HALAMAN JUDUL
oleh:
AMISAH DIA NINGSI
24185543A
Kepada
SKRIPSI
oleh:
AMISAH DIA NINGSI
24185543A
Kepada
i
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul :
oleh :
apt. Mamik Ponco Rahayu, M.Si. apt. Siti Aisiyah, S.Farm, M.Sc.
NIP/NIS: 1200409012092 NIP/NIS: 1200504012103
ii
HALAMAN PERSEMBAHAN
mimpimu akan menjadi nyata jika kamu sering berdo’a dan berusaha
1. Allah SWT atas Ridho-Nya yang telah membuat hamba menjadi manusia yang
kuat, tegar, dan sabar serta selalu berusaha.
2. Bapak Yanensi dan Ibu Risma Laili orang terpenting di hidup saya yang selalu
memberikan do’a, dukungan, serta semangat yang tiada hentinya, serta adik
tersayang Logis dan Nabila Anisa menjadi salah satu alasan saya untuk selalu
berjuang dan semangat agar bisa memberikan contoh yang baik buat mereka
3. Dosen pembimbing saya, Ibu apt. Mamik Ponco Rahayu, M.Si. dan Ibu apt.
Siti Aisiyah, S.Farm, M.Sc. yang selama ini selalu membimbing saya dengan
tulus dan rela meluangkan waktu, tenaga, serta ilmunya sehingga saya bisa
sampai di titik ini. Terima kasih atas nasihat, bantuan serta pengalaman yang
begitu berharga.
4. Teman dan sahabat, Ririn, Mahdi, Wulan, Tiara, Wilis, Rana, Nafta, Verdy,
Siska, Maulidya, Umar, dan Maulidha yang selalu membantu dan memberikan
semangat untuk saya. Terima kasih sudah mau direpotkan dan selalu ada setiap
kali saya minta bantuan kalian.
5. Teruntuk Bi Family, Bibik Dewi, Safar, dan Heri yang selalu memberikan
do’a, dukungan, serta semangat dari jauh untuk saya hingga sampai di titik ini,
semoga bisa kumpul lagi seperti dulu.
6. Teman satu tim penelitian Rahmah Nurfauziah, yang selalu sabar dan saling
membantu sehingga bisa menyelesaikan penelitian ini.
iii
7. Keluarga besar Pharcythree_2018 yang selalu bersama, kompak, saling
membantu, saling berbagi dari semester 1 hingga wisuda.
8. Seluruh laboran di laboratorium 9,7,8,1, 13 (pak Kino, pak Henricus, bu Fitri,
pak Asik, pak Sam, pak Joko, bu Emil) yang sudah membantu, memberikan
arahan, dan memfasilitasi dalam menyelesaikan penelitian tugas akhir.
iv
PERNYATAAN
Saya menyatakan bahwa skripsi ini hasil pekerjaan saya sendiri dan tidak
terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu
Perguruan Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau
pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali saya yang
secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Apabila skripsi ini merupakan jiplakan dari penelitian/ karya ilmiah/
skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademis maupun
hukum.
v
KATA PENGANTAR
Segala puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat
dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN OBAT
KUMUR EKSTRAK ETANOL BUAH MURBEI (Morus alba L.)
TERHADAP BAKTERI Streptococcus mutans ATCC 25175’’ Skripsi ini
disusun sebagai sebuah proses pembelajaran dan sebagai salah satu syarat untuk
menyelesaikan jenjang pendidikan sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi,
Universitas Setia Budi, Surakarta.
Skripsi ini tidak dapat terselesaikan tanpa bantuan, saran, serta dukungan
dari berbagai pihak baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu,
tidak lupa penulis ingin mengucapkan terima kasih yang sedalam-dalamnya
kepada :
1. Dr. Djoni Tarigan, MBA, selaku Rektor Universitas Setia Budi Surakarta.
2. Dr. apt. Prof. R. A. Oetari, SU., M.M, M.Sc, selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Setia Budi Surakarta.
3. apt. Nur Aini Dewi Purnamasari, M.Sc, selaku pembimbing akademik yang
senantiasa membimbing dan memberi nasihat sehingga penulis dapat
menyelesaikan pendidikan dengan baik.
4. Dr. apt. Wiwin Herdwiani, M.Sc, selaku Ketua Program Studi S1 Farmasi
Fakultas Farmasi Universitas Setia Budi.
5. apt. Mamik Ponco Rahayu, M.Si, selaku pembimbing utama yang telah
berkenan memberikan bimbingan, menasehati dan memberikan saran dalam
penyusunan skripsi ini.
6. apt. Siti Aisiyah, M.Sc, selaku pembimbing pendamping yang telah berkenan
memberikan bimbingan, menasehati dan memberikan saran dalam penyusunan
skripsi ini.
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................1
PENGESAHAN SKRIPSI.......................................................................................ii
HALAMAN PERSEMBAHAN.............................................................................iii
PERNYATAAN.......................................................................................................v
KATA PENGANTAR............................................................................................vi
DAFTAR ISI..........................................................................................................vii
DAFTAR TABEL...................................................................................................xi
DAFTAR GAMBAR.............................................................................................xii
DAFTAR SINGKATAN......................................................................................xiii
DAFTAR LAMPIRAN.........................................................................................xiv
ABSTRAK.............................................................................................................xv
ABSTRACT..........................................................................................................xvi
BAB I PENDAHULUAN........................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah................................................................................1
B. Perumusan Masalah......................................................................................4
C. Tujuan Penelitian..........................................................................................4
D. Kegunaan Penelitian.....................................................................................4
vii
2. Metode ekstraksi......................................................................................10
3. Pelarut ekstraksi......................................................................................11
D. Obat kumur.................................................................................................11
1. Pengertian obat kumur.............................................................................11
2. Fungsi Obat Kumur.................................................................................12
3. Penggolongan Obat Kumur.....................................................................12
4. Komposisi Obat Kumur...........................................................................13
E. Bakteri Streptococcus mutans.....................................................................14
1. Klasifikasi Bakteri...................................................................................14
2. Sifat dan Morfologi Bakteri....................................................................14
3. Patogenesis Streptococcus mutans..........................................................15
F. Antibakteri..................................................................................................16
G. Uji Aktivitas Antibakteri Metode Difusi....................................................17
H. Landasan Teori............................................................................................19
I. Hipotesis......................................................................................................21
viii
8. Pembuatan sediaan obat kumur...............................................................28
9. Evaluasi sediaan obat kumur...................................................................28
10. Pembuatan media uji............................................................................30
11. Identifikasi bakteri...............................................................................30
12. Pembuatan suspensi bakteri.................................................................32
13. Pengujian aktivitas bakteri...................................................................32
E. Analisis Hasil..............................................................................................33
F. Skema jalannya penelitian..........................................................................33
ix
I. Hasil Pengujian Aktivitas Antibakteri Secara Difusi Sumuran...............55
DAFTAR PUSTAKA............................................................................................60
LAMPIRAN...........................................................................................................64
x
DAFTAR TABEL
Halaman
xi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
xii
DAFTAR SINGKATAN
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Determinasi tanaman........................................................................64
Lampiran 2. Perhitungan bobot kering terhadap bobot basah buah murbei.........65
Lampiran 3. Perhitungan rendemen serbuk buah murbei.....................................66
Lampiran 4. Perhitungan persentase kadar air serbuk buah murbei.....................67
Lampiran 5. Perhitungan persentase rendemen ekstrak buah murbei...................68
Lampiran 6. Perhitungan persentase kadar air ekstrak buah murbei....................69
Lampiran 7. Alat penelitian..................................................................................70
Lampiran 8. Gambar proses ekstraksi...................................................................73
Lampiran 9. Gambar pengujian kandungan senyawa kimia buah murbei............75
Lampiran 10. Sertifikat Bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175..................76
Lampiran 11. Identifikasi Bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175..............77
Lampiran 12. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak buah murbei........................78
Lampiran 13. Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan obat kumur.........................79
Lampiran 14. Hasil uji statistik pH sediaan obat kumur.......................................80
Lampiran 15. Hasil uji statistik berat jenis sediaan obat kumur...........................83
Lampiran 16. Hasil uji statistik viskositas sediaan obat kumur............................86
Lampiran 17. Hasil uji statistik aktivitas antibakteri sediaan obat kumur............89
xiv
ABSTRAK
xv
ABSTRACT
xvi
BAB I
PENDAHULUAN
1
2013). Obat kumur adalah larutan yang memberikan efek antibakteri yang
digunakan sebagai pembersih atau pembilas mulut yang diharapkan dapat
mengurangi jumlah mikroorganisme di rongga mulut, terjadinya plak gigi, dan
mencegah karies gigi. Obat kumur biasanya digunakan sesudah menggosok gigi,
obat kumur bisa menggapai daerah permukaan di dalam rongga mulut yang susah
di gapai oleh sikat gigi, tidak hanya berfungsi untuk mengurangi jumlah
mikroorganisme di dalam mulut, tetapi juga bisa sebagai salah satu alternatif yang
baik untuk menghilangkan bau mulut yang tidak sedap, serta menyegarkan nafas
(Hidayanto et al., 2017).
