Pengenalan Antigen dalam Adaptive Immune System

Struktur Reseptor Antigen Limfosit dan Pengembangan Repertoar Kekebalan Tubuh

Reseptor antigen melayani peran penting dalam pematangan limfosit dari progenitor dan di semua respon
imun adaptif. Pada imunitas adaptif, limfosit naif mengenali antigen untuk memulai respons, dan sel T efektor
dan antibodi mengenali antigen untuk menjalankan fungsinya.
Limfosit B dan T mengekspresikan reseptor berbeda yang mengenali antigen: antibodi yang terikat
membran pada sel B dan reseptor sel T (TCR) pada limfosit T. Fungsi utama reseptor seluler dalam sistem
kekebalan, seperti pada sistem biologis lainnya, adalah untuk mendeteksi rangsangan eksternal (antigen,
reseptor antigen dari sistem imun adaptif) dan memicu respons sel-sel di mana reseptor diekspresikan. Untuk
mengenali berbagai macam antigen yang berbeda, reseptor limfosit antigen harus dapat mengikat dan
membedakan antara banyak struktur kimia yang sering berkaitan erat. Reseptor antigen didistribusikan secara
klonal, yang berarti bahwa setiap klon limfosit spesifik untuk antigen yang berbeda dan memiliki reseptor unik,
berbeda dari reseptor dari semua klon lainnya. (Ingat bahwa klon terdiri dari sel induk dan keturunannya.)
Jumlah total klon limfosit yang berbeda sangat besar, dan seluruh koleksi ini membentuk repertoar kekebalan
tubuh. Meskipun setiap klon limfosit B atau limfosit T mengenali antigen yang berbeda, reseptor antigen
mengirimkan sinyal biokimia yang pada dasarnya sama di semua limfosit dan tidak terkait dengan spesifisitas.
Fitur-fitur pengenalan limfosit dan reseptor antigen ini menimbulkan pertanyaan-pertanyaan berikut:
- Bagaimana reseptor limfosit antigen mengenali antigen yang sangat beragam dan mengirimkan sinyal
aktivasi ke sel?
- Apa perbedaan dalam sifat pengenalan reseptor antigen pada sel B dan sel T?
- Bagaimana keragaman struktur reseptor dalam repertoar limfosit yang dihasilkan?
Keragaman pengenalan antigen menyiratkan adanya banyak reseptor protein antigen yang berbeda secara
struktural, lebih dari yang dapat dikodekan dalam genom warisan (germline). Oleh karena itu, mekanisme
khusus harus ada untuk menghasilkan keragaman ini.
 GAMBAR 4-1 Sifat antibodi dan reseptor antigen sel T (TCR). Antibodi (juga disebut imunoglobulin) dapat dinyatakan sebagai
reseptor membran atau protein yang disekresikan; TCR hanya berfungsi sebagai reseptor membran. Ketika molekul imunoglobulin
(Ig) atau TCR mengenali antigen, sinyal dikirim ke limfosit oleh protein yang terkait dengan reseptor antigen. Reseptor antigen dan
protein signaling terlampir membentuk reseptor sel B (BCR) dan kompleks TCR. Perhatikan bahwa reseptor antigen tunggal
ditunjukkan mengenali antigen, tetapi sinyal biasanya membutuhkan pengikatan dua atau lebih reseptor ke molekul antigen yang
berdekatan. Karakteristik penting dari molekul yang mengenali-antigen ini dirangkum. APC, Sel-sel yang menyajikan antigen; Ig,
imunoglobulin; MHC, kompleks histocompatibility utama.
Dalam bab ini, kami menggambarkan struktur reseptor antigen B dan limfosit T dan bagaimana reseptor
ini mengenali antigen. Kami juga membahas bagaimana keragaman reseptor antigen dihasilkan selama proses
perkembangan limfosit, sehingga menimbulkan repertoar limfosit matang. Proses aktivasi limfosit terinduksi
antigen dijelaskan dalam bab-bab selanjutnya.
QURIN
RESEPTOR ANTIGEN DARI LYMPHOCYTES
Reseptor antigen B dan limfosit T memiliki beberapa fitur yang penting untuk fungsinya dalam imunitas
adaptif (Gambar 4-1). Meskipun reseptor ini memiliki banyak kesamaan dalam hal struktur dan mekanisme
pensinyalan, ada perbedaan mendasar yang terkait dengan jenis struktur antigenik yang dikenali sel B dan sel T.
- Antibodi yang terikat-membran, yang berfungsi sebagai reseptor antigen limfosit B, dapat mengenali banyak
jenis struktur kimia, sementara sebagian besar reseptor antigen sel T mengenali hanya peptida yang terikat
dengan molekul major histocompatibility complex (MHC). Reseptor antigen limfosit B dan antibodi yang
disekresikan sel B mampu mengenali bentuk, atau konformasi, makromolekul, termasuk protein, lipid,
karbohidrat, dan asam nukleat, serta lebih sederhana, bagian kimia yang lebih kecil. Spesifitas luas sel B
untuk berbagai jenis struktur molekul memungkinkan antibodi untuk mengenali beragam mikroba dan racun
dalam bentuk asli mereka. Dalam kontras yang mencolok, sebagian besar sel T hanya melihat peptida yang
 ditampilkan pada sel antigenpresenting (APC) yang terikat pada molekul MHC. Spesifitas sel T ini
membatasi pengakuan mereka hanya pada mikroba yang terkait sel (lihat Bab 3)
- Molekul reseptor antigen terdiri dari daerah (domain) yang terlibat dalam pengenalan antigen — oleh karena
itu bervariasi antara klon limfosit — dan daerah lain yang diperlukan untuk integritas struktural dan fungsi
efektor — sehingga relatif lestari di antara semua klon. Domain yang mengenali antigen dari reseptor
disebut variabel (V) daerah, dan bagian yang dikonservasi adalah daerah konstan (C). Bahkan dalam setiap
wilayah V, sebagian besar variabilitas urutan terkonsentrasi dalam bentangan pendek, yang disebut daerah
hipervariabel, atau daerah yang menentukan komplementaritas (CDRs), karena mereka membentuk bagian-
bagian dari reseptor yang mengikat antigen (yaitu, mereka saling melengkapi bentuk antigen). Dengan
memusatkan variasi urutan di daerah kecil reseptor, dimungkinkan untuk memaksimalkan variabilitas bagian
pengikat antigen, sambil mempertahankan struktur dasar reseptor. Sebagaimana dibahas kemudian,
mekanisme khusus ada dalam mengembangkan limfosit untuk menciptakan gen yang menyandikan daerah
variabel berbeda dari protein reseptor antigen di masing-masing klon.
- Rantai reseptor antigen dikaitkan dengan protein membran invarian yang fungsinya untuk memberikan
sinyal intraseluler setelah pengenalan antigen (lihat Gambar 4-1). aktivasi dalam Bab 5 dan 7, masing-
masing.
Sinyal-sinyal ini, yang ditransmisikan ke sitosol dan nukleus, dapat menyebabkan limfosit untuk
membelah, untuk membedakan, atau dalam keadaan tertentu untuk mati. Dengan demikian, dua fungsi
reseptor limfosit untuk antigen - pengenalan antigen spesifik dan transduksi sinyal - dimediasi oleh
polipeptida yang berbeda. Ini lagi-lagi memungkinkan variabilitas dipisahkan dalam satu set molekul —
reseptor itu sendiri — sementara meninggalkan fungsi transduksi sinyal yang dilestarikan dalam protein lain,
invariant. Seperangkat reseptor antigen membran plasma terkait dan molekul sinyal dalam limfosit B disebut
kompleks reseptor sel B (BCR), dan pada limfosit T disebut kompleks sel T (TCR) kompleks. Ketika
molekul antigen berikatan dengan reseptor limfosit antigen, protein pemberi sinyal yang terkait dari
kompleks reseptor dibawa ke dekat. Akibatnya, enzim yang melekat pada bagian sitoplasma dari protein
pemberi sinyal mengkatalisis fosforilasi protein lainnya. Fosforilasi memicu kaskade sinyal kompleks yang
berujung pada aktivasi transkripsional dari banyak gen dan produksi banyak protein yang memediasi respons
limfosit. Kami kembali ke proses aktivasi limfosit T dan B di Bab 5 dan 7, masing-masing.
- Antibodi ada dalam dua bentuk — sebagai reseptor antigen yang terikat-membran pada sel B atau sebagai
protein yang disekresikan — tetapi TCR hanya ada sebagai reseptor membran pada sel T. Antibodi yang
disekresikan hadir dalam darah dan sekresi mukosa, di mana mereka berfungsi untuk mempertahankan
melawan mikroba (yaitu, mereka adalah molekul efektor imunitas humoral). Antibodi juga disebut
immunoglobulins (Igs), mengacu pada protein imunitas-berunding dengan mobilitas elektroforetik lambat
karakteristik globulin. Antibodi yang dikenali mengenali antigen mikroba dan toksin oleh domain
variabelnya, sama dengan reseptor antigen B limfosit yang terikat membran. Daerah konstan dari beberapa
antibodi yang disekresikan memiliki kemampuan untuk mengikat ke molekul lain yang berpartisipasi dalam
eliminasi antigen: molekul-molekul ini termasuk reseptor pada fagosit dan protein dari sistem komplemen.
