NPC Komunikasi Produk Alami 2018

Vol. 13
Nomor 12

Perkembangan Terbaru Metode Pengendalian Mutu untuk Sediaan Obat yang 1599 - 1606
Berasal dari Herbal

Gunawan Indrayanto

KK Bioteknologi Tanaman, Fakultas Farmasi, Universitas Airlangga, Surabaya 60286, Indonesia

gunawanindrayanto@yahoo.com

Diterima: 6 Juli th, 2018; Diterima: 14 November th, 2018

Industri farmasi harus menerapkan QC (kendali mutu) yang ketat untuk memastikan konsistensi, keamanan, dan kemanjuran sediaan obat turunan herbal mereka. QC harus dilakukan di setiap tahap lini produksi, yaitu bahan mentah yang masuk, ekstraksi, kontrol dalam

proses, produk jadi, dan penyimpanan sampel. Karena sifat kompleks dari kandungan kimia jamu, dua pendekatan QC harus diambil, yaitu penentuan kuantitatif dari senyawa (s) penanda yang dipilih, dan profil metabolit. Kontaminasi obat herbal oleh logam berat,

pestisida, metabolit toksik, toksin mikroba, mikroorganisme patogen dan benda asing lainnya juga harus dievaluasi. Kombinasi profil kimia dan analisis multivariat (MVA) direkomendasikan sebagai alat QC untuk metode identifikasi botani (BIM) tumbuhan, ekstrak, bahan

jamu, dan sediaan obat herbal. Metode mikroskopis, profil DNA atau penanda kimiawi tidak direkomendasikan untuk digunakan sebagai satu-satunya BIM karena kurangnya spesifisitas. Hanya penanda yang memenuhi kriteria tertentu yaitu penanda kualitas aktif (QA)

yang dapat digunakan sebagai alat QC. Rentang spesifikasi batas penanda yang digunakan sebagai alat QC harus dijelaskan dalam profil target analitis (ATP). Untuk mendapatkan hasil yang andal dari setiap analisis yang telah dilakukan di laboratorium QC mana pun,

metode analisis harus divalidasi sesuai dengan panduan terbaru. Batas deteksi sampel dari setiap senyawa beracun harus lebih rendah dari nilai cut-off dan MPL-nya. Keandalan setiap hasil analisis laboratorium QC harus dievaluasi dengan menggunakan sampel QC untuk

setiap rangkaian pengukuran. Metode mikroskopis, profil DNA atau penanda kimiawi tidak direkomendasikan untuk digunakan sebagai satu-satunya BIM karena kurangnya spesifisitas. Hanya penanda yang memenuhi kriteria tertentu yaitu penanda kualitas aktif (QA)

yang dapat digunakan sebagai alat QC. Rentang spesifikasi batas penanda yang digunakan sebagai alat QC harus dijelaskan dalam profil target analitis (ATP). Untuk mendapatkan hasil yang andal dari setiap analisis yang telah dilakukan di laboratorium QC mana pun,

metode analisis harus divalidasi sesuai dengan panduan terbaru. Batas deteksi sampel dari setiap senyawa beracun harus lebih rendah dari nilai cut-off dan MPL-nya. Keandalan setiap hasil analisis laboratorium QC harus dievaluasi dengan menggunakan sampel QC untuk

setiap rangkaian pengukuran. Metode mikroskopis, profil DNA atau penanda kimiawi tidak direkomendasikan untuk digunakan sebagai satu-satunya BIM karena kurangnya spesifisitas. Hanya penanda yang memenuhi kriteria tertentu yaitu penanda kualitas aktif (QA)

yang dapat digunakan sebagai alat QC. Rentang spesifikasi batas penanda yang digunakan sebagai alat QC harus dijelaskan dalam profil target analitis (ATP). Untuk mendapatkan hasil yang andal dari setiap analisis yang telah dilakukan di laboratorium QC mana pun, metode analisis harus divalidasi

Kata kunci: Pembuatan profil kimiawi, pembuatan profil DNA, Obat herbal, Penanda QA, Pembuatan profil metabolit, Analisis multivariat, Batas deteksi sampel, Validasi.

Sediaan obat turunan herbal atau obat herbal telah digunakan di dengan studi klinis tambahan. Obat herbal di Indonesia saat
seluruh dunia selama berabad-abad. Obat-obatan herbal dapat ini banyak diproduksi oleh perusahaan farmasi, dan menurut
mengandung satu atau beberapa tumbuhan dalam satu sediaan obat. Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM), tercatat 872
Itulah mengapa obat-obatan herbal dapat memiliki campuran perusahaan pada tahun 2005; tingkat pertumbuhan produk
kompleks dari banyak tumbuhan yang mengandung banyak senyawa ini di Indonesia diperkirakan 20-30% per tahun [7, 8].
kimia [1, 2]. Menurut pedoman WHO [3] obat herbal adalah jamu,
bahan jamu, sediaan jamu dan produk jamu jadi. Herbal termasuk
bahan mentah yang dapat berasal dari lumut, jamur, alga dan bagian Dengan semakin maraknya aplikasi jamu atau jamu secara global,
dari bahan tumbuhan tingkat tinggi, yang mungkin utuh, juga di Indonesia, dalam satu dekade terakhir QC sediaan obat
terfragmentasi atau menjadi bubuk, sedangkan bahan herbal yang bersumber dari jamu menjadi sangat penting. QC ini dapat
termasuk jus segar, getah, minyak tetap, minyak esensial, resin dan digunakan untuk memantau kemanjuran dan toksisitasnya [1, 9,
bubuk kering herbal. . Bahan-bahan ini dapat diproses dengan cara 10]. QC harus dilakukan di semua tahap lini produksi produk
dikukus, dipanggang, dilapisi madu atau minuman beralkohol. turunan herbal yaitu bahan baku yang masuk (jamu, bahan
Sediaan herbal mungkin termasuk bahan herbal yang dihaluskan atau herbal, ekstrak, eksipien), kontrol dalam proses (IPC), produk jadi
dipotong, atau ekstrak, tincture dan minyak lemak dari bahan herbal. (FP) dan penyimpanan sampel (KS) FP (Gambar 1). Pedoman
Produk jamu jadi dan campuran produk jamu mungkin mengandung umum untuk mengevaluasi kualitas jamu dan obat turunan
eksipien selain bahan aktifnya yaitu sediaan jamu yang dibuat dari herbal telah dikeluarkan oleh banyak negara dan organisasi
satu atau lebih jamu atau ekstraknya. Jika lebih dari satu ramuan misalnya EMA [5, 11], FDA [4], AOAC [12], WHO [13], Ringkasan
digunakan, istilah "produk herbal campuran" digunakan. Istilah Pengobatan Herbal USP [14], Standar Medis Materia Cina Hong
"Botani" dari FDA [4] berarti produk yang mencakup bahan Kong [15],
Farmakope Herbal Indonesia (Bahasa Indonesia Herbal
tumbuhan, ganggang, jamur makroskopis, dan kombinasinya; tidak Farmakope) [16], Asosiasi Produk Herbal Amerika [17], dan
termasuk produk yang mengandung hewan atau bagian tubuh Farmakope Inggris (BP) 2018 [18]. Sayangnya metode resmi
hewan, tumbuhan transgenik, produk yang dihasilkan oleh fermentasi yang dijelaskan sangat umum, dan hanya memiliki spesifik
ragi, bakteri, sel tumbuhan, atau organisme mikroskopis lainnya, dan aplikasi untuk jamu atau bahan ramuan tertentu. Tampaknya metode
senyawa yang sangat dimurnikan baik yang berasal dari alam atau yang dijelaskan tidak dapat diterapkan langsung untuk menganalisis
yang dimodifikasi secara kimiawi. Produk yang mengandung campuran jamu dalam sediaan produk. SEBUAH spesifik Metode
konstituen terisolasi yang ditentukan secara kimiawi, atau analisis, sebagai alat QC, harus dikembangkan sendiri dan divalidasi
campurannya, bukanlah produk jamu [5]. oleh perusahaan farmasi untuk setiap sediaan produk herbal mereka.

