PRAKTIKUM

PEMERIKSAAN AIR

METODE MOST PROBALITY NUMBER (MPN)

Hari/tanggal :

Tempat :

Tujuan :

A.Tinjauan Pustaka

Metode MPN terdiridari 3 tahap,yaitu uji pendugaan (presumptive test),uji konfirmasi

(confirmed test).Dalam uji tahappertama,keberadaan coliform masih dalam tingkat probalitas
rendah masih dalam dugaan.Uji mendeteksi sifat fermentative coliform dalam sampel. Karna
beberapa jenis bakteri selain coliform juga memiliki sifat fermentative,diperlukan uji
konfirmasi untuk mengetes Kembali kebenaran adanya coliform dengan bantuan medium
hasil uji konfirmasidengan mendeteksi sifat fermentative dan pengamatan mikroskop
terhadap ciri-ciri coliform berbentuk batang,gramnegative,tidakberspora.

B.Alat dan bahan

 Alat
a) Tabungreaksi
b) Rak tabungreaksi
c) Tabungdurham
d) Gelasukur
e) Beaker gllas
f) Botol semprot
g) Oven
h) Bulb
i) Ose
j) Pipet tetes
 k) Pipet volume
l) Label
m) Lampu Bunsen
n) Inqubator
o) Kapas
p) Penjepitbesi

 Bahan
a) AirSampel
b) Aquadest
c) Media LB (Lactose Broth) 13gr/L
d) Alkohol 70%
e) BGLB (40gr/L)

C.Carakerja

1) Tespen dugaan dengan menggunakan media LB ( Lactose Broth)

 Cara pembuatan media LB

a)Timbanglah media LB yang telahdihitung
b)Tambahkan aquadest sesuai dengan yang dibutuhkan
c)Panaskan media diatas kompor sampaimen didih,angkat
d)Siapkan tabung reaksi sebanyak 9 buah dan beri label
e)Pipet kedalam masing-masing tabung reaksi 3 tabung berisi 9 ml, 3 tabung berisi
9,9 ml, dan 3 tabung 5 ml media LB yang telah dimasak
f)Bolak balik tabung reaksi agar didalam tabung durham tidak terdapat gelembung,
kemudian tutup dengan kapas
g)Kemudian sterilkan dengan oven pada suhu 110 derajat selama 15 menit, kemudian
dinginkan
 Cara kerjapenanaman
a)HidupkanlampuBunsen,ambil media yang telahdisterilisasikan
b)Ambilsampel,pipetkedalam media LB dengan label (1 tabungreaksiberisimemdia
dan sampelyaitu 10 ml)
c)Tutupkembalidengankapas
d)Lalu masukankedlaminqubatordengansuhu 37 derajatselama 2x24 jam.

Kolifom E coli
5 = +3 5 = +3
1 = +3 1 = +3
0,1 = +3 0,1 = +3
Kode +-1898

 Hasil

Maka jumlah tabuing yang positif pada media LB diperoleh hasil 8 tabung reaksi LB
positif dari 9 tabung reaksi. Yaitu tabung 9,9ml sebnyak 2 tabung, 9 ml sebanyak 3
dan tabung 5 ml sebanyak 3 tabung. adapun ciriciri tabung reaksi LB positif adalah :
1) Keruh
2) Tabung durham naik keatas
3) Tabung durham menandakan adanya gas

 Kesimpulan

Dari percobaan pengambilan sampel air sumur gali menggunakan media LB (Lactose
Broth), diperoleh hasil 8 tabung reaksi LB positif dari 9 tabung reaksi. Tabung reaksi
LB positif yaitu 3 tabung 5 ml dan 3 tabung 9 ml. dan 2 tabung 9,9 ml

2) Tes Penegasan (Pada Media BGLB)

• Cara Pembuatan Media BGLB

a) Timbanglah media BGLB yang telah di hitung
b) Tambahkan aquadest sesuai dengan yang dibutuhkan
c) Panaskan media diatas kompor sampai mendidih, angkat
d) Tutup dengan almunium foil
e) Kemudian sterilkan dengan oven pada suhu 110°C selama 15 menit, kemudian
diinginkan
f) Tuang media BGLB ke dalam petridish

• Cara Penanaman Ke Media BGLB

a) Hitunglah media BGLB (40gr/L) sesuai dengan perhitungan
b) Kemudian tambahkan aquadest sesuai dengan kebutuhan
c) Masukkan media BGLB sebanyak 5ml pada masing-masing tabung yang telah di
beri tabung durham, dengan membuat dua rangkap untuk coliform dan colitinja
d) Kemudian bolak-balik tabung durham sampai tidak terdapat gelembung
e) Tutup dengan kapas, kemudian sterilkan pada oven
f) Tunggu sampai dingin kemudian pindahkandengan menggunakan ose sesuai
dengan tabung yang positif
g) Masukkan ke dalam inqubator Untuk coliform di inkubator pada suhu 37 °C
selama 2x24 jam Untuk colitinja di inkubator pada suhu 45 °C selama 1x24 jam