Dengan demikian, antibodi melayani fungsi yang berbeda pada berbagai tahap respon imun humoral:
 antibodi membran-terikat pada sel B mengenali antigen untuk memulai tanggapan, dan antibodi disekresikan
menetralkan dan menghilangkan mikroba dan racun mereka dalam fase efektor imunitas humoral. Dalam
imunitas seluler, fungsi efektor eliminasi mikroba dilakukan oleh T limfosit sendiri dan oleh leukosit lain
yang merespon sel T. Reseptor antigen sel T hanya terlibat dalam pengenalan antigen dan aktivasi sel T, dan
protein ini tidak disekresikan dan tidak memediasi fungsi efektor. Dengan pengantar ini, kami menjelaskan
selanjutnya reseptor antigen limfosit, antibodi pertama dan kemudian reseptor sel T.
ANTIBODI
Antibodi Molekul antibodi terdiri dari empat rantai polipeptida — dua rantai berat (H) identik dan dua
rantai ringan (L) identik — dengan masing-masing rantai yang berisi wilayah variabel dan daerah konstan
(Gambar 4-2). Keempat rantai tersebut dirakit untuk membentuk molekul berbentuk Y. Setiap rantai ringan
melekat pada satu rantai berat, dan dua rantai berat saling menempel satu sama lain, semuanya dengan ikatan
disulfida. Rantai ringan terdiri dari satu V dan satu domain C, dan rantai berat memiliki satu V dan tiga atau
empat domain C. Setiap domain melipat menjadi bentuk tiga dimensi yang khas, yang disebut domain
immunoglobulin (Ig) (lihat Gambar 4-2, D). Domain Ig terdiri dari dua lapisan lembaran β-lipit yang disatukan
oleh jembatan disulfida. Untai yang berdekatan dari setiap β-sheet dihubungkan oleh loop pendek yang
menonjol; di daerah V dari molekul Ig, loop ini membentuk tiga CDR yang bertanggung jawab untuk
pengenalan antigen. Domain Ig hadir di banyak protein lain dalam sistem kekebalan tubuh, serta di luar sistem
kekebalan tubuh, dan sebagian besar protein ini terlibat dalam menanggapi rangsangan dari lingkungan dan dari
sel lain. Semua protein ini dikatakan anggota superfamili imunoglobulin, dan mereka mungkin telah berevolusi
dari gen leluhur yang sama.

GAMBAR 4-2 Struktur antibodi. Diagram skematik A, molekul imunoglobulin G (IgG) yang disekresikan, dan B, molekul
bentuk membran-terikat IgM, menggambarkan domain rantai berat dan ringan dan daerah protein yang berpartisipasi dalam
pengenalan dan efektor antigen fungsi. N dan C mengacu pada ujung terminal-amino dan ujung-terminal karboks dari rantai
polipeptida, masing-masing. C, Struktur kristal dari molekul IgG yang disekresikan menggambarkan domain dan orientasi ruang
mereka; rantai berat berwarna biru dan merah, rantai ringan berwarna hijau, dan karbohidrat berwarna abu-abu. D, Diagram pita dari
domain Ig V menunjukkan struktur lembaran β-lipit dasar dan loop proyeksi yang membentuk tiga CDR. CDR, Complementarity
menentukan wilayah. (C, Courtesy of Dr. Alex McPherson, Universitas California, Irvine.)
Situs pengikatan antibodi antigen tersusun dari daerah V dari rantai berat dan rantai ringan, dan struktur
antibodi inti mengandung dua tempat pengikatan antigen yang identik (lihat Gambar 4-2). Setiap wilayah
variabel dari rantai berat (disebut VH) atau rantai ringan (disebut VL) mengandung tiga daerah hypervariable,
atau CDRs. Dari ketiganya, variabilitas terbesar ada pada CDR3, yang terletak di persimpangan daerah V dan
C. Seperti yang dapat diprediksi dari variabilitas ini, CDR3 juga merupakan bagian dari molekul Ig yang
memberikan kontribusi paling banyak pada pengikatan antigen.
Bagian molekul antibodi yang berbeda secara fungsional pertama kali diidentifikasi berdasarkan fragmen
yang dihasilkan oleh proteolisis. Fragmen antibodi yang mengandung rantai cahaya utuh (dengan domain V dan
C-nya) yang melekat pada V dan domain C pertama dari rantai berat berisi bagian antibodi yang diperlukan
untuk pengenalan antigen dan oleh karena itu disebut Fab (fragmen, antigen-binding). Sisa domain rantai-berat
C membentuk wilayah Fc (fragmen, kristalin); fragmen ini cenderung mengkristal dalam larutan. Dalam setiap
molekul Ig, ada dua daerah Fab yang identik yang mengikat antigen dan satu wilayah Fc yang bertanggung
jawab untuk sebagian besar aktivitas biologis dan fungsi efektor dari antibodi. (Seperti yang didiskusikan
kemudian, beberapa jenis antibodi ada sebagai multimer dari dua atau lima molekul Ig yang menempel satu
sama lain.) Di antara daerah Fab dan Fc dari sebagian besar molekul antibodi adalah bagian fleksibel yang
disebut daerah engsel. Engsel memungkinkan dua Fab reigenbinding daerah dari setiap molekul antibodi untuk
bergerak independen satu sama lain, memungkinkan mereka untuk secara bersamaan mengikat epitop antigen
yang dipisahkan satu dengan yang lain dengan jarak yang bervariasi.
Ujung terminal-C dari rantai berat mungkin berlabuh di membran plasma, seperti yang terlihat pada
reseptor sel B, atau dapat berakhir pada bagian ekor yang tidak memiliki jangkar membran sehingga antibodi
diproduksi sebagai protein yang disekresikan. Rantai cahaya dalam molekul Ig tidak melekat pada membran
sel.
Ada lima jenis rantai berat, yang disebut μ, δ, γ, ε, dan α, yang berbeda dalam wilayah C mereka; di
manusia, ada empat subtipe γ rantai dan dua rantai α. Antibodi yang mengandung rantai berat yang berbeda
milik kelas yang berbeda, atau isotipe, dan diberi nama sesuai dengan rantai berat mereka (IgM, IgD, IgG, IgE,
dan IgA). Setiap isotipe memiliki sifat fisik dan biologis dan fungsi efektor yang berbeda (Gambar 4-3).
Reseptor antigen limfosit naif B, yang merupakan sel B matang yang belum menemukan antigen, adalah IgM
dan IgD yang terikat membran. Setelah stimulasi oleh antigen dan limfosit T penolong, klon limfosit B spesifik
antigen dapat berkembang dan berdiferensiasi menjadi progeni yang mensekresikan antibodi. Beberapa progeni
IgM dan IgD yang mengekspresikan sel B dapat mensekresikan IgM, dan progeni lain dari sel B yang sama
dapat menghasilkan antibodi dari kelas rantai berat lainnya. Perubahan dalam produksi isotipe Ig ini disebut
switching kelas berat (atau isotipe); mekanisme dan kepentingannya dibahas dalam Bab 7. Meskipun bagian C
rantai berat dapat berubah selama respon imun humoral, setiap klon sel B mempertahankan spesifisitasnya,
karena daerah V tidak berubah.
Kedua jenis rantai ringan, yang disebut κ dan λ, berbeda dalam wilayah C mereka. Setiap sel B
mengekspresikan κ atau λ tetapi tidak keduanya. Setiap jenis rantai ringan dapat kompleks dengan semua jenis
rantai berat dalam molekul antibodi, tetapi tidak seperti rantai berat, dua jenis rantai ringan tidak memiliki
perbedaan fungsional. Kelas rantai ringan (κ atau λ) juga tetap di sepanjang kehidupan setiap klon sel B,
terlepas dari apakah kelas berat atau rantai switching telah terjadi.
PENGIKATAN ANTIGEN OLEH ANTIBODI
Antibodi mampu mengikat berbagai macam antigen, termasuk makromolekul dan bahan kimia kecil.
