TUGAS MATA KULIAH COMPOUNDING AND DISPENSING

STANDAR OPERASIONAL PROSEDUR SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

Disusun oleh:
TIFANY MAULIDA CANDRA
I4C020044

PENDIDIKAN PROFESI APOTEKER

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
PURWOKERTO
2020
 STANDART OPERATING PROCEDURE (SOP)

PENGOPERASIAN SPEKTROFOTOMETER UV-VIS

Tifany Maulida Candra I4C020044

1. PRINSIP KERJA
Spektrofotometer UV-Vis merupakan alat yang digunakan sesuai dengan
manual alat.

2. SPESIFIKASI ALAT
Jenis Alat : Spektrofotometer UV-VIS
Merek : HITACHI U-2810
Type : 122-000
No. : 1819-011 a

3. KOMPONEN ALAT
1. Sumber cahaya.
2. Monokromator, yaitu suatu piranti untuk mengecilkan pita sempit
panjang gelombang dari spektrum lebar yang dipanaskan oleh sumber
cahaya.
3. Kuvet atau wadah larutan yang akan diuji.
4. Detektor, alat yang mengubah energi cahaya menjadi suatu isyarat listrik.
5. Amplifier (penguat) dan rangkaian yang berkaitan membuat isyarat
listrik itu memadai untuk dibaca.
6. Piranti pembaca yang memprogramkan besarnya isyarat listrik, yang
menyatakan dalam persen (%) maupun adsorbansi (A).

4. PETUNJUK DASAR PENGGUNAAN

1. Hubungkan Spektrofotometer ke sumber arus
2. Nyalakan spektrofotometer dengan menekan tombol ON pada main
spektrofotometer.
 3. Tampilan program akan muncul dan memberitahukan bahwa proses
inisiasi sedang berlangsung, tunggu hingga proses selesai ditandai
dengan munculnya warna hijau dan tertulis status ready.
4. Biarkan selama 15 menit untuk pemanasan, setelah itu spektrofotometer
siap digunakan.
5. Atur panjang gelombangnya.
6. Setelah itu spektrofotometer siap digunakan untuk pengukuran serapan
sample pada panjang gelombang tertentu.
7. Kuvet dimasukkan setelah di lap dengan kertas tissue. Sisi kuvet yang
terang menghadap lubang cahaya dari spektrofotometer.
8. Setelah selesai bekerja, kuvet dikeluarkan dan dibersihkan dari
pelarutnya kemudian dikeringkan.
9. Spektrofotometer dimatikan dengan mengklik tombol OFF pada main
unit spektrofotometer

5. LANGKAH KERJA PENGUKURAN ABSORBANSI

1. Spektrofotometri UV-VIS dihubungkan dengan perangkat komputer

menggunakan kabel penghubung USB.

2. Klik soft ware Ocean View/start button/All program/Ocean

optics/Oceanview/Oceanview pada Computer Personal Unit (CPU).

3. Pilih QuickView/welcome screen/OK

4. Tekan tombol power pada sumber cahaya, diikuti tekan tombol power
lampu deuterium, lampu halogen dan shutter.

5. Tunggu Spektrofotometri UV-VIS selama 15 menit untuk melakukan

proses pemanasan.

6. Klik Create a New Spektroscopy Application/home untuk penampilan

gambar

7. Klik Spectroscopy/Absorbance/Next ... untuk menampilkan kurva

absorbance
8. Untuk membuat baseline, pelarut dimasukkan ke dalam kuvet (jika
sampel berupa padatan maka gunakan substratnya untuk membuat
baseline), tempatkan pada tempat sampel dan tutup dengan pelindung
cahaya luar (aluminium foil), set komputer pada Acquisition Group
window
a. Klik Automatic botton integration time:automatic
b. Set Scans to Average pada angka 10 dan Boxcar width angka 5. Cek
list untuk scans to Average
c. Cek list Non linearity Correction
d. Klik next

9. Klik Store Reference/next

10. Tutup sumber cahaya dengan menekan tombol shutter lamp

11. Klik Store reference/next

12. Buka sumber cahaya dengan menekan kembali tombol shutter

lamp (lampu warna hijau ON)

13. Klik Finish dan baseline sudah terlihat tampilan program ocean.

14. Ambil kuvet berisi pelarut dari tempat sampel dan gantikan pelarut
di dalam kuvet dengan sampel larutan yang akan diukur (jika sampel
berupa padatan maka substrat yang diatasnya terdapat sampel padat yang
digunakan) kemudian letakkan kembali ke dalam tempat sampel dan
tutup dengan pelindung cahaya luar (aluminium foil).

