Praktikum Genetika 2018 2
Praktikum Genetika 2018 2
Oleh :
Prof. Dr. Ir. Estri Laras Arumingtyas, MSc.St
Prof. Fatchiyah, MKes., PhD
Prof. Muhaimin Rifai, PhD.
Dr. Sri Widyarti, MS.
Nia Kurniawan, MSi., PhD.
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA
DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2018
0
Daftar Isi
Latihan I .............................................................................................................................. 2
Penentuan Jenis Kelamin .................................................................................................... 2
Tujuan ............................................................................................................................. 2
Bahan-bahan dan peralatan ............................................................................................. 2
Cara Kerja ....................................................................................................................... 2
Latihan II ............................................................................................................................. 4
Rangkai Kelamin ................................................................................................................ 4
Tujuan ............................................................................................................................. 4
Bahan-bahan dan peralatan ............................................................................................. 4
Cara Kerja ....................................................................................................................... 4
Latihan III ........................................................................................................................... 6
Peranan Gen yang Dipengaruhi Seks .................................................................................. 6
Tujuan ............................................................................................................................. 6
Bahan-bahan dan peralatan ............................................................................................. 6
Cara kerja ........................................................................................................................ 6
Latihan IV ........................................................................................................................... 8
Analisis Kromosom Tumbuhan .......................................................................................... 8
Tujuan ............................................................................................................................. 8
Bahan-bahan dan Peralatan ............................................................................................. 8
Cara Kerja ....................................................................................................................... 8
Latihan V .......................................................................................................................... 10
Analisis Kromosom Manusia ............................................................................................ 10
Tujuan ........................................................................................................................... 10
Bahan-bahan dan peralatan : ......................................................................................... 10
Latihan VI ......................................................................................................................... 12
Alel Ganda ........................................................................................................................ 12
Tujuan ........................................................................................................................... 12
Bahan-bahan dan peralatan ........................................................................................... 12
Cara Kerja : ................................................................................................................... 12
Latihan VII ........................................................................................................................ 16
Genetic Analysis of Flower Colour in Snapdragon .......................................................... 16
Introduction ................................................................................................................... 16
Genotype ....................................................................................................................... 17
Flower colour ................................................................................................................ 17
Test crosses ................................................................................................................... 18
1
Latihan I
Penentuan Jenis Kelamin
Tujuan
1. Menetapkan jenis kelamin
2. Mengidentifikasi barr body dan drumstick dengan uji seks kromatin
Cara Kerja
a. Barr body dari sel epithel mukosa mulut
1. Ambil lapisan mukosa mulut dengan tusuk gigi, kemudian oleskan pada gelas
obyek, lalu dikering-anginkan.
2. Kemudian preparat dicelupkan ke dalam staining jar berisi larutan fiksatif
(methanol absolut) selama 5 menit, kering-anginkan.
3. Teteskan pewarna crecyl violet, biarakan selama 3-5 menit, kemudian cuci
dengan air mengalir, lalu dikering-anginkan.
4. Amati preparat menggunakan mikroskop.
5. Gambarkan sel-sel endothel dengan barr body.
6. Bandingkan antara preparat dari praktikan laki-laki dan perempuan.
7. Hitung barr body, 100 sel diulang 3 kali. Pada wanita minimal dijumpai bar body
11 sel per 100 sel yang diamati, sedang pada laki-laki kurang dari 10 sel barr body
per 100 sel yang diamati.
2
5. Amati menggunakan mikroskop dan gambarkan sel yang mengandung inti dengan
bentuk drumstick.
Laporan sementara Latihan I (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
a. Barr body dari sel epithel mukosa mulut
1. Gambar Barr body (♀ dan ♂)
3
Latihan II
Rangkai Kelamin
Tujuan
1. Mempelajari rangkai kelamin dengan uji butawarna
2. Mempelajari cara pengujian butawarna secara individu
Cara Kerja
1. Setiap praktikan akan diuji secara bergantian oleh asisten dengan menggunakan
buku uji standar internasional
2. Baik praktikan maupun asisten mencatat hasil uji, terutama yang tidak bisa atau
keliru diterjemahkan oleh praktikan untuk dicocokkan dengan buku uji standar
3. Sebutkan berapa persentase kesalahan pembacaan
4. Prediksikan genotip orangtua setiap praktikan
5. Bahas secara individu dan populasi kelas dalam laporan
4
Laporan sementara Latihan II (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
1. Prosentase kesalahan : pada gambar nomor:
2. Genotip praktikan :
5
Latihan III
Peranan Gen yang Dipengaruhi Seks
Tujuan
1. Mempelajari peranan gen yang dipengaruhi seks
2. Menentukan genotip dirinya sendiri berdasarkan ukuran jari telunjuk dan kepala
botak
Cara kerja
1. Gambarlah dua garis lurus horisontal dengan jelas pada halaman laporan
sementara saudara
2. Letakkan ujung jari tengah saudara tepat di garis yang atas
3. Gambarkan posisi jari telunjuk dan jari tengah saudara
4. Tentukan genotip saudara dan bagaimana populasi kelas secara keseluruhan
5. Hitung frekuensi gen untuk populasi kelas, gen apa yang mendominasi populasi
kelas
6. Untuk kepala botak, tuliskan secara jujur dari silsilah keluarga saudara adakah
yang berkepala botak, sehingga saudara bisa memprediksi kebotakana yang akan
terjadi kemudian.