Alasan untuk ini adalah bahwa loop CDR pengikat antigen molekul antibodi dapat bersatu membentuk celah
yang mampu menampung molekul-molekul kecil atau membentuk permukaan yang lebih luas yang mampu
menampung banyak molekul yang lebih besar, termasuk bagian-bagian protein (Gambar 4-4). . Antibodi
berikatan dengan antigen melalui interaksi nonkovalen yang reversibel, termasuk ikatan hidrogen, interaksi
hidrofobik, dan interaksi berbasis muatan. Bagian-bagian antigen yang diakui oleh antibodi disebut epitop, atau
determinan. Epitop antigen protein yang berbeda dapat dikenali berdasarkan urutan rentetan asam amino
(epitop linear) atau pada bentuk (epitop konformasi). Beberapa epitop ini tersembunyi di dalam molekul
antigen dan diekspos sebagai hasil dari perubahan fisikokimia.

GAMBAR 4-3 Fitur dari isotipe utama (kelas) antibodi. Gambar ini merangkum beberapa fitur penting dari isotipe antibodi utama
manusia. Isotipe diklasifikasikan berdasarkan rantai beratnya (H); masing-masing isotipe dapat mengandung κ atau λ rantai ringan.
Diagram skematik mengilustrasikan bentuk berbeda dari bentuk antibodi yang disekresikan. Perhatikan bahwa IgA terdiri dari dua
subclass, yang disebut IgA1 dan IgA2, dan IgG terdiri dari empat subclass, yang disebut IgG1, IgG2, IgG3, dan IgG4. Sebagian besar
fungsi fiksasi opsonizing dan pelengkap IgG yang disebabkan IgG1 dan IgG3. Domain dari rantai berat di masing-masing isotipe
diberi label. Konsentrasi plasma adalah nilai rata-rata pada individu normal. Ig, Immunoglobulin.

GAMBAR 4-4 Mengikat antigen oleh antibodi. Model antigen protein yang terikat pada molekul antibodi menunjukkan bagaimana
situs pengikatan antigen dapat mengakomodasi makromolekul yang dapat larut dalam konformasi asli (terlipat). Rantai berat antibodi
 berwarna merah, rantai ringan berwarna kuning, dan antigen berwarna biru. (Sumber: Dr. Dan Vaughn, Laboratorium Cold Spring
Harbor, Cold Spring Harbor, NY.)
Kekuatan satu permukaan pengikat antigen antibodi berikatan dengan satu epitop antigen disebut afinitas
interaksi. Afinitas sering dinyatakan sebagai konstanta disosiasi (Kd), yang merupakan konsentrasi molar dari
antigen yang diperlukan untuk menempati setengah molekul antibodi yang tersedia dalam larutan; semakin
rendah Kd, semakin tinggi afinitasnya. Kebanyakan antibodi yang diproduksi dalam respon imun primer
memiliki Kd dalam kisaran 10−6 hingga 10−9 M, tetapi dengan rangsangan berulang (misalnya, pada respon
imun sekunder), afinitas meningkat menjadi Kd 10−8 hingga 10 −11 M. Peningkatan kekuatan pengikatan
antigen ini disebut pematangan afinitas (lihat Bab 7).
Setiap molekul antibodi IgG, IgD, dan IgE memiliki 2 situs pengikatan antigen. IgA yang disekresikan
adalah dimer dan oleh karena itu memiliki 4 tempat pengikatan antigen, dan mensekresi IgM adalah pentamer,
dengan 10 situs pengikatan antigen. Oleh karena itu, setiap molekul antibodi dapat mengikat 2 hingga 10 epitop
antigen, atau epitop pada 2 atau lebih antigen tetangga. Kekuatan pengikatan total jauh lebih besar daripada
afinitas ikatan antigen-antibodi tunggal dan disebut aviditas interaksi. Antibodi yang dihasilkan terhadap satu
antigen dapat mengikat antigen-antigen lain yang mirip struktural. Pengikatan seperti epitop serupa disebut
reaksi silang.
Dalam limfosit B, molekul Ig terikat-membran secara non-kovalen dikaitkan dengan dua protein lain,
yang disebut Igα dan Igβ, dan tiga protein membentuk kompleks BCR. Ketika reseptor sel B mengenali antigen,
Igα dan Igβ mengirimkan sinyal ke bagian dalam sel B yang memulai proses aktivasi sel B. Sinyal-sinyal ini
dan lainnya dalam respon imun humoral dibahas dalam Bab 7.
ANTIBODI MONOKLONAL
Kesadaran bahwa satu klona sel B membuat antibodi hanya satu spesifisitas telah dieksploitasi untuk
menghasilkan antibodi monoklonal, salah satu kemajuan teknis paling penting dalam imunologi, dengan
implikasi yang luas untuk obat klinis dan penelitian. Untuk menghasilkan antibodi monoklonal, sel B, yang
memiliki rentang hidup singkat in vitro, diperoleh dari hewan yang diimunisasi dengan antigen dan menyatu
dengan sel-sel myeloma (tumor sel plasma), yang dapat diperbanyak tanpa batas dalam kultur jaringan (Gambar
4). -5). Garis sel myeloma tidak memiliki enzim spesifik, akibatnya sel-sel ini tidak dapat tumbuh dengan
adanya obat beracun tertentu; sel-sel yang menyatu, mengandung kedua mieloma dan inti sel B normal,
bagaimanapun, tumbuh di hadapan obat ini karena sel B yang normal menyediakan enzim yang hilang. Dengan
demikian, dengan menggabungkan dua sel populasi dan membiakkannya dengan obat, adalah mungkin untuk
menumbuhkan sel-sel yang berasal dari sel B dan myeloma, yang disebut hibridoma. Sel hibridoma ini tumbuh
terus menerus, setelah memperoleh properti abadi dari tumor myeloma. Dari populasi hibridoma, seseorang
dapat memilih dan memperluas sel-sel individual yang mengeluarkan antibodi dari spesifisitas yang diinginkan;
antibodi tersebut, berasal dari klon sel B tunggal, adalah antibodi monoklonal homogen, yang berarti antibodi
monoklonal terhadap hampir semua antigen yang dapat diproduksi.
 GAMBAR 4-5 Generasi hibridoma dan antibodi monoklonal. Dalam prosedur ini, sel-sel limpa dari seekor tikus yang telah
diimunisasi dengan antigen yang diketahui menyatu dengan jalur sel myeloma yang kekurangan enzim yang tidak mensekresikan
imunoglobulinnya sendiri. Sel-sel leburan kemudian ditempatkan dalam medium seleksi yang memungkinkan kelangsungan hidup
hibrida yang diabadikan; sel B normal menyediakan enzim yang tidak dimiliki myeloma, dan sel B yang tidak digunakan tidak dapat
bertahan tanpa batas. Sel hibrid ini kemudian tumbuh sebagai klon sel tunggal dan diuji untuk sekresi antibodi dari spesifisitas yang
diinginkan. Klon yang memproduksi antibodi ini diperluas dan menjadi sumber antibodi monoklonal.
Kebanyakan antibodi monoklonal dibuat dengan menggabungkan sel-sel dari tikus yang diimunisasi
dengan myeloma tikus. Antibodi monoklonal tikus seperti itu tidak dapat disuntikkan berulang kali ke subjek
manusia, karena sistem kekebalan tubuh manusia melihat Ig tikus sebagai benda asing dan meningkatkan
respons kekebalan terhadap antibodi yang disuntikkan. Masalah ini telah diatasi sebagian oleh pendekatan
rekayasa genetika yang mempertahankan antigenbinding V wilayah antibodi monoklonal tikus dan
menggantikan sisa Ig dengan Ig manusia; antibodi seperti manusiawi cocok untuk administrasi untuk orang
(meskipun dengan penggunaan jangka panjang, bahkan beberapa antibodi monoklonal manusiawi dapat
menimbulkan tanggapan antibodi anti-Ig pada individu yang diobati). Baru-baru ini, antibodi monoklonal telah
dihasilkan dengan menggunakan teknologi DNA rekombinan untuk mengkloning DNA yang menyandikan
antibodi manusia dengan spesifisitas yang diinginkan. Pendekatan lain adalah mengganti gen Ig tikus dengan
gen antibodi manusia dan kemudian mengimunisasi tikus-tikus ini dengan antigen untuk menghasilkan antibodi
manusia yang spesifik. Antibodi monoklonal sekarang digunakan secara luas sebagai agen terapeutik untuk
banyak penyakit pada manusia (Gambar 4-6).
GAMBAR 4-6 Antibodi monoklonal terpilih dalam penggunaan klinis. Angka tersebut mencantumkan beberapa antibodi monoklonal
yang disetujui untuk pengobatan berbagai jenis penyakit atau dalam uji klinis untuk penyakit ini.
RESEPTOR SEL T UNTUK ANTIGEN
TCR, yang mengenali antigen peptida yang ditampilkan oleh molekul MHC, adalah protein heterodimerik
membranebound yang tersusun dari rantai α dan rantai β, setiap rantai yang mengandung satu daerah variabel
(V) dan satu daerah konstan (C) (Gambar 4-7). . Daerah V dan C adalah homolog dengan imunoglobulin V dan
daerah C. Di wilayah V dari setiap rantai TCR, ada tiga hypervariable, atau complementarity- menentukan,
wilayah, masing-masing sesuai dengan satu lingkaran di domain V. Seperti pada antibodi, CDR3 adalah yang
paling variabel di antara TCR yang berbeda.
