Gianti - Fkik
Gianti - Fkik
SKRIPSI
GIANTI
NIM: 109102000058
SKRIPSI
GIANTI
NIM: 109102000058
ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS
Nama : Gianti
NIM : 109102000058
Tanda Tangan :
iii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING
Nama : Gianti
NIM : 109102000058
Program Studi : Farmasi
Judul Skripsi : Analisis kandungan merkuri dan hidrokuinon dalam
kosmetik krim racikan dokter
Disetujui Oleh:
Pembimbing I Pembimbing II
Mengetahui,
Kepala Program Studi Farmasi
FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
iv
HALAMAN PENGESAHAN
Nama : Gianti
NIM : 109102000058
DEWAN PENGUJI
v
Penguji II : Lina Elfita, M.Si., Apt
(
)
Ditetapkan di : Jakarta
Tanggal : 24 Oktober 2013
vi
ABSTRAK
Nama : Gianti
NIM : 109102000058
NIM : 109102000058
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT yang senantiasa mencurahkan segala
rahmat-Nya kepada kita semua, khususnya saya sebagai penulis sehingga dapat
menyelesaikan skripsi yang berjudul “Analisis Kandungan Merkuri Dan
Hidrokuinon Dalam Kosmetik Krim Racikan Dokter” ini. Shalawat serta salam
senantiasa terlimpahkan kepada junjungan kita nabi muhammad SAW, yang telah
membawa kita dari kegelapan menuju dunia yang terang benderang yang penuh
dengan ilmu pengetahuan. Semoga kita mendapat syafa’atnya di hari kiamat. amin
Skripsi ini disusun berdasarkan hasil penelitian di laboratorium penelitian II
dan laboratorium kimia obat UIN syarif hidayatullah jakarta. Skripsi ini juga
disusun berdasarkan dari berbagai sumber. Dalam menyelesaikan masa
perkuliahan sampai penulisan ini tentu banyak berbagai halangan serta kesulitan
yang menyertai, sehingga penulis tidak terlepas dari do’a, dorongan, bantuan, dan
bimbingan dari banyak pihak. Oleh karena itu, izinkan menulis untuk
menghaturkan ucapan terimakasih yang mendalam kepada :
1. Bapak Drs. Umar Mansur, M.Sc., Apt sebagai Pembimbing I sekaligus
sebagai ketua Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran Dan Ilmu
Kesehatan yang telah bersedia memberikan ilmu, waktu, tenaga, nasehat,
serta arahan selama penelitian dan penulisan skripsi ini.
2. Ibu Sabrina, M.Farm, Apt sebagai Pembimbing II sekaligus sebagai
pembimbing akademik yang telah bersedia memberikan ilmu, waktu,
tenaga, nasehat, serta arahan selama masa perkuliahan, penelitian dan
penulisan skripsi ini.
3. Ibu Zilhadia, M.Si., Apt sebagai penguji I dan ibu Lina Elfita M.Si., Apt
sebagai penguji II yang telah banyak sekali mengoreksi kesalahan saya dan
membantu saya dalam menyelesaikan skripsi ini.
4. Bapak Prof. Dr. (hc). dr. MK. Tadjudin, Sp.And selaku Dekan Fakultas
Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif
Hidayatullah Jakarta.
5. Bapak dan Ibu staf pengajar, serta karyawan yang telah memberikan
bimbingan dan bantuan selama menempuh pendidikan di Program Studi
Penulis
Nama : Gianti
NIM : 109102000058
Program studi : Farmasi
Dibuat di : Ciputat
Pada Tanggal : 24 Oktober 2013
Yang menyatakan,
(Gianti)
Halaman
HALAMAN JU
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ........................................ iii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .......................................... iv
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... v
ABSTRAK ..................................................................................................... vii
ABSTRACT ................................................................................................... viii
KATA PENGANTAR ................................................................................... ix
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH .............. x
DAFTAR ISI ................................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xii
DAFTAR TABEL ......................................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xiv
BAB 1. PENDAHULUAN ............................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ............................................................................ 1
1.2 Batasan Masalah ......................................................................... 3
1.3 Perumusan Masalah .................................................................... 3
1.4 Tujuan Penelitian ........................................................................ 4
1.5 Hipotesis ..................................................................................... 4
1.6 Manfaat Penelitian ...................................................................... 4
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 5
2.1 Kosmetik ..................................................................................... 5
2.1.1 Definisi Kosmetik............................................................. 5
2.1.2 Penggolongan Kosmetik................................................... 5
2.2 Krim ............................................................................................ 5
2.2.1 Definisi Krim .................................................................... 5
2.2.2 Contoh Formula krim ...................................................... 6
2.2.3 Beberapa Data Kelarutan Komponen Dalam Krim .......... 7
