Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Ilmu Eksperimental 2011, 2(7): 21-25

ISSN: 2218-1768
www.scholarjournals.org

www.jexpsciences.com

JES-Ilmu Hayati

Isolasi, Pemurnian dan Identifikasi Kurkuminoid dari

Kunyit (Curcuma longa L.) menurut Kromatografi Kolom
S. Revati1, S. Elumalai1*, Merina Benny2 dan Benny Antony2
1 PG dan Departemen Penelitian Biologi Tumbuhan dan Bioteknologi Tumbuhan, Presidency College (Autonomous), Chennai – 600 005 (India)
2 Ekstrak Alami Arjuna, Alwaye, Kerala – 683 101 (India)

Info Artikel Abstrak

Sejarah Artikel Kunyit, temulawak L dari keluarga Zingiberaceae adalah rempah-rempah yang dibudidayakan secara luas
Diterima : 13-02-2011 di India dan negara-negara Asia lainnya. Kunyit kaya akan kurkuminoid, dan dikenal karena spektrum
Diperbaiki : 16-05-2011 aktivitas biologisnya yang luas, kurkuminoid bervariasi dalam struktur kimia, karakteristik fisiko-kimia
Diterima : 17-05-2011 serta sifat fungsionalnya. Penelitian ini difokuskan pada penyaringan pelarut untuk ekstraksi
kurkuminoid, isolasi dan pemurnian kurkuminoid dengan kromatografi kolom dilanjutkan dengan
* Penulis yang sesuai
analisis kemurnian dengan HPLC. Pelarut yang berbeda digunakan untuk ekstraksi, di antaranya aseton
Telp : + 91-9710116385 menunjukkan hasil maksimum dari masing-masing kurkuminoid. Berbagai pelarut pada polaritas yang
berbeda telah diuji sebelumnya dalam KLT untuk pemisahan kurkuminoid, kloroform:metanol pada 95:5
menunjukkan resolusi nilai Rf yang lebih baik pada 0,75, 0,55, 0,27, seperti Curcumin(C),
Surel:
ananandal@gmail.com Demethoxycurcumin(DMC), Bisdemethoxycurcumin(BDMC ) masing-masing. Ekstrak aseton menjadi
sasaran kromatografi kolom silika gel dengan kloroform: metanol pada peningkatan polaritas. Hasil
setiap kurkuminoid dari kolom ditentukan dan kurkuminoid total dari fraksi individu masing-masing
kurkuminoid ditentukan dengan spektrofotometri UV. Kristalisasi masing-masing senyawa dilakukan
dengan menggunakan kloroform: metanol (5:2) pada 5°C. Kurkuminoid yang diisolasi (C, DMC, dan
BDMC) menunjukkan puncak tunggal pada waktu retensi masing-masing 10,81, 12,79, 13,03 menit pada
HPLC.

©ScholarJournals, SSR Kata Kunci: temulawak longa, Kurkumin (C), Demethoxycurcumin (DMC) dan
bisdemethoxycurcumin (BDMC), spektroskopi UV, HPLC

pengantar
Curcuma longa L. merupakan tumbuhan perdu yang khas
dengan rimpang yang tebal dan berdaging serta berdaun dalam
pelepah yang mencirikan famili Zingiberaceae [1]. Kunyit berasal
dari Asia Selatan tropis dan membutuhkan suhu antara 20º C dan
30º C, dan curah hujan tahunan yang cukup untuk berkembang
[2]. Kunyit umumnya dikenal karena nilai obatnya dalam sistem
pengobatan tradisional India [3]. Kurkumin (C), zat pewarna
utama dalamCurcuma longa dan dua senyawa terkait,
demethoxycurcumin (DMC) dan bisdemethoxycurcumin (BDMC),
semuanya dikenal sebagai kurkuminoid [1]. Struktur kimia ketiga
kurkuminoid ditunjukkan pada Gambar 1. Total kurkuminoid yaitu
sekitar 4-6%, kunyit juga mengandung 2-4% minyak atsiri dan
2-3% minyak tetap dan berbagai minyak atsiri, termasuk
turmeron, atlanton , dan zingiberon. Konstituen lainnya termasuk
gula, protein dan resin. Nilai produk kunyit didasarkan pada
kandungan kurkuminoidnya dan diperkirakan berdasarkan
absorbansinya pada 420 nms [3].