PENGENALAN ANTIGEN OLEH TCR
Baik rantai α dan rantai β dari TCR berpartisipasi dalam pengakuan spesifik molekul MHC dan peptida
terikat (Gambar 4-8). Salah satu fitur luar biasa dari pengenalan antigen sel T yang telah muncul dari analisis
kristalografi x-ray dari TCR yang terikat pada kompleks MHC-peptida adalah bahwa setiap TCR mengakui
sedikitnya satu hingga tiga residu peptida yang terkait MHC.
TCR mengenali antigen, tetapi seperti halnya membran Ig pada sel B, ia tidak mampu mentransmisikan
sinyal ke sel T sendiri. Terkait dengan TCR adalah kompleks protein, yang disebut protein CD3 dan ζ, yang
bersama dengan TCR membentuk kompleks TCR (lihat Gambar 4-1). Rantai CD3 dan transm mengirimkan
beberapa sinyal yang dimulai ketika TCR mengenali antigen.
 GAMBAR 4-7 Struktur reseptor antigen sel T (TCR). Diagram skematik dari αβ TCR (kiri) menunjukkan domain-domain
khas TCR spesifik untuk kompleks peptida-MHC. Bagian pengikatan-antigen dari TCR dibentuk oleh domain Vα dan Vβ. N dan C
mengacu pada ujung terminal-amino dan ujung-terminal karbok dari polipeptida. Diagram pita (kanan) menunjukkan struktur bagian
ekstraseluler dari suatu TCR seperti yang diungkapkan oleh kristalografi sinar-X. Ig, Immunoglobulin; MHC, kompleks
histocompatibility utama. (Dari Bjorkman PJ: pembatasan MHC dalam tiga dimensi: pandangan interaksi reseptor sel T / ligan. Cell
89: 167-170, 1997. © Cell Press; dengan izin.)

GAMBAR 4-8 Pengakuan kompleks peptida-MHC oleh reseptor antigen sel T. Diagram pita ini diambil dari struktur kristal
bagian ekstraseluler kompleks peptida-MHC yang terikat pada TCR yang spesifik untuk peptida yang ditampilkan oleh molekul
MHC. Peptida dapat terlihat melekat pada celah di bagian atas molekul MHC, dan satu residu peptida menghubungi daerah V dari
suatu TCR. Struktur molekul MHC dan fungsinya sebagai protein tampilan peptida dijelaskan dalam Bab 3. β2m, β2-Microglobulin;
MHC, kompleks histocompatibility utama; TCR, reseptor sel T. (Dari Bjorkman PJ: pembatasan MHC dalam tiga dimensi: pandangan
interaksi reseptor sel T / ligan. Cell 89: 167-170, 1997. © Cell Press; dengan izin.)
Selain itu, aktivasi sel T membutuhkan keterlibatan molekul koreceptor CD4 atau CD8, yang mengenali
bagian nonpolimorfik molekul MHC dan juga terlibat dalam transduksi sinyal. Fungsi protein dan coreceptors
terkait TCR ini dibahas dalam Bab 5.
Pengenalan antigen oleh reseptor limfosit B dan T berbeda dalam cara yang penting (Gambar 4-9).
Antibodi dapat mengikat berbagai jenis struktur kimia, sering dengan afinitas tinggi, yang mengapa antibodi
dapat mengikat dan menetralkan berbagai mikroba dan racun yang mungkin hadir pada konsentrasi rendah
dalam sirkulasi atau di lumen organ mukosa. TCR hanya mengenali kompleks peptida-MHC dan mengikat ini
dengan afinitas yang relatif rendah, yang mungkin mengapa pengikatan sel T ke APC harus diperkuat oleh
molekul adhesi permukaan sel tambahan (lihat Bab 5). Struktur tiga dimensi dari TCR mirip dengan yang ada
di wilayah Fab dari sebuah molekul Ig. Tidak seperti dalam antibodi, kedua rantai TCR berlabuh di membran
plasma; TCR tidak diproduksi dalam bentuk yang disekresikan dan tidak mengalami perpindahan isotipe atau
pematangan afinitas selama kehidupan sel T.
Dari 5% hingga 10% sel T pada reseptor ekspres tubuh yang tersusun atas rantai gamma (γ) dan delta (δ),
yang secara struktural mirip dengan TCR αβ tetapi memiliki kekhususan yang sangat berbeda. The γδ TCR
dapat mengenali berbagai antigen protein dan nonprotein, biasanya tidak ditampilkan oleh molekul MHC
klasik. Sel T yang mengekspresikan γδ TCR melimpah di epitel. Pengamatan ini menunjukkan bahwa γδ Sel T
mengenali mikroba yang biasanya ditemui di permukaan epitel, tetapi baik spesifisitas maupun fungsi sel T ini
tidak terbentuk dengan baik. Subpopulasi sel T yang lain, terdiri kurang dari 5% dari semua sel T, menunjukkan
penanda sel pembunuh alami dan disebut sel T pembunuh alami (sel NK-T). Sel NK-T mengekspresikan αβ
TCRs dengan keragaman terbatas, dan mereka mengenali antigen lipid yang ditampilkan oleh molekul-molekul
I MHC-seperti kelas nonpolymorphic. Fungsi sel NK-T juga tidak dipahami dengan baik.]
PEMBANGUNAN REPERTOIR IMUNUN
Sekarang setelah kita membahas struktur reseptor antigen B dan limfosit T dan bagaimana reseptor-
reseptor ini mengenali antigen, pertanyaan berikutnya adalah bagaimana keragaman besar reseptor-reseptor ini
dihasilkan. Ketika hipotesis seleksi klonal diprediksi, ada banyak klon limfosit dengan spesifisitas yang
berbeda, mungkin sebanyak 109, dan klon ini muncul sebelum pertemuan dengan antigen. Tidak ada gen yang
cukup dalam genom manusia untuk setiap reseptor yang mungkin untuk dikodekan oleh gen yang berbeda.
Bahkan, sistem kekebalan tubuh telah mengembangkan mekanisme untuk menghasilkan reseptor antigen yang
sangat beragam dari sejumlah gen warisan terbatas, dan generasi reseptor yang beragam sangat terkait erat
dengan proses pematangan limfosit B dan T.

GAMBAR 4-9 Fitur pengenalan antigen oleh imunoglobulin dan reseptor antigen sel T. Kesamaan dan perbedaan penting dari
molekul Ig dan TCR, reseptor antigen B dan limfosit T, masing-masing.
Proses pematangan limfosit pertama menghasilkan sejumlah besar sel masing-masing dengan reseptor
antigen yang berbeda dan kemudian mempertahankan sel-sel dengan reseptor yang berguna. Generasi sebanyak
beberapa miliar reseptor adalah proses molekuler yang tidak dapat dipengaruhi oleh apa yang diakui oleh
reseptor, karena pengenalan hanya dapat terjadi setelah pembentukan dan ekspresi reseptor. Begitu antigen ini
reseptor diekspresikan pada pengembangan limfosit, proses seleksi ikut bermain yang mempromosikan
kelangsungan hidup sel dengan reseptor yang dapat mengenali antigen, seperti antigen mikroba, dan
menghilangkan sel yang tidak dapat mengenali antigen dalam individu atau yang berpotensi menyebabkan
bahaya. Kami membahas masing-masing acara ini selanjutnya.
AWALIA
PERKEMBANGAN LIMFOSIT
Perkembangan limfosit dari sel punca sumsum tulang melibatkan komitmen progenitor hematopoietik
terhadap garis turunan B atau T, proliferasi progenitor ini, penataan ulang dan ekspresi gen reseptor antigen,
dan peristiwa seleksi untuk mempertahankan dan memperluas sel yang mengekspresikan antigen yang
berpotensi bermanfaat. reseptor (Gambar 4-10). Langkah-langkah ini umum untuk limfosit B dan T, meskipun
limfosit B matang di sumsum tulang dan limfosit T matang di timus. Setiap proses yang terjadi selama
pematangan limfosit memainkan peran khusus dalam pembentukan repertoar limfosit.

GAMBAR 4-10 Langkah-langkah dalam pematangan limfosit. Selama pematangan mereka, limfosit B dan T melalui siklus
proliferasi dan ekspresi protein reseptor antigen oleh rekombinasi gen. Sel-sel yang gagal mengekspresikan reseptor fungsional utuh
mati oleh apoptosis, karena mereka tidak menerima sinyal kelangsungan hidup yang diperlukan. Pada akhir proses, sel-sel menjalani
seleksi positif dan negatif. Limfosit yang ditunjukkan mungkin B atau sel T.
