DIAGNOSIS FILARIASIS

DR. YENNY DJUARDI, PHD, SP.PAR.K

PROF. DR. DRA. TANIAWATI SUPALI
PELATIHAN PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS FILARIASIS
JAKARTA, 14 FEBRUARI 2023
 UJI DIAGNOSTIK UNTUK TRANSMISSION
ASSESSMENT SURVEY (TAS)

❑ DAERAH ENDEMIK W. BANCROFTI: FILARIASIS TEST STRIP (FTS)

❑ DAERAH ENDEMIK BRUGIA SPP.: DARAH TEBAL MALAM HARI

❑ DAERAH KOENDEMIK W. BANCROFTI DAN BRUGIA SPP.: DARAH

TEBAL MALAM HARI
 UJI DIAGNOSTIK UNTUK TAS

Uji Target deteksi

Apus darah Microfilaria

FTS Antigen filaria

 PENANGANAN BAHAN KLINIK

• JENIS BAHAN KLINIK

• PENGAMBILAN BAHAN KLINIK
• PEMBUATAN SEDIAAN DARAH TEBAL
• PENGIRIMAN BAHAN KLINIK
• PENYIMPANAN BAHAN KLINIK
 JENIS BAHAN KLINIK

• DARAH SEGAR
• DARAH DENGAN ANTIKOAGULAN
- PREPARAT APUS DARAH TEBAL (EDTA/HEPARIN)
- TES SEROLOGI (EDTA/HEPARIN)
- TES MOLEKULAR DENGAN PCR (EDTA)
• PLASMA ATAU SERUM (DENGAN ATAU TANPA ANTI KOAGULAN)
 PENGAMBILAN BAHAN KLINIK

• DARAH TEPI (JARI): TENAGA MEDIS/PARAMEDIS, ANALIS, AWAM TERLATIH

(KADER)
• DARAH VENA: TENAGA MEDIS/PARAMEDIS, ANALIS
• WAKTU:
- MALAM HARI DI ATAS PK. 20.00, TERBAIK ANTARA PK. 22.00 – 02.00
(PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS) → SESUAI DENGAN PERIODISITAS
MIKROFILARIA (NOKTURNAL/SUB NOKTURNAL). DARAH JARI LEBIH BAIK
KARENA MIKROFILARIA TERKONSENTRASI DI PEMBULUH KAPILER PERIFER.
- KAPAN SAJA (PEMERIKSAAN SEROLOGI, PCR)
 PENGAMBILAN DARAH JARI
Alat dan bahan: lancet, kapas alkohol, kapas kering, kaca obyek,
plastik sampah medis, kontainer lancet bekas, sarung tangan non steril.

Sumber: WHO
 PENGAMBILAN DARAH JARI
Persiapan pasien: berdiri dengan posisi
jari lebih rendah dari siku (darah mengalir
lebih banyak), tenangkan pasien bila
tegang/takut

Telapak tangan menghadap ke Urut jari secara perlahan ke arah

atas ujung untuk membantu darah
Pilih jari tengah atau manis, mengalir
Bagian kulit yang lembut
Sumber: WHO
 PENGAMBILAN DARAH JARI

Bersihkan bagian ujung jari Pegang jari dan tusukkan

yang akan ditusuk dengan lancet pada ujung jari yang
kapas alkohol, mulai dari telah dibersihkan
bagian tengah keluar.
Diamkan hingga kering

Buka tutup lanset biru

dengan memutar tutup
 PENGAMBILAN DARAH JARI

Buang tetesan pertama Ambil spesimen darah dengan

dengan kapas kering mikropipet sebanyak 60 ul.
 PENGAMBILAN DARAH JARI

Tekan ujung jari yang Buang sampah medis pada

ditusuk dengan tempatnya
kapas/kasa kering
PENGAMBILAN DARAH DENGAN TABUNG KAPILER
DENGAN ANTIKOAGULAN

