PERTUMBUHAN MIKROBA

OLEH :
Kelompok 6
Mira Thania
Rafeah Tunnur Hasibuan
Rahmi Ridhayani
Tria Febrianti Pangestu
 Pertumbuhan mikroorganisme dapat ditinjau dari
dua sudut, yaitu : pertumbuhan individu dan
pertumbuhan koloni atau pertumbuhan populasi.
Pertumbuhan individu diartikan sebagai bertambahnya
ukuran tubuh, sedangkan pertumbuhan populasi
diartikan sebagai bertambahnya kuantitas individu
dalam suatu populasi atau bertambahnya ukuran koloni.
Kurva Pertumbuhan Mikroba
Pertumbuhan mikroorganisme dimulai dari awal
pertumbuhan sampai dengan berakhirnya aktivitas
merupakan proses bertahap yang dapat digambarkan
sebagai kurva pertumbuhan. Kurva pertumbuhan
mikroba terdiri dari 4 fase utama yaitu :
 Lag
 Eksponensial
 Stasioner
 kematian
 Fase Lag atau Adaptasi
Jika mikroba dipindahkan ke dalam suatu medium, mula-mula
akan mengalami fase adaptasi untuk menyesuaikan dengan
kondisi lingkungan di sekitarnya.

 Fase Log atau Pertumbuhan Eksponensial

Pada fase ini mikroba membelah dengan cepat dan konstan
mengikuti kurva logaritmik. Pada fase ini kecepatan
pertumbuhan sangat dipengaruhi oleh medium tempat
tumbuhnya seperti pH dan kandungan nutrient, juga kondisi
lingkungan termasuk suhu dan kelembaban udara.
Akhir fase log, kecepatan pertumbuhan populasi menurun
dikarenakan :
1 Nutrien di dalam medium sudah berkurang.
2 Adanya hasil metabolisme yang mungkin beracun atau dapat
menghambat pertumbuhan mikroba.
 Fase Stasioner
Pada fase ini jumlah populasi sel tetap karena jumlah sel yang
tumbuh sama dengan jumlah sel yang mati. Ukuran sel pada fase
ini menjadi lebih kecil karena sel tetap membelah meskipun zat-
zat nutrisi sudah habis. Pada fase ini sel-sel lebih tahan terhadap
keadaan ekstrim seperti panas, dingin, radiasi, dan bahan-bahan
kimia.

 Fase Kematian
Pada fase ini sebagian populasi mikroba mulai mengalami
kematian karena beberapa sebab yaitu:
1 Nutrien di dalam medium sudah habis.
2 Energi cadangan di dalam sel habis.
Kecepatan kematian bergantung pada kondisi nutrien,
lingkungan, dan jenis mikroba.
Menghitung Pertumbuhan Mikroba
 Metode pengukuran pertumbuhan mikroorganisme dapat dibedakan
menjadi metode langsung dan tidak langsung.
 Contoh metode langsung hitungan mikroskopik (menggunakan
hemositometer), digunakan untuk mengukur pertumbuhan bakteri pada
susu / vaksin dan hitungan cawan digunakan untuk mengukur
pertumbuhan bakteri susu, air, makanan, tanah, dan lain-lain.

 Contoh metode tidak langsung adalah sebagai berikut:

1. Berdasarkan kekeruhan, bila suspensi biakan cair & homogen

2. Berdasarkan berat kering sel, bila suspensi biakan kental & tidak
homogen
3. Berdasarkan kadar nitrogen, bila suspensi biakan kental & tidak homogen
4. Berdasarkan aktivitas biokimia, mengggunakan uji mikrobiologis.
Menghitung Jumlah Sel Secara Langsung
 Hitungan mikroskopik menggunakan ruang penghitung
hemositometer mempunyai kelebihan cepat dalam
pengerjaannya, tetapi mempunyai beberapa
kekurangannya, yaitu : tingkat kesalahan tinggi, sel mati
bisa terhitung, sel ukuran kecil sulit teramati. Metode ini
tidak sesuai untuk sel yang densitasnya rendah.
Menghitung secara Tidak Langsung dengan
Berat Kering
Metode tidak langsung melalui berat kering sel,
dilakukan dengan tahapansebagai berikut :
1. Menyaring/sentrifugasi massa sel
2. Mencuci dengan aquadest/buffer
3. Dikeringkan dalam oven, bila suhu 800C
memerlukan waktu 24 jam atau 1100C selama 8 jam
4. Kemudian ditimbang sehingga diperoleh berat
kering sel.
Pengaruh keterbatasan nutrisi