- Pematangan progenitor limfoid umum di sumsum tulang menghasilkan komitmen terhadap sel B atau garis
sel T. Komitmen ini dikaitkan dengan pengaktifan beberapa tran khusus garis keturunan
faktor-faktor skrip dan peningkatan aksesibilitas gen Ig dan TCR ke mesin rekombinasi gen, seperti yang
dijelaskan kemudian.
- Mengembangkan limfosit mengalami proliferasi pada beberapa tahap selama pematangannya. Proliferasi
limfosit berkembang diperlukan untuk memastikan bahwa jumlah sel yang memadai akan tersedia untuk
mengekspresikan reseptor antigen dan matang menjadi limfosit yang berfungsi secara fungsional.
Kelangsungan hidup dan proliferasi prekursor limfosit awal dirangsang terutama oleh faktor pertumbuhan
interleukin-7 (IL-7), yang diproduksi oleh sel-sel stroma di sumsum tulang dan timus. IL-7 mempertahankan
 dan memperluas jumlah progenitor limfosit (progenitor sel T pada manusia, dan keduanya
Prekursor B dan T sel pada tikus) sebelum mereka mengekspresikan reseptor antigen, sehingga
menghasilkan sejumlah besar sel di mana beragam reseptor antigen dapat dihasilkan. Ekspansi proliferasi
yang lebih besar dari garis keturunan B dan sel T terjadi setelah limfosit berkembang telah menyelesaikan
penataan ulang reseptor antigen reseptor pertama dan menyusun reseptor preantigen (dijelaskan kemudian).
Langkah ini adalah pos pemeriksaan kontrol kualitas dalam limfosit pengembangan yang menjamin
pelestarian sel dengan reseptor fungsional.
- Limfosit dipilih pada beberapa langkah selama pematangan mereka untuk mempertahankan kekhususan
yang bermanfaat. Seleksi didasarkan pada ekspresi komponen reseptor antigen utuh dan apa yang mereka
kenali. Sebagaimana dibahas kemudian, banyak upaya untuk menghasilkan reseptor antigen gagal karena
kesalahan selama proses rekombinasi gen. Oleh karena itu, pos pemeriksaan diperlukan di mana hanya sel
dengan reseptor antigen fungsional utuh yang dipilih untuk bertahan hidup dan berproliferasi.
Prelymphocytes dan limfosit belum matang yang gagal untuk mengekspresikan reseptor antigen mati oleh
apoptosis (lihat Gambar 4-10). Pengaturan ulang gen dalam limfosit berkembang secara acak menghasilkan
reseptor antigen dengan kekhususan yang sangat beragam. Beberapa di antaranya mungkin tidak mampu
mengenali antigen dalam individu — misalnya, jika TCR terjadi spesifik untuk molekul MHC yang tidak
ada pada individu. Untuk melestarikan sel T yang akan fungsional, sel T yang belum matang dipilih untuk
bertahan hidup hanya jika mereka mengenali molekul MHC di timus. Proses ini, yang disebut seleksi positif,
memastikan bahwa sel-sel yang matang sempurna akan mampu mengenali antigen yang ditampilkan oleh
molekul MHC yang sama pada APC (yang merupakan satu-satunya molekul MHC yang biasanya ditemukan
sel-sel ini). Reseptor antigen lain dapat mengenali peptida protein diri. Oleh karena itu, proses seleksi lain
diperlukan untuk menghilangkan limfosit yang berpotensi berbahaya ini dan mencegah perkembangan
respons imun otomatis. Mekanisme yang menghilangkan B dan T limfosit yang sangat self-reaktif
merupakan seleksi negatif. Proses pematangan dan seleksi limfosit B dan T berbagi beberapa fitur penting
tetapi juga berbeda dalam banyak hal. Kami mulai dengan peristiwa sentral yang umum untuk kedua garis
keturunan: rekombinasi dan ekspresi gen reseptor antigen.
PRODUKSI RESEPTOR ANTIGEN BERAGAM
Pembentukan gen fungsional yang mengkode reseptor antigen B dan T limfosit diprakarsai oleh
rekombinasi somatik segmen gen yang mengkode wilayah variabel reseptor, dan keragaman dihasilkan selama
proses ini
GEN RESEPTOR ANTIGEN YANG DIWARISKAN
Sel punca hematopoietik di sumsum tulang dan progenitor limfoid awal mengandung gen Ig dan TCR
dalam konfigurasi herediter atau germline. Dalam konfigurasi ini, lokus rantai-berat dan lightchain Ig dan rantai
TCR α-dan rantai β masing-masing mengandung beberapa segmen variabel (V) segmen gen, berjumlah sekitar
30-45, dan satu atau beberapa daerah konstan (C) gen (Gambar 4-11). Antara gen V dan C adalah kelompok
beberapa sekuens pengkodean pendek yang disebut keragaman (D) dan penggabungan (J) segmen gen. (Semua
lokus gen reseptor antigen mengandung V, J, dan gen C, tetapi hanya rantai-rantai Ig dan rantai TCR β-rantai
juga mengandung segmen gen D).
 REKOMBINASI SOMATIK DAN EKSPRESI GEN RESEPTOR ANTIGEN
Komitmen dari nenek moyang limfosit menjadi limfosit B dikaitkan dengan rekombinasi segmen gen
yang dipilih secara acak di lokus rantai-berat Ig-segmen gen D pertama dengan satu segmen J, diikuti oleh
penataan ulang segmen V ke fusi yang menyatu. Kompleks DJ (Gambar 4-12). Dengan demikian, sel B yang
berkomitmen tetapi masih berkembang sekarang memiliki ekson VDJ rekombinasi dalam lokus rantai berat.
Gen ini ditranskripsikan, dan dalam transkrip primer, ekson VDJ disambung ke ekson C-region dari rantai μ,
paling banyak 5 ′ region C, untuk membentuk μ messenger RNA (mRNA) lengkap. Μ mRNA diterjemahkan
untuk menghasilkan μ rantai berat, yang merupakan protein Ig pertama yang disintesis selama pematangan sel
B.
Pada dasarnya, urutan yang sama dari rekombinasi DNA dan penyambungan RNA mengarah pada
produksi rantai ringan dalam sel B, kecuali bahwa rantai-rantai ringan tidak memiliki segmen D, sehingga
ekson V region mengkombinasikan kembali secara langsung dengan segmen J. Penataan ulang
TCR α-rantai dan β-rantai gen dalam limfosit T adalah mirip dengan rantai Ig L dan H, masing-masing.

GAMBAR 4-11 Organisasi germinal dari lokus reseptor gen antigen. Dalam germline, warisan gen reseptor antigen yang diwariskan
mengandung segmen pengkode (ekson, ditampilkan sebagai blok berwarna dengan berbagai ukuran) yang dipisahkan oleh segmen
yang tidak diekspresikan (intron, ditampilkan sebagai bagian abu-abu). Setiap immunoglobulin (Ig) rantai berat konstan (C) daerah
dan T cell receptor (TCR) wilayah C terdiri dari beberapa ekson yang menyandikan domain dari wilayah C; organisasi ekson Cμ
dalam lokus rantai berat Ig ditampilkan sebagai contoh. Diagram menggambarkan lokus reseptor antigen pada manusia; organisasi
dasarnya sama di semua spesies, meskipun urutan dan jumlah segmen gen yang tepat dapat bervariasi. Ukuran segmen dan jarak
antara mereka tidak tertarik pada skala. D, Keanekaragaman; J, bergabung; L, urutan pemimpin (hamparan kecil nukleotida yang
mengkodekan peptida yang memandu protein melalui retikulum endoplasma dan dibelah dari protein matang); V, variabel.
 GAMBAR 4-12 Rekombinasi dan ekspresi gen immunoglobulin (Ig). Ekspresi dari rantai berat Ig melibatkan dua peristiwa
rekombinasi gen (D-J bergabung, diikuti dengan bergabung dengan wilayah V ke kompleks DJ, dengan penghapusan dan hilangnya
segmen gen intervening). Gen rekombinan ditranskripsikan, dan kompleks VDJ disambung ke ekskavasi daerah C dari RNA rantai
berat pertama (yang μ), untuk menghasilkan μ mes senger RNA (mRNA). MRNA diterjemahkan untuk menghasilkan μ protein rantai
berat. Rekombinasi gen reseptor antigen lainnya — yaitu, rantai ringan Ig dan rantai reseptor sel T (TCR) α dan β — pada dasarnya
mengikuti urutan yang sama, kecuali bahwa dalam loki yang tidak memiliki segmen D (rantai ringan Ig dan TCR α), gen V
mengkombinasikan kembali secara langsung dengan segmen gen J.
