Isolasi, Pemurnian dan Identifikasi

Curcuminoids dari Kunyit (Curcuma longa

L.) dengan Kolom Kromatografi

ANDRE WISNU MUKHTI

ADZILLA NUR FITRIANI
CINDY SYAFIRA PUTRI
 PENDAHULUAN

Curcuma longa L. adalah tanaman herba rimpang tebal dan

berdaging dan daun di selubung itu mencirikan keluarga
Zingiberaceae.
Kunyit adalah tanaman asli tropis Asia Selatan dan
membutuhkan suhu antara 20º C dan 30º C, dan sejumlah besar
curah hujan tahunan untuk berkembang. Kunyit umumnya
dikenal karena nilai obatnya dalam sistem pengobatan
tradisional di India . Curcumin (C), zat pewarna utama dalam
Curcuma longa dan dua yang terkait senyawa,
demethoxycurcumin (DMC) dan bisdemethoxycurcumin (BDMC),
semuanya dikenal sebagai curcuminoid.
 LANJUTAN…

Struktur kimia dari tiga curcuminoids ditunjukkan

pada Gambar 1. Total curcuminoids yang sekitar 4-
6%, kunyit juga mengandung 2-4% minyak atsiri dan
2-3% minyak tetap dan berbagai minyak atsiri,
termasuk kunyit, atlantone, dan zingiberone.
Konstituen lain termasuk gula, protein dan resin.
Nilai produk kunyit adalah berdasarkan konten
curcuminoids mereka dan diperkirakan berdasarkan
absorbansi pada 420 nms
STRUKTUR KIMIA
 APA SIH KURKUMIN ITU?

Curcuminoids adalah polifenol yang berwarna

kuning. Mereka memiliki kelarutan yang buruk dalam
air pada asam dan pH fisiologis, dan juga
menghidrolisis dengan cepat dalam alkali.
Curcuminoids larut dalam dimetil sulfoksida (DMSO),
aseton dan etanol. Mereka mudah terurai saat terpapar
cahaya terang, suhu tinggi atau kondisi oksidatif.
Penggunaan tradisional kunyit atau alami curcuminoid
dalam pengobatan tradisional banyak, dan beberapa di
antaranya termasuk antioksidan, sifat anti-inflamasi,
anti kanker efek dan efek hipoglikemik pada manusia .
 Isi dari total curcuminoids dalam bubuk kunyit
memainkan peran penting dalam aktivitas antioksidan
dan efektivitas produk. Meskipun demikian, kurkumin
memiliki lebih banyak sifat farmakologis, jumlah total
curcuminoids diserap oleh sistem hewan jauh lebih
sedikit.
Pencampuran kurkumin dengan minyak esensial
kunyit terstandarisasi meningkatkan penyerapan dan
bioavailabilitas dalam sistem hewan. Pilihan pelarut
untuk ekstraksi terbatas pada beberapa pelarut dengan
kemurnian yang ditentukan diizinkan oleh nasional dan
hukum pangan internasional dalam pengolahan bahan
makanan.
 Hexane, Aseton, alkohol, dan etilen diklorida pada
umumnya digunakan dalam ekstraksi oleoresin rempah-
rempah. Dari pertimbangan kelarutan konstituen aktif,
curcuminoids sangat larut dalam pelarut hidrokarbon.
Ekstraksi soxhlet bubuk kunyit dengan aseton memberi
hasil sekitar 5,0% mengandung 42% curcuminoids
dalam 4 hingga 5 jam. Aseton sebagai pelarut sedikit
lebih unggul dari alkohol dan etilen diklorida.
Sejumlah penelitian dilakukan untuk
memisahkanpigmen curcuminoid dengan kromatografi
lapis tipis (KLT), kromatografi lapis tipis kinerja tinggi
(HPTLC), dan kromatografi kolom (CC)
 Fase diam sebagian besar yang biasa digunakan
adalah silika gel dengan sistem pelarut yang berbeda
termasuk benzena, etil asetat, etanol, kloroform, asetat
asam, heksana, dan metanol untuk pemisahan
kromatografi.
Metode HPLC sensitif, tepat, dan akurat untuk
deteksi dan kuantifikasi curcuminoids dalam ekstrak
rimpang Curcuma longa . (HPLC) sebagian besar
dilakukan secara terbalik fase menggunakan campuran
air, asetonitril, etanol, dan metanol
 penyaringan sistem pelarut untuk ekstraksi
curcuminoids dari rimpang kunyit menggunakan
pelarut non-polar ke polar untuk ekstraksi lengkap,
dan isolasi, identifikasi dan pemurnian kurkuminoid
oleh kromatografi kolom diikuti dengan analisis
kemurnian oleh HPLC.
 MATERIAL

Rimpang temulawak (Kunyit) dikumpulkan dari

Assam - varietas Lakhadong. Semua pelarut / Bahan
Kimia yang digunakan adalah dari AR / HPLCgrade dan
diperoleh dari E-Merck. Itu standar referensi Curcumin
dibeli dari Sigma Chemicals Co. A.S.
 METODE

1. Ekstraksi curcuminoids Rimpang segar dibersihkan dicuci

dengan deionisasi air, diiris dan dijemur selama satu minggu
dan dikeringkan lagi pada 50 ° C dalam oven udara panas
selama 6 jam.
2. Rimpang kering dipotong dalam potongan-potongan kecil,
bubuk oleh pabrik elektronik. Sekitar 20gr sampel diambil
ke dalam bidal dan ditempatkan di alat soxhlet, didirikan
dengan berbagai pelarut dari nonpolar ke polar
3. 150 ml pelarut ditambahkan dan diekstraksi menurut titik
didih mereka selama 6 jam.

Pelarut yang digunakan adalah Heksana (B.P = 69 ° C),

Kloroform (B.P = 61 ° C), Etil asetat (B.P = 77 ° C), Metanol
(B.P = 65 ° C), dan Aseton (B.P = 56.53 ° C).

4. Setelah selesai Ekstraksi, ekstrak coklat gelap kemudian

didinginkan, disaring, terkonsentrasi menggunakan rotary
evaporator, dan terakhir dengan vaccum hisap untuk
mendapatkan ekstrak kering mentah yang berwarna oranye
hitam warna.
 PROSEDUR

1. Persiapan Sampel: Ditimbang secara akurat sampel 25mg dan

dilarutkan dalam aseton 25ml. Dari ini pipet 1ml dan diencerkan
hingga 5 ml dengan aseton. Disaring melalui membran 0,2μm
saring sebelum injeksi.
2. Kondisi kromatografi
Sampel dianalisis dengan HPLC dalam Shimadzer LC. Sistem
kromatografi cair 20A0 dengan detektor SPD-M20AuV dalam mode
isokratis. 20μl sampel disuntikkan dan dielusi dilakukan dengan
sistem pelarut gradien dengan laju aliran 1,0ml / menit pada suhu
sekitar. Kolom yang digunakan adalah C18 (250X4.6mm), fase
ponsel 40% THF dan 60% air mengandung 1% asam sitrat, pH
disesuaikan dengan 3.0 menggunakan larutan kalium hidroksida
pekat dan diukur dalam panjang gelombang 420nm.
TERIMAKASIH