Elistia - Kelompok 4 - Laporan Resmi - ACC

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM
MIKROBIOLOGI HASIL PERIKANAN
Disusun oleh :
Elistia
26060119120016
Kelompok 4 / Trip II
Departemen Teknologi Hasil Perikanan

Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan
Universitas Diponegoro
Semarang
2021
LAPORAN PRAKTIKUM
Mata Kuliah Mikrobiologi Hasil Perikanan
Semester Genap 2020/2021
Dosen Pengampu :
Laras Rianingsih, S.Pi., M. Sc. (Koordinator Praktikum)
Ir. Sumardianto, PG. Dipl., M. Gz.
Romadhon , S.Pi., M.Biotech.
Tim Asisten :
Bahana Safria Dito NIM. 26060117130055

Aldila Wulan Yuniar NIM. 26060117140024
Rumaisha Salima NIM. 26060118130073
Mustofa Kamil NIM. 26060118140096
Departemen Teknologi Hasil Perikanan

Semarang
2021
ii
LEMBAR PENGESAHAN
Laporan Praktikum Mikrobiologi Hasil Perikanan ini telah disetujui dan
disahkan pada:
hari :
tanggal :
tempat : Semarang
Mengetahui,
Koordinator Asisten Asisten Pendamping
Aldila Wulan Yuniar Mustofa Kamil

NIM 26060117140024 NIM 26060118140096
Mengetahui,
Koordinator Praktikum
Laras Rianingsih, S.Pi., M.Sc.

NIP 19700608 199903 1 002
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat serta hidayah-Nya, sehingga penulis laporan praktikum mata
kuliah Mikrobiologi Hasil Perikanan ini dapat diselesaikan dengan baik.
Laporan ini diharapkan dapat mendukung program perbaikan dan
menambah informasi mengenai topik yang berkaitan dengan mata kuliah dan
praktikum Mikrobiologi Hasil Perikanan.
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ibu Laras Rianingsih, S.Pi., M.Sc., selaku Koordinator Mata Kuliah
Mikrobiologi Hasil Perikanan yang telah meluangkan waktu untuk
memberikan masukan, koreksi dan araham selama praktikum;
2. Bapak Ir. Sumardianto, PG.Dipl., M.Gz. dan Bapak Romadhon, S.Pi.,
M.Biotech., selaku dosen mata kuliah Mikrobiologi Hasil Perikanan; dan
3. Tim Asisten Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi Hasil Perikanan dan
semua pihak yang telah membantu dalam penyusunan laporan ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan laporan praktikum ini masih
jauh dari sempurna. Oleh karena itu, saran dan kritik demi perbaikan penulisan
laporan ini sangat diharapkan. Semoga laporan ini dapat bermanfaat.
Semarang, Mei 2021
Penulis
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL....................................................................................... I
LEMBAR PENGESAHAN............................................................................ iii
KATA PENGANTAR.................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................. v
DAFTAR TABEL .......................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... viii
MODUL 1 : STERILISASI ALAT, MEDIA DAN TEKNIS

ASEPTIS................................................................................ 2
Tujuan .................................................................................... 2
Dasar Teori Praktikum ........................................................... 2
Prosedur Kerja ....................................................................... 2
Pembahasan............................................................................ 4
Kesimpulan dan Saran............................................................ 6
MODUL II : ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT).................................... 2

Tujuan .................................................................................... 2
Prosedur Kerja ....................................................................... 2
Lembar Hasil Pengamatan...................................................... 4
Pembahasan............................................................................ 7
................................................................................................
MODUL III:I PENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT 2

DAN PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERI........... 2
Tujuan .................................................................................... 2
Prosedur Kerja ....................................................................... 5
Pembahasan............................................................................ 10
Kesimpulan dan Saran............................................................
................................................................................................ 2
2
MODUL IV : PENGAMATAN JAMUR.................................................... 2
Tujuan .................................................................................... 2
Prosedur Kerja ....................................................................... 6
Pembahasan............................................................................
v
MODUL V : PENENTUAN JUMLAH BAKTERI PADA RUANGAN 2
DAN PERALATAN PENGOLAHAN (METODE SWAB) 2
................................................................................................ 2
Tujuan .................................................................................... 4
Prosedur Kerja ....................................................................... 8
Lembar Hasil Pengamatan......................................................
Pembahasan............................................................................ 2
2
MODUL VI :I PENDUGAAN JUMLAH BAKTERI COLIFORM........... 2
Tujuan .................................................................................... 4
Prosedur Kerja ....................................................................... 8
Lembar Hasil Pengamatan......................................................
Pembahasan............................................................................ 9
Kesimpulan dan Saran..........................................................
................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA.....................................................................................
vi
DAFTAR TABEL
Halaman
MODUL I. STERILISASI ALAT, MEDIA DAN TEKNIS ASEPTIS
1. Alat yang Digunakan pada Praktikum Sterilisasi dan Teknis Aseptis ........ 2
2. Bahan yang Digunakan pada Praktikum Sterilisasi dan Teknis Aseptis..... 2
MODUL II. ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT)

3. Lembar Penilaian Organoleptik Ikan Bandeng (Chanos chanos) ............... 4
4. Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri................................................... 6
MODUL III. IPENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT

DAN PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERI
5. Lembar Penilaian Organoleptik Terasi........................................................ 5
MODUL IV. PENGAMATAN JAMUR

7. Lembar Penilaian Organoleptik Ikan Tongkol (Euthynus affinis) Asap...... 4
8. Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Jamur..................................................... 5
MODUL V. PENENTUAN JUMLAH BAKTERI PADA RUANGAN

DAN PERALATAN PENGOLAHAN (METODE SWAB)
MODUL VI. PENDUGAAN JUMLAH BAKTERI COLIFORM

10.Lembar Penilaian Organoleptik Ikan Bandeng (Chanos chanos)............... 4
11.Hasil Perhitungan Jumlah Coliform............................................................. 5
vii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
MODUL II. ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT)
1. Hasil Pengamatan Angka Lempeng Total (ALT) pada Sampel Ikan
Bandeng (Chanos chanos)............................................................................... 5
MODUL III. IPENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT

DAN PENGAMATAN MORFOLOGI BAKTERI
2. Hasil Pengamatan Uji Bakteri Asam Laktat (BAL) pada Sampel
Terasi............................................................................................................... 6
3. Bakteri Lactobacillus acidophilus ................................................................. 7
4. Bakteri Lactobacillus plantarum.................................................................... 7
MODUL IV. PENGAMATAN JAMUR

5. Hasil Pengamatan Jamur pada Sampel Ikan Tongkol (Euthynus affinis)
Asap................................................................................................................. 5
MODUL V. PENENTUAN JUMLAH BAKTERI PADA RUANGAN

DAN PERALATAN PENGOLAHAN (METODE SWAB)
6. Hasil Pengamatan Mikroorganisme di Ruangan Laboratorium ..................... 4
7. Hasil Pengamatan Mikroorganisme pada Swab Alat
Oven................................................................................................................ 5
MODUL VI. PENDUGAAN JUMLAH BAKTERI COLIFORM

8. Hasil Pendugaan Jumlah Bakteri Coliform pada Sampel Bandeng (Chanos
chanos) ........................................................................................................... 5
viii
MODUL PRAKTIKUM

Semarang
2021
MODUL I : Sterilisasi Alat, Media dan Teknis Aseptis Kelompok : 4
Tanggal : 9 Maret 2021
Nama : Elistia NIM: 26060119120016 Ttd:
Tujuan
Tujuan dari praktikum sterilisasi alat dan sterilisasi media adalah sebagai berikut:
1. Mengetahui cara sterilisasi alat-alat yang ada di laboratorium
2. Mengetahui cara sterilisasi media yang ada di laboratorium
3. Mengetahui cara melakukan teknik aseptis
Dasar Teori Praktikum
Sterilisasi merupakan proses penghilangan semua jenis organisme hidup, dalam hal ini adalah
mikroorganisme yang terdapat dalam suatu benda. Sterilisasi ini bertujuan untuk menjamin sterilitas
produk maupun karakteristik kualitas sediaannya, termasuk kestabilan yang dimiliki oleh produk
yang dihasilkan. Agen kimia untuk sterilisasi disebut sterilant. Proses sterilisasi merupakan hal yang
paling utama dalam menentukan kesterilan dari sediaan akhir yang nantinya akan dibuat. Sehingga,
perlu dilakukan metode sterilisasi yang tepat dan sesuai dengan sifat masing-masing bahan, alat serta
wadah yang akan digunakan untuk proses sterilisasi (Taufiq dan Najmudin, 2017).
Sterilisasi dapat digunakan dengan tiga cara yaitu sterilisasi udara kering, sterilisasi uap air panas,
dan sterilisasi uap air panas bertekanan. Sterilisasi dengan udara kering biasannya menggunakan oven.
Sterilisasi uap air panas untuk bahan yang berbentuk cairan yang tidak dapat disterilkan dengan oven.
Sterilisasi dengan uap air panas yang bertekanan, alat yang digunakan adalah autoklaf (autoclave) yang
dilengkapi katup pengaman. Alat ini mempunyai tekanan 2 atm dan suhu 121ᵒC selama 15 menit untuk bahan
dan 20 menit untuk alat. Cara ini dapat mematikan bakteri yang ada (Azizah et al., 2020).
Alat
Alat yang digunakan pada praktikum Sterilisasi dan Teknik Aseptis adalah sebagai berikut:
Tabel 1. Alat yang digunakan pada praktikum Sterilisasi dan Teknik Aseptis
No Nama Alat Ketelitian Fungsi
1. Oven - sebagai sterilisasi alat
2. Autoclave - sebagai pemanas untuk sterilisasi
3. Bunsen flame - sebagai penghasil nyala api
4. Masker - sebagai penutup mulut agar alat tetap steril
5. Sarung tangan - sebagai pencegah kontaminasi bakteri
6. Penutup kepala - sebagai pelindung kepala dari proses sterilisasi
Bahan
Bahan yang digunakan pada praktikum Sterilisasi dan Teknik Aseptis adalah sebagai berikut:
Tabel 2. Bahan yang digunakan pada praktikum Sterilisasi dan Teknik Aseptis
No Nama Bahan Jumlah Fungsi
1. Alkohol 70% - sebagai antiseptik atau disenfektan
2. Kertas coklat - sebagai pembungkus cawan untuk menghindari kontaminasi
3. Kapas - sebagai penutup media yang akan disterilisasi
4. Alumunium foil - sebagai pembungkus ala-alat yang akan disterikan
Metode
a. Sterilisasi Kering
Metode yang digunakan pada praktikum Sterilisasi Kering adalah sebagai berikut:
1. Siapkan alat-alat yang akan disterilisasi;
2. Bungkus alat-alat yang telah disterilisasi menggunakan kertas coklat; dan
3. Sterilisasi dengan menggunakan oven selama ± 2 jam dengan suhu 160°C.
Page 2 of 6
b. Sterilisasi Uap Air Panas
Metode yang digunakan pada praktikum Sterilisasi Uap Air Panas adalah sebagai berikut:
2. Siapkan autoklaf yang akan digunakan;
3. Alat-alat yang berisi media ditutup kapas serta almunium foil; dan
4. Sterilisasi dengan menggunakan autoklaf selama 15-20 menit dengan suhu 121°C dengan tekanan 1 atm.
c. Sterilisasi Pemijaran
Metode yang digunakan pada praktikum Sterilisasi Pemijaran adalah sebagai berikut:
2. Siapkan bunsen yang akan digunakan; dan
3. Alat-alat yang akan disterilisasi dipijarkan di atas bunsen yang menyala.
d. Teknik Aseptis
Metode yang digunakan pada praktikum Teknik Aseptis adalah sebagai berikut:
1. Siapkan alat-alat yang akan disterilsasi;
2. Sterilisasi tangan dengan handsanitizer;
3. Semprotkan alkohol 70% di atas meja; dan
4. Gunakan penutup kepala, penutup mulut (masker), serta sarung tangan.
Page 3 of 6
Pembahasan:
Sterilisasi adalah menghilangkan dengan komplit atau menghancurkan semua mikroorganisme,
termasuk spora. Sterilisasi yaitu proses membunuh semua mikroorganisme termasuk spora bakteri pada
benda yang terkontaminasi dengan tepat. Sterilisasi merupakan setiap proses kimia maupun fisika yang
membunuh semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme. Proses penghilangan seluruh mikroorganisme
dari alat kesehatan termasuk endospora bakteri. Sterilisasi adalah proses destruksi atau mematikan
mikroorganisme. Proses pemanasan yang digunakan dalam proses sterilisasi tidak menghasilkan produk yang
steril atau terbebas dari mikroorganisme karena tidak semua mikroba mati pada proses sterilisasi. Akan
tetapi, pengaturan pH atau kondisi penyimpanan produk, seperti pengemasan vakum dan pendinginan dapat
mencegah pertumbuhan bakteri pembusuk dan penyebab keracunan makanan. Sterilisasi dalam bidang medis
memiliki arti yaitu proses dengan metode dengan hasil akhir yang tidak lagi adanya mikroorganisme. Metode
yang digunakan untuk sterilisasi cukup banyak, namun dari metode yang digunakan harus tetap menjaga
kualitas akhir proses sterilisasi. Menurut Nikhilesh et al., (2013), sterilisasi dapat didefinisikan sebagai proses
yang efektif membunuh atau menghilangkan agen yang dapat ditularkan seperti jamur, bakteri, virus dan
prion dari permukaan, peralatan, makanan, obat-obatan atau media kultur biologis. Sterilisasi dicapai dengan
memaparkan objek yang akan disterilkan dengan bahan kimia atau fisik selama waktu tertentu. Sterilisasi
berarti penggunaan prosedur fisik atau kimiawi untuk menghancurkan semua kehidupan mikroba, termasuk
endospora bakteri yang sangat resisten.
Sterilisasi panas kering adalah metode yang umum dan paling efektif digunakan untuk sterilisasi
peralatan gelas seperti cawan petri, pipet ukur dan labu erlenmeyer serta banyak alat-alat bedah.
Menggunakan oven sebagai alat sterilisasi kering, maka alat gelas yang disterilisasi tidak akan timbul
kondensasi sehingga tidak ada tetes udara atau embun di dalam alat gelas. Sterilisasi panas kering juga biasa
digunakan untuk mensterilkan cairan dengan kadar air yang sangat rendah dan perawatan serbuk obat.
Metode sterilisasi panas kering biasanya menggunakan oven pensteril. Alat ini terbuat dari baja tahan karat,
bentuk dan posisi elemen pemanas di ruang menjamin distribusi temperatur biasa. Sterilisasi Panas Kering
yaitu mensterilkan alat atau instrument kedokteran menggunakan heater atau oven dengan panas yang
tinggi, misalnya alat dari logam yang tajam, alat dari kaca yang tahan terhadap panas. Sterilisasi panas kering
mengalirkan udara kering sebagai konduktor panas dari uap panas pada temperature yang sama, sehingga
diperlukan yang lebih tinggi dibanding penggunaan autoklaf. Metode panas kering ini bisa langsung
digunakan untuk satu ruangan langsung, bukan per alat media. Secara teoristis sterilisasi melalui pemanasan
dalam oven dilaksanakan pada temperatur 160 0C selama 2 jam. Menurut Azizah et al., (2020), sterilisasi
dengan udara kering biasanya menggunakan oven. Alat ini digunakan untuk mensterilkan alat-alat gelas,
seperti erlenmeyer, petridish, tabung reaksi, dan alat gelas lainnya. Suhu pada sterilisasi kering umumnya
170-180ᵒC selama paling sebentar 2 jam.
Metode sterilisasi kering melalui prinsip konduksi, panas akan diabsorbsi oleh permukaan luar dari
peralatan yang akan disterilkan. Panas akan merambat ke bagian yang lebih dalam dari peralatan tersebut
sampai suhu untuk sterilisasi tercapai secara merata. Mikroba terbunuh pada sterilisasi ini dengan cara
oksidasi, dimana protein mikroba akan mengalami koagulasi. Sterilisasi ini menggunakan udara panas pada
sebuah alat yang disebut oven, sebuah bejana yang udara di dalamnya harus dipanaskan dengan dengan
Page 4 of 6
memanfaatkan gas atau listrik, suhunya dapat mencapai 160-180°C. Durasi atau waktu untuk proses
sterilisasi 1-2 jam, lebih lama dari penggunaan autoclave karena daya penetrasinya tidak sebaiik uap panas.
Proses sterilisasi dengan panas kering terjadi melalui mekanisme konduksi panas, di mana panas yang
terbentuk akan di absorbsi oleh permukaan luar dari alat yang disterilkan lalu merambat ke bagian dalam
permukaan sampai akhirnya suhu untuk sterilisasi tercapai. Metode yang biasa dilakukan pada sterilisasi ini
yaitu alat yang akan disterilkan dibungkus dengan kertas cokelat yang berfungsi untuk mencegah kontaminasi
dari bakteri luar maupun dari alat sterilisasi, kemudian dimasukkan ke dalam oven dan lakukan proses
sterilisasi. Menurut Andriani (2016), sterilisasi udara kering dengan membebaskan alat-alat dari segala macam
kehidupan mikroba tanpa kelembaban. Cara menggunakannya yaitu dengan memasukkan alat-alat yang telah
dibungkus dengan kertas yang akan disterilkan ke dalam oven dan menyusunnya pada rak, kemudian
memanaskannya di atas api.
Sterilisasi basah merupakan suatu proses sterilisasi yang menggunakan uap air. Uap air tersebut
didapat dari proses pemanasan air. Sterilisasi basah tersebut dapat membunuh jasad renik atau
mikroorganisme karena menyebabkan denaturasi protein, termasuk enzim-enzim di dalam sel. Uap panas
pada suhu tekanan, dan waktu pemaparan tertentu mampu membunuh mikroba patogen dengan cara
denaturasi protein dari enzim dan membran sel. Uap air yang dihasilkan selama proses sterilisasi
menyebabkan lingkungan yang lembab dan memaksa semua spora melakukan proses perkembangan.
Keadaan panas dan lembap, protein akan di denaturasi dengan cepat dan dilanjutkan proses koagulasi
sehingga mikroba tersebut mati. Proses sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121 0C selama 15 menit
merupakan sterilisasi yang ideal dan memenuhi persyaratan penggunaan alat-alat kritis yang steril, dan
diperlukan untuk bekerja secara aseptis. Panas basah mematikan mikroba melalui proses koagulasi,
denaturasi enzim dan protein protoplasma mikroba, sedangkan untuk mematikan spora diperlukan panas
basah selama 15 menit pada suhu 121°C. Sterilisasi basah merupakan proses penghilangan seluruh
mikroorganisme dengan melakukan pengukusan menggunakan uap air. Suhu 121 0C itu disebabkan oleh
tekanan 1 atm pada ketinggian permukaan laut. Sterilisasi ini sering dipakai karena lebih efisien, cepat, dan
aman. Menurut Lisdyayanti et al., (2019), sterilisasi yang dilakukan terdapat dua jenis yaitu sterilisasi basah
dan sterilisasi kering. Sterilisasi basah digunakan untuk sterilisasi media kultur dengan menggunakan autoklaf
pada suhu 121°C dengan tekanan 1,5 atm selama 15 menit.
Teknik pelaksanaan yaitu alat yang digunakan adalah sebuah bejana tertutup yang dilengkapi dengan
manometer, thermometer, thermostat dan pengatur tekanan dengan demikian suhu dan tekanan uap panas
dapat diatur. Sterilisator metode uap panas bertekanan tinggi ini di sebut autoklaf. Setelah udara dalam
ruangan ini digantikan oleh uap air, maka ruangan ini ditutup rapat sehingga tekanannya akan meningkat,
yang juga akan diikuti oleh kenaikan suhunya. Metode sterilisasi basah atau panas basah adalah pemanasan
menggunakan air atau uap air. Alat dan bahan yang akan disterilkan disiapkan, kemudian media ditutup
kapas dan alumunium foil yang berguna untuk mencegah kontaminasi dari bakteri luar maupun dari alat lalu
masukkan ke dalam autoklaf dengan suhu 121°C selama 15 menit sampai mengeluarkan uap. Menurut
Hairuddin dan Arianto (2016), masukkan media ke dalam autoklaf, setelah media dimasukkan ke dalam
autoklaf tutup autoklaf tersebut. Tekan tombol on autoklaf kemudian tunggu sampai katup klep
mengeluarkan uap, apabila salah satu katup klep telah mengeluarkan uap katup klep ditutup. Selanjutnya,
diamkan autoklaf yang berisi media selama 15-20 menit, setelah itu keluarkan media tersebut dari autoklaf.
Page 5 of 6
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi sterilisasi maka diperoleh kesimpulan
sebagai berikut:
1. Cara sterilisasi pada alat laboratorium yaitu sterilisasi kering. Sterilisasi kering juga dapat dilakukan
dengan memberikan udara panas. Umumnya sterilisasi kering dilakukan dengan alat yang digunakan
adalah oven. Sterilisasi kering dengan oven ini baik dilakukan terhadap alat-alat kering yang terbuat
dari kaca, seperti cawan petri dan atau apa saja yang tidak menjadi rusak, menyala, hangus atau
menguap pada suhu tinggi. Cara untuk sterilisasi alat yaitu siapkan alat-alat yang akan disterilisasi,
bungkus alat-alat yang telah disterilisasi menggunakan kertas coklat dan sterilisasi dengan
menggunakan oven selama 2 jam dengan suhu 160°C.
2. Cara sterilisasi media dilakukan dengan pemanasan basah contohnya adalah dengan menggunakan
autoklaf. Sterilisasi dengan metode ini dapat digunakan untuk sterilisasi bakteri dan pembuatan
media. Pemanasan yang digunakan pada suhu 121°C selama 15 menit. Cara untuk sterilisasi media
yaitu siapkan alat-alat yang akan disterilisasi, siapkan autoklaf yang akan digunakan, alat-alat yang
berisi media ditutup kapas serta almunium foil dan lakukan sterilisasi dengan menggunakan autoklaf
selama 15-20 menit dengan suhu 121°C dengan tekanan 1 atm.
3. Teknik aseptis dilakukan dengan menyiapkan alat yang akan disterilisasi, lalu lakukan sterilisasi
tangan dengan handsanitizer semprotkan alkohol 70% di atas meja dan gunakan penutup kepala,
masker dan sarung tangan.
Saran :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan tentang materi sterilisasi maka diperoleh saran sebagai
berikut:
1. Sebaiknya saat melakukan sterilisasi pada alat dan media dilakukan dengan baik dan benar.
2. Sebaiknya pada saat melakukan teknis aseptis harus dilakukan dengan tepat agar tidak ada
kontaminasi dari bakteri.
3. Sebaiknya setelah melakukan proses sterilisasi alat yang digunakan di bersihkan kembali supaya tidak
membuat bakteri berkembang biak.
Nilai : 94
Draft : ACC
Nama dan paraf asisten:
Mustofa Kamil
Page 6 of 6
MODUL PRAKTIKUM