Di Indonesia, jamu biasa disebut Obat tradisional , dan terdiri

dari: (1) obat tradisional nonstandar ( Jamu), ( 2) obat herbal Beberapa artikel review menarik tentang metode QC untuk jamu telah
terstandar ( Obat Herbal Terstandard diterbitkan. Jiang dkk. pada tahun 2010 [ 19] menjelaskan beberapa
atau OHT). Ini berarti obat-obatan herbal yang keamanan dan pendekatan analitis untuk kendali mutu (QC) obat-obatan tradisional
kemanjurannya telah dibuktikan dengan studi praklinis, dan (3) Cina. Strategi QC untuk pengobatan Tiongkok diusulkan oleh Li dkk. pada
Fitofarmasi ( Fitofarmasi), yang dapat didefinisikan sebagai (2) tahun 2011. [20]. Panci dkk. ( 2013) [21] diusulkan
1600 Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018
merupakan proses integrasi teknologi analitik jamu dari bahan
baku hingga ekstrak jadi atau bahan aktif menggunakan
kombinasi metode spektroskopi dan analisis multivariat (MVA).
Metode validasi analitik umum untuk analisis obat-obatan botani
ditinjau dan dibahas oleh Brown dan Lister [22], sementara
metode kromatografi validasi analisis untuk aplikasi spesifik
untuk obat-obatan herbal telah ditinjau baru-baru ini oleh penulis
[23], Chen dkk. ( 2017) mengusulkan strategi holistik untuk
pengendalian kualitas dan keamanan obat-obatan tradisional
Cina [24]. Abdel-Tawab menjelaskan penilaian metode yang
sangat umum untuk tumbuhan sebagai produk PFS [6].
Dalam tiga tahun terakhir beberapa perkembangan baru yang
penting dalam metode QC untuk obat herbal telah dipublikasikan:
(1) deskripsi baru tentang penanda sebagai alat QC, dan metode
penentuan; (2) penerapan profil kimiawi untuk penentuan jamu
tertentu dalam obat herbal, secara kualitatif dan kuantitatif; (3)
penetapan batas deteksi sampel dan verifikasinya; dan (4) teknik
statistik yang lebih baru dari metode validasi. Sayangnya,
aspek-aspek baru tersebut tidak dibahas secara rinci dalam
tinjauan yang dijelaskan sebelumnya [6, 19-24]. Artikel kali ini
akan membahas aspek-aspek baru ini dan perkembangan terkini
lainnya yang dapat diterapkan, dan berguna sebagai alat QC
untuk industri farmasi.
Metode pengambilan sampel dalam proses pembuatan jamu:
Pengambilan sampel adalah bagian terpenting dari QC dalam industri farmasi; jika sampel tidak
representatif, seluruh proses QC tidak berguna. USP <561> [25] telah dijelaskan sebagai
metode pengambilan sampel untuk sampel yang berasal dari tumbuhan atau tumbuhan.
Semua kontainer harus dijadikan sampel jika jumlah kontainer (n) = 1-10; 11 kontainer jika n =
11-19; Jika n kontainer> 19 maka jumlah kontainer yang akan diambil sampelnya adalah 10 + n /
10. Sampel harus diambil dari bagian atas, tengah dan bawah wadah. Jika bahan tanaman
terdiri dari bagian <1 cm atau kurang atau bahan bubuk, perangkat pengambilan sampel dapat
digunakan; jika sampel memiliki bagian> 1 cm, sampel dapat ditarik dengan tangan. Untuk
wadah dengan bahan <1 kg, setelah pencampuran, sampel dapat diambil dalam jumlah yang
cukup; untuk kontainer 1-5 kg, sampel harus ditarik dari atas, bagian tengah dan bawah; jika
wadah> 5 kg, sampel 250 g harus ditarik dari bagian atas, tengah dan bawah, dan setelah
pencampuran, sebagian diambil untuk pengujian. WHO [13] merekomendasikan prosedur
pengambilan sampel tumbuhan sebagai berikut: untuk wadah atau kemasan n = 5, semua
harus diambil sampelnya; n = 6-50, sampel harus diambil dari masing-masing lima wadah; n>
50, ambil 10% untuk sampel, bulatkan jumlah unit ke kelipatan terdekat 10, misalnya jika n = 52
ini akan dijadikan sampel sebagai n = 60. Metode pengambilan sampel umum yang telah
dijelaskan secara rinci di USP 41 < 1010> [26] dapat diterapkan untuk sampel pada setiap tahap
lini produksi dalam proses pembuatan obat turunan herbal di industri farmasi; dalam hal ini,
metode pengambilan sampel acak biasanya direkomendasikan. 250 g sampel harus ditarik dari
bagian atas, tengah dan bawah, dan setelah pencampuran, sebagian diambil untuk pengujian.
WHO [13] merekomendasikan prosedur pengambilan sampel tumbuhan sebagai berikut: untuk
wadah atau kemasan n = 5, semua harus diambil sampelnya; n = 6-50, sampel harus diambil
dari masing-masing lima wadah; n> 50, ambil 10% untuk sampel, bulatkan jumlah unit ke
kelipatan terdekat 10, misalnya jika n = 52 ini akan dijadikan sampel sebagai n = 60. Metode
pengambilan sampel umum yang telah dijelaskan secara rinci di USP 41 < 1010> [26] dapat diterapkan menggunakan
untuk sampel pada setiap tahap
Metode profil kimia sebagai alat QC untuk obat-obatan herbal:
Mengonfirmasi identitas jamu atau ekstrak yang masuk merupakan
langkah penting dalam menghasilkan produk jamu yang berkualitas
baik (Gambar 1). Metode umum untuk identifikasi bahan tanaman
atau jamu dengan menggunakan metode makroskopis, mikroskopis,
dan kromatografi dijelaskan secara resmi misalnya oleh WHO [13],
Kompendium Obat Herbal USP [14], Farmakope Jamu Indonesia [16],
Asosiasi Produk Herbal Amerika [17], BP 2018 [18] dan USP 41 <563>
[27]. Pengalaman kami menunjukkan bahwa penerapan hanya
metode makroskopis dan mikroskopis untuk identifikasi jamu
komersial atau bahan jamu tidak dapat digunakan, karena kurangnya
spesifisitas, dan dengan demikian metode identifikasi profil kimia dan
/ atau DNA tambahan diperlukan untuk dipertunjukkan. Ini
Indrayanto
Metode makroskopis dan mikroskopis merupakan karakteristik,
tetapi tidak spesifik. Metode KLT untuk identifikasi barang yang
berasal dari tumbuhan dijelaskan oleh USP 41 <203> [28], dan
<1064> [29]. Evaluasi metode HPTLC dilakukan dengan
membandingkan secara visual kromatogram sampel dan bahan
referensi botani asli (BRM); urutan zona (spot) yang ada
posisi tertentu (R f), warna dan intensitas (profil TLC atau sidik
jari) dievaluasi dan dibandingkan. Evaluasi TLC / HPLC
kromatogram hanya dengan cara visual (yaitu membandingkan R f, R t, intensitas dan warna
puncak), seperti yang dijelaskan dalam beberapa panduan seperti yang ditunjukkan di atas,
bisa sangat subjektif dan sulit. Identik R f / R t, warna dan intensitas dua titik /
puncak tidak berarti senyawa yang identik.
Itulah mengapa dianjurkan untuk mengevaluasi kromatogram (HPLC /
TLC) dengan menggunakan detektor DAD atau pemindai TLC
(densitometri). Dengan menggunakan ini, identitas dan kemurnian
puncak target dapat dievaluasi dengan perbandingan dengan standar
otentik. Evaluasi TLC-spot juga dapat dilakukan dengan menggunakan
metode video-densitometric, namun sayangnya pada metode ini
identitas dan kemurnian puncak tidak dapat dievaluasi. Baru-baru ini
Frommenwiller dkk. [ 30] menerapkan profil puncak (PPI) langsung dari
gambar sidik jari dari bintik TLC untuk mengevaluasi sampel Angelica
gigas akar. Untuk memastikan struktur kimia dari titik target / puncak
TLC [31] atau HPLC dengan jelas, sistem kromatografi harus
digabungkan dengan detektor MS.
.
Kerugian utama dari penerapan metode kromatografi adalah memakan waktu; Hal ini karena
berbagai alasan yaitu sampel harus diekstraksi dengan pelarut yang dipilih, stabilitas sampel
dalam pelarut yang dipilih ini harus dievaluasi, dan semua puncak target harus dievaluasi
mengenai identitas dan kemurniannya [23]. Untuk mengatasi masalah ini, penerapan metode
langsung (MS, FT-IR, NIR, dan Raman) untuk identifikasi bahan dan ekstrak herbal dalam
sediaan obat dapat lebih disukai dan sangat menarik. Beberapa publikasi baru-baru ini
melaporkan penerapan MS langsung yang dikombinasikan dengan analisis multivariat (MVA)
untuk mengidentifikasi bahan bubuk herbal, adulterant dan herbal terkait [32-34]. Tampaknya
identifikasi MS langsung pada tanaman atau tumbuhan lebih spesifik dibandingkan dengan
pembuatan profil DNA, terutama untuk spesies herbal yang berkerabat dekat [35, 36].
Kekurangan dari penerapan LC-MS / MS- atau direct MS-profiling adalah relatif tingginya harga
peralatan dan biaya operasinya; belum banyak perusahaan farmasi yang memanfaatkan
peralatan ini. Penerapan metode ATR-FT-IR lebih disukai untuk identifikasi langsung dan
estimasi kuantitatif jamu yang telah banyak digunakan di China; Hal ini dikarenakan biaya
operasi yang relatif rendah, sehingga disarankan untuk menerapkan metode ATR-FT-IR sebagai
alat QC untuk perusahaan farmasi, khususnya untuk negara berkembang. Penerapan metode
ATR-FT-IR lebih disukai untuk identifikasi langsung dan estimasi kuantitatif jamu yang telah
banyak digunakan di China; Hal ini dikarenakan biaya operasi yang relatif rendah, sehingga
disarankan untuk menerapkan metode ATR-FT-IR sebagai alat QC untuk perusahaan farmasi,
