Sampel studi kromatografi ahli dan biologis yang mengandung Desomorphine

Abstrak sampel ahli dan biologis yang mengandung senyawa desomorphine dan seiring dipelajari oleh
kromatografi gas, kromatografi spektrometri massa dan kromatografi cair kinerja tinggi. Analoginya
beberapa sintetis dari desomorphine telah diidentifikasi, dan mereka kromatografi parameter dan massa
spektrum yang dijelaskan. Teknik untuk ekstraksi dan studi desomorphine dan didehydrodesomorphine
pada chromatograph cair Milichrom A-02 yang diuraikan. Informasi ini penting bagi ahli toksikologi
analitis dan criminalistics.

Dalam beberapa tahun terakhir, peningkatan drastis diamati dalam jumlah kasus-kasus penyalahgunaan
narkotika sintetis yang diproduksi oleh teknik kerajinan dari yang mengandung kodein obat-obatan.
Tablet tersedia biaya disediakan di dalam toko obat tanpa resep, seperti Codterpin, Codelac, Sedal-M, dll,
yang digunakan untuk sintesis. Jumlah kodein dalam obat-obatan yang dijadwalkan mg. Desomorphine
(5a-17-methyl-4,5-epoxymorphinan-3-ol) Diperoleh dari yang mengandung kodein tablet dengan
penggunaan yodium dan fosfor. Kekuatan dampak pada tubuh, senyawa ini secara signifikan melebihi
kodein.

Kasus gejala-gejala penarikan sintetis narkotika jenis ini terjadi di banyak wilayah Rusia. Desomorphine
termasuk dalam "Daftar narkotika, psikotropika zat dan prekursor Thereof, tunduk pada kontrol di
Federasi Rusia" [1]. Oleh karena itu, studi komprehensif ini senyawa dalam ahli bahan dan sampel
biologis merupakan masalah penting.

Ahli studi dengan diambil sampel yang mengandung desomorphine melibatkan kesulitan. Terutama,
kesulitan-kesulitan ini adalah karena kurangnya informasi tentang fitur analisa kimia dari senyawa ini dan
tidak adanya bahan referensi standar. Deskripsi produk sampingan yang mungkin dalam rantai
transformasi dari kodein untuk desomorphine pada kondisi yang berbeda sintesis mereka tidak dapat
ditemukan dalam literatur. Praktek ditunjukkan bahwa, di daerah yang berbeda, desomorphine disintesis
di bawah kondisi yang berbeda dan prosedur yang berbeda. Oleh karena itu, sampel dihasilkan berbeda
dari satu sama lain dalam konsentrasi desomorphine dan dalam komposisi produk reaksi seiring.

Oleh karena itu, tujuan karya ini adalah (i) untuk belajar komposisi komponen sampel yang mengandung
desomorphine dengan kromatografi gas dengan detektor massa-selektif (GC-MS) dan (ii) untuk
mengembangkan prosedur untuk penentuan desomorphine pada Milichrom A-02 cair chromatograph ahli
bahan dan cairan biologis tubuh manusia.

Informasi ini diperlukan untuk ahli dalam criminalistics dan analitis Toksikologi.

EKSPERIMENTAL

Instrumen dan prosedur. GC-MS analisis dilakukan pada chromatograph Agilent 6850 dengan Agilent
5973 massa-selektif detektor (Agilent Technologies). Kondisi kromatografi adalah sebagai berikut.