2.3 HPLC .......................................................................................... 8
2.3.1 Definisi HPLC................................................................. 8
2.3.2 Kelebihan HPLC ............................................................. 9
2.3.3 Komponen HPLC ............................................................ 9
2.4 Mercury Analyzer ....................................................................... 10
2.4.1 Definisi ........................................................................... 10
2.4.2 Prinsip Kerja ................................................................... 10
2.5 Hidrokuinon ................................................................................ 10
2.5.1 Identitas ............................................................................ 11
2.5.2 Persyaratan Kadar ........................................................... 11
2.5.3 Data Fisikokimia .............................................................. 11
2.5.4 Metode Analisis Hidrokuinon .......................................... 13
2.6 Merkuri ........................................................................................ 15
2.6.1 Identitas ............................................................................ 15
2.6.2 Sifat Fisikokimia .............................................................. 16
2.6.3 Metode Analisis Merkuri ................................................. 17
2.7 Kulit............................................................................................. 19
2.7.1 Definisi Kulit .................................................................... 20
Halaman
Gambar 1. Struktur Hidrokuinon .................................................................... 10
Gambar 2. Kurva Kalibrasi Standar Hidrokuinon ........................................... 30
Gambar 3. Kurva Kalibrasi Standar Merkuri .................................................. 31
Halaman
Lampiran 1. Uji Linieritas dan Pembuatan Kurva Kalibrasi Hidrokuinon ...... 42
Lampiran 2. Data Parameter Uji LOD dan LOQ ............................................. 43
Lampiran 3. Uji Perolehan Kembali ................................................................ 44
Lampiran 4. Penentuan Kadar HQ Sampel Krim Racikan Dokter .................. 46
Lampiran 5. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Hidrokuinon .......... 47
Lampran 6. Kromatogram Larutan Standar Hirokuinon ................................. 48
Lampiran 7. Kurva Kalibrasi Standar Hidrokuinon ......................................... 51
Lampiran 8. Kromatogram Krim Simulasi Hidrokuinon ................................. 52
Lampiran 9. Kromatogram Sampel Krim Racikan Dokter ............................. 55
Lampiran 10. Alat HPLC ................................................................................. 57
Lampiran 11. Sertifikat Analisis Standar Hidrokuinon ................................... 58
Lampiran 12. Kurva Kalibrasi Standar Merkuri .............................................. 59
Lampiran 13. Data Parameter Uji LOD Dan LOQ Pada Standar Merkuri ..... 60
Lampiran 14. Hasil Pengukuran Kadar merkuri .............................................. 61
Lampiran 15. Alat Mercury Analyzer .............................................................. 62
Lampiran 16. Sampel krim racikan dokter ....................................................... 63
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Maraknya kosmetik racikan dokter yang diberikan kepada pasien dinilai
dapat membahayakan konsumen. Dua zat kimia yang sering ditambahkan
dalam kosmetik adalah hidrokuinon dan merkuri, karena kemampuan zat
tersebut untuk menghambat pembentukan melanin pada permukaan kulit dan
menjadikan kulit putih mulus dalam waktu yang relatif singkat (Syafnir et al.,
2011).
Kosmetik berbentuk krim yang mengandung hidrokuinon banyak
digunakan untuk menghilangkan bercak-bercak hitam pada wajah. Daya kerja
pemucatan hidrokuinon sangat lambat dan akan lebih cepat dengan kadar yang
lebih tinggi, tetapi kadar yang tinggi akan memberikan efek samping yang
tidak diinginkan (Ibrahim et al., 2004).
Hidrokuinon lebih dari 2% merupakan golongan obat keras yang
penggunaannya berdasarkan resep dokter. Kadar hidrokuinon yang melebihi
5% dapat menimbulkan kemerahan dan rasa terbakar pada kulit. Bahaya
pemakaian obat keras ini tanpa pengawasan dokter dapat menyebabkan iritasi
kulit, kulit kemerahan, rasa terbakar, kelainan ginjal, kanker darah dan kanker
hati. Pemakaian yang berlebih dapat menyebabkan iritasi kulit, namun jika
dihentikan seketika akan berefek lebih buruk. Kadar hidroquinon dalam krim
yang beredar di pasaran hanya diperbolehkan 2%, lebih dari itu dipergunakan
sebagai obat (BPOM RI, 2007).
Merkuri adalah unsur yang mempunyai nomor atom 80 dengan berat
molekul relatif 200,59. Merkuri diberikan simbol kimia Hg yang berasal dari
bahasa yunani hydrargyricum yang berarti cairan berwarna perak (SPU, 2007)
Dalam kosmetik krim biasanya digunakan merkuri anorganik, yaitu
ammoniated mercury, merkuri juga dapat ditemukan dalam kosmetik yang
lain, misalnya dalam produk pembersih make up mata dan maskara.