TABUNG KAPILER DIBAGI 3 BAGIAN (1

TABUNG KAPILER BERISI 75 UL)
ASUMSIKAN TIAP BAGIAN INI AKAN TETESKAN
DARAH 20 UL.
SETELAH SELESAI DITETESKAN, AKAN ADA SISA
DARAH PADA UJUNG TABUNG KAPILER,
BIARKAN (JANGAN TIUP TABUNG KAPILER)
Bila tidak dikerjakan langsung di tempat maka dibutuhkan tabung
kolektor dengan antikoagulan untuk mengumpulkan darah dan
dibawa ke laboratorium
Microtainer dengan kapiler
Microtainer 0.5 ml dan
lancet BD®

Steril, sekali Mikropipet 20ul Tip kuning

pakai, contact-
activated lancet
BD®
 PEMBUATAN SEDIAAN DARAH TEBAL
FILARIASIS
SIAPKAN LARUTAN GIEMSA:
1. BUAT LARUTAN BUFFER PH 7 : MELARUTKAN 1
TABLET BUFFER FORTE KEDALAM 1000 ML AIR
JERNIH DAN BERSIH. PENGGANTI LARUTAN BUFFER : AIR
MINERAL/AQUA PH 7. PENGUJIAN PH AIR MENGGUNAKAN
KERTAS LAKMUS
3. LARUTAN KERJA GIEMSA: 1 ML GIEMSA STOK DITAMBAHKAN
DENGAN 19 ML LARUTAN BUFFER/AIR AQUA UNTUK
PEWARNAAN SELAMA 20 MENIT. ATAU 1 ML GIEMSA STOK
DITAMBAH 14 ML AIR UNTUK PEWARNAAN 15 MENIT.
 PENGUJIAN KUALITAS GIEMSA

• DENGAN KERTAS LAKMUS UTK STOK GIEMSA MAUPUN LARUTAN

GIEMSA SIAP PAKAI
• YG BAGUS BILA WARNA 1/3 MERAH, SISANYA BIRU. BILA >1/3 MAKA
PEWARNAAN AKAN MERAH SEMUA (JADI MASALAH SAAT
IDENTIFIKASI B. MALAYI KARENA ADA SARUNG YANG SEHARUSNYA
TERWARNAI MERAH). BILA SEMUA BAGIAN LAKMUS BIRU MAKA
PEWARNAAN JADI BIRU SEMUA
• LABEL KACA BENDA - DIBERI LABEL
IDENTITAS YANG TAHAN AIR/TIDAK
MUDAH LUNTUR

• BERSIHKAN KACA BENDA DENGAN

ALKOHOL SWAB (BEBAS DARI SERAT
DAN RESIDU MINYAK)

• SIAPKAN MIKROPIPET PADA 20 UL

KOCOK PELAN TABUNG LALU AMBIL 20
MIKROLITER DARAH

TETESKAN DARAH PADA KACA BENDA

BENTUK TIGA GARIS TEBAL DARAH TEBAL

SEJAJAR SEPANJANG KACA BENDA,
TANPA MEMBENTUK GELEMBUNG UDARA
GARIS DARAH DAPAT DIBUAT
DARI TUTUP LANSET

HINDARI ADANYA
GELEMBUNG UDARA PADA
GARIS DARAH
CONTOH GARIS YANG KURANG RATA ATAU
TERLALU PANJANG
 SEDIAAN DARAH TEBAL FILARIASIS

POLA 3 GARIS PADA KERTAS PUTIH

DAPAT DIGUNAKAN UNTUK
MEMBUAT GARIS YANG RAPI
 SEDIAAN DARAH TEBAL FILARIASIS
5. SEDIAAN DIKERINGKAN DI SUHU RUANGAN. JAGA DARI DEBU
DAN SERANGGA

