonza (Basel, Swiss). Rekombinan rh-
ADAMTS13 adalah bentuk R&D Systems
(Minneapolis, MN). Substrat Dura Barat SuperSignal
berasal dari Thermo Scientific (Waltham, MA).
Reagen lain dibeli dari Sigma (St. Louis, MO).
Pengadaan dan Penanganan Unit Apheresis Trombosit
Unit apheresis trombosit donor per unit tunggal
diisolasi oleh Palang Merah Amerika, Wilayah Layanan
Darah Pacific Northwest, menggunakan mesin apheresis
sentrifugal aliran kontinu Amicus (Fenwal Inc, Lake Zurich,
IL), yang menggunakan teknik pemisahan dua tahap
dengan gaya sentrifugal dan konfigurasi geometris seperti
sabuk dari ruang pemisahan dan pengumpulan (Tabel1).64
Setiap donor menjalani pungsi vena bilateral yang
memungkinkan penarikan seluruh darah secara simultan
menjadi natrium sitrat, pemrosesan darah dalam mesin
apheresis dan infus ulang produk darah yang kembali.
Dalam mesin apheresis, darah utuh sitrat diputar pada
1600 rpm selama rata-rata 10 menit di RT untuk
mengisolasi plasma kaya trombosit (PRP); darah merah
dan sel darah putih diinfuskan kembali ke pendonor. PRP
selanjutnya direduksi leuko dengan penyaringan dan
dipekatkan pada 1600 rpm selama 10 menit untuk
menghilangkan sebagian dari plasma miskin-trombosit.
Unit apheresis trombosit memiliki konsentrasi rata-rata
7,6±0,59105tolong/akuL,n = 20. Unit apheresis trombosit
dalam kantong apheresis kemudian diterima dan
disimpan oleh departemen Pelayanan Obat Transfusi
OHSU. Sesuai dengan pedoman USFDA, unit apheresis
trombosit dikeluarkan dari inventaris klinis 5 hari setelah
pengumpulan dan dilepaskan untuk penggunaan
penelitian. Unit apheresis trombosit dikumpulkan dari
empat kelompok donor golongan darah ABO: 7 dari A, 7
dari B, 3 dari AB dan 3 dari golongan darah O; 4 unit
apheresis trombosit berasal dari Rh- dan 16 unit PC
berasal dari donor Rh+.
Pada hari percobaan, unit apheresis trombosit
ditangani sesuai dengan diagram alir (Gbr.1). Sebelum
transportasi, sampel basal diekstraksi dari kantong
apheresis yang berisi unit apheresis trombosit dengan
jarum 15 Gauge dan jarum suntik 20 mL di Layanan
Transfusi OHSU dan disimpan dalam Falcontube
berbentuk kerucut polipropilen 15 mL di laboratorium.
Selanjutnya, sisa unit apheresis platelet dipecah
menjadi dua kantong apheresis dan diangkut ke OHSU
Trauma and Surgical Intensive Care Unit. melaluidua
metode paralel: sistem pipa pneumatik (PTS; Swisslog
TransLogic, Apeldoorn, Belanda) atau transportasi
ambulatory (AMB). Percepatan/
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS

TABEL 1. Deskripsi preparat trombosit yang digunakan dalam penelitian.

Preparat konsentrat trombosit

Dalam tulisan Darah diambil oleh tion Penggunaan yang dimaksudkan Disimpan di

Apheresis trombosit Sentrifugal aliran kontinu Kesehatan,

satuan Amerika Merah mesin apheresis klinis Transfusi OHSU
Menyeberang Melayani
Pekat Sentrifugasi bangku serial Hanya penelitian
kaya trombosit OHSU Digunakan dalam waktu 2 jam dari

plasma, cPRP Riset pengambilan darah

Phlebotomist

gaya deselerasi yang dihasilkan selama metode

pengangkutan ini dinilai menggunakan iPod touch
internal, IOS 9, akselerometer dan direkam menggunakan
aplikasi seluler SensorLog v1.8. Sebelum penyisipan unit
apheresis trombosit, iPod diamankan ke kapsul
transportasi seperti yang ditunjukkan pada Supp. Gbr. 1.
Untuk referensi, gaya sentrifugal yang dialami selama
putaran 1600rpm dalam sentrifugal GPKR yang dilengkapi
dengan rotor SH 3.7 S/N 576 (Beckman Coulter, Inc, Brea,
CA; Tabel2dan Gambar.2) juga diukur.

Pengumpulan dan Persiapan Darah Utuh Manusia dari

Plasma dan Serum Kaya Trombosit Konsentrat

Untuk menyiapkan plasma kaya trombosit segar (PRP),

40 mL darah vena manusia diambil dengan pungsi vena
dari sukarelawan dewasa yang sehat ke dalam jarum
suntik 60 mL yang mengandung 1:10 3,8% natrium sitrat
sesuai dengan Badan Peninjau Kelembagaan OHSU.
Seluruh darah kemudian dipindahkan ke dalam 50 mL
polypropylene conical Falcontube dan diputar pada 1600
rpm selama 10 menit pada RT; profil akselerasi/deselerasi
direkam menggunakan akselerometer seperti dijelaskan
di atas. Setelah putaran pertama, PRP dipindahkan ke
tabung kerucut 50 mL baru dan diputar lagi pada 1600
rpm selama 10 menit; volume plasma disesuaikan untuk
mencapai konsentrasi akhir 49105tolong/akuL dalam
konsentrat (c) PRP (Tabel1). Hasil akhir adalah sekitar 5 mL
cPRP per 40 mL donor darah utuh.
Serum segar dibuat dengan mengumpulkan darah vena
manusia melalui pungsi vena ke dalam spuit kering. Darah
nonantikoagulasi kemudian dibiarkan di bangku dan
dibiarkan menggumpal selama 30 menit pada suhu kamar.
Serum diisolasi dengan sentrifugasi pada 2500 rpm selama 20
menit dalam sentrifus Hermle Z300 yang dilengkapi dengan
rotor 221,12 V01 (Labnet, Edison, NJ).
Persiapan Trombosit dan Supernatan yang Dicuci dari
Unit Apheresis Platelet atau Fresh cPRP
Unit apheresis trombosit atau cPRP yang baru disiapkan
dibagi menjadi tabung polipropilen terpisah untuk:
GAMBAR 1. Bagan alir dari apheresis trombosit eksperimental
prosedur penanganan unit. Bagan alir yang menggambarkan
peristiwa pada hari percobaan. Sebelum transportasi, sampel
basal diekstraksi dari kantong apheresis yang berisi unit apheresis
trombosit. Selanjutnya, sisa unit apheresis platelet dipecah
menjadi dua kantong apheresis dan diangkut ke OHSU Trauma
and Surgical Intensive Care Unit (ICU)melaluidua metode paralel:
sistem pipa pneumatik (PTS; Swisslog TransLogic, Apeldoorn,
Belanda) atau transportasi ambulatory (AMB). Semua sampel
selanjutnya diproses di laboratorium penelitian. Ketika trombosit
dicuci dan supernatan yang tepat dimurnikan dari sampel.
pilih prosedur eksperimental yang dijalankan secara paralel.
Prostasiklin (PGI2; 0.1akug/mL akhir) dan asam/sitrat/dekstrosa
(ACD; rasio volume akhir 1:10) ditambahkan ke 200akuL unit
apheresis trombosit atau cPRP segar sebelum pelet untuk
menghasilkan trombosit yang dicuci. Sampel kemudian diputar
dua kali pada 2500 rpm selama 10 menit untuk membentuk pelet
trombosit; pelet terakhir disuspensikan kembali dalam 200akuL
serum, dihitung dan disesuaikan dengan hitungan akhir 49105
tolong/akuL. Trombosit yang telah dicuci dibiarkan istirahat
selama 45 menit sebelum dievaluasi untuk aktivasi dan
mikroagregasi yang diinduksi oleh agonis dan awal. Ke
 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.

MEJA 2. Parameter fisik penanganan unit apheresis trombosit.