Modus 1. HP-SM5 kolom dengan diameter 0.35 mm dan panjang 30 mm; ketebalan film fase 0,33 mm.
gas pembawa, helium; laju aliran gas pembawa dalam kolom, 1.5 mL min. Splitless modus. C;Injector
suhu, 270 C;C untuk 1 min, berikutnya dengan tingkat 99 K/menit sampai dengan 100kolom suhu
pemrograman: langkah pertama, 50 C;C untuk 1 min, berikutnya dengan tingkat 15 K/menit sampai
dengan 280Langkah kedua, 100 C selama 20 menit;Langkah ketiga, 280 C.MSD antarmuka suhu, 280
Elektron dampak ionisasi dengan energi elektron 400 EV. Mode operasi MSD: scan penuh ion dari 40
untuk 450 amu (SCAN mode). Pengolahan data dibawa keluar pada kimia Stasiun ditingkatkan kepala
Stasiun G-1701 DA versi D.00.00.38. Spektrum massa diperoleh dibandingkan dengan perpustakaan
massa spectra (NIST-98 massa spektral perpustakaan disediakan dengan program pengolah instrumen)
dan diproses dengan program Amdis versi 2.1. GC-MS analisis dilakukan dengan metode timelocking
retensi dilaporkan dalam [2].

C untuk 1 min;Mode 2 berbeda dari mantan dalam kolom suhu pemrograman: langkah pertama, 100 C
untuk 10 menit.berikutnya dengan tingkat 35 K/menit sampai dengan 300

Kromatografi cair dilakukan pada chromatograph Milichrom A-02 dengan detektor UV (ZAO EcoNova,
Novosibirsk, Rusia). Kondisi kromatografi: kolom AQ Protosil-120-5-C18; Mobile tahap A, (4 M
LiClO40.1 M HClO4): H2O (95:5); Mobile tahap B, asetonitril HPLC kelas; gradiasi dari 5 untuk 100%
HP fase B dalam volume 4000 L, 100% mobile tahap berikutnya B dalam volume hingga 4500 L; laju
aliran eluent, 100 L/menit; C.kolom suhu, 40 Deteksi dilakukan dalam mode multiwave di 210, 220,
230, 240, 250, 260, 280, dan 300 nm. Volume menyuntikkan sampel adalah 4L.

Senyawa dikenali oleh volume penyimpanan dan spektral rasio menurut rekondisi terhadap GrApple
metodologis dari Kompendium [3]. Rasio spektral yang dihitung dengan metode kemurnian terbaik.

Untuk kromatografi lapis tipis (TLC), kami menggunakan Sorbfil PTSKh-AF-UF piring. Sebagai
referensi contoh, kami menggunakan ethanolic solusi morfin, kodein, dan asam. Kromatografi dilakukan
dalam sistem pelarut benzeneethanoldiethylamine (9: 1: 1). Jalan depan pelarut adalah 90 mm. Setelah
akhir kromatografi, piring dikeringkan, dikaji di bawah sinar UV (OLD-41 lamp) menandai fluoresensi
penyerapan zona, dan kemudian dikembangkan dengan Marki reagent (larutan formaldehida dalam
H2SO4 terkonsentrasi). Untuk ekstraksi senyawa, bintik-bintik empat diterapkan ke piring, salah satu
tempat dikembangkan dengan reagen Marki, dan zona lainnya yang eluted pada tingkat senyawa yang
dikembangkan dengan campuran chloroformisopropanol (9: 1).

Sampel dan persiapan mereka untuk analisis. Kita mempelajari sampel ahli forensik dan biologi. Ahli
forensik sampel yang washouts dari cottonwool tampon (melalui orang-orang yang mengkonsumsi
narkotika disaring sintesis produk sebelum pengenalan intravena), washouts dari alat suntik bekas pakai,
dan residu cairan jarum suntik. Cairan biologis yang umumnya diambil dari orang-orang yang
mengkonsumsi desomorphine dari berbagai daerah, khususnya, daerah Kemerovo dan Lipetsk urin.

HASIL DAN DISKUSI

Untuk penentuan komposisi komponen yang mengandung desomorphine sampel dan sampel ekstrak,
kami menggunakan GC-MS; Semua senyawa yang diharapkan akan sintetik analog dari kodein
diidentifikasi, dan konsentrasi relatif mereka ditentukan. Hasil yang disajikan dalam tabel 1 dan 2.