Obat kumur pada umumnya banyak mengandung Chlorhexidine, akan tetapi
jika digunakan terus-menerus bisa menimbulkan efek samping. Penelitian Khan &
Hasan menjelaskan bahwa penggunaan senyawa sintetis Chlorhexidine pada
mulut dapat menimbulkan efek mutagenik, untuk menghindari hal tersebut maka
dibutuhkan obat kumur yang terbuat dari bahan yang memiliki aktivitas
antibakteri tanpa efek samping. Formulasi obat kumur dari ekstrak simplisia yang
mengandung efektivitas antibakteri merupakan salah satu metode yang bisa
dicoba untuk menghindari efek samping dari obat kumur yang mengandung
Chlorhexidine.
Indonesia adalah negara yang kaya dengan bermacam-macam tumbuhan
yang bisa dimanfaatkan sebagai obat antibakteri, anti jamur atau hal lainnya.
Tanaman murbei (Morus alba L.) adalah suatu tumbuhan yang banyak tumbuh di
Indonesia dengan memiliki bermacam manfaat bagi kesehatan manusia, seperti
untuk pengobatan demam, flu, batuk, sakit gigi, hipertensi, diabetes melitus,
hiperkolesterolemia, menyuburkan pertumbuhan rambut, dan lain sebagainya.
Murbei merupakan salah satu antioksidan yang bagus dan dapat digunakan
sebagai ramuan teh herbal dalam pengobatan antidiabetes. Daun murbei
mempunyai efek antibakteri, antioksidan, antivirus, dan inflamasi. Daun murbei
juga memiliki aktivitas antimikroba (Salem, 2013). Buah murbei adalah salah satu
bagian tanaman yang memiliki kandungan steroid, flavonoid, fenolat, kuinon,
monoterpen, dan seskuiterpen (Aulifa et al., 2015).
Menurut Aulifa et al., (2015) dari hasil penelitiannya buah murbei (Morus
alba L.) diekstraksi bertingkat menggunakan pelarut etanol, n-heksan serta etil
asetat menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans dan
Streptococcus sanguinis, dari ketiga pelarut yang dipakai, pelarut yang paling
efektif menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri S.mutans adalah pelarut
etil asetat dengan diameter zona hambat pada konsentrasi 25 % (19,08 mm),
12,5% (15,53 mm), 6,25% (11,40 mm) dan 3,125% (9,11 mm) dan konsentrasi
hambat minimum (KHM) 8 mg/ml pada bakteri S.mutans dan 9 mg/ml pada
bakteri Streptococcus sanguinis. Bahan alam murbei dapat digunakan untuk
pembuatan sediaan obat, seperti sediaan pasta gigi yang bisa digunakan dalam
mencegah bermacam masalah di dalam rongga mulut, seperti mengurangi
perkembangan organisme mikroskopis di rongga mulut, menghilangkan bercak
dan plak pada gigi, serta menghilangkan aroma yang tidak enak pada mulut
(Fajriani & Sartini 2015).
Penelitian ini menggunakan ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.)
untuk pembuatan obat kumur karena obat kumur lebih baik dalam mengeliminasi
mikroorganisme S.mutans dibandingkan pasta gigi (Pratiwi 2005). Pernyataan
Wiley (2009) obat kumur bisa sampai pada bagian-bagian umum susah dijangkau
oleh sikat gigi, contohnya ujung lekukan rongga mulut dan sela-sela gigi,
membuat penggunaan sikat gigi kurang baik dalam membersihkan rongga mulut
secara maksimal.
Penelitian Aulifa et al., (2015) menyatakan bahwa ekstrak etanol buah
murbei (Morus alba L.) menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri
S.mutans dengan diameter zona hambatnya masing-masing konsentrasi yaitu 25 %
(18,18 mm), 12,5% (14,42 mm), 6,25% (10,4 mm), 3,125% (8,54 mm), oleh
sebab itu peneliti tertarik untuk mengembangkan ekstrak etanol buah murbei
menjadi formulasi sediaan obat kumur dengan konsentrasi 12,5%, 6,25%, 3,125%
serta pada konsentrasi berapakah ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.) di
dalam formulasi obat kumur yang optimal serta efektif terhadap pertumbuhan
bakteri S.mutans.
B. Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang, maka masalah penelitian dapat dirumuskan
sebagai berikut:
Pertama, apakah sediaan obat kumur ekstrak etanol buah murbei (Morus
alba L.) bisa memberikan aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus
mutans ATCC 25175?
Kedua, pada konsentrasi manakah dari 12,5%, 6,25%, dan 3,125% ekstrak
etanol buah murbei (Morus alba L.) dalam formulasi sediaan obat kumur yang
optimal dan efektif terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans ATCC
25175?
C. Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah :
Pertama, untuk mengetahui sedian obat kumur dengan penambahan ekstrak
etanol buah murbei (Morus alba L.) dapat memberikan aktivitas antibakteri
terhadap bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175.
Kedua, untuk mengetahui pada konsentrasi manakah dari 12,5%, 6,25%,
dan 3,125% ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.) dalam formulasi sediaan
obat kumur yang optimal dan efektif terhadap pertumbuhan bakteri Streptococcus
mutans ATCC 25175.
D. Kegunaan Penelitian
Adapun manfaat dari penelitian ini adalah :
Pertama untuk peneliti, menambah wawasan dan pengetahuan mengenai uji
aktivitas antibakteri dan formulasi suatu sediaan obat kumur.
Kedua untuk institusi, dapat dijadikan referensi untuk penelitian-penelitian
uji aktivitas formulasi sediaan obat kumur sebagai antibakteri selanjutnya.
Ketiga untuk masyarakat, memanfaatkan buah murbei (Morus alba L.)
sebagai buah yang dapat digunakan sebagai zat aktif dalam kebersihan mulut
seperti sediaan obat kumur.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2. Nama Lain
Tanaman Morus alba L. diketahui memiliki berbagai nama di setiap
daerah yaitu murbei dan bebesaran (Jawa Barat dan Jawa Tengah), besaran
(Jawa timur), kerto (Gayo,Aceh), kitau (Lampung), sedangkan di pulau
Sulawesi dikenal dengan nama bassara (Makassar) dan papanre ule (Bugis),
kertu (Sumatra Utara).