6. SEDIAAN YANG TELAH KERING DAPAT DISIMPAN SEMENTARA DI

BUKU PREPARAT

DARAH tanpa antikoagulan: dapat langsung diwarnai,

dengan antikoagulan: diwarnai 2-3 hari kemudian
SEDIAAN DARAH TEBAL FILARIASIS

6. DARAH PADA KACA BENDA:

LISISKAN DENGAN MENETESKAN AIR AKUA DI ATAS SEDIAAN DARAH SELAMA ~

5 MENIT, HINGGA WARNA MERAH DARAH MEMUDAR

7. BUANG CAIRAN PADA SEDIAAN DARAH DAN PREPARAT DIKERING-ANGINKAN

8. FIKSASI DENGAN METANOL 1-2 MENIT (TETESAN MERATA

PADA SELURUH SEDIAAN DARAH), BUANG KELEBIHAN CAIRAN DAN KERINGKAN

9. WARNAI DENGAN GIEMSA SELAMA 15 ATAU 20 MENIT (TERGANTUNG KONSENTRASI

LARUTAN KERJA)

10. CUCI DENGAN CARA MENGALIRKAN AIR PADA SEDIAAN DAN KERINGKAN PADA

SUHU RUANGAN

11. PERIKSA DI BAWAH MIKROSKOP DENGAN PEMBESARAN 10X DAN 40X

 KUALITAS SEDIAAN YANG DAPAT
BERPENGARUH PADA PEMBACAAN
• SEDIAAN TERLALU TEBAL, ADA GELEMBUNG UDARA/ KOTORAN,
SEBAGIAN SEDIAAN HILANG
• KUALITAS GIEMSA STOK (TGL KADALUARSA, KONDISI PENYIMPANAN
GIEMSA STOK)
• KUALITAS AIR (PH)
• LAMA PEWARNAAN, DISESUAIKAN DENGAN KONSENTRASI GIEMSA
• KACA BENDA YANG KOTOR MISAL TERSENTUH JARI TANGAN BERLEMAK
• DARAH DENGAN ANTIKOAGULAN YANG BELUM CUKUP KERING
SEDIAAN YANG BAIK VS BURUK
CARA MENULISKAN HASIL
PEMERIKSAAN
 CARA MENGHITUNG JUMLAH MIKROFILARIA

• PEMBACAAN DIMULAI DARI UJUNG KANAN ATAU KIRI SEDIAAN DARAH,

SECARA HORIZONTAL HINGGA KE UJUNG SATUNYA, LALU BERPINDAH KE
BAWAH
• PADA SAAT PERPINDAHAN, GUNAKAN PENANDA BERUPA SEL DARAH ATAU
DEBRIS PADA BAGIAN TENGAH LAPANG PANDANG TERAKHIR (SILANG
PADA GAMBAR) UNTUK BERPINDAH KE BARIS BERIKUTNYA
• HITUNG MIKROFILARIA DALAM 1 ML.
• CONTOH: 20 MF/60 UL
20X1000/60 ATAU 20 X 17 (FAKTOR PENGALI)
→ 340 MF/ML
 AKURASI PENGHITUNGAN JUMLAH
MIKROFILARIA
• TETAPKAN ARAH PENGHITUNGAN, BOLEH ATAS-BAWAH ATAU KIRI-
KANAN

• PERHATIKAN PERPINDAHAN LAPANG PANDANG, TENTUKAN PENANDA

• TETAPKAN KONSENSUS UNTUK MIKROFILARIA YANG MELEWATI

BATAS, MISALKAN DIHITUNG BILA >50% BAGIAN TUBUH YANG
MELEWATI
 PENGIRIMAN BAHAN KLINIK
• PREPARAT DARAH TEBAL YANG TELAH KERING ATAU TELAH DIWARNAI
→ BOKS SLIDE PLASTIK. JANGAN DIKIRIM SEBAGAI BAGASI ATAU
KARGO (RISIKO PECAH!), BAWA KE KABIN

• PLASMA/SERUM: TABUNG SAMPEL DIMASUKKAN KE DALAM

KANTONG PLASTIK KLIP DENGAN LABEL, DIKIRIM DALAM BOKS
STYROFOAM DENGAN ES BATU DAN DISEGEL DENGAN BAIK.
 PENYIMPANAN BAHAN KLINIK