Semarang
2021
MODUL II : Angka Lempeng Total (ALT) Kelompok : 4
Nama : Elistia NIM:26060119120016 Ttd:
Tujuan
Tujuan dari praktikum angka lempeng total adalah sebagai berikut:

1. Mengetahui metode penghitungan bakteri dengan Angka Lempeng Total (ALT).
2. Mengetahui Angka Lempeng Total (ALT) dari produk perikanan.
3. Membandingkan Angka Lempeng Total (ALT) beberapa produk perikanan dan faktor-faktor yang
berpengaruh.
Salah satu cara untuk mendeteksi atau menganalisis jumlah mikroba yang ada didalam makanan
penerbangan yaitu dengan cara uji TPC (Total Plate Count) di laboratorium. Pengujian Total Plate Count
(TPC) dimaksudkan untuk menunjukkan jumlah mikroba yang terdapat dalam suatu produk dengan cara
menghitung koloni bakteri yang ditumbuhkan pada media agar. Produk makanan dapat dikategorikan aman
jika total koloni bakteri (Total Plate Count/TPC) tidak melebihi seratus delapan coloni forming unit / per ml
(CFU/ml). Prinsip dari metode hitungan cawan adalah menumbuhkan sel-sel mikroba yang masih hidup pada
suatu atau beberapa media sehingga sel tersebut berkembang biak dan membentuk koloni-koloni yang dapat
dilihat langsung dengan mata telanjang tanpa menggunakan mikroskop, dan koloni dapat dihitung
menggunakan colony counter (Yunita et al.,2015).
Analisis kuantitatif mikrobiologi pada bahan pangan penting dilakukan untuk mengetahui mutu bahan
pangan tersebut. Beberapa cara dapat digunakan untuk menghitung atau mengukur jumlah jasad renik
didalam suatu suspensi atau bahan, salah satunya yaitu perhitungan jumlah sel dengan metode hitung
cawan. Prinsip dari metode ini adalah jika sel mikroba masih hidup ditumbuhkan pada medium agar maka sel
tersebut akan berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung tanpa menggunakan
mikroskop. Cara pemupukan kultur dalam hitungan cawan yaitu dengan metode tuang ( pour plate) Jika
sudah didapatkan hasil jumlah koloninya, kemudian disesuaikan berdasarkan SPC (Standard Plate Count)
(Yunita et al.,2015).
Bahan
 Sampel ikan/produk hasil perikanan
 Plate Count Agar (PCA)
 Larutan Buffer NaCl 0,85%
 Aquades
a. Alat
 Cawan petri
 Tabung reaksi
 Yellow tip
 Mikropipet
 Erlenmeyer 250 ml
 Beaker glass 100 ml
 Bunsen
 Inkubator
 Timbangan Elektrik
 Vortex
 Hot plate stirer
 Stomacher
 Autoclave
 Kertas label
 Karet gelang
 Plastik
 Batang L (L-Rod)
Page 2 of 9
b. Metode dan hasil pengamatan
Pembuatan Media PCA
1. Media PCA sebanyak 22,5 g dan 1000 mL aquades dicampur dalam erlenmeyer, diaduk dan dipanaskan
pada hot plate stirer hingga mendidih;
2. Media yang sudah mendidih kemudian didinginkan lalu disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu
121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit;
3. Media kemudian dituang ke dalam petri 10-15 ml kemudian diamkan hingga agar menjendal.
Pembuatan larutan pengencer NaCl

1. NaCl 0,85% dan aquades dari kebutuhan disiapkan;
2. Keduanya dimasukkan dalam erlenmeyer dan dihomogenisasi dengan cara di stir padahot plate stirer;
3. Larutan pengencer NaCl dimasukkan dalam erlenmeyer sebanyak 90 ml dan 9 ml dalam tabung reaksi
kemudian disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Persiapan Contoh
1. Sampel ditimbang sebanyak 10 g, dimasukkan ke dalam plastik dan ditambahkan 90 mL larutan
pengencer NaCl (1:9);
2. Sampel kemudian dimasukkan ke dalam alat stomacher untuk dihomogenisasi selama 1 menit sampai
menjadi larutan yang homogen sehingga diperoleh larutan dengan pengenceran 10 -1.
Pengenceran
1. 1 mL larutan hasil pengenceran 10-1 diambil dengan menggunakan pipet steril;
2. Larutan kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 mL larutan pengencer NaCl untuk
didapatkan pengenceran 10-2, kemudian di vortex;
3. 1 mL larutan pengenceran 10-2 diambil dengan menggunakan pipet steril lalu dimasukkan ke dalam
tabung reaksi yang berisi 9 mL larutan pengencer NaCl untuk didapatkan pengenceran 10 -3, dan
dilakukan sampai mendapat pengenceran 10-4.
Pemupukan
1. Media yang sudah dituang dalam petri disiapkan;
2. Mengambil 0,1 mL dari tiap-tiap pengenceran dan dimasukkan ke dalam cawan petri;
3. Sampel diratakan menggunakan batang L
Inkubasi
Kemudian petri diinkubasi pada posisi terbalik dengan suhu inkubator 37 0C selama 48 jam.
Perhitungan
Jumlah koloni yang terbentuk dihitung dengan colony counter. Koloni yang dihitung adalah koloni yang
tampak membentuk zona jernih. Cawan yang dihitung adalah yang mengandung koloni antara 30 hingga 300
koloni. Koloni dihitung dengan persamaan:
Keterangan:
C = jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran

n1 = jumlah petri pada pengenceran pertama yang dihitung
n2 = jumlah petri pada pengenceran kedua yang dihitung
d = nilai pengenceran koloni terendah
Page 3 of 9
Lembar Hasil Pengamatan:
Tabel 3. Lembar penilaian organoleptik ikan bandeng (Chanos chanos) mundur mutu
(Xi- X
Spesifikasi (Xi-
Xi
Panelis X ) )2
Mata Insang Lendir Daging Bau
1 7 6 6 7 5 6,2 0,3 0,09
2 5 6 6 7 5 5,8 -0,1 0,01
3 6 7 7 6 5 6,2 0,3 0,09
4 6 6 5 7 6 6 0,1 0,01
5 5 5 5 5 6 5,2 -0,7 0,49
X = Σ=0,69
5,9
Perhitungan
1
S 2= ∑ ( Xi− X )2
Simpangan : n
1
S 2 = (0 , 69 )
5
2
S =0,138
S= √0,138
S=0 ,37
S S
X− .1, 96<μ< X+ .1, 96
√n √n
Selang Kepercayaan :
0,37 0, 37
5,9− . 1, 96<μ<5,9+ .1,96
√ 5 √ 5
5,9−0 ,32<μ<5,9+0 ,32

5,58<μ<6,22
Kesimpulan :
Dari hasil uji organoleptik terhadap ikan bandeng (Chanos chanos) mundur mutu didapat selang
kepercayaan sebesar 5,58<μ<6,22pada tingkat kepercayaan 95 %, maka produk tersebut tidak layak
untuk dikonsumsi/digunakan sebagai bahan baku.
Page 4 of 9
Gambar 1. Hasil Pengamatan Angka Lempeng Total (ALT) pada Sampel ikan bandeng ( Chanos chanos)
mundur mutu.
Sampel Pengenceran 10-3 Sampel Pengenceran 10-4
Pengenceran 10-3 Pengenceran 10-4
Deskripsi :
Dari pengenceran 10-3 diperoleh koloni yang berbentuk bulatan besar dan menyebar hampir memenuhi
bagian wadah cawan petri, koloni yang terbentuk dari pengenceran ini sebanyak 112. Hasil pengenceran ke
10-4 diperoleh koloni dengan bentuk bulatan kecil yang sebagian hanya berada di bagian tengah wadah cawan
petri, koloni yang terbentuk dari pengenceran ini berjumlah sebanyak 63 koloni. Berdasarkan jumlah koloni
yang diperoleh bisa dinyatakan bahwa semakin besar besar pengenceran yang dilakukan maka akan
membuat semakin sedikit jumlah koloni yang terbentuk.
Page 5 of 9
Tabel 4. Hasil Perhitungan Jumlah Koloni pada Sampel Ikan Mundur Mutu
Sampel Pengenceran Jumlah Koloni
Ikan Bandeng (Chanos Pengenceran 10-3