Ammoniated mercury 1-10 % digunakan sebagai bahan pemutih kulit dalam
sediaan krim karena berpotensi sebagai bahan pemucat warna kulit. Daya
pemutih pada kulit sangat kuat. Karena toksisitasnya terhadap organ-organ
ginjal, saraf dan otak sangat kuat maka pemakaiannya dilarang dalam sediaan
kosmetik (WHO, 2011).
Menurut Peraturan Mentri Keseharan RI No. 445/MENKES/PER/V/1998
tentang bahan, zat warna, substrat, zat pengawet dan tabir surya pada
kosmetik. Dalam kadar yang sidikitpun merkuri dapat bersifat racun. Mulai
dari perubahan warna kulit, bintik-bintik hitam, alergi, iritasi, serta pada
pemakaian dosis tinggi dapat menyebabkan kerusakan permanen otak, ginjal
dan gangguan perkembangan janin. Bahkan, paparan jangka pendek dalam
dosis tinggi dapat menyebabkan muntah-muntah, diare dan kerusakan paru-
paru serta merupakan zat karsinogenik (BPOM RI, 2007)
Karena masyarakat percaya sepenuhnya kepada dokter spesialis yang
menanganinya, seringkali tidak peduli apakah kosmetik yang diberikan telah
terdaftar di BPOM atau belum. Kesadaran dokter juga diperlukan sehingga
tidak hanya mendahulukan profit tapi juga keamanan. Masyarakat yang hanya
melihat hasil tanpa melihat efek juga tidak pernah tahu bahwa ternyata
kosmetik yang digunakan mengandung zat kimia yang berbahaya.
Banyaknya dokter yang memberikan kosmetik racikan untuk konsumen
yang tidak diketahui dengan jelas kandungan dalam sediaan krim kosmetik
tersebut, diduga dapat membahayakan konsumen. Hal ini diakibatkan
kecenderungan penggunaan hidrokuinon dan merkuri dalam sediaan kosmetik
racikan dokter. Untuk menghindari terjadinya efek yang tidak diinginkan,
maka peneliti menguji kosmetik racikan dokter untuk dianalisis kandungan
hidrokuinon dan merkuri dalam krimm sediaannya. Karena kedua zat tersebut
dapat membahayakan kesehatan konsumen.
Terdapat beberapa metode pada penentuan kadar merkuri. Yaitu dengan
spektrofotometri serapan atom dan titrasi ditizon (DepKes, 1995), CVAAS
(Irianto, 1998 & Parenkuan et al., 2013),dan metode kompleksometri (RAY &
Underwood, 2002).
Penetapan kadar hidrokuinon ada beberapa metode yang dapat digunakan,
diantaranya dengan Titrasi Redoks (DepKes, 1995), Spektrofotometri UV
(Pedro et al., 2007), Kolorimetri (Ibrahimet al., 2004), Thin Layer
Chromatography (Siddique et al., 2012), High Perform Liquid
1. Sampel yang diteliti adalah krim malam pada beberapa merk yang diracik
oleh dokter di wilayah Cileduk, Cirendeu, Bintaro dan Depok
2. Zat yang akan ditetapkan kadarnya adalah hidrokuinon dan merkuri
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Kosmetik
2.1.1 Definisi Kosmetik
Kosmetik adalah sediaan atau paduan bahan yang untuk digunakan
pada bagian luar badan (kulit, rambut, kuku, bibir dan organ kelamin
bagian luar), gigi dan rongga mulut untuk membersihkan, menambah daya
tarik, mengubah penampilan, memperbaiki bau badan, melindungi atau
memelihara tubuh pada kondisi baik (BPOM RI, 2011).
bahan dasar yang sesuai, berupa emulsi kental mengandung tidak kurang
60 % air ditujukan untuk pemakaian luar (Anief, 2000).
Formulasi krim ada dua, yaitu krim air dalam minyak (A/M),
misalnya cold cream dan minyak dalam air (M/A), misalnya vanishing
cream (Yanhendri, 2012).
R/ Cerae alba 5
Cetacei 10
Olei olivarum 60
Aquadest add 100
R/ liquid parafin 60
White bees wax 20
Borax 0,1
Parfum ad
Aquadest add 19 ml
Contoh krim M/A (Anief, 2000)
R/ acedi stearinici 15
Cerae albi 2
Vaselini albi 8
Triethanolamine 1,5
Propylene glycoli 8
aquadest add 65,5
Hard paraffin : Praktis tidak larut dalam air, dan etanol 95%, larut dalam
kloroform (DepKes, 1979).