3. Morfologi tanaman
Murbei adalah tanaman famili moraceae dan genus Morus sp. Tanaman
murbei banyak tumbuh di Indonesia yang bermacam-macam jenis diantaranya,
5
Morus cathayana, Morus alba, Morus multicaulis, Morus nigra, Morus
australis, dan Morus macroura (Arisandi et al. 2006). Tanaman murbei
berbentuk perdu ataupun semak dengan ketinggian tanaman dapat mencapai 5
– 6 meter dan memiliki cabang yang banyak, akan tetapi jika dibiarkan tumbuh
terus-menerus tanpa perawatan, tanaman ini bisa mencapai ketinggian 20 – 25
meter. Tanaman murbei bisa tumbuh dengan baik didaerah tropis dan
subtropis, dapat tumbuh didaerah dataran tinggi 10-3.600 mdpl dengan kondisi
tanah yang memiliki ketersediaan udara dan airnya cukup.
Tanaman murbei memiliki daun tunggal dengan tangkai dengan panjang
4 cm serta letaknya berseling. lembar daun berbentuk seperti bulat telur hingga
bisa berbentuk seperti jantung, tepi daun bergerigi, dengan pangkal daun
tumpul, ujung daun yang runcing, mempunyai tulang daun menyirip sedikit
terlihat, permukaan atas serta bawah daun kasar, warna hijau, panjangnya daun
2,5-20 cm, dan lebar 1,5-12 cm. Memiliki bunga majemuk bentuk tandan, yang
keluar dari ketiak daun, mahkota berbentuk taju, dan berwarna putih. Murbei
berbunga sepanjang tahun, satu pohon daun biasanya ada bunga jantan dan
betina, serta bunga sempurna yang terpisah. Buah murbei memiliki kandungan
air tinggi dengan rasa yang enak. Bijinya warna hitam dan kecil. Tumbuhan
murbei banyak dibudidayakan karena memiliki daun yang bisa dikonsumsi dan
berfungsi membersihkan darah pada orang yang sering mengalami bisul, serta
bisa menjadi sumber makanan bagi ulat sutera (Tjitrosoepomo, 1989).
4. Khasiat murbei
Morus alba merupakan jenis tanaman murbei yang dimanfaatkan untuk
pengobatan tradisional di China karena dipercaya memiliki aktivitas terapeutik
yang baik serta memiliki kadar toksisitas yang rendah, bermanfaat untuk
pengobatan seperti influenza, demam, batuk, penyakit usus, malaria, rematik,
darah tinggi (hipertensi), memperbanyak ASI, muntah darah, batuk berdarah
dan berdahak, keringat malam, kolesterol tinggi (hiperkolesterolemia), diabetes
mellitus, kaki gajah (elephantiasis), kurang darah (anemia), radang mata merah
(conjunctivitis acute), tidak menstruasi, gangguan saluran pencernaan dan
pernafasan, cacingan, muka bengkak (edema), haus dan mulut kering, insomnia
(gangguan tidur), sembelit, pusing, hepatitis, migrain, sakit tenggorokan, sakit
gigi, nyeri ulu hati (sakit pinggang) , dan menyuburkan akar rambut.
5. Kandungan kimia
Murbei (Morus alba L.) memiliki bagian tanaman dengan kandungan
kimia masing-masing seperti daun mengandung soquercitrin, astragalin,
scopolin, skimmin, roseoside II, linolenyl alkohol, protein larut total dan
benzyl glukopiranoside (AC Manjula,2011). Kulit batangnya mengandung
triterpenoid (α,-amyrin,sitosterol,sitosterol,-glukosida),flavonoid (morusin,
cyclomorusin, kuwanone A, B, C, oxydihyromorusin) dan cumarin
(umbelliferone dan scopoletin) (Tjitrosoepomo, 1989). Buah murbei
mengandung steroid, flavonoid, fenolat, kuinon, Monoterpen, dan seskuiterpen
(Aulifa et al., 2015). Biji mengandung urease (Tjitrosoepomo, 1989). Kulit
akarnya terkandung derivat flavon mulberrin, mulberro chromene,
cyclomulberrin, cyclomulberro chromen, morusin, dan mulberofuran A
(Tjitrosoepomo, 1989). serta ranting tanaman mengandung tanin serta vitamin
A (Tjitrosoepomo, 1989).
B. Simplisia
1. Pengertian simplisia
Simplisia adalah bahan alam yang telah dikeringkan digunakan dalam
pengobatan, tidak melewati pengelolaan sedikitpun, pengeringan bisa
dilakukan dengan penjemuran dibawah sinar matahari, diangin-anginkan, atau
memakai oven, kecuali dinyatakan lain suhu pengeringannya tidak lebih dari
60ºC. Simplisia nabati merupakan seluruh tanaman, bagian tanaman ataupun
eksudat tanaman. Eksudat tumbuhan adalah isi sel yang keluar secara tiba-tiba
dari tumbuhan atau dengan cara tertentu dikeluarkan dari selnya atau zat nabati
lain yang dengan cara tertentu dipisahkan dari tanamannya. Simplisia hewani
merupakan simplisia berupa hewan utuh, bagian hewan atau zat-zat berguna
yang dihasilkan dari hewan dan belum berupa zat kimia murni (DepKes RI,
2017).
2. Pengumpulan simplisia
Simplisia menurut bahan mentah didapat dari tumbuhan liar ataupun
tumbuhan yang dibudidaya. Simplisia yang diperoleh dari tumbuhan budidaya
sehingga kesamaan usia, waktu panen serta galur (asal- usul, garis generasi)
tumbuhan bisa dikontrol. Perolehan simplisia dari tumbuhan liar bakal banyak
hambatan serta akan kesulitan dalam mengendalikan variabilitas semacam asal
tumbuhan, usia serta tempat berkembang (Depkes RI, 2007).
3. Pembuatan simplisia
Pembuatan simplisia terdapat banyak proses. Proses awal yaitu
mengumpulkan bahan baku agar memastikan kualitas mutu bahan baku,
kemudian dilakukan sortasi basah adalah pemisahan kotoran ataupun bahan
asing dari bahan simplisia kemudian melakukan pencucian yang berfungsi
membersihkan kotoran yang menempel pada tanaman, paling utama adalah
bahan-bahan yang tercemar pestisida. Kemudian dilakukan perajangan yang
bertujuan memudahkan tahap pengeringan, pengemasan, penyimpanan, serta
memperluas permukaan bahan baku. Pengeringan berfungsi mengurangi
kandungan air sehingga bahan tidak gampang dihinggapi oleh kapang, bakteri
serta menghilangkan reaksi enzimatik hingga dapat tersimpan dengan waktu
yang panjang, kemudian sortasi kering adalah pemisahan bahan asing dan
bahan yang rusak sehabis proses pengeringan. Langkah terakhir merupakan
pengepakan serta penyimpanan, penyimpanan dilakukan sesuai jenis simplisia
(Surya Erlangga, 2017).
4. Pembuatan serbuk simplisia
Pembuatan serbuk simplisia ialah tahap awalan pembuatan ekstrak.
Serbuk simplisia dibikin dengan menggunakan simplisia utuh ataupun
simplisia diiris halus dan telah melewati tahap pengeringan dan ditumbuk
dengan menggunakan alat yang tidak menimbulkan kerugian atau kehilangan
zat senyawa penting, lalu diayak untuk memperoleh serbuk dengan tingkat
kehalusan tertentu. Tingkat kehalusan bubuk simplisia yaitu bubuk sangat
kasar, kasar, agak kasar, halus, serta sangat halus. Kecuali jika dinyatakan
dalam hal apapun, tingkat kehalusan bubuk simplisia bakal pembuatan ekstrak
adalah kehalusan bubuk simplisia seperti yang tercantum pada ayakan serta
derajat kehalusan serbuk (DepKes RI, 2017).