112
chanos) Mundur Mutu
Pengenceran 10-4 63
Perhitungan Jumlah koloni adalah sebagai berikut:
N= 112 + 63
[(1 x 1) + (0,1 x 1)] x 10-4
N= 175
1,1 x 10-4
N = 15,9 x 105
Page 6 of 9
Pembahasan:
Ikan Bandeng merupakan salah satu jenis ikan budidaya air payau sehingga dapat ditemukan hidup di
laut maupun perairan tawar. Memiliki nama ilmiah Chanos chanos dan terdapat dalam famili chanidae dan
dikenal juga dengan nama milikfish. Ikan segar memiliki kelemahan, yaitu mudah mengalami kerusakan atau
kemunduran mutu. Proses kemunduran mutu ikan akan terus berlangsung jika tidak dihambat. Kecepatan
proses tersebut sangat dipengaruhi oleh banyak hal, baik faktor internal yang lebih banyak berkaitan dengan
sifat ikan itu sendiri maupun eksternal yang berkaitan dengan lingkungan dan perlakuan manusia.
Penanganan yang baik adalah menggunakan sistem rantai dingin. Kemunduran mutu atau pembusukan dilihat
dari perubahan warna insang kecokelatan, bau busuk dan tekstur yang rusak. Proses perubahan pada ikan
tersebut terjadi karena aktivitas enzim dan mikroorganisme. Kedua hal tersebut menyebabkan tingkat
kesegaran ikan menurun. Perubahan tekstur di mana daging menjadi lebih lunak terjadi apabila ikan sudah
mulai mengalami kemunduran mutu. Hal ini disebabkan oleh mulai terjadinya perombakan pada jaringan otot
daging oleh proses enzimatis. Ikan adalah salah satu spesies yang mudah mengalami kebusukan apabila tidak
dilakukan penanganan secara langsung. Menurut Shehawy et al., (2016), ikan adalah salah satu produk
makanan yang paling mudah rusak dan masa simpan produk tersebut dibatasi dengan adanya udara normal
oleh efek kimiawi oksigen atmosfer dan pertumbuhan mikroorganisme pembusuk aerobik. Pertumbuhan
mikroorganisme membuat makanan secara organoleptik tidak dapat diterima untuk dikonsumsi karena
adanya perubahan warna, bau dan tekstur.
Metode pemupukan yang digunakan pada modul alt ini yaitu yang pertama media yang sudah dituang
dalam cawan petri disiapkan, mengambil 0,1 mL dari tiap-tiap pengenceran dan dimasukkan ke dalam cawan
petri dan sampel diratakan menggunakan batang L. Batang L berfungsi dalam isolasi dan pembiakan mikroba
yaitu untuk menyebarkan cairan di permukaan media supaya mikroba yang tersuspensi dalam cairan tersebut
tersebar merata. Angka Lempeng Total (ALT) dimaksudkan untuk menunjukkan jumlah mikroba yang tumbuh
dalam suatu produk dengan cara menghitung koloni bakteri yang ditumbuhkan pada media agar pada suhu
dan waktu inkubasi yang ditetapkan. Metode yang digunakan adalah metode tuang ( pour plate) dengan cara
menanamkan contoh ke dalam cawan petri terlebih dahulu kemudian ditambahkan media pemupukan. Prinsip
dari metode ini adalah jika sel mikroba masih hidup ditumbuhkan pada medium agar maka sel tersebut akan
berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung tanpa menggunakan mikroskop. Cara
pemupukan kultur dalam hitungan cawan yaitu dengan metode tuang ( pour plate) Jika sudah didapatkan
hasil jumlah koloninya. Menurut Damayanti et al., (2020), pemeriksaan angka kuman dengan metode tuang
adalah suatu teknik untuk menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara mencampurkan
media yang masih cair dengan stok kultur bakteri, sehingga sel-sel tersebut tersebar merata dan diam
dengan baik di permukaan agar atau di dalam agar. Sementara itu pada metode cawan sebar ini cukup sulit
terutama saat meratakan suspensi dengan batang bengkok, untuk menumbuhkan koloni secara merata.
Hasil yang diperoleh pada ikan mundur mutu diperoleh nilai altnya 15,9 x 10⁵. Angka lempeng total
yang tinggi menandakan bahwa sampel yang diuji sudah mengalami pembusukan atau sanitasi yang
disebabkan oleh mikroorganisme. Sanitasi berhubungan dengan jumlah mikroba kontaminan. Semakin rendah
tingkat sanitasi maka semakin tinggi jumlah mikroba yang mengkontaminasi bahan pangan. Kontaminasi
bahan pangan dapat terjadi karena adanya kontaminasi bakteri dari sarana dan prasarana yang digunakan
kurang steril. Angka lempeng total (ALT) atau perhitungan jumlah bakteri bertujuan untuk menentukan
secara kuantitatif jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada media agar. Adanya angka lempeng total (ALT)
Page 7 of 9
yang melebihi batas juga dapat membahayakan masyarakat yang mengonsumsi ikan tersebut, karna dalam
ALT yang tinggi kemungkinan terdapat bakteri patogen di antaranya Salmonella dan E.coli yang dapat
menimbulkan penyakit. Sedangkan menurut SNI-01-3552-1994, persyaratan yang ditentukan untuk pengujian
Angka Lempeng Total maksimal 50 koloni/g. Angka lempeng total pada sampel sudah tergolong tidak aman
karena berada di atas batas minimal SNI yaitu sebesar 5 x 10⁵. Menurut Sukmawati et al., (2020), jenis ikan,
fillet ikan dan hasil perikanan termasuk moluska dan echinodermata jumlah Total Plate Count mikroba atau
Angka Lempeng Total jumlah maksimalnya ialah 5 x 10⁵ CFu/mL (SNI, 2015). Salah satu pengujian
kesegaran ikan secara mikrobiologis adalah dengan menggunakan metode Angka Lempeng total.
Perbandingan hasil antara ikan segar ikan mundur mutu tentunya berbeda jauh. Hasil dari ikan segar
memiliki angka lempeng total yaitu 4.2 x 10⁵ yang artinya angka lempeng total tersebut masih sesuai dengan
standar SNI yaitu 5 x 10⁵. Rendahnya nilai alt tersebut dikarenakan sampel yang digunakan adalah ikan
segar. Kesegaran ikan merupakan kriteria paling penting untuk menentukan mutu dan daya awet dari ikan
yang diinginkan. Pada ikan segar yang baru saja ditangkap diberikan hancuran es agar ikan dalam keadaan
baik pada saat dipasarkan dan menghambat aktivitas zat-zat dan mikroorganisme perusak. Hasil pada ikan
mundur mutu yaitu sudah melampaui batas SNI, karena ikan yang digunakan sebagai sampel adalah ikan
mundur mutu. Perubahan ini terjadi akibat oksidasi lemak sehingga menimbulkan bau tengik yang tidak
diinginkan. Kriteria bau ikan segar dengan skor 7 menurut SNI 2729:2013 yakni segar, spesifik jenis kurang.
Mikroorganisme memiliki berbagai enzim yang dapat memecah komponen-komponen makanan menjadi
senyawa sederhana yang mengakibatkan perubahan-perubahan sifat makanan, seperti warna, mata, bau,
rasa dan tekstur dan angka cemaran mikroba yang semakin tinggi mempengaruhi nilai organoleptik.
Pembusukan pada ikan lebih bersifat ketengikan oksidatif. Menurut Apriani et al., (2017), mata ikan yang
terbenam dan pudar sinarnya merupakan salah satu tanda dari mulai berkembangnya bakteri. Kenampakan
daging, terutama pada warna sayatan dipengaruhi oleh reaksi oksidasi antara oksigen dengan komponen
lemak pada ikan kusam. Kriteria daging ikan segar dengan skor 7 menurut SNI 2729:2013 yakni sayatan
daging sedikit kurang cemerlang dan jaringan daging kuat.
Faktor yang mempengaruhi hasil dengan nilai yang tinggi karena ikan yang sudah mengalami
kemunduran mutu. Kecepatan proses tersebut sangat dipengaruhi oleh banyak hal, baik faktor internal yang
lebih banyak berkaitan dengan sifat ikan itu sendiri maupun eksternal yang berkaitan dengan lingkungan dan
perlakuan manusia. Faktor eksternal lain yang mempengaruhi kemunduran mutu pada ikan disebabkan oleh
suhu. Ikan bandeng jika dibiarkan pada suhu kamar, maka akan cepat mengalami proses pembusukan, serta
kandungan air yang tinggi pada tubuh ikan, dapat menjadi media untuk pertumbuhan bakteri pembusuk atau
mikroorganisme lain, sehingga ikan sangat cepat mengalami proses pembusukan dan menjadi tidak segar
lagi. Faktor lain penurunan mutu ikan yakni proses autolisis. Autolisis adalah proses penguraian organ-organ
tubuh ikan oleh enzim-enzim yang terdapat di dalam tubuh ikan sendiri. Proses ini biasanya terjadi setelah
ikan yang mati melewati fase rigor mortis. Salah satu faktor yang mempengaruhi kecepatan penurunan
kualitas ikan yakni suhu. Suhu dan waktu lingkungan yang rendah akan memperpanjang tingkat kesegaran
ikan. Menurut Syafitri et al., (2016), salah satu faktor yang mempengaruhi penurunan mutu ikan yang
dipasarkan adalah waktu, semakin lama waktu maka semakin cepat ikan mengalami proses penurunan mutu.
Hal-hal yang berpengaruh buruk pada mutu ikan adalah kenaikan suhu, penanganan yang kurang baik, dan
penundaan waktu penanganan.
Page 8 of 9
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan tentang angka lempeng total diperoleh kesimpulan
sebagai berikut:
1. Metode perhitungan bakteri dengan Angka Lempeng Total (ALT) adalah jumlah koloni yang terbentuk
dihitung dengan colony counter. Koloni yang dihitung adalah koloni yang tampak membentuk zona
jernih. Cawan yang dihitung adalah yang mengandung koloni antara 30 hingga 300 koloni. Koloni
dihitung dengan persamaan jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran (sigmaC). Nilai n1
yaitu jumlah petri pada pengenceran pertama yang dihitung dikalikan dengan 1 kemudian ditambah
dengan 0,1 yang dikalikan dengan nilai n2 jumlah petri pada pengenceran kedua yang dihitung, lalu
dikali dengan nilai pengenceran koloni terendah, dan dibagi dengan jumlah koloni yang terbentuk dari
semua pengenceran.
2. Angka lempeng total dari ikan bandeng ( Chanos-chanos) mundur mutu diperoleh nilai alt yaitu 15,9 x
105. Angka lempeng total tersebut sudah melebihi ambang batas angka lempeng total yang ditetapkan
oleh SNI yaitu 5,0 x 10 5. Angka lempeng total yang melebihi patas pada ikan bandeng ( Chanos-
chanos) mundur mutu tersebut dapat disimpulkan bahwa ikan sudah tidak layak untuk dikonsumsi.
3. Perbandingan angka lempeng total dari sampel ikan bandeng ( Chanos-chanos) segar dan mundur
mutu sangat jauh berbeda. Angka lempeng total yang diperoleh pada sampel ikan bandeng ( Chanos-
chanos) segar yaitu 6 x 105, sementara hasil angka lempeng total dari sampel ikan bandeng ( Chanos-
chanos) mundur mutu yaitu 15,9 x 10 5. Perbedaan tersebut dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti
penyimpanan, penanganan, suhu. Tingginya nilai angka lempeng total dari ikan bandeng ( Chanos-
chanos) segar karena adanya penanganan yang baik serta penyimpanan dengan suhu rendah,
sehingga mampu menghambat mikroba. Penanganan yang kurang baik serta membiarkan produk
pada suhu ruang akan mengakibatkan produk mengalami kemunduran mutu dan berkembangnya
mikroba.
Saran
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan tentang materi angka lempeng total diperoleh saran
sebagai berikut:
1. Sebaiknya perataan pada sampel dilakukan dengan benar supaya sampel dapat merata ke seluruh
permukaan wadah cawan.
2. Sebaiknya lebih teliti dalam melakukan perhitungan jumlah koloni bakteri agar tidak terjadi kesalahan
untuk perhitungan angka lempeng total (ALT).
3. Sebaiknya alat dan bahan yang telah digunakan dikemasi kembali dan dibersihkan.
Nilai : 92
Draft : ACC
Mustofa Kamil
Page 9 of 9
MODUL PRAKTIKUM

Semarang
2021
MODUL III : Penentuan Jumlah Bakteri Asam Laktat dan Kelompok : 4
Pengamatan Morfologi Bakteri
Tujuan
Tujuan dari praktikum penentuan jumlah bakteri asam laktat adalah sebagai berikut:
1. Mengetahui cara perhitungan Bakteri Asam Laktat (BAL).
2. Mengetahui jumlah Bakteri Asam Laktat (BAL) pada produk perikanan.
3. Membandingkan jumlah Bakteri Asam Laktat (BAL) pada beberapa produk perikanan dan faktor-faktor
yang berpengaruh.
4. Mengetahui morfologi sel Bakteri Asam Laktat (BAL).

Bakteri Asam Laktat (BAL) merupakan salah satu organisme yang memfermentasi bahan pangan
melalui fermentasi karbohidrat dan umumnya menghasilkan sejumlah besar asam laktat. Bakteri ini
memberikan kontribusi yang cukup besar terhadap perbaikan flavour, tekstur, dan masa simpan produk
fermentasi. BAL mempunyai distribusi yang luas dan kemampuan tumbuh pada berbagai substrat organik
dan kondisi seperti kondisi asam, basa, suhu rendah, suhu tinggi, kadar garam tinggi, anaerob, sehingga
menjadikan bakteri asam laktat sebagai kompetitor yang tangguh di semua sektor pengolahan pangan. Pada
berbagai jenis makanan fermentasi, keterlibatan BAL memberikan efek yang menguntungkan karena asam
yang dihasilkan dapat mencegah pertumbuhan mikroba lain yang tidak dikehendaki selama proses fermentasi
berlangsung (Yuliana, 2013).
Bakteri Asam Laktat (BAL) mempunyai sistem proteolitik yang kompleks, baik untuk pertumbuhan
BAL itu sendiri dan juga memberi kontribusi yang nyata untuk pembentukan flavour pada produk fermentasi.
BAL merupakan bakteri yang bersifat halofil, yaitu dapat tumbuh pada lingkungan yang mempunyai kadar
garam. BAL juga hanya mempunyai kemampuan tumbuh pada media yang mengandung protein, serta
membentuk zona jernih di sekitar koloni. Pada proses fermentasi produk perikanan dengan menggunakan
kadar garam tinggi, diperkirakan jenis BAL yang mampu tumbuh dan berkembang adalah dari genus
Lactobacillus sp, Pediococcus sp, dan Leuconostoc sp.
Bakteri Asam Laktat (BAL) mengeksresikan asam laktat sebagai produk akhir fermentasi yang
berperan sebagai preservasi bahan makanan. BAL merupakan bakteri Gram-positif yang banyak digunakan
sebagai starter fermentasi. Bakteri Gram positif memiliki dinding sel yang tebal, membran sel selapis, serta
tidak memiliki membaran luar. (Schnurer dan Magnusson, 2005). Bakteri Gram positif akan mempertahankan
warna Kristal violet setelah dilakukan pengecatan atau pewarnaan. Pewarnaan GRAM adalah salah satu teknik
pewarnaan yang paling penting yang digunakan untuk membedakan antara bakteri Gram positif dan bakteri
Gram negatif. Prinsip pewarnaan Gram yaitu saat bakteri diwarnai dengan kristal violet, bakteri Gram positif
akan menyerap zat warna tersebut sehingga bewarna ungu. Bakteri Gram positif memiliki dinding sel seperti
jala yang tebal yang terbuat dari peptidoglikan (50-90% berat selubung sel), sedangkan bakteri gram negatif
memiliki lapisan yang lebih tipis (10% berat selubung sel) (Putri et al., 2018).
Prosedur Kerja Pour Plate

c. Bahan
 Aquades
 MRS Broth
 Agar
 CaCO3 0,8-1%
 Na-Azida 0,01%
 Preparat basah
Page 2 of 10
d. Alat
 Cawan petri
 Tabung reaksi
 Blue tip
 Mikropipet
 Bunsen
 Inkubator
 Vortex
 Stomacher
 Autoclave
 Kertas label
 Karet gelang
 Plastik
 Kaca objek
 Mikroskop
e. Metode dan hasil pengamatan

Pembuatan Media MRS agar
4. Media MRS agar sebanyak 68,2 g, CaCO 3 sebanyak 8 gram, Na-azida sebanyak 0,1 gram dan 1000 mL
aquades dicampur dalam erlenmeyer, diaduk dan dipanaskan pada hot plate stirer hingga mendidih;
121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Pembuatan Larutan Pengencer NaCl

5. Keduanya dimasukkan dalam erlenmeyer dan dihomogenisasi dengan cara di stir pada hot plate stirrer,
6. Larutan pengencer NaCl dimasukkan dalam erlenmeyer sebanyak 90 ml dan 9 ml dalam tabung reaksi,
kemudian disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Persiapan Contoh
Pengencer NaCl (1:9);
4. Sampel kemudian dimasukkan ke dalam alat stomacher untuk dihomogenisasi sampai menjadi larutan
yang homogen sehingga diperoleh larutan dengan pengenceran 10 -1.
Pengenceran
6. 1 mL larutan pengenceran 10-2 diambil dengan menggunakan pipet steril lalu dimasukkan ke dalam
tabung reaksi yang berisi 9 mL larutan pengencer NaCl untuk didapatkan pengenceran 10 -3, kemudian di
vortex.
7. Melakukan pengenceran hingga 10-6.
Pemupukan
1. Dari setiap tingkat pengenceran diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam cawan petri steril;
2. Media MRS dituangkan sebanyak 10-12 ml ke dalam cawan petri berisi sampel;
3. Segera dilakukan pencampuran hingga merata antara sampel dan media agar dengan cara menggeser
cawan di atas meja membentuk angka delapan.
Page 3 of 10
Inkubasi
Setelah media agar dalam petridish menjadi padat, cawan yang telah terisi sampel diinkubasi pada posisi
terbalik dengan suhu incubator 370C selama 48 jam.
Perhitungan
Keterangan:


1. Kaca obyek dibersihkan dengan kapas yang diberi alkohol kemudian lewatkan pada Bunsen flame
sebentar dan dinginkan.
2. Bersihkan jarum ose dengan alkohol lalu pijarkan di atas Bunsen, biarkan dingin. Pindahkan satu mata
ose suspensi biakan ke atas permukaan kaca obyek lalu ose lagi. Ulangi seperti di atas satu kali lagi.
3. Tambahkan satu tetes minyak imersi di atas kaca obyek lensa obyektif 100x, di turunkan dengan
pengatur kasar hingga menyentuh minyak imersi.
4. Fokus diatur dengan pengatur halus. Laporkan hasilnya.
5. Setelah selesai, lensa obyektif yang telah digunakan dibersihkan dengan kertas lensa yang baru dibasahi
dengan aquadest hingga sisa minyak imersi terlarut dan yang terakhir usap lagi dengan kertas lensa
yang kering hingga sisa air hilang.
Page 4 of 10
Tabel 5. Lembar penilaian organoleptik Udang Rebon (Acetes) Kering

(Xi- X
Spesifikasi (Xi-
Xi
Panelis X ) )2
Kenampakan Bau Rasa Tekstur Jamur
1 9 9 7 7 9 8,2 0 0
2 9 7 9 9 9 8,6 0,4 0,16
3 7 7 9 9 9 8,2 0 0
4 9 7 9 7 9 8,2 0 0
5 7 7 7 9 9 7,8 -0,4 016
X = Σ=0,32
8,2
Perhitungan
1
S 2= ∑ ( Xi− X )2
Simpangan : n
1
S 2 = (0 , 32)
5
2
S =0, 064
S= √0,064
S=0 ,25
S S
X− .1, 96<μ< X+ .1, 96
√n √n
0 ,25 0 , 25
8,2− . 1 ,96 <μ<8,2+ .1 , 96
√5 √5
8.2−0,22<μ<8,2+0,22
7,98<μ<8,42
Kesimpulan :
Dari hasil uji organoleptik terhadap udang rebon ( Acetes) kering didapat selang kepercayaan sebesar
7,98<μ<8,42 pada tingkat kepercayaan 95 %, maka produk tersebut layak untuk
dikonsumsi/digunakan sebagai bahan baku.
Page 5 of 10
Gambar 2. Hasil Pengamatan Uji Bakteri Asam Laktat (BAL) pada Sampel Udang Rebon Kering
Deskripsi :
Pengenceran 10-5 diperoleh koloni yang berbentuk bulatan kecil menyebar keseluruh wadah cawan.
Pengenceran 10-5 terdapat zona warna pada koloni bakteri. Jumlah koloni yang diperoleh dari pengenceran 10 -
5
yaitu 53 koloni bakteri. Pengenceran dari 10 -6 diperoleh koloni yang membentuk zona warna yang lebih
gelap dari pengenceran sebelumnya. Jumlah koloni yang dihasilkan dari pengenceran ini yaitu sebanyak 31
bakteri. Semakin banyak pengenceran yang dilakukan maka semakin sedikit koloni bakteri yang dihasilkan.
Tabel 6. Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri pada Sampel Udang Rebon (Acetes) Kering
Udang Rebon (Acetes) Kering Pengenceran 10-5 53

Pengenceran 10 -6
31
Perhitungan Jumlah koloni bakteri adalah sebagai berikut:
N= 53 + 31
[(1 x 1) + (0,1 x 1)] x 10-6
N= 84
1,1 x 10-6
N = 7,63 x 107
Page 6 of 10
Gambar 3. Lactobacillus plantarum Gambar 4. Lactobacillus acidophilus
Gambar 3. Lactobacillus plantarum Gambar 4. Lactobacillus acidophilus
Deskripsi :
Hasil morfologi bakteri Lactobacillus plantarum dan Lactobacillus acidophilus adalah Bakteri Asam
Laktat yang berasal dari sampel. Morfologi dari bakteri Lactobacillus plantarum adalah bakteri yang berbentuk
batang rantai pendek, dan bersifat ramah lingkungan sehingga sering digunakan untuk fermentasi dalam
makanan. Bakteri ini menghambat bakteri yang bersifat patogen. Bakteri Lactobacillus plantarum juga
merupakan bakteri gram positif jika dilakukan uji pewarnaan akan menghasilkan warna ungu. Morgologi dari
bakteri Lactobacillus acidophilus adalah bakteri yang berbentuk batang atau kokus yang bersifat non spora.
Bakteri ini juga memproduksi bakteri asam laktat sebagai produk fermentasi. Bakteri Lactobacillus acidophilus
ini memiliki pH optimum berkisar 5,3-5,6 dan pH optimum pada bakteri Lactobacillus plantarum adalah 4-5.
Page 7 of 10
Pembahasan:
Udang Rebon adalah salah satu hasil laut dari jenis udang-udangan namun dengan ukuran yang sangat
kecil dibandingkan dengan jenis udang-udangan lainnya. Ukurannya yang kecil inilah, udang ini disebut
dengan udang rebon. Udang rebon merupakan zooplankton dengan ukuran panjang 1-1,5 cm. Udang rebon
merupakan jenis udang yang berukuran kecil dan hidup di perairan Asia Tenggara. Udang ini adalah salah
satu bahan baku yang digunakan untuk pembuatan terasi. Udang jenis ini lebih mudah ditemukan dalam
bentuk terasi ataupun dikeringkan dibandingkan dalam bentuk segar. Ciri-ciri udang rebon adalah mempunyai
tiga pasang kaki yang sempurna, restum dan telsonnya pendek, mempunyai kaki renang yang sempurna dan
tampak berbulu dan panjang antena sekitar 2-3 kali panjang tubuhnya. Udang rebon ini bernafas
menggunakan insang. Sistem pernafasan udang ini diantara bagian lateral karopak ( branchionstegit). Dinding
badan terdapat ronnga rongga atau kamar insang dibagian ventral. Udang rebon mempunyai kandungan gizi
yang tinggi, dalam 100 gram udang rebon segar mengandung protein 62,4 gram dan mengandung kalsium
1209 mg. Menurut Syarif et al., (2017), udang rebon adalah salah satu hasil laut dari jenis udang-udangan
namun dengan ukuran yang sangat kecil dibandingkan dengan jenis udang-udangan lainnya. Karena
ukurannya yang kecil inilah, udang ini disebut dengan udang rebon. Udang rebon mengandung 295 kal kalori,
62,4 g protein, 2,3 g lemak, 1,8 gr karbohidrat, 1209 mg kalsium, 1225 mg fosfor, 6,3 mg zat besi, vit A 210
mg, 0,14 mg vit B1, 20,7 g air dari setiap 100 gr udang rebon kering.
Metode pemupukan pada pengujian Bakteri Asam Laktat yaitu dari setiap tingkat pengenceran diambil
1 ml dan dimasukkan ke dalam cawan petri steril. Media MRS dituangkan sebanyak 10-12 ml ke dalam cawan
petri berisi sampel dan segera dilakukan pencampuran hingga merata antara sampel dan media agar dengan
cara menggeser cawan di atas meja membentuk angka delapan. Pemutaran cawan dengan angka delapan
supaya sampel dan media tercampur sempurna lakukan pemutaran cawan ke depan ke belakang dan ke kiri
ke kanan. Koloni bakteri asam laktat (BAL) ditentukan berdasarkan perubahan warna media menjadi kuning
muda di sekitar lokasi tumbuh koloni bakteri. Pemupukan pada Bakteri Asam Laktat ini menggunakan metode
pour plate. Teknik pour plate adalah teknik penanaman mikroorganisme dengan mencampurkan inokulum
sampel dengan medium padat yang masih berbentuk cair sehingga kumpulan sel akan tersebar merata ke
seluruh media tidak hanya di permukaan. Menurut Rachman et al., (2018), pemupukan untuk bakteri asam
laktat menggunakan metode tuang atau pour plate. Pemupukan dengan metode tuang dilakukan dengan cara
mengambil sebanyak 1 ml sampel yang telah diencerkan dalam larutan. Media agar steril dituangkan ke
dalam cawan petri dan di homogenisasi agar sampel tersebar merata, lalu dibiarkan hingga media agar
memadat. Cawan petri diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24-48 jam dengan posisi terbalik. Koloni BAL yang
terbentuk dalam cawan kemudian dihitung.
Hasil Bakteri Asam Laktat pada udang rebon adalah 7,63 x 10⁷. Rendahnya jumlah Bakteri Asam Laktat
karena nilai pH menurun seiring dengan menurunnya aktivitas bakteri, ditandai dengan semakin
berkurangnya jumlah BAL yang masih hidup. Jumlah Bakteri Asam Laktat tersebut rendah karena pada udang
rebon kering tidak terlalu banyak protein untuk tumbuh. Bakteri asam laktat memerlukan protein untuk
tumbuh. Bakteri asam laktat adalah bakteri. Bakteri asam laktat akan menghidrolisis protein secara bertahap,
yaitu tahap pertama melibatkan enzim proteinase menghasilkan peptida-peptida dan tahap kedua dilanjutkan
oleh aktivitas peptidase menghasilkan asam amino. Bakteri asam laktat membutuhkan protein didasarkan
pada kebutuhan nitrogen. Bakteri asam laktat pada fase pertumbuhan memanfaatkan protein sebagai sumber
Page 8 of 10
nitrogen, yang digunakan oleh bakteri untuk sintesis protein, asam amino. Hasil yang diperoleh menunjukkan
bahwa tidak terlalu banyak protein yang dihidrolisis oleh Bakteri Asam Laktat, sehingga jumlah Bakteri Asam
Laktat pada udang rebon masih terbilang rendah dan bisa dikonsumsi. Jumlah Bakteri Asam Laktat yang baik
yaitu tidak melebihi 10⁷. Menurut Batubara et al., (2019), jumlah bakteri asam laktat pada produk yang baik
dikonsumsi dan baik untuk kesehatan berkisar antara 10⁷-10⁹ CFU/ml. Perubahan total asam laktat erat
hubungannya dengan pH. Kenaikan total asam selalu berbanding terbalik dengan penurunan nilai pH.
Hasil Bakteri Asam laktat dari udang rebon yaitu 7,63 x 10⁷ dan hasil Bakteri Asam Laktat pada produk
terasi yaitu 15 x 10⁷. Hasil jumlah Bakteri Asam Laktat pada produk terasi lebih besar dari udang rebon,
karena pada produk terasi terjadi fermentasi sehingga meningkatkan Bakteri Asam Laktat. Proses fermentasi
terdapat kadar garam yang memberi pengaruh yang besar terhadap nilai Bakteri Asan Laktat. Peningkatan
kadar garam diikuti oleh penurunan total hitungan bakteri asam laktat. Garam mempengaruhi pertumbuhan
mikroba dengan cara menurunkan ketersediaan air dalam sel. Bakteri Asam Laktat pada produk fermentasi
akan bersimbiosis, sehingga dapat mempercepat fermentasi dan akan menghasilkan pH yang lebih rendah
serta kadar asam laktat yang lebih tinggi daripada udang rebon kering. Selama proses fermentasi, bakteri
asam laktat akan memfermentasi karbohidrat yang ada hingga terbentuk asam laktat. Selama proses
fermentasi BAL akan memanfaatkan karbohidrat yang ada hingga terbentuk asam laktat, hingga terjadi
penurunan nilai pH dan peningkatan keasaman. Semakin banyak jumlah BAL dalam terasi maka kadar asam
laktatnya akan semakin tinggi. Peningkatan kadar asam laktat disebabkan adanya aktivitas BAL yang
memecah laktosa dan sukrosa menjadi asam laktat. Kadar asam menurun seiring dengan menurunnya
aktivitas bakteri, ditandai dengan semakin berkurangnya jumlah BAL yang masih hidup atau beraktivitas.
Selama proses fermentasi populasi BAL akan meningkat seiring meningkatnya produksi asam yang berasal
dari pemecahan laktosa. Menurut Magala et al., (2015), fermentasi menggunakan bakteri asam laktat
menyebabkan peningkatan konsentrasi asam laktat. Fermentasi juga menyebabkan penurunan konsentrasi
glukosa dan fruktosa karena dikonsumsi sebagai sumber energi untuk pertumbuhan dan metabolisme bakteri
asam laktat.
Bakteri asam laktat sangat dipengaruhi oleh komposisi media pertumbuhan dan faktor lingkungannya.
Faktor-faktor lingkungan yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri asam laktat antara lain adalah suhu, nilai
pH, kadar garam, dan karbohidrat. Suhu akan berpengaruh terhadap pertumbuhan sel dan juga pembentukan
produk oleh mikroba. Salah satu faktor penting dalam pertumbuhan bakteri adalah nilai pH. Bakteri
memerlukan suatu pH optimum untuk tumbuh optimal. Pengaruh pH terhadap pertumbuhan bakteri ini
berkaitan dengan aktivitas enzim. Enzim dibutuhkan oleh bakteri untuk mengkatalis reaksi-reaksi yang
berhubungan dengan pertumbuhan bakteri. Tingginya kadar bakteri asam laktat dapat disebabkan oleh
beberapa faktor, di antaranya semakin bertambah lama fermentasi terdapat pertumbuhan mikroorganisme
terutama bakteri asam laktat yang semakin lama menghasilkan asam laktat lebih banyak, sehingga protein
yang terdenaturasi lebih banyak. Faktor lingkungan yang mempengaruhi pertumbuhan dan produksi asam
laktat adalah pH dan suhu. Apabila pH dalam suatu medium atau lingkungan tidak optimal, maka akan
mengganggu kerja dari enzim-enzim tersebut, yang pada akhirnya akan mempengaruhi pertumbuhan bakteri
itu sendiri. Menurut Mardalena (2016), beberapa faktor lingkungan yang mempengaruhi pertumbuhan asam
laktat adalah kadar garam, suhu, pH dan tersedianya karbohidrat sebagai sumber makanan. Untuk
pertumbuhan yang ideal bagi bakteri asam laktat perlu dibuat suatu kondisi yang optimal.
Page 9 of 10
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai Bakteri Asam Laktat diperoleh kesimpulan
sebagai berikut:
1. Cara perhitungan Bakteri Asam Laktat yaitu jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran (C)
dibagi 1 dikali jumlah petri pada pengenceran pertama yang dihitung (n1) ditambah 0,1 dikali jumlah
petri pada pengenceran kedua yang dihitung (n2) dan dikalikan dengan nilai pengenceran koloni
terendah (d)
2. Jumlah Bakteri Asam Laktat pada udang rebon yaitu 7, 63 x 10⁷. Jumlah Bakteri Asam Laktat tersebut
masih dikategorikan layak untuk dikonsumsi karena belum melampaui batas maksimum yang
ditetapkan oleh SNI. Standar SNI untuk Bakteri Asam Laktat yaitu jumlah bakteri asam laktat pada
produk yang baik dikonsumsi dan baik untuk kesehatan berkisar antara 10⁷-10⁹ CFU/ml.
3. Bakteri Asam Laktat pada udang rebon yaitu 7,63 x 10⁷, sedangkan jumlah Bakteri Asam Laktat pada
produk terasi yaitu 15x10⁷. Perbedaan jumlah tersebut menunjukkan bahwa jumlah Bakteri Asam
Laktat pada produk terasi lebih tinggi. Hal ini dikarenakan terasi adalah produk fermentasi, selain itu
juga adanya pengaruh kadar garam, ph, dan suhu. Secara teoritis Bakteri Asam Laktat meningkat
seiring dengan meningkatnya lama fermentasi, karena gula-gula yang ada dapat dimanfaatkan oleh
Bakteri Asam Laktat untuk tumbuh. Hal ini disebabkan karena fruktosa dipecah oleh Bakteri Asam
Laktat untuk bertumbuh menjadi asam laktat dan asam-asam organik lainnya.
4. Morfologi sel Bakteri Asam Laktat yaitu memiliki ciri-ciri yaitu selnya bereaksi positif terhadap
pewarnaan Gram, bereaksi negatif terhadap katalase dan tidak membentuk spora. Secara umum
morfologi dari sel Bakteri Asam Laktat memiliki ciri-ciri secara morfologi bentuk bulat, susunan sel
tetrad, gram positif, motilitas negatif.
Saran
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan tentang materi angka lempeng total diperoleh saran
sebagai berikut:
1. Sebaiknya pada proses sterilisasi media saat ditutup dengan kapas dan alumunium foil dilakukan
dengan teliti supaya tidak terjadi penguapan.
2. Sebaiknya perhitungan jumlah koloni Bakteri Asam Laktat dilakukan dengan teliti agar tidak terjadi
kesalahan.
3. Sebaiknya alat dan bahan yang telah digunakan dikemasi kembali agar tidak terjadi kontaminasi oleh
bakteri.
Nilai : 92
Draft : ACC
Mustofa Kamil
Page 10 of 10
MODUL PRAKTIKUM

Semarang
2021
MODUL IV : Pengamatan Jamur Kelompok : 4
Tujuan
Tujuan dari praktikum pengamatan jamur adalah sebagai berikut:
1. Mengetahui metode perhitungan jamur.
2. Mengetahui jamur pada produk Perikanan.
3. Membandingkan jamur pada beberapa produk perikanan dan faktor-faktor yang berpengaruh.