Getaran akselerasi/deselerasi
Gs dihasilkan
Maks±SEM n Frekuensi±SEM t(s)/ sentakan±SEM

Transportasi sistem tabung pneumatik

x 7.96±0,08 16 269±54 1.0±0.2
kamu 6.79±0.37 16 205±26 1.1±0,3
z 7.87±0.12 16 547±77 0.4±0.1
Transportasi rawat jalan
x 0,64±0,10 16 164±49 17.5±7.1
kamu 0,46±0,08 16 257±106 6.8±3.4
z 1.77±0,09 16 1± – 90.2±1.7
Sentrifugasi 1600 rpm
x 7.57±0,01 5 2± – 40.2±2.6
kamu 7.99±0,01 5 2± – 30.2±3.4
z 8.16±0,01 5 2± – 37.0±2.3

Gaya akselerasi/deselerasi yang dihasilkan selama setiap jenis transportasi dan sentrifugasi trombosit diukur menggunakan akselerometer (Apple
iPod touch 16gb, generasi ke-6, IOS 9, SensorLog v1.8). Frekuensi dan durasi per sentakan titik transisi akselerasi/deselerasi dikuantifikasi.

GAMBAR 2. Parameter fisik penanganan unit apheresis trombosit. Profil akselerasi/deselerasi yang dihasilkan selama transportasi melaluisistem
tabung pneumatik (a;n =16), transportasi rawat jalan (b;n =16) atau sentrifugasi trombosit (c;n =5) yang diukur menggunakan akselerometer.
Penelusuran koordinat z yang representatif ditampilkan. Data dilaporkan sebagai mean6SEM.
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS
memurnikan unit apheresis trombosit atau supernatan
cPRP, 20akuL unit apheresis trombosit atau cPRP
dipindahkan ke 1,7 mL mikrosentrifugasi polipropilen
kopolimer bertingkat dan diputar pada 2500 rpm selama
10 menit.
Aktivasi Trombosit dan Uji Mikroagregasi
Unit apheresis trombosit atau cPRP yang baru disiapkan
dibuat pelet dan disuspensikan kembali dalam serum manusia
hingga konsentrasi akhir 49105tolong/akuL. Sampel kemudian
ditambahkan ke dalam tabung yang berisi penyangga
kendaraan, ADP (3, 10 dan 200akuM final), U46619 (1 dan 10
akuM final), kombinasi ADP dan U46619 (10 dan 10akuM final
masing-masing), CRP-XL (0,3, 1 dan 10akug/mL akhir), TRAP6
(10 dan 30akuM final), kombinasi CRP-XL dan TRAP6 (10 dan
30akuM akhir masing-masing), 10akuM epinefrin, atau 100aku
g / mL kolagen fibrilar dengan tidak adanya atau adanya 10
akuM ADP atau 10akuM epinefrin dan diinkubasi selama 30
menit pada RT pada shaker yang diaduk pada 200 rpm. Reaksi
dihentikan dengan mengencerkan sampel 1:10 dengan
larutan pendinginan yang terdiri dari HEPES-Tyrodes yang
dimodifikasi dengan 40akuM PPACK, 1,5% b/v Nacitrate (1:1,
vol/vol).72Mengikuti langkah pendinginan ini, 10akuL dari
setiap sampel ditambahkan ke tambahan 10akuL larutan
pendinginan yang mengandung antibodi anti-platelet berikut:
anti-CD41-PE, anti-CD62P-APC dan anti-CD31-e450, hingga
pengenceran akhir 1:50, dan diinkubasi selama 30 menit di RT
dalam gelap. Sampel difiksasi dengan mengencerkan 1:10
dengan larutan quenching yang mengandung 12,5% CytofixBD
. 10.000 kejadian trombosit tunggal dikumpulkan dengan
mengukur penanda trombosit terkonjugasi PE CD41 dan pola
penyebaran ke depan dan samping yang khas menggunakan
penyortir sel yang diaktifkan fluoresensi, FACS (Canto II; BD
Biosciences). Aktivasi trombosit (%) ditentukan sebagai rasio
populasi positif CD62P dari peristiwa positif ganda CD31/CD41
seperti yang dijelaskan sebelumnya.71,72Persen pembentukan
mikroagregat ditentukan oleh peningkatan intensitas
fluoresensi dalam peristiwa positif ganda CD31/CD41. Untuk
mengukur GPIb platelet trombositsebuahtrombosit diinkubasi
dengan pengenceran 1:50 antibodi primer monoklonal AK2
anti-manusia tikus selama 30 menit di RT diikuti oleh inkubasi
30 menit dengan pengenceran akhir anti-CD41-PE dan anti-
CD31-eFluor450 1:50 dan 1:50 1000 pengenceran akhir
antibodi sekunder IgG-AF640 anti-tikus.
Uji Kamar Aliran
Tabung / ruang kapiler kaca (0,2929200mm; VitroCom)
dilapisi dengan kolagen fibrillar (100akug/mL), VWF (100
akug/mL) atau fibrinogen (100akug/mL) selama 1 jam di
RT. Permukaan diblokir dengan 5 mg/mL denatured
bovine serum albumin (BSA) selama 1 jam di RT
sebelum perakitan menjadi sistem aliran seperti yang
dijelaskan sebelumnya.72Konten trombosit dalam sampel unit
apheresis trombosit diukur. Jumlah trombosit akhir
disesuaikan dengan 49105tolong/akuL menggunakan
supernatan autologus. Unit apheresis trombosit kemudian
diperfusi melalui ruang selama 10 menit pada laju geser
dinding awal (300 detik-1). Agregasi trombosit divisualisasikan
dengan mikroskop kontras interferensi diferensial (DIC) dan
diukur menggunakan perangkat lunak FlowJo.
Penentuan Imunoblot VWF
50akug protein plasma dimuat per sumur dan
dijalankan di bawah kondisi non-pereduksi seperti yang
dijelaskan sebelumnya.57Gel agarosa resolusi rendah
hingga menengah 1,5% dicetak menggunakan agarosa
emas Seakem. VWF manusia, diinkubasi dengan atau
tanpa rh-ADAMTS13, digunakan untuk mengkonfirmasi
spesifisitas antibodi. Setelah transfer ke membran PVDF,
blot diinkubasi dengan antibodi primer anti-VWF diikuti
oleh antibodi sekunder terkonjugasi HRP. Sebagai kontrol
pemuatan, bercak diperiksa untuk protein vinculin dengan
berat molekul tinggi (117 kDa). Pita protein
divisualisasikan dengan chemiluminescence setelah
inkubasi dengan Substrat Dura Barat SuperSignal.
Kuantisasi area pita dilakukan dengan ImageJ (NIH).
Statistik
Data ditampilkan sebagai sarana±SEM.
Signifikansi statistik perbedaan antara rata-rata
ditentukan oleh ANOVA. Jika rata-rata terbukti
berbeda secara signifikan, beberapa perbandingan
dilakukan dengan uji Tukey. Nilai probabilitas darip
<0,05 dipilih menjadi signifikan secara statistik.
HASIL
Parameter Fisik Unit Apheresis Trombosit
Penanganan
Untuk mengevaluasi parameter fisik yang dialami oleh
trombosit dalam unit aferesis trombosit selama
pengangkutan di dalam rumah sakit, sebuah iPod dengan
akselerometer internal dimasukkan ke dalam kapsul
pengangkut (Sup. Gambar 1) sebelum penyisipan unit
aferesis trombosit. Setelah pengumpulan sampel basal,
unit apheresis trombosit dipecah menjadi dua kelompok
studi transportasi (Gbr. 2b).1) dimasukkan ke dalam kapsul
pengangkut dan gaya gravitasi dan waktu transit yang
dialami oleh unit aferesis trombosit yang diangkut di
dalam rumah sakit di OHSUmelaluiTransportasi PTS atau
AMB diperiksa. Unit apheresis trombosit diangkutmelalui
Transportasi PTS untuk 144±8 s, termasuk bagian
 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.