Cetaceum : Praktis tidak larut dalam air, dalam etanol 95% dingin, larut
dalam 20 bagian etanol 95% mendidih, koroform, eter,
karbon disulfida, minyak lemak dan minyak atsiri (DepKes,
1979).
Olive oil : Sukar larut dalam etanol 95%, mudah larut dalam
kloroform dalam eter dan minyak tanah (DepKes, 1979)
Triethanolamine : Mudah larut dalam air, kloroform dan etanol 95% (DepKes,
1979)
Vaselin album : Praktis tidak larut dalam air, dan etanol, larut dalam
kloroform, eter, minyak tanah (DepKes, 1979)
Asam stearat : Praktis tidak larut dalam air, larut dalam 20 bagaian etanol
95%, 2 bagian klroform dan 3 bagian eter (DepKes, 1979)
Propilen glikol : Bercampur dengan air, etanol 95% dan kloroform, larut
dalam 6 bagian eter, tidak bercampur dengan minyak tanah
dan minyak lemak (DepKes, 1979)
Setil alkohol : Tidak larut dalam air, larut dalam etanol dan eter, kelarutan
bertambah dengan naiknya suhu (DepKes, 1995)
Gliserin : Bercampur dengan air dan etanol, tidak larut dalam eter,
korofor, minyak lemak dan minyak atsiri (DepKes, 1995)
Gom arab : Larut dalam 2 bagian air, praktis tidak larut dalam etanol
dan eter (DepKes, 1979)
Karbomer : Larut dalam air, etanol dan gliserol (DepKes, 1995)
Tokoferol : Praktis tidak larut dalam air, sukar larut dalam alkali, larut
dalam etanol 95%, eter, aseton dan miyak nabati,sangat
mudah larut dalam kloroform (DepKes, 1979)
Niasin amida : Mudah larut alam air, etanol dan gliserol (DepKes, 1979)
Krim tipe A/M biasanya menggunakan surfaktan seperti, sabun polivalen,
span, adeps lannae dan cera. Sedangkan untuk krim dengan tipe M/A biasanya
menggunakan sabun monovalen seperti, trietanolamin stearat, Na stearat, kalium
stearat, amonium stearat, tween, natrium lauril sulfat, kuning telur, CMC,
emulgidum, pectinum dan gelatin (Anief, 2000).
a. Pelarut
Pelarut merupakan fase gerak. Pemilihan fase gerak berdasarkan pada
sampel yang digunakan.
b. Kolom
Kolom berisi fase diam. Fasa diam yang biasa digunakan adalah kolom
C18 yang bersifat non polar dan fasa geraknya bersifat polar. Jenis
pemisahan ini disebut dengan kromatografi partisi fasa terbalik.
Senyawa yang polar akan keluar terlebih dahulu sehingga memiliki
waktu retensi yang relatif kecil sedangkan senyawa non polar akan
ditahan lebih lama oleh fasa diamnya
c. Pompa
Pompa berfungsi untuk mengalirkan fase gerak melewati fase diam
untuk membawa sampel yang ada dalam fase diam.
d. Detektor
Detektor yang digunakan dalam HPLC adalah detektor UV, radiasi
UV, fluoresens, refraktif index dan detektor NMR yang baru
dikembangkan.
e. Injektor
Injektor HPLC yang dipakai secara umum adalah :
1. Injektor dengan memakai diafragma (septum injector)
2. Injektor tanpa memakai diafragma (septumless injection system)
3. Injektor dengan pipa dosis (loop valve)
4. Sistem injeksi otomatis (autoinjector)
2.4 Mercury Analyzer (Yusnizam, 2008)
2.4.1 Definisi
Mercury analyzer merupakan alat untuk menganalisa merkuri yang
cepat, mempunyai sensitivitas yang tinggi, dapat menentukan jumlah
merkuri pada sampel padat, cair dan gas dengan operasi yang mudah.
Merupakan metode otomatis di mana sampel disuntikkan ke dalam aliran
kontinu cairan pembawa yang mencampur dengan larutan lain yang terus
mengalir sebelum mencapai detektor. Flow injection analysis salah
satunya adalah FIMS (Flow Injection Mercury Spectrometer).
tersebut akan ditangkap oleh amalgam sehingga yang tinggal hanya uap
merkuri. Analisa dengan instrumentasi dilakukan pada panjang gelombang
253.7 nm. Gas merkuri yang dihasilkan akan dilewatkan pada cell tube
yang ditembakkan sinar/cahaya dari lampu merkuri. Besarnya konsentrasi
yang dihasilkan sebanding dengan konsentrasi merkuri yang terkandung
dalam sampel dan sebanding dengan nilai absorban yang dihasilkan.
