Lihat diskusi, statistik, dan profil penulis untuk publikasi ini di: https://www.researchgate.net/publication/258163229
KUTIPAN BACA
13 283
3 penulis:
Steven Pratt
Universitas Queensland
LIHAT PROFIL
Beberapa penulis publikasi ini juga sedang mengerjakan proyek terkait berikut:
Semua konten setelah halaman ini diunggah oleh Philip Keymer pada tanggal 25 November 2014.
Diterima: 16 Mei 2013 /Direvisi dan diterima: 3 September 2013 /Diterbitkan online: 19 Oktober 2013
# Sains Springer+Media Bisnis Dordrecht 2013
Abstrak Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan model pH dan konsentrasi karbon anorganik total (TIC). Model ini mengandalkan
generik yang dapat memprediksi aktivitas fotosintesis alga sebagai fungsi pH dan TIC—variabel-variabel ini mudah diukur dalam kultur pertumbuhan
dari total karbon anorganik dan pH, yang akan membantu dalam desain alga (dibandingkan dengan pengukuran masing-masing spesies karbon).
dan pengoperasian sistem budidaya alga. Hal ini penting karena Memiliki model seperti itu akan membantu dalam memprediksi dan
ketersediaan karbon anorganik memainkan peran penting dalam memahami keterbatasan karbon dalam pertumbuhan alga dan sistem
pertumbuhan alga dan akumulasi produk, dan dalam praktiknya, pH tidak akumulasi bioproduk, karena ketersediaan karbon anorganik memainkan
konstan dalam budidaya alga. Oleh karena itu, model seperti itu akan peran penting dalam pertumbuhan alga dan pembentukan produk
membantu dalam memprediksi dan memahami keterbatasan karbon (Aishvarya et al. 2012; Singh dan Ahluwalia 2012 ) . Model ini mengacu
dalam pertumbuhan alga dan sistem akumulasi produk. Model ini pada hubungan kimia karbon anorganik yang bergantung pada pH.
didasarkan pada penelitian yang telah dipublikasikan mengenai serapan Hingga saat ini, belum ada model yang menggambarkan laju produksi
karbon anorganik dalam sistem alga alami dan memperluasnya hingga oksigen fotosintetik alga sebagai fungsi dari TIC dan pH. Penelitian
secara sistematis memperhitungkan pH yang luas dan rentang total sebelumnya telah menunjukkan bahwa model sumatif Monod untuk
karbon anorganik. Studi ini mengembangkan dan memvalidasi model karbon dioksida (CO2) dan bikarbonat (HCO3 ÿ ) dapat digunakan untuk
sederhana yang mengintegrasikan hubungan sumatif karbon dioksida menggambarkan laju produksi oksigen fotosintetik alga; namun, pengaruh
dan kinetik Monod bikarbonat dengan kimia kesetimbangan karbon pH belum diteliti lebih lanjut (Rost et al. 2006; Hansen et al. 2007; Schulz
organik. Ini adalah pertama kalinya laju produksi oksigen fotosintesis alga et al.
digambarkan sebagai fungsi dari total karbon anorganik dan pH. 2007; Trimborn dkk. 2008, 2009). Dalam praktiknya, pH kultur mikroalga
Model ini diuji berdasarkan data yang dipublikasikan dan eksperimental dapat bervariasi secara signifikan sepanjang hari; oleh karena itu, penting
pada rentang pH dan total karbon anorganik yang diperluas. Parameter untuk memasukkan parameter ini ke dalam pemodelan sistem tersebut
kinetik yang diestimasi oleh model sesuai dengan yang disajikan dalam (Zang et al. 2011; Craggs et al. 2012).