C. Ekstrak
1. Definisi ekstrak
Ekstraksi adalah suatu proses terjadinya pemisahan senyawa terlarut
(solut) ke dalam pelarut (solvent). Senyawa yang memiliki sifat anorganik atau
yang disebut dengan senyawa polar bisa terlarut oleh pelarut polar, namun
untuk senyawa organik atau pun non - polar bisa terlarut dalam pelarut non -
polar. Sifat ini disebut dengan istilah like dissolve like (Pecsok et al.,1976).
Ekstrak merupakan sediaan kental didapatkan dari mengekstraksi zat aktif
simplisia nabati atau pun simplisia hewan dengan memakai pelarut yang tepat
(Depkes RI, 2000).
Berdasarkan sifatnya, ekstrak dikelompok menjadi 4 jenis seperti ekstrak
kental, ekstrak cair, ekstrak encer, serta ekstrak kering. Ekstrak kental
(Extractum spissum) yaitu sediaan liat dalam kondisi dingin serta tidak bisa
dituang. ekstrak ini mengandung air sekitar 30%, Tingginya airnya
menimbulkan sediaan obat tidak stabil dikarenakan terdapat cemaran kuman
atau bakteri. Ekstrak cair (Extractum fluidum) merupakan sediaan dari
simplisia nabati mempunyai kandungan etanol sebagai pelarut ataupun
pengawet maupun sebagai pelarut serta pengawet. Kecuali dinyatakan lain
pada masing-masing monografi setiap ml ekstrak mempunyai kandungan zat
aktif dari 1 gram simplisia yang memenuhi persyaratan. Ekstrak encer
(Extractum tenue) merupakan sediaan yang mempunyai konsistensi seperti
cairan madu dan mudah mengalir. Ekstrak kering (Extractum siccum)
merupakan sediaan yang mempunyai konsistensi bentuk kering serta mudah
dihancurkan dengan tangan. Melalui proses penguapan dan pengeringan sisa
ekstrak akan terbentuk suatu produk, dan kadar kelembaban tidak lebih dari 5
% (Depkes RI, 2014).
2. Metode ekstraksi
Ekstrak adalah sediaan kental didapat melalui ekstraksi zat aktif simplisia
nabati atau pun simplisia hewan memakai solvent yang cocok, setelah itu
seluruh ataupun nyaris seluruh solvent diuapkan, serta masa ataupun sisa
serbuk diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi baku yang sudah
ditetapkan. Proses ekstraksi memakai pelarut bisa dilakukan dengan bermacam
metode seperti maserasi, perkolasi, refluks, sokletasi dan digesti. Secara garis
besar ekstrak diperoleh dari mengekstraksi bahan baku obat dengan metode
perkolasi. Segala perkolat umumnya dipekatkan melalui destilasi dengan
penurunan tekanan, supaya bahan sedikit mungkin terkena panas (Depkes RI,
2020).
Maserasi merupakan proses ekstraksi simplisia memakai pelarut yang
dilakukan dengan proses pengocokan ataupun pengadukan pada suhu ruangan
(kamar). Tujuan maserasi yaitu untuk mengekstraksi simplisia yang tidak tahan
dengan proses pemanasan. Maserasi kinetic merupakan suatu proses
pengadukan dilakukan secara continu (terus-menerus). Remaserasi merupakan
proses pengulangan dengan menambahkan pelarut setelah proses penyaringan
maserat pertama, dan seterusnya (Depkes RI, 2000).
Maserasi dilakukan melalui proses perendaman pada tanaman utuh
ataupun yang telah dihaluskan kasar menggunakan pelarut dalam bejana
tertutup dengan temperatur kamar selama paling sedikit tiga hari dan dilakukan
pengocokan berulang kali hingga semua bagian tanaman yang dapat larut
hancur dalam cairan pelarut. Tujuan dilakukan pengocokan ialah menjaga
keseimbangan konsentrasi bahan ekstraksi yang lebih cepat di dalam cairan.
Keadaan diam selama proses maserasi dapat menyebabkan turunnya
perpindahan bahan aktif. Pelarut yang digunakan umumnya ialah etanol
ataupun juga bisa air. Hasil maserasi disaring dan sisa ampasnya di press
untuk memperoleh bagian cairnya saja (Lully,2016).
Keuntungan dari maserasi yaitu proses pengerjaan serta peralatan yang
dipakai cukup sederhana. Sedangkan untuk kerugian maserasi ialah perlu
dilakukan proses pengocokan/pengadukan, penyaringan dan pengepresan, bisa
terjadinya residu pelarut di dalam ampas, dan membutuhkan waktu yang tidak
sebentar atau lama (Lully, 2016).
3. Pelarut ekstraksi
Pemilihan cairan pelarut dalam proses ekstraksi harus disesuaikan
dengan kelarutan dari simplisia yang ingin diekstraksi sehingga zat aktif dari
simplisia tersebut dapat tertarik atau terpisah dari bahan simplisianya. Faktor
utama pemilihan pelarut ialah selektivitas, mudah bekerja dalam proses cairan
tersebut, ekonomis, ramah lingkungan, dan keamanannya. Kestabilan zat aktif
simplisia adalah sifat penting agar mendapatkan obat yang tepat, oleh sebab itu
beragam zat aktif simplisia yang larut didalam air maupun etanol dikarenakan
kepolarannya. Etanol bisa menyesuaikan kestabilan bahan obat terlarut dan
tidak mengakibatkan peningkatan pada sel. Sifat etanol bisa menghalangi kerja
enzim serta mengendapkan albumin (Voigt, 1994).
Farmakope Indonesia menyatakan cairan penyari dalam proses ekstraksi
terdiri dari etanol, air, etanol-air, dan eter. Pada penelitian ini menggunakan
cairan penyari etanol dengan pertimbangan etanol lebih khusus, etanol 20%
atau lebih susah bagi kapang dan kuman untuk berkembang, netral, tidak
berbahaya, retensi besar, etanol dapat dicampur dengan air disemua pengujian,
proses pemekatan menggunakan lebih sedikit panas. Etanol bisa melarutkan
alkaloid esensial, flavonoid, steroid, glikosida, curcumin, coumarin,
antrakuinon, minyak menguap, dan klorofil. Tannin, saponin, lemak, dan
vaselin album sukar larut dalam etanol (Depkes RI, 2000).
D. Obat kumur
1. Pengertian obat kumur
Obat kumur adalah sediaan berbentuk cairan memiliki kandungan zat
antibakteri dirancang untuk membunuh mikroorganisme didalam mulut, sangat
mudah penggunaannya, serta bisa menggapai area permukaan di dalam rongga
mulut yang susah dicapai oleh sikat gigi. Obat kumur bisa mengandung zat
dinamis dari hasil rekayasa atau didapat dari bahan-bahan alami (Wardani
2012). Menurut definisi lain, obat kumur atau mouthwash merupakan larutan
dengan kandungan bahan penyegar nafas, astringent, demulsen atau surfaktan,
ataupun antibakteri yang berkhasiat sebagai pembersih mulut serta penyegaran
saluran nafas yang penggunaannya dengan cara berkumur (Akarina, 2011).
Kesehatan mulut adalah hal penting bagi manusia terutama untuk
kegiatan sehari-hari. Bermacam-macam masalah mulut yang sering terjadi di
dalam kehidupan sehari-hari, yaitu seperti nafas yang tidak enak dan infeksi
periodontal diakibatkan oleh plak gigi. Plak gigi merupakan lapisan tipis
lengket berisi kuman atau bakteri di permukaan gigi. Bakteri yang dapat
menyebabkan terbentuknya plak gigi yaitu bakteri S.mutans. Bakteri ini
biasanya membentuk koloni yang menempel kuat terhadap permukaan gigi
serta memiliki keahlian buat memfermentasikan gula jadi asam, merendahkan
pH permukaan gigi serta menimbulkan mineralisasi gigi. Metode agar
mengurangi terjadinya plak gigi ialah memakai obat kumur (mouthwash) yang
mengandung bahan berkhasiat antibakteri (Pradewa, 2008).