melalui pusat redistribusi dan mengalami Pengaruh Transportasi pada Aktivasi Trombosit dan
maksimum 7,96±0,08, 6,79±0,37 dan 7,87±gaya 0,12 Pengumpulan
G (n =16) dalamx-, y-danz-koordinat arah, masing-
Kami pertama-tama merancang eksperimen untuk
masing. Sampel diangkutmelaluitransportasi rawat
menentukan apakah transportasi unit apheresis trombosit
jalan (AMB) diangkut untuk 90±2 s dan mengalami
memiliki efek pada aktivasi trombosit atau pembentukan
maksimum 0,64±0.10, 0.46±0,08 dan 1,77±0,09 G
mikroagregat. Trombosit yang dicuci diisolasi dari unit
gaya (n =16) dalamx-, y-danz- koordinat arah,
apheresis trombosit atau PRP pekat (c) yang baru disiapkan
masing-masing. Khususnya, unit apheresis
(Tabel1), dan aktivasi trombosit yang dicuci dinilai dengan
trombosit diangkutmelaluiPTS sering mengalami
mengukur ekspresi P-selectin (CD62P) (Gbr. 4b).3a dan Sup.
sentakan akselerasi/deselerasi sebesar 547±77
Gambar 2a). Pembentukan mikroagregat trombosit
transisi diz-arah koordinat, sementara trombosit
dikuantifikasi dengan mengukur pergeseran intensitas
yang diangkut AMB bergerak dengan mantap tanpa
fluoresensi rata-rata dari peristiwa CD31 dan CD41 positif
z-transisi koordinat (Tabel2dan Gambar.2). Unit
ganda (Gbr. 3d).3b dan Sup. Gambar 2b) seperti yang
apheresis trombosit mengalami transisi akselerasi/
dijelaskan sebelumnya.71,72
deselerasi dengan derajat yang sama dix-dany-
Konsisten dengan laporan sebelumnya, trombosit yang
koordinat arah selama transportasi PTS atau AMB.
dicuci dimurnikan dari cPRP yang baru disiapkan menyatakan
Sebagai pembanding, trombosit mengalami
tingkat P-selectin yang signifikan darisebuah-butiran sebagai
percepatan berkelanjutan 8,16±gaya 0,01 G (n =
respons terhadap peningkatan konsentrasi agonis GPCR
5) diz-koordinat arah selama sentrifugasi pada 1600 rpm
(TRAP6, ADP, tromboksan A2analog U46619, epinefrin, atau
dengan transisi tunggal yang mulus ke garis dasar pada
kombinasi ADP dan U46619), agonis yang diperantarai ITAM
pengaturan rem sentrifugal 'rendah' (Tabel2 dan
(CRP-XL, fibrillar kolagen), atau kombinasinya dibandingkan
Gambar.2).
dengan pembawa

GAMBAR 3. Pengaruh transportasi pada aktivasi dan agregasi trombosit. Trombosit dicuci yang diisolasi dari unit apheresis trombosit dikumpulkan
sebelum (basal) atau setelah transportasimelaluipneumatic tubing system transport (PTS) atau dengan kurir manusia, ambulatory transport (AMB).
Sampel diinkubasi dengan agonis yang ditunjukkan selama 30 menit, diimunisasi dan dievaluasi dengan sitometri pemilahan sel yang diaktifkan
fluoresensi (FACS) untuk persen aktivasi trombosit (peristiwa CD41+/CD31+/CD62P+; (a) atau pembentukan mikroagregat trombosit (peristiwa
CD41+/CD31+ intensitas fluoresensi tinggi; ( b). Berarti6SEM,n =7.
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS
kontrol (Sup. Gambar 2a). Persentase trombosit yang
dicuci dengan CD62P-positif meningkat hingga 4 kali
lipat sebagai respons terhadap ADP, hingga 12 kali
lipat dengan adanya TxA2analog, 13 kali lipat dengan
adanya kombinasi ADP dan U46619, hingga 15 kali lipat
dengan adanya CRP-XL atau TRAP6, 12 kali lipat dengan
adanya kolagen saja, 30 kali lipat dengan adanya
kombinasi kolagen dan ADP atau epinefrin, dan 3 kali
lipat dengan adanya epinefrin saja dibandingkan
dengan baseline. Demikian pula, trombosit dicuci yang
baru disiapkan membentuk mikroagregat sebagai
respons terhadap peningkatan konsentrasi dan
kombinasi agonis dibandingkan dengan kontrol
pembawa (Sup. Gambar 2b). Derajat mikroagregasi
trombosit meningkat hingga 6 kali lipat sebagai
respons terhadap ADP, 10 kali lipat sebagai respons
terhadap U46619, 11 kali lipat sebagai respons
terhadap kombinasi ADP dan U46619, hingga 12 kali
lipat sebagai respons terhadap CRP-XL saja atau dalam
kombinasi dengan TRAP6, hingga 9 kali lipat sebagai
respons terhadap TRAP6 saja,
Khususnya, sentrifugasi darah utuh dan cPRP selama
persiapan trombosit yang baru dicuci tidak menginduksi aktivasi
trombosit dasar yang signifikan atau pembentukan mikroagregat.
Sebaliknya, trombosit yang dimurnikan dari unit apheresis
trombosit menunjukkan peningkatan aktivasi trombosit awal (Gbr.
2b).3a) dan pembentukan mikroagregat (Gbr.3b) sebelum
transportasi PTS atau AMB. Lebih lanjut, trombosit yang diisolasi
dari unit apheresis trombosit bersifat refrakter terhadap mediator
sekunder aktivasi trombosit, ADP dan U46619 dosis rendah pada
awal. Persen aktivasi trombosit meningkat hanya dua kali lipat
sebagai respons terhadap 200akuM ADP atau 10akuM U46619,
sementara hanya peningkatan tiga kali lipat yang diamati sebagai
respons terhadap kombinasi 10akuM ADP dan 10akuM U46619.
Kolagen atau epinefrin agonis platelet saja gagal menginduksi
aktivasi platelet yang dicuci dari unit apheresis platelet pada awal,
sementara peningkatan tiga kali lipat dalam ekspresi CD62P
diamati sebagai respons terhadap kombinasi kolagen dengan ADP
atau epinefrin. Aktivasi trombosit mencapai maksimum
peningkatan empat kali lipat dengan meningkatnya konsentrasi
CRP-XL, TRAP6 atau kombinasi CRP-XL dan TRAP6. Demikian pula,
persentase mikroagregasi trombosit meningkat hanya dua kali
lipat sebagai respons terhadap 200akuM ADP, tujuh kali lipat
sebagai respons terhadap kombinasi U46619 dan ADP, hingga
delapan kali lipat sebagai respons terhadap CRP-XL, lima kali lipat
sebagai respons terhadap TRAP6, sepuluh kali lipat sebagai
respons terhadap kombinasi CRP-XL dan TRAP6 dan hingga lima
kali lipat sebagai respons terhadap kombinasi kolagen dan ADP
atau epinefrin. Kami tidak mengamati perbedaan yang signifikan
secara statistik dalam aktivasi trombosit atau pembentukan
mikroagregat setelah transportasimelaluiPTS atau AMB
dibandingkan dengan baseline untuk salah satu yang lalu-
nis. Data kami menunjukkan bahwa pengangkutan unit
apheresis trombositmelaluibaik rute PTS atau AMB tidak
mempengaruhi aktivasi platelet yang diinduksi agonis.
Pengaruh Supernatan Unit Apheresis Trombosit pada Segar
Aktivasi dan Agregasi Platelet yang Disiapkan
Setelah aktivasi, trombosit melepaskan mediator sekunder
termasuk ADP untuk mempromosikan aktivasi trombosit
melalui sinyal parakrin dan autokrin. Untuk menguji apakah
supernatan dari unit apheresis trombosit mengandung
mediator sekunder yang mendorong aktivasi trombosit,
trombosit segar yang dimurnikan dari cPRP diinkubasi dengan
peningkatan kadar supernatan dari unit apheresis trombosit.
Data kami menunjukkan bahwa keberadaan supernatan unit
apheresis trombosit serendah 1% v/v sudah cukup untuk
menginduksi peningkatan ekspresi Pselectin dan
pembentukan mikroagregat pada trombosit yang baru dicuci
pada awal (Gbr. 2a).4sebuah dan4b). Pengangkutan unit
apheresis trombositmelaluibaik rute PTS atau AMB tidak
mempengaruhi kemampuan supernatan unit apheresis
trombosit untuk menginduksi aktivasi trombosit yang baru
dicuci. Sebaliknya, supernatan dari cPRP gagal mendapatkan
respons dari trombosit yang baru dicuci, menunjukkan bahwa
efek yang diamati dari unit aferesis trombosit pada reaktivitas
trombosit adalah karena penyimpanan unit aferesis trombosit
daripada metode isolasi supernatan yang digunakan di sini.
Bersama-sama data ini menunjukkan bahwa supernatan dari
unit apheresis trombosit dapat meningkatkan tingkat aktivasi
dasar, yang dapat mengurangi reaktivitas trombosit yang
diinduksi agonis lebih lanjut. Hal ini sejalan dengan penelitian
sebelumnya yang menunjukkan bahwa trombosit yang
dirangsang ADP cenderung menjadi refrakter terhadap
rangsangan dari waktu ke waktu.6,20
Pengaruh Penanganan Unit Apheresis Trombosit terhadap Trombosit
Mengikat Kolagen dan VWF Di Bawah Geser
Kami selanjutnya memeriksa efek pengangkutan unit
apheresis trombosit pada fungsi hemostatik trombosit dari
pengikatan ECM yang terbuka dan protein perekat di bawah
geser. Untuk setiap metode transportasi, jumlah trombosit
akhir disesuaikan dengan 49105tolong/akuL menggunakan
supernatan autologus. Suspensi trombosit diperfusi melalui
kolagen fibrilar amobil, VWF atau fibrinogen pada laju geser
vena 300 detik-1. Kami membandingkan tingkat adhesi
trombosit (dinyatakan sebagai cakupan permukaan) setelah
10 menit. Data kami menunjukkan bahwa trombosit dalam
unit aferesis trombosit sebelum diangkut terikat dan
teragregasi pada permukaan kolagen, VWF, dan fibrinogen
(Gbr. 2b).5sebuah dan5b). Tingkat adhesi dan agregasi
trombosit yang setara diamati untuk trombosit dalam unit
aferesis trombosit setelah transportasi AMB. Anehnya, tingkat
adhesi trombosit dan
 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.

