Ekstrak Etanol Bunga Kertas (Bougainvillea) Pink Sebagai

Anti Oksidan Dengan Menggunakan Metode DPPH

Devi Haveni1, Mastura2, Ratih Permana Sari3

1,2,3
Program Studi Pendidikan Kimia, FKIP Universitas Samudra
Jln. Kampus Meurandeh, Langsa 24416
E-mail: devihaveny@gmail.com

Abstrak
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui kandungan senyawa metabolit sekunder di dalam ekstrak
etanol bunga kertas dan mengetahui aktivitas ekstrak etanol bunga kertas sebagai antioksidan dengan
menggunakan metode DPPH. Ekstrak etanol diperoleh melalui metode maserasi. Pengujian
antioksidan dilakukan dengan metode DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil). Ekstrak etanol bunga kertas
memiliki kandungan metabolit sekunder golongan alkaloid, flavonoid, saponin, triterpenoid dan fenol.
Hasil uji aktivitas antioksidan yang dilakukan menunjukkan nilai persen inhibisi secara berturut-turut
pada konsentrasi 50 ppm sebesar 23,1771%, pada konsentrasi 75 ppm sebesar 45,7855%, pada
konsentrasi 100 ppm sebesar 56,6449% dan 125 ppm sebesar 78,3121%. Nilai IC 50 yang diperoleh
yaitu 55,71 ppm menunjukkan aktivitas antioksidan yang kuat. Berdasarkan penelitian ini, ekstrak
etanol bunga kertas (Bougainvillea) memiliki potensi sebagai antioksidan.
Kata kunci : Bunga kertas (Bougainvillea), antioksidan, DPPH

Abstract

This research was conducted to determine the content of secondary metabolites in ethanol extracts of
paper flowers and to know the activity of ethanol extracts of paper flowers as antioxidants using the
DPPH method. Ethanol extract was obtained through maceration method. Antioxidant testing was
carried out by the DPPH method (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). Ethanol extract of paper flowers
contains secondary metabolites of alkaloids, flavonoids, saponins, triterpenoids and phenols. The
results of antioxidant activity tests carried out showed the value of percent inhibition in a row at a
concentration of 50 ppm of 23.1771%, at a concentration of 75 ppm at 45.7855%, at a concentration
of 100 ppm at 56.66449% and 125 ppm at 78.3121 %. The IC50 value obtained was 55.71 ppm
indicating strong antioxidant activity. Based on this study, ethanol extract of paper flowers
(Bougainvillea) has potential as an antioxidant.
Keywords: Paper flower (Bougainvillea), antioxidants, DPPH