Nutrisi adalah substansi organik yang dibutuhkan

organisme untuk fungsi normal dari sistem tubuh,
pertumbuhan, pemeliharaan kesehatan.
Nutrisi didapatkan dari makanan dan cairan yang
selanjutnya diasimilasi oleh tubuh.
Unsur-unsur dasar yang diperlukan mikroba
adalah : karbon, nitrogen, hidrogen, oksigen,
sulfur, fosfor, zat besi dan sejumlah kecil logam
lainnya.
 Sumber Nutrisi yang Diperlukan Mikroba
1. Air
Air merupakan komponen utama sel mikroba dan medium.
Fungsi air adalah sebagai sumber oksigen untuk bahan organik sel
pada respirasi. Selain itu air berfungsi sebagai pelarut dan alat
pengangkut dalam metabolisme. Air merupakan bagian terbesar
dari sel, sebanyak 80-90%, dan bagian lain sebanyak 10-20% terdiri
dari protoplasma, dinding sel, lipida untuk cadangan makanan,
polisakarida, polifosfat, dan senyawa lain.
2. Sumber Energi
Ada beberapa sumber energi untuk mikroba yaitu senyawa organik
atau anorganik yang dapat dioksidasi. Berdasarkan sumber energi
mikroba dibedakan menjadi jasad fototrof yaitu mikroba yang
menggunakan bantuan energi cahaya dan jasad kemototrof yaitu
mikroba yang menggunakan energi dari reaksi kimia.
3. Sumber Karbon
Sumber karbon untuk mikroba dapat berbentuk senyawa
organik maupun anorganik. Senyawa organik meliputi
karbohidrat, lemak, protein, asam amino, asam organik, garam
asam organik, polialkohol, dan sebagainya. Senyawa anorganik
misalnya karbonat dan gas CO2 yang merupakan sumber karbon
utama terutama untuk tumbuhan tingkat tinggi.
4. Sumber Aseptor Elektron
Proses oksidasi biologi merupakan proses pengambilan dan
pemindahan elektron dari substrat. Karena elektron dalam sel
tidak berada dalam bentuk bebas, maka harus ada suatu zat yang
dapat menangkap elektron tersebut. Penangkap elektron ini
disebut aseptor elektron. Aseptor elektron ialah agensia
pengoksidasi. Pada mikroba yang dapat berfungsi sebagai
aseptor elektron ialah O2, senyawa organik, NO3-, NO2-, N2O,
SO4 =, CO2, dan Fe3+.
5. Sumber Mineral
Mineral merupakan bagian dari sel. Unsur penyusun
utama sel ialah C, O, N, H, dan P. unsur mineral lainnya yang
diperlukan sel ialah K, Ca, Mg, Na, S, Cl. Unsur mineral
yang digunakan dalam jumlah sangat sedikit ialah Fe, Mn,
Co, Cu, Bo, Zn, Mo, Al, Ni, Va, Sc, Si, Tu. Selain berfungsi
sebagai penyusun sel, unsur mineral juga berfungsi untuk
mengatur tekanan osmose, kadar ion H+ (kemasaman, pH),
dan potensial oksidasireduksi (redox potential) medium.
6. Faktor Tumbuh
Berdasarkan struktur dan fungsinya dalam metabolisme,
faktor tumbuh digolongkan menjadi asam amino sebagai
penyusun protein; base purin dan pirimidin sebagai penyusun
asam nukleat; dan vitamin sebagai gugus prostetis atau
bagian aktif dari enzim.
7. Sumber Nitrogen
Nitrogen merupakan komponen utama protein dan asam
nukleat, yaitu ± 10% dari berat kering sel bakteri. Jenis senyawa
nitrogen yang digunakan bakteri tergantung pada jenisnya.
Sumber nitrogen yang paling utama untuk mikroorganisme
adalah garam ammonium.
8. Interaksi Antar Mikroba Dalam Menggunakan Nutrien
Fenomena ini merupakan hasil interaksi metabolisme atau
interaksi dalam penggunaan nutrient yang dikenal sebagai
sintropisme atau sinergitik. Seperti bakteri penghasil metan
yang anaerob obligat tidak dapat menggunakan glukosa sebagai
substrat, tetapi bakteri tersebut akan segera tumbuh oleh adanya
hasil metabolisme bakteri anaerob lain yang dapat
menggunakan glukosa.
Ketiadaan atau kekurangan sumber-sumber nutrisi
ini dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroba
hingga pada akhirnya dapat menyebabkan
kematian. Kondisi tidak bersih dan higienis pada
lingkungan adalah kondisi yang menyediakan
sumber nutrisi bagi pertumbuhan mikroba
sehingga mikroba dapat tumbuh berkembang di
lingkungan seperti yang sesuai.
Kultur Kontinu (Kemostat dan Turbidostat)
Dalam kultivasi mikroba menggunakan teknik kultur
kontinyu/sinambung, mikroba ditumbuhkan secara terus menerus pada
fase paling optimum untuk fase pertumbuhan yaitu fase eksponensial
dimana sel membelah diri dengan laju yang konstan, massa menjadi
dua kali lipat mengikuti kurva logaritmik. Hal ini dilakukan dengan
memberi nutrisi secara terus menerus sehingga mikroba tidak pernah
kekurangan nutrisi.

