lipidomics adalah bidang yang muncul, di mana struktur, fungsi dan dinamis

perubahan lipid dalam sel, jaringan atau cairan tubuh diselidiki. Karena peran vital
lipid dalam fisiologis manusia dan proses patologis, lipidomics menarik semakin
lebih perhatian. Namun, karena keragaman dan kompleksitas lipid, analisis lipid
masih penuh tantangan. Perkembangan terbaru dari metode untuk ekstraksi lipid
dan
analisis dan kombinasi dengan teknologi bioinformatika sangat mendorong
studi lipidomics. Di antara mereka, spektrometri massa (MS) adalah teknologi yang
paling penting
untuk analisis lipid. Dalam ulasan ini, metodologi berdasarkan MS untuk analisis
lipid adalah
diperkenalkan. Hal ini diyakini bahwa seiring dengan pesatnya perkembangan MS
dan yang lebih
aplikasi untuk analisis lipid, lipid lebih fungsional akan diidentifikasi sebagai
biomarker dan
target terapi dan untuk studi mekanisme penyakit
Lipidomics pertama kali dikemukakan pada tahun 2003 [1], di mana struktur, fungsi
dan dinamis
perubahan lipid dalam sel, jaringan atau cairan tubuh diselidiki. Baru-baru ini, telah
banyak
mengakui bahwa lipid adalah pusat untuk pengaturan dan pengendalian fungsi
seluler dan penyakit [2].
Oleh karena itu, lipidomics telah memperoleh banyak perhatian dan menjadi bidang
yang baru muncul dari dasar dan
penelitian translasi. Untuk saat ini, konsep dasar, kemajuan penelitian dan aplikasi
potensial dalam obat
pengembangan lipidomics telah ditinjau [3-6]. Dalam ulasan ini, kami fokus pada
spektrometri massa
metodologi untuk analisis lipid.
Lipid terdiri dari delapan kategori; sekitar 1,68 juta spesies. Jumlah besar kategori

dan struktur yang sangat kompleks lipid menyebabkan tantangan berat untuk
sepenuhnya menganalisis semua lipid.
Saat ini, ada dua strategi untuk menganalisis lipid: ditargetkan analisis lipid dan
non-target analisis lipid. Analisis lipid yang ditargetkan berfokus pada lipid
diketahui, dan mengembangkan
metode khusus dengan sensitivitas tinggi untuk analisis kuantitatif ini lipid tertentu.
Non-target
analisis lipid bertujuan untuk mendeteksi setiap spesies lipid secara bersamaan.
Agar berhasil mewujudkan
analisis kualitatif dan kuantitatif dari lipid, banyak metode analisis telah
dikembangkan untuk
analisis lipid, termasuk kromatografi lapis tipis (TLC) [7-9], kromatografi gas (GC)
[13/10],
2. Metode untuk Lipid Ekstraksi
Ekstrak lipid dari sistem biologis yang kompleks biasanya merupakan langkah
pertama untuk analisis lipid. Setelah
ekstraksi, protein dan beberapa mineral dihapus; Oleh karena itu, sistem biologis
menjadi
sederhana, yang memfasilitasi analisis lipid. Sebuah metode ekstraksi sederhana
dan direproduksi diperlukan untuk
cross-validasi data lipid diperoleh di laboratorium yang berbeda.
Sejauh ini, metode ekstraksi yang paling banyak digunakan dikembangkan pada
tahun 1950 oleh Blight dan
Dyer [19], di mana campuran metanol, kloroform dan air (1: 1: 0,9, v / v / v) yang
digunakan, dan fase
pemisahan terlibat. Lipid dilarutkan dalam pelarut organik, dan protein dan hidrofilik
lainnya
bahan dihapus setelah pemisahan fase. Asli metode Bligh dan Dyer (metode BD)
cocok untuk mengekstraksi fosfolipid besar, tetapi tidak lipid hidrofilik, seperti asam
lysophosphatidic,
sphingosine-1-fosfat, sulfatide, dll Modifikasi dari metode BD telah dilakukan untuk
meningkatkan

efisiensi ekstraksi lipid. Di antara mereka, Yatomi et al. sudah termasuk KCl, HCl dan
NH4OH di
Metode ekstraksi mereka untuk mengoptimalkan ekstraksi [20]. asam ringan,
seperti asam sitrat, telah digunakan untuk
mengganti HCl [21,22]. Selain itu, butanol bukan metanol dan kloroform telah
digunakan di beberapa
laboratorium sebagai metode dioptimalkan untuk ekstraksi lipid [21-23]. Namun,
ada kekhawatiran bahwa
kondisi asam atau basa akan menginduksi hidrolisis lipid endogen, sehingga dalam
generasi buatan lipid [21]. Misalnya, plasmalogens (lipid alkenil-asil) sangat
sensitif terhadap bahkan jejak asam dan menghasilkan lysophospholipid dan
aldehida lemak. Di
Selain itu, sangat sulit untuk butanol akan diuapkan, yang membuat proses yang
sangat memakan waktu.
Baru-baru ini, Matyash dan rekan kerja mengembangkan metil-tert-butyl ether
(MTBE) metode berbasis untuk
ekstrak lipid [24], yang memungkinkan lebih cepat dan lebih bersih pemulihan
sebagian besar kelas lipid utama.
Kami juga melaporkan metode metanol, memanfaatkan metanol pelarut tunggal
dan melibatkan hanya satu
langkah sentrifugasi untuk mengekstrak fosfolipid dan sphingolipids, yang telah
terbukti
sangat sederhana, efektif dan direproduksi [25]. Untuk lipid apolar, seperti
triacylglycerides, itu
melaporkan bahwa metode heksana-isopropanol yang terbaik [26].
Selain metode ekstraksi untuk pemulihan berisi spesies lipid yang disebutkan di
atas,
metode dengan selektivitas tinggi telah diusulkan untuk ekstraksi lipid tertentu.
Sebagai contoh,
Dennis et al. melaporkan bahwa prepurification dan pengayaan asam lemak bebas
dapat dicapai dengan
penerapan solusi bi-phasic metanol diasamkan dan isooctane [27]. Selain itu, logam

kompleks yang disebut "phos-tag" dapat digunakan untuk ekstraksi selektif asam
lysophosphatidic (LPA) dan
sphingosine-1-fosfat (S1P) [28]. Wenk et al. telah secara selektif lipid phosphomonoester oleh
polimer imidazolium, dan setelah derivatisasi dengan trimethylsilyldiazomethane
(TMS-diazometana),
mereka berhasil menentukan fosfat dasar rantai panjang (LCB-Ps, misalnya,
sphingosine-1-fosfat) [29].
Selain itu, ini sangat efektif untuk selektif mengekstraksi beberapa lipid atas dasar
mereka