2. Fungsi Obat Kumur
Obat kumur tidak jauh berbeda dengan pasta gigi yang mempunyai
fungsi sebagai kosmetik ataupun terapeutik. Obat kumur sangat bermanfaat
untuk mulut karena mampu mencapai tempat yang susah untuk dibersihkan
oleh sikat gigi, akan tetapi penggunaan obat kumur belum bisa menggantikan
sikat gigi (Claffey,2003). Obat kumur yang banyak mengandung zat antibakteri
dapat mengurangi karies pada gigi serta infeksi gusi serius. Tujuan obat kumur
antibakteri adalah agar menurunkan pertumbuhan bakteri yang terdapat dalam
rongga mulut dan mencegah terbentuknya plak pada gigi (Wilkins et al., 1991).
3. Penggolongan Obat Kumur
Penggolongan obat kumur dibagi menjadi beberapa bagian seperti
pertama obat kumur yang digunakan sebagai kosmetik terdiri dari flavor, air,
zat pewarna, dan mengandung surfaktan yang berfungsi untuk meningkatkan
kelarutan. Kedua obat kumur dengan fungsi utamanya membunuh bakteri di
saluran pernapasan yang biasanya dalam jumlah banyak. Ketiga obat kumur
dengan sifat astringent berfungsi memberikan efek secara langsung pada
mukosa mulut dan penurunan flokulasi protein saliva. Keempat obat kumur
dengan bentuk sediaan pekat dan pemakaiannya harus diencerkan. Kelima obat
kumur sebagai terapeutik, formulasinya bertujuan agar mengobati infeksi,
mengurangi terjadinya karies gigi, serta mengurangi kondisi patologis gigi,
mulut, ataupun faring.
Penggunaan obat kumur dibagi menjadi 3, yaitu pertama penggunaan
untuk kosmetik, berfungsi membersihkan, menyegarkan, serta mengurangi bau
mulut. Kedua untuk terapeutik, sebagai perawatan penyakit terhadap mukosa
ataupun gingiva, mencegah karies gigi ataupun pengobatan infeksi saluran
nafas. Ketiga untuk kosmetik dan terapeutik (Sagarin dan Gershon, 1972).
4. Komposisi Obat Kumur
Tabel 1. Komposisi obat kumur (Mitsui, 1997)
Air atau Aquadest murni, Purified Pelarut, mengatur viskositas, konsentrasi dan
Aquades water, dll penyesuaian volume sediaan
Solubilizer/ Poloxamer 407, polysorbate, Pelarut flavoring agent, memberi efek bersih di
emulsifier PEG 40, hydrogenated castor mulut
oil
Flavoring Sodium saccharin, menthol, Menimbulkan rasa sejuk dan segar, menutupi
agent oleum menthae, xylitol rasa yang tidak enak dari komponen obat kumur
lainnya, mengurangi rasa ataupun efek terbakar
dari pemakaian alkohol dalam obat kumur
Pewarna FD dan C blue No.1 FD dan Zat warna membuat tampilan lebih menarik
C green No.3 CI 14720
Kategori Contoh Fungsi
Dapar Asam sitrat dan garamnya, Penstabil pH, tingkat keasaman ataupun pH
asam benzoat dan garamnya, mulut yang bagus ialah mendekati netral, yaitu
Na fosfat dan Na difosfat antar pH 6-7
F. Antibakteri
Antibakteri merupakan senyawa yang dimanfaatkan agar mengatur
perkembangan pertumbuhan bakteri dengan sifat merugikan. Pengelolaan
perkembangan mikroorganisme berfungsi agar menghindari tersebarnya penyakit
serta infeksi, membunuh mikroorganisme terhadap inang yang infeksi, serta
menghindari pembusukan serta penghancur bahan oleh mikroorganisme
(Sulistyo,1971). Antimikroba terdiri dari kelompok antibakteri, antimikotik, serta
antiviral (Ganiswara, 1995).
Proses dalam menghambat perkembangan bakteri bagi senyawa antibakteri
bisa berbentuk penghancur dinding sel melalui jalan menghalangi proses
terbentuknya ataupun mengubahnya sesudah terbentuk, pergantian permeabilitas
membran sitoplasma sehingga mengeluarkan bahan makanan didalam sel,
pergantian molekul asam nukleat serta protein, menghambat kegiatan enzim, serta
menghambat sintesis asam nukleat dan protein. Dibidang farmasi, bahan
antibakteri disebut antibiotik, adalah substansi kimia yang dihasilkan oleh
mikroba serta bisa membatasi perkembangan mikroba lainnya. Senyawa
antibakteri bisa bekerja secara bakteriostatik, bakteriosidal, serta bakteriolitik
(Pelczar & Chan, 1988).
Pernyataan Madigan et al., (2000), sifat toksisitas selektif, zat anti mikroba
memiliki tiga jenis dampak terhadap perkembangan mikroba yakni bersifat
bakteriostatik, bakteriosidal, dan bakteriolitik. Bakteriostatik adalah sifat yang
memberikan dampak dengan metode membatasi perkembangan namun bukan
membunuh. Senyawa bakteriostatik seringkali membatasi sintesis protein ataupun
mengikat ribosom karena menunjukkan peningkatan antimikroba terhadap kultur
mikroba yang terletak pada fase logaritmik. Sehabis peningkatan zat antimikroba
pada fase logaritmik dihasilkan jumlah sel total ataupun jumlah sel hidup yaitu
tetap.
Bakterisidal adalah sifat yang menimbulkan dampak pembunuhan sel
namun tidak terjadinya lisis sel atau pun rusaknya sel. Perihal ini ditunjukkan oleh
peningkatan antimikroba pada kultur mikroba yang terletak pada fase logaritmik.
Setelah peningkatan zat antimikroba pada fase logaritmik didapatkan jumlah sel
total tetap sebaliknya jumlah sel hidup menyusut. Sedangkan bakteriolitik
merupakan sifat yang dapat menimbulkan sel menjadi lisis ataupun rusak sel
sehingga jumlah sel menurun ataupun terjadinya kekeruhan sesudah peningkatan
antimikroba. Perihal ini ditunjukkan oleh peningkatan antimikroba pada kultur
mikroba terletak pada fase logaritmik. Sesudah peningkatan zat antimikroba
terhadap fase logaritmik, jumlah sel total ataupun jumlah sel hidup akan
menyusut.
G. Uji Aktivitas Antibakteri Metode Difusi
Uji aktivitas antibakteri adalah pengujian yang dilakukan untuk dapat
mengetahui zat tersebut bisa membunuh ataupun membatasi perkembangan
bakteri. Uji aktivitas antibakteri bisa dicoba melalui metode difusi serta metode
dilusi ataupun pengenceran. Metode difusi bertujuan menentukan aktivitas bakteri
uji terhadap agen antibakteri. Teknik ini dilakukan menggunakan kertas cakram
ke dalam medium agar yang sudah diinokulasi dengan bakteri, masukkan kertas
cakram serta isi dengan senyawa uji. Bagian zona bening dianggap sebagai
diameter zona hambat pada bakteri yang diujikan (Jawetz et al,. 1986).
Metode difusi dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu pradifusi, ketebalan
media agar, jumlah inokulasi, tekstur medium agar, temperatur inkubasi, lama
inkubasi, serta pengaruh pH. Perbandingan ketebalan media agar mempengaruhi
zat uji masuk ke dalam agar, sehingga dapat mempengaruhi diameter hambat.
Media agar yang dipakai terus menjadi tebal hingga daya hambat yang terjadi
bakal semakin kecil (Bonang et al., 1982).