Teknik kultur kontinyu cocok untuk diterapkan pada sistem produksi

metabolit sel mikroba yang tidak berpengaruh pada pertumbuhan
selnya itu sendiri. Untuk industri bioteknologi berkapasitas besar,
kultur kontinyu menghasilkan efisiensi produksi yang lebih tinggi
dibandingkan dengan kultur batch asalkan produk yang dihasilkan
tidak berpengaruh negatif terhadap mikroba penghasilnya.
Laju pertumbuhan spesifik dipengaruhi oleh perbandingan
antara laju aliran medium dan volume kultur disebut dengan
“Laju Dilusi (D)” dimana D = F/V
Keterangan:
F : Laju aliran
V : Volumea
D : Laju dilusi
 Gambar Teknik Kultivasi Kontinyu
 Kelebihan Kultur Kontinyu
 Produktivitas lebih tinggi, disebabkan lebih sedikit waktu persiapan bioreaktor persatuan
produk yang dihasilkan, laju pertumbuhan & konsentrasi sel dapat dikontrol, pemasokan
oksigen dan pembuangan panas dapat diatur. Dengan demikian hanya butuh pabrik lebih kecil
(pengurangan biaya  modal untuk fasilitas baru).
 Dapat dijalankan pada waktu yang lama.
 Cocok untuk proses yang kontaminasnya rendah dan produk yang berasosiasi dengan
pertumbuhan.
 Pemantauan dan pengendalian proses lebih sederhana.
 Tidak ada akumulasi produk yang menghambat.

Kelebihan Kultur Kontinyu

 Produktivitas lebih tinggi, disebabkan lebih sedikit waktu persiapan bioreaktor persatuan
produk yang dihasilkan, laju pertumbuhan & konsentrasi sel dapat dikontrol, pemasokan
oksigen dan pembuangan panas dapat diatur. Dengan demikian hanya butuh pabrik lebih kecil
(pengurangan biaya  modal untuk fasilitas baru).
 Dapat dijalankan pada waktu yang lama.
 Cocok untuk proses yang kontaminasnya rendah dan produk yang berasosiasi dengan
pertumbuhan.
 Pemantauan dan pengendalian proses lebih sederhana.
 Tidak ada akumulasi produk yang menghambat.
Kelemahan Kultur Kontinyu
Aliran umpan yang lama, resiko kontaminasi besar
(operasi harus hati-hati & desain peralatan lebih baik).
Peralatan untuk operasi dan pengendalian proses harus
biasa tetap bekerja baik untuk waktu yang lama.
Memerlukan mikroba dengan kestabilan genetik tinggi,
karena akan digunkan pada waktu yang lama
Khemostat
Teknik kultur kontinyu dengan cara kemostat
dilakukan dengan menambahnkan nutrien melalui
sebuah tangki sedemikian rupa sehingga komposisi
nutrient di dalam fermentor tempat kultivasi mikrobia
selalu dalam keadaan tetap.
Keterangan:
1.Reservoir of steril medium (fresh)
2.Flow rate regulator
3.Air inlet
4.Air filter
5.Passage for inoculation
6.Siphon and Overflow
7.Growth camber
8.Receptacle (wadah)
Turbidostat
Teknik kultivasi denga system turbidostat dilakukan
dengan menambahkan nutrient secara kontinyu
sehingga kerapatan sel selalu dalam keadaan tetap.
Dalam teknik turbidostat, aliran medium diatur
berdasarkan atas kerapatan optic kultur mikroba.
Keterangan
1.Reservoir of steril medium
2.Valve controling flow of medium
3.Outlet for spent medium
4.Foto sel
5.Sumber cahaya
6.Turbistat
Diskusi
1. Annisa anike putri : bagaimana kelebihan,
kekurangan dan prosedur kerja perhitungan tidak
langsung?
Tambahan: -
2. Moga sari mulya : apa penyebab kerusakan media
tumbuh sehingga mikroba tidak dapat tumbuh?
Tambahan: tiwi ilhami
3. Widya gusti : apakah semua sumber nutrisi
diperlukan dalam pertumbuhan mikroba?
Tambahan: aisa dalwita, indra putra