khususnya untuk negara berkembang. Penerapan metode ATR-FT-IR lebih disukai untuk
identifikasi langsung dan estimasi kuantitatif jamu yang telah banyak digunakan di China; Hal
ini dikarenakan biaya operasi yang relatif rendah, sehingga disarankan untuk menerapkan
metode ATR-FT-IR sebagai alat QC untuk perusahaan farmasi, khususnya untuk negara
berkembang. . Penerapan metode IR untuk QC obat tradisional China telah dijelaskan dan
ditinjau oleh Sun dkk. [ 37]. Metode QC untuk obat herbal telah diterbitkan dan ditinjau
spektroskopi FT-IRlini
danproduksi
Raman dalam proses
[38, 39]. pembuatan
Nilai yang obat
berbeda Panax herbal di industri farmasi; dal
dariturunan
notoginseng serbuk dapat dibedakan secara langsung dengan menggunakan FT-IR dan 2D
FT-IR [40]. Kombinasi pencitraan mikro-spektroskopi ATR-FTIR dapat diterapkan secara
langsung untuk mengidentifikasi campuran kompleks obat herbal bubuk [41].
Kandungan kimiawi jamu dan bahan jamu sangat kompleks dan oleh karena itu
evaluasi profil kimiawi (kromatografi dan spektroskopi) harus dilakukan dalam
kombinasi dengan MVA yaitu PCA, HCA, PLS-DA, SIMCA dll. Sepertinya sangat
sulit atau tidak mungkin. untuk mengevaluasi profil kromatografi atau
spektroskopi sampel tanpa kombinasi apapun dengan MVA. Kromatografi dan
spektroskopi profil / sidik jari yang sebagian besar dikombinasikan dengan MVA
telah banyak digunakan untuk evaluasi atau QC bahan ramuan / tumbuhan;
beberapa contoh bagus telah dijelaskan dalam publikasi sebelumnya [2, 19, 34,
42-44]. Beberapa
Metode pengendalian mutu untuk jamu
Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi profil kimiawi adalah
kualitas sampel, metode pengeringan, metode ekstraksi, peralatan,
metode analitik dan validasinya. Profil kimiawi sampel yang identik
akan ditunjukkan oleh pengelompokan yang ketat di plot skor PCA.
Untuk tujuan QC, identitas bahan mentah atau ekstrak herba (yang
masuk) umumnya dapat dievaluasi dengan menggunakan teknik
pengenalan pola yaitu soft independent modelling of class analogogy
(SIMCA) [23, 45]; Metode lain misalnya analisis diskriminan linier (LDA)
atau klasifikasi mesin vektor dukungan (SVMC) dapat diterapkan [46,
47]. Penentuan kuantitatif jamu tertentu dalam sediaan obat dapat
dilakukan dengan menggunakan regresi PLS; Misalnya yang diberikan
oleh Wang dkk. [ 36]. Penentuan kuantitatif komponen campuran jamu
juga dapat dilakukan dengan menggunakan rasio dua puncak spesifik
FT-IR [37]. Pemrosesan profil kimiawi (profil metabolit atau
metabolomik) data (misalnya LC / GC-MS, NMR) dapat diselesaikan
dengan menggunakan berbagai perangkat lunak online gratis [48];
Pengalaman kami menunjukkan bahwa peralatan LC-HR MS / MS yang
canggih umumnya sudah dilengkapi dengan software MVA. Analisis
kesamaan kromatogram atau spektra FT-IR sampel dan BRM juga
dapat dilakukan dengan menghitung koefisien korelasinya ( r) dan
kesesuaian ( c) nilai-nilai; nilai r dan c dekat dengan satu berarti bahwa
profil kimianya identik; nilai ambang batas r harus> 0,990 [49, 50].
Profil kimiawi yang identik dari dua sampel menunjukkan bahwa
sampel tersebut memiliki biokimia kualitatif dan kuantitatif yang
identik, sehingga kedua sampel tersebut bersifat fitoeuivalen satu
sama lain; ini berarti bahwa kedua sampel tersebut akan memiliki
bioaktivitas atau toksisitas yang setara.
AOAC [12] menjelaskan validasi metode identifikasi botani (BIM). Untuk memvalidasi BIM untuk
aplikasi tertentu, bahan uji inferior tertentu (SITM) dan bahan uji unggul tertentu (SSTM) harus
disiapkan dan ditentukan. SITM merupakan campuran bahan nabati (herba) yang memiliki
konsentrasi bahan sasaran (herba) maksimum yang dianggap tidak dapat diterima (hasil
negatif) sesuai dengan persyaratan metode standar (SMPR), sedangkan SSTM adalah campuran
jamu yang memiliki nilai minimum konsentrasi ramuan target yang dianggap dapat diterima
(hasil positif). Untuk penyusunan SITM dan SSTM penulis merekomendasikan penggunaan BRM
resmi (jika ada), atau herba yang dibudidayakan di lokasi yang ditentukan dan telah
teridentifikasi secara ilmiah. Menurut USP 41 <1039> [51] setiap metode kimia yang
dikombinasikan dengan analisis kemometri harus menunjukkan kemampuan untuk
mengidentifikasi dengan benar atau mengklasifikasikan sampel ramuan, sehingga kurva
karakteristik operasi penerima (ROC) harus dibangun. Kurva KOP dapat dibangun dengan
menggunakan nilai rasio positif-benar (TPR) versus rasio positif-palsu di atas ambang batas
keputusan; Metode identifikasi yang baik harus menghasilkan kurva KOP dengan area di bawah
kurva (AUC) mendekati satu. Sampel dengan 0% dan 100% SSTM dapat digunakan untuk
memilih BIM tumbuhan tertentu berdasarkan ROC. Validitas metode BIM yang ditentukan oleh
kurva KOP harus divalidasi menggunakan metode probabilitas identifikasi (POI) sesuai ke AOAC
Lampiran K [12]. Tujuan ideal dari metode validasi adalah diskriminasi SSTM dan SITM dengan
tingkat kepercayaan tertentu (mis. sehingga kurva karakteristik operasi penerima (ROC) harus
dibuat. Kurva KOP dapat dibangun dengan menggunakan nilai rasio positif-benar (TPR) versus
rasio positif-palsu di atas ambang batas keputusan; Metode identifikasi yang baik harus
menghasilkan kurva KOP dengan area di bawah kurva (AUC) mendekati satu. Sampel dengan
0% dan 100% SSTM dapat digunakan untuk memilih BIM tumbuhan tertentu berdasarkan ROC.
Validitas metode BIM yang ditentukan oleh kurva KOP harus divalidasi menggunakan metode
probabilitas identifikasi (POI) sesuai ke AOAC Lampiran K [12]. Tujuan ideal dari metode validasi
adalah diskriminasi SSTM dan SITM dengan tingkat kepercayaan tertentu (mis. sehingga kurva
karakteristik operasi penerima (ROC) harus dibuat. Kurva KOP dapat dibangun dengan
menggunakan nilai rasio positif-benar (TPR) versus rasio positif-palsu di atas ambang batas
keputusan; Metode identifikasi yang baik harus menghasilkan kurva KOP dengan area di bawah
kurva (AUC) mendekati satu. Sampel dengan 0% dan 100% SSTM dapat digunakan untuk
memilih BIM tumbuhan tertentu berdasarkan ROC. Validitas metode BIM yang ditentukan oleh
kurva KOP harus divalidasi menggunakan metode probabilitas identifikasi (POI) sesuai ke AOAC
Lampiran K [12]. Tujuan ideal dari metode validasi adalah diskriminasi SSTM dan SITM dengan
tingkat kepercayaan tertentu (mis. Kurva KOP dapat dibangun dengan menggunakan nilai rasio positif-benar (TPR)faktor
Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018 1601
Metode profil kimia (kromatografi dan spektroskopi) yang
dikombinasikan dengan MVA juga dapat diterapkan sebagai alat QC
untuk evaluasi atau standarisasi sampel IPC dan FP selama produksi.
Untuk memvalidasi metode, persiapan IPC dan FP yang dibuat di
laboratorium harus disiapkan sebagai perangkat pelatihan untuk
membangun model SIMCA untuk analisis kualitatif. Estimasi
kuantitatif tumbuhan tertentu dalam sampel IPC dan FP dapat
dilakukan dengan menggunakan regresi PLS. Validitas model dapat
diuji dengan menggunakan validasi silang, atau dengan sediaan LM
lain atau bahan ramuan / makanan [53-55]. Evaluasi profil kimiawi
sampel dan preparasi LM untuk setiap tahapan produksi juga dapat
dilakukan dengan menggunakan metode similarity (menggunakan r atau
c), seperti dijelaskan di atas. Karena waktu analisis yang relatif cepat
dan biaya operasi yang rendah, penerapan kombinasi ATR-FT-IR
langsung dengan evaluasi kemometri sangat disarankan sebagai alat
QC untuk jamu atau ekstrak dalam sediaan obat herbal. Kombinasi
turunan kedua dan dua dimensi (2D) -FT-IR dengan MVA dapat
diterapkan jika 1D-ATR-FT-IR gagal menunjukkan ROC yang baik.
Untuk tujuan QC menggunakan metode profil kimia, diperlukan
ketersediaan BRM, ekstrak standar, dan sampel LM standar dari setiap
tahap produksi. Standarisasi ekstrak atau sampel LM yang akan
digunakan untuk QC sebaiknya dilakukan dengan menggunakan
peralatan yang lebih canggih seperti LC / GC-MS (MS).
Profil DNA sebagai metode identifikasi untuk tumbuhan: Identifikasi
sampel tumbuhan atau tumbuhan menggunakan profil berbasis DNA
telah dijelaskan oleh USP 41 <563> [27]. Metode ini diterapkan untuk
membedakan spesies yang sangat mirip atau mirip secara morfologis;
ini termasuk kode batang DNA dan DNA (Sanger). Pengkodean batang
DNA adalah metode identifikasi berbasis urutan DNA tertentu yang
menggunakan urutan pendek lokus DNA plastid inti khusus untuk
identifikasi spesies tanaman. Identifikasi botani menggunakan
metode sekuensing DNA (Sanger) meliputi seleksi penanda, ekstraksi