GAMBAR 4. Pengaruh supernatan unit apheresis trombosit pada aktivasi dan agregasi trombosit segar. Unit apheresis trombosit dikumpulkan
sebelum (basal) atau setelah transportasimelaluitransportasi sistem tabung pneumatik (PTS) atau dengan kurir manusia, transportasi ambulatory
(AMB) dan pelet dengan sentrifugasi untuk mengisolasi supernatan. Trombosit dicuci yang baru disiapkan disuspensikan kembali dalam serum yang
dilengkapi dengan fraksi yang ditunjukkan (persen volume total) dari supernatan unit aferesis trombosit. Sebagai kontrol, trombosit yang baru dicuci
disuspensikan kembali dalam serum yang dilengkapi dengan supernatan yang diisolasi dari cPRP. Aktivasi trombosit segar (a) dan pembentukan
mikroagregat (b) dengan adanya kadar supernatan trombosit yang ditunjukkan diukur dengan FACS; Berarti6SEM,n = 4.

GAMBAR 5. Pengaruh penanganan unit apheresis trombosit pada pengikatan trombosit ke kolagen dan VWF di bawah geser. Unit apheresis
trombosit dikumpulkan sebelum (basal) atau setelah transportasimelaluipneumatic tubing system transport (PTS) atau dengan kurir manusia,
ambulatory transport (AMB). Kandungan trombosit dalam unit apheresis trombosit diukur dan jumlah trombosit akhir disesuaikan menjadi 43105
tolong/akuL menggunakan supernatan autologus. Sampel diperfusi di atas permukaan kolagen, VWF, atau fibrinogen yang tidak bergerak dengan
kecepatan geser 300 detik21selama 10 menit. Diferensial interferensi kontras (DIC) mikroskop adhesi trombosit dan perwakilan agregasi dari tiga
percobaan terpisah (a) dan rata-rata kuantifikasi luas permukaan6SEM (b) ditampilkan. *, **,#dan##menunjukkan kelompok yang berbeda secara
statistik dengan yang sesuaipnilai 0,010, 0,013, 0,027 dan 0,003, masing-masing.

agregasi pada kolagen dan VWF berkurang untuk Pengaruh Penanganan Unit Apheresis Trombosit terhadap Kadar
trombosit di unit apheresis trombosit yang telah Reseptor GPIb Trombosit dan Bentuk VWF
diangkutmelaluiPTS. Hal ini menimbulkan pertanyaan
Kami selanjutnya mempelajari apakah pengangkutan unit
apakah transpor PTS mempengaruhi ekspresi reseptor
apheresis trombosit mempengaruhi tingkat ekspresi reseptor
VWF trombosit, GPIb, mengingat fakta bahwa aktivasi
GPIb trombosit. Hasil kami menunjukkan bahwa tingkat
trombosit tidak terpengaruh oleh pengangkutan unit
ekspresi GPIb setara pada trombosit di unit apheresis
apheresis trombosit.melaluiPTS.
trombosit sebelum dan sesudah transportasimelaluisalah satu
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS

GAMBAR 6. Pengaruh penanganan unit apheresis trombosit terhadap kadar reseptor GPIb trombosit dan bentuk VWF. Unit apheresis trombosit
dikumpulkan sebelum (basal) atau setelah transportasimelaluitransportasi sistem tabung pneumatik (PTS) atau oleh kurir manusia, transportasi
rawat jalan (AMB) dan diimunisasi untuk ekspresi permukaan GPIb dan dievaluasi oleh FACS. Intensitas fluoresen rata-rata geometris (GeoMFI) dari
level GPIb dinormalisasi ke level yang ditemukan dalam sampel cPRP yang baru disiapkan. Berarti6SEM,n =4. (a) Dalam percobaan tertentu, unit
apheresis trombosit dan sampel cPRP dipelet dengan sentrifugasi untuk mengisolasi dan menguji supernatan untuk multimer VWF dengan Western
blot. Tingkat total bentuk VWF dinormalisasi menjadi vinculin (b; ns = tidak signifikan secara statistik denganp = 0,1173, **p =0,0331 dan ***p =
0,0123;n =4). Rasio bentuk VWF, multimer berat molekul tinggi (HMWM), dimer dan matang, dinormalisasi menjadi bentuk VWF matang (c;n =4)