2.5 Hidrokuinon
2.5.1 Identitas
Stabilitas :Stabil pada tekanan dan suhu normal stabil, tidak menyatu
dengan oksidator kuat, basa kuat, O2, Fe. Sensitif terhadap
cahaya dan udara (BPOM, 2011)
y = a ± bx
c. Kromatografi Lapis Tipis (Siddique et al., 2012)
Analisis hidrokuinon menggunakan fase diam yang bersifat
polar dan fase diam yang bersifat nonpolar. Kuantitas
hidrokuinon dihitung dengan membandingkan luas puncak
bercak sampel terhadap bercak standar menggunakan alat
densitometri yang diukur pada panjang gelombang
maksimumnya.
Kulit adalah organ terbesar pada tubuh manusia dan merupakan garis
pertahanan utama dari serangan infeksi yang berasal dari luar. Merupakan
organ yang paling terlihat dari tubuh (Davies, 1998).
a. Lapisan epidermis
Lapisan epidermis adalah bagian terluar kulit. Tersusun dari
jaringan epitel bertingkat yang mengalami keratinasi Berdasarkan
ketebalan epidermis, dapat dibedakan kulit tebal dan kulit tipis. Turunan
epidermis meliputi rambut, kuku, kelenjar sebasea dan kelenjar keringat.
Lapisan epidermis terdiri dari stratum korneum, stratu lusidum, stratum
granulosum, stratum spinosum, stratum basal.
b. Lapisan dermis
Lapisan dermis dipisahkan dari lapisan epidermis dengan adanya
membran dasar atau lamina yang merupakan suatu lapisan jaringan ikat
yang berasal dari mesoderm, terletak di bawah lapisan epidermis dan
jauh lebih tebal dari epidermis. Lapisan ini terdiri dari lapisan elastik dan
fibrosa padat dengan elemen-elemen selular dan folikel rambut. Secara
garis besar, lapisan dermis dibagi menjadi dua bagian yaitu pars papilar
dan pars retikular. Pada lapisan ini tedapat sel-sel saraf dan pembuluh
darah.
c. Lapisan subkutis atau hipodermis
Lapisan ini terdiri atas jaringan ikat longgar yang mengikat kulit
secara longgar pada organ-organ di bawahnya, yang memungkinkan kulit
di bagian atas bergeser. Lapisan ini mengandung sel-sel lemak.
2.7.3 Jenis Kulit (Tresna, 2010)
Kulit digolongkan menjadi 4 jenis yang pokok yaitu : kulit normal,
berminyak, kering dan campuran.
a. Kulit normal
Kulit jenis ini merupakan kulit yang sehat dimana kelenjar lemak
memproduksi minyak tidak berlebihan, sehingga tidak menimbulkan
penyumbatan pada pori-pori kulit. Tanda-tanda kulit normal antara
lain : kulit lembut, halus, segar, bercahaya, sehat, poripori tidak
2. Accidental sampling
Atas dasar perandaian, tanpa direncanakan terlebih dahulu.
Jumlah sampel yang dikehendaki tidak berdasarkan pertimbangan
yang dapat dipertanggungjawabkan, asal memenuhi keperluan saja.
kesimpulan yang diperoleh bersifat kasar dan sementara.
3. Quota sampling
Berdasarkan pertimbangan peneliti, namun besar dan
kriteria sampel telah ditentukan terlebih dahulu. cara ini dilakukan
jika peneliti benar-benar mengenal daerah dan situasi dimana
penelitian akan dilakukan.
2.9 Validasi Metode (Harmita, 2004)
Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap
parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk
membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk
penggunaannya.
Beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam
validasi metode analisis diuraikan dan didefinisikan sebagaimana cara
penentuannya diantaranya adalah sebagai berikut :
1. Kecermatan (accuracy)
Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan
hasil analis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan
dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang
ditambahkan.
Kecermatan hasil analis sangat tergantung kepada sebaran galat
sistematik di dalam keseluruhan tahapan analisis. Oleh karena itu untuk
mencapai kecermatan yang tinggi hanya dapat dilakukan dengan cara
mengurangi galat sistematik tersebut seperti menggunakan peralatan
yang telah dikalibrasi, menggunakan pereaksi dan pelarut yang baik,
pengontrolan suhu, dan pelaksanaannya yang cermat, taat asas sesuai
prosedur.
2. Keseksamaan (precision)
Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian
antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual
dari rata-rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-
sampel yang diambil dari campuran yang homogen.
3. Selektivitas (Spesifisitas)
Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya
yang hanya mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama
dengan adanya komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel.