Yeast adalah salah satu mikroorganisme yang termasuk dalam golongan fungi uniseluler. Reproduksi
vegetatif pada yeast terutama dengan cara pertunasan. Sebagai sel tunggal, yeast tumbuh dan berkembang
biak lebih cepat dibandingkan dengan mold yang tumbuh dengan membentuk filamen. Yeast adalah
kelompok polifiletik dari Basidiomycetes dan Ascomycetes. Pertumbuhan yeast pada media tumbuh sangat
tergantung pada sifat fisiologisnya. Umumnya yeast tumbuh pada kondisi dengan persediaan cukup air
(Zunaidah dan Alami, 2014).
Perhitungan koloni bakter yang mengandung antara 25 – 250 koloni. Bila jumlah koloni per cawan
lebih besar dari 250 pada seluruh pengenceran maka laporan hasilnya sebagai TBUD atau terlalu banyak
untuk dihitung (Hartati, 2016).
Jamur dapat menyebabkan berbagai tingkat dekomposisi bahan pangan. Selain itu, jamur dapat
tumbuh pada hasil pertanian sebelum dipanen, hasil panen yang sedang disimpan, bahan pangan yang telah
diolah maupun yang dijual di pasar. Bahan pangan yang mengalami dekomposisi oleh jamur dapat membusuk
dan bernoda dengan warna tertentu (Tournas et al., 2001).
Prosedur Kerja
f. Bahan
 Aquades
 Media Potato Dextrose Agar (PDA)
g. Alat
 Cawan petri
 Tabung reaksi
 Blue tip
 Mikropipet
 Bunsen
 Inkubator
 Vortex
 Stomacher
 Autoclave
 Kertas label
 Karet gelang
 Plastik
Page 2 of 8
h. Metode dan hasil pengamatan
Pembuatan Media PDA
6. Media PDA sebanyak 39 gram dan 1000 ml aquades dicampur dalam erlenmeyer, diaduk dan dipanaskan
pada hot plate stirer hingga mendidih;
121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit.

2. Keduanya dimasukkan dalam erlenmeyer dan dihomogenisasi dengan cara di stir pada hot plate stirrer;
3. Larutan pengencer pengencer NaCl dimasukkan dalam erlenmeyer sebanyak 90 ml dalam erlenmeyer
dan 9 ml dalam tabung reaksi kemudian disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121oC dan
tekanan 1 atm selama 15 menit.
Persiapan Contoh
Pengenceran
10.1 mL larutan pengenceran 10-2 diambil dengan menggunakan pipet steril lalu dimasukkan ke dalam
vortex.
Pemupukan
4. Dari setiap tingkat pengenceran diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam cawan petri steril;
5. Media PDA dituangkan sebanyak 10-12 ml ke dalam cawan petri berisi sampel;
6. Segera dilakukan pencampuran hingga merata antara sampel dan media agar dengan cara menggeser
cawan di atas meja membentuk angka delapan.
Inkubasi
Setelah media agar dalam petridish menjadi padat, cawan yang telah terisi sampel diinkubasi pada posisi
terbalik dengan suhu inkubator 370C selama 48 jam.
Perhitungan
Keterangan:

Page 3 of 8
Pengamatan
Koloni yang terbentuk diamati dan dideskripsikan.
Tabel 7. Lembar Penilaian Organoleptik Ikan Kapasan Kering Tawar

(Xi- X
Spesifikasi (Xi-
Xi
Panelis X ) )2
Kenampakan Bau Rasa Tekstur Jamur
1 8 9 9 7 9 8,4 0,28 0,07
2 8 9 7 7 9 8 -0,12 0,01
3 7 9 7 7 9 7,8 -0,32 0,1
4 8 9 7 7 9 8 -0,12 0,01
5 8 9 9 7 9 8,4 0,28 0,07
X =8,1 Σ=0,26
2
Perhitungan
1
S 2= ∑ ( Xi− X )2
Simpangan : n
1
S 2 = (0 , 26 )
5
2
S =0 ,052
S= √0,052
S=0 ,23
S S
X− .1, 96<μ< X+ .1, 96
√n √n
0,23 0,23
8,12− .1,96<μ<8 ,12+ .1,96
√5 √5
8,12−0,2<μ<8,12+0,2
7,92<μ<8,32
Kesimpulan :
Dari hasil uji organoleptik terhadap ikan kapasan kering tawar didapat selang kepercayaan sebesar
7,92<μ<8,32 pada tingkat kepercayaan 95 %, maka produk tersebut layak untuk
dikonsumsi/digunakan sebagai bahan baku.
Page 4 of 8
Gambar 5. Hasil Pengamatan Jamur pada Sampel Ikan Kapasan Kering Tawar
Deskripsi :
Pengenceran 10-2 diperoleh koloni jamur yang terbentuk sebanyak 153 koloni. Jamur yang terbentuk
terdapat zona jernih yang besar serta terdapat dua zona jernih yang besar. Pengenceran 10 -3 menghasilkan
jumlah koloni sebanyak 117. Jamur yang terbentuk dengan bulatan kecil dan hampir menyebar keseluruh
wadah cawan. Berdasarkan hasil dari kedua pengenceran tersebut dapat dikatakan bahwa semakin sering
dilakukan pengenceran maka koloni yang terbentuk semakin sedikit.
Tabel 8. Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Jamur

Ikan Kapasan Kering Tawar Pengenceran 10-2 153

Pengenceran 10-3 117
Perhitungan Jumlah koloni Jamur adalah sebagai berikut:
N= 153 + 117
[(1 x 1) + (0,1 x 1)] x 10-3
N= 270
1,1 x 10-3
N = 24,5 x 104
Page 5 of 8
Pembahasan:
Ikan kapas-kapas atau kapasan merupakan ikan yang mempunyai ukuran tubuh relatif kecil, bentuk
badan pipih tegak dengan kepala melengkung, mulut terletak di ujung depan kepala, moncong dapat
ditonjolkan ke depan, tubuh ditutupi oleh sisik berukuran besar, sirip dada panjang dan runcing, warna
tubuh keperakan. Daerah penyebaran ikan ini seluruh perairan pantai Indonesia terutama Laut Jawa, bagian
timur Sumatera, sepanjang pantai Kalimantan, Sulsel, Arafuru, ke utara sampai Teluk Benggala, Teluk
Siarn, sepanjang Laut Cina Selatan, ke selatan sampai pantai utara Australia. Ikan kapasan memilih tempat
hidup di padang lamun, mereka tidak ingin bermigrasi ke terumbu karang maupun ke habitat lain tidak seperti
ikan lainnya. Padang lamun memiliki berbagai peranan dalam kehidupan ikan di mana padang lamun dapat
dijadikan daerah asuhan (nursery ground), sebagai tempat mencari makan (feeding ground), dan daerah
untuk mencari perlindungan. Ikan kapasan yang di tangkap biasanya harus memiliki ukuran sekitar 10,2 cm-
16,5 cm. Menurut Kalsum et al., (2019), umumnya ikan-ikan sebagai penghuni tidak tetap biasanya setelah
dewasa bermigrasi kembali ke ekosistem terumbu karang, kecuali kelompok ikan kapas-kapas ( Gerreidae)
yang memilih menetap di padang lamun. Ikan kapas-kapas memiliki ukuran layak tangkap pada kisaran
panjang cagak antara 10,2 cm sampai 16,5 cm.
Metode pemupukan pada pengamatan jamur yaitu dari setiap tingkat pengenceran diambil 1 ml dan
dimasukkan ke dalam cawan petri steril. Media PDA dituangkan sebanyak 10-12 ml ke dalam cawan petri
berisi sampel. Segera dilakukan pencampuran hingga merata antara sampel dan media agar dengan cara
menggeser cawan di atas meja membentuk angka delapan. Pemupukan pada pengamatan jamur
menggunakan metode tuang. Tujuan dari teknik ini adalah untuk menyebarkan sel-sel bakteri tidak hanya
pada permukaan media saja melainkan sel terendam dalam medium sehingga terdapat sel yang tumbuh di
permukaan media yang kaya oksigen dan tumbuh di dalam media dengan oksigen sedikit. Teknik ini
memerlukan media yang belum padat untuk dituang bersama suspensi bakteri ke dalam cawan petri lalu
dihomogenkan dan dibiarkan memadat. Cawan petri yang berisi media di geser membentuk angka delapan
dengan tujuan supaya tercampur merata. Teknik pemupukan dengan metode pour plate pada pengujian
jamur jika tidak dilakukan maka akan berdampak pada koloni. Menurut Sanders et al., (2012), dengan teknik
pelat tuang, koloni terbentuk di dalam agar serta di permukaan media agar-agar sehingga memberikan cara
yang mudah untuk menghitung jumlah sel yang layak dalam sampel. Salah satu kesalahan teknis paling
umum yang terjadi saat melakukan teknik pelat tuang adalah pencampuran sampel yang tidak mencukupi
dengan agar-agar yang meleleh yang menyebabkan koloni menggumpal sehingga membuat jumlah pelat
tidak akurat. Kesalahan lain yang sering terjadi adalah menuangkan agar-agar yang meleleh ketika terlalu
panas, membunuh banyak sel bakteri dalam sampel. Kesalahan ini juga akan mempengaruhi keakuratan
jumlah lempeng yang memberikan angka yang kurang mewakili jumlah total unit pembentuk koloni dalam
sampel.
Hasil yang diperoleh dari sampel ikan kering kapasan yaitu diperoleh nilai pada pengujian jamurnya
menghasilkan nilai 24,5 x 10⁴. Hasil nilai organoleptiknya yaitu 7,82 < u < 8,32, nilai organoleptik tinggi
merupakan nilai yang diperoleh berdasarkan hasil rata-rata keseluruhan parameter dari segi kenampakan,
tekstur, bau, dan jamur. Adanya jamur pada ikan asin mengindikasikan bahwa ikan asin tersebut mempunyai
kelembaban yang tinggi akibat penyimpanan dan pemasaran kurang tepat dan cukup lama. Tingginya jumlah
Page 6 of 8
jamur karena adanya penyimpanan atau penanganan seperti pengeringan. Jumlah jamur yang diperoleh
karena batas penerimaan untuk jamur yaitu 10². Angka tersebut sudah melebihi batas yang ditetapkan oleh
SNI. Munculnya jamur pada produk ikan asin karena disebabkan oleh ikan yang kurang kering atau masih
memiliki kelembapan pada tekstur sehingga ditumbuhi jamur dan belatung serta tekstur hancur yang
menyebabkan pedagang mengalami kerugian. Menurut Atma (2016), total kapang serta khamir yang sesuai
dengan standar yang telah ditetapkan Badan Pengawasan Obat dan Makanan (BPOM) dan Standar Nasional
Indonesia (SNI). Standar yang ditetapkan adalah 1x10² CFU/ml (BPOM) dan 5x10¹ CFU/ml (SNI).
Hasil yang diperoleh dari sampel ikan asin tawar yaitu pada pengujian jamur memiliki nilai 24,5 x 10⁴,
sedangkan hasil pada produk ikan asap jumlah koloni sudah melebihi range yang ditetapkan jadi tidak bisa
dihitung atau TBUD. Kombinasi pertumbuhan jamur pada bagian permukaan daging ikan dan aktivitas bakteri
pada bagian dalam daging ikan mempercepat terjadinya kemunduran mutu ikan asap. Semakin tingginya
kandungan air dalam tubuh ikan yang memungkinkan menguapnya senyawa-senyawa asap selama disimpan
serta diakibatkan hampir seluruh bagian tubuh ikan sudah ditumbuhi oleh jamur sehingga kelihatan sudah
tidak layak lagi. Kerusakan ini dapat menyebabkan pembusukan produk baik oleh bakteri atau jamur yang
patogen maupun oleh racun yang dihasilkan. Pengolahan yang dikombinasikan dengan pemanasan, maka
produk ikan asap juga rentan terhadap pertumbuhan jamur. Aksi bakteri maupun enzim mengakibatkan
degradasi jaringan pengikat yang menyebabkan penurunan nilai tekstur sehingga menjadi lunak. Mikroba
yang ada menghasilkan benang-benang jamur dan lendir-lendir yang membuat nilai bau, tekstur dan
penampakan semakin rendah. Menurut Sakti et al., (2016), proses kimiawi pada bahan yang terjadi selama
pengasapan akan merubah mutu ikan setelah pengasapan. Ikan yang telah diasap harus disimpan di tempat
yang kering dan tertutup rapat. Kerusakan yang sering terjadi pada ikan asap adalah terjadinya pertumbuhan
jamur atau kapang karena jamur dapat tumbuh pada makanan dengan kadar air rendah. Pertumbuhan jamur
pada ikan asap dapat menyebabkan terjadinya perubahan bau menjadi tengik dan perubahan tekstur.
Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan jamur yaitu proses penanganan seperti pengeringan dengan
bantuan sinar matahari secara langsung sangat rawan terhadap serangan lalat dan kontaminasi kotoran.
Pengeringan dengan dijemur itu tidak sempurna justru dapat menyebabkan ikan mudah busuk terutama
karena serangan jamur, bakteri, belatung dan kutu. Faktor sanitasi dan hiegine yang kurang, akibatnya ikan
asin tampak kusam, berbau dan tak jarang ditumbuhi jamur yang secara langsung dapat dilihat dengan mata
telanjang. Suhu pengeringan maupun pengasapan yang tidak sesuai lamanya dengan waktu pengasapan atau
pengeringan maka ikan tidak kering. Bahan pangan yang disimpan pada kisaran suhu ini, jika hal ini terjadi
maka ikan akan lebih mudah terserang jamur. Namun, pada kondisi yang ideal seperti pH substrat yang
netral, kadar air yang tinggi dan adanya nutrisi yang ideal, kapang dan khamir pertumbuhannya justru
cenderung lebih lambat dibandingkan dengan bakteri dalam kompetisi pertumbuhan. Faktor lain yang
mempengaruhi jamur yaitu proses penyimpanan produk. Menurut Purnomo et al., (2017), proses pengolahan
dan pengeringan memang sangat mempengaruhi kualitas mutu dari produk ikan asin yang dihasilkan. Selain
hal tersebut tahapan penyimpanan juga mempengaruhi kualitas ikan asin. Penyimpanan ikan asin yang tidak
sesuai akan menyebabkan pertumbuhan jamur yang dapat mengganggu kesehatan jika dikonsumsi.
Mudahnya ikan asin rusak akibat jamur menyebabkan produk ini rentan akan bahaya kesehatan. Selama
penyimpanan memungkinkan untuk pertumbuhan kapang, maka akan terjadi kerusakan oleh kapang tersebut
dan terus meningkat seiring dengan bertambahnya waktu penyimpanan.
Page 7 of 8
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi pengamatan jamur maka diperoleh
kesimpulan sebagai berikut:
1. Metode perhitungan jamur yaitu jumlah koloni yang terbentuk dihitung dengan colony counter. Koloni
dihitung dengan persamaan yaitu jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran (C) dibagi 1
dikali jumlah petri pada pengenceran pertama yang dihitung (n1) ditambah 0, 1 dikali jumlah petri
pada pengenceran kedua yang dihitung (n2) dan dikalikan dengan nilai pengenceran koloni terendah
(d).
2. Jamur pada produk perikanan paling banyak ditemukan pada sampel ikan kapasan diperoleh jamur
sebanyak 117-153 koloni. Jamur pada produk perikanan pada sampel tongkol asap lebih banyak
daripada sampel ikan kapasan kering tawar yaitu melebihi 250 koloni. Jumlah koloni yang terbentuk
dari kedua sampel tersebut bisa dikatakan bahwa produk ikan kapasan kering tawar masih layak
konsumsi sedangkan produk ikan tongkol asap tidak layak untuk dikonsumsi karena sudah melebihi
batas.
3. Jamur pada produk ikan kering tawar yaitu 24,5 x 10⁴ sedangkan jamur pada produk ikan asap tidak
bisa dihitung atau TBUD. Perbedaan jumlah jamur pada kedua sampel tentunya dipengaruhi oleh
beberapa faktor. Faktor yang mempengaruhi tingginya jumlah jamur pada suatu produk seperti ikan
asap yaitu adanya pengaruh suhu, proses penyimpanan, sanitasi dan hiegine pada produk.
Saran :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan tentang materi pengamatan jamur diperoleh saran sebagai
berikut:
1. Sebaiknya pada saat melakukan pemupukan di lakukan dengan benar supaya tidak merusak koloni
yang akan tumbuh.
1. Sebaiknya perhitungan jumlah koloni dilakukan dengan benar supaya pada perhitungan jamur tidak
terjadi kesalahan.
2. Sebaiknya alat dan bahan yang digunakan dikemasi supaya terhindar dari kontaminasi bakteri.
Nilai : 92
Draft : ACC
Mustofa Kamil
Page 8 of 8
MODUL PRAKTIKUM
Semester Genap 2020

Semarang
2021
MODUL V : Penentuan Jumlah Bakteri pada Ruangan Kelompok : 4
dan Peralatan Pengolahan (Metode Swab)
Tanggal : 13 April 2021
Tujuan
Tujuan dari praktikum penentuan jumlah bakteri pada ruangan dan peralatan pengolahan (metode swab)
adalah sebagai berikut:
1. Mengetahui cara menghitung jumlah mikroorganisme menggunakan metode swab.
2. Mengetehui jumlah mikroorganisme yang terdapat di ruangan dan peralatan.
3. Membandingkan jumlah mikroorganisme pada ruangan dan peralatan serta faktor-faktor yang
berpengaruh.