DNA, primer dan amplifikasi polymerase chain reaction (PCR),
sekuensing DNA dan perbandingan dengan bahan referensi. Diskusi
rinci yang menggambarkan aplikasi profil DNA termasuk kode batang
DNA, dan keterbatasan mereka untuk identifikasi tumbuhan,
dilaporkan dalam publikasi sebelumnya [56-58]. dkk. [ 59] melaporkan
penerapan metode kode batang DNA untuk mengidentifikasi
tanaman Tinospora sp dalam sediaan suplemen herbal komersial
(tablet dan kapsul).
Karena banyak faktor eksternal yang dapat mempengaruhi
kandungan metabolit (sekunder) tanaman baik secara kualitatif
maupun kuantitatif, alat QC menggunakan DNA profiling. harus
diselesaikan menggunakan metode kimia; diketahui bahwa profil
bioaktivitas dan toksisitas produk herbal bergantung pada kandungan
biokimianya secara kualitatif dan kuantitatif. Untuk alasan ini,
penerapan profil DNA saja sebagai alat QC tidak disarankan; tanaman
yang memiliki profil DNA identik mungkin memiliki profil kimiawi yang
berbeda. Kombinasi studi profil DNA dan metabolit akan sangat
berguna untuk menentukan apakah perbedaan kandungan metabolit
tumbuhan atau tumbuhan disebabkan oleh perbedaan strain spesies
tumbuhan atau beberapa faktor eksternal.
Penanda dan aplikasinya sebagai alat QC obat herbal:
USP 41 <563> [27] menjelaskan penanda sebagai aktif, analitis
dan negatif, sementara EMA [5] menjelaskan penanda aktif dan
analitis saja. Penanda juga dapat dikategorikan dan diringkas
sebagai berikut: komponen terapeutik, komponen toksik,
komponen bioaktif, utama komponen, sinergis komponen,
komponen karakteristik dan komponen korelatif. Namun, karena
banyak
eksternal
versus rasio yang
positif-palsu dapat
di atas mempengaruhi
ambang profil
batas keputusan; Metode kimiawi
identifikasi yang baik harus mengh
kualitatif dan kuantitatif tanaman, penerapan definisi penanda
sederhana sebagai alat QC sayangnya tidak bisa langsung
1602 Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018
diterapkan [1, 60]. Untuk mengatasi masalah ini Benssousan dkk. [ 1]
mengusulkan istilah baru yaitu Sistem Peringkat Penanda Kimia Herbal ( Herb
MaRS). Dalam sistem baru ini, penanda kimia diberi peringkat dalam
berbagai kategori yaitu x, 0, 1, 2, 3, 4 dan 5; peringkat ini didasarkan pada
pengamatan langsung terhadap efek terapeutik atau toksik yang dapat
dideteksi dan diukur untuk penanda dalam sediaan herbal; hanya Herb
MaRS yang memiliki peringkat 3-5 yang dapat diterapkan sebagai alat QC.
Baru-baru ini, Rivera-Mondragôn dkk. [ 61] melaporkan beberapa penanda
kimia yang dapat diterapkan sebagai alat QC untuk genus tersebut
Cecropia berdasarkan kategori Herbal MaRS. Pedoman WHO [62]
menjelaskan metode pemilihan penanda sebagai alat QC; pedoman ini
menjelaskan penanda sebagai konstituen dengan aktivitas terapeutik dan
atau farmakologis yang diketahui, dan penanda harus dapat dideteksi dan
diukur, sehingga penanda harus muncul dalam jumlah yang cukup dalam
obat herbal. Jika penanda digunakan untuk BIM, itu harus spesifik untuk
satu tumbuhan atau spesies dan marga tumbuhan tertentu. Liu dkk.
[63] dan Yang dkk. [ 64] mengusulkan istilah tersebut Penanda-Q
yang dapat diringkas sebagai berikut: (1) marker adalah
senyawa kimia yang terdapat pada tumbuhan dalam jumlah
yang dapat dilacak; (2) penanda dapat ditentukan secara
kualitatif dan kuantitatif; (3) penanda harus dikaitkan dengan
bioaktivitas khusus; (4) efek terkait dan data farmakokinetik
penanda diketahui; dan (5) penanda harus dikaitkan dengan
penggunaan tradisional. Dapat diasumsikan bahwa definisi
WHO tentang marker terpilih, dan istilah Q-marker
menunjukkan deskripsi yang hampir sama dengan Herb
MaRS peringkat 3-5. Untuk penyederhanaan, semua kategori
penanda ini akan dijelaskan dalam ulasan ini sebagai kualitas
penanda aktif ( QA-marker). Jika untuk tumbuhan tertentu
penanda QA belum ditentukan, kombinasi profil kimiawi,
bioaktivitas / profil klinis dan PLS-DA dapat dilakukan untuk
menentukan penanda QA. Sayangnya, hanya sedikit publikasi
yang menggambarkan penanda QA untuk tumbuhan tertentu
yang muncul saat ini (2015-2018); dan sebagian besar
publikasi terbaru ini tidak menyebutkan batas kisaran
spesifikasi (λ) dari penanda QA untuk aplikasi terapeutik
tertentu. Untuk tujuan QC, semua sediaan obat komersial
harus memiliki profil target analitik terperinci (ATP), di mana
konsentrasi target τ ± λ dari bahan aktif farmasi (API) harus
dijelaskan.
Konstituen penanda minat atau identitas (untuk masing-masing monograf herba) telah
dijelaskan oleh beberapa pedoman [14-16]. Pengalaman kami menunjukkan bahwa
tidak mudah untuk memilih spesifik c penanda kimia untuk a tumbuhan atau tumbuhan
tertentu; senyawa yang menarik mungkin tidak terdeteksi di tanaman yang dijelaskan,
atau bisa juga terdeteksi di banyak tanaman lain [1, 60]. Oleh karena itu, memang
demikian adanya tidak direkomendasikan untuk menerapkan penanda identitas atau
senyawa yang diminati ini sebagai BIM tunggal untuk tanaman obat atau bahan
tanaman komersial individu, atau dalam campurannya. Untuk validasi BIM dengan
menggunakan penanda kimia, SITM dan SSTM harus disiapkan (bagian 3), dan ini bisa
sangat sulit, karena konsentrasi penanda pada tanaman dapat dipengaruhi oleh
banyak faktor eksternal [1].
Diketahui bahwa kandungan kimiawi sediaan obat herbal sangat
kompleks, sehingga pemilihan metode alat QC harus
kromatografi (HP / TLC, UPLC, HPLC, GC); semua metode harus
divalidasi terlebih dahulu, sebelum diterapkan untuk aplikasi
rutin. Parameter validasi yang paling penting adalah selektivitas
atau spesifisitas metode; identitas dan kemurnian semua puncak
target dalam sampel harus dievaluasi dan diverifikasi
menggunakan detektor DAD atau MS; nilai Rs dari puncak target
ke puncak terdekat harus> 1,75. Jika pemantauan beberapa reaksi
(MRM) oleh LC-MS / MS dapat dilakukan, tidak perlu memeriksa
nilai Rs dari puncak target, jika struktur kimia
Indrayanto
penanda target sudah diketahui. Perkembangan terbaru yang penting
dalam metode validasi kromatografi untuk pendekatan senyawa /
penanda telah ditinjau dan dibahas baru-baru ini [23]. Rangkuman
singkat perkembangan penting disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1: Ringkasan perkembangan terbaru dalam metode validasi untuk pendekatan penanda.
• Koefisien korelasi (r) tidak dapat diterapkan sebagai parameter tunggal untuk menyatakan linearitas
(bahkan r mendekati 1)
• Nilai uji yang dihitung Xa / Xp Sebuah harus <tingkat konsentrasi terendah dari standar
kalibrasi
• Akurasi / kebenaran dan presisi harus dievaluasi secara bersamaan dengan kriteria
penerimaan tunggal
• Tidak disarankan untuk mengevaluasi akurasi / kebenaran dan presisi secara independen. R Sebuah
• penanda QA dalam jamu komersial harus dimasukkan dalam kisaran spesifikasi batasnya
• Contoh DL Sebuah harus ditentukan dan diverifikasi untuk setiap matriks
• Pengendalian mutu internal harus dilakukan untuk setiap rangkaian pengukuran di
laboratorium QC
Sebuah Lihat teks untuk penjelasan
AOAC menerbitkan Persyaratan Kinerja Metode Standar (SMPR) untuk
menganalisis senyawa tertentu (penanda) dalam sediaan tertentu.
SMPR ini menjelaskan persyaratan kinerja metode untuk senyawa
tertentu (pemulihan, pengulangan, reproduktifitas, batas deteksi),
tetapi sayangnya metode analisis rinci tidak dijelaskan. Misalnya,
AOAC SMPR
2017.003 [65] menjelaskan SMPR proanthocyanidin dalam buah cranberry,
jus, minuman, cranberry kering, saus cranberry, bahan dan formulasi
suplemen makanan. Monografi ringkasan obat-obatan herbal USP [14] dan
pedoman lain [15-18] secara umum menjelaskan metode analisis dan minimum
kriteria konsentrasi dari suatu atau kelompok penanda tertentu
dalam sediaan herbal tertentu. Metode analisis yang dijelaskan
dapat diterapkan untuk bahan mentah atau sediaan tertentu
yang dijelaskan, tetapi sayangnya tidak dapat digunakan untuk
menganalisis penanda dalam sediaan jamu lain atau sediaan obat
herbal campuran. Metode analisis penanda yang valid harus
dikembangkan untuk setiap sediaan obat herbal tertentu.
Baru-baru ini Langer dkk. [ 66] menyatakan bahwa kriteria
konsentrasi minimal
dari tertentu penanda, atau Sebuahkelompok dari
konstituen / penanda dalam tumbuhan tertentu, yang dijelaskan oleh
beberapa pedoman, tidak bisa dikorelasikan langsung dengan kualitas
atau khasiatnya, tetapi terkadang kriteria ini hanya dapat dikorelasikan
dengan kualitas jamu tertentu. Untuk menghubungkan konsentrasi
penanda tertentu dalam sediaan herba dengan kemanjuran dan