Gambar 1

21
Revathy dkk./J Exp Sci 2 (2011) 21-25
Gambar 2: Profil HPLC dari kurkuminoid murni.
A. Curcumin, B. Demethoxycurcumin, C. Bisdemethoxycurcumin
menunjukkan puncak tunggal pada waktu retensi 11,2, 12,7, 13,4 menit
masing-masing.
Kurkuminoid adalah polifenol yang memiliki warna kuning
yang nyata. Mereka memiliki kelarutan yang buruk dalam air
pada pH asam dan fisiologis, dan juga terhidrolisis dengan cepat
dalam larutan basa. Kurkuminoid larut dalam dimetil sulfoksida
(DMSO), aseton dan etanol. Mereka mudah terurai ketika terkena
cahaya terang, suhu tinggi atau kondisi oksidatif [4]. Penggunaan
tradisional kunyit atau kurkuminoid alami dalam pengobatan
tradisional sangat banyak, dan beberapa di antaranya termasuk
antioksidan, sifat anti-inflamasi, efek antikarsinogenik dan efek
hipoglikemik pada manusia [2]. Meskipun struktur kimia
kurkumin ditentukan pada abad ke-19, nilai besar dari molekul ini
sedang direalisasikan sekarang dengan beberapa studi ekstensif
pada potensi farmasi dan nutraceuticalnya [5]. Kandungan total
kurkuminoid dalam bubuk kunyit berperan penting dalam
aktivitas antioksidan dan efektivitas produk [4]. Kandungan
kurkuminoid dapat bervariasi pada rimpang kunyit yang ditanam
di zona agroklimat yang berbeda [7]. Kurkuminoid dikenal karena
spektrum aktivitas biologisnya yang luas, potensi penggunaan
kurkumin dalam pencegahan kanker adalah subjek penelitian
laboratorium dan klinis intensif [8]. Baru-baru ini dilaporkan
bahwa efek kurkuminoid diperiksa pada proliferasi sel tumor
payudara manusia MCF-7 bahwa demethoxycurcumin adalah
penghambatan terbaik sel MCF-7 diikuti oleh kurkumin dan
bisdemethoxycurcumin [9]. Banyak dari sifat-sifat ini dapat
ditingkatkan melalui peningkatan bioavailabilitas kurkuminoid
dengan pendekatan yang berbeda dan subjek penelitian
laboratorium dan klinis yang intensif [10]. Meskipun kurkumin
memiliki lebih banyak sifat farmakologis, jumlah total
kurkuminoid yang diserap oleh sistem hewan jauh lebih sedikit.
Pencampuran kurkumin dengan minyak esensial kunyit standar
meningkatkan penyerapan dan bioavailabilitas dalam sistem
hewan [11].
Pilihan pelarut untuk ekstraksi dibatasi pada beberapa pelarut
dengan kemurnian yang ditentukan yang diizinkan oleh undang-
undang pangan nasional dan internasional dalam pemrosesan bahan
makanan. Dari sudut pemrosesan, pilihan ditentukan oleh efisiensi
ekstraksi komponen karakteristik individu
22
rempah-rempah, optimasi sehubungan dengan hasil
oleoresin dengan sifat penanganan yang diinginkan, dan
akhirnya kasus dan ekonomi desolventizing ke tingkat
pelarut sisa yang diizinkan dalam produk akhir, dan
pemulihan pelarut. Heksana, aseton, alkohol, dan etilen
diklorida umumnya telah digunakan dalam ekstraksi
oleoresin rempah-rempah. Dari pertimbangan kelarutan
konstituen aktif, kurkuminoid kurang larut dalam pelarut
hidrokarbon. Alkohol dan aseton adalah ekstraktan yang baik
dan hasil yang diharapkan juga tinggi karena ekstraksi
komponen non-flavor. Ekstraksi soxhlet bubuk kunyit dengan
aseton memberikan hasil sekitar 5,0% yang mengandung
42% kurkuminoid dalam 4 sampai 5 jam. Aseton sebagai
pelarut sedikit lebih unggul dari alkohol dan etilen diklorida,
kandungan kurkuminoid juga berada di sisi yang tinggi,
menyarankan ekstraksi selektif. Hasil ekstraksi dengan
aseton, bagaimanapun, telah dilaporkan memberikan hasil
tinggi kurkuminoid dari ekstraksi alkohol [1].
Sejumlah penelitian dilakukan untuk memisahkan pigmen
kurkuminoid dengan kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi
lapis tipis kinerja tinggi (HPTLC), dan kromatografi kolom (CC).
Fasa diam yang paling umum digunakan adalah silika gel dengan
