PENGGUNAAN SPEKTROFOTOMETER UV - VIS

No. Dokumen No.Revisi Halaman

dari

Ditetapkan oleh :
Direktur
Instruksi Kerja Tanggal Terbit

1.PENGERTIA Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitan atau absorban

N suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Spektrofotometer
merupakan gabungan dari alat optic dan elektrik serta sifat-sifat kimia
fisiknya.
2.TUJUAN Tujuan petunjuk ini sebagai instruksi kerja Spektrofotometri UV-VIS.

3.KEBIJAKAN

4. LANGKAH A. Persiapan Alat ini terdiri dari :

KERJA 1. Sumber cahaya.
2. Monokromator, yaitu suatu piranti untuk mengecilkan pita sempit
panjang gelombang dari spektrum lebar yang dipanaskan oleh
sumber cahaya.
3. Kuvet atau wadah larutan yang akan diuji.
4. Detector, alat yang mengubah energi cahaya menjadi suatu isyarat
listrik.
5. Amplifier (penguat) dan rangkaian yang berkaitan membuat isyarat
listrik itu memadai untuk dibaca.
6. Piranti pembaca yang memprogramkan besarnya isyarat listrik,
yang menyatakan dalam persen (%) maupun adsorbansi (A).
B. Pelaksanaan
1. Pengukuran Absorbansi
a. Spektrofotometri UV-VIS dihubungkan dengan perangkat
komputer menggunakan kabel penghubung USB.
b. Klik soft ware Ocean View/start button/All program/Ocean
optics/Oceanview/Oceanview pada Computer Personal Unit
(CPU).
c. Pilih QuickView/welcome screen/OK
d. Tekan tombol power pada sumber cahaya, diikuti tekan tombol
power lampu deuterium, lampu halogen dan shutter.
e. Tunggu Spektrofotometri UV-VIS selama 15 menit untuk
melakukan proses pemanasan.
f. Klik Create a New Spektroscopy Application/home untuk
penampilan gambar.
g. Klik Spectroscopy/Absorbance/Next ... untuk menampilkan
kurva absorbance.
h. Untuk membuat baseline, pelarut dimasukkan ke dalam
 cuvet(jika sampel berupa padatan maka gunakan substratnya
untuk membuat baseline), tempatkan pada tempat sampel dan
tutup dengan pelindung cahaya luar (aluminium foil), set
komputer pada Acquisition Group window - Klik Automatic
botton integration time:automatic - Set Scans to Average pada
angka 10 dan Boxcar width angka 5. Cek list untuk scans to
Average - Cek list Non linearity Correction - Klik next
i. Klik Store Reference/next
j. Tutup sumber cahaya dengan menekan tombol shutter lamp
k. Klik Store reference/next
l. Buka sumber cahaya dengan menekan kembali tombol shutter
lamp (lampu warna hijau ON)
m. Klik Finish dan baseline sudah terlihat tampilan program
ocean.
n. Ambil cuvet berisi pelarut dari tempat sampel dan gantikan
pelarut di dalam cuvet dengan sampel larutan yang akan diukur
(jika sampel berupa padatan maka substrat yang diatasnya
terdapat sampel padat yang digunakan) kemudian letakkan
kembali ke dalam tempat sampel dan tutup dengan pelindung
cahay luar (aluminium foil).
o. Sesaat setelah cuvet berisi sampel larutan atau sampel padat
diletakkan di dalam tempat sampel maka tampilan kurva di
layar computer akan berubah yang menggambarkan absorbansi
dari sampel.
p. Simpan data hasil pengukuran dengan Klik Configure Graph
Saving/tekan Gb. Peralatan/File writer
- pilih file penyimpanan
- tulis nama file
- Klik apply/exit
q. Klik Save Graph to files/save your absorbance spectrum
r. Klik Convert Active Spectrum to Overlay/to create an overlay
of the spectrum
s. Akan nampak panjang gelombang maksimal dan minimal
t. Cetak data dengan menekan tombol print (jika menginginkan
versi cetak).
2. Pengukuran Transmitansi
a. Spektrofotometri UV-VIS dihubungkan dengan perangkat
komputer.
b. Klik soft ware Ocean View/start button/All program/Ocean
optics/Oceanview/Oceanview
c. Pilih QuickView/welcome screen/OK
d. Klik Strobe/Lamp enable/Acquisition Group window/tekan
lampu On.
e. Tunggu Spektrofotometri UV-VIS selama 15 menit untuk
melakukan proses pemanasan.
f. Klik Create a New Spektroscopy Application/home untuk
penampilan gambar
g. klik Spectroscopy/Transmisi/Next ... untuk menampilkan
gambar Transmisi
h. Untuk membuat baseline pelarut dimasukkan ke dalam cuvet
 (jika sampel berupa padatan maka gunakan substratnya untuk
membuat baseline), tempatkan pada tempat sampel dan tutup
dengan pelindung cahaya luar (aluminium foil), set komputer
pada Acquisition Group window
- Klik Automatic botton integration time:automatic
- Set Scans to Average pada angka 10 dan Boxcar width
angka 5. Cek list untuk scans to Average
- Cek list Non linearity Correction
- Klik next
i. Klik Store Reference/next
j. Tutup sumber cahaya dengan menekan tombol shutter lamp
k. Klik Store reference/next
l. Buka sumber cahaya dengan menekan kembali tombol shutter
lamp (lampu warna hijau ON)
m. Klik Finish dan baseline sudah terlihat tampilan program
ocean.
n. Ambil cuvet berisi pelarut dari tempat sampel dan gantikan
pelarut di dalam cuvet dengan sampel larutan yang akan diukur
(jika sampel berupa padatan maka gunakan substrat yang
diatasnya terdapat sampel padat) kemudian letakkan kembali
ke dalam tempat sampel dan tutup dengan pelindung cahay luar
(aluminium foil).
o. Sesaat setelah cuvet berisi sampel larutan atau sampel padat
diletakkan di dalam tempat sampel maka tampilan kurva di
layar computer akan berubah yang menggambarkan
transmitansi sampel.
p. Simpan data hasil pengukuran dengan Klik Configure Graph
Saving/tekan Gb. Peralatan/File writer
- pilih file penyimpanan
- tulis nama file
- Klik apply/exit
q. Klik Save Graph to files/save your transmission spectrum
r. Klik Convert Active Spectrum to Overlay/to create an overlay
of the spectrum
s. Akan nampak panjang gelombang maksimal dan minimal
t. Cetak data dengan menekan print jika menginginkannya.
5.REFERENSI file:///C:/Users/HP
%2014S/Downloads/86f1cadce0ee1fbfde5a9697c23c6f54.pdf

http://www.sentrapolimer.id/id/alat-alat-pengujian-id/uv-vis-
spectrophotometer

6.UNIT LABORATORIUM
TERKAIT