literatur. Alga Chlorella yang diuji dalam percobaan menunjukkan sedikit Dapat dipahami bahwa banyak mikroalga mengasimilasi anorganik
-
afinitas terhadap bikarbonat yang sesuai dengan pengamatan karbon sebagai CO2 dan HCO3 sebagai bagian dari mekanisme
sebelumnya untuk alga ini. konsentrasi karbon (CCM) (Wang et al. 2011; Gardner et al. 2012), dan
bahwa CCM ini telah berkembang sebagai respons evolusioner terhadap
Kata kunci pH. Keterbatasan pertumbuhan. Mikroalga. penurunan karbon dalam jangka panjang. tingkat CO2 di atmosfer dan
Total karbon anorganik. TIK peningkatan O2 (Giordano dkk. 2005). CCM alga bertanggung jawab
untuk mencapai konsentrasi CO2 internal yang tinggi untuk menghindari
penghambatan oleh oksigen (O2), yang bersaing dengan CO2 untuk
Perkenalan mendapatkan situs aktif kompleks Rubisco. Mekanisme ini dapat
mencakup difusi CO2 ke sel alga, transpor aktif CO2 dan/atau HCO3 ÿ
-
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan model yang dapat dan konversi eksternal HCO3 CO2 oleh karbonat anhidrase sebelum ke
asimilasi (Colman et al.
menggambarkan tingkat pertumbuhan fotosintesis alga dalam kondisi stabil di berbagai wilayah
2002). Mekanisme alga mengasimilasi karbon anorganik bervariasi
berdasarkan spesies alga, dan setiap alga memiliki satu atau lebih
PC Keymer : PA Lant : S.Pratt (*)
mekanisme asimilasi (Raven et al. 2005). pH merupakan
Fakultas Teknik Kimia, Universitas Queensland, Brisbane, QLD
4072, Australia email: komponen penting dari sistem buffering bikarbonat dan mempunyai
s.pratt@uq.edu.au pengaruh langsung terhadap spesies anorganik
Machine Translated by Google
karbon tersedia untuk mikroalga. Beberapa penelitian telah melaporkan kesetimbangan kimia selama fotosintesis keadaan tunak, sebagai laju
tingkat pH yang tinggi (sampai sekitar pH 11) dalam studi pertumbuhan alga fotosintesis konsumsi CO2 (1,7×10ÿ7 molCO2 galgaeÿ1 s dibandingkan
ÿ1
massal (Moheimani dan Borowitzka 2007; Briassoulis et al. 2010; Wang et al. langkah pembatas ) beberapa kali lipat lebih lambat
2012); namun, hanya sedikit penelitian yang melaporkan kinetika asimilasi laju dalam sistem penyangga bikarbonat (rhy=23 sÿ1 ) (Keymer dkk. 2013)
karbon pada kondisi pH ini. Kesetimbangan kelimpahan spesies karbon (CO2 ditentukan berdasarkan
* 2ÿ
Saat ini, hanya satu penelitian yang menunjukkan pengaruh variasi pH melebihi kimia kesetimbangan bikarbonat yang , HCO3 ÿ dan CO3 ) adalah
kisaran 7,8 hingga 8,9 terhadap kinetika asimilasi karbon mikroalga pada alga. dijelaskan oleh Persamaan 1 dan 2.