7. Dan tuliskan genotip silsilah dari keluarga saudara, bahas dalam laporan saudara.
6
Laporan sementara latihan III (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
a. Untuk panjang jari telunjuk
1. Gambar jari tangan praktikan
2. Genotip praktikan
b. Kepala Botak
1. Genotip praktikan
7
Latihan IV
Analisis Kromosom Tumbuhan
Tujuan
1. Menganalisis kromosom tumbuhan dengan metoda squash
2. Mengamati kromosom akar Allium cepa
Cara Kerja
1. Semaikan bawang merah selama 2-3 hari di air, sehingga diperoleh akar Allium
cepa.
2. Potong akar bawang , masukkan ke dalam botol flakon yang berisi larutan Carnoy
, inkubasi 24 jam (dimulai pukul 9.00, 10.00, dan 11.00 pagi)
3. Buang larutan Carnoy , dan ganti dengan alkohol:HCl 1N (1:1), inkubasi 15
menit.
4. Buang larutan sebelumnya, ganti dengan alkohol 70 % inkubasi jaringan pada
oven 60 oC selama 15 menit
5. Kemudian ganti larutan dengan pewarna acetocarmine, inkubasi sampai ujung
akar berubah warna menjadi merah
6. Ambil akar, letakkan pada gelas obyek, potong ujung akar kira-kira 1-2 mm.
7. Kemudian tutup ujung akar tsb dengan gelas penutup, pencet hati-hati sehingga
jaringan terlihat menipis dan menyebar.
8. Amati bentuk, struktur dan jumlah kromosom setiap sel.
8
Laporan sementara latihan IV (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
1. Apakah ada perbedaan antara akar yang difiksasi pukul 9.00, 10.00 dan 11.00
dalam hal kejelasan preparat?
6. Fase mitosis apa saja yang dapat saudara kenali dalam preparat saudara?
9
Latihan V
Analisis Kromosom Manusia
Tujuan
1. Menganalisis kromosom manusia
2. Menyusun kariotipe kromosm
10
Laporan sementara latihan V (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
1. Gambar kromosom yang diperoleh (lampirkan hasil karyotiping)
2. Jumlah autosom
11
Latihan VI
Alel Ganda
Tujuan
1. Mempelajari beberapa sifat keturunan pada manusia yang ditentukan oleh
pengaruh alel ganda
2. Menganalisis frekuensi gen pada suatu populasi
3. Mempelajari pengertian tentang antigen, antibodi dan reaksi aglutinasi
Cara Kerja :
a. Gen beralel ganda pada rambut jari tangan
1. Amati jari-jari tangan saudara dengan kaca pembesar
2. Tentukan dengan seksama apakah dijumpai rambut di antara segmen digitalis
bagian tengah jari saudara
3. Tentukan genotip saudara
4. Hitung frekuensi genotip populasi kelas, apakah tampak adanya ciri populasi
etnik, coba bedakan antara berbagai variasi etnik dalam populasi kelas.
b. Gen beralel ganda golongan darah sistem ABO dan Rh
1. Siapkan gelas obyek yang bersih dan buatlah tiga lingkaran dan beri tanda A, B
dan R
2. Pengambilan darah dari jari tangan yang tidak digunakan untuk menulis/bekerja :
- Ayunkan dengan keras tangan saudara beberapa kali
- Bersihkan jari tangan saudara dengan kapas yang telah dicelupkan dalam
alkohol 70 %, biarkan mengering sejenak dan jaga agar tidak
terkontaminasi
- Tusuk jari saudara dengan lancet steril dengan kuat dan cepat. Usaplah
tetesan darah pertama yang keluar dengan kapas beralkohol.