sistem pelarut yang berbeda termasuk benzena, etil asetat,
etanol, kloroform, asam asetat, heksana, dan metanol untuk
pemisahan kromatografi [6, 12]. Metode HPLC sensitif, tepat, dan
akurat untuk deteksi dan kuantifikasi kurkuminoid dalam ekstrak
rimpang.Curcuma longa [13]. Pemisahan dengan kromatografi
cair kinerja tinggi (KCKT) sebagian besar dilakukan pada fase
terbalik menggunakan campuran air, asetonitril, etanol, dan
metanol [8]. Karena pigmen kurkuminoid bervariasi dalam
struktur kimia, ada kemungkinan bahwa karakteristik fisiko-kimia
serta sifat fungsional akan bervariasi di antara mereka. Karena
senyawa DMC dan BDMC tidak tersedia secara komersial, penting
untuk mendapatkan pigmen ini dalam kemurnian tinggi untuk
studi rinci tentang atribut kimia dan fisiologisnya [14]. Oleh
karena itu penting untuk mendapatkan pigmen murni dan
mengkarakterisasinya secara individual untuk mempelajari sifat
biologisnya [15].
Penelitian ini menjelaskan penyaringan sistem pelarut
untuk ekstraksi kurkuminoid dari rimpang kunyit menggunakan
pelarut non-polar ke polar untuk ekstraksi lengkap, dan isolasi,
identifikasi dan pemurnian kurkuminoid dengan kromatografi
kolom diikuti dengan analisis kemurnian dengan HPLC.
Bahan dan metode
Curcuma longa (Kunyit) rimpang dikumpulkan dari
varietas Assam - Lakhadong. Semua pelarut / Bahan Kimia
yang digunakan adalah AR / HPLCgrade dan diperoleh dari E-
Merck. Standar referensi Curcumin dibeli dari Sigma
Chemicals Co. USA
Metode
Ekstraksi kurkuminoid
Rimpang segar dibersihkan dicuci dengan air deionisasi, diiris dan
dikeringkan di bawah sinar matahari selama satu minggu dan dikeringkan
lagi pada suhu 50 ° C dalam oven udara panas selama 6 jam. Rimpang kering
dipotong kecil-kecil, dihaluskan dengan gilingan elektronik. Sampel
sebanyak kurang lebih 20 gram dimasukkan ke dalam thimble dan
dimasukkan ke dalam alat soxhlet, disetting dengan berbagai pelarut dari
non polar sampai polar. 150ml pelarut ditambahkan dan diekstraksi
Revathy dkk./J Exp Sci 2 (2011) 21-25
berdasarkan titik didihnya selama 6 jam. Pelarut yang digunakan
adalah Heksana(BP=69̊ C), Kloroform (BP = 61̊ C), Etil asetat
(BP=77̊ C), Metanol (BP=65˚C), dan Aseton (BP=56,53̊ C). Dan satu
sampel diekstraksi dengan heksana selama 2 jam dan ekstrak
heksana dibuang dan serbuk diekstraksi kembali dengan metanol
selama 6 jam. Setelah selesai ekstraksi ekstrak berwarna coklat
tua kemudian didinginkan, disaring, dipekatkan menggunakan
rotary evaporator, dan terakhir dengan vaccum suction untuk
mendapatkan ekstrak kasar kering yang berwarna hitam orange.
Setiap sampel mentah kunyit diekstraksi dengan metode yang
sama dan hasil dihitung.
Estimasi kurkuminoid: dengan prosedur
analisis HPLC
i) Persiapan Sampel: Ditimbang secara akurat 25 mg sampel dan
dilarutkan dalam 25 ml aseton. Dari ini dipipet keluar 1ml dan
diencerkan menjadi 5 ml dengan aseton. Disaring melalui filter
membran 0,2μm sebelum injeksi.
ii) Kondisi kromatografi
Sampel dianalisis dengan HPLC dalam sistem
kromatografi cair Shimadzer LC 20A0 dengan detektor SPD-
M20AuV dalam mode isokratik. 20µl sampel disuntikkan dan
elusi dilakukan dengan sistem pelarut gradien dengan laju
alir 1,0ml/menit pada suhu kamar. Kolom yang digunakan
adalah C18 (250X4.6mm), fase gerak 40% THF dan 60% air
yang mengandung asam sitrat 1%, pH diatur menjadi 3,0
menggunakan larutan kalium hidroksida pekat dan diukur
dalam panjang gelombang 420nm.
Pemisahan kurkuminoid dengan KLT menggunakan sistem pelarut yang
berbeda:
Ekstrak aseton diuji dalam KLT untuk keberadaan tiga
kurkuminoid. Pelat silika gel pra-dilapisi TLC (Merk-60 F254, tebal