Hansen dkk. (2007) menunjukkan bahwa peningkatan pH memang berdampak
buruk pada pertumbuhan tiga alga dinoflagellata, dan mendalilkan bahwa pH,
rhy rc1
selain mempengaruhi konsentrasi spesies karbon anorganik dan juga CO2ðÞþ d H2O ÿ H2CO3 ÿ Hþ þ HCOÿ 3 ð1Þ
tetap) untuk asimilasi CO2 dan HCO3 ÿ oleh mikroalga dengan menggunakan rc1
BERSAMA ÿ Hþ þ HCOÿ þ H2O3 ð3Þ
spektrometer massa saluran masuk membran (MIMS) dan pengukuran TIC. 2
Model ini mengasumsikan kinetika Monod berdasarkan tiga variabel total ¼ rCO þ rHCO ð7Þ
2 3
bugar. Dua variabel bebasnya adalah pH dan TIC (diukur sebagai total karbon
anorganik yang relevan untuk kimia keseimbangan bikarbonat) yang dimana, rtotal adalah laju keseluruhan produksi oksigen fotosintesis yang
menentukan variabel ketiga (tergantung), yaitu laju produksi oksigen diamati, rCO2 adalah laju yang dihasilkan dari keberadaan
fotosintetik bersih. Diasumsikan bahwa spesies karbon dalam budidaya alga CO2 dan rHCO adalah
3
laju yang dihasilkan dari keberadaan
-
telah terbentuk HCO3 . Perhatikan bahwa tidak ada istilah Monod untuk CO32ÿ karena tidak ada alga
Machine Translated by Google
afinitas untuk substrat ini telah dibuktikan (Wang et al. HCO3 ÿ konsentrasi, TIC dihitung sebagai jumlah dari
2011). Hubungan Monod individu diberikan dalam Persamaan. 8 kedua spesies (membalikkan prosedur yang digunakan untuk memperoleh
dan 9. HCO3 ÿ konsentrasi). PH yang digunakan dari literatur adalah
pH buffer seperti yang disediakan dalam literatur (karenanya masing-masing
CCO2
rCO2 ¼ maks CO ð8Þ kumpulan data literatur memiliki pH konstan).
2
KCO 2 þ CCO
2 Estimasi parameter dilakukan untuk menentukan rmaxCO2 ,
untuk setiap kumpulan data yang dikumpulkan.
rmaxHCOÿ3 , KCO2 dan KHCOÿ 3
CH3CO3
rHCO3 ¼ maks HCO ð9Þ Alat pemasangan kurva MATLAB digunakan untuk parameter
3
KHCO 3 þ CH3CO
3 estimasi menggunakan metode kuadrat terkecil nonlinier (algoritma wilayah
kepercayaan) dengan toleransi 10ÿ6 dan batas bawah 0
dan rmaxHCO
dimana rmax CO2 adalah laju maksimum yang dapat dicapai untuk CO2 untuk setiap parameter. Estimasi parameter dari
3
dan HCO3 ÿ substrat, masing-masing, CCO2 dan kumpulan data yang diperoleh dari literatur dibandingkan dengan parameter
-
adalah konsentrasi CO2 dan HCO3 , masing-masing disajikan dalam studi literatur.
CH3CO3
ly, dan KCO2 dan KHCO adalah setengah kecepatan Monod Untuk menguji model pada rentang pH dan TIC yang lebih luas,
3
-
konstanta untuk CO2 dan HCO3 , masing-masing. kumpulan data lain diperoleh secara eksperimental melalui prosedur
dan CH3COÿ dengan fungsi pH dan TIC, model keseluruhan diikuti untuk menentukan parameter kinetik untuk
3
kumpulan data eksperimen seperti yang dijelaskan untuk data literatur
ekspresi diperoleh seperti yang ditunjukkan oleh Persamaan. 10.
set.
2
10pH
CTIC ÿ Pendekatan eksperimental
rtotal ¼ rmax CO 2 2
10pH
KCO 2 þ CTIC ÿ
Sistem pertumbuhan alga yang digunakan dalam penelitian ini adalah ESOC,
sebelumnya dijelaskan oleh Keymer et al., (2013). ESOC adalah
digunakan karena kemampuannya untuk mempertahankan kondisi DO yang stabil sementara
ð Þ K1 10pH mengukur laju produksi oksigen fotosintesis. Gambar 2
CTIC ÿ
þ maks HCO ð10Þ menunjukkan representasi ESOC dan komponen utamanya.