Rute PTS atau AMB (Gbr.6sebuah). Selain itu, kadar GPIb pada
trombosit di unit aferesis trombosit setara dengan kadar GPIb
yang diukur pada trombosit yang baru dicuci.
Kami selanjutnya memeriksa kadar bentuk multimer
VWF dalam supernatan yang diisolasi dari unit apheresis
trombosit sebelum dan setelah transportasimelaluibaik
PTS atau AMB rute. Kami menemukan bahwa ketika
dinormalisasi ke protein rumah tangga, vinculin, fraksi
unit apheresis trombosit yang diisolasi pada awal atau
setelah transportasi PTS atau AMB mengandung tingkat
VWF total yang serupa, meskipun tingkatnya sedikit lebih
tinggi daripada tingkat yang diamati pada plasma kaya
trombosit yang baru disiapkan ( Ara.6b). Distribusi bentuk
dimer dan multimer VWF setara dalam plasma unit
apheresis trombosit sebelum transportasi dibandingkan
dengan transportasi berikutnyamelaluibaik rute PTS atau
AMB (Gbr.6c). Singkatnya, data kami menunjukkan bahwa
pengangkutan unit apheresis trombositmelaluibaik
metode PTS atau AMB tidak mempengaruhi ekspresi
reseptor GPIb trombosit atau distribusi multimer VWF
dibandingkan dengan sebelum transportasi.
DISKUSI
Perdarahan tetap menjadi penyebab utama kematian pada
pasien trauma.22,32,56,60Penyertaan unit apheresis trombosit
sebagai bagian dari strategi resusitasi awal telah terbukti
meningkatkan kelangsungan hidup pasien yang terluka parah
52,53,70dan meningkatkan hasil pada pasien dengan
trombositopenia yang relevan secara klinis.61Oleh karena itu,
unit apheresis trombosit sering dilarikan ke
tim perawatan pasien segera setelah kebutuhan ditentukan;
umumnya, sistem tabung pneumatik (PTS) digunakan untuk
mempercepat dan mengamankan akses produk transfusi vital
ini. Menariknya, beberapa penelitian telah menunjukkan
bahwa pengangkutan darah utuhmelaluiPTS mengarah ke
hasil tes fungsi trombosit abnormal dibandingkan dengan
transportasi AMB.2,7,15,16,19,24,65,67Bahkan, koleksi ini
Temuan tive telah menyebabkan pembentukan rekomendasi
internasional terhadap penggunaan PTS untuk transportasi
sampel klinis untuk pengujian fungsi trombosit.21,45Sangat
membingungkan bahwa sementara PTS tidak lagi
direkomendasikan untuk pengangkutan sampel klinis untuk
pengujian trombosit, hal itu diizinkan dan sering digunakan untuk
pengangkutan unit apheresis trombosit yang akan ditransfusikan
ke pasien. Studi kasus kami dirancang untuk memeriksa apakah
pengangkutan unit apheresis trombositmelaluiTranspor PTS
mempengaruhi aktivasi dan fungsi trombosit.
Donasi unit apheresis trombosit melibatkan keterlibatan
waktu donor yang signifikan serta sejumlah risiko jangka
pendek dan jangka panjang untuk donor termasuk kompromi
parameter hematologi langsung, trombopoiesis dan
demineralisasi tulang.12,69Sebagian besar penelitian yang
melihat kemungkinan efek transpor PTS pada fungsi
trombosit telah difokuskan pada pengangkutan sampel darah
utuhmelaluiPTS dan penggunaan satu konsentrasi agonis
tunggal atau pengobatan yang digabungkan dengan tes
fungsi trombosit.10,23Dalam penelitian kami, kami menghitung
profil akselerasi / deselerasi yang dialami unit apheresis
trombosit dalam OHSU PTS dibandingkan dengan selama
transportasi rawat jalan (AMB). Studi kasus kami menunjukkan
bahwa menundukkan unit apheresis trombosit untuk
perubahan cepat dalam gravitasi
 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.
kekuatan tational selama transportasi PTS tidak
mempengaruhi respon trombosit terhadap agonis
trombosit terlarut, ekspresi reseptor GPIb atau tingkat
multimer VWF. Sedikit penurunan diamati pada tingkat
agregasi trombosit pada kolagen dan VWF, dan kami saat
ini sedang menyelidiki mekanisme di balik pengurangan
pembentukan agregat ini. Tidak jelas apakah sedikit
penurunan dalam pembentukan agregat merupakan
indikasi hilangnya fungsi hemostatik yang relevan secara
klinis.
Data kami menunjukkan bahwa trombosit diangkutmelalui
PTS tidak menunjukkan tingkat aktivasi atau mikroagregasi
yang lebih tinggi dibandingkan dengan trombosit yang
diangkut dengan metode AMB. Temuan ini konsisten dengan
Javela dkk.yang juga menunjukkan bahwa waktu
penyimpanan daripada penanganan unit apheresis platelet
mempromosikan sekresi CD62P platelet awal.28Kelompok lain
juga menunjukkan bahwa PTS tidak berpengaruh pada
aktivitas metabolisme trombosit, aktivasi atau sekresi sebagai
fungsi waktu penyimpanan.16,37,55Selain itu, karya terbaru oleh
Kellydkk., menunjukkan bahwa kemampuan unit apheresis
trombosit untuk meningkatkan jumlah trombosit pada pasien
kanker non-perdarahan dengan trombositopenia tidak
tergantung pada derajat fungsi trombosit yang diukur dengan
agregometri, ekspresi Pselectin dan pengikatan fibrinogen.33
Jadi, mungkin selama pasien memiliki konsentrasi ambang
trombosit fungsional dalam sirkulasi, transfusi trombosit
tambahan, meskipun mungkin menunjukkan penurunan
aktivitas absolut, mungkin cukup untuk menghentikan
perdarahan. Dalam pengaturan ini, reaktivitas trombosit
dalam unit aferesis trombosit mungkin sekunder dari
kemampuan untuk secara cepat mengangkut unit aferesis
trombosit ke pasien yang berisiko perdarahan. Sebaliknya,
pada pasien cedera berat dengan trombositopenia dan
disfungsi trombosit, transfusi unit apheresis trombosit yang
mempertahankan fungsi trombosit mungkin sangat penting
untuk meningkatkan hemostasis. Studi lebih lanjut diperlukan
untuk menilai dengan tepat efek transportasi pada fungsi unit
apheresis trombosit yang disimpan pada populasi pasien
yang berbeda untuk memandu pemanfaatan yang tepat dari
reagen terapeutik penting ini.
Penilaian klinis fungsi trombosit diperumit oleh sejumlah
variabel; secara historis, tes fungsi trombosit terkenal karena
kompleksitas teknisnya dan kegunaannya yang terbatas karena
efek potensial dari penanganan sampel selama pengangkutan,
kerapuhan trombosit dan penggunaan langkah-langkah
pemurnian.5,10,13,17,19,43Penilaian unit apheresis trombosit lebih
diperumit oleh kondisi penyimpanan trombosit di mana trombosit
rentan untuk mensekresi mediator sekunder, mengubah
ketersediaan reseptor, mengubah respons trombosit terhadap
rangsangan dan kemampuan mereka untuk berinteraksi dengan
protein ECM tertentu.6,8,14,18,20,34,35,37Selain itu, yang lain telah
menemukan bahwa penyimpanan dikombinasikan dengan
peningkatan frekuensi
Transpor PTS secara dramatis menurunkan fungsi trombosit
yang dinilai dengan agregometri dengan adanya kolagen,
ADP, TRAP atau asam arakidonat.37Selama dua dekade
terakhir, langkah signifikan telah dibuat untuk meningkatkan
dan menyederhanakan pengujian trombosit termasuk
mengeluarkannya dari laboratorium pengujian khusus dan
membuat pengujian lebih portabel dan prediktif terhadap
hasil klinis.10,23Potensi komersialisasi metode sistem tertutup
dan terbuka menggunakan sampel darah utuh volume kecil