Teknik swab merupakan teknik yang pengujian sanitasi yang dapat digunakan pada permukaan yang
rata, bergelombang atau permukaan yang sulit dijangkau seperti retakan, sudut dan celah. Pengambilan
sampel mikroorganisme pada permukaan dilakukan dengan cara mengusap permukaan alat yang akan diuji
dengan teknik yang telah ditentukan. Penggunaan teknik swab ini biasanya dilakuakan untuk mengetahui
angka kuman pada permukaan yang kontak dengan pangan (Lukman dan Soejoedono, 2009).
Metode swab merupakan suatu metode yang digunakan untuk pemeriksaan permukaan suatu
peralatan atau tempat dengan cara mengusapkan area yang telah diketahui dengan luas antara 10-100cm2.
Metode swab dilakukan dengan menggunakan pengusap steril seperti cotton bud atau alat usap
lainnya yang telah dibasahi dalam 10 mL pengencer penetral. Pendekatan semi kuantitatif ini memungkinkan
penghitungan mikroorganisme per cm 2 dan dapat memfasilitasi dari sebuah interpretasi hasil
(Public Healthy England, 2017).
Pengambilan sampel dengan swab dapat digunakan untuk mendeteksi kontaminan organik
(mikrobakteri) dan anorganik (debu, pestisida, logam, semprotan melayang, residu kontaminan, dll.) pada
permukaan yang berbeda. Teknik ini paling efektif untuk kelancaran permukaan seperti kaca, logam
(termasuk pipa), permukaan yang dicat dan permukaan vegetasi yang halus seperti Daun-daun. Pengambilan
sampel swab kurang efektif pada permukaan yang kasar dan / atau berpori (mis. Kayu dan beton). Meskipun
ada langkah-langkah pengaturan kontaminasi permukaan untuk beberapa kontaminan (mis. Untuk 'bebas
PCB' bahan), penggunaan sampel lap untuk tujuan selain mendeteksi keberadaan kontaminan tidak
direkomendasikan. (Enviromental Protection Water, 2007).
Prosedur Kerja Metode Swab
i. Bahan
 Sampel ruangan atau peralatan pengolahan
 Plate Count Agar (PCA)
 Aquades
j. Alat
 Cawan petri
 Tabung reaksi
 Yellow tip
 Mikropipet
 Bunsen
 Inkubator
 Vortex
Page 2 of 8
 Stomacher
 Autoclave
 Kertas label
 Karet gelang
 Plastik
 Cotton bud
 Batang L (L-Rod)
c. Metode dan hasil pengamatan

Pembuatan Media PCA
8. Media PCA sebanyak 22,5 g dan 1000 mL aquades dicampur dalam erlenmeyer, diaduk dan dipanaskan
pada stir hot plate hingga mendidih;
121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit;
10.Media kemudian dituang ke dalam petri 10-15 ml lalu diamkan hingga media menjendal.

6. Larutan pengencer NaCl sebanyak 10 ml dan 9 ml dimasukkan ke dalam tabung reaksi, kemudian
disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121oC dan tekanan 1 atm selama 15 menit.
Prosedur Swab
1. Luas area untuk daerah usapan adalah 1 cm2. Untuk membantu menetapkan luas area dapat
menggunakan bahan yang bersifat anti karat, dapat disterilkan dan mempunyai daerah usapan 1 cm 2;
2. Jika permukaan yang akan diusap kering, cotton bud dicelupkan pada cairan larutan pengencer steril
sebelum digunakan;
3. Cotton bud diusapkan secara aseptis dengan cara memutar secara seksama;
4. Cotton bud dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 10 ml larutan NaCl steril 0,85%;
5. Tabung reaksi berisi larutan dihomogenasi menggunakan vortex.
Pengenceran
11.1 mL larutan hasil pengenceran 10-1 diambil dengan menggunakan pipet steril;
12.Larutan kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 mL larutan pengencer NaCl untuk
vortex;
14.Prosedur dilakukan berlanjut hingga pengenceran 10-4.
Pemupukan
4. Media yang sudah dituang dalam petri disiapkan;
5. Mengambil 0,1 mL dari tiap-tiap pengenceran dan dimasukkan ke dalam cawan petri;
6. Sampel diratakan menggunakan batang L (L-Rod)
Inkubasi
Setelah media agar dalam petri dish menjadi padat, cawan yang telah terisi sampel diinkubasi pada posisi
terbalik dengan suhu inkubator 370C selama 48 jam.
Page 3 of 8
Perhitungan
koloni. Jumlah bakteri dinyatakan per 100 cm2. Koloni dihitung dengan persamaan:
Keterangan:

Gambar 6. Hasil Pengamatan Mikroorganisme di Ruangan (Udara)
Deskripsi :
Koloni bakteri yang dihasilkan dari swab udara yaitu terbentuk zona jenrnih. Zona jernih yang
terbentuk berada di tengah permukaan cawan dan tidak menyebar. Bakteri yang terbentuk banyak
membentuk zona jernih yang besar. Adanya bakteri yang terbentuk pada swab udara karena disebabkan oleh
kontaminasi dari bakteri yang ada di udara maupun ruangan. Ruangan maupun udara yang kurang bersih
banyak terdapat bakteri, oleh karena itu perlunya dilakukan pembersihan dan sanitasi pada ruangan.
Page 4 of 8
Gambar 7. Hasil Pengamatan Mikroorganisme pada Swab Alat (Oven)
Deskripsi :
Koloni bakteri yang dihasilkan dari swab alat pada oven yaitu yaitu terbentuk zona jenrnih. Zona
jernih yang terbentuk hampir banyak menyebar keseluruh permukaan cawan. Bakteri yang terbentuk banyak
membentuk bulatan zona jernih yang kecil. Koloni yang terbentuk pada pengenceran 10 -3 yaitu 98 dan pada
pengenceran 10-4 koloni yang terbentuk sebanyak 74. Adanya bakteri yang terbentuk pada swab alat karena
disebabkan oleh kontaminasi dari bakteri yang ada di alat tersebut. Alat yang kurang bersih banyak terdapat
bakteri, oleh karena itu perlu dilakukan pembersihan pada alat supaya tidak terdapat bakteri. Semakin banyak
dilakukan proses pengenceran maka jumlah koloni yang terbentuk semakin sedikit.
Tabel 9. Data Koloni pada Pengujian Metode Swab Udara

Swab Alat Pengenceran 10-3 98

Pengenceran 10-4 74
Perhitungan Jumlah koloni bakteri adalah sebagai berikut:
N= 98 + 74
[(1 x 1) + (0,1 x 1)] x 10-4
N= 172
1,1 x 10-4
N = 15 x 105
Page 5 of 8
Pembahasan:
Swab udara adalah suatu uji untuk mengetahui kondisi sanitasi dan higiene lingkungan proses
produksi. Penyebaran mikroorganisme di udara dipengaruhi oleh kecepatan aliran udara, mikroorganisme
yang berasal dari lingkungan (flora normal) oleh adanya aliran udara akan tersuspensi dalam udara dan
bergabung dengan partikel udara lain. Uji swab udara dilakukan dengan pengujian mikrobiologi termasuk
bakteri menggunakan media agar ( Plate Count Agar/PCA). Alat yang digunakan dalam pengujian ini adalah
cawan petri. Cawan petri yang sudah berisi media PCA dibiarkan terbuka diruangan yang akan diuji selama 2
menit. Selanjutnya cawan ditutup rapat dan diinkubasi, lalu koloni dari cawan petri dapat diamati. Pengujian
swab udara juga harus memperhatikan kesterilan dari tempat maupun orang yang melakukan pengujian,
dengan mematuhi sesuai aturan yang ditetapkan oleh laboratorium seperti sarung tangan, masker, jas dan
penutup kepala. Menurut Getachew et al. (2018), selama prosedur swab udara pada sampel pastikan
memakai sarung tangan steril, masker bedah, dan pelindung digunakan untuk mencegah kontaminasi pada
pelat agar-agar. Pelat diperiksa secara visual untuk pertumbuhan bakteri sebelum digunakan. Cawan petri
yang berisi agar dibiarkan terbuka ke udara selama jangka waktu tertentu. Mikroba yang dibawa oleh udara
akan jatuh ke permukaan media.
Hasil swab positif mengandung mikroorganisme, hal ini ditandai dengan adanya titik-titik putih atau
zona jernih yang menempel pada media PCA. Kontaminasi mikroorganisme merupakan parameter paling
berpengaruh pada polutan udara dalam ruang, khususnya pada lingkungan ruang kesehatan. Keberadaan
bakteri udara di ruang adalah faktor risiko penting terjadinya infeksi. Keadaan udara juga sangat
mempengaruhi terjadinya infeksi misalnya kelembaban udara, suhu dan pergerakan udara. Kelembaban
mempengaruhi angka kuman dalam udara. Infeksi disebarkan melalui udara perlu dipantau terus-menerus.
Proses pembersihan ruangan yang tidak dilakukan dengan baik atau sesuai dengan standar maka akan
mempengaruhi jumlah koloni bakteri yang ada pada ruangan tersebut, kelembaban tinggi akan meningkatkan
pertumbuhan mikroorganisme, suhu udara terlalu panas maka kualitas udara akan terpengaruh. Jumlah
bakteri kontaminan berkaitan dengan kebersihan lingkungan, sehingga kebersihan harus dijaga dengan baik
termasuk dengan pembersihan. Semakin bersih lingkungan maka bakteri yang dihasilkan juga semakin
sedikit. Menurut Yonata et al. (2020), sanitasi ruangan atau kebersihan yang melingkupi kebersihan
lingkungan dapat mengurangi risiko adanya kuman dalam hal ini di udara ruang. Apabila sanitasi ruangannya
buruk hal ini tentu saja dapat menimbulkan ruangan yang kotor dan berdebu. Partikel debu mengandung
berbagai jenis kuman di dalamnya.
Kualitas dari alat laboratorium yang digunakan untuk pengujian dapat dilakukan uji swab peralatan.
Adapun tujuan dari pengambilan sampel usap alat bertujuan sebagai bahan pemeriksaan angka kuman yang
ada pada peralatan agar dapat diketahui sejauh mana tingkat kebersihan peralatan yang digunakan. Metode
swab peralatan yaitu menentukan luas area usap sebesar 12 cm. Untuk membantu menetapkan luas area
dapat menggunakan bahan yang bersifat anti karat, dapat disterilkan dan mempunyai daerah usapan 1 cm 2.
Apabila permukaan yang akan diusap kering, cotton bud dicelupkan pada cairan larutan pengencer steril
sebelum digunakan, lalu cotton bud diusapkan secara aseptis dengan cara memutar secara seksama. Cotton
bud dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 10 ml larutan NaCl steril 0,85% dan tabung reaksi berisi
larutan dihomogenasi menggunakan vortex. Menurut Ismail et al. (2013), prosedur swab usap menggunakan
cotton bud steril untuk mengambil mikroorganisme dari permukaan peralatan. Kuncup kapas yang
diaplikasikan pada permukaan alat memulihkan bakteri mikroba dan melepaskannya ke dalam larutan
Page 6 of 8
ekstraksi selama langkah vortexing, diikuti dengan proses pengenceran. Oleh karena itu, langkah vortex atau
homogenisasi tidak dapat dihindari untuk membantu memulihkan mikroorganisme dari cotton bud. Cotton
bud kering atau permukaan alat kering sering dibasahi dalam larutan pengencer steril. Terakhir,
mikroorganisme dihitung berdasarkan peraturan yang berlaku.
Hasil yang diperoleh pada pengujian swab peralatan yaitu pada perhitungan koloni diperoleh
sebesar 15 x 10⁵. Jumlah koloni yang besar dari swab peralatan menandakan bahwa alat yang di swab
mengandung banyak kotoran dan sanitasi tidak terjaga pada peralatan tersebut. Kebersihan dan cara
penyimpanan peralatan laboratorium harus juga memenuhi persyaratan sanitasi. Kebersihan dan cara
penyimpanan peralatan harus memenuhi persyaratan sanitasi. Pembersihan dan sanitasi alat untuk dapat
menyusun program sanitasi yang efektif maka suatu sarana pengolahan sebaiknya memiliki alat yang dengan
desain dan penempatan yang baik dan memudahkan proses pembersihan dan sanitasi. Secara umum tahapan
pembersihan meliputi penghilangan kotoran, penggunaan pembersih untuk menghilangkan kotoran yang
terlihat seperti debu pada peralatan. Kebersihan peralatan yang kurang baik akan mempunyai peranan
penting dalam pertumbuhan dan perkembangbiakan mikroba, penyebaran penyakit dan keracunan, untuk itu
peralatan laboratorium haruslah dijaga terus tingkat kebersihannya supaya terhindar dari kontaminasi bakteri
patogen serta cemaran zat lainnya. Menurut Ananda dan Khairiyati (2017), tingginya angka koloni bakteri
dikarenakan tahapan proses pembersihan pada alat yang tidak sempurna, tempat penyimpanan peralatan
yang tidak terlindung/tertutup. Pembersihan peralatan secara baik akan menghasilkan alat yang bersih dan
sehat serta mengurangi mikroorganisme. Tingginya angka kuman dapat mengkontaminasi peralatan tersebut
serta media yang akan diuji.
Faktor yang mempengaruhi perbedaan jumlah koloni dari kedua metode swab tersebut yaitu ada
kebersihan. Kebersihan mencakup sanitasi, debu, lingkungan, kontaminasi manusia, cahaya dan kelembapan
udara. Higiene sanitasi merupakan salah satu faktor penting dalam mencegah kontaminasi bakteri yang akan
merusak kualitas peralatan. Keberadaan koloni bakteri akan tinggi apabila banyak manusia di laboratorium
yang tidak memakai pakaian yang sesuai aturan. Manusia sebagai salah satu faktor penyebab tingginya angka
koloni bakteri. Suhu ruangan yang semakin tinggi, maka diikuti jumlah koloni mikroba akan cenderung
banyak, dan makin rendah suhu, maka diikuti jumlah koloni mikroba akan cenderung sedikit. Semakin tinggi
kelembaban udara, maka jumlah koloni mikroba yang terbentuk akan cenderung sedikit, dan makin rendah
kelembaban udara, maka diikuti jumlah koloni mikroba akan cenderung banyak. Intensitas cahaya yang
semakin tinggi, maka diikuti jumlah koloni mikroba akan cenderung sedikit, dan makin rendah intensitas
cahaya, maka diikuti jumlah koloni yang semakin tinggi dan banyak. Faktor utama tingginya angka koloni dari
swab peralatan yaitu adanya debu pada peralatan tersebut, sehingga mengkontaminasi peralatan tersebut.
Jumlah koloni mikroorganisme di udara tergantung pada aktivitas dalam ruangan serta banyaknya debu dan
kotoran lain. Ruangan yang kotor akan berisi udara yang banyak mengandung mikroorganisme dari pada
ruangan yang bersih. Menurut Sinaga et al. (2014), hasil pengujian yang berbeda bisa disebabkan oleh
beberapa faktor antara lain kepadatan ruangan, kelembaban, serta aktivitas manusia. Kepadatan ruangan
atau jumlah orang yang ada di dalam ruangan dapat berpengaruh pada jumlah bakteri udara, karena
penyebaran bakteri dalam ruangan yang padat penghuninya akan lebih cepat terjadi. Pengaruh kelembaban
sangat penting untuk pertumbuhan mikroorganisme.
Page 7 of 8
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi Metode Swab diperoleh kesimpulan
sebagai berikut:
1. Cara menghitung jumlah mikroorganisme menggunakan metode swab yaitu jumlah koloni yang
terbentuk dihitung dengan colony counter. Koloni dihitung dengan persamaan yaitu jumlah koloni
yang terbentuk dari semua pengenceran (C) dibagi 1 dikali jumlah petri pada pengenceran pertama
yang dihitung (n1) ditambah 0, 1 dikali jumlah petri pada pengenceran kedua yang dihitung (n2) dan
dikalikan dengan nilai pengenceran koloni terendah (d).
2. Jumlah mikroorganisme yang diperoleh dari pengujian mikroorganisme dengan metode swab
peralatan diperoleh jumlah mikroorganisme sebanyak 15 x 10⁵. Koloni bakteri yang dihasilkan dari
swab udara yaitu terbentuk zona jernih. Zona jernih yang terbentuk berada di tengah permukaan
cawan dan tidak menyebar. Bakteri yang terbentuk banyak membentuk zona jernih yang besar.
3. Mikroorganisme pada swab udara koloni banyak berada di tengah cawan, sementara koloni pada
swab peralatan koloni yang terbentuk menyebar ke seluruh cawan. Jumlah mikroorganisme pada
swab peralatan yaitu 15 x 10⁵. Perbedaan hasil tersebut dikarenakan oleh beberapa faktor. Faktor
yang mempengaruhi perbedaan hasil tersebut yaitu adanya debu dalam ruangan maupun pada alat,
kelembapan udara, cahaya, suhu serta sanitasi dan hygine dari ruangan maupun pada peralatan yang
diuji.
Saran :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi Metode Swab diperoleh saran sebagai
berikut:
1. Sebaiknya setelah melakukan pengusapan alat dengan cotton bud segera masukan cotton bud ke
tabung reaksi supaya tidak terkontaminasi bakteri lain.
2. Sebaiknya perhitungan jumlah koloni dengan colony counter di lakukan dengan benar agar tidak
terjadi kesalahan pada hasil yang diperoleh.
3. Sebaiknya alat dan bahan yang telah digunakan di kemasi dan dibersihkan supaya tidak
terkontaminasi oleh mikroorganisme.
Nilai : 90
Draft : ACC
Mustofa Kamil
Page 8 of 8
MODUL PRAKTIKUM