MEKANISME V (D) J REKOMBINASI
Rekombinasi somatik V dan J, atau V, D, dan J, segmen gen dimediasi oleh enzim spesifik limfoid,
rekombase VDJ, dan enzim tambahan, yang sebagian besar tidak spesifik limfosit dan terlibat dalam perbaikan
ganda. istirahat DNA -stranded diperkenalkan oleh rekombinase. Rekombinasi VDJ terdiri dari protein
pengaktifan-pengaktifan ulang gen 1 dan 2 (RAG-1 dan RAG-2). Ia mengenali sekuens DNA yang mengapit
semua reseptor antigen V, D, dan J segmen gen. Sebagai hasil dari pengenalan ini, rekombinase membawa dua
segmen gen Ig atau TCR berdekatan dan memotong DNA di situs tertentu. Istirahat DNA kemudian diperbaiki
oleh ligase, menghasilkan ekson VJ atau VDJ rekombinasi lengkap tanpa segmen DNA intervening (lihat
Gambar 4-12). Rekombinasi VDJ diekspresikan hanya pada B dan T limfosit yang belum matang. Meskipun
enzim yang sama dapat memediasi rekombinasi semua gen Ig dan TCR, gen-gen rantai-berat dan gen-gen
rantai-longgar utuh diatur kembali dan diekspresikan hanya dalam sel B, dan gen TCR α dan β diatur kembali
dan diekspresikan hanya dalam sel T. Kekhususan garis keturunan penyusunan ulang gen reseptor tampaknya
terkait dengan ekspresi faktor transkripsi spesifik garis keturunan. Dalam sel B, faktor transkripsi spesifik garis
keturunan "membuka" lokus gen Ig pada tingkat kromatin tetapi bukan lokus TCR, sedangkan dalam
mengembangkan sel T, regulator transkripsi membantu membuka lokus TCR tetapi bukan lokus Ig. The
"terbuka" loci adalah orang-orang yang dapat diakses oleh rekombinase.
 GENERASI KEANEKARAGAMAN IG DAN TCR
Keanekaragaman reseptor antigen dihasilkan oleh penggunaan kombinasi yang berbeda dari segmen gen
V, D, dan J dalam berbagai klon limfosit (disebut keragaman kombinatorial) dan bahkan lebih oleh perubahan
urutan nukleotida yang diperkenalkan pada persimpangan rekombinasi V, D, dan segmen gen J (disebut
keragaman junctional) (Gambar 4-13). Keragaman kombinatorial dibatasi oleh jumlah segmen gen V, D, dan J
yang tersedia, tetapi keanekaragaman junctional hampir tidak terbatas. Keragaman junctional dihasilkan oleh
tiga mekanisme, yang menghasilkan lebih banyak urutan daripada yang ada di gen germline:
- Eksonuklease dapat menghilangkan nukleotida dari segmen gen V, D, dan J di lokasi rekombinasi.
- Enzim limfosit spesifik yang disebut terminal deoxyribonucleotidyl transferase (TdT) mengkatalisis
penambahan acak nukleotida yang bukan bagian dari gen germline ke persimpangan antara segmen V dan D
dan segmen D dan J, membentuk apa yang disebut daerah N.
- Selama tahap peralihan dalam proses rekombinasi V (D) J, sebelum patah pada DNA diperbaiki,
overhanging urutan DNA dapat dihasilkan yang kemudian diisi, membentuk nukleotida P, memperkenalkan
lebih banyak variabilitas di lokasi rekombinasi .
Sebagai hasil dari mekanisme ini, urutan nukleotida di lokasi rekombinasi V (D) J pada gen antibodi atau
TCR dalam satu klon limfosit berbeda dari urutan di V (D) J situs antibodi atau molekul TCR yang dibuat oleh
setiap klon lainnya. Sekuen junctional ini dan segmen D dan J menyandi asam amino loop CDR3, yang
disebutkan sebelumnya sebagai variabel CDR paling banyak dan yang paling penting untuk pengenalan
antigen. Dengan demikian, keragaman junctional memaksimalkan variabilitas di bagian antibodi dan TCR yang
mengenali antigen. Dalam proses menciptakan keragaman junctional, banyak gen dapat diproduksi dengan
urutan yang tidak dapat mengkode protein dan oleh karena itu tidak berguna. Ini adalah harga yang dibayar oleh
sistem kekebalan untuk menghasilkan keragaman luar biasa. Risiko menghasilkan gen nonfungsional juga
adalah mengapa proses pematangan limfosit mengandung pos-pos pemeriksaan di mana hanya sel-sel dengan
reseptor yang berguna yang dipilih untuk bertahan hidup.
DYTA
PEMATANGAN DAN SELEKSI B LIMFOSIT
Pematangan limfosit B terjadi terutama di sumsum tulang (Gambar 4-14). Progenitor yang berkomitmen
pada garis sel B berproliferasi, sehingga menimbulkan sejumlah besar prekursor sel B, yang disebut sel pro-B.
Pematangan selanjutnya melibatkan ekspresi dan seleksi gen reseptor antigen.
Langkah Awal dalam Maturasi Sel B
The Ig locator heavychain menata ulang pertama, dan hanya sel yang mampu membuat Ig μ rantai berat
protein yang dipilih untuk bertahan hidup dan menjadi sel pra-B. Sel pra-B ditentukan oleh keberadaan protein
rantai-berat Ig μ, terutama di sitoplasma. Beberapa μ protein diekspresikan pada permukaan sel dalam
hubungan dengan dua protein invarian lain, yang disebut rantai pengganti pengganti karena mereka menyerupai
rantai ringan dan berhubungan dengan μ rantai berat. Kompleks rantai μ dan rantai kecil pengganti
berhubungan dengan molekul pensinyalan Igα dan Igβ untuk membentuk pra-B cell receptor (pra-BCR)
kompleks. Peran Kompleks Pra-BCR dalam Maturasi Sel B. Pra-BCR yang dibentuk berfungsi fungsi penting
dalam pematangan sel B:
- Sinyal dari kompleks pra-BCR mempromosikan kelangsungan hidup dan proliferasi sel garis keturunan B
yang telah membuat pengaturan ulang produktif di lokus rantai H-H. Ini adalah pos pemeriksaan pertama
dalam pengembangan sel B, dan ia memilih dan memperluas sel pra-B yang mengekspresikan rantai μ berat
fungsional (yang merupakan komponen penting dari pra-BCR dan BCR). Sel pra-B yang membuat out-of-
frame (tidak produktif) penataan ulang di lokus rantai berat gagal untuk membuat protein μ, tidak dapat
mengekspresikan preBCR atau menerima sinyal pra-BCR, dan mati oleh kematian sel terprogram
(apoptosis).
- Sinyal kompleks pra-BCR untuk mematikan rekombinasi gen rantai-berat Ig pada kromosom kedua, karena
setiap sel B dapat mengekspresikan rantai berat Ig dari hanya satu dari dua alel induk yang diwariskan.
Proses ini disebut eksklusi alelik, dan membantu memastikan bahwa setiap sel hanya dapat mengekspresikan
reseptor spesifisitas tunggal.
- Pra-BCR memicu rekombinasi pada lokus rantai-ringan Ig κ yang mengarah ke produksi protein κ. Rantai
cahaya λ hanya dihasilkan jika rantai lokus yang terurai kembali gagal mengekspresikan protein fungsional
atau jika rantai k menghasilkan reseptor reaktif self-reaktif yang berbahaya dan harus dihilangkan, oleh
proses yang disebut pengeditan reseptor (lihat Bab 9).

GAMBAR 4-13 Mekanisme keragaman reseptor antigen. Keanekaragaman dalam imunoglobulin dan reseptor sel T dihasilkan oleh
kombinasi acak dari segmen gen V, D, dan J, yang dibatasi oleh jumlah segmen ini dan dengan penghapusan dan penambahan
nukleotida pada sambungan V-J atau V-D-J, yang hampir tidak terbatas. Jumlah segmen gen mengacu pada jumlah rata-rata dari gen
fungsional (yang diketahui diekspresikan sebagai RNA atau protein) pada manusia. Keragaman junctional memaksimalkan variasi di
wilayah CDR3 dari protein reseptor antigen, karena CDR3 mencakup persimpangan di lokasi rekombinasi V-J dan V-D-J. Kontribusi
yang diperkirakan dari mekanisme ini untuk ukuran potensial dari B matang dan repertoar sel T ditampilkan. Juga, keragaman
ditingkatkan oleh kemampuan rantai berat dan ringan Ig yang berbeda, atau rantai reseptor sel T berbeda (TCR) α dan β, untuk
bergabung dalam sel yang berbeda, membentuk reseptor yang berbeda (tidak ditunjukkan). Meskipun batas atas pada jumlah protein
imunoglobulin (Ig) dan TCR yang dapat diekspresikan sangat besar, setiap individu mengandung hanya pada urutan 107 klon sel B
dan sel T dengan kekhususan dan reseptor yang berbeda; dengan kata lain, hanya sebagian kecil dari potensi repertoar yang benar-
benar dapat diekspresikan. (Dimodifikasi dari Davis MM, Bjorkman PJ:
Gen reseptor antigen sel-T dan pengenalan sel-T. Nature 334: 395-402, 1988.)
