com
ANALISIS ANTIOKSIDAN
Abdul Rohman
Kimia Farmasi UGM
pengantar
Antioksidan sengaja ditambahkan untuk mencegah atau
menunda oksidasi lipid selama pemrosesan dan
penyimpanan lemak, minyak dan makanan yang
mengandung lipid dan telah digunakan oleh industri
makanan selama lebih dari 50 tahun.
Antioksidan berperan sebagai signifikan berperan dalam
memperlambat reaksi oksidasi lipid dalam produk
makanan.
Yang merugikan efek oksidasi lipid yang berlebihan seperti
pembentukan off-flavours dan senyawa kimia yang tidak
diinginkan (aldehida, keton dan asam organik, dll.), sudah
terkenal.
mekanisme aksi antioksidan
Pemulungan radikal
Agen pereduksi
Pengkelat logam
Lipid peroksidasi inhibisi
sinergis
Antioksidan
Alami
Vitamin C
Vitamin E
Sintetik
BHA
BHT
TBHQ
PG
Antioksidan alami
Antioksidan sintetik
Uji antioksidan
Uji aktivitas
Pengujian sistem linoleat,
Tes TBA (asam tio barbiturat),
Bilangan peroksida,
Menguji aktivitas antiradikal menggunakan DPPH
Penetapan kadar
Uji linoleat-tiosianat
Uji TBA: Reaksi antara TBA dan MDA
O O HS N OH
HC CH + 2
C N
H2
Malonaldehid
OH
Asam tiobarbiturat (TBA)
H+
SH
HO N
S N OH
N
H + 2H2O
N C
C C OH
H H
Produk kondensasi
Pengembangan produk sekunder
a) dari hidroperoksida asam linolenat b) dari radikal bebas 2-nonenal
OH
O
O
H H H
C CH C C
R1 C C C R2 2-nonenal
H H H H
O2
OH
O
O O
H H O
C CH C C
R1 C C C R2 2-nonenal
H H H H
O O H H
C C H
R1 + HC CH + HC C R2 C5H11 O HO C O
H
C C
H2 + H
Malonaldehid H H
O O
HC CH
C
H2
Malonaldehid
Uji DPPH
Absorbansi DPPH vs waktu operasional
IC50 nilai beberapa antioksidan
Metode analisis untuk penentuan AA
HPLC
Kromatografi gas
Kromatografi gas-spektrometri massa
Spektroskopi UV
Masalah untuk persiapan sampel
Ekstraksi fase padat
Ekstraksi cair-cair
Kromatografi cair kinerja tinggi
Persiapan sampel
kondisi HPLC
Kolom : A LiChrospher RP (panjang 250 mm x 4,0 mm,
ukuran partikel 5 m)
Fase gerak: Mode gradien yang terdiri dari ACN dan air
dengan asam asetat 1% yang divariasikan antara 30% dan
95% selama 5 menit, dan berlanjut hingga 100% dalam 4
menit (1,5 ml/ menit).
Deteksi : UV 280 nm
Hasil akurasi
Kromatografi Gas
kondisi GC
kolom: Paket Chrom CP-SIL 8CB megapori kolom
kapiler (30 mx 0,53 mm Indo., 1,5 m film ketebalan)
Gas pembawa : Helium pada a mengalir kecepatan 4
ml/menit.
Suhu oven diprogram pada 150 HaiC selama 1 menit,
dinaikkan menjadi 200 HaiC Pukul 7 HaiC/ menit, lalu
meningkat menjadi 300 HaiC pada 40 HaiC/menit, dan
akhirnya diadakan pada 300 HaiC selama 5 menit.
Port injeksi: 250 HaiC
Detektor: FID (290 HaiC)
IS : 8-quinolinol
kromatogram gas antioksidan. Puncak 1, 8-
quinolinol; 2, BHA; 3, BHT; 4, TBHQ.
Hasil: Analisis AA menggunakan GC
GC: Analisis vitamin C
kondisi GC
Kromatogram Asam askorbat
GC: vitamin E
Kromatografi Gas-Spektrometri Massa
Kondisi GC-MS
Kromatogram GC-MS
Spektroskopi