Tabel 1 menyajikan derivatif kodein utama yang diidentifikasi oleh GC-MS yang ditemukan di ahli
sampel dan sampel urin. Dalam sampel dipelajari, kafein, dimedrol, analgin dan dekomposisi produk, dan
fenobarbital juga ditemukan. Untuk hampir semua sampel belajar kecuali yang tercantum di atas,
chromatograms menunjukkan puncak senyawa (spektrum massa yang disajikan dalam Fig. 1) yang untuk
sementara disebut senyawa 1.

Tabel 2 menyajikan kodein derivatif ditemukan dalam sampel dipelajari. Konsentrasi komponen
diidentifikasi ditentukan dengan metode normalisasi internal, di mana semua puncak di chromatogram
diambil sebagai 100%.

Seperti yang terlihat di tabel 1, bahan-bahan belajar dalam sampel yang berbeda secara substansial
berbeda dalam komposisi dan
rasio saling komponen. Hal ini karena fitur spesifik sintesis, langkah, teknik persiapan narkotika untuk
digunakan, dan pemurnian produk. Secara khusus, dalam sampel no. 2, konsentrasi senyawa 1 secara
signifikan lebih besar daripada konsentrasi desomorphine dan kodein. Konsentrasi desomorphine di
ekstrak sampel urin bervariasi dari 7080% untuk jumlah jejak.

Bersama dengan desomorphine, turunannya dalam konsentrasi yang berbeda juga ditemukan dalam studi
sampel urin. Hal ini menunjukkan bahwa bagian dari komponen-komponen ini yang tiba di tubuh
bersama-sama dengan desomorphine diekskresikan dalam bentuk yang tidak berubah. Desomorphine dan
produk konversi lainnya dari kodein diidentifikasi dalam sampel urin setelah hidrolisis asam atau tanpa
hidrolisis. Dalam chromatograms ekstrak urin yang mengandung sejumlah besar analgin, puncak analgin
masker puncak desomorphine. Dalam kasus ini, ianya lebih baik untuk mengidentifikasi desomorphine
dalam asam klorida hydrolyzates sampel, mana efek mengganggu analgin berkurang.

Karena senyawa 1 terjadi di banyak sampel yang mengandung desomorphine, kita mengasumsikan bahwa
senyawa ini adalah turunannya. Gambar 2 menyajikan chromatogram sampel ekstrak mode 2, di mana
puncak senyawa dengan retensi kali min 7,49 dan 7,53 yang diidentifikasi sebagai desomorphine dan
senyawa 1, masing-masing.

Struktur kompleks 1 diidentifikasi dengan metode korelasi structurespectrum berdasarkan meluputkan

massa-spectrometric dikenal desomorphine dan Analoginya nya.

Seperti diketahui, molekul ion m / z = 271 adalah ion utama dalam spektrum massa desomorphine. Ion
m/z = 256 [M-15] + sesuai dengan hilangnya gugus metil, ion m / z = 254 [M-17] + adalah karakteristik
kerugian dari group hidroksi, m / z = 242 [M-29] + adalah mungkin hilangnya spesies C2H5 dengan
pembelahan salah satu cincin jenuh molekul, m / z = 228 [M-43] + adalah hilangnya spesies C2H6N, dan
m z = 214 [M-57] + adalah hilangnya fragmen C4H9, yang dapat sesuai dengan hilangnya gugus metil
dan spesies C3H7 dengan pembelahan dua Obligasi di posisi 5,6 dan 8.14 molekul desomorphine.

Jika kita menganggap bahwa arah utama fragmentasi senyawa 1 adalah sama untuk desomorphine,
spektrum massa ini senyawa dapat diperlakukan sebagai berikut (Lihat gambar 1): m / z = 269 adalah ion
molekul yang berbeda dari desomorphine oleh 2 amu; Hal ini memungkinkan asumsi bahwa molekul
senyawa 1 memiliki satu ikatan ganda lebih desomorphine; m / z = 254 [M-15] + sesuai dengan hilangnya
gugus metil, m / z = 252 [M-17] + sesuai dengan hilangnya kelompok hidroksil, m / z = 240 [M-29] +
berkaitan dengan kemungkinan hilangnya spesies C2H5 dengan pembelahan salah satu cincin jenuh
molekul, m / z = 226 [M-43] + sesuai dengan hilangnya spesies C2H6N, dan m / z = 212 [M-57] + sesuai
dengan hilangnya fragmen C4H9, yang dapat sesuai dengan hilangnya gugus metil dan C3H7 dengan
pembelahan dua Obligasi di posisi 5,6 dan 8.14.