0,25mm) dikembangkan menggunakan tangki kaca twintrough Camag
yang dijenuhkan sebelumnya dengan fase gerak selama 1 jam dan
masing-masing pelat dikembangkan hingga ketinggian sekitar 10cm.
Komposisi fase gerak dioptimalkan dengan menggunakan pelarut
bergerak yang berbeda dari berbagai polaritas. Setelah pelat
pengembangan dikeluarkan dan dikeringkan dan bintik-bintik
divisualisasikan dalam sinar UV.
Kromatografi kolom:
Persiapan sampel
Serbuk halus rimpang 100 gram diekstraksi dengan soxhlet dan
pelarut yang digunakan adalah aseton selama 6 jam. Ekstrak disaring
dan dipekatkan dalam rotary evaporator, olerosin yang dihasilkan
diendapkan dengan petroleum eter dan dikeringkan dengan vakum,
campuran kurkuminoid mentah ini mengandung kurkumin,
demethoxycurcumin, bisdemethoxycurcumin.
Kromatografi kolom silika gel
Ekstrak aseton dilakukan kromatografi kolom dalam kolom
kaca silika gel (60-120 mesh). Sekitar 5 gram kurkuminoid mentah
dicampur dengan 8 gram silika gel dan dimasukkan ke dalam
23
ke kolom 46x2 cm dan dielusi dengan kloroform diikuti
dengan kloroform:metanol dengan peningkatan polaritas.
Semua fraksi yang terkumpul ditLC silika gel 60 F254 plate
menggunakan kloroform:metanol (95:5) sebagai sistem
pelarut yang berkembang dan terdeteksi sebagai bintik
kuning. Dan fraksi serupa dengan nilai Rf dikumpulkan dan
pelarut organik dihilangkan dengan rotavapor. Kandungan
kurkuminoid total dari setiap kurkuminoid yang dikumpulkan
dianalisis dengan spektrofotometri UV pada 420 nm.
Pemurnian masing-masing kurkuminoid:
Kurkuminoid individu yang dikumpulkan dari kromatografi
kolom dilarutkan dalam metanol dan dipanaskan. Setelah larut
sempurna ditambahkan kloroform untuk mendapatkan
perbandingan metanol : kloroform 5:2 dan disimpan pada suhu
5°C selama semalam. Kristal yang diperoleh dipisahkan dengan
penyaringan. Kristal diendapkan dengan petroleum eter.
Kemurnian kristal individu dianalisis dalam HPLC.
Hasil dan Diskusi
Kurkuminoid memiliki sifat biologis yang sangat besar di
mana kurkumin (C) dilaporkan memiliki begitu banyak
khasiat obat. Baru-baru ini analog kurkumin dilaporkan untuk
aktivitas biologis. Demethoxycurucmin (DMC) adalah
penghambatan terbaik sel MCF-7 [9]. Bisdemethoxycurcumin
(BDMC) aktif untuk modulasi ekspresi gen MDR-1 [17].
Senyawa II dan III tidak tersedia secara komersial. Oleh
karena itu untuk mempelajari sifat biologis kurkuminoid
individu diperlukan senyawa isolat dengan kemurnian tinggi.
Dalam penelitian kami saat ini aseton adalah pelarut yang
cocok untuk ekstraksi kurkuminoid. Profil HPLC dari
kurkuminoid mentah yang diekstraksi menunjukkan
kurkumin (C), dan analognya DMC dan BDMC hadir di 22,8%,
14,2%, 6,5% masing-masing spiking dengan standar.
Penyaringan pelarut untuk ekstraksi
Pelarut yang berbeda dengan polaritas yang berbeda
digunakan untuk ekstraksi kurkuminoid dari rimpang kunyit.
Berbagai pelarut yang digunakan adalah Heksana,
Kloroform, Etil asetat, Metanol, Aseton. Setelah
mengkonsentrasikan masing-masing ekstrak, hasil total
ditentukan dan komposisi persentase kurkuminoid individu
yang ada dalam ekstrak dianalisis dengan HPLC yang
ditunjukkan pada tabel1, identitas setiap puncak dikonfirmasi
dengan penentuan waktu retensi dan dengan spiking dengan
standar. Kurkumin ditemukan sebagai senyawa utama dalam
semua ekstrak yang diuji diikuti oleh demethoxycurcumin
dan bisdemethoxycurcumin. Dalam penelitian kami saat ini
ekstrak aseton menghasilkan jumlah kurkuminoid individu
yang optimal dibandingkan dengan semua ekstrak lainnya.
Persentase C, DMC, BDMC dalam ekstrak aseton adalah
22,8%, 14,2%, 6,5%.
 Revathy dkk./J Exp Sci 2 (2011) 21-25