PENDAHULUAN kerusakan tersebut berkontribusi terhadap

beberapa penyakit dan menyebabkan
Radikal bebas adalah suatu atom kondisi yang biasa disebut sebagai
atau molekul yang mempunyai elektron penuaan dini (Liochev, 2013).
tidak berpasangan. Elektron tidak
Radikal bebas mencari reaksi-reaksi
berpasangan tersebut menyebabkan radikal
agar dapat memperoleh kembali elektron
bebas sangat reaktif menangkap atau
pasangannya. Selain itu, radikal bebas
mengambil elektron dari senyawa lain
dapat mengalami tubrukan kaya energi
seperti protein, lipid, karbohidrat, dan
dengan molekul lain, yang merusak ikatan
DNA untuk menetralkan diri. Radikal
didalam molekul, sehingga radikal bebas
bebas dapat masuk ke dalam tubuh dan
dapat merusak membran sel atau DNA sel
menyerang sel-sel yang sehat sehingga
yang rentan (Corwin, 2009). Radikal bebas
menyebabkan sel-sel tersebut kehilangan
dapat berasal dari dalam tubuh sebagai
fungsi dan strukturnya. Akumulasi dari
CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia 1
Vol. 2, No. 1, Juni 2019
bagian dari hasil metabolisme. Sedangkan
radikal bebas yang bersumber dari luar
tubuh dapat disebabkan oleh faktor
lingkungan, termasuk kebiasaan merokok,
penggunaan pestisida pada makanan,
polusi dan radiasi (Mbaoji, dkk., 2016)
Antioksidan merupakan bahan atau
senyawa yang dapat menghambat atau
mencegah terjadinya oksidasi pada
susbtrat yang mudah teroksidasi dan telah
banyak dimanfaatkan oleh masyarakat.
Tubuh manusia tidak mempunyai
cadangan antioksidan dalam jumlah
berlebih, sehingga jika terjadi paparan
radikal berlebih, maka tubuh
membutuhkan antioksidan yang berasal
dari luar tubuh. Adanya kekhawatiran akan
kemungkinan efek samping yang belum
diketahui dari antioksidan sintetik
menyebabkan antioksidan alami menjadi
alternatif yang sangat potensial untuk
dikembang. Antioksidan alami mampu
melindungi tubuh terhadap kerusakan
tubuh yang disebabkan senyawa oksigen
reaktif, mampu menghambat peroksida
lipid pada makanan (Winarsi, 2007).
Senyawa antioksidan banyak
ditemukan pada tumbuhan, baik pada
bunga, daun maupun buah. Senyawa
didalam tanaman banyak mengandung
berbagai molekul penghambat radikal
bebas, seperti senyawa fenolik (asam
fenolik, falvonoid, kuinon, kumarin,
lignan, stilbenes dan tanin), senyawa
nitrogen (alkaloid, amina dan betalain),
vitamin, terpenoid (termasuk karotenoid),
dan beberapa metabolit endogen lainnya
yang kaya akan aktivitas antioksidan
(Ivanisova, dkk., 2013). Salah satu
tanaman herbal yang dapat dimanfaatkan
sebagai antioksidan adalah bunga kertas.
Bunga kertas dijadikan sebagai
antioksidan karena mengandung senyawa
fenolik atau polifenolik yang dapat berupa
golongan flavonoid. Flavonoid memiliki
gugus hidroksil yang terikat pada karbon
cincin aromatik sehingga dapat
menangkap radikal bebas yang dihasilkan
dari reaksi peroksidasi lemak. Senyawa
CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia
Vol. 2, No. 1, Juni 2019
flavonoid akan menyumbangkan satu atom
hidrogen untuk menstabilkan radikal
peroksi lemak (Hartanto, 2012). Menurut
penelitian Suparmi, dkk. (2012)
menunjukkan bahwa aktivitas antioksidan
ekstrak etanol kulit buah rambutan dapat
menghambat terjadinya reaksi radikal
bebas di dalam tubuh. Kulit buah rambutan
mengandung golongan senyawa flavonoid.
Beberapa golongan senyawa flavonoid
tersebut diketahui mempunyai efek anti
radikal bebas atau antioksidan.
Berdasarkan penelitian yang pernah
dilakukan oleh Rao, dkk. (2015)
menyatakan bahwa ekstrak metanol bunga
kertas mengandung varietas senyawa
fitokimia. Senyawa tersebut dapat secara
efektif melindungi tubuh dari kerusakan
oksidatif oleh radikal bebas. Dengan
demikian aktivitas ekstrak metanol bunga
kertas dapat digunakan sebagai sumber
senyawa antioksidan alami.
Pengujian kandungan metabolit
sekunder dilakukan untuk menentukan
kualitas ekstrak. Setelah itu pengujian
aktivitas ekstrak etanol bunga kertas
sebagai antioksidan dengan menggunakan
metode DPPH.Tujuan penelitian ini yaitu
mengetahui kandungan senyawa metabolit
sekunder didalam ekstrak etanol bunga
kertas dan mengetahui aktivitas ekstrak
etanol bunga kertas sebagai antioksidan
dengan menggunakan metode DPPH.
METODE
Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan pada
penelitian ini adalah bunga kertas yang