Perhatikan bahwa senyawa mempelajari memiliki kehancuran karakter mirip dengan desomorphine. Di
fragmentasi, penghancuran dua jenuh cincin diamati: salah satunya melibatkan nitrogen dan, di sisi lain,
pembelahan dua berlawanan Obligasi diamati, mungkin, posisi 5,6 dan 8.14. Karena semua fragmen
kompleks belajar berbeda dari fragmen-fragmen di spektrum massa desomorphine oleh 2 amu,
diharapkan bahwa ikatan ganda dilokalisasi dalam cincin jenuh yang tidak menghantam di fragmentasi.
Senyawa diidentifikasi dapat digambarkan sebagai didehydrodesomorphine.

Karena derivatisasi dari senyawa yang digunakan dalam analisis GC-MS narkotika forensik studi dan
penelitian biomaterials, studi trifluoroacetyl dan trimethylsilyl derivatif dari desomorphine dan seiring
senyawa sangat menarik praktis. Namun, kita gagal untuk menemukan informasi tentang derivatif ini
dalam literatur tersedia. Oleh karena itu, persiapan trifluoroacetyl turunan dari didehydrodesomorphine
diidentifikasi dan studi dengan spektrum massa dapat, dalam pendapat kami, mengkonfirmasi struktur
kompleks dipelajari.
Derivatisasi BSTFA dari desomorphine dalam urin ekstrak, kita memperoleh puncak dengan waktu
retensi 18.897 min; chromatogram (dalam modus 1) dan spektrum massa disajikan dalam rajah-rajah 3
dan 4.

Massa molekul turunan trimethylsilyl dari desomorphine adalah 343 amu; Akibatnya, ion molekuler
sesuai dengan m z = 343, ion m/z = 328 [M-15] + sesuai dengan hilangnya gugus metil, ion m/z = 314
[M-29] + mencerminkan mungkin hilangnya spesies C2H5 dengan pembelahan salah satu
unsaturatedrings, m/z = 300 [M-43] + mencerminkan hilangnya spesies C2H3N, m/z = 286 [M-57] +
adalah hilangnya C4H9 frag-ment, yang dapat berhubungan dengan hilangnya gugus metil dan C3H7
dengan pembelahan dua Obligasi di 5,6 dan 8.14 posisi cincin jenuh, dan ion m/z = 271 [M-72] + dapat
berhubungan dengan hilangnya kelompok tri-methylsilyl.

Oleh karakter kehancuran, senyawa ini dapat diidentifikasi sebagai turunan mono(trimethylsilyl) dari
desomorphine. Umumnya, karakter destruc-tion identik dengan pemusnahan desomorphine. Ion sesuai
dengan detasemen dari group hidroksi [M-17] + absen, karena penyimpangan yang terjadi pada kelompok
hidroksi, dan ion [M-72] + cor-menanggapi hilangnya kelompok trimethylsilyl diamati.

Angka 5 dan 6 hadir chromatogram tri-fluoroacetyl turunan dari desomorphine dan dengan spektrum
massa. Di kromatografi dalam mode 1, puncak trifluoroacetyl turunan dari desomorphine mempunyai
waktu reten-tion min 11.85.