keamanannya, penghitungan QA- penanda harus dilakukan untuk
menentukan apakah konsentrasinya dalam sediaan herba termasuk dalam
kisaran spesifikasi batasnya.
Karena jumlah yang terbatas dan harga yang relatif tinggi dari banyak
penanda standar otentik, penentuan kuantitatif penanda dalam jamu
sebagai alat QC terkadang menjadi sangat sulit. Ning
dkk. [ 67], Xu dkk. [ 68] dan Zhu dkk. [ 69] mengusulkan analisis kuantitatif
multi-komponen hanya menggunakan satu penanda ( QAMS), atau standar
referensi tunggal untuk penentuan multi-komponen (SSDMC). Metode ini
bisa tidak butuh untuk memiliki semua standar otentik untuk penghitungan
banyak penanda dalam jamu. Para penulis tersebut mengusulkan metode
yang digunakan satu penanda hanya sebagai standar; perhitungan
konsentrasi untuk penanda lain dapat dilakukan dengan menggunakan
koreksi atau faktor konversi (F).
//
Fx= i = 1, 2 ......... n ( 1)
F x = Σ • .............................. ( 2)
C x = SEBUAH x. C s. () .................... ( 3)
dimana s = penanda standar, x = penanda x, A = detektor respon atau area puncak; C =
konsentrasi, i = tingkat konsentrasi, n = banyaknya tingkat konsentrasi.
Metode pengendalian mutu untuk jamu
Menurut EMA [70], untuk melakukan kalibrasi satu titik (persamaan 3),
konsentrasi Cx harus berada dalam ± 30% dari Cs. Metode validasi
untuk QAMS atau SSDMC dapat dilakukan dengan menggunakan
metode penambahan standar, seperti yang dijelaskan dalam tinjauan
kami sebelumnya [23], atau dengan membandingkan hasil analisis
menggunakan metode QAMS / SSDMC dengan hasil analisis yang
menggunakan standar spesifik untuk setiap penanda ; metode
validasi rinci untuk membandingkan dua prosedur telah dijelaskan
dalamUSP 41 <1010> [26].
Hasil (R) dari analisis penanda QA dalam sediaan obat herbal,
atau hasil evaluasi pemulihan harus dimasukkan dalam kisaran
spesifikasi yang telah ditentukan sebelumnya (klaim label /
konsentrasi target ± λ) yang dijelaskan dalam ATP; R harus
dihitung dengan persamaan 4 bukan persamaan 5.
R = Rata-rata ± CI / PI / TI ………. ( 4)
R = Rata-rata ± SD (RSD) ……. . ( 5)
CI adalah interval kepercayaan, PI adalah interval prediksi dan TI adalah interval toleransi;
persamaan rinci dijelaskan dalam USP 41 <1010> dan <1210 [26, 71]. Untuk tujuan QC,
disarankan untuk menerapkan TI daripada CI atau PI [23].
Baru-baru ini Zhao dkk. [ 9] mengusulkan polisakarida tertentu sebagai penanda QA
untuk alat QC untuk pengobatan tradisional China (TCM), karena sejarah panjang
penerapan air rebusan untuk TCM. Shi dkk. [ 66] diusulkan efektif penanda
kombinatorial (ECM), sedangkan Guo dkk. [ 10] mengusulkan kombinasi senyawa efektif
(EEC) sebagai pengganti penanda tertentu sebagai alat QC holistik untuk jamu. EMC
atau EEC ditentukan dengan menggunakan model bioaktivitas (hewan). Lee dkk. [ 73]
menentukan 14 penanda secara bersamaan (peringkat MaRS herba> 3) dari formulasi
pengobatan Tiongkok yang mengandung tujuh campuran herba; Konsep yang sama
menggunakan banyak penanda sebagai alat QC dikembangkan oleh Yang dkk.
(74); penanda ini diberi nama penanda kimia bioaktif
(BMC). Menurut uraian EMC, EEC dan BMC, kategori penanda ini juga
dapat didefinisikan sebagai penanda QA. Analisis beberapa
QA-marker tertentu dari sediaan obat herbal dapat digunakan untuk
menggantikannya konvensional profil kimiawi, tetapi pekerjaan lebih
lanjut diperlukan untuk mengonfirmasi hal ini. Kesimpulannya,
hitungan dari penanda tertentu sebagai alat QC untuk sediaan obat herbal
dapat diaplikasikan dengan baik dan berkorelasi dengan kemanjurannya
jika penanda tersebut adalah penanda QA. Sebagai alat QC, harus
ditentukan batasan spesifikasi setiap penanda QA (klaim label atau
konsentrasi target ± λ) untuk setiap jamu yang dipasarkan untuk aplikasi
terapeutik tertentu.
Analisis bahan kimia dan senyawa toksik dalam jamu: Untuk
menjamin keamanan sediaan obat herbal, konsentrasi metabolit
toksik endogen, logam berat, sisa pestisida, mikotoksin, bahan
tambahan organik berbahaya, polutan, obat kimia dan antibiotik
dalam obat atau ekstrak herbal harus di bawah level maksimum
yang diizinkan (MPL) atau batas sisa maksimum (MRL); Artinya,
metode yang digunakan harus memiliki batas deteksi sampel (DL)
di bawah MPL-nya. Jumlah senyawa toksik endogen tidak boleh
lebih dari 1,5 µg / hari untuk senyawa karsinogenik dan
genotoksik [1].
Menurut pedoman VICH GL 49 [75] batas deteksi sampel harus
ditentukan dalam dua langkah yaitu pertama dengan penentuan DL
instrumen, dan kemudian DL sampel, seperti yang dijelaskan oleh
persamaan 6 dan 7. Direkomendasikan untuk menentukan DL sampel
untuk setiap matriks yang berbeda . Instrumental QL (batas
kuantifikasi) diestimasi dengan 3 Dl. Sejumlah senyawa toksik standar
pada konsentrasi QL instrumen dibubuhi ke matriks, kemudian
Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018 1603
sampel dianalisis menggunakan metode yang diusulkan, dan SD
dihitung (n = 7 ulangan).
Contoh DL = ts .......... ( 6)
Sampel QL = 3. DL ....... ( 7)
dimana t adalah satu sisi ( p = 99%, n-1), dan s adalah SD hasil analisis sampel
berduri,
Direkomendasikan untuk menerapkan metode USP 41 <1210>
atau VICH GL49 [71, 75] untuk menentukan DL instrumen.
Untuk ini, kurva regresi linier yang menggunakan konsentrasi
senyawa toksik target yang relatif rendah dalam matriks
tertentu harus dibuat. Metode penentuan DL ini identik
dengan yang dijelaskan sebelumnya oleh Funk dkk. [ 76];
dalam hal ini, DL = Nilai uji Xp / Xa ( p = 0,05), dan QL = 3 DL.
Diskusi rinci mengenai Xp / Xa ini disediakan oleh publikasi
sebelumnya [23, 76]. Sample DL yang telah dihitung dengan
persamaan 6 harus diverifikasi menurut Eurachem Guide [77].
Untuk verifikasi ini, nilai batas harus ditentukan dengan
negatif palsu tidak lebih dari 5%, sebagai kriteria penerimaan
umum. Nilai sampel DL harus lebih rendah dari nilai batas,
dan nilai batas harus lebih rendah dari MPL. Diskusi rinci
disajikan dalam review oleh penulis [23].
Metode umum untuk penentuan senyawa toksik dan MPL-nya
dalam obat-obatan herbal, seperti logam berat, pestisida, dan
toksin telah dijelaskan oleh beberapa pedoman [3, 12-14]. Metode
resmi untuk penentuan aflatoksin dan sisa pestisida juga telah
telah dijelaskan [13, 25], sedangkan metode untuk penentuan As,
Cd, Pb, total Hg, metil Hg dan logam beracun lainnya dijelaskan
oleh pedoman USP <233> [78] dan WHO [13]. EMA [64]
menjelaskan secara rinci prosedur validasi metode untuk analisis
residu pestisida. Untuk analisis obat kimia dalam pemasaran
suplemen makanan, metode resmi dari USP 41 <2251> dapat
diterapkan [79]; metode ini dapat digunakan untuk mendeteksi
obat kimia dalam obat-obatan herbal . Baru-baru ini, Thermo
Fischer Scientific mendeskripsikan metode perhitungan on-line
yaitu “Kalkulator nilai J” untuk menghitung MPL logam tertentu
dalam sediaan obat (herbal) [80].
Penentuan parameter non-spesifik dan benda asing:
Menurut American Herbal Product Association [81], WHO [13], dan
USP <561> [25] produk jamu harus bebas dari benda asing yaitu
bagian dari jamu selain yang diberi nama, tanah, batu, pasir, debu,
kaca , plastik, logam dan benda anorganik asing. Tanaman herba
harus diperiksa untuk tidak adanya tanda-tanda kontaminasi jamur,
serangga, dan hewan lain yang terkontaminasi atau kotoran; itu harus
bebas dari bau abnormal, perubahan warna, lendir atau tanda-tanda
kerusakan. Tidak spesifik parameter yang harus ditentukan adalah:
abu (abu total, abu tidak larut asam dan abu larut air), bahan yang
dapat diekstraksi (air dan etanol), air dan bahan mudah menguap,
minyak atsiri, nilai pahit, aktivitas hemolitik, indeks pembengkakan,
indeks pembusaan, total tanin, serat kasar dan kandungan pati;
metode penentuan telah dijelaskan secara rinci [13, 25]. Untuk ekstrak
tumbuhan, parameter nonspesifik yang harus ditentukan adalah
residu pada penguapan, sisa pelarut dan alkohol [82]. Tampaknya
sulit untuk menghubungkan secara langsung parameter non-spesifik
dengan aktivitas terapeutik, toksisitas dan profil kimiawi dari sediaan
obat herbal. Parameter non-spesifik ini mungkin diterapkan untuk standarisasi
sederhana dari obat-obatan herbal yang belum ditentukan penanda
QA dan / atau profil kimianya.
Kesimpulan dan rekomendasi: Untuk menghasilkan sediaan
obat herbal, nabati dan fitofarmaka yang berkualitas baik, semua
bahan baku nabati, ekstrak dan eksipien yang masuk harus
diuji secara ketat. Ini berarti bahwa QC yang lengkap harus dilakukan yaitu
1604 Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018 Indrayanto