 GAMBAR 4-14 Langkah-langkah dalam pematangan dan seleksi limfosit B. Pematangan limfosit B berlangsung melalui langkah-
langkah berurutan, yang masing-masing ditandai oleh perubahan tertentu dalam ekspresi gen immunoglobulin (Ig) dan dalam pola
ekspresi protein Ig. Pada transisi dari pro-B ke pra-B atau pra-B ke sel B yang belum matang, kegagalan untuk mengekspresikan
rantai berat Ig atau protein rantai ringan Ig, masing-masing, menghasilkan kematian sel dengan jalur default dari apoptosis. Pra-BCR
terdiri dari protein Ig μ yang berhubungan dengan membran yang melekat pada dua protein lain yang disebut rantai pengganti
pengganti karena mereka mengambil tempat rantai cahaya dalam molekul Ig lengkap. BCR, reseptor sel B; mRNA, messenger RNA.
Peran Kompleks Pra-BCR dalam Maturasi Sel B.
Pra-BCR yang dibentuk berfungsi fungsi penting dalam pematangan sel B:
- Sinyal dari kompleks pra-BCR mempromosikan kelangsungan hidup dan proliferasi sel garis keturunan B
yang telah membuat pengaturan ulang produktif di lokus rantai H-H. Ini adalah pos pemeriksaan pertama
dalam pengembangan sel B, dan ia memilih dan memperluas sel pra-B yang mengekspresikan rantai μ berat
fungsional (yang merupakan komponen penting dari pra-BCR dan BCR). Sel pra-B yang membuat out-of-
frame (tidak produktif) penataan ulang di lokus rantai berat gagal untuk membuat protein μ, tidak dapat
mengekspresikan preBCR atau menerima sinyal pra-BCR, dan mati oleh kematian sel terprogram
(apoptosis).
- Sinyal kompleks pra-BCR untuk mematikan rekombinasi gen rantai-berat Ig pada kromosom kedua, karena
setiap sel B dapat mengekspresikan rantai berat Ig dari hanya satu dari dua alel induk yang diwariskan.
Proses ini disebut eksklusi alelik, dan membantu memastikan bahwa setiap sel hanya dapat mengekspresikan
reseptor spesifisitas tunggal.
- Pra-BCR memicu rekombinasi pada lokus rantai-ringan Ig κ yang mengarah ke produksi protein κ. Rantai
cahaya λ hanya dihasilkan jika rantai lokus yang terurai kembali gagal mengekspresikan protein fungsional
atau jika rantai k menghasilkan reseptor reaktif self-reaktif yang berbahaya dan harus dihilangkan, oleh
proses yang disebut pengeditan reseptor (lihat Bab 9). Rantai cahaya fungsional mana pun yang dihasilkan
asosiasi dengan rantai μ untuk membentuk reseptor antigen IgM terkait membran komplit. Reseptor ini
kembali memberikan sinyal yang mempromosikan kelangsungan hidup, sehingga menjaga sel-sel yang
mengekspresikan reseptor antigen lengkap, pos pemeriksaan kedua selama pematangan. Sinyal dari reseptor
antigen juga mematikan produksi enzim rekombinase dan rekombinasi lebih lanjut pada lokus rantai cahaya.
Akibatnya, setiap sel B menghasilkan salah satu κ atau satu rantai cahaya λ dari salah satu alel induk yang
diwariskan. Kehadiran dua set gen rantai ringan yang diwariskan hanya meningkatkan peluang untuk
menyelesaikan rekombinasi gen dan ekspresi reseptor yang sukses.
 Penyempurnaan Maturasi Sel B
Limfosit B pengekspres IgM adalah sel B yang belum matang. Kematangan selanjutnya dapat terjadi di
sumsum tulang atau setelah meninggalkan sumsum tulang dan masuk ke limpa. Langkah pematangan akhir
melibatkan koekspresi IgD dengan IgM, yang terjadi karena dalam setiap sel B, VDJ rantai-rekombinasi berat
dapat disambung ke Cμ atau Cδ dalam transkrip RNA primer, masing-masing menimbulkan μ atau δ mRNA.
Kita tahu bahwa kemampuan sel B untuk merespon antigen mengelupaskan bersama-sama dengan koekspresi
IgM dan IgD, tetapi mengapa kedua kelas reseptor diperlukan tidak diketahui. Sel IgM + IgD + adalah sel B
matang, mampu merespon antigen dalam jaringan limfoid perifer.
Pemilihan Sel B Dewasa
Pengembangan sel B dipilih secara positif berdasarkan pada ekspresi reseptor antigen lengkap, dan bukan
pada kekhususan pengenalan sel-sel ini. (Hal ini pada dasarnya berbeda dalam sel T maturing, seperti yang
dibahas kemudian.) Repertoar sel B selanjutnya dibentuk oleh seleksi negatif. Dalam proses ini, jika sel B yang
belum matang mengikat antigen di sumsum tulang dengan afinitas tinggi, ia mungkin mengekspresikan kembali
enzim rekombinase VDJ, menjalani rekombinasi VJ rekombinan ringan, menghasilkan rantai cahaya yang
berbeda, dan dengan demikian mengubah spesifisitas dari reseptor antigen, proses yang disebut pengeditan
reseptor. Beberapa sel B yang menghadapi antigen di sumsum tulang dapat mati oleh apoptosis, juga dikenal
sebagai penghapusan. Antigen yang paling sering ditemukan di sumsum tulang adalah antigen diri yang banyak
diekspresikan di seluruh tubuh (yaitu, di mana-mana), seperti protein darah, dan molekul membran umum
untuk semua sel. Oleh karena itu seleksi negatif menghilangkan sel-sel yang berpotensi berbahaya yang dapat
mengenali dan bereaksi terhadap antigen diri di mana-mana.
Proses rekombinasi gen Ig adalah acak dan tidak dapat secara inheren bias terhadap pengakuan mikroba.
Namun, reseptor yang dihasilkan mampu mengenali antigen dari banyak mikroba yang bervariasi yang harus
dilawan oleh sistem kekebalan. Repertoar limfosit B dipilih secara positif untuk ekspresi reseptor utuh dan
dipilih secara negatif terhadap pengenalan kuat antigen diri. Apa yang tersisa setelah proses seleksi ini adalah
kumpulan besar sel B matang, yang secara kebetulan termasuk sel yang mampu mengenali hampir semua
antigen mikroba yang mungkin ditemui.
Subset Sel B Dewasa
Sel B yang paling matang disebut sel folikel B karena mereka ditemukan dalam kelenjar getah bening dan
limpa. Sel B marjinal-zona, yang ditemukan di margin folikel limpa, berkembang dari progenitor yang sama
(sel pro-B) seperti halnya sel folikel B. Limfosit B-1, populasi berbeda yang ditemukan di organ limfoid dan
rongga peritoneum, dapat berkembang lebih awal dan dari prekursor yang berbeda. Peran subset sel B ini dalam
imunitas humoral dijelaskan dalam Bab 7.
PEMATANGAN DAN PEMILIHAN LIMFOSIT T
Progenitor sel T bermigrasi dari sumsum tulang ke thymus, di mana seluruh proses pematangan terjadi
(Gambar 4-15). Proses pematangan limfosit T memiliki beberapa fitur unik, terutama terkait dengan spesifitas
subset yang berbeda dari sel T untuk peptida yang ditampilkan oleh berbagai kelas molekul MHC.
Langkah Awal dalam T Cell Maturation
Progenitor yang paling sedikit berkembang di thymus disebut sel pro-T atau sel T-negatif ganda (atau
timbunan ganda) karena mereka tidak mengekspresikan CD4 atau CD8. Sel-sel ini berkembang jumlahnya
terutama di bawah pengaruh IL-7 yang diproduksi di timus. Rekombinasi gen TCR β, dimediasi oleh
rekombinase VDJ, terjadi pada beberapa sel-sel negatif ganda. (Sel T undergo mengalami rekombinasi serupa
yang melibatkan TCR γ dan δ loci, tetapi mereka milik garis keturunan yang berbeda dan tidak dibahas lebih
lanjut.) Jika rekombinasi VDJ berhasil di salah satu dari dua lokus yang diwariskan dan protein rantai TCR β
disintesis, ini diekspresikan pada permukaan sel dalam hubungan dengan protein invarian yang disebut pra-Tα,
untuk membentuk kompleks pra-T-TCR sel pra-T. Jika rekombinasi di salah satu dari dua lokus yang
diwariskan tidak berhasil, rekombinasi akan terjadi pada lokus yang lain. Jika itu juga gagal dan lengkap
Rantai TCR β tidak diproduksi dalam sel pro-T, sel mati.