berwarna pink (merah jambu) sebanyak 2
kg. Sampel ini diambil dengan cara
memetik bunganya dari pohon.
Cara membuat ekstrak etanol bunga
kertas
Bunga kertas diangin-anginkan,
dirajang halus kemudian dimaserasi
dengan etanol selama 48 jam sebanyak 3
kali pengulangan, selanjutnya disaring dan
diangin-anginkan kembali selama 24 jam,
sehingga dihasilkan ekstrak etanol kental.
2
Skrinning fitokimia
Skrinning fitokimia dilakukan untuk
mengetahui kandungan metabolit sekunder
pada ekstrak etanol bunga kertas.
Metabolit sekunder yang diuji antara lain
alkaloid, flavonoid, saponin, triterpenoid,
dan fenol.
a. Uji Alkaloid
Sebanyak 0,5 gram ekstrak etanol
dilarutkan dalam larutan HCl encer
kemudian disaring, lalu ditambahkan
reagenwagner. Terjadinya endapan
berwarna kuning menandakan adanya
senyawa alkaloid.
b. Uji Flavonoid
Sebanyak 0,5 gram ekstrak etanol
dilarutkan kembali dengan 2 mL etanol
dan ditambahkan 3 tetes larutan NaOH.
Terjadinya perubahan intensitas warna
kuning menjadi tidak berwarna pada
penambahan H2SO4 mengidentifikasikan
adanya senyawa flavonoid.
c. Uji Saponin
Sebanyak 0,5 gram ekstrak etanol
dilarutkan dalam 20 mL aquades,
kemudian larutan dikocok dalam labu ukur
selama 10 menit. Terbentuknya busa
setinggi 1 cm mengidentifikasikan adanya
senyawa saponin.
d. Uji Triterpenoid
Sebanyak 0,5 gram ekstrak etanol
dilarutkan dalam kloroform dan disaring,
kemudian filtrat ditambahkan beberapa
tetes asam sulfat dan dikocok.
Terbentuknya warna kuning emas
menandakan adanya senyawa triterpen.
e. Uji Fenol
Sebanyak 0,5 gram ekstrak etanol
dilarutkan kembali dengan 2 mL etanol
dan ditambahkan 3 tetes larutan FeCl3.
Terbentuknya warna hitam kebiruan
menandakan adanya senyawa fenol.
CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia
Vol. 2, No. 1, Juni 2019
Uji Antioksidan pada bunga kertas
menggunakan metode 1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil (DPPH)
a. Penentuan konsentrasi pada sampel
Berat sampel (kristal yang sudah
dimurnikan) ditimbang 2,5 mg
dimasukkan kedalam labu ukur 50 mL
kemudian ditambah dengan metanol p.a
sampai tanda batas sebagai diperoleh
konsentrasi sampel 500 ppm (Larutan
induk), Dari larutan induk (larutan uji 500
ppm) dilakukan pengenceran untuk
mendapatkan konsentrasi 50 ppm, 75 ppm,
100 ppm dan 125 ppm. Setelah konsentrasi
dalam masing-masing ppm di peroleh
selanjutnya masing-masing tabung
tambahkan 0,6 mL DPPH (0,1 mM) lalu
tambah metanol sampai tanda/volume 3
mL.Selanjutnya inkubasi selama 30 menit
dalam ingkubator pada suhu 37 oC baru
dilakukan pengujian.Semua sampel yaitu
sampel ekstrak etanol bunga kertas yang
telah diinkubasi diuji nilai absorbansinya
menggunakan spektrofotometer UV-Vis
pada panjang gelombang 517 nm.
b. Pembuatan Larutan 1,1-difenil-2-
pikrilhidrazil (DPPH) 0,1 mM
Serbuk 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil
(DPPH) (BM 394,32) sebanyak 1,98 mg
dilarutkan dengan metanol p.a dan
dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL.
Volume dicukupkan dengan metanol p.a
hingga tanda batas, kemudian ditempatkan
dalam botol gelap.
c. Pembuatan Larutan Blangko
Larutan DPPH 0,1 mM sebanyak 2
mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi
dan ditambahkan metanol p.a sebanyak 2
mL. Tutup dengan aluminium foil.
Campuran dihomogenkan dengan vortex
dan diinkubasi dalam ruangan gelap
selama 30 menit. Selanjutnya, serapan
larutan blangko diukur pada panjang
gelombang maksimum yaitu 517 nm
menggunakan spektrofotometer UV-Vis.
3
d. Penentuan Panjang Gelombang Tabel 1. Hasil Penapisan Fitokimia
Maksimum DPPH Ekstrak Etanol Bunga Kertas 70%
Kuvet dibersihkan terlebih dahulu Pengujian senyawa Hasil
bagian luarnya dengan menggunakan tissu. Alkaloid +
Setelah itu dimasukkan metanol p.a pada Flavonoid +
kedua kuvet ke arah bawah. Ukur Saponin +
Triterpenoid +
absorbansinya. Keluarkan metanol p.a Fenol +
pada kuvet yang kedua, lalu buang dan
bilas dengan blangko DPPH, lalu diisi
dengan blangko DPPH. Ukur Selanjutnya grafik konsentrasi dan
absorbansinya (ukur blangko sebelum absorbansi pada ekstrak etanol bunga
mengukur sampel).Setelah blangko lalu kertas (bougainvillea).
diukur larutan uji, kuvet dicuci dengan 0,8
metanol, lalu dibilas dengan sedikit sampel 0,7
uji buang, baru isi sampel uji sampai 0,6