3
Þ K1 10pH ð Prinsip utama ESOC adalah mereduksi oksigen
KHCO 3 þ CTIC ÿ
diproduksi oleh alga menjadi air di katoda. Pengurangan ini
reaksi berfungsi untuk mengontrol DO dalam budaya alga dan
2
dimana ÿ ¼ 10pH ; Dan memungkinkan kuantifikasi produksi oksigen fotosintesis, dengan mengukur
þ ð Þ K1 10pH þ ð Þ K1ð Þ K2
arus yang melewati listrik
K1 ¼ 4:45 10ÿ7 sirkuit, ketika sistem berada pada DO stabil. Ferrisianida/
ferosianida (1 L, 10 mM kalium ferosianida, Merck)
K2 ¼ 4:68 10ÿ11
pasangan redoks digunakan untuk mengaktifkan reaksi oksidasi pada
anoda ESOC dan menyediakan elektron untuk reduksi
reaksi di katoda. ESOC dijalankan dengan stabil
koleksi data dan analisis konsentrasi oksigen terlarut 9,5 mg Lÿ1 karena ini adalah satu set
titik di mana sistem produksi biomassa alga akan terjadi
Prosedur pengumpulan dan analisis data dirangkum dalam biasanya beroperasi untuk menghindari penghambatan fotosintesis sebagai
Gambar 1. Beberapa kumpulan data digunakan untuk menguji model, termasuk akibat dari akumulasi O2 (Keymer et al. 2013). Satu
kumpulan data yang diperoleh dengan mengekstraksi data dari sebelumnya Perlu dicatat bahwa ESOC hanya mempertimbangkan produksi
literatur yang diterbitkan. Kumpulan data dari Rost dkk. (2006) dan oksigen sebagai konsekuensi dari aktivitas fotosintesis alga dan
Trimborn dkk. (2009) termasuk CO2 mentah (diukur dengan tidak mencoba menyimpulkan bentuk laju fiksasi karbon dioksida
MIMS) dan HCO3 ÿ (dihitung sebagai selisih antara hasil ini. Hal ini sangat penting ketika mempertimbangkan
TIC dan MIMS juga mengukur konsentrasi CO2 sumber nitrogen disuplai ke mikroalga karena memiliki hubungan langsung
data kinetik yang digunakan untuk perbandingan terhadap berdampak pada hasil fotosintesis (arah reduksi nitrat
nilai prediksi model. Kumpulan data dari Mercado et al. terhadap pelepasan CO2 ) (Cramer dan Mayers 1948).
(1998) tidak memasukkan parameter kinetik apa pun dan hanya Lima putaran terpisah dilakukan masing-masing pada awal yang berbeda
memasukkan konsentrasi TIC. CO2 , HCO3 ÿ dan data TIC pH berkisar antara 6,5 hingga 10,5. Sistem ini awalnya di-sparged
diekstraksi secara grafis menggunakan paket perangkat lunak ImageJ dengan campuran gas nitrogen/oksigen selama 30 menit sebelum percobaan
(Abràmoff dkk. 2004). Untuk kumpulan data termasuk CO2 dan untuk menghilangkan karbon anorganik sebanyak mungkin.
Machine Translated by Google
Gambar 1 Ringkasan
prosedur pengumpulan data dan
analisis data yang dilakukan
Natrium bikarbonat ditambahkan ke kultur alga pada interval 90 menit untuk alga diencerkan dengan buffer untuk mencapai konsentrasi biomassa awal
meningkatkan konsentrasi TIC (1, 5, 10, 20, 40 mmol Lÿ1 ). Setiap sekitar 0,25 g Lÿ1 sebelum ditambahkan ke ESOC (volume kerja kultur
penambahan natrium bikarbonat dilanjutkan dengan pengukuran pH dan alga sebesar 710 cm3 ). Kultur dijalankan pada konsentrasi alga yang
pengambilan sampel untuk analisis TIC setelah 30 menit, dan langsung rendah untuk menghindari saling menaungi alga. Kultur disinari oleh