Semarang
2021
MODUL VI : Pendugaan Jumlah Bakteri Coliform Kelompok : 4
Tanggal : 20 April 2021
Tujuan
Tujuan dari praktikum penentuan jumlah bakteri coliform adalah sebagai berikut:
1. Mengetahui cara menduga coliform dengan MPN.
2. Mengetahui MPN coliform pada produk perikanan.
3. Membandingkan coliform pada berbagai produk perikanan dan faktor-faktor yang berpengaruh.

Makanan yang kurang terjamin kebersihannya akan sangat mudah terkontaminasi. Kontaminasi juga
dapat terjadi jika penyimpanan makanan terlalu lama. Penyimpanan yang lama akan menyebabkan
tumbuhnya bakteri patogen seperti coliform. Bakteri coliform merupakan mikroorganisme yang sering
digunakan sebagai indikator untuk menentukan suatu sumber air terkontaminasi patogen atau tidak. Bakteri
coliform dapat tumbuh dan berkembang biak pada suhu penyimpanan 7°C hingga 60°C (Nurjanah, 2006).
Metode Most Probable Number (MPN), merupakan metode perhitungan sel terutama untuk
perhitungan bakteri coliform berdasarkan jumlah perkiraan terdekat. Perkiraan terdekat yaitu perhitungan
dalam range tertentu. Dihitung sebagai nilai duga dekat secara statistik dengan merujuk pada tabel MPN
(Most Probable Number). Hasil yang diperoleh dari pengujian menunjukkan bahwa semua sampel
positif membentuk gelembung/gas, yang diduga telah terjadi kontaminasi oleh bakteri coliform
(Putrri dan Pramudya, 2018).
Penyebab keracunan makanan adalah adanya cemaran bakteri patogen. Terjadinya keracunan
ditandai dengan adanya gejala diare. Jika diare terjadi dalam jangka yang panjang akan dapat menyebabkan
kematian. Kasus keracunan terjadi karena penerapan sanitasi lingkungan pengolahan yang masih kurang
memadai. Cemaran yang dapat menyebabkan penyakit adalah cemaran mikrobiologi seperti Eschericia coli,
atau bakteri coliform (Rien dan Wiharyani, 2010).
Prosedur Kerja
k. Bahan
 Aquades
 Louryl Triptone Broth (LTB)
 Brilliant green lactose broth (BGLB)
l. Alat
 Tabung reaksi
 Blue tip
 Mikropipet
 Bunsen
 Tabung durham
 Inkubator
 Vortex
 Stomacher
 Autoclave
 Kertas label
 Karet gelang
 Plastik
Page 2 of 10
m. Metode dan hasil pengamatan
Pembuatan Media LTB
1. melarutkan 35,5 gram LTB dalam 1000 ml aquades dan dihomogen dengan hot plate
stirrer
2. menyiapkan 9 tabung reaksi dan diberi tabung durham
3. menuangkan larutan LTB sebanyak 9 ml ke masing tabung reaksi
4. sterilisasi dengan suhu 121°C selama 15 menit