Absorbansi
penuh, dibersihkan dengan tissue sampai 0,5
kering lalu diukur dan dibaca 0,4
absorbansinya.Penentuan Nilai lC50 0,3
(Inhibitory Concentration) 0,2
Parameter yang biasa digunakan 0,1
untuk menginterpretasikan hasil dari uji 0
aktivitas antioksidan dengan metode 0 50 100 150
DPPH adalah dengan nilai efficient Konsentrasi (ppm)
concentration (EC50) atau sering disebut Gambar 1. Kurva hubungan konsentrasi
nilai lC50, yaitu konsentrasi yang dan absorbansi
menyebabkan hilangnya 50% aktivitas
DPPH, untuk menghitung nilai lC50 Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan
diperlukan data persen inhibisi dapat Ekstrak Etanol Bunga Kertas
dihitung dengan menggunakan rumus
Konsentrasi Absorbansi % IC50
sebagai berikut: (ppm) Rata-rata Inhibisi
%
% inhibisi = x 50 0,7428 23,1771 55,71
100 % 75 0,5242 45,7855 ppm
100 0,4192 56,6449
Selanjutnya hasil perhitungan 125 0,2097 78,3121
dimasukkan ke dalam persamaan regresi
dengan konsentrasi ekstrak (ppm) sebagai 100
absis (sumbu X) dan nilai % inhibisi 80 y = 0,7051x - 10,713
(antioksidan) sebagai koordinatnya (sumbu R² = 0,9837
% Inhibisi

60
Y). Nilai IC50 dari perhitungan pada saat
% inhibisi sebesar 50% y = ax + b. 40
20
HASIL DAN PEMBAHASAN
0
Berikut ini tabel hasil uji metabolit 0 50 100 150
sekunder menggunakan metode penapisan Konsentrasi (ppm)
fitokimia.
Gambar 2. Kurva hubungan konsentrasi
dan % Inhibisi ekstrak

CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia 4

Vol. 2, No. 1, Juni 2019
 Koefisien y pada persamaan linier
bernilai 50 merupakan koefisien IC50,
sedangkan koefisien x pada persamaan
linier ini merupakan konsentrasi ekstrak
yang akan dicari nilainnya, dimana x yang
diperoleh merupakan besarnya konsentrasi
yang diperlukan untuk dapat meredam
50% aktivitas radikal DPPH. Nilai R2
menggambarkan linieritas konsentrasi
terhadap % inhibisi. Nilai R2 yang
mendekati +1 (bernilai positif)
menandakan bahwa dengan semakin
meningkatnya konsentrasi ekstrak,
semakin meningkat pula aktivitas
antioksidannya. Hal ini berkaitan dengan
jumlah senyawa metabolit sekunder yang
terlarut di dalam ekstrak dan memiliki
aktivitas antioksidan.
Berdasarkan gambar 2 diperoleh
nilai y = 0,7051x-10,713, maka dapat
ditentukan nilai IC50 dengan mengganti
nilai y dengan angka 50. Berdasarkan nilai
IC50 yang diperoleh, ekstrak etanol bunga
kertas memiliki aktivitas antioksidan yang
kuat yaitu 55,71 ppm. Uji kandungan
Gambar 3. Reaksi Antioksidan dan DPPH
(Sumber: Nurfadillah.,dkk 2016)
Perubahan warna ungu menjadi
kuning pada uji aktivitas antioksidan
menandakan terbentuknya radikal
antioksidan. Semakin banyak atom H dari
antioksidan yang didonorkan pada DPPH
maka semakin banyak radikal antioksidan
yang terbentuk (Suryanto, 2012). Pada
penelitian ini nilai persen inhibisi yang
diperoleh pada konsentrasi 50 ppm sebesar
23,1771%, pada konsentrasi 75 ppm
sebesar 45,7855%, pada konsentrasi 100
CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia
Vol. 2, No. 1, Juni 2019
senyawa metabolit sekunder menggunakan
metode penapisan fitokimia dilakukan
untuk mengindentifikasi adanya
kandungan metabolit sekunder yang
terdapat didalam bunga kertas
menggunakan etanol 70%, kandungan
metabolit sekunder yang berpotensi
sebagai antioksidan. Dalam penelitian ini
dilakukan pengujian metabolit sekunder
untuk golongan senyawa yaitu alkaloid,
flavonoid, saponin, triterpenoid dan fenol.
Hasil metabolit sekunder yang dilakukan
dapat dilihat pada tabel 1.
Metode DPPH menggunakan
prinsip spektrum UV-Vis. Senyawa yang
dimiliki oleh antioksidan akan
mendonorkan atom hidrogennya untuk
berikatan dengan DPPH sehingga
membentuk DPPH tereduksi yang dapat
ditandai dengan terjadinya perubahan
warna yang semula berwarna ungu
menjadi kuning pucat disertai terjadinya
penuruna nilai absorbansi (Nurfadillah,
dkk., 2016).
ppm sebesar 56,6449% dan pada
konsentrasi 125 ppm sebesar 78,3121 %.
Semakin tinggi konsentrasi sampel, maka
semakin tinggi persentase inhibisinya, hal
ini disebabkan pada sampel yang semakin
banyak, maka semakin tinggi kandungan
antioksidannya sehingga berdampak juga
pada tingkat penghambatan radikal bebas
yang dilakukan oleh zat antioksidan
tersebut (Molyneux, 2004).
5
 Penghambatan 50% diperoleh dari
kurva antara persen inhibisi terhadap
konsentrasi sampel dari persamaan regresi
linear. Pengujian antioksidan yang
dilakukan terhadap ekstrak etanol bunga
kertas diperoleh nilai IC50 55,71 ppm.
Estrak etanol bunga kertas memiliki
aktivitas antioksidan yang kuat. Menurut