15. Sesaat setelah kuvet berisi sampel larutan atau sampel padat
diletakkan di dalam tempat sampel maka tampilan kurva di layar
komputer akan berubah yang menggambarkan absorbansi dari sampel.

16. Simpan data hasil pengukuran dengan Klik Configure Graph

Saving/tekan Gb. Peralatan/File writer
a. Pilih file penyimpanan
b. Tulis nama file
c. Klik apply/exit

17. Klik ‘Save Graph to files’/’save your absorbance spectrum’

 18. Klik ‘Convert Active Spectrum to Overlay’/’to create an overlay of
the spectrum’

19. Akan nampak panjang gelombang maksimal dan minimal

20. Cetak data dengan menekan tombol print (jika menginginkan versi
cetak).

6. LANGKAH KERJA PENGUKURAN TRANSMITANSI

1. Spektrofotometri UV-VIS dihubungkan dengan perangkat komputer.
2. Klik software Ocean View/start button/All program/Ocean optics/Ocean
view/Ocean view
3. Pilih QuickView/welcome screen/OK
4. Klik Strobe/Lamp enable/Acquisition Group window/tekan lampu On.
5. Tunggu Spektrofotometri UV-VIS selama 15 menit untuk melakukan
proses pemanasan.
6. Klik Create a New Spektroscopy Application/home untuk penampilan
gambar
7. Klik Spectroscopy/Transmisi/Next ... untuk menampilkan gambar
Transmisi
8. Untuk membuat baseline pelarut dimasukkan ke dalam kuvet (jika
sampel berupa padatan maka gunakan substratnya untuk membuat
baseline), tempatkan pada tempat sampel dan tutup dengan pelindung
cahaya luar (aluminium foil), set komputer pada Acquisition Group
window
a. Klik Automatic botton integration time:automatic
b. Set Scans to Average pada angka 10 dan Boxcar width angka 5. Cek
list untuk scans to Average
c. Cek list Non linearity Correction
d. Klik next
9. Klik Store Reference/next
10. Tutup sumber cahaya dengan menekan tombol shutter lamp
 11. Klik Store reference/next
12. Buka sumber cahaya dengan menekan kembali tombol shutter lamp
(lampu warna hijau ON)
13. Klik Finish dan baseline sudah terlihat tampilan program ocean.
14. Ambil kuvet berisi pelarut dari tempat sampel dan gantikan pelarut di
dalam kuvet dengan sampel larutan yang akan diukur (jika sampel berupa
padatan maka gunakan substrat yang diatasnya terdapat sampel padat)
kemudian letakkan kembali ke dalam tempat sampel dan tutup dengan
pelindung cahaya luar (aluminium foil).
15. Sesaat setelah kuvet berisi sampel larutan atau sampel padat diletakkan di
dalam tempat sampel maka tampilan kurva di layar computer akan
berubah yang menggambarkan transmitansi sampel.
16. Simpan data hasil pengukuran dengan Klik Configure Graph
Saving/tekan Gb. Peralatan/File writer
a. pilih file penyimpanan
b. tulis nama file
c. Klik apply/exit
17. Klik Save Graph to files/save your transmission spectrum
18. Klik Convert Active Spectrum to Overlay/to create an overlay of the
spectrum
19. Akan nampak panjang gelombang maksimal dan minimal
20. Cetak data dengan menekan print jika menginginkannya.

7. PERAWATAN
1. Sebelum digunakan, biarkan mesin warming up selama 15-20 menit
2. Simpan spektrofotometer di dalam ruangan yang suhunya stabil dan di
atas meja yang permanen
3. Pastikan kompartemen sampel bersih dari bekas sampel
4. Saat memasukkan kuvet, pastikan kuvet kering
5. Lakukan kalibrasi panjang gelombang dan absorban secara teratur