Molekul ion m/z = 367 adalah ion utama dalam spektrum massa. Ion m/z = 352 [M-15] + sesuai dengan
hilangnya gugus metil, ion m/z = 338 [M-29] + adalah mungkin hilangnya spesies C2H5 dengan cleav-
salah satu cincin jenuh molekul, m/z = 324 [M-43] + adalah hilangnya spesies C2H6N, m/z = 310 [M-57]
+ adalah hilangnya fragmen C4H9, yang dapat berhubungan dengan hilangnya gugus metil dan spesies
C3H7 dengan pembelahan dua Obligasi di 5.6 dan posisi 8.14, dan m z = 270 [M-97] + adalah hilangnya
kelompok trifluoroacetyl. Demikian pula untuk turunan mono(trimethylsilyl) desomorphine, ion sesuai
dengan detasemen dari group hidroksi dan ion [M-97] + cor-menanggapi hilangnya kelompok
trifluoroacetyl diamati. Oleh karakter kehancuran, com-pon ini dapat diidentifikasi sebagai turunan
mono(trifluoroacetyl) dari desomorphine.

Untuk mengkonfirmasi struktur diidentifikasi didehy-drodesomorphine, kita mempelajari produk

derivatisasi MBTFA nya. Chromatogram dan Tampilan spektrogram kompleks disajikan dalam rajah-
rajah 7 dan 8. Kromatografi dilakukan dalam mode 2; puncak senyawa belajar memiliki waktu retensi
min 6.98.

Trifluoroacetyl turunan dari didehydrodesomor-phine harus molekuler ion m/z = 365; di PA-tion,
Tampilan spektrogram pameran puncak ion m/z = 350 [M-15] + sesuai dengan hilangnya gugus metil,
m/z = 336 [M-29] + mungkin sesuai dengan hilangnya spesies C2H5 dengan pembelahan salah satu unsat
- urated cincin molekul, m/z = 322 [M-43] + edisi-sponding hilangnya spesies C2H6N, dan m z = 268
[M-97] + sesuai dengan hilangnya trifluoro-asetil.

Demikian pula lain trifluoroacetyl derivatif, ion sesuai dengan detasemen dari group hidroksi [M-17] +
absen, karena penyimpangan yang terjadi pada kelompok hidroksi, dan ion [M-97] + sesuai dengan
hilangnya kelompok trifluoroacetyl diamati. Oleh karakter kehancuran, senyawa ini dapat diidentifikasi
sebagai turunan mono(trifluoroacetyl) dari didehydrodesomorphine.

Dengan demikian, desomorphine ditemukan di GC-MS studi sampel ahli yang berbeda. Untuk pertama
kalinya, didehy-drodesomorphine, mono(trifluoroacetyl) deriva-tive dari didehydrodesomorphine,
turunan mono (trifluoro-asetil) dari desomorphine, dan mono(trimethylsilyl) turunan dari desomorphine
dikenali oleh GC-MS.

Sebelum mempelajari desomorphine dan didehydrodesomorphine oleh HPLC, itu perlu untuk
mengekstrak senyawa ini; sebelumnya, mereka ditahirkan oleh kromatografi lapis tipis. Pelarut sistem
benzeneethanoldiethylamine (9: 1: 1) digunakan sebagai paling sering digunakan dalam analisis
narkotika dari kelompok opium. Di kromatografi lapis tipis sampel ahli yang mengandung desomorphine,
dua tempat yang diamati di piring pembangunan dengan reagen Marki: tempat blueviolet hampir tidak
terlihat pada tingkat kodein (tempat 1) dan blueviolet tempat di antara kodein dan asam, edisi zona -
zona
sponding untuk desomorphine (tempat 2).

Selanjutnya, senyawa dari piring TLC (pada tingkat zona dikembangkan) eluted dengan chloroform
isopropanol campuran (9: 1). Bagian dari ekstrak yang diperoleh dipelajari oleh GC-MS; hasil pra-sented
dalam tabel 3. Konsentrasi diidentifikasi com-ponents ditentukan dengan metode normalisasi internal, di
mana semua puncak diidentifikasi diambil untuk menjadi 100%.

