POTENSI EKSTRAK METANOL DAUN MANGROVE AVICENNIA MARINA

SEBAGAI ANTI JAMUR CANDIDA ALBICANS DAN ASPERGILLUS NIGER

POTENTIAL OF MANGROVE LEAF METANOL EXTRACTS AVICENNIA

MARINA AS AN ANTI-MUSHROOM CANDIDA ALBICANS AND ASPERGILLUS
NIGER

Fahmi Abbas Saleh Pasallo*1, Usman*2

1
Program Studi Sarjana Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Mulawarman,
Samarinda, Kalimantan Timur, Indonesia
2
Program Studi Pasca Sarjana Pendidikan Kimia, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas
Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur, Indonesia
*2Corresponding Author: sainusman@ymail.com (+6281347105831)
ABSTRAK
Mangrove Aviciennia Marina merupakan mangrove yang tumbuh di pasir berlumpur yang biasa
kita jumpai di daerah air payau, atau daerah muara lautan. Daun mangrove ini biasa digunakan
sebagai obat-obatan tradisional seperti menyembuhkan luka dan lain sebagainya. Tujuan dari
penelitian ini yaitu untuk mengetahui kandungan senyawa dalam daun mangrove Aviciennia
Marina dan efek senyawa tersebut dalam menghambat jamur Candida Albicans dan jamur
Aspergilus Niger. Candida albicans merupakan jamur opportunistik penyebab sariawan, lesi
pada kulit, vulvaginistis, candida pada urin (kandiduria), gastrointestinal kandiasisis yang dapat
menyebabkan gastric ulcer, atau bahkan dapat menjadi komplikasi kanker (Kurniawan, 2009 dan
Mutschler, 1991). Aspergillus Niger merupakan penyebab umum penyakit otomikosis.
Berdasarkan hasil uji fitokimia daun mangrove Aviciennia Marina mengandung flavonoid dan
steroid. Metode yang digunakan dalam uji anti jamur ini yaitu metode gores. Ektraks metanol
daun mangrove dengan varian konsentrasi 1000 ppm, 800 ppm, 600 ppm, 400 ppm, 200 ppm dan
ketoconazole 1000 ppm sebagai kontrol positif. Hasilnya ditumbuhi jamur (tidak ada zona
hambat). Ektraks metanol daun mangrove Aviciennia Marina tidak dapat menghambat
disebabkan oleh rendahnya konsentrasi yang digunakan dan kemungkinan adanya kontaminasi
pada paperdics.
Kata kunci : Avicennia marina, fitokimia, antijamur, Candida albicans, Aspergilus nige, steroid,
flavonoid
ABSTRACT
Aviciennia Mangrove Marina is a mangrove growing in the muddy sand that we usually encounter
in the area of brackish water, estuaries or the sea area. This mangrove leaves are commonly used
as traditional medicines such as wound healing and so forth. The purpose of this study is to
determine the content of compounds in the leaves of mangrove Aviciennia Marina and the effects
of these compounds to inhibit the fungus Candida albicans and Aspergillus niger fungus. Candida
albicans is an opportunistic fungus causes thrush, skin lesions, vulvaginistis, candida in the urine
(candiduria), gastrointestinal kandiasisis which can cause gastric ulcers, or even can be a
complication of cancer (Kurniawan, 2009 and Mutschler, 1991). Aspergillus niger is a common
cause of disease otomikosis. Based on the test results phytochemical Aviciennia Marina mangrove
leaves contain flavonoids and steroids. The method used in this test is the method of anti-fungal
scratch. Ektraks mangrove leaf variants with a concentration of 1000 ppm, 800 ppm, 600 ppm,
400 ppm, 200 ppm and ketoconazole (positive control) 1000 ppm overgrown mushroom (no
inhibition zone). Ektraks mangrove leaves Aviciennia Marina can not hamper due to the low
concentrations used and the possibility of contamination in paperdics.
Keywords: Avicennia marina, phytochemicals, antifungal, Candida albicans, Aspergillus nige,
steroids, flavonoids

1
PENDAHULUAN
Jamur merupakan salah satu penyebab berbagai
penyakit terutama pada negara-negara tropis.
Indonesia sebagai salah satu negara tropis di dunia
memiliki iklim dengan kelembaban udara yang tinggi
sehingga sangat mendukung sebagai tempat
tumbuhnya jamur. Banyaknya infeksi jamur juga
didukung oleh masih banyaknya masyarakat
Indonesia yang berada di bawah garis kemiskinan
sehingga masalah kebersihan lingkungan, sanitasi
dan pola hidup.