memiliki potensi untuk penilaian fungsi trombosit pasien yang
tepat waktu yang dapat mempercepat dan menyederhanakan
pemahaman kita tentang kapasitas hemostatik spesifik pasien
untuk memandu intervensi potensial.4,19,27,29,40,48,58,66
Laporan ini berfokus pada studi tentang pengaruh
penanganan unit apheresis trombosit selama transportasi
dalam satu rumah sakit dan rute tertentu. Keterbatasan
penting untuk generalisasi penelitian kami adalah potensi
varians antara instalasi PTS yang berbeda. Heterogenitas
konstruksi dan tata letak rumah sakit menentukan bahwa
jarak, waktu transit, dan pengalaman kargo percepatan
puncak akan agak bervariasi dari rumah sakit ke rumah
sakit, dan bahkan dari lantai ke lantai di dalam rumah
sakit, berdasarkan tata letak khusus dan instalasi sistem
transportasi tabung pneumatik tertentu. . Di dalam rumah
sakit kita sendiri misalnya, produk darah diangkut ke
berbagai lantai rumah sakitmelaluiPTS, kemungkinan
menghasilkan variasi kekuatan yang dialami kargo.
Beberapa publikasi sebelumnya yang mencakup sistem
rumah sakit yang berbeda telah mengukur percepatan
puncak sekitar 8 g,49hingga 15 gram,62dengan percepatan
puncak hingga 25 g telah dilaporkan dalam sebuah
penelitian yang mengevaluasi kecepatan yang lebih tinggi
yang tidak secara rutin digunakan untuk transportasi
produk darah (7 m/s).2Varians ini dapat menjelaskan
beberapa heterogenitas dalam laporan efek PTS pada
produk darah.50Beberapa penulis telah menyarankan
rumah sakit melakukan evaluasi internal PTS mereka
dengan g-logger untuk menentukan sejauh mana
kekuatan yang dialami produk darah dalam perjalanan.50
Penting untuk menunjukkan bahwa literatur tentang efek
PTS pada fungsi trombosit dan tidak konsisten secara
universal. Analisis sebelumnya dari sampel darah utuh telah
menemukan perbedaan yang dapat dideteksi dalam
agregometri trombosit7,24,65dan parameter PFA-100 dalam
sampel yang dikirim melalui PTS vs prosedur penanganan
alternatif,24sedangkan penelitian lain belum menemukan
pengaruh transpor PTS terhadap agregometri trombosit.15Ada
beberapa variabel yang dapat menjelaskan perbedaan ini
termasuk variasi dalam kekuatan pengalaman trombosit di
masing-masing pusat sistem PTS masing-masing,50fakta
bahwa studi yang dikutip mengevaluasi darah lengkap dan
fakta bahwa sumber darah lengkap bervariasi dari
sukarelawan sehat, pasien yang menerima agen antiplatelet,
hingga pasien yang mungkin sakit kritis. Beberapa penelitian
juga mengirimkan sampel melalui
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS
Unit PTS beberapa kali,19atau kecepatan PTS yang digunakan tidak
secara rutin digunakan untuk transportasi produk darah.2Secara
klinis, sebagian besar penelitian sebelumnya yang mengevaluasi
darah lengkap lebih dapat digeneralisasikan untuk keakuratan
berbagai tes fungsi trombosit yang dilakukan pada sampel pasien
langsung kemudian pada transfusi trombosit, yang merupakan
tujuan utama penelitian kami.
Kami menggunakan unit apheresis trombosit yang
dikeluarkan dari inventaris klinis sesuai dengan pedoman
Palang Merah Amerika. Jangka waktu penyimpanan unit
apheresis trombosit dan jangka waktu kadaluarsa ditetapkan
oleh Palang Merah terutama untuk mencegah beban bakteri
dalam komponen darah yang disimpan di RT. Namun,
kemungkinan juga bahwa trombosit yang baru saja
kadaluwarsa mungkin kurang diinginkan untuk transfusi
karena akumulasi tingkat mediator sekunder trombosit yang
signifikan dalam supernatan unit aferesis trombosit.36Lebih
lanjut, data kami sesuai dengan gagasan bahwa penyimpanan
unit apheresis trombosit dapat meningkatkan kadar multimer
VWF berbobot molekul tinggi (HMWM), yang mungkin
disebabkan oleh pelepasan trombosit yang disimpan dari
HMWM yang resisten terhadap degradasi oleh ADAMTS13.31,38
,44,47Dengan mengingat keterbatasan ini, penting untuk dicatat
bahwa kami tidak mengamati perbedaan ekspresi reseptor
GPIb antara trombosit segar dan yang disimpan.9,11,39,41,42,63
Sedangkan transpor trombosit melaluiPTS tidak berpengaruh
pada tingkat GPIb atau VWF, kami menemukan bahwa
trombosit yang disimpan yang terpapar pada frekuensi tinggi
percepatan/perlambatan sentakan menunjukkan penurunan
pembentukan agregat pada permukaan kolagen atau VWF
yang tidak bergerak di bawah laju geser 300 detik-1. Pekerjaan
di masa depan menggunakan trombosit yang baru diisolasi
akan difokuskan untuk menentukan apakah PTS berperan
dalam mengubah konformasi atau berpotensi menyebabkan
pelepasan reseptor trombosit (termasuk GPIb dan GPVI) dan
mencoba menghubungkan temuan ini dengan hasil klinis
pada pasien yang menjalani transfusi trombosit.3,59
BAHAN TAMBAHAN ELEKTRONIK
Versi online artikel ini (https://doi.org/10. 1007/
s13239-018-0361-2) berisi materi tambahan, yang
tersedia untuk pengguna yang berwenang.
UCAPAN TERIMA KASIH
Kami berterima kasih kepada staf Layanan Transfusi
OHSU, Palang Merah Amerika, Wilayah Layanan Darah
Pacific Northwest, dan Fenwal Inc., Perusahaan
Fresenius Kabi, produsen pemisah Amicus, atas
bantuan teknis pengadaan apheresis trombosit
unit dan persiapan cPRP segar. OJT McCarty adalah
Investigator Didirikan Asosiasi Jantung Amerika
(13EIA12630000).
PENDANAAN
Studi ini didanai oleh hibah dari National
Institutes of Health (R01HL101972, R01GM116184
dan F31HL13623001). OJT McCarty adalah
Investigator Didirikan Asosiasi Jantung Amerika
(13EIA12630000).
KONFLIK KEPENTINGAN
J. Zilberman-Rudenko, FZ Zhao, SE Reitsma,
A. Mitrugno, J. Pang, JJ Shatzel, B. Rick, C. Tyrrell,
W. Hasan, OJT McCarty, dan MA Schreiber tidak
memiliki konflik kepentingan.
PERSETUJUAN ETIKA
Semua prosedur yang dilakukan dalam penelitian yang
melibatkan partisipan manusia telah sesuai dengan
standar etika dari komite penelitian institusional dan/atau
nasional dan dengan deklarasi Helsinki tahun 1964 dan
amandemen selanjutnya atau standar etika yang
sebanding. Informed consent diterima dari semua peserta
manusia. Artikel ini tidak berisi penelitian apa pun dengan
hewan yang dilakukan oleh penulis mana pun.
REFERENSI
1AABB. Standar Bank Darah dan Pelayanan Transfusi
(edisi ke-29). Bethesda: Asosiasi Bank Darah Amerika,
2014.
2Amann, G., C. Zehntner, F. Marti, dan G. Colucci. Pengaruh gaya
akselerasi selama pengangkutan melalui sistem tabung
pneumatik pada analisis ROTEM.klinik Kimia Laboratorium.
Med.50:1335–1342, 2012.
3Auton, M., C. Zhu, dan MA Cruz. Mekanisme pengikatan
GPIbalpha platelet yang dimediasi VWF.Biofis. J.
99:1192-1201, 2010.
4Baker-Groberg, SM, S. Lattimore, M. Recht, OJT McCarty,
dan KM Haley. Penilaian adhesi, aktivasi, dan agregasi
trombosit neonatal.J. Tromb. paling hemat.14:815–827,
2016.
5Bartels, A., Y. Sarpong, J. Coberly,dkk.Kegagalan Platelet
Function Assay (PFA)-100 untuk mendeteksi agen
