GFP protein fluoresen secara luas digunakan sebagai penanda biologis karena sangat ditoleransi dengan

baik oleh sebagian besar sel dan tidak menganggu fungsi seluler normal akan memeriksa teknologi
peralatan dan bahan yang digunakan bagaimana mempersiapkan proses dan bagaimana proses
pemurnian GFP dikelola langkah demi langkah

Ada dua operasi utama yang digunakan dalam komatrogafi pemurnian dan filtrasi sebelum kita dapat
menghargai dengan tepat apa langkah-langkah proses ini, untuk mencapai hal tersebut kita perlu
melihat lebih dekat pada apa fluoresens hijau kita protein telah melalui sejauh ini dalam pemulihan sel-
sel yang dipanen kami dari fermentasi dihomogenisasi, protein target kami ada didalam setiap sel, untuk
mencapai hal itu sel-sel harus dipecah homogenasi membebaskan banjir komponen seluler termasuk
puing-puing membran. DNA sitoplasma dan protein termasuk protein target GFP kami dan semuanya
dicampur kedalam larutan buffering yang digunakan untuk menangguhkan sel sebagian besar dari ini
padatan kemudian dihilangkan melalui sentrifugasi atau dengan centrifuge tetapi cairan yang tersisa
lisat yang diklarifikasi masih kaya akan biologis produk termasuk protein bahan kimia terlarut dan
kotoran lainnya dengan luar biasa melalui pemurnian kita dapat menargetkan protein tunggal dalam
biologis ini .

Menit 03:12

Dalam proses pemurnian GFP kami, kami akan menggunakan beberapa jenis kolom, kromatografi kolom
adalah silinder yang diisi dengan gelas keramik atau polimer manik-manik yang direkayasa untuk
berinteraksi dengan atau mengikat molekul berdasarkan satu atau lebih banyak sifat fisik kromatografi
tergantung pada perbedaan. Setiap molekul memiliki karakteristik fisik yang unik seperti ukuran biaya
atau tingkat interaksi dengan kromatografi air menggunakan ini. Perbedaan untuk memisahkan protein
targetdari protein lain dan bahan kimia terkadang ukuran digunakan untuk membedakan beberapa
manik-manik kecil lubang didalamnya dan untuk sementara waktu dapat menjebak atau setidaknya
memperlambat molekul yang lebih kecil karena mereka melakukan perjalanan melalu kolom manik-
manik resin sementara molekul terlalu besar untuk masukkan pori-pori bergerak disekitar manik-manik
dan keluar dari kolom terlebih dahulu, jenis ini kromatografi disebut ukuran pengecualian dalam kasus
menarik berlawanan muatan jadi manik kromatografi bermuatan negatif akan menarik dan mengikat
dua komponen bermuatan positif dalam aliran proses juga positif manik bermuatan akan mengikat
komponen bermuatan negatif dalam aliran proses kromtografi basa bermuatan ini disebut kromatografi
penukar ion dan lalu ada molekul air yang siap berinteraksi dan larut air disebut pencinta air hidrofilik
sedangkan yang tidak disebut protein pembenci air hidrofobik mengandung daerah yang hidrofobik dan
daerah yang hidrofilik karena air cenderung membentuk perisai disekitar bercak hidrofobik