Mardawati, (2008) secara spesifik suatu
senyawa dikatakan sebagai antioksidan
kuat jika nilai IC50 bernilai 51-100, dan
lemah jika IC50 bernilai 151-200.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang
telah dilakukan maka dapat diambil
kesimpulan Ekstrak etanol bunga kertas
memiliki kandungan senyawa metabolit
sekunder golongan alkaloid, flavonoid,
saponin, triterpenoid dan fenol dan
Pengujian antioksidan dengan dengan
metode DPPH menunjukkan bahwa
ekstrak etanol bunga kertas memiliki
aktivitas antioksidan yang kuat dengan
nilai IC50 sebesar 55,71 ppm
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terimakasih
kepada dosen pembimbing yang telah
banyak membantu skripsi ini, kepada
penguji dan seluruh dosen yang telah
memberi saran dan masukan dalam
penulisan skripsi ini, serta kepada kepala
UPT Laboratorium Dasar Universitas
Samudra dan kepala Laboratorium
Penelitian Fakultas Farmasi Universitas
Sumatra Utara, dan semua pihak yang
telah banyak membantu dalam penelitian
ini.
DAFTAR PUSTAKA
Corwin, E. J. 2009 Buku Saku
Patofisiologi. Edisi Ketiga.
Penerjemah: Yudha, E. K.,
Wahyuningsih, E., Yulianti, D., dan
Karyuni. P. E. Jakarta: Penerbit
Buku Kedokteran EGC.
CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia
Vol. 2, No. 1, Juni 2019
Hartanto, H. 2012. “Identifikasi Potensi
Antioksidan Minuman Cokelat dari
Kakao Lindak dengan Berbagai Cara
Preparasi: Metode Radikal Bebas
DPPH”. Skripsi. Surabaya:
Universitas Katolik Widya Mandala.
Ivasinova, dkk. 2013. Antioxidant Activity
of Selected Plant Products. Jounal of
Microbiology, Biotechnology, and
Food Sciences.
Liochev, S. I. 2013. “Reactive Oxygen
Spesies and the Free Radical Theory
of Aging. Free Radical Biology and
Medicine. 60. 1-4.
Mardawati, E. 2008. Kajian Aktivitas
Ektrak Kulit Manggis (Gracinia
Mangostana L) dalam Rangka
Pemanfaatan Limbah Kulit Manggis
di Kecamatan Puspahiang
Kabupaten Tasikmalaya. Laporan
Akhir Penelitian. Bandung: Jurusan
Teknologi Pangan Fakultas
Teknologi Industri Pertanian
Universitas Padjajaran.
Mbaoji, F. N., Ezike, A. C., Nworu, C. S.,
Nwabunike, I. A., Okoli, I. C., dan
Akah, P. A. “Antioxidant And
Hepatoprotective Potentials of
Stemonocoleus Micranthus Harms
(Fabacceae) Stem Bark Extract,
2016: 8(7).
Molyneux, P. 2004. The Use of the Stable
Free Radical Diphenylpicryhydrazyl
(DPPH) for Estimating Antioxidant
Activity. J. Sci. Technol. 26: 211-
219.
Nurfadillah., Chadijah, S., dan Rustiah, W.
2016. Analisis Antioksidan Ekstrak
Etil Asetat dari Kulit Buah
Rambutan (Nephelium Iappaceum)
dengan Menggunakan Metode
DPPH (1,1-difenil-2pikrilhidrazil).
Al-Kimia. 4(1).
Suparmi., Anshory, H., dan Dirmawati, N.
2012. “Uji Aktivtas Antioksidan
6
 Ekstrak Etanol Kulit Buah Rambutan
(Nephelium Iappaceum, L.) dengan
Metode Linoleat-Tiosianat”. Jurnal
Ilmiah Farmasi. 9(1).
Suryanto, E. 2012. Fitokimia Antioksidan.
Surabaya: Putra Media Nusantara.
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan
Radikal Bebas. Yogyakarta:
Kanisius.

CHEMICA: Jurnal Pendidikan Kimia dan Ilmu Kimia 7

Vol. 2, No. 1, Juni 2019