Selektivitas seringkali dapat dinyatakan sebagai derajat penyimpangan
(degree of bias) metode yang dilakukan terhadap sampel yang
mengandung bahan yang ditambahkan berupa cemaran, hasil urai,
senyawa sejenis, senyawa asing lainnya, dan dibandingkan terhadap
hasil analisis sampel yang tidak mengandung bahan lain yang
ditambahkan.
4. Linearitas dan rentang
Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan
respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi
matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam
sampel. Rentang metode adalah pernyataan batas terendah dan tertinggi
analit yang sudah ditunjukkan dapat ditetapkan dengan kecermatan,
keseksamaan, dan linearitas yang dapat diterima.
5. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi
Batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang
dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan
dengan blangko. Batas deteksi merupakan parameter uji batas. Batas
kuantitasi merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan
sebagai kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat
memenuhi kriteria cermat dan seksama.
6. Ketangguhan Metode (ruggedness)
Ketangguhan metode adalah derajat ketertiruan hasil uji yang
diperoleh dari analisis sampel yang sama dalam berbagai kondisi uji
Preparasi
sampel
Kualitas dan
Metode HPLC dan
kuantitas
Mercury Analyzer
hidrokuinon dan
merkuri
Persyaratan BPOM RI NO
445/MENKES/PER/1998
kesimpulan
BAB 4
METODE PENELITIAN
b. Analisis merkuri
Standar baku merkuri, HNO3 pekat, aquades, 3 sampel krim racikan dokter.
1.4 Prosedur Penelitian
1.4.1 Analisis Hidrokuinon
1. Pembuatan fase gerak
Air : metanol (40 : 60), 60 ml metanol dicampurkan dengan 40 ml air
2. Penentuan panjang gelombang maksimum
Larutan standar hidrokuinon dengan konsentrasi 10 ppm, dibuat spektrum
serapan dari panjang gelombang 200 - 400 nm dengan spektrofotometri
UV-Vis. Tentukan panjang gelombang maksimumnya (ASEAN, 2005)
3. Pembuatan standar hidrokuinon
Sebanyak 50 mg standar hidrokuinon ditimbang dan dimasukkan kedalam
labu ukur 50 mL, ditambahkan dengan 25 mL fase gerak kemudian dikocok
dan dicukupkan volumenya hingga tanda batas. Dipipet 5 mL dari larutan
induk dimasukkan dalam 50 mL labu ukur dan ditambahkan fase gerak
hingga tanda batas. Dibuat standar dengan konsentrasi 20 ppm, 30 ppm, 40
ppm, 50 ppm dan 60 ppm. Diinjeksikan kedalam alat HPLC dengan panjang
gelombang 290 nm, laju alir 1 mL/menit dan volume injeksi 20 µL. Dibuat
kurva kalibrasinya dengan memplotkan peak area vs konsentrasi, dihitung
nilai LOD dan LOQ (ASEAN, 2005)
4. Pembuatan krim simulasi
R/ Hidrokuinon 12,5 mg
Asam stearat 229 mg
Cera alba 30 mg
Vaselin 122 mg
Propilen glikol 122 mg
TEA 23 mg
Aquades ad 1g
Lelehkan asam stearat, cera alba dan vaselin diatas water bath
dengan suhu 600 C (M1) sebagai fase minyak. TEA, propilen glikol
BAB 5
HASIL DAN PEMBAHASAN
5.1 Hasil percobaan
5.1.1 Hidrokuinon
5.1.1.1 Penentuan panjang gelombang maksimum hidrokuinon
Hidrokuinon memberikan serapan maksimum pada panjang
gelombang 290 nm. Spektrum serapan larutan hidrokuinon 10 ppm
dapat dilihat pada lampiran 5.
5.1.1.2 Pemilihan fase gerak dan kondisi optimum HPLC
Fase gerak yang digunakan pada penelitian ini berdasarkan
hasil orientasi yaitu metanol : air (60 : 40), dengan laju alir 1
mL/menit, volume injeksi 20 µL pada panjang geombang 290 nm,
menggunakan kolom C-18 dengan lampu detektor UV.
5.1.1.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Hidrokuinon
14
y = 0.2042x - 0.2246
12 R² = 0.9999
10
8
AUC
6 Series1
Linear (Series1)
4
0
0 20 40 60 80
konsentrasi
Keterangan : a = -0,2246
b = 0,2042
r = 0,9999
5.1.1.4 Uji Perolehan Kembali
Hasil perolehan kembali dari krim simulasi didapat 92,5 %
(Lampiran 3 dan 7).