Kisaran spesifikasi untuk penanda QA tertentu belum tersedia

secara resmi, industri farmasi harus melakukan penelitian untuk
menentukannya sebelum komersialisasi produk. Kriteria
konsentrasi minimum penanda tertentu, seperti yang dijelaskan dalam beberapa
panduan, sayangnya tidak dapat diterapkan sebagai alat QC [66].

Metode FT-IR (ATR, 2D, Imaging) yang dikombinasikan dengan MVA

Gambar 1: Parameter QC lengkap untuk setiap tahap di lini produksi jamu.
direkomendasikan sebagai alat QC untuk analisis kualitatif dan / atau
kuantitatif dari tumbuhan atau ekstrak individu dan dalam sediaan
obat. Metode ini relatif murah, cepat dan akurat dibandingkan
dengan metode kromatografi. Untuk penerapan metode FT-IR, BRM
otentik, sampel QC standar dari IP dan FP harus tersedia; SITM dan
SSTM untuk setiap metode harus ditentukan dan divalidasi terlebih
dahulu. Penulis merekomendasikan metode FT-IR sebagai alat QC
bagi perusahaan farmasi di negara berkembang.

Penerapan metode DNA hanya sebagai alat QC tidak disarankan

mengevaluasi identitas bahan mentah dan profil kimianya, kuantifikasi penanda
karena kurangnya spesifisitas; Metode DNA direkomendasikan untuk
QA (jika ada), memastikan semua senyawa beracun harus <MPL, dan
mendeteksi substitusi atau pemalsuan spesies [83]. Konstituen minat
menentukan parameter non-spesifik terpilih lainnya; semua data yang diukur
atau penanda identitas tidak direkomendasikan untuk diterapkan
dari bahan yang masuk harus memenuhi kisaran spesifikasi atau kriteria
sebagai BIM dari tumbuhan apapun; ini juga karena kurangnya
penerimaan yang telah ditentukan sebelumnya. Evaluasi kemungkinan
kekhususan.
kontaminasi senyawa toksik untuk sampel IP tidak diperlukan. Sampel FP dan KP
harus dievaluasi sesuai dengan parameter yang dijelaskan dalam sertifikat
Untuk mendapatkan hasil yang andal dari setiap analisis yang dilakukan oleh
analisis dan / atau labelnya. Laboratorium QC perusahaan farmasi harus dapat
laboratorium QC, semua metode yang digunakan harus divalidasi sesuai dengan
memastikan bahwa kandungan produk jamu persis seperti yang tertera pada
panduan terbaru. Tambahan , pengendalian kualitas internal (IC) seperti yang
label (Gambar 1).
dijelaskan oleh Eurachem [77] harus dilakukan untuk setiap rangkaian
pengukuran dengan menggunakan sampel QC. Jika hasil sampel QC tidak dapat
memenuhi kriteria penerimaan, hasil analisis dari seluruh rangkaian pengukuran
Jika penanda QA dalam ramuan tertentu sudah ditentukan dengan
pada hari itu harus dihilangkan atau harus dianalisis ulang, dan validasi ulang
baik, tidak perlu profil kimiawi untuk ramuan ini. Dalam hal ini, hasil
sebagian atau penuh dari metode tersebut dipertimbangkan.
analisis kuantitatif penanda QA dalam tanaman harus dimasukkan
dalam kisaran spesifikasi ATP yang telah ditentukan sebelumnya
(klaim konsentrasi / label target ± λ). Pekerjaan lebih lanjut diperlukan
Ucapan Terima Kasih - Penulis mengucapkan terimakasih atas
untuk menentukan kategori penanda terbaik (Q-marker, Herbs MaRS,
beberapa referensi yang telah diberikan oleh Ibu Febry Ardiana (PT
ECM, EEC, atau BMC) yang dapat menggantikan profil kimiawi. Jika
Bernofarm, Surabaya, Indonesia).
penanda QA belum ditentukan dengan baik untuk ramuan tertentu,
profil kimiawi harus dilakukan sebagai alat QC utama.

Referensi
[1] Bensoussan A, Lee S, Murray C, Bourchier S, van der Koy F, Pearson JL, Liu J, Chang D, Khoo SS. ( 2015) Memilih penanda kimiawi untuk jaminan kualitas obat
herbal kompleks: Pengembangan dan penerapan kriteria Mars Herb. Farmakologi & Terapi Klinis, 97, 628-
640.
[2] Gad HA, El-Achmady SH, Abou-Shoer MI, Al-Azizy MM. ( 2012) Penerapan kemometri dalam otentikasi jamu: Review.
Analisis Fitokimia, 24, 1-24. SIAPA. ( 2007) Pedoman Cara Pembuatan Obat yang Baik (GMP) untuk jamu. WHO Press,
[3] Jenewa, 1-92.
[4] Departemen Layanan Kesehatan, Administrasi Makanan dan Obat-obatan AS, Pusat Evaluasi dan Penelitian Obat (CDER). ( 2016). Panduan pengembangan
obat botani untuk industri Silver Spring, Maryland, 1-30.
[5] Badan Obat Eropa. ( 2011) Pedoman mutu produk jamu / produk jamu tradisional.European Medicinal Agency, London, 4-12.

[6] Abdel-Tawab M. ( 2017) Apakah kita membutuhkan suplemen makanan nabati? Pemeriksaan kritis terhadap kualitas, keamanan, kemanjuran, dan kebutuhan untuk
kerangka peraturan baru. Planta Medica, 84, 372-393. Elfahmi, Woerdenbarg HJ, Kayser O. ( 2014) Jamu: Obat tradisional Indonesia untuk penggunaan fitofarmasi yang
[7] rasional. Jurnal Pengobatan Herbal, 4, 51-73.

[8] Badan Pengawas Obatdan Makanan Republik Indonesia (BPOM). ( 2005) Peraturan Kepala BPOM Nomor: HK.00.05.41.1384. BPOM, Jakarta, 1-
14.
[9] Zhao J, Ma S-cheng, Li S-ping. ( 2018) Kemajuan untuk pengendalian kualitas Pengobatan Cina. Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis,
147, 473-478.
[10] Guo L, Duan L, Liu L-Le, Yang H, Liy E-Hu, Li P. ( 2016) Standarisasi mutu jamu dengan menggunakan kombinasi senyawa efektif sebagai konstituen berlabel.
Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis, 120, 320-331. Badan Obat Eropa. ( 2011) Pedoman spesifikasi: tata cara pengujian dan kriteria penerimaan bahan
[11] jamu, sediaan jamu dan produk jamu / produk jamu tradisional.Badan Obat Eropa, London, 5-17.