Tabel 1. Penyaringan pelarut yang berbeda dengan berbagai polaritas untuk ekstraksi Curcuminoids

Pelarut Kurkumin Demethoxycurcumin Bisdemethoxycurcumin Total Ekstrak keseluruhan

gm
Aseton 22,8% 14,2% 6.5% 43,5% 3.49
Khloroform 19,7% 12,15% 5,05% 36,9% 3.09
Heksana 6.5% 1,03% 0,04% 7,57% 0,90
metanol 15,68% 9,90% 4,73% 30,3% 4.31
Etil asetat 18,76% 11,6% 5,2% 35,5% 3.20
Hex/MeoH 18.1% 11,2% 6.1% 35,4% 3.62
Ekstrak total sampel kunyit ditentukan seperti yang dijelaskan dalam teks. Komposisi persentase masing-masing kurkuminoid diperkirakan dengan HPLC dan hasilnya adalah
rata-rata dari tiga percobaan.

Tabel 2: Pemisahan kurkuminoid dengan KLT menggunakan sistem pelarut yang berbeda

Fase seluler TLC Perbandingan nilai Rf

C DMC BDMC
Benzena: etilasetat 18 : 2 0,79 0,69 0,61
Diklorometana: metanol 19 : 1 0.8 0,7 0.6
Kloroform: metanol 19 : 1 0,75 0,55 0.27
Setiap pelat dikembangkan hingga ketinggian sekitar 8cm.
C = kurkumin, DMC = demethyoxycurcumin, BDMC = bisdemethyoxycurcumin.