Candida Albicans adalah jamur patogen
oportunistik yang ada sebagai komensal berbahaya di
saluran pencernaan dan genitourinari di sekitar 70%
dari manusia dan sekitar 75% wanita menderita
infeksi Candida setidaknya sekali dalam seumur
hidup mereka [1-4]. Namun, itu menjadi patogen
oportunistik untuk pasien immunocompromised,
untuk beberapa individu imunologis lemah, atau
bahkan untuk orang yang sehat. Infeksi yang
disebabkan oleh C. albicans umumnya dikenal
sebagai kandidiasis (Asakura, H., Dkk., 2012)
Insiden infeksi jamur telah meningkat secara
signifikan, sehingga berkontribusi terhadap
morbiditas dan kematian. Hal ini disebabkan oleh
peningkatan resistensi antimikroba dan jumlah
terbatas obat antijamur, yang mempertahankan
banyak efek samping. spesies Candida Albicans
adalah jamur manusia utama patogen yang
menyebabkan kedua mukosa dan infeksi jaringan
dalam. Bukti terbaru menunjukkan bahwa sebagian
besar infeksi yang dihasilkan oleh patogen ini
berhubungan dengan pertumbuhan biofilm. Biofilm
adalah komunitas biologis dengan tingkat tinggi
organisasi, di mana mikro-organisme membentuk
terstruktur, terkoordinasi dan fungsional masyarakat.
Ini komunitas biologis yang tertanam dalam matriks
ekstraselular diciptakan sendiri. Produksi Biofilm
juga terkait dengan tingkat tinggi resistensi
antimikroba dari organisme terkait. Kemampuan
spesies Candida untuk membentuk drugresistant
biofilm merupakan faktor penting dalam kontribusi
mereka terhadap penyakit manusia (Sardi. J.C.O.,
Dkk., 2013).
Jamur lainnya yang dapat menyebabkan
penyakit yaitu Aspergillus niger yang merupakan
fungi dari filum ascomycetes yang berfilamen,
mempunyai hifa berseptat, dan dapat ditemukan
melimpah di alam (Madigan dan Martinko, 2006).
Aspergillus muncul sebagai penyebab penting
dari infeksi yang mengancam jiwa pada pasien
2
immunocompromised. Populasi memperluas ini
terdiri dari pasien dengan neutropenia
berkepanjangan, infeksi HIV lanjut, dan mewarisi
immunodeficiency dan pasien yang telah menjalani
alogenik hematopoietik transplantasi sel induk
(HSCT) dan / atau transplantasi paru-paru (Walsh,
T.J., Dkk., 2008).
Perlu adanya upaya berkesinambungan
memperbaiki obat-obat moderen beralih pada obat
tradisional yang memungkinkan untuk dijadikan obat
antijamur yang lebih efektif. Mangrove merupakan
salah satu tumbuhan yang biasa digunakan
masyarakat sebagai antibiotik tradisional, sehingga
menarik untuk ditindak lanjut untuk diujikan pada
jamur Candida Albicans dan Aspergilu Niger.
Indonesia merupakan sebuah negara dengan
kekayaan sumber daya alam yang melimpah. Salah
satu tanaman yang dapat dimanfaatkan sebagai obat
adalah tanaman Mangrove Avicennia Maria yang
lebih dikenal sebagai Pidada Merah. Di Indonesia
tanaman ini banyak dijumpai pada hutan-hutan
mangrove yang tumbuh khususnya di tempat-tempat
dimana terjadi pelumpuran dan akumulasi bahan
organik. Baik di teluk-teluk yang terlindung
gempuran ombak, maupun di sekitar muara sungai
dimana air melambat dan mengendapkan lumpur
yangn dibawanya dari hulu. Tanaman mangrove ini
mempunyai kandungan kimia yang aktivitasnya
sebagai antijamur. Salah satu kandungan yang
terdapat dalam tanaman ini adalah metanol.
Berdasarkan uraian diatas, peneliti tertarik
untuk melakukan penelitian potensi antijamur ekstrak
metanol daun mangrove Avicennia Maria terhadap
jamur Candida albicans dan Aspergillus niger
sehingga dapat dijadikan sebagai acuan pengobatan
tradisional untuk pengobatan penyakit yang
disebabkan oleh jamur.
METODE PENELITIAN
Jenis penelitian ini tergolong dalam jenis uji
kualitatif. Sample yang digunakan adalah ekstrak
daun mangrove Avicennia Marina yang akan diujikan
pada jamur Candida Albican dan Aspergilus Niger
dengan metode difusi.