dilanjutkan dengan pengukuran ESOC selama 60 menit. Diakui bahwa sepasang tabung fluoresen 18 W (Osram, 18 W/840) dan diatur untuk
pengumpulan data bergantung pada sistem yang memiliki buffer yang mencapai rasio area dan volume yang diterangi sebesar 18 m2 /m3 baik
baik, sehingga dapat menghindari fluktuasi pH akibat pengurangan nitrat dalam wadah pertumbuhan pra-kultur maupun eksperimental. Fotoperiode
serta proses fisiologis lainnya. yang digunakan adalah siklus terang-gelap 12:12 jam pada intensitas
cahaya 100 mol foton mÿ2 s (setara PAR), yang diukur pada permukaan
ÿ1
kultur dengan pengukur cahaya portabel (840020C, Sper Scientific Ltd. ,
Budaya alga AS). Media pertumbuhan disangga dengan buffer HEPES 20 mM yang
disuplai dengan nutrisi pertumbuhan alga f/2 (Varicon aqua solution, UK)
Kultur alga hijau non-axenic yang diidentifikasi sebagai Chlorella telah dan natrium bikarbonat sebagai sumber karbon. Stok konsentrat f/2
dikultur sebelumnya dalam labu Erlenmeyer 2 L pada pH 9-10 yang diangin-
anginkan dengan udara selama 2 minggu sebelum digunakan dalam ESOC. Itu
Machine Translated by Google
(100 mg mLÿ1 ) digunakan untuk mempertahankan kekuatan penuh f/2 medium Sampel alga dikumpulkan sebelum dan sesudah masing-masing
konsentrasi dalam budaya alga dan dipasok secara teratur percobaan untuk mengukur perubahan biomassa. Berat kering
interval (3 hari) (Guillard dan Ryther 1962). ditentukan secara gravimetri dengan menyaring 20 mL kultur
Tabel 1 Perbandingan parameter kinetik prediksi model dan parameter kinetik yang dipublikasikan sebelumnya dari studi oleh Mercado et al. (1998), Rost
dkk. (2006) dan Trimborn dkk. (2009)
Jenis KCO2 rmax CO2 KHCO3 rmax HCO3 R2 KCO2 rmax CO2 KHCO3 rmax HCO3
Phaeocystis globosa R-Hal 7.2 2.8 320 2.9 0,94 4.4 2.4 180 3.2
Skeletonema costatum R-Sc 8.9 2.8 400 4.8 0,93 6.0 2.1 260 4.6
Tabel 2 Estimasi
Perkiraan Parameter 95 %
parameter model untuk
Interval
kumpulan data eksperimen
kepercayaan
maksimal CO2
5.9 5.1–6.7
0 –
KHCO3
Exp-ph6
Exp-ph7
Exp-ph8 dengan menyuntikkan filter (filter yang digerakkan dengan jarum suntik
Exp-ph9
Exp-ph10 polietersulfon Millex-GP 0,45 ÿm) 250 ÿL sampel ke dalam larutan
M-Kr
M-Ca asam fosfat 2,6 M dari mana karbon dioksida yang terbentuk
M-Pi
R-eh dihilangkan dan dideteksi dengan detektor inframerah dekat dalam
R-Hal
R-Sc aliran oksigen (160 mL mntÿ1 ).
T-ez
T-Sc
T-Tn
metode analitis Kesesuaian untuk nilai prediksi (R2 ) seperti yang ditunjukkan pada
Tabel 1 menunjukkan bahwa model tersebut dapat secara efektif
Total karbon anorganik (TIC) diukur pada Total memperkirakan laju fotosintesis alga untuk TIC dan pH yang diketahui.
Alat Analisis Karbon Organik (Analytic Jena multi N/C 2100S) Saat membandingkan parameter kinetik yang ditentukan oleh model dan parameter tersebu
diterbitkan sebelumnya (Tabel 1), semuanya memiliki nilai yang sama tingkat pada kisaran pH dan TIC yang lebih luas untuk kumpulan data
-
ketika mempertimbangkan rentang pengukuran CO2 dan HCO3 adalah eksperimental.