antiplatelet.Operasi158:1012–1018, 2015; (diskusi
1018-1019).
6Baurand, A., A. Eckly, N. Bari, C. Léon, B. Hechler, JP
Cazenave, dan C. Gachet. Desensitisasi respons agregasi
trombosit terhadap ADP: penurunan regulasi reseptor
P2Y1 dan P2cyc yang berbeda.berdenyut. paling hemat.
84:484–491, 2000.
7Bolliger, D., MD Seeberger, KA Tanaka, S. Dell-Kuster, M.
Gregor, U. Zenklusen, M. Grapow, DA
 ZILBERMAN-RUDENKOdkk.
Tsakiris, dan M. Filipovic. Efek pra-analitik dari transportasi
tabung pneumatik pada agregometri trombosit impedansi.
Trombosit20:458–465, 2009.
8 Boomgaard, MN, CW Gouwerok, CH Homburg, G. de Groot,
MJ IJsseldijk, dan D. de Korte. Kapasitas adhesi trombosit
pada matriks subendotel dan kolagen dalam model aliran
selama penyimpanan konsentrat trombosit selama 7 hari.
berdenyut. paling hemat.72:611–616, 1994.
9Canault, M., D. Duerschmied, A. Brill, L. Stefanini, D. Schatzberg,
SM Cifuni, W. Bergmeier, dan DD Wagner. p38 aktivasi protein
kinase yang diaktifkan mitogen selama penyimpanan trombosit:
konsekuensi untuk pemulihan trombosit dan fungsi hemostatik
in vivo.Darah115:1835–1842, 2010.
10Cardigan, R., C. Turner, dan P. Harrison. Metode saat ini-
ods menilai fungsi trombosit: relevansi dengan obat
transfusi.Vox Sang.88:153-163, 2005.
11Chen, W., X. Liang, AK Syed, P. Jessup, Gereja WR,
J. Ware, CD Josephson, dan R. Li. Menghambat GPIbsebuah
shedding mempertahankan pemulihan pasca-transfusi dan
fungsi hemostatik trombosit setelah penyimpanan yang lama.
Arterioskler. berdenyut. Vask. Biol.36:1821–1828, 2016.
12Das, SS, R. Chaudhary, SK Verma, S. Ojha, dan D.
Khitan. Penentu keputusan transfusi di unit perawatan
intensif medis-bedah campuran — studi kohort
prospektif.Transfusi Darah.7:188–192, 2009.
13De Rossi, SS, dan M.Glick. Waktu pendarahan: tidak dapat diandalkan
prediktor hemostasis klinis.J. Maksilofak Oral. Surg.
54:1119-1120, 1996.
14Devine, DV, dan K. Serrano. Lesi penyimpanan trombosit.
klinik Laboratorium. Med.30:475–487, 2010.
15Dyszkiewicz-Korpanty, A., R. Quinton, J. Yassine, dan R.
Sarode. Pengaruh sistem transportasi tabung pneumatik pada
waktu penutupan merek dagang PFA-100 dan agregasi
trombosit darah utuh.J. Tromb. paling hemat.2:354–356, 2004.
16Enko, D., H. Mangge, A. Münch, T. Niedrist, E. Mahla, H.
Metzler, dan F. Prüller. Transportasi sistem tabung pneumatik tidak
mengubah fungsi trombosit dalam agregometri optik dan darah
lengkap, waktu protrombin, waktu tromboplastin parsial teraktivasi,
jumlah trombosit dan fibrinogen pada pasien yang menjalani terapi
obat anti-platelet.Biokimia. Med.27:217–224, 2017.
17Favaloro, EJ Mendiagnosis penyakit von Willebrand: singkat
sejarah pencapaian dan inovasi laboratorium, ditambah
status, tantangan, dan solusi saat ini.mani. berdenyut.
Hemost.40:551–570, 2014.
18Gitz, E., CA Koekman, DJ van den Heuvel, H.
Deckmyn, JW Akkerman, HC Gerritsen, dan RT Urbanus. Peningkatan
kelangsungan hidup trombosit setelah penyimpanan dingin dengan
pencegahan glikoprotein Ibsebuahpengelompokan di rakit lipid.
hematologi97:1873–1881, 2012.
19Glas, M., D. Mauer, H. Kassas, T. Volk, dan S. Kreuer.
Transportasi sampel dengan sistem tabung pneumatik
mengubah hasil agregometri elektroda ganda tetapi tidak
tromboelastometri rotasi.Trombosit24:454–461, 2013.
20Hardy, AR, PB Conley, J. Luo, JL Benovic, AW
Poole, dan SJ Mundell. Reseptor P2Y1 dan P2Y12 untuk ADP
mengalami desensitisasi oleh mekanisme bergantung kinase yang
berbeda. Darah105:3552–3560, 2005.
21Harrison, P., I. Mackie, A. Mumford, C. Briggs, R. Lies-
ner, M. Winter, S. Machin, dan Komite Inggris untuk
Standar dalam Hematologi. Pedoman pemeriksaan
laboratorium kelainan fungsi trombosit yang diturunkan.
sdr. J. Hematol.155:30–44, 2011.
22Hess, JR, K. Brohi, RP Dutton,dkk.koagulasi-
lopati trauma: tinjauan mekanisme.J. Trauma 65:748–
754, 2008.
23Holme, S. Penyimpanan dan penilaian kualitas trombosit.Suara
Bernyanyi.74:207–216, 1998.
24Hübner, U., N. Böckel-Frohnhöfer, B. Hummel, dan J.
Geisel. Pengaruh sistem transportasi tabung pneumatik pada
agregasi trombosit menggunakan agregometri optik dan
PFA-100.klinik Laboratorium.56:59–64, 2010.
25Jackson, SP Semakin kompleksnya agregasi trombosit
gerbang.Darah109:5087–5095, 2007.
26Jackson, SP, WS Nesbitt, dan S. Kulkarni. Sinyal
peristiwa yang mendasari pembentukan trombus.J. Tromb. paling
hemat.1:1602–1612, 2003.
27Jain, A., AD van der Meer, A.-L. Ayah,dkk.Penilaian
trombosis darah utuh dalam perangkat mikofluida dilapisi oleh
endotelium manusia tetap.Bioma. Perangkat mikro18:73, 2016.
28Javela, K., J. Eronen, S. Sarna, dan R. Kekomäki. Larut
glikoprotein V sebagai penanda kualitas konsentrat trombosit
yang ditekankan oleh transportasi.Transfusi (Paris)45:1504–
1511, 2005.
29Jeger, V., H. Zimmermann, dan AK Exadaktylos. Itu
peran trombelastografi pada trauma multipel.muncul.
Med. Int.2011:1–4, 2011.
30Jurk, K., dan BE Kehrel. Trombosit: fisiologi dan bio-
kimia.mani. berdenyut. Hemost.31:381–392, 2005.
31Kanaji, S., SA Fahs, Q. Shi, SL Haberichter, dan RR
Montgomery. Kontribusi trombosit vs VWF endotel untuk
adhesi trombosit dan hemostasis.J. Tromb. paling hemat.
10:1646–1652, 2012.
32Kauvar, DS, R. Lefering, dan CE Wade. Dampak dari
perdarahan pada hasil trauma: gambaran epidemiologi,
presentasi klinis, dan pertimbangan terapeutik.J. Trauma
60:S3-11, 2006.
33Kelly, AM, SF Garner, T. Foukaneli,dkk.Efeknya
variasi dalam fungsi trombosit donor pada hasil
transfusi: uji coba terkontrol semi-acak.Darah130:214–
220, 2017.
34Kicken, C., SV Poucke, AE Marcus, MD Lance, and
Y. Henskens. Respon konsentrat trombosit terhadap
perubahan tekanan dan suhu tanpa gangguan fungsi in
vitro.berdenyut. Res.135:679–683, 2015.
35Kicken, CH, M. Roest, YMC Henskens, B. de Laat,
dan D. Huskens. Penerapan kuantifikasi Aktivasi
Trombosit (PACT) berbasis aliran sitometri yang
dioptimalkan: Memantau aktivasi trombosit dalam
konsentrat trombosit.PloS SATU12:e0172265, 2017.
36Kreuger, AL, C. Caram-Deelder, J. Jacobse, J.-L. Ker-
khoffs, JG van der Bom, dan RA Middelburg. Pengaruh waktu
penyimpanan produk trombosit pada hasil klinis setelah
transfusi: tinjauan sistematis dan meta-analisis.Vox Sang
112:291–300, 2017.
37Lance, MD, MAE Marcus, R. van Oerle, HMS
Theunissen, dan YMC Henskens. Transportasi konsentrat
trombosit dalam sistem tabung pneumatik — apakah itu
berhasil?Vox Sang.103:79–82, 2012.
38Lenting, PJ, dan CV Denis. Trombosit von Willebrand
faktor: ketahanan manis.Darah122:4006–4007, 2013.
39Leytin, V., DJ Allen, A. Gwozdz, B. Garvey, dan J.
orang merdeka. Peran glikoprotein permukaan trombosit
Ibalpha dan P-selectin dalam pembersihan konsentrat trombosit
yang ditransfusikan.Transfusi (Paris)44:1487–1495, 2004.
40Li, R., H. Elmongy, C. Sims, dan SL Diamond. ex vivo