Keterangan : a = 1,0798333
b = 1,00
r = 0,9999
5.2 Pembahasan
5.2.1 Hidrokuinon
Hidrokuinon merupakan senyawa kimia berupa Kristal putih
berbentuk jarum, tidak berbau, memiliki struktur kimia C6H6O2 dengan
nama kimia 1,4 benzendiol dan mengalami oksidasi terhadap cahaya dan
udara. Senyawa ini digunakan sebagai bahan pemutih dan pencegahan
pigmentasi yang bekerja menghambat enzim tirosinase yang berperan
dalam penggelapan kulit (Ibrahim et al., 2004).
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis kadar hidrokuinon
dalam kosmetik racikan dokter juga menilai apakah krim racikan dokter
mengandung kadar hidrokuinon yang melebihi batas. Analisa ini
menggunakan alat HPLC dengan sampel krim racikan dokter yang diambil
dengan cara sampling investigatif. Penggunaan alat HPLC untuk
penetapan kadar hidrokuinon dalam krim ini karena waktu analisis yang
relatif cepat, mempunyai ketelitian yang tinggi dan mudah.
Kondisi optimum alat yang digunakan untuk penelitian adalah
dengan menggunakan kolom ODS C18 (Oktadesil Silica), detector UV,
fase gerak air : metanol (40 : 60), dilakukan pada panjang gelombang 290
nm, dengan laju alir 1 mL/menit, dan volume injeksi 20 µL.
Penelitian dimulai dengan penentuan panjang gelombang
maksimum hidrokuinon menggunakan alat spektrofotometri UV-VIS
karena hidrokuinon selain mempunyai gugus fungsi OH juga mempunyai
gugus kromofor sehingga dapat ditentukan menggunakan alat
spektrofotometri UV-VIS (Harmita, 2006).
Berdasarkan hasil pengukuran panjang gelombang maksimum
hidrokuinon diperoleh 290,5 nm dengan konsentrasi 10 ppm. Namun pada
alat HPLC digunakan pada panjang gelombang 290 nm karena alat HPLC
tidak bisa menggunakan tanda koma.
Pembuatan kurva kalibrasi dibuat dengan lima konsentrasi yang
berbeda, yaitu 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm. Diperoleh
nilai r 0,9999 dengan menggunakan persamaan regresi linier y = -0,2246 +
0,2042x. Nilai r 0,9999 menunjukkan bahwa nilai koofisien korelasi lebih
rasa terbakar pada kulit karena adanya kadar hidrokuinon yang tinggi
dalam krim (BPOM, 2007).
5.2.2 Merkuri
Merkuri digunakan sebagai bahan kosmetik untuk pemutih kulit.
Akan tetapi penggunaan merkuri pada sediaan krim pemutih dapat
menimbulkan berbagai hal mulai dari perubahan warna kulit yang
akhirnya dapat menyebabkan bintik-bintik hitam pada kulit, alergi,dan
iritasi kulit. Pada pemakaian dosis tinggi dapat menyebabkan kerusakan
permanen pada otak, ginjal, dan gangguan perkembangan janin (BPOM,
2007).
Untuk mengetahui adanya senyawa merkuri dalam sediaan krim
kosmetik racikan dokter dilakukan analisis penetapan kadar merkuri
dengan menggunakan alat mercury analyzer. Penggunaan alat ini karena
lebih spesifik, canggih dan cepat.
Penentuan linieritas diawali dengan pembuatan kurva kalibrasi.
Untuk pembuatan kalibrasi, mula-mula ditimbang L-sistein 10 mg
dimasukkan kedalam labu ukur 1000 mL. ditambahkan aquades hingga
500 ml dan asam nitrat pekat 2 mL. dikocok hingga L-sistein terlarut
kemudian dicukupkan dengan aquades hingga 1000 mL. pembuatan
larutan L-sistein ini digunakan sebagai larutan pengganti aquades pada
saat pembuatan larutan standar. Pada pembuatan kurva kalibrasi dibuat 3
konsentrasi. Yaitu 5 ppb, 50 ppb dan 100 ppb. Hasil plot antara
konsentrasi dan absorbansi pada pembuatan kurva kalibrasi didapat nilai r
sebesar 0,9999 dengan menggunakan persamaan regresi linier y =
1,0798333 + 1,00x. Nilai LOD didapat18 µg/L dan nilai LOQ didapat 60
µg/L.
Untuk menentukan kadar senyawa merkuri yang terdapat pada
krim racikan dokter, sampel langsung diambil dengan menggunakan tusuk
gigi dan digoreskan kedalam boat pada alat mercury analyzer. Hasil
pengukuran yang telah dilakukan, 3 sampel racikan dokter yang diperiksa
mengandung kadar merkuri yang cukup tinggi. Sampel A mengandung
6.2 Saran
DAFTAR PUSTAKA
Anief, M. 2000. Ilmu Meracik Obat Teori dan Praktek. Gajah Mada University
Press: Yogyakarta.
Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2011. Persyaratan Tekhnis Bahan Kosmetik
: Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik
Indonesia No. HK.00.03.1.23.08.11.07517.
Farmawati, Aishah dan Dwi Susiawati. 2008. Analisis Logam Berat dalam perona
Kelopak Mata Yang Beredar Di Kota Makassar Dengan Metode
Spektrofotometri Serapan Atom (Vol 12 n0-2 juli 2008).
Gao, Wenhui,. Cristina Legido Quigley. 2011. Fast and Sensitive High
Performance Liquidchromatography Analysis Of Cosmetic Cream For
Hidroquinone, Phenol and Six Preservatives. Journal Of
Chromatography A, xxx (2011) xxx-xxx, no of page :
5,www.elsevier.com/locate/chroma
Irianto , Irianto. 1998. Penentuan Kadar Raksa (II) Dalam Krim Pemutih Kulit
Dengan Metoda Aas Uap Dingin. Undergraduate thesis, FMIPA :
UNDIP.
Iswari, Retno dan Fatma, Latifa. 2007. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan
Kosmetik. gramedia pustaka utama : jakarta.
Jang Seokmin dan Yongseong Kim. 2005. Analysis of Hydroquinone and Its
Ether Derivativesby Using Micellar Electrokinetic Chromatography
(MEKC). Department of Chemistry, Kyungnam University, Kyungnam
631-701 : Korea. Korean Chem. Soc. 2005, Vol. 26, No. 5.
Parenkuan, Kissi et al., 2013. Analisis Kandungan Merkuri Pada Krim Pemutih
Yang Beredar Di Kota Manado. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi –
UNSRAT vol.2 no.01 februari 2013 ISSN 2302-2493
Sardi, Setiawan dkk. 2011. Alat Analisis Spektrofotometer Serapan Atom (Atomic
Absorbtion Spektrofotometer). UMI : Makassar.
Sloane, Ethel. 2003. Anatomi Dan Fisiologi Untuk Pemula. EGC : Jakarta.
Syafnir, Livia dan Arlina, Prima Putri. 2011. Pengujian Kandungan Merkuri
Dalam Sediaankosmetik Dengan Spektrofotometri Serapan Atom.
Prosiding snapp 2011 Sains, Teknologi Dan Kesehatan ISSN:2089-3582.
Tresna, Pipin. 2010. Modul 1 Dasar Rias : Perawatan Kulit Wajah (Facial).
Universitas pendidikan Indonesia : Bandung.
Yanhendri, Satya Wydya Yenny. (2012). Berbagai Bentuk Sediaan Topikal dalam
Dermatologi. Bagian Ilmu Kesehatan Kulit Dan Kelamin Fakultas
Kedokteran ; Universitas Andalas. CDK-194/vol.39 n0.6 th.2012.
ok.indd
Y = a+bx
Keterangan : a = -0,2246
b = 0,2042
r = 0,9999
Kondisi analisis :
Fase gerak : Metanol : air (60 : 40)
Kolom : C-18
Pelarut : Fase gerak
Volume injeksi : 20 µL
Laju alir : 1 mL/menit
Panjang gelombang : 290 nm
√
Sb
√
= 0,027
LOD = 3. Sb/b
= 0,396 µg/mL
LOQ = 10.Sb/b
= 1,322 µg/mL
Krim yang
dibuat Dimasukkan
dimasukkan dalam labu
dalam beker ukur 50 mL
glass 25 mL
LLml+fase gerak
Dipanaskan diatas
Divortex 1
water bath
menit
dengan suhu 600
C selama 15
menit
Didinginkan,
dicukupkan hingga Disaring dengan
50 mL fase gerak. membran filter
Dan disentrifuge 0,45 µm
5000 rpm selama 10
menit
(lanjutan)
Diketahui :
Sehingga X =
= 231,189 ppm
UPK HQ =
= x 100 %
= 92,5 %
y = a+bx atau x=
% kadar HQ =
Standar 20 ppm
Standar 30 ppm
(lanjutan)
Standar 40 ppm
Standar 50 ppm
(lanjutan)
Standar 60 ppm
14
y = 0.2042x - 0.2246
12 R² = 0.9999
10
8
AUC
6 Series1
Linear (Series1)
4
0
0 20 40 60 80
konsentrasi
Sampel A1
Sampel A2
(lanjutan)
Sampel B1
Sampel B2
(lanjutan)
Sampel C1
Sampel C2
(lanjutan)
Sampel D1
Sampel D2
Lampiran 13. Data Parameter Uji LOD dan LOQ Standar Merkuri
√
Sb
√
Sb
= 0,0006
LOD = 3. Sb/b
= 3. 0,0006/ 1,00
= 0,008 µg/L
= 0,006 µg/L