[12] AOAC International. ( 2013) Panduan untuk suplemen makanan dan tumbuhan (Metode Resmi Analisis AOAC, Lampiran K). AOAC International, Rockville,
1-32.
[13] SIAPA. ( 2011). Metode kontrol kualitas untuk bahan herbal. WHO Press, Jenewa, 1-173.
[14] Ringkasan Pengobatan Herbal USP, ( 2018) Konvensi Farmakope USP, Rockville, AS (https://hmc.usp.org/)
[15] Standar Medika Materia Cina Hong Kong, ( 2018) Departemen Kesehatan Wilayah Administrasi Khusus Hong Kong. Republik Rakyat Cina
(http://www.cmd.gov.hk/hkcmms/vol1/appendices_eng.html)
Metode pengendalian mutu untuk jamu Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018 1605

[16] KementrianKesehatanRepublik Indonesia (Kemenkes RI). ( 2013) Farmakope Herbal Indonesia.Kemenkes RI, Jakarta, 1-116.
[17] AHPA Botani Identitas Referensi Ringkasan, ( 2018) Amerika Herbal Produk Asosiasi,
(http://www.botanicalauthentication.org/index.php/Main_Page).
[18] Farmakope Inggris ( 2018), Jilid IV. Kantor Farmakope Inggris, London, 43– 467. Jiang Y, David B, Tu P, Barbin Y. ( 2010) Pendekatan analitis terbaru dalam
[19] pengendalian kualitas obat-obatan Cina: Tinjauan. Analytica Chemica Acta,
657, 9-18.
[20] Li SP, Zhao J, Yang B. ( 2011) Strategi untuk pengendalian kualitas pengobatan Tiongkok. Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis, 55, 802-
809.
[21] Pan S, Neeraj A, Srivastava KS, Kishore P, Danquah MK, Sarethy IP. ( 2013) Proposal untuk sistem mutu produk herbal. Jurnal Ilmu Farmasi, 102, 4230-4241.
Brown PN, Lister P. ( 2014) Inisiatif saat ini untuk validasi metode analitik untuk tumbuhan. Pendapat Saat Ini di Bioteknologi, 25, 124-
[22]
128.
[23] Indrayanto G. ( 2018) Validasi metode analisis kromatografi: Aplikasi untuk obat yang berasal dari tumbuhan. Di Profil Zat Narkoba, Eksipien dan Metodologi
Terkait, Vol. 43, BrittainHG. (Ed.), Elsevier Academic Press, San Diego, New York, Boston, London, Sydney, Tokyo, Toronto. 359-387.

[24] Chen A, Sun L, Yuan H, Wu A, Lu J, Ma S. ( 2017) Strategi holistik untuk pengendalian kualitas dan keamanan obat-obatan tradisional China dengan sistem
standar "iVarious". Jurnal Ilmu Farmasi, 7, 271-279. USP 41`-̀NF 36. ( 2018) Informasi umum <561> Artikel asal tumbuhan. Konvensi Farmakope USP,
[25] Rockville, 1-72. USP 41-NF 36. ( 2018) Informasi umum <1010> Penafsiran dan pengobatan data analitis. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72. USP 40-NF
[26] 36. ( 2018) Uji Kimia <563> Identifikasi asal tumbuhan. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72. USP 40-NF 36. ( 2018) Uji Kimia <203> Prosedur
[27] kromatografi lapis tipis kinerja tinggi untuk identifikasi barang yang berasal dari tumbuhan. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72.
[28]

[28] USP 40-NF 36. ( 2018) Uji Kimia <203> Prosedur kromatografi lapis tipis berkinerja tinggi untuk identifikasi barang yang berasal dari tumbuhan. Konvensi
Farmakope USP, Rockville, 1-72.
[29] USP 41-NF 36. ( 2018) Informasi umum <1064> Identifikasi barang yang berasal dari tumbuhan dengan prosedur kromatografi lapis tipis kinerja tinggi.
Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72.
[30] Frommenwiller DA, Kim J, Yook CS, Tran TT, Canigueral S, Reich E. ( 2018) Sidik jari HPTLC yang komprehensif untuk kontrol kualitas obat herbal- kasus Angelica
gigas akar. Planta Medica, 84, 465-474. Hu B, Xin G-zhong, Jadi P-kin, Yao Z-ping. ( 2015) Kromatografi lapis tipis dengan ionisasi elektrospray untuk analisis
[31] langsung sampel mentah.
Jurnal Kromatografi A, 1415, 155-160. Wang H, Jadi P-kin, Yao Z-ping. ( 2014) Analisis langsung bubuk herbal dengan spektrometri massa pipet electrospray. Analytica
[32] Chemica Acta, 809,
109-116.
[33] Wong H-Yi, Hu B, Jadi P-kin, Chan C-On, Mok D K-Wah, Xin G-Zhong, Li P, Yao Z-Ping. ( 2016) Otentikasi cepat Gastrodiae rimpang dengan spektrometri
massa langsung. AnalyticaChemicaActa, 938, 90-97.
[34] Xin G-Zhong, Hu B, Shi Z-Qi, Zheng, JY, Wang L, Chang W-Qi, Li P, Yao Z, Liu L-Fang. ( 2016) Pendekatan berbasis spektrometri massa ionisasi langsung untuk
diferensiasi obat Ephedra jenis. Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis, 117, 492-498. Xin G-Zhong, Hu B, Shi Z-Qi, Lam YC, Dong TT-Xia, Li P, Yao Z-Ping, Tsim
[35] KWK. ( 2014) Identifikasi cepat bahan tanaman dengan spektrometri massa ionisasi elektrospray ujung kayu dan strategi untuk membedakan bola lampu Fritillaria.
Analytica Chemica Acta, 820, 84-91.
[36] Wang L, Liu L-Fang, Wang J-Ying, Shi Z-Qi, Chang W-Qi, Chen M-Lu, Yin J-Hao, Jiang Y, Li H-Jun, Li P, Yao Z-Ping, Xin G-Zhong. ( 2017) Sebuah strategi untuk
mengidentifikasi dan mengukur bahan herbal adulterant terkait dengan regresi parsial berbasis spektrometri massa. Analytica Chemica Acta, 977,
28-35.
[37] Sun S-Qin, Zhou Q, Chen J-Bo. ( 2011) Spektroskopi inframerah untuk campuran kompleks: Aplikasi dalam makanan dan Pengobatan Tradisional Cina.
Pers Industri Kimia, Beijing, 1-235. Chen J-Bo, Sun S-Qin, Ma F, Zhou Q. ( 2014) Identifikasi mikroskopis vibrasi obat tradisional bubuk: Mikromorfologi
[38] kimiawi Poria diamati dengan inframerah dan mikrospektroskopi Raman. Spectrochemica Acta Bagian A: Spektroskopi Molekuler dan Biomolekuler, 128, 629-637.

[39] Chen D-Dan, Xie X-Fang, Ao H, Liu J-Lei, Peng C. ( 2017) Spektroskopi Raman dalam kendali mutu Pengobatan Herbal Cina. Jurnal Asosiasi Medis China, 80, 288-296.

[40] Ma F, Chen J-Bo, Wu X-Xue, Zhou Q, Sun S-Qin. ( 2016) Diskriminasi cepat Panax notoginseng dari nilai yang berbeda dengan FT-IR dan 2D COS-IR. Jurnal
Struktur Molekuler, 1124, 131-137.
[41] Chen J-Bo, Sun S-Qin, Tang X-Dong, Zhang J-Zhao, Zhou Q. ( 2016) Deteksi langsung dan simultan bahan organik dan anorganik dalam sediaan bubuk herbal
dengan pencitraan mikrospektroskopi inframerah transformasi Fourier. SpectrochimicaActa Bagian A: Spektroskopi Molekuler dan Biomolekuler, 165, 176-182.

[42] Jing J, Ren WC, Chen SB, Wei M, Parekh HS. ( 2013) Kemajuan dalam teknologi analitik untuk mengevaluasi kualitas obat tradisional China. Tren Kimia Analitik,
44, 39-45. Chen J, Guo B, Yan R, Sun S, Zhou Q. ( 2017) Identifikasi kimiawi yang cepat dan otomatis dari kuncup bunga obat Lonicera tanaman di benchtop
[43] dan spektroskopi inframerah transformasi Fourier genggam. SpectrochimicaActa Bagian A: Spektroskopi Molekuler dan Biomolekuler, 182, 81–

86.
[44] Hawryl A, Bogucka-Kocka A, Swieboda R, Hawryl M, Stebel A, Waksmundzka-Hajnos M. ( 2018) Sidik jari kromatografi lapis tipis dan analisis kemometri
terpilih Bryophyta spesies dengan aktivitas sitotoksiknya. Jurnal Kromatografi Planar, 31, 28–35. Lu X-Feng, Bi K-Shun, Zhao X, Chen X-Hui. ( 2012) Otentikasi
[45] dan perbedaan injeksi shenmai dengan analisis sidik jari HPLC dibantu dengan teknik pengenalan pola. Jurnal Analisis Farmasi, 5, 327-333. Fu H, Fan Y,
Zhang X, Lan H, Yang T, Shao M, Li S. ( 2015) Diskriminasi cepat untuk obat-obatan herbal kompleks tradisional dari berbagai bagian, waktu pengumpulan,
[46] dan asal menggunakan kromatografi cair kinerja tinggi dan sidik jari spektral inframerah-dekat dengan bantuan metode pengenalan pola. Jurnal Metode
Analisis dalam Kimia, 2015, 1-10. Duan L, Guo L, Liu K, Liu E-Hu, Li P. ( 2014) Karakterisasi dan klasifikasi tujuh Jeruk herba dengan
liquidchromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry dan algoritma genetik dioptimalkan untuk mendukung mesin vektor. Jurnal
[47] Kromatografi A, 1339, 118–127 Spicer R, Salek RM, Moreno P, Caneuto D, Steinbeck C. ( 2017) Menavigasi alat perangkat lunak yang tersedia secara gratis
untuk analisis metabolomik.
[48]
Metabolomik, 13, 106-122.
[49] Alaerts G, Erps JV, Pieters S, Dumarey M, Van Nedderkassel AM, Goodarzi M, Smeyers-Verbeke J, Van derHeyden Y. ( 2012) Analisis kesamaan sidik jari
kromatografi sebagai alat untuk identifikasi dan kontrol kualitas teh hijau. Jurnal Kromatografi B, 910, 61-70.
1606 Komunikasi Produk Alami Vol. 13 (12) 2018 Indrayanto