Tabel 3: profil elusi kromatografi kolom silika gel.

bilangan pecahan Jumlah volume Kurkuminoid hadir Berat ekstrak Persentase dari total
dikumpulkan (mg) kurkuminoid oleh UV
(mL) spektroskopi
1 sampai 31 240 C 906.4 84%
32 hingga 40 360 C+DMC 173.5 22%
41 hingga 67 1080 DMC 597.5 86%
68 hingga 75 320 DMC+BDMC 192,7 46,6%
76 hingga 95 800 BDMC 390.5 80,61%
Setiap fraksi berisi 40 mL.
C = kurkumin, DMC = demethyoxycurcumin, BDMC = bisdemethyoxycurcumin.
Elusi dengan kloroform dan kloroform:metanol 98:2.

diendapkan dengan petroleum eter. Profil kemurnian kurkuminoid

Pemisahan kurkuminoid dengan KLT menggunakan sistem pelarut yang
berbeda.
Komposisi yang berbeda dari fase gerak diuji dalam KLT
untuk pemisahan masing-masing kurkuminoid dan nilai Rfnya
ditentukan ditunjukkan pada tabel 2. Resolusi pemisahan yang
diinginkan dicapai dengan menggunakan kloroform: metanol
95:5 sebagai fase gerak. Nilai Rf dari kurkuminoid adalah0,75,
0,55, dan 0,27, untuk C, DMC, BDMC masing-masing. Resolusi
nilai Rf yang lebih baik menunjukkan bahwa kloroform dan
metanol dapat menjadi pelarut yang sesuai untuk pemisahan
senyawa dalam kromatografi kolom.
Kromatografi kolom
Dalam penelitian ini ekstrak aseton diendapkan dengan
petroleum eter dan kurkuminoid mentah yang dihasilkan dikenai
kromatografi kolom, elusi dilakukan menggunakan kloroform
diikuti dengan kloroform: metanol dengan peningkatan polaritas
dan fraksi yang diperoleh diuji dengan KLT. Fraksi menunjukkan
pola yang sama dalam KLT dikumpulkan dan terkonsentrasi.
Komposisi fraksi yang dikumpulkan selama pemisahan
kromatografi kolom kurkuminoid mentah dan fraksi pekat diuji
untuk penentuan kurkuminoid total dengan spektroskopi UV
ditunjukkan pada Tabel 3.
Analisis spektroskopi UV fraksi yang dikumpulkan menunjukkan
persentase total kurkuminoid yang ada dalam fraksi. Dalam
persentase penelitian kami dari total kurkuminoid hadir dalam fraksi
dikumpulkan 84%, 86%, 80,6% dari C, DMC, dan BDMC masing-masing.
Oleh karena itu pemurnian lebih lanjut dilakukan dengan kristalisasi
berulang dengan kloroform dan metanol. Akhirnya
individu terisolasi dianalisis dengan HPLC ditunjukkan pada gambar2,
C, DMC, BDMC menunjukkan puncak tunggal pada waktu retensi
masing-masing 10,81, 12,79, 13,03 menit. Identitas setiap puncak
dikonfirmasi dengan penentuan waktu retensi dan dengan spiking
dengan standar. Kurkumin terbentuk sebagai kristal kuning cerah
berbentuk jarum, Demethoxycurcumin sebagai kristal kuning muda,
Bisdemethoxycurcumin sebagai kristal warna oranye kemerahan.
Senyawa murni ini dipelajari lebih lanjut untuk aktivitas biologis dan
sifat farmasi.
Pengakuan
Penulis berterima kasih kepada Kepala Sekolah dan Kepala,
Departemen Bioteknologi Tanaman, Presidency College, Chennai - 600
005 dan Ekstrak Alami Arjuna, Alwaye, Kerala - 683 101, untuk
menyediakan fasilitas laboratorium, dan bantuan teknis.
Referensi
[1] VS Govindarjan., 1980. Kunyit – kimia, Teknologi,
dan Kualitas. Tinjauan Kritis CRC dalam Ilmu
Pangan dan Gizi, 12(3), 199-301.
[2] L.Peret-Almeida, Cherubino, Alves RJ 2005. Pemisahan dan
penentuan karakteristik fisiko-kimia kurkumin,
demethoxycurcumin, bisdemethoxycurcumin.Penelitian
Makanan Internasional 38: 1039-1044.
[3] Merina Benny Antony., 2003. Tanaman Obat Asli:
ekstrak dan isolatnya sebagai produk ekspor bernilai
tambah. Jurnal Agro bios, jilid no.1, 39-41.
[4] Schieffer, GW, 2002. Ekstraksi cairan bertekanan dari
kurkuminoid dan produk degradasi kurkuminoid dari