9. Larutan pengencer NaCl dimasukkan dalam erlenmeyer sebanyak 90 dalam erlenmeyer ml dan 9 ml
dalam tabung reaksi kemudian disterilisasi menggunakan autoclave dengan suhu 121oC dan tekanan 1
atm selama 15 menit.
Persiapan Contoh
7. Sampel ditimbang sebanyak 10 g, dimasukkan ke dalam plastik dan ditambahkan 90 mL larutan buffer
Pengenceran
15.1 mL larutan hasil pengenceran 10-1 diambil dengan menggunakan pipet steril;
16.Larutan kemudian dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi 9 mL larutan pengencer NaCl untuk
vortex.
Pendugaan coliform
1. Melakukan inokulasi pada tabung tabung positif ke dalam tabung tabung Louryl
Triptone Broth (LTB) yang berisi tabung durham dengan menggunakan jarum ose.
2. Melakukan inkubasi selama selama 48 jam ±2 jam dengan suhu 35°C ±1°C.
3. Melakukan pengamatan untuk mempertegas adanya coliform. Tabung positif
ditandai dengan adanya warna keruh dan gas yang terdapat pada tabung durham .
4. Melakukan penentuan nilai angka paling memungkinkan (APM) berdasarkan tabung
tabung LTB yang positif dengan tabel APM 3 seri
Page 3 of 10
Tabel 10. Lembar penilaian organoleptik Ikan Lele (Clarias sp.) Segar Pengujian Coliform
Spesifikasi (Xi- (Xi-
Panelis Xi
) )2
Mata Insang Lendir Daging Bau
1 8 8 9 7 9 8,2 0,2 0,04
2 8 8 8 8 8 8 0 0
3 8 9 9 8 8 8,4 0,4 0,16
4 8 7 8 7 7 7,4 -0,6 0,36
5 9 7 9 8 8 8,2 0,2 0,04
= Σ=0,6
8
Perhitungan
1
S 2= ∑ ( Xi− X )2
Simpangan : n
1
S 2 = (0,6 )
5
2
S =0, 12
S= √0,12
S=0 ,35
S S
X− .1, 96<μ< X+ .1, 96
√n √n
0 , 35 0 , 35
8− . 1 , 96<μ<8+ . 1 , 96
√5 √5
8−0,3<μ<8+0,3
7,7<μ<8,3
Kesimpulan :
Dari hasil uji organoleptik terhadap Ikan Lele ( Clarias sp.) didapat selang kepercayaan sebesar
7,7<μ<8,3 pada tingkat kepercayaan 95%, maka produk tersebut layak untuk dikonsumsi/digunakan
sebagai bahan baku.
Page 4 of 10
Gambar 8. Hasil Pendugaan Jumlah Bakteri Coliform pada Sampel Ikan Lele (Clarias sp.)
Sebelum Perlakuan Sesudah Perlakuan
Deskripsi:
Tabung durham yang berisi sampel ikan lele (Clarias sp.) dengan media LTB sebelum perlakuan
belum terdapat gelembung gas karena belum ada perlakuan yaitu inkubasi. Tabung durham setelah
perlakuan dengan inkubasi sudah terdapat gelembung gas dalam tabung durham. Gelembung gas yang
terbentuk hanya pada pengenceran 10 -1 yaitu terdapat satu tabung yang positif, pada pengenceran 10-2 tidak
ada gelembung gas yang terbentuk begitupun dengan pengenceran 10 -3 juga tidak ada gelembung gas yang
terdapat dalam tabung durham. Adanya tabung yang positif dari pengenceran 10 -1 menandakan bahwa ada
bakteri yang memfermentasikan laktosa sehingga membentuk gas. Hasil yang negatif atau hanya sedikit
gelembung gas yang terbentuk disebabkan karena sampel yang digunakan berupa ikan segar. Pola APM yang
terbentuk dari ketiga pengenceran tersebut yaitu 1,0,0 maka diperoleh total APM yaitu 3,6 APM/g. Sehingga
dapat dikatakan bahwa nilai tersebut sudah melebihi batas yang ditetapkan oleh SNI mengenai coliform yang
tidak boleh melebihi angka 3.
Tabel 11. Hasil Pengujian Coliform pada Sampel Ikan Lele (Clarias sp.)
Sampel Ikan Segar Pengenceran Jumlah Tabung Positif
10-1 1
Ikan Lele (Clarias sp.) 10-2 0
10-3 0
Nilai APM sampel ikan lele (Clarias sp.) Segar yaitu 3,6 APM/g.
Page 5 of 10
Pembahasan:
Ikan lele (Clarias sp) merupakan salah satu jenis ikan air tawar yang sering dibudidayakan di
Indonesia. Ikan lele (Clarias sp.) memiliki kulit tubuh yang licin karena adanya lapisan lendir ( mucus) dan
tidak bersisik, agak pipih memanjang serta memiliki misai di sekitar mulutnya. Lele termasuk ikan yang paling
mudah diterima masyarakat karena berbagai kelebihannya. Kelebihan tersebut di antaranya adalah
pertumbuhannya cepat, memiliki kemampuan beradaptasi terhadap lingkungan yang tinggi, rasanya enak dan
kandungan gizinya cukup tinggi serta harganya murah. Komposisi gizi ikan lele meliputi kandungan protein
(17,7 %), lemak (4,8 %), mineral (1,2 %), dan air (76 %). Ikan lele kaya akan leusin dan lisin. Ikan lele
merupakan salah satu bahan pangan bergizi yang mudah untuk dihidangkan sebagai lauk. Kandungan gizi
ikan lele sebanding dengan daging ikan lainnya. Beberapa jenis ikan, termasuk ikan lele mengandung protein
lebih tinggi dan lebih baik dibandingkan dengan daging hewan lainnya. Kandungan protein dari ikan lele
mengandung berbagai macam asam amino esensial. Menurut Shadyeva et al. (2019), kandungan nilai gizi
daging ikan lele menunjukkan bahwa kandungan protein pada spesies ikan ini termasuk dalam kategori
produk protein yang mengandung berbagai macam asam amino esensial. Kandungan lemak dalam jaringan
otot dapat dikaitkan dengan jenis ikan berlemak. Massa otot spesies ikan ini mengandung asam lemak tak
jenuh tunggal dan tak jenuh ganda yang tinggi dan dicirikan oleh tingginya kadar asam linoleat, yang
merupakan asam lemak esensial. Kandungan asam linoleat pada otot ikan lele dumbo jauh lebih tinggi
dibandingkan pada otot salmon merah muda.
Metode yang digunakan dalam pengujian bakteri coliform yaitu melakukan inokulasi pada tabung
positif ke dalam tabung Louryl Triptone Broth (LTB) yang berisi tabung durham dengan menggunakan jarum
ose. Melakukan inkubasi selama 48 jam ±2 jam dengan suhu 35°C ±1°C. Melakukan pengamatan untuk
mempertegas adanya coliform. Tabung positif ditandai dengan adanya warna keruh dan gas yang terdapat
pada tabung durham. Melakukan penentuan nilai angka paling memungkinkan (APM) berdasarkan tabung
tabung LTB yang positif dengan tabel APM 3 seri. Coliform adalah golongan bakteri yang merupakan
campuran antara bakteri fekal dan bakteri non fekal. Prinsip penentuan angka bakteri coliform adalah bahwa
adanya pertumbuhan bakteri coliform yang ditandai dengan terbentuknya gas pada tabung durham, setelah
diinkubasikan pada media yang sesuai. Menurut Shen et al. (2019), total koliform dalam tabung yaitu
seberapa banyak bakteri dapat memfermentasi laktosa menghasilkan asam dan gas, mengubah media kultur
pepton laktosa menjadi kuning dan menghasilkan gelembung udara. Pengujian dilakukan dengan cara sampel
pengenceran yang diencerkan dengan benar. Inokulasikan 1ml, 0,1ml dan 0,01ml masing-masing
sampel ke dalam tabung dengan media kultur selama 24 jam pada suhu 37 C.
o
Hasil percobaan
tabung penghasil asam dan penghasil gas merupakan mikroba coliform. Coliform dapat diidentifikasi sebagai
total koliform jika koloni terus memproduksi asam dan gas selama proses.
Hasil coliform yang diperoleh pada sampel ikan lele diperoleh angka koliform 3,6 Apm/g. Angka
tersebut sudah melebihi ambang batas yang ditetapkan oleh SNI. SNI menetapkan total coliform pada bahan
pangan tidak melebihi angka 3. Semakin tinggi tingkat kontaminasi bakteri coliform, semakin tinggi pula risiko
kehadiran bakteri-bakteri patogen lain yang biasa hidup dalam tubuh makhluk hidup. Total Coliform yang
tinggi melebihi batas standar baku merupakan indikator adanya cemaran patogen infeksi yang menimbulkan
penyebaran penyakit melalui perantara. Total Coliform yang tinggi juga dapat mempengaruhi kehidupan
organisme biota pada suatu perairan. Semakin tingginya angka coliform pada ikan, mengakibatkan tingginya
Page 6 of 10
kontaminasi mikroorganisme terutama bakteri coliform. Semakin tinggi tingkat kontaminasi bakteri tersebut,
maka semakin tinggi risiko penyakit yang dapat ditimbulkan seperti diare, demam, kram perut, dan muntah-
muntah. Menurut Retnaningsih et al. (2018), coliform yang ditandai dengan terbentuknya gas dalam tabung
durham. Jumlah Coliform yang tinggi atau tidak memenuhi persyaratan SNI 03-7388-2009 yaitu maksimum
tidak lebih dari 3 APM/g dapat menyebabkan gangguan pada sistem pencernaan yang gejalanya berupa diare,
demam, kram perut, muntah-muntah.
Perbandingan hasil yang diperoleh dari sampel ikan bandeng yaitu 1100 APM/g dan ikan lele yaitu
3,6 APM/g. Hasil yang diperoleh dari kedua sampel tersebut dapat dikatakan bahwa sampel yang memperoleh
angka coliform paling tinggi yaitu pada sampel ikan bandeng mundur mutu. Jumlah angka yang didapatkan
pada tabel APM menunjukkan jumlah bakteri coliform dalam tiap g/ml sampel yang diujikan. Total coliform
atau kepadatan coliform merupakan indikator awal bakteri yang digunakan untuk menentukan aman atau
tidaknya ikan untuk dikonsumsi. Jumlah bakteri coliform pada sampel yang berbeda karena perbedaan mutu
kesegaran dari sampel tersebut. Perbedaan angka coliform tersebut dikarenakan sampel yang kurang
terjamin kebersihannya akan sangat mudah terkontaminasi. Kontaminasi juga dapat terjadi jika penyimpanan
makanan terlalu lama. Penyimpanan yang lama akan menyebabkan tumbuhnya bakteri patogen seperti
coliform. Tingginya nilai coliform juga terjadi banyaknya bakteri yang memfermentasikan laktosa ke dalam
sampel. Menurut Putri dan Kurnia (2018), proses fermentasi gula laktosa dalam media karena adanya bakteri
coliform fekal (Escherichia coli). Fermentasi gula dengan adanya energi yang dihasilkan oleh bakteri akan
menghasilkan asam piruvat dan asam asetat, kemudian muncul gelembung gas CO2 yang berada dalam
media.
Faktor yang mempengaruhi perbedaan hasil dari kedua sampel tersebut yaitu suhu, pH, sanitasi,
higiene, kondisi bahan baku, dan kondisi penyimpanan. Keberadaan coliform dalam pangan merupakan
indikasi dari kondisi prosessing atau sanitasi yang tidak memadai. Higiene dan sanitasi berpengaruh terhadap
ada tidaknya cemaran bakteri coliform dalam daging ikan. Sanitasi lingkungan berpengaruh terhadap adanya
cemaran bakteri coliform. Umur ikan juga mempengaruhi jumlah coliform, karena sistem tanggap kebal pada
berbagai tingkat umur juga berbeda. Makin dewasa imunitasnya makin terbentuk. Perkembangan umur
berakibat meningkatnya kemampuan tubuh terhadap tanggap kebal dan mengeliminasi kuman di dalam
tubuh. Faktor-faktor lingkungan yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri yaitu suhu, pH, dan oksigen. Suhu
memiliki pengaruh yang sangat penting terhadap fase adaptasi pertumbuhan bakteri. Ketika suhu mendekati
suhu minimum, tidak hanya mengurangi kecepatan pertumbuhan tetapi juga memperpanjang fase adaptasi .
Hal ini sangat penting dalam proses penyimpanan makanan pada suhu dingin. Makanan disimpan di bawah
suhu minimum, maka bakteri akan tumbuh lambat. Selain faktor lingkungan, faktor cemaran juga
mempengaruhi jumlah bakteri pada sampel. Semakin tingginya tingkat pencemaran air dan pakan pada ikan,
maka semakin tinggi pula risiko adanya bakteri. Menurut Sari et al. (2014), cemaran bakteri koliform pada
makanan dapat disebabkan beberapa hal seperti kandungan protein yang tinggi pada makanan dan kondisi
lingkungan yang sangat sesuai untuk pertumbuhan mikroba pembusuk. Adapun kondisi lingkungan tersebut
seperti suhu, pH, oksigen, waktu simpan, dan kondisi kebersihan sarana prasarana. Proses penyimpanan
makanan menjadi faktor penting yang akan mempengaruhi jumlah bakteri koliform yang terkandung di
dalamnya, karena keadaan lingkungan seperti suhu dan pH dapat mempengaruhi pertumbuhan bakteri
tersebut yang pada akhirnya akan mempengaruhi batas keamanan konsumsi makanan.
Page 7 of 10
Kesimpulan :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi Pendugaan Jumlah Bakteri Coliform
diperoleh kesimpulan sebagai berikut:
1. Cara menduga coliform dengan MPN yaitu melakukan inokulasi pada tabung positif ke dalam tabung
tabung Louryl Triptone Broth (LTB) yang berisi tabung durham dengan menggunakan jarum ose,
kemudian melakukan inkubasi selama 48 jam ±2 jam dengan suhu 35°C ±1°C. Lakukan pengamatan
untuk mempertegas adanya coliform. Tabung positif ditandai dengan adanya warna keruh dan gas
yang terdapat pada tabung durham. Melakukan penentuan nilai angka paling memungkinkan (APM)
berdasarkan tabung LTB yang positif dengan tabel APM 3 seri.
2. MPN coliform pada produk perikanan seperti ikan bandeng mundur mutu yaitu memiliki nilai sebesar
1100 APM/g. MPN coliform pada ikan lele segar nilai APM yang diperoleh yaitu sebesar 3,6 APM/g.
Berdasarkan kedua sampel tersebut keduanya dinyatakan sudah melebihi batas yang ditetapkan oleh
SNI, bahwa untuk coliform tidak melebihi angka 3.
3. Perbandingan coliform dari kedua sampel yaitu diperoleh nilai yang tinggi sebesar 1100 APM/g pada
ikan bandeng mundur mutu, sementara nilai pada ikan lele segar diperoleh yaitu 3,6 APM/g. Kedua nilai
tersebut sudah melebihi batas yang ditetapkan yaitu melebihi angka 3. Faktor yang mempengaruhi hal
tersebut karena dari produk tersebut seperti kemunduran mutu, pH, kebersihan, kondisi penanganan.
Faktor-faktor tersebut mampu menumbuhkan bakteri patogen seperti coliform yang akan menimbulkan
penyakit apabila dikonsumsi.
Saran :
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan mengenai materi Pendugaan Jumlah Bakteri Coliform
diperoleh saran sebagai berikut:
1. Sebaiknya lebih teliti dalam melihat tabung durham yang positif atau gelembung gas yang sudah
mencukupi untuk dikatakan positif, supaya tidak salah dalam menentukan nilai APM.
2. Sebaiknya dalam inokulasi dilakukan dengan teknis aseptis yang sesuai dan benar, supaya tidak
terkontaminasi oleh bakteri lain.
3. Sebaiknya alat dan bahan yang telah digunakan di kemasi dan dibersihkan kembali.
Nilai : 92
Draft : ACC
Mustofa Kamil
Page 8 of 10
Daftar Pustaka :
Ananda, B. R dan L. Khairiyati. 2017. Angka Kuman pada Beberapa Metode Pencucian Peralatan Makan.
Medical Laboratory Technology Journal. 3(1): 82-86.
Andriani. R. 2016. Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk Mengatasi Keselamatan Kerja dan
Keberhasilan Praktikum. Jurnal Mikrobiologi, 1(1): 1-7.
Apriani, R., R. Ferasyi dan R. Razali. 2017. Jumlah Cemaran Mikroba dan Nilai Organoleptik Ikan Tongkol
(Euthynnus affinis). Jurnal Ilmiah Mahasiswa Veteriner. Jimvet. 1(3): 598-603.
Atma, Y. 2016. Angka Lempeng Total (Alt), Angka Paling Mungkin (Apm) dan Total Kapang Khamir Sebagai
Metode Analisis Sederhana untuk Menentukan Standar Mikrobiologi Pangan Olahan Posdaya. Jurnal
Teknologi. 8(2): 77-82.
Azizah, M., L. S. Lingga dan Y. Rikmasari. 2020. Uji Aktivitas Antibakteri Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Seledri
(Apium graviolens L.) dan Madu Hutan terhadap Beberapa Bakteri
Penyebab Penyakit Kulit. Jurnal Penelitian Sains, 22 (1): 37-44.
Batubara, P. A. P., Desniar dan I. Setyaningsih. 2019. Pengaruh Starter Bakteri Asam Laktat Probiotik
terhadap Perubahan Kimiawi dan Mikrobiologis Rusip. Jurnal Teknologi dan Industri Pangan. 30(1):
28-35.
Damayanti, N. W. E., M. F. Abadi dan N. W. D. Bintari. 2020. Perbedaan Jumlah Bakteriuri pada Wanita Lanjut
Usia Berdasarkan Kultur Mikrobiologi Menggunakan Teknik Cawan Tuang dan Cawan Sebar. The
Jornal of Medical Laboratory . Meditory. 8(1): 1–4.
Getachew, H., A. Derbie dan D. Mekonnen. 2018. Surfaces and Air Bacteriology of Selected Wards at a
Referral Hospital, Northwest Ethiopia: A Cross-Sectional Study. International Journal of Microbiology .
3(1): 1-7.
Hairuddin, R dan J. Arianto. 2016. Seleksi Kalus Tanaman Tebu ( Saccharum officinarum L) terhadap Beberapa
Konsentrasi Nacl Secara In-Vitro. Jurnal Perbal, 4(2): 1-9.
Ismail, R., F. Aviat, V. Michel, I. L. Bayon, P. G. Perret, M. Kutnik dan M. Federighi. 2013. Methods for
Recovering Microorganisms from Solid Surfaces Used in the Food Industry: A Review of the
Literature. International Journal of Environmental Research and Public Health . 10(11): 6169-6183.
Kalsum, U. U., M. Palo dan Najamuddin. 2019. Analisis Aspek Teknis dan Hasil Tangkapan Jaring Insang Dasar
di Perairan Kabupaten Maros. Jurnal Ipteks Pemanfaatan Sumberdaya Perairan. 6(11): 70-89.
Lisdyayanti, N. D., S. Anwar dan A. Darmawati. 2019. Pengaruh Iradiasi Sinar Gamma Terhadap Induksi Kalus
dan Seleksi Tingkat Toleransi Padi (Oryza sativa L.) terhadap Cekaman Salinitas secara In-Vitro.
Berkala Bioteknologi, 2(2): 67-75.
Magala, M., Z. Kohajdova, J. Karovicova, M. Greifova dan J. Hojerova. 2015. Application of Lactic Acid Bacteria
for Production of Fermented Beverages Based on Rice Flour. Czech Journal of Food Sciences . 33(5):
458-463.
Mardalena. 2016. Fase Pertumbuhan Isolat Bakteri Asam Laktat (BAL) Tempoyak Asal Jambi yang Disimpan
pada Suhu Kamar. Jurnal Sains Peternakan Indonesia. 11(1): 58-66.
Nikhilesh, B., Z. A. Sachin, T. Vishal dan J. Dipesh. 2013. Steam Sterilization A Method Of Sterilization . Journal
of Biological & Scientific Opinion, 1(2): 138-141.
Purnomo, I. M. H., S. D. Lestari dan A. Baehaki. 2017. Analisis Kandungan Formalin, Pestisida, dan Jamur pada
Beberapa Jenis Ikan Asin. Jurnal Teknologi Hasil Perikanan. 6(1): 47-55.
Putri, A. M dan P. Kurnia. 2018. Identifikasi Keberadaan Bakteri Coliform dan Total Mikroba dalam Es Dung-
Dung Di Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Surakarta. Media Gizi Indonesia. 13(1): 41–48.
Page 9 of 10
achman, A., E. Taufik dan I. I. Arief. 2018. Karakteristik Yoghurt Probiotik Rosella Berbahan Baku Susu
Kambing dan Susu Sapi Selama Penyimpanan Suhu Ruang. Jurnal Ilmu Produksi dan Teknologi Hasil
Peternakan. 6(2): 73-80.
Retnaningsih, A., A. Primadiamanti dan D. Mentari. 2018. Perhitungan Jumlah Bakteri Coliform pada Es Krim
Puter yang Dijual Sekitar Wilayah Rajabasa Bandar Lampung dengan Metode Most Probable Number
(MPN). Jurnal Analis Farmasi. 3(2): 149-154.
Sakti, H., S. Lestari dan A. Supriadi. 2016. Perubahan Mutu Ikan Gabus ( Channa striata) Asap selama
Penyimpanan. Jurnal Teknologi Hasil Perikanan. 5(1): 11-18.
Sanders, E. R. 2012. Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods. Journal of Visualized Experiments.
63(1): 1-18.
Sari, R dan P. Apridamayanti. 2014. Cemaran Bakteri Eschericia Coli dalam Beberapa Makanan Laut yang
Beredar Di Pasar Tradisional Kota Pontianak. Kartika Jurnal Ilmiah Farmasi. 2(2): 14-19.
Shadyeva, L., E. Romanova, V. Romanov, E. Spirina, V. Lyubomirova, T. Shlenkina dan Y. Fatkudinova. 2019.
Forecast Of The Nutritional Value Of Catfish (Clarias Gariepinus) In The Spawning Period. Iop
Conference Series: Earth and Environmental Science. 40(3): 1-7.
Shehawy, S. M. E., A. A. E. F. G. Alla dan H. M. Mutwally. 2016. Quality Attributes of the Most Common
Consumed Fresh Fish in Saudi Arabia. International Journal of Nutrition and Food Science. 5(2): 85-
94.
Shen, Q., X. Wang, E. Chen dan Z. Ma. 2019. Comparative Study on Test Methods of Total Coliforms in
Domestic Drinking Water. Iop Conference Series: Earth and Environmental Science . 3(10): 1-4.
Sinaga, H., D.Y.P. Runtuboi dan L. I. Zebua. 2014. Bakteri Penyebab Infeksi Nosokomial pada Alat Kesehatan
dan Udara di Ruang Unit Gawat Darurat RSUD Abepura, Kota Jayapura. Jurnal Biologi Papua. 6(2):
75–79.
Sukmawati., I. Badaruddin dan E. S. Simohon. 2020. Analisis Angka Lempeng Total Mikroba pada Ikan
Kembung (Rastrelliger sp.) Segar di Tempat Pelelangan Ikan Kota Sorong Papua Barat. Samakia:
Jurnal Ilmu Perikanan. 1(1): 10-14.
Syafitri., Metusalach dan Fahrul. 2016. Studi Kualitas Ikan Segar Secara Organoleptik yang Dipasarkan di
Kabupaten Jeneponto. Jurnal Ipteks Pemanfaatan Sumberdaya Perikanan. (6): 544- 552.
Syarif, W., R. Holinesti, A. Faridah dan L. Fridayati. 2017. Analisis Kualitas Sala Udang Rebon. Jurnal Teknologi
Pertanian Andalas. 21(1): 45-51.
Yonata, Q. U., I. Thohari dan Marlik. 2020. Faktor yang Berhubungan dengan Angka Kuman Udara di Rumah
Sakit Soemitro Surabaya. Jurnal Penelitian Kesehatan Suara Forikes. 11(3): 264-266
Page 10 of 10

Elistia - Kelompok 4 - Laporan Resmi - ACC

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Elistia - Kelompok 4 - Laporan Resmi - ACC

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI HASIL PERIKANAN

Departemen Teknologi Hasil Perikanan

Bahana Safria Dito NIM. 26060117130055

Departemen Teknologi Hasil Perikanan

Laporan Praktikum Mikrobiologi Hasil Perikanan ini telah disetujui dan

Koordinator Asisten Asisten Pendamping

Aldila Wulan Yuniar Mustofa Kamil

Laras Rianingsih, S.Pi., M.Sc.

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah

Semarang, Mei 2021

LEMBAR PENGESAHAN............................................................................ iii

DAFTAR ISI .................................................................................................. v

DAFTAR TABEL .......................................................................................... vii

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... viii

MODUL 1 : STERILISASI ALAT, MEDIA DAN TEKNIS

MODUL II : ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT).................................... 2

MODUL III:I PENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT 2

MODUL II. ANGKA LEMPENG TOTAL (ALT)

MODUL III. IPENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT

MODUL IV. PENGAMATAN JAMUR

MODUL V. PENENTUAN JUMLAH BAKTERI PADA RUANGAN

MODUL VI. PENDUGAAN JUMLAH BAKTERI COLIFORM

MODUL III. IPENENTUAN JUMLAH BAKTERI ASAM LAKTAT

MODUL IV. PENGAMATAN JAMUR

MODUL V. PENENTUAN JUMLAH BAKTERI PADA RUANGAN

MODUL VI. PENDUGAAN JUMLAH BAKTERI COLIFORM

Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Tanggal : 9 Maret 2021

Nama : Elistia NIM: 26060119120016 Ttd:

Dasar Teori Praktikum

Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Tanggal : 16 Maret 2021

Nama : Elistia NIM:26060119120016 Ttd:

Tujuan dari praktikum angka lempeng total adalah sebagai berikut:

Dasar Teori Praktikum

Pembuatan larutan pengencer NaCl

C = jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran

5,9−0 ,32<μ<5,9+0 ,32

Sampel Pengenceran 10-3 Sampel Pengenceran 10-4

Pengenceran 10-3 Pengenceran 10-4

Ikan Bandeng (Chanos Pengenceran 10-3

Perhitungan Jumlah koloni adalah sebagai berikut:

Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Nama : Elistia NIM: 26060119120016 Ttd:

Dasar Teori Praktikum

Prosedur Kerja Pour Plate

e. Metode dan hasil pengamatan

Pembuatan Larutan Pengencer NaCl

C = jumlah koloni yang terbentuk dari semua pengenceran

Pengamatan Morfologi Bakteri

Tabel 5. Lembar penilaian organoleptik Udang Rebon (Acetes) Kering

Pengenceran 10-5 Pengenceran 10-6

Pengenceran 10-5 Pengenceran 10-6

Udang Rebon (Acetes) Kering Pengenceran 10-5 53

Perhitungan Jumlah koloni bakteri adalah sebagai berikut:

Gambar 3. Lactobacillus plantarum Gambar 4. Lactobacillus acidophilus

Gambar 3. Lactobacillus plantarum Gambar 4. Lactobacillus acidophilus

Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Tanggal : 30 Maret 2021

Nama : Elistia NIM: 26060119120016 Ttd:

Dasar Teori Praktikum

Pembuatan Larutan Pengencer NaCl