[50] Qu L, Chen J-Bo, Zhang G-Jun, Sun S-Qin, Zheng J. ( 2017) Profil kimiawi dan skrining pemalsuan Aquilariae Lignum Resinatum dengan spektroskopi Fourier
Transform Inframerah (FT-IR) dan spektroskopi inframerah korelasi dua dimensi (2D-IR). Spectrochimica Acta Bagian A: Spektroskopi Molekuler dan
Biomolekuler, 174, 177–182. USP 41-NF 36 ( 2018) Informasi umum <1039> Kemometrik. Konvensi Farmakope USP, Rockville. Wehling P, LaBudde RA,
[51] Brunelle SL, Nelson MT ( 2011) Probability of detection (POD) sebagai model statistik untuk validasi metode kualitatif. Jurnal AOAC International, 94, 335-347.
[52]

[53] Duca D, Mancini M, Rossini G, Mengarelli C, Pedretti EF, Toscano G, Pizzi A. ( 2016) Pemodelan analogi kelas yang tidak tergantung lunak yang diterapkan pada
spektroskopi inframerah untuk membedakan dengan cepat antara kayu keras dan kayu lunak. Energi, 117, 251-258. Xu C, Jia X, Xu R, Wang Y, Zhou Q, Sun S-Qin. ( 2013) Diskriminasi
[54] cepat HerbaCistanches dengan sidik jari makro infra merah multi-langkah yang dikombinasikan dengan pemodelan analogi kelas yang lembut dan tidak bergantung
(SIMCA). Spectrochimica Acta Bagian A: Spektroskopi Molekuler dan Biomolekuler, 114,
421–431.
[55] Riedl, J, Esslinger S, Fauhl-Hassek C. ( 2015) Review validasi dan pelaporan pendekatan sidik jari non-target untuk otentikasi makanan.
Analytica Chimica Acta, 885, 17–32. Techen N, Parveen I, Pan Z, Khan IA. ( 2014) Kode batang DNA bahan tanaman obat untuk identifikasi. Pendapat Saat Ini
[56] di Bioteknologi, 25,
103–110.
[57] Ganie SH, Upadhyay P, Das S, Sharma MP. ( 2015) Otentikasi tanaman obat dengan penanda DNA. Tanaman Gen, 4, 83-99. Parveen I, Gafner S, Techen N,
[58] Murch SJ, Khan IA. ( 2016) Kode batang DNA untuk identifikasi tumbuhan dalam pengobatan herbal dan suplemen makanan: kekuatan dan keterbatasan. Planta
Medica, 82, 1225-1235. Osathanunkul M, Osathanunkul R, Madesis P. ( 2018) Pendekatan identifikasi spesies untuk bahan baku dan produk akhir suplemen
[59] herbal dari Tinospora jenis. Pengobatan Pelengkap dan Alternatif BMC, 18, 111. https://doi.org/10.1186/s12906-018-2174-0 Li S, Han Q, Qiao C, Lagu J,
Cheng CL, Xu H. ( 2008) Penanda kimiawi untuk pengendalian mutu obat-obatan herbal: gambaran umum. Pengobatan Cina, 3, 7. doi: 10.1186 /
[60] 1749-8546-3-7

[61] Rivera-Mondragon A, Ortiz OO, Bijttebie S, Vlietinck A, Apers S, Pieters L, Caballero-George C. ( 2017) Pemilihan penanda kimiawi untuk pengendalian mutu
tanaman obat dari marga Cecropia. Biologi Farmasi, 55, 1500-1512.
[62] Pedoman WHO (2018) untuk memilih bahan penanda asal jamu untuk pengendalian mutu obat-obatan herbal
(http://apps.who.int/medicinedocs/documents/s23240en/s23240en.pdf).
[63] Liu C-Xiao, Cheng Y-Yu, Guo D-An, Zhang T-Jun, Li Y – Zhuo, Hou-W-Bin, Huang L-Qi, Xu H-Yu. ( 2017) Konsep baru tentang penanda kualitas untuk penilaian
kualitas dan pengendalian proses obat-obatan Cina. Obat Herbal Cina, 9, 3-13. Yang W, Zhang Y, Wu W, Huang L, Guo D, Liu C. ( 2017) Pendekatan untuk
[64] menetapkan Q-marker untuk standar kualitas obat-obatan tradisional China. Acta Pharmaceutica Sinica B, 7, 439–446.

[65] AOAC SMPR 2017.003, http://www.aoac.org/aoac_prod_imis/AOAC_Docs/SMPRs/SMPR%202017_003.pdf Lȁnger R, Stȍrger E, Kubelka W, Helliwell K. ( 2017) Standar
[66] mutu jamu dan sediaan jamu –sesuai atau perlu perbaikan ?. Planta Medica, 84, 350-360.

[67] Ning Z, Liu Z, Zong Z, Zhao S, Dong Y, Zeng H, Shu Y, Lu C, Liu Y, Lu A. ( 2016) Strategi pemilihan penanda tunggal dalam karakterisasi simultan, dan
kuantifikasi banyak komponen dengan kromatografi cair resolusi cepat yang digabungkan dengan spektrometri massa tandem triple quadrupole
(RRLC-QqQ-MS). Jurnal Analisis Farmasi dan Biomedis, 124, 174–188. Xu M, Tan H-Sheng, Fu W-Wei, Pan L-Yun, Tang Y-Xun, Huang S-Da, Xiu Y-Feng. ( 2017) Penentuan
[68] tujuh komponen secara simultan dalam gamboge dan produk olahannya menggunakan standar acuan tunggal. Pengobatan Herbal Cina, 9, 42-29. Zhu C, Li
X, Zhang B, Lin Z. ( 2017) Analisis kuantitatif multi-komponen dengan penanda tunggal — metode rasional untuk kualitas internal jamu Cina, Penelitian
[69] Kedokteran Integratif, 6, 1-11. Direktorat Jenderal Kesehatan dan Keamanan Pangan Komisi Eropa. ( 2015) Kontrol kualitas analitis dan prosedur validasi
metode untuk analisis residu pestisida dalam makanan dan pakan (Dokumen Supersedes No SANCO / 12571/2013, SANTE / 11945/2015). Badan Obat Eropa,
[70]

London, 1-46.
[71] USP 41-NF 36. ( 2018) Informasi umum <1210> Alat statistik untuk validasi prosedur. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72. Shi Z-Qi, Lagu D-Fang, Li
[72] R-Qian, Yang H, Qi L-Wen, Xin G-Zhong, Wang D-Qian, Lagu H-Peng, Chen J, Hao H, Li P. ( 2014) Identifikasi penanda kombinatorial yang efektif untuk
standarisasi mutu obat herbal. Jurnal Kromatografi A, 1345, 78–85. Lee S, Khoo CS, Pearson JL, Bourchier SJ, Bensoussan A. ( 2016) Validasi metode analitik
[73] dan kontrol kualitas dari tujuh ramuan obat Cina yang digunakan untuk pengobatan sindrom iritasi usus besar dengan sembelit. Jurnal AOAC International, 99,
591-598. Yang Z, Shao Q, Ge Z, Ai N, Zhao X, Fan X. ( 2017) Strategi berbasis penanda kimia bioaktif untuk penilaian kualitas obat nabati injeksi xuesaitong
[74] sebagai studi kasus. Laporan Ilmiah, 7, 2410. DOI: 10.1038 / s41598-017-02305-y, https://www.nature.com/articles/s41598-017- 02305-y

[75] Badan Obat Eropa. ( 2015) Topik VICH GL49: Studi untuk mengevaluasi metabolisme dan kinetika residu obat hewan pada hewan penghasil makanan
manusia: validasi metode analisis yang digunakan dalam studi penipisan residu. Badan Obat Eropa, London, 3-8. Funk W, Dammann V, Donnevert C. ( 2007) Jaminan
[76] kualitas dalam kimia analitik, 2 nd Ed. Wiley-VCH, Weinheim, 1-271. Magnusson B, Ornemark U. ( 2014) Panduan Eurachem: Kesesuaian untuk tujuan metode
[77] analitis - Panduan laboratorium untuk validasi metode dan topik terkait. Eurachem, Dublin, 1-59. USP 40-NF 35. ( 2017) Uji kimia <233> Prosedur pengotor
unsur. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72. USP 41-NF 36. ( 2018) Suplemen makanan <2251> Skrining untuk obat yang tidak diumumkan dan analog
[78] obat. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72.
[79]

[80] Thermo Scientific J-Calculator (http://www.jvaluecalculator.com/calculator.html)

[81] Pedoman batasan benda asing dalam ramuan herbal, ( 2018) Asosiasi Produk Herbal Amerika (AHPA)
(www.ahpa.org/News/LatestNews/tabid/96/ArtMID/1179/ArticleID/874/Default.aspx).
[82] USP 41-NF 36. ( 2018) Uji kimia <565> Ekstrak tumbuhan. Konvensi Farmakope USP, Rockville, 1-72. Ichim MC, Crisan G, Tebrencu CE, de Boer HJ. ( 2018) PhytoAuthent:
[83] Otentikasi molekuler dari suplemen makanan herbal yang kompleks untuk keamanan dan kemanjuran. Ide dan Hasil Penelitian, 4, 1-5.