rekapitulasi koagulopati yang diinduksi trauma dan
penilaian awal fungsi trombosit pasien trauma di bawah
aliran menggunakan teknologi mikofluida.J. Trauma Bedah
Perawatan Akut.80:440–449, 2016.
 Fungsi Unit Apheresis Trombosit Pasca Transportasi PTS
41Liang, X., SR Russell, S. Estelle, LH Jones, S. Cho, M.
L. Kahn, MC Berndt, ST Bunting, J. Ware, dan R. Li. Penghambatan
spesifik pelepasan ektodomain dari glikoprotein Ibsebuahdengan
menargetkan situs pembelahan penumpahan juxtamembrane.
J. Tromb. paling hemat.11:2155–2162, 2013.
42Liang, X., AK Syed, SR Russell, J. Ware, dan R. Li.
Dimerisasi glikoprotein Ibsebuahtidak cukup untuk menginduksi
klirens trombosit.J. Tromb. paling hemat.14:381–386, 2016.
43Ling, L.-Q., J. Liao, Q. Niu, X. Wang, J. Jia, C.-H. Zuo, H.
Jiang, dan J.Zhou. Evaluasi agregometri transmisi cahaya
otomatis.Trombosit28:712, 2017.
44Luo, G.-P., B. Ni, X. Yang, dan Y.-Z. Wu. von Willebrand
faktor: lebih dari pengatur hemostasis dan trombosis.
Acta Hematol.128:158–169, 2012.
45Magnette, A., M. Chatelain, B. Chatelain, H. Ten Cate,
dan F. Muller. Masalah pra-analitis di laboratorium
hemostasis: panduan untuk laboratorium klinis.
berdenyut. J.14:49, 2016.
46McCarty, OJT, SDJ Calaminus, MC Berndt, LM
Machesky, dan SP Watson. Faktor von Willebrand memediasi
penyebaran trombosit melalui glikoprotein Ib dan
alfa(IIb)beta3 masing-masing dengan adanya botrocetin dan
ristocetin.J. Tromb. paling hemat.4:1367–1378, 2006.
47McGrath, RT, M. van den Biggelaar, B. Byrne, JM
O'Sullivan, O. Rawley, R. O'Kennedy, J. Voorberg, RJS Preston, dan JS
O'Donnell. Glikosilasi yang berubah dari faktor von Willebrand yang
diturunkan dari trombosit memberikan resistensi terhadap
proteolisis ADAMTS13.Darah122:4107–4110, 2013.
48Moore, HB, EE Moore, MP Chapman,dkk.melihat-
pengukuran koelastik fungsi trombosit, bukan fungsi fibrinogen,
memprediksi sensitivitas terhadap aktivator plasminogen tipe
jaringan pada pasien trauma.J Tromb Haemost13:1878– 1887,
2015.
49Mullins, GR, JH Harrison, dan DE Bruns. Cerdas-
telepon dapat memantau sistem tabung pneumatik pusat
medis.klinik Kimia62:891–893, 2016.
50Nybo, M., ME Lund, K. Titlestad, dan CU Maegaard.
Transportasi sampel darah dengan sistem transportasi
pneumatik: tinjauan literatur sistematis.klinik Kimia64:782,
2017.
51Ozaki, Y., N. Asazuma, K. Suzuki-Inoue, dan MC
Berndt. Pensinyalan yang bergantung pada GPIb-IX-V trombosit.J.
Tromb. paling hemat.3:1745–1751, 2005.
52Perkins, JG, AP Cap, CP Andrew,dkk.Sebuah evaluasi-
asi dampak trombosit apheresis yang digunakan dalam pengaturan
pasien trauma yang ditransfusikan secara besar-besaran.J. Trauma
66:S77– S84, 2009; (diskusi S84–S85).
53Pidcoke, HF, JK Aden, AG Mora, MA Borgman,
PC Spinella, MA Dubick, LH Blackbourne, dan AP Cap. Analisis
sepuluh tahun transfusi dalam Operasi Pembebasan Irak dan
Operasi Pembebasan Bertahan: peningkatan penggunaan plasma
dan trombosit berkorelasi dengan peningkatan kelangsungan hidup.
J. Trauma Bedah Perawatan Akut.73:S445–452, 2012.
54Ruggeri, Trombosit ZM pada aterotrombosis.Nat Med
8:1227–1234, 2002.
55Sandgren, P., S. Larsson, P. Wai-San, dan B. Aspevall-
Diedrich. Efek transportasi tabung pneumatik pada trombosit
segar dan disimpan dalam larutan aditif.Transfusi Darah. 12:85–
90, 2014.
56Sauaia,
A., FA Moore, EE Moore, KS Moser, R.
Brennan, RA Baca, dan PT Pons. Epidemiologi kematian
trauma: penilaian ulang.J. Trauma38:185–193, 1995.
57Schoner,A., C. Tyrrell, M. Wu, JM Gelow, AA Hayes,
JR Lindner, KL Thornburg, dan W. Hasan. Endo-
disfungsi endotel jantung secara progresif mengganggu
jalur anti kemudian pro-trombotik pada tikus gagal jantung.
PloS SATU10:e0142940, 2015.
58Schreiber, MA, J. Differding, P. Thorborg, JC May-
berry, dan RJ Mullins. Hiperkoagulabilitas paling sering
terjadi pada awal setelah cedera dan pada pasien wanita.J.
Trauma58:475–480, 2005; (diskusi 480–481).
59Singh, I., E. Themistou, L. Porcar, dan S. Neelamegham.
Geser cairan menginduksi perubahan konformasi protein darah
manusia faktor von Willebrand dalam larutan.Biofis. J. 96:2313–
2320, 2009.
60Sobrino, J., dan S. Shafi. Waktu dan penyebab kematian setelah
cedera.Prok. Bayl. Univ. Med. Sen.26:120–123, 2013.
61Stanworth,SJ, LJ Estcourt, G. Powter,dkk.Tidak-
profilaksis strategi transfusi trombosit untuk kanker
hematologi.N. Inggris. J. Med.368:1771-1780, 2013.
62Streichert, T., B. Otto, C. Schnabel, G. Nordholt, M.
Haddad, M. Maric, A. Petersmann, R. Jung, dan C. Wagener.
Penentuan ambang hemolisis dengan menggunakan data
logger dalam sistem tabung pneumatik.klinik Kimia
57:1390–1397, 2011.
63Tao, Y., X. Zhang, X. Liang, J. Zang, X. Mo, dan R. Li.
Dasar struktural untuk penghambatan spesifik glikoprotein Ibsebuah
dilepaskan oleh antibodi penghambat.Sci. Reputasi.6:24789, 2016.
64Tenorio, GC, RG Strauss, MJ Wieland, TA Behlke,
dan GA Ludwig. Perbandingan acak plateletpheresis
dengan donor yang sama menggunakan empat pemisah
darah di satu pusat darah.J.klin. Apheresis17:170–176,
2002.
65Thalén, S., I. Forsling, J. Eintrei, L. Söderblom, dan JP
Antovic. Transpor tabung pneumatik mempengaruhi fungsi
trombosit yang diukur dengan agregometri elektroda multiplate.
berdenyut. Res.132:77–80, 2013.
66Tisherman, SA, RH Schmicker, KJ Brasel, EM
Bulger, JD Kerby, JP Minei, JL Powell, DA Reiff, SB Rizoli,
dan MA Schreiber. Deskripsi rinci dari semua kematian di
kedua shock dan cedera otak traumatis percobaan salin
hipertonik dari Konsorsium Hasil Resusitasi.Ann. Surg.
261:586–590, 2015.
67Wallin, O., J. Söderberg, K. Grankvist, PA Jonsson, dan
J.Hultdin. Efek praanalisis dari transportasi tabung
pneumatik pada hematologi rutin, parameter koagulasi,
fungsi trombosit dan koagulasi global.klinik Kimia
Laboratorium. Med.46:1443–1449, 2008.
68Watson, SP, JM Auger, OJT McCarty, dan AC
Pearce. GPVI dan integrinsebuahIIbb3 sinyal dalam trombosit.J.
Tromb. paling hemat.3:1752-1762, 2005.
69Winters, JL Komplikasi apheresis donor.J.klin.
Apheresis21:132–141, 2006.
70Yonge, JD, dan MA Schreiber. Jalan pragmatis-
uji coba rasio trombosit dan plasma optimal terdominasi: apa
artinya untuk resusitasi kendali kerusakan jarak jauh?Transfusi
(Paris)56 (Suppl 2): S149–156, 2016.
71Zilberman-Rudenko, J., A. Itakura, J. Maddala, SM
Baker-Groberg, R. Vetter, EI Tucker, A. Gruber, C. Gerdes,
dan OJT McCarty. Biorheologi aktivasi trombosit dalam
aliran darah distal pembentukan trombus.Sel. mol.
Bioeng.9:496–508, 2016.
72Zilberman-Rudenko, J., A. Itakura, CP Wiesenekker, R.
Vetter, C. Maas, D. Gailani, EI Tucker, A. Gruber, C. Gerdes,
dan OJT McCarty. Faktor koagulasi XI mempromosikan
aktivasi trombosit distal dan konsumsi trombosit tunggal
dalam aliran darah di bawah aliran geser.Tromb
Arterioskler. Vask. Biol.36:510–517, 2016.