Keuntungan metode difusi merupakan bisa dengan gampang memastikan
kemampuan antibakteri melalui pengukuran diameter zona radikal serta zona
irradikal, sedangkan pengamatan metode dilusi susah disebabkan warna ekstrak
yang mempengaruhi. Zona radikal ialah daerah sumuran ataupun cakram dimana
satupun tidak nampak perkembangan bakteri, sebaliknya zona irradikal adalah
wilayah sumuran ataupun cakram dengan perkembangan bakterinya terhambat
oleh zat anti mikroba namun tidak dimatikan. Kekurangan metode difusi yaitu
aktivitas antibakteri bisa dipengaruhi oleh ketebalan media serta aspek difusi obat
sebab suspensi bakteri tidak menyebar rata seperti metode dilusi (Jawetz et al,.
1986). Pengujian antibakteri dengan metode difusi dipergunakan untuk
memastikan aktivitas antibakteri berdifusi pada lempeng agar yang sudah
diinokulasi terlebih dahulu. Kemampuan antibakteri ditetapkan melalui
pengukuran diameter zona hambat bakteri disekitar cakram yang berisi zat
antibakteri. Metode difusi dibagi menjadi 3 metode.
Pertama Metode cakram dilakukan dengan cara cakram kertas yang
mempunyai kandungan obat konsentrasi tertentu ditempatkan pada lempeng agar
yang sudah di biakan bakteri. Diinkubasi sesuai waktu yang sudah ditentukan,
zona hambat jernih yang mengelilingi cakram dianggap sebagai aktivitas
antibakteri. Lebar daerah hambatan bergantung pada daya serapan obat kedalam
agar serta sensitivitas obat pada bakteri tersebut (Bonang et al., 1982), jelas jika
prosedur dipengaruhi oleh beberapa aspek fisika serta kimia di samping interaksi
antar obat dan bakteri (contohnya, sifat pembenihan serta kekuatan difusi,
parameter molekul serta kestabilan obat) (Jawetz et al., 1986).
Kedua Metode parit (Ditch- plate technique), sampel uji metode ini agen
antibakterinya diletakan pada parit yang didapat dari pemotongan media agar
dalam cawan petri pada bagian tengah secara membujur dan bakteri uji (maksimal
6 macam) dioleskan pada parit yang berisi agen antibakteri. Setelah itu dilihat
terdapat ataupun tidaknya zona hambat disekitar parit (Pratiwi 2008). Ketiga
metode cawan membuat sumuran pada media agar yang sudah ditanam bakteri
serta diberikan agen antibakteri yang hendak diuji.
H. Landasan Teori
Murbei (Morus alba L.) merupakan tanaman bentuk semak atau perdu,
memiliki banyak cabang dan tinggi bisa mencapai 5-6 meter, namun jika
dibiarkan tumbuh terus-menerus tingginya bisa mencapai 20-25 meter, dapat
tumbuh baik didaerah subtropis dan tropis. Tanaman ini bisa hidup di daerah
ketinggian 10-3.600 m dpl asalkan tanahnya mengandung ketersediaan air dan
udara yang cukup, dan banyak digunakan sebagai tanaman penghijau karena
memiliki perakaran yang dalam dan mampu menahan laju erosi tanah. Tanaman
murbei sudah banyak tersebar di Indonesia dan dikenal memiliki beberapa nama
dalam berbagai bahasa daerah seperti: Babasaran (Jawa barat), besaran (Jawa
timur), Kitau (Lampung), Kertu (Sumatera Utara) dan Gertu (Sulawesi).
Tanaman Murbei (Morus alba L.) adalah tanaman asal China serta
penggunaan tanaman murbei dalam pengobatan di China telah dilakukan
semenjak 659 SM (Kumar dan Chauchan, 2008). Morus alba L. merupakan jenis
tanaman murbei yang paling banyak digunakan dalam pengobatan tradisional di
China karena diyakini memiliki aktivitas terapeutik yang baik serta memiliki
kadar toksisitas yang rendah (Li, 2008). Murbei (Morus alba L.) adalah suatu
antioksidan yang bagus dan dapat dipakai sebagai ramuan teh herbal untuk
pengobatan antidiabetes (Islam, et al., 2008). Daun murbei mempunyai efek
antibakteri, antioksidan, antivirus, dan inflamasi. Daun murbei juga memiliki
aktivitas antimikroba (Salem,2013). Buah murbei (Morus alba L.) merupakan
buah yang memiliki kandungan steroid, flavonoid, fenolat, kuinon, monoterpen,
dan seskuiterpen (Aulifa et al., 2015)
Obat kumur adalah sediaan dalam bentuk larutan yang memiliki kandungan
zat khasiat antibakteri bertujuan membunuh mikroorganisme di dalam mulut,
sangat mudah penggunaannya, serta bisa menggapai area permukaan didalam
rongga mulut yang susah dicapai oleh sikat gigi. Obat kumur bisa mengandung
zat aktif dari sintetis ataupun bahan alam (Wardani 2012). Tujuan obat kumur
antibakteri adalah menghambat pertumbuhan bakteri di dalam rongga mulut serta
mencegah terbentuknya plak pada gigi (Wilkins, 1991).
Plak gigi merupakan lengketan berisi kuman atau bakteri serta produknya
yang tercipta di permukaan gigi. Bakteri yang dapat berperan dalam pembentukan
plak gigi adalah bakteri S.mutans. bakteri ini biasanya membentuk koloni yang
menempel erat di permukaan gigi serta memiliki keahlian fermentasi sukrosa jadi
asam, merendahkan pH permukaan gigi serta menimbulkan mineralisasi gigi.
Penelitian yang dilakukan oleh Aulifa et al., (2015) dari hasil penelitian
buah murbei (Morus alba L.) memiliki aktivitas antibakteri terhadap
Streptococcus mutans dan Streptococcus sanguinis. Pada pembuatan ekstrak buah
murbei dilakukan dengan proses maserasi bertingkat, menggunakan 310 gram
simplisia yang diekstraksi secara bertingkat selama 3x24 jam memakai pelarut n-
heksan, etil asetat, serta etanol 96% (1:10), setelah itu pengentalan maserat
menggunakan evaporator. Dilakukan pengujian antibakteri melalui metode difusi
agar pada ekstrak n-heksan, etil asetat, serta etanol buah murbei dengan masing-
masing konsentrasi 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125%, kontrol negatif (tween 80-1%
b/v) dan kontrol positif (amoksisilin 50 L), pengujian dilakukan triplo, lalu
inkubasi dengan temperatur 37ºC dalam waktu 18-24 jam, pengukuran diameter
zona hambat memakai jangka sorong. Hasil penelitian memperlihatkan bahwa
ekstrak buah murbei konsentrasi 25%, 12,5%, 6,25%, 3,125% memiliki aktivitas
antibakteri pada Streptococcus mutans dan Streptococcus sanguinis, dari ketiga
pelarut yang dipakai, pelarut yang paling efektif menunjukkan aktivitas
antibakteri adalah pelarut etil asetat dengan diameter zona hambat pada
konsentrasi 25% (19,08 mm), 12,5% (15,53 mm), 6,25% (11,40 mm) dan 3,125%
(9,11 mm) dan konsentrasi hambat minimum (KHM) terhadap bakteri
Streptococcus mutans sebesar 8 mg/ml dan Streptococcus sanguinis sebesar 9
mg/ml. Sedangkan diameter zona hambat dari pelarut etanol pada masing-masing
konsentrasi yaitu 25% (18,18 mm), 12,5% (14,42 mm), 6,25% (10,4 mm), 3,125%
(8,54 mm). Pada penelitian ini menggunakan obat kumur “L” sebagai kontrol
positif karena obat kumur “L” telah beredar dipasaran serta telah digunakan oleh
masyarakat luas. Obat kumur “L” dalam suatu penelitian dipakai dengan
konsentrasi 45% v/v dan dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. mutans
sebanyak 99,104% secara signifikan (Dewi et al., 2015).