Pada penelitian ini ada 4 tahap yang dilakukan
yaitu tahap sterilisasi alat dan bahan, membuat
larutan uji, membuat larutan kontrol dan pengujian
anti jamur. Larutan kontrol yang digunakan pada
penelitian ini adalah ketoconazole dan larutan ujinya
adalah ekstrak daun mangrove Avicennia Marina
dengan konsentrasi yang digunakan yaitu 1000 ppm,
800 ppm, 600 ppm, 400 ppm, dan 200 ppm.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Mangrove yang digunakan berasal dari kawasan
mangrove Bontang, Kalimantan Timur. Pada proses
awal, daun mangrove Avicennia Maria pertama-tama
yang dilakukan yaitu mencuci daun mangrove dengan
air bersih agar kotoran atau benda-benda asing pada
permukaan daun mangrove dapat hilang. Kemudian
daun mangrove dikeringkan agar tidak ditumbuhi
jamur yang dapat merusak sampel, sehingga sampel
dapat bertahan lama. Selain dikeringkan agar mutu
sampel tidak berkurang ada cara lain yaitu dengan
menghentikan reaksi enzimetik. Selanjutnya sampel
yang telah kering dihaluskan dan dimaserasi dengan
menggunakan pelarut metanol. Sampel yang telah
kering dihaluskan untuk memperoleh serbuk-serbuk
yang kecil sehingga mempermudah proses penarikan
zat aktif yang ada pada sampel saat dilakukannya
ekstraksi.
Maserasi dilakukan dengan menggunakan
pelarut metanol karena metanol memiliki molekul
yang lebih kecil shingga mampu berdifusi kedalam
bagian dalam sel daun manrove Avicennia marina.
Menurut Darwis (2000) dalam Prabowo dkk (2011),
bahwa secara umum pelarut metanol merupakan yang
paling banyak digunakan dalam proses isolasi
senyawa organik bahan alam, karena hampir
melarutkan seluruh golongan skunder baik yang polar
maupun non polar. Sarker dkk (2006) dalam Prihanto
dkk (2011) menyebutkan bahwa efisiensi dan
efektivitas ekstraksi sangat dipengaruhi oleh
kemampua pelarut berdifusi ke dalam selnya.
Proses maserasi dilakukan selama 4 hari atau 94
jam dimana setiap 24 jam pelarut sampel. Proses
maserasi dilakukan selama 4 hari karena pada waktu
tersebut merupakan waktu optimum untuk zat yang
terkandung dalam sampel dan pelarut terjadi kontak
sehingga semakin banyak komponen bioaktif yang
terkandung dalam sampel dapat terlarutkan hingga
larutan mencapai titik jenuh. Dilakukannya
pengantian pelarut setiap 24 jam bertujuan untuk
mendapatkan hasil ektrasi yang optimum karena
selama 24 jam tesebut akan terjadi kejenuhan larutan,
dengan digantikannya pelarut tersebut diharapkan
pelarut dapat melarutkan sisa-sisa senyawa metabolit
skunder yang masih terkandung dalam serbuk
sampel. Semakin banyak dilakukan pengulangan
maserasi, semakin banyak hasil ektraksi yang
diperoleh dari serbuk sampel mangrove Avecinnia
marina. Pada saat maserasi, sampel tersebut
diletakkan di tempat tertutup, hal ini bertujuan agar
pelarut yang digunakan tidak menguap sehingga
dapat menyebabkan sedikitnya ekstrasi yang
diperoleh karena pelarut yang berkurang dari volume
pelarut yang telah ditentukan. Hasil maserasi yang
diperoleh masih terkandung cair pelarut, untuk
memisahkannya digunakan rotary evoporator yang
kemudian hasilnya di keringkan mengunakan oven
agar pelarut benar-benar hilang (menguap), yang
tersisa hanyak murni senyawa metabolit skunder.
Ekstrak kering yang diperoleh dari 100 gram buah
mangrove Avicennia marina dalam pelarut metanol
400 mL dengan 3 kali maserasi adalah 43,9027 gram
dengan rendamen 43,90%.
Selanjutnya dilakukan uji fitokimia pada hasil
ektraksi daun mangrove Avciennia marina. Senyawa
metabolit sekunder merupakan senyawa pemunjang
dalam proses metabolisme. Metabolit skunder yang
terkandung dalam setiap spesies yang satu dengan
yang lain ditemukan dalam bentuk yang unik dan
berbeda-beda (Varpoorte & Alfermann, 2000).