- Kemudian teteskan darah berikutnya pada ketiga lingkaran pada gelas
obyek yang telah dipersiapkan.
- Teteskan serum anti-A pada lingkaran A, serum anti-B pada lingkaran B
dan anti-Rh pada lingkaran R, dan campurkan dengan cepat menggunakan
spatula yang berbeda, agar tidak terkontaminasi.
- Amati lingkaran yang mengalami aglutinasi dan yang tidak.
3. Tentukan genotip saudara
12
4. Hitung frekuensi genotip populasi kelas, apakah tampak adanya ciri populasi
etnik, coba bedakan antara berbagai variasi etnik yang ada dalam populasi kelas.
Bahas dalam laporan saudara.
Laporan sementara latihan VI (sah hanya bila ada tanda tangan asisten)
a. Gen beralel ganda pada rambut jari tangan
1. Genotip praktikan :
13
Lampiran
B B IB IB IB atau IBi
AB A dan B I , IA
A
IAIB
14
Gambar 1. Barr body
Gambar 2. Drumstick
15
Latihan VII
Genetic Analysis of Flower Colour in Snapdragon
No need to learn the precise gene symbols and pigment names for flower colour in
snapdragon. Rather you should understand the principle of epistasy, the strategy of
making a test cross to identify the genotype of a parent, and how to determine linkage.
Introduction
niv Flavonoid synthesis is started when niv+. (niv in dominant condition) is present.
The double recessive niv niv-condition leads to all-white flowers and acts
epistatically over the three following genes. Niv+. produces a yellow pigment.
inc When homozygous or heterozygous dominant inc+., this gene leads to synthesis
of red and purple pigments (red = inc+.eos eos; purple = inc+. eos+.). When double
recessive (inc inc), the gene acts epistatically over eos+ (see below). As a
consequence, the different genotypes inc inc eos+. and inc inc eos eos, cannot be
distinguished by eye.
eos The effect of the eos-gene is only visually expressed in inc+. plants. Eos+. turns
the red pigment pelargonidin (inc+. eos eos) into the purple pigment cyanidin
(inc+. eos+.).
sulf This is a factor for colour-intensity. When double recessive (sulf sulf), the gene
gives a more intense coloration.
16
sulf - white yellow bronze carmine
1. Fill out the expected flower colours for each of the genotypes in Table 1.
inc+inc+eos+eos+sulf+sulf+
inc+inc+eos+eos+sulf sulf
17
Test crosses
From the above table it can be concluded that identical looking yellow (as well as ivory)
plants may be genotypically different. Test crosses, which incorporate the factor inc+,
enable us to distinguish between plants, which carry eos+. and plants which are eos eos.
b) In the same way, the spectrum of flower colours in the F1, resulting from the cross
ivory (three genotypes) x pink (carrying inc+) reflects the genotype of the ivory parent
involved.
In snapdragon, early testing for the presence of anthocyanins is possible, as far as the
flavonoids for red and purple colours are concerned. This enables early elimination of
unwanted genotypes. Early testing takes place by studying red or purple colouration (in
different intensities, depending on the genotype) in the lower stem parts, the tips of
(mainly) side shoots and the lower side of the leaves.
Assignment
4. Enter in table 2 the expected F1 genotypes and phenotypes for the crosses "yellow x
bronze" and "ivory x pink".
18
Table 2 Possible genotypic combinations, expected F1 genotypes and expected F1
phenotypes for the crosses "yellow x bronze" and "ivory x pink".
Pollinator assumed to be homozygous.
"yellow x bronze"
1 inc inc eos+ eos+ sulf sulf x inc+ inc+ eos eos sulf sulf
2 inc inc eos+ eos sulf sulf x inc+ inc+ eos eos sulf sulf
3 inc inc eos eos sulf sulf x inc+ inc+ eos eos sulf sulf
"ivory x pink"
1 inc inc eos+ eos+ sulf+ sulf+ x inc+ inc+ eos eos sulf+ sulf+
2 inc inc eos+ eos sulf+ sulf + x inc+ inc+ eos eos sulf+ sulf+
3 inc inc eos eos sulf+ sulf+ x inc+ inc+ eos eos sulf+ sulf+
19
5. Below you see some “virtual plots” of hybrids from the above test crosses with
bronze (inc+ inc+ eos eos sulf sulf) and pink (inc+ inc+ eos eos sulf+ sulf+) genotypes,
in order to know the genotypes of the yellow and ivory flowering plants, respectively.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
20
Yellow
White Bronze
Magenta
21