I. Hipotesis
Berdasarkan permasalahan yang ada, dapat disusun hipotesis dalam
penelitian ini yaitu:
Pertama, sediaan obat kumur dengan penambahan ekstrak etanol buah
murbei (Morus alba L.) memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Streptococcus mutas ATCC 25175.
Kedua, 12,5% merupakan konsentrasi ekstrak etanol buah murbei (Morus
alba L.) dalam formulasi sediaan obat kumur yang optimal dan efektif terhadap
pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175, karena pada penelitian
sebelumnya konsentrasi 12,5% menunjukkan diameter zona hambat 14,42 mm.
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
1. Populasi
Populasi penelitian ini menggunakan buah murbei (Morus alba L.) yang
dapat dari Padepokan Morus Bery, Kab. Cirebon, Jawa Barat.
2. Sampel
Sampel penelitian menggunakan buah murbei (Morus alba L.) yang diambil
secara acak dengan memilih buah yang sudah matang berwarna merah kehitaman,
masih segar dan tidak busuk dari Padepokan Morus Bery, Kab. Cirebon, Jawa
Barat.
B. Variabel Penelitian
1. Identifikasi variabel utama
Variabel utama pertama penelitian yaitu ekstrak buah murbei (Morus alba
L.).
Variabel utama kedua penelitian yaitu formulasi obat kumur ekstrak etanol
buah murbei (Morus alba L.).
Variabel utama ketiga penelitian yaitu aktivitas antibakteri S.mutans dalam
formulasi obat kumur ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.).
2. Klasifikasi variabel utama
Variabel utama yang sudah diidentifikasi bisa dikategorikan kedalam
bermacam variabel yaitu variabel bebas, variabel kendali serta variabel
tergantung.
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variabel yang sengaja diubah-
ubah agar dipelajari pengaruhnya terhadap variabel tergantung.
Variabel kendali adalah variable yang mempengaruhi variabel tergantung
hingga diperlukan kualifikasi agar hasil yang didapat tidak tersebar serta dapat
diulang oleh penelitian lain secara tepat.
22
Variabel bebas dalam penelitian ini yaitu ekstrak buah murbei (Morus alba
L.) dalam formulasi obat kumur dengan berbagai konsentrasi.
Variabel kendali penelitian ini adalah kemurnian bakteri uji S.mutans,
kondisi laboratorium (meliputi enkas, alat dan bahan yang digunakan harus steril),
media yang dipakai dalam penelitian ini.
Variabel tergantung dalam penelitian ini yaitu diameter daya hambat
antibakteri yang dapat dilihat dari pertumbuhan S.mutans pada media uji.
3. Definisi operasional variabel utama
Pertama, buah murbei (Morus alba L.) ialah buah matang, berwarna merah
kehitaman, masih segar dan tidak rusak/busuk didapat dari Padepokan Morus
Bery, Kab. Cirebon, Jawa Barat.
Kedua, serbuk buah murbei adalah buah matang berwarna merah kehitaman
yang diambil lalu dicuci di air mengalir agar kotoran yang menempel hilang,
setelah itu dikeringkan dengan menggunakan oven, setelah kering dijadikan
serbuk serta diayak dengan ayakan no.40.
Ketiga, ekstrak etanol buah murbei merupakan serbuk buah murbei
diekstraksi secara maserasi memakai pelarut etanol 95% kemudian diuapkan
pelarutnya.
Keempat, formulasi adalah sediaan obat kumur dari ekstrak etanol buah
murbei (Morus alba L.).
Kelima, evaluasi mutu sediaan obat kumur adalah uji organoleptis, uji pH,
uji bobot jenis, pengujian viskositas, dan stabilitas sediaan.
Keenam, bakteri uji pada penelitian ini yaitu S.mutans yang didapat dari
Laboratorium Mikrobiologi Universitas Setia Budi Surakarta.
Ketujuh, uji aktivitas antibakteri merupakan uji menggunakan metode
difusi. Metode difusi berupa satu seri pengenceran dalam berbagai konsentrasi
yaitu 12,5%, 6,25%, 3,125%, kontrol positif (+), dan kontrol negatif (-).
Kedelapan, diameter zona hambat merupakan zona bening yang terbentuk di
sekitar cakram karena terdapat pertumbuhan bakteri uji dihambat oleh sampel uji.
23
C. Bahan dan Alat
1. Alat
Alat yang dipakai meliputi alat-alat gelas, blender, timbangan digital, pH
meter, piknometer, pipet tetes, Rotary Vacuum Evaporator, inkubator, jarum ose,
autoklaf, oven, krus porselin, ayakan mesh nomor 40, kertas saring, corong,
waterbath, wadah, pisau, cawan petri, kapas lidi steril, jangka sorong, batang
pengaduk, gelas ukur, viskometer ostwald, tabung reaksi, rak tabung, enkas,
bunsen, stamper, dan mortir.
2. Bahan
Bahan yang digunakan meliputi buah murbei (Morus alba L.), etanol 95%,
gliserin, tween 80, Na sakarin, peppermint oil, media MHA (Mueller Hinton
Agar), median BHI (Brain Heart Infusion), media BAP (Blood Agar Plate),
aquadest, DMSO 5%, reagen mayer, dragendorf, lieberman burchard asam klorida
pekat,serbuk magnesium, FeCl3 1 %, asam asetat anhidrat, dan asam sulfat pekat.
D. Jalannya Penelitian
1. Determinasi tanaman
Tahapan utama penelitian ini adalah determinasi tanaman yang digunakan
dalam penelitian yaitu tanaman murbei (Morus alba L.) Determinasi ini dilakukan
di B2P2TOOT Tawangmangu, Kab. Karanganyar, Jawa Tengah. Determinasi dan
deskripsi ini berfungsi untuk menetapkan keberadaan yang berkaitan dengan ciri
morfologi baik secara makroskopik tanaman murbei (Morus alba L.) terhadap
kepustakaan yang dibuktikan di laboratorium.
2. Pembuatan serbuk
Pembuatan serbuk simplisia adalah tahap awal pembuatan ekstrak. Serbuk
simplisia dibuat dengan menggunakan simplisia utuh atau simplisia diiris halus
yang telah melewati tahap pengeringan dan ditumbuk dengan menggunakan alat
yang tidak menimbulkan kerugian atau kehilangan zat senyawa penting, lalu
diayak agar memperoleh serbuk dengan tingkat kehalusan tertentu. Tingkat
kehalusan serbuk simplisia yaitu serbuk sangat kasar, kasar, agak kasar, halus, dan
sangat halus.
24
Pembuatan serbuk buah murbei dibuat dengan cara buah murbei dicucikan
bersih di air mengalir sampai kotoran dan debunya hilang, lalu buah murbei
dikeringkan dengan cara dioven sampai kering. Buah murbei yang telah kering
diserbukan memakai alat penyerbukan lalu diayak dengan ayakan nomor 40
hingga didapatkan serbuk buah murbei dengan derajat kehalusan relatif homogen.
Pembuatan serbuk berfungsi untuk memperluas partikel bahan yang kontak
dengan larutan penyari hingga bisa diperluas sampai penyarian berlangsung
efektif (DepKes RI, 2008).
3. Pembuatan ekstrak
Pembuatan ekstrak buah murbei menggunakan metode maserasi.
Dimasukkan 600 gram serbuk simplisia buah murbei kering kedalam maserator,
diekstraksi menggunakan pelarut etanol 95% sebanyak (1:10). Rendam selama 6
jam pertama sambil sesekali diaduk, lalu diamkan selama 18 jam, dilakukan
sebanyak 3x24 jam. Pisahkan maserat dengan cara pengendapan, sentrifugasi,
dekantasi ataupun filtrasi. Dilakukan kembali tahap penyarian kurang lebih dua
kali dengan jenis serta jumlah pelarutnya adalah setengah jumlah volume pelarut
yang pertama sama. Kumpulkan semua maserat, lalu diuapkan dengan penguap
vakum ataupun penguapan tekanan rendah hingga didapatkan ekstrak kental.