• PREPARAT DARAH TEBAL: SIMPAN DI SUHU RUANGAN, TEMPAT TEDUH

• SAMPEL PLASMA/SERUM: SIMPAN DI -20OC ATAU -80OC (JANGKA
LAMA)
 DETEKSI ANTIGEN FILARIA

DETEKSI ANTIGEN W. BANCROFTI DENGAN ENZYME-LINKED

IMMUNOASSAY (ELISA) ATAU IMMUNOCHROMATOGRAPHY
ASSAY DALAM BENTUK TES CEPAT (FILARIASIS TEST STRIP): LEBIH
SENSITIF DARIPADA MIKROSKOPIS DALAM MENDETEKSI
KEBERADAAN CACING DEWASA DALAM TUBUH PENDERITA
 ALERE/BIOLINE™ FILARIASIS TEST
STRIP
❑PENYIMPANAN – 2-37°C, TES TIDAK BOLEH DIBEKUKAN DAN TIDAK BOLEH
DIGUNAKAN SETELAH TANGGAL KADALUARSA

❑TRANSPORTASI – HINDARI PAPARAN TERHADAP PANAS SELAMA WAKTU

YANG LAMA. SAAT MEMBAWA TES DI LAPANGAN, TIDAK PERLU
MENGGUNAKAN COOL BOX.

❑ PENERANGAN – TES HARUS DIBACA DI BAWAH PENERANGAN MEMADAI

KARENA GARIS HALUS/LEMAH DAPAT SULIT TERBACA, KHUSUSNYA BILA
DIKERJAKAN PADA PADA MALAM HARI.
 CARA KERJA

Kit didiamkan dalam Isi kit (test strip, tray,

suhu ruang sebelum mikropipet 75 ul)
digunakan dikeluarkan dari
kemasan hanya
sesaat sebelum
digunakan
 CARA KERJA

Pegang bagian
Beri label sampel,
yang tidak ada
letakkan dalam wadah
tanda panah,
kecil yang disediakan
jangan menekan
(tray), label ikut menempel
bantalan sampel
pada tray untuk
mengamankan strip
 CARA KERJA

Ambil 75 ul darah Teteskan darah pada Tuliskan waktu pada

dengan memegang bagian bawah tray, pembacaan hasil
mikropipet sedikit lebih bantalan sampel dilakukan pada 10
tinggi dari bidang dengan menekan pipet menit setelah
horizontal. Jangan secara perlahan penambahan sampel,
menekan pipet saat hasil langsung ditulis
menyedot darah. pada label
PEMBACAAN DAN INTERPRETASI HASIL

Scoring (optional):
0 : negatif
1 : garis tes < kontrol
2 : garis tes = control
3 : garis tes > kontrol
PEMBACAAN dan INTERPRETASI hasil

Pembacaan hasil tidak Tidak ada garis Hanya garis tes

dilakukan bila sampel yang muncul yang muncul
tidak naik ke seluruh
bagian strip
• CARA PENGERJAAN (DALAM BAHASA INDONESIA):
HTTPS://YOUTU.BE/IJAV6DU1RVQ (WWW.NTDSUPPORT.ORG)
 QUALITY CONTROL
❑ PELATIHAN DILAKUKAN SEBELUM TAS UNTUK MEMASTIKAN SEMUA
PROSEDUR DILAKUKAN DENGAN BENAR

▪ KEMASAN HANYA DIBUKA SESAAT SEBELUM DIGUNAKAN

▪ CATAT NOMOR LOT/BATCH DARI KOTAK TES YANG
DIGUNAKAN

▪ TES DIAGNOSTIK DIUJI TERLEBIH DULU DENGAN KONTROL

POSITIF UNTUK MEMASTIKAN VALIDITAS TES.

▪ TES DIAGNOSTIK DISIMPAN DENGAN BAIK UNTUK

MEMINIMALISIR RISIKO PENURUNAN KUALITAS TES.

▪ HASIL TES YANG MERAGUKAN PERLU SEGERA DIBACA OLEH

PEMBACA KEDUA ATAU SUPERVISOR DAN BILA DIPERLUKAN TES
DIULANG.