24
Revathy dkk./J Exp Sci 2 (2011) 21-25
Kunyit (Curcuma longa) dengan pengujian HPLC berikutnya.
J.Liq. kromatografi. Technol.25 Terkait, 3033-3044.
[5] Johnson JJ, Mukhtar H. 2007. Curcumin untuk
kemoprevensi kanker usus besar. Kanker Lett
255:170– 81.
[6] Ravindran P, Babu KN, Sivaraman K. 2007. Dalam: Kunyit:
genus temulawak. Boca 150-155
[7] Revathy.S, Elumalai.S, Merina Benny dan Benny Antony
2011. Evaluasi Kurkuminoid pada Rimpang Kunyit (
Curcuma longa L.) dikumpulkan dari berbagai tempat di
India. Biosains, Penelitian Bioteknologi Asia vol 8(1),
[8] Jayaprakasha GK, Jaganmohan Rao L, Sakariah KK.
2002. Peningkatan metode HPLC untuk penentuan
kurkumin, demethoxycurcumin dan
bisdemethoxycurcumin. J Agric Food Chem 50:3668–72.
[9] Simon.A 1998. Efek penghambatan kurkuminoid pada
proliferasi sel MCF-7 dan hubungan struktur-aktivitas.
Kanker biarkan., 129, 111-116.
[10] Anand P, Aggarwal BB 2007. Ketersediaan hayati
kurkumin: masalah dan janji. Mol Pharmacol 4: 807-18.
[11] Benny Antony, Merina Benny, SBRao., 2005. Meningkatkan
penyerapan kurkuminoid, Jurnal Rempah-rempah India,
23-26.
[12] Gupta AP, Gupta MM, Kuma SJ. 1999. Penentuan
simultan kurkuminoid dalam sampel temulawak
menggunakan kromatografi lapis tipis kinerja tinggi.liq
Kromatogr Waktu Nyata 22:1561–9.
25
[13] Sompol Paramapojn dan Wandee Gritsanapan., 2009.
Penentuan aktivitas radikal bebas dan analisis
kuantitatif kurkuminoid pada Temulawak zedoaria
ekstrak rimpang dengan metode HPLC. Ilmu saat ini,
jilid. 97, 1069-1073.
[14] M.Madhava Naidu, Shyamala, Srinivas 2009. Metode
HPLC Sederhana untuk Resolusi Kurkuminoid dengan
Potensi Antioksidan. Jurnal ilmu makanan jilid 74(4).
[15] LD Kapoor, 1990. Buku Pegangan CRC tanaman Obat
Ayurveda, CRC Press, Inc., Boca Raton, Florida.
[16] Ammon HPT, Wahl MA 1991. Farmakologi Curcuma longa
. Planta Med 57:1-7.
[17] Pornngarm, Anuchapreeda 2004. Modulasi manusia
gen MDR-1 multidrug-resistance oleh kurkuminoid alami
kanker BMC 4:13.
[18] Deepak V.Dandekar, VGGaikar., 2003. Ekstraksi
Hidrotropik Kurkuminoid dari Kunyit, Pemisahan ilmu
pengetahuan dan teknologi jilid 38, 1185-1215.
[19] Wisut Wichitnithad 2009. Metode HPLC Isokratik
Sederhana untuk Penentuan Kurkuminoid Secara
Simultan dalam Ekstrak Kunyit Komersial.
fitokimia. anal; 20: 314-319.
[20] Janssen A, Gole TH. 1984. Penentuan
kromatografi lapis tipis kurkumin dari kunyit.
Kromatografi18:546–9.