GAMBAR 4-15 Langkah-langkah dalam pematangan dan pemilihan major histocompatibility complex (MHC) - limfosit T
yang terbatas. Pematangan limfosit T dalam hasil thymus melalui langkah-langkah berurutan sering didefinisikan oleh ekspresi dari
CD4 dan CD8 co-receptors. The T cell receptor (TCR) rantai β pertama kali diekspresikan pada tahap pra-T-sel double-negatif, dan
reseptor sel T lengkap dinyatakan dalam sel-sel positif ganda. Pra-TCR terdiri dari rantai TCR β yang terkait dengan protein yang
disebut pre-Tα. Kematangan memuncak pada pengembangan CD4 + dan CD8 + sel T positif tunggal. Seperti halnya sel B, kegagalan
untuk mengekspresikan reseptor antigen pada setiap tahap menyebabkan kematian sel oleh apoptosis.
Kompleks pra-TCR memberikan sinyal intraseluler setelah dirakit, mirip dengan sinyal dari kompleks
pra-BCR dalam mengembangkan sel B. Sinyal-sinyal ini mempromosikan kelangsungan hidup, proliferasi, dan
rekombinasi gen TCR α dan menghambat rekombinasi VDJ pada lokus rantai TCR β kedua (eksklusi alelik).
Kegagalan untuk mengekspresikan rantai α dan TCR lengkap kembali menyebabkan kematian sel. Sel yang
hidup mengekspresikan TCR αβ lengkap dan coreceptors CD4 dan CD8; sel-sel ini disebut sel T double-positif
(atau thymocytes double-positif).
Pemilihan Sel T Dewasa
Klon berbeda dari sel T double-positif mengekspresikan TCRs αβ yang berbeda. Jika TCR sel T
mengenali molekul MHC di timus, yang harus merupakan molekul MHC diri yang menampilkan peptida
mandiri, dan jika interaksi memiliki afinitas rendah atau sedang, sel T ini dipilih untuk bertahan hidup. Sel T
yang tidak mengenali molekul MHC di timus mati oleh apoptosis; Sel-sel T ini tidak akan berguna karena
mereka tidak akan mampu melihat MHC yang menunjukkan antigen terkait sel pada individu tersebut.
Pelestarian diri MHC-dibatasi (yaitu, berguna) sel T adalah proses seleksi positif. Selama proses ini, sel T yang
TCRs mengenali kompleks MHC-peptida kelas I mempertahankan ekspresi CD8, coreceptor yang mengikat
MHC kelas I, dan kehilangan ekspresi CD4, koreceptor khusus untuk molekul MHC kelas II. Sebaliknya, jika
sel T mengenali kompleks MHC-peptida kelas II, sel ini mempertahankan ekspresi CD4 dan kehilangan
ekspresi CD8. Jadi, apa yang muncul adalah sel T positif tunggal (atau thymocytes tunggal positif), yang
merupakan pembatasan CD8 + kelas I MHC atau pembatasan CD4 + kelas II MHC. Selama seleksi positif, sel
T juga menjadi terpisah secara fungsional: sel T CD8 + mampu menjadi CTL pada aktivasi, dan sel CD4 +
adalah sel penolong.
T-sel T yang belum dewasa dan bereputasi ganda yang reseptornya sangat mengenali kompleks MHC-
peptida di timus mengalami apoptosis. Ini adalah proses seleksi negatif, dan ini berfungsi untuk menghilangkan
limfosit T yang dapat bereaksi dengan cara berbahaya melawan protein diri yang diekspresikan dalam timus.
Beberapa protein diri ini hadir di seluruh tubuh, dan yang lain adalah protein jaringan yang diekspresikan dalam
sel epitel thymus oleh mekanisme khusus, seperti yang dibahas dalam Bab 9 dalam konteks toleransi diri.
Mungkin tampak mengejutkan bahwa baik seleksi positif dan seleksi negatif dimediasi oleh pengakuan
dari kumpulan self-peptida MHC-self sendiri yang sama di thymus. (Perhatikan bahwa thymus hanya dapat
mengandung molekul MHC diri dan peptida diri; peptida mikroba terkonsentrasi di jaringan limfoid perifer dan
cenderung
tidak masuk ke timus.) Penjelasan yang mungkin untuk hasil yang berbeda ini adalah bahwa jika reseptor
antigen dari sel T mengenali kompleks self-peptida MHC diri dengan aviditas rendah, hasilnya adalah seleksi
positif, sedangkan pengenalan aviditas tinggi mengarah ke negatif. pilihan. Pengenalan aviditas tinggi terjadi
jika sel T mengekspresikan TCR yang memiliki afinitas tinggi untuk peptida diri itu dan jika peptida diri hadir
di timus pada konsentrasi yang lebih tinggi daripada peptida yang dipilih secara positif. Jika sel T seperti itu
dibiarkan dewasa, pengenalan antigen dapat menyebabkan respon imun berbahaya terhadap antigen diri di
pinggiran, sehingga sel T harus dihilangkan.
Seperti sel B, kemampuan sel T untuk mengenali antigen asing bergantung pada generasi repertoar
reseptor antigen klonal yang sangat beragam. Sel T yang lemah mengenali antigen diri di timus mungkin sangat
mengenali dan merespon antigen mikroba asing di perifer.
RINGKASAN
- Dalam sistem imun adaptif, molekul yang bertanggung jawab untuk pengenalan spesifik antigen adalah
antibodi dan reseptor antigen sel T.
- Antibodi (juga disebut imunoglobulin) dapat diproduksi sebagai reseptor membran limfosit B dan sebagai
protein yang disekresikan oleh sel B yang diinduksi antigen yang telah berdiferensiasi menjadi sel plasma
yang mensekresi antibodi. Antibodi yang disekresikan adalah molekul efektor imunitas humoral, yang
mampu menetralkan mikroba dan racun mikroba dan menghilangkannya dengan mengaktifkan berbagai
mekanisme efektor.
- Reseptor sel T (TCR) adalah reseptor membran dan tidak disekresikan.
- Struktur inti antibodi terdiri dari dua rantai berat identik dan dua rantai ringan identik, membentuk kompleks
yang terkait dengan disulfida. Setiap rantai terdiri dari variabel (V) wilayah, yang merupakan bagian yang
mengakui antigen, dan konstan (C) daerah, yang menyediakan stabilitas struktural dan, dalam rantai berat,
melakukan fungsi efektor antibodi. Wilayah V dari satu rantai berat dan satu rantai cahaya bersama
membentuk situs pengikatan antigen, dan dengan demikian struktur inti memiliki dua tempat pengikatan
antigen yang identik.
- Reseptor sel T terdiri dari rantai α dan rantai β. Setiap rantai mengandung satu wilayah V dan satu wilayah
C, dan kedua rantai berpartisipasi dalam pengenalan antigen, yang untuk sebagian besar sel T adalah peptida
yang ditampilkan oleh MHC molekul.
- Bagian V dari molekul imunoglobulin (Ig) dan TCR mengandung segmen hypervariable, juga disebut
complementarity-determination regions (CDRs), yang merupakan wilayah kontak dengan antigen.
- Gen yang mengkodekan reseptor antigen terdiri dari beberapa segmen yang dipisahkan dalam germline dan
dibawa bersama selama pematangan limfosit. Dalam sel B, segmen gen Ig mengalami rekombinasi saat sel-
sel matang di sumsum tulang, dan pada sel T, segmen gen TCR mengalami rekombinasi selama maturasi di
thymus.
- Reseptor dengan kekhususan yang berbeda dihasilkan sebagian oleh kombinasi yang berbeda dari segmen
gen V, D, dan J. Proses rekombinasi memperkenalkan variabilitas dalam urutan nukleotida di situs
rekombinasi dengan menambahkan atau menghapus nukleotida dari persimpangan. Hasil dari variabilitas
yang diperkenalkan ini adalah pengembangan dari beragam repertoar limfosit, di mana klon-klon sel dengan
spesifitas antigen yang berbeda mengekspresikan reseptor yang berbeda dalam urutan dan pengakuan, dan
sebagian besar perbedaan terkonsentrasi pada daerah-daerah rekombinasi gen.
- Selama pematangan mereka, limfosit dipilih untuk bertahan hidup di beberapa pos pemeriksaan; hanya sel
dengan reseptor antigen fungsional lengkap yang diawetkan dan diperluas. Selain itu, limfosit T dipilih
secara positif untuk mengenali antigen peptida yang ditampilkan oleh molekul MHC sendiri dan untuk
memastikan bahwa pengenalan jenis molekul MHC yang tepat sesuai dengan koreceptor yang diawetkan.
- Limfosit yang belum matang yang sangat mengenali antigen-antigen diri dipilih secara negatif dan dicegah
dari menyelesaikan pematangannya, sehingga menghilangkan sel-sel dengan potensi bereaksi dengan cara-
cara berbahaya terhadap jaringan-jaringan tubuh.