Senyawa metabolit skunder yang umum terdapat
dapat pada mangrove berupa alkaloid,
steroid/terpenoid, flavonoid atau fenolik.
Berdasarkan dari hasil uji fitokimia pada ekstrak daun
mangrove Avciennia marina, didapatkan bahwa pada
ekstraks tersebut terkandung senyawa flavonoid dan
steroid, hasil ini bisa di lihat pada gambar (1)
terlampir
Pada awal pengujian anti jamur semua alat dan
bahan di siapkan terlebih dahulu untuk disterlisasi
dalam autoclaf. Sebelum alat dan bahan di masukkan
kedalam autoclaf, alat dan bahan terlebih dahulu
disumbat menggunakan kapas dan dibungkus
menggunakan kertas HVS. Setelah semua sudah siap
alat dan bahan tersebut dimasukkan kedalam
autoclaf. Sterilisasi alat dan bahan dilakukan secara
terpisah dalam autoclaf. Sterilisasi dilakukan selama
60 menit. Prinsip kerja dari autoclaf yaitu
menggunakan panas basah dimana uap air akan
menembus alat dan bahan yang disterilkan. Suhu
pada autoclaf yaitu mencapai 1210C. Uap air dalam
dalam autoclaf ini akan mengkoagulasi protein
penyusun membran sel mikroba yang ada pada alat
atau bahan yang menyebabkan mikroba tersebut mati.
Selanjutnya pembuatan larutan ektraksi daun
mangrove Aviciennia Marina dengan varian
konsentrasi 1000 ppm, 800 ppm, 600 ppm, 400 ppm,
200 ppm, dan larutan ketoconazole dengan
konsentrasi 1000 ppm sebagai kontrol positif serta
aquades sebagai kontrol negatif. Yang dimaksut
3
dengan kontrol positif yaitu yang menjadi tolak ukur
keefektifan hasil ektraksi dalam menghambat jamur
karena ketoconazole merupakan obat anti jamur dan
kontrol negatif sebagai tolak ukur apa bila hasil
ektraksi tidak dapat menghambat jamur karena nanti
akan ditumbuhi jamur. Setelah larutan tersebut jadi,
dimasukkan paperdics kedalam larutan tersebut.
Lanjut pada pembuatan media perkembangbiakan
jamur. Media yang umum digunakan yaitu PDA
(Potato Dexstrose Agar). Media ini digunakan karena
mengandung nutrisi yang cocok untuk pertumbuhan
jamur. PDA tersedia dalam bentuk bubuk yang
dimana penggunaannya sebagai tempat
perkembangbiakan jamur harus lah dalam bentuk
agar-agar. Untuk itu PDA yang masih dalam bentuk
bubuk ini harus dilarutkan menggunakan aqudes
terlebih dahulu yang kemudian dipanaskan
menggunakan hot plat agar cepat larut, hingga larutan
menjadi bening lalu dibiarkan dingin beberapa saat
hingga larutan PDA memadat membentuk agar-agar.
Setelah PDA membantuk agar-agar, PDA ini
disterilisasi dalam autoclaf pada suhu 1210C.
Kemudian PDA kembali di panaskan agar mencair
dan diiambil sebanyak 3 mL di masukkan kedalam
tabung reaksi. Tabung reaksi yang telah dimasukkan
larutan PDA ditempatkan dengan posisi miring dan
dibiarkan memadat membentuk agar-agar kembali
dan setelah itu dilakukan pembutan suspensi jamur.
Pembuatan supensi jamur ini dilakukan dengan cara
mengambil jamur menggunakan sepatula lalu di
goreskan secara zig-zag perlahan-lahan pada media
dan dibiarkan beberapa hari. Setelah jamur tumbuh,
ditambahkan NaCl dengan perbandingan 1:9, lalu
divortex hingga homogen. Sebelum dimasukkan
campuran tersebut terlebih dahulu di masukan
terlebih dahulu PDA kedalam cawan petri, lalu
kemudian dimasukkan campuran tersebut kedalam
cawan petri dan dihomogenkan dengan cara
menggoyangkan cawan petri membentuk angka 8.
Setelah homogen dan memadat, dimasukkan
paperdics ektraksi daun mangrove Aviciennia Marina
dengan varian konsentrasi 1000 ppm, 800 ppm, 600
ppm, 400 ppm, 200 ppm, ketoconazole (kontrol
positif) 1000 ppm dan aqudes (kontrol negatif).