(deviasi agregat maksimum sebesar 29 % dari parameter literatur). Memiliki model seperti itu akan sangat berguna untuk desain dan
pengoperasian sistem produksi massal alga, karena model ini memberikan
Untuk lebih memahami keluaran model, Gambar 4 diplot untuk hubungan yang dapat ditentukan dari parameter yang relatif mudah diukur
memvisualisasikan permukaan model, kita dapat mengharapkan rentang (pH dan TIC). Model ini dapat membantu mengoptimalkan takaran karbon
nilai pH dan TIC (nilai K dan rmax untuk Mercado et al. (1998) Data anorganik dan membantu menentukan kisaran pH optimal untuk
Cladophora rupestris set yang digunakan). pengoperasian. Spesies alga yang digunakan dalam penelitian
Model ini menunjukkan respons tipe orde pertama karena TIC meningkat eksperimental menunjukkan afinitas HCO3 ÿ yang dapat diabaikan , hal
sementara penurunan pH memberikan respons yang lebih lambat dan laju ini sesuai dengan penelitian sebelumnya yang dilakukan dengan alga ini.
maksimum berkurang. Hal ini konsisten dengan penelitian lain yang
Raso S, van Genugten B, Vermuë M, Wijffels RH (2012) Pengaruh konsentrasi Sousa C, de Winter L, Janssen M, Vermuë MH, Wijffels RH (2012)
oksigen terhadap pertumbuhan Nannochloropsis sp. pada intensitas Pertumbuhan mikroalga Neochloris oleoabundans pada tekanan
cahaya rendah. J Menerapkan Fiko 24:863–871 oksigen parsial tinggi dan intensitas cahaya sub-saturasi. Bioresour
Raven JA, Ball LA, Beardall J, Giordano M, Maberly SC (2005) Alga tidak Technol
memiliki mekanisme pemekatan karbon. Can J Bot 89:879–890 Rost 104:565–570 Trimborn S, Lundholm N, Thoms S, Richter KU, Krock B,
B, Riebesell U, Siiltemeyer D (2006) Akuisisi karbon fitoplankton laut: Hansen PJ, Rost B (2008) Akuisisi karbon anorganik pada diatom yang
pengaruh panjang fotoperiode. Limnol Oceanogr 51: 12–20 berpotensi toksik dan tidak toksik: pengaruh perubahan yang disebabkan
oleh pH dalam kimia karbonat air laut. Tumbuhan Fisiol 133:92–105
Rotatore C, Colman B (1991a) Lokalisasi transpor karbon anorganik aktif
pada membran plasma di Chlorella ellipsoidea. Trimborn S, Wolf-Gladrow D, Richter KU, Rost B (2009) Pengaruh pCO2
Can J Bot 69:1025–1031 terhadap perolehan karbon dan asimilasi intraseluler pada empat
Rotatore C, Colman B (1991b) Penyerapan aktif karbon dioksida oleh alga diatom laut. J Exp Mar Biol Ecol 376:26–36 Wang
hijau uniseluler Chlorella sacharophila dan C. ellipsoidea. Lingkungan Y, Duanmu D, Spalding MH (2011) Mekanisme konsentrasi karbon dioksida
Sel Tumbuhan 14:371–375 di Chlamydomonas reinhardtii: trans port karbon anorganik dan
Schulz KG, Rost B, Burkhardt S, Riebesell U, Thoms S, Wolf-Gladrow DA penangkapan kembali CO2. Fotosintesis Res 109:115–
(2007) Pengaruh ketersediaan besi terhadap regulasi perolehan karbon 122 Wang B, Lan CQ, Horsman M (2012) Fotobioreaktor tertutup untuk
anorganik di coccolithophore Emiliania huxleyi dan pentingnya produksi biomassa mikroalga. Bioteknologi Adv 30:904–
kompartementasi seluler untuk fraksinasi isotop karbon yang stabil . 912
Geochim Cosmochim Acta 71:5301– Zang C, Huang S, Wu M, Du S, Scholz M, Gao F, Lin C, Guo Y, Dong Y
5312 (2011) Perbandingan hubungan antara ph, oksigen terlarut dan klorofil
Singh UB, Ahluwalia AS (2012) Mikroalga: alat yang menjanjikan untuk a untuk perairan budidaya dan non budidaya. Jajak Pendapat Air Udara
penyerapan karbon. Mitig Adaptasi Strategi Glob Chang 18:73–95 Tanah 219:157–174