Jadi, dalam contoh ahli, senyawa pem-oped oleh reagen Marki ditemukan di dua zona. Di zona pertama
pada tingkat kodein, didehydrodeso-morfin dan kodein tentatif ditemukan dalam jumlah yang kurang
lebih sama. Di zona kedua pada tingkat desomorphine, didehydrodesomorphine dan desomorphine yang
ditemukan (juga tentatif), dan jumlah desomorphine adalah tiga kali lebih kecil dari jumlah
didehydrodesomorphine. Analgin juga diidentifikasi di zona ini. Dengan demikian, di bawah diberikan
mem-
dibebaskan atas syarat, pemisahan desomorphine dari analog sintetis lainnya di piring TLC tidak lengkap.
Pelarut sistem benzeneethanoldiethylamine (9: 1: 1), yang digunakan dalam analisis narkotika, kurang
informatif; oleh karena itu, metode lain harus digunakan untuk mengkonfirmasi kehadiran desomorphine
dalam sampel dipelajari.

Untuk tujuan ini, sampel dimurnikan dipelajari pada Milichrom A-02 chromatograph cair dalam mode
dijelaskan dalam [3]. L campuran (95:5) 4 M LiClO40.1 M HClO4: H2O dan belajar pada
chromatograph.Ekstrak setelah TLC pemurnian kembali diekstraksi dengan 200

Angka 9 dan 10 dan Tabel 4 mempresentasikan hasil pemisahan kromatografi ekstrak murni. Seperti yang
terlihat di tabel, puncak analgin dan dua unre-memecahkan puncak pada tingkat kodein ditemukan di
ekstrak dari spot 1. Mempertimbangkan rasio spektral, Area puncak kromatografi, dan hasil GC-MS dan
studi TLC, puncak, 5 dan 6 bisa memenuhi lowon-megah sebagai didehydrodesomorphine dan kodein,
masing-tively. Dua puncak dengan daerah rasio sekitar 1:3 ditemukan di ekstrak dari 2 tempat.
Memperhitungkan rasio spektral, Area puncak kromatografi, dan hasil dari studi TLC, GC-MS dan
puncak dengan waktu retensi 10.1510.18 min dapat diidentifikasi sebagai didehydrodesomorphine dan
puncak dengan waktu retensi 11.46 min dapat diidentifikasi sebagai desomorphine.

Kesimpulannya, kita cam merangkum hasil dari studi ini.

(i) dalam analisis GC-MS ahli sam berbeda-ples mengandung desomorphine, empat komponen yang
ditemukan dan diidentifikasi (oleh massa spektrum) sebagai sintetis ana logues dari desomorphine.
Sebagian kecil dari desomorphine bervariasi dari jejak 7080% dari jumlah dari semua puncak.
Akibatnya, dalam penentuan senyawa ini, dapat diasumsikan bahwa sampel belajar adalah produk sintesis
desomorphine. Analoginya trifluoroacetyl dan trimethylsilyl dari desomorphine didapat dan dipelajari.
Didehydrodesomorphine diidentifikasi dalam sampel; garis-garis spektrum massal senyawa ini dan
turunannya trifluoroacetyl yang
diamati.
(ii) ahli sampel urin yang mengandung desomor-phine dipelajari. Itu menunjukkan bahwa desomor-phine
dapat berupa komponen utama atau jejak impu-rity. Analoginya beberapa sintetis dari desomorphine telah
diidentifikasi dalam sampel urin. Hal ini menunjukkan bahwa bagian dari senyawa ini dikeluarkan
dengan urin dalam bentuk tidak berubah. Desomorphine terdapat dalam urin baik pada alkali ekstraksi
dan setelah hidrolisis asam klorida.
(iii) oleh pemurnian TLC, desomorphine diekstrak dan belajar untuk pertama kalinya di chromatograph
cair Milichrom A-02. Waktu retensi dan spektral rasio didehydrodesomorphine dan deso-morfin bertekad
di bawah kondisi modus chromatograph DB-2003.

Dengan demikian, karya ini melibatkan studi kompleks sampel ahli dan cairan biologis yang mengandung
deso morfin, meningkatkan kualitas keahlian, dan perhatian ketelitian dari studi yang berkaitan dengan
perdagangan gelap narkotika.