Selanjutnya dilakukan inkubasi dalam inkubator
dengan posisi terbalik selama 3x24 jam.
Setelah dinkubasi selama 3x24 jam peneliti
mengamati zona hambat pada paperdisc ektraks daun
mangrove Avciennia Marian dengan varian
konsentrasi 1000 ppm, 800 ppm, 600 ppm, 400 ppm,
dan 200 ppm ternyata tidak terlihat sama sekali
adanya zona hambat terhadap jamur Candida
4
Albicans maupun jamur Aspergillus Niger. Hal ini
disebabkan rendahnya konsentrasi yang peneliti
gunakan hal ini bisa dilihat dari penelitian yang
dilakukan Noviyanti (2016) dengan metode yang
sama akan tetapi dengan konsentrasi mangrove yang
lebih tinggi yaitu 20.000 ppm, 40.000 ppm, 60.000
ppm, dan 80.000 ppm dengan zona hambat berturut-
turut adalah 11,593 mm; 12,825 mm; 14,143 mm;
15,443 mm dan 15,812 mm. Bila diameter hambat 6
mm atau kurang maka aktivitas penghambatnya
dikategorikan lemah, diameter daya hambat 6-10 mm
dikategorikan sedang, diameter daya hambat 10-19
mm dikategorikan kuat dan diameter daya hambat 20
mm atau lebih dikategorikan sangat kuat (Andayani,
2014). Semakin besar konsentrasi yang digunakan,
semakin besar juga zona hambatnya. Kandungan
yang terdapat dalam mangrove yang dia gunakan
Noviyanti (2016) yaitu alkaloid, flavonoid, tannin,
saponin. Alkaloid memiliki manfaat sebagi anti jamur
sedangkan dalam daun mangrove Avciennia Marina
terkandung flavonoid dan steroid, dimana steroid
juga mempunyai fungsi atau manfaat yang sama
seperti alkaloid yaitu sebagai anti jamur.
Selain itu juga dimungkinkan karena adanya
kontaminasi mikroorganisme pada paperdisc
sehingga senyawa hasil ektraksi daun mangrove
Avciennia Marina telah bereaksi dengan
mikroorganisme yang mengkontaminasi, sehingga
saat diujiikan pada jamur sudah tidak bereaksi lagi
(tidak dapat menghambat), hal ini dapat dilihat bahwa
ternyata kontrol positif juga tidak dapat menghambat
(ditumbuhi jamur).
SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapa disimpulkan
bahwa; (1) Ekstrak jaringan daun mangrove
Avicennia marina mengandung senyawa metabolit
sekunder yaitu flavonoid dan steroid, (2) Ekstrak
metanol jaringan daun mangrove Avicennia marina
pada konsentrasi 200 ppm, 400 ppm, 600 ppm, 800
ppm, dan 1000 ppm tidak mampu menghambat
pertumbuhan jamur Candida albicans dan
Aspergillus niger.
UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terima kasih dan penghargaan yang
setinggi-tingginya atas kerja samanya kepada dosen
pembimbing atas bimbingannya dan teman-teman
yang telah membantu penulis melaksanakan
penelitian.
DAFTAR PUSTAKA
Darwis, D. 2000. Teknik Dasar Laboratorium Dalam
Penelitian Senyawa Bahan Alam Hayati”,
Workshop Pengembangan Sumber Daya Manusia
Dalam Bidang Kimia Organik Bahan Alam
Hayati FMIP A Universitas Andalas: Padang.
Jawetz, dkk. 2004. Mikrobiologi Kedokteran.
Salemba Medika : Jakarta.
Noviyanti dkk, 2016, Uji Fitokimia, Toksisitas Dan
Aktivitas Antibakteri Terhadap Ekstrak Etanol
Daun Rambusa (Passiflora Foetida L.) Terhadap
Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia
Coli, FMIPA Universitas Mulawarman:
Samarinda
Madigan MT, Martinko JM. 2006. Brock Biology of
Microorganisms, 11th ed. Pearson Education:
New Jersey.
Sardi, J.C.O., dkk, 2013,“Candida Species: Current
Epidemiology, Pathogenicity, Biofilm Formation,
Natural Antifungal Products And New
Therapeutic Options, Journal of Medical
Microbiology
Sarker,dkk. 2006, Natural Products Isolation,
Totowa : Humana Press
Walsh, T.,dkk 1997, Molecular Pathology of Breast
Cancer and Its Aplication To Clinical
Management, Cancer and metastatis Rev.