Hitung rendemen yang didapat ialah persen bobot (b/b) antara rendemen dengan
jumlah serbuk simplisia yang dipakai (Depkes RI,2017).
4. Penetapan sifat fisika serbuk dan ekstrak
4.1 Pemeriksaan organoleptis. Pemeriksaan organoleptis berfungsi
untuk mengetahui bau, warna, serta rasa dari sediaan serbuk dan ekstrak buah
murbei (Morus alba L.).
4.2 Pemeriksaan kadar air. Pengujian kadar air berfungsi agar
mengetahui persentase kadar air didalam serbuk serta ekstrak. Kadar air dapat
ditentukan melalui 2 metode yaitu metode gravimetri dan metode Sterling
Bidwell. Pertama metode gravimetri dilakukan dengan cara menimbang kurang
lebih 10 gram sampel, masukkan ke dalam wadah yang sudah ditara sebelumnya.
Keringkan pada suhu 105ºC selama 5 jam, dan ditimbang. Lanjutkan pengeringan
25
dan timbang pada selang waktu 1 jam sampai perbedaan antara 2 penimbangan
berturut-turut tidak lebih dari 0,25% (Depkes RI, 2017).
26
asam sulfat pekat 2 ml melalui dinding tabung. Hasilnya positif apabila timbul
warna biru dan hijau (triterpenoid), dan ungu atau merah (steroid) (Total et al.,
2000).
5.5 Identifikasi Saponin. Identifikasi senyawa Saponin Mengambil 1
ml ekstrak, campur dengan 10 ml aquades pada penangas air dan didihkan. Kocok
filtrate dan biarkan selama 15 menit. Saponin ditunjukkan positif adanya bentuk
busa yang stabil (Alamsyah et al., 2014).
5.6 Uji bebas alkohol ekstrak. Pengujian bebas alkohol terhadap
ekstrak buah murbei menggunakan cara esterifikasi untuk mengetahui bahwa
ekstrak yang digunakan dalam penelitian bisa terbebas dari etanol, karena
ditemukan memiliki efek antiseptik yang bisa mencegah bakteri. Proses pengujian
dilakukan dengan memasukkan ekstrak ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan
pereaksi pekat asam sulfat serta asam asetat, kemudian dipanaskan. Hasil uji
ditandai dengan ada tidaknya bau ester yang khas pada etanol (Depkes, 1995).
6. Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak
Pengujian aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol buah murbei dilakukan uji
pada bakteri S.mutans melalui metode difusi agar. Pada media MHA yang telah
steril dengan suhu lebih kurang 50°C. Tambahkan dengan 150 µL suspensi
bakteri, lalu homogenkan serta diamkan hingga memadat. Buatlah 4 lubang
dengan diameter 8 mm menggunakan alat perforator, lalu masing-masing lubang
diisi ekstrak dengan konsentrasi 12,5%, 6,25%, dan 3,125%. Pengujian dilakukan
secara triplo, dan inkubasi dengan temperatur 37°C dalam waktu 18-24 jam.
Kemudian memakai jangka sorong untuk mengukur diameter zona hambatnya
(Aulifa et al., 2015).
7. Formula obat kumur ekstrak buah murbei (Morus alba L.)
Formula yang dipakai mengacu pada penelitian yang sudah dilakukan oleh
Anastasia et al (2017) dengan judul penelitian Formulasi Sediaan Mouthwash
Pencegah Plak Gigi Ekstrak Biji Kakao (Theobroma cacao L) Dan Uji Efektivitas
Pada Bakteri Streptococcus mutans: Mouthwash Formulation of Tooth Plaque
Preventing of Kakao (Theobroma cacao L) Seed Extract and Effectivity Test on.
Konsentrasi ekstrak etanol buah murbei yang digunakan mengacu pada penelitian
27
Aulifa D L & Febriani Y (2015) dengan judul penelitian Aktivitas Antibakteri
Ekstrak N- Heksan, Etil Asetat, Dan Etanol Morus Alba L. terhadap Bakteri
Penyebab Karies Gigi.
Tabel 2. Rancangan formula obat kumur ekstrak buah murbei
Formula % (b/v)
Bahan F1 F2 F3 -
Ekstrak buah murbei 3,125 6,25 12,5 -
Gliserin 5 5 5 5
Tween 80 1 1 1 1
Na sakarin 0,1 0,1 0,1 0,1
Na benzoat 0,1 0,1 0,1 0,1
Peppermint oil 0,15 0,15 0,15 0,15
Aquadest 100 100 100 100
Keterangan :
F1 : Formula obat kumur dengan ekstrak etanol buah murbei 3,125 %
F2 : Formula obat kumur dengan ekstrak etanol buah murbei 6,25 %
F3 : Formula obat kumur dengan ekstrak etanol buah murbei 12,5 %
Kontrol + : obat kumur yang ada di pasaran “L”
Kontrol - : Formula obat kumur tanpa ekstrak
28
9.2 Pemeriksaan Homogenitas. Pemeriksaan homogenitas diujikan
melalui sediaan yang dilihat pada cahaya terang agar mengetahui semua zat yang
ada dalam sediaan obat kumur terlarut dengan baik dan tidak ada partikel yang
mengendap di dasar wadah (Hidayanto et al., 2017)
9.3 Pemeriksaan bobot jenis. Pemeriksaan bobot jenis menggunakan
alat piknometer yang sudah dikeringkan dan ditimbang, lalu dinginkan hingga
suhu 25°C dan sampel dimasukkan ke dalam piknometer, tutup rapat lalu
timbang. Lakukan pemeriksaan pembanding menggunakan aquadest (Hidayanto
et al., 2017).
9.4 Pemeriksaan pH. Kalibrasi pH meter menggunakan larutan
standar buffer, bilas dengan air suling bebas CO2 serta keringkan elektroda pakai
tisu, dicelupkan elektroda ke dalam sampel sambil diaduk, dicatat hasil
pembacaan pH pada tampilan pH meter (Hidayanto et al., 2017).
9.5 Pemeriksaan viskositas. Pengujian viskositas menggunakan
viskometer Ostwald. Sebanyak 10 ml dimasukan ke dalam viskometer Ostwald
dan dibiarkan mengalir hingga melewati batas yang tertera pada viskometer lalu
dihitung waktunya (Lestari et al., 2018). kemudian viskositas ditentukan dengan
rumus berikut :
29
10. Pembuatan media uji
10.1 Pembuatan media Mueller Hinton Agar (MHA). Media MHA
dibuat dengan cara menimbang sebanyak 38 g lalu masukkan kedalam panci
tambahkan 1 L aquades dipanaskan diatas penangas air sambil diaduk agar tidak
terjadi gumpalan, diaduk terus sampai semua media melarut sempurna dan
mendidih. Kemudian sterilkan media menggunakan autoklaf tekanan tinggi
dengan suhu 121ºC selama 20 menit. Media MHA dituangkan pada cawan petri
steril, diamkan di suhu kamar hingga memadat, lalu simpan pada suhu 4ºC
(didalam lemari pendingin) (Utomo et al., 2018).
10.2 Pembuatan media Brain Heart Infusion (BHI). Mengambil
sebanyak 4,44 Gram media BHI masukkan kedalam erlenmeyer 250 ml lalu
larutkan dengan 129 ml aquadest, buatlah sesuai kebutuhan dan ukur pH
menggunakan indikator pH 7,4 ±0,2. Kemudian panaskan hingga larut dengan
baik, lalu disterilkan menggunakan autoklaf suhu 121°C selama 15 menit (Yunus
et al., 2017)
10.3 Pembuatan media Blood Agar Plate (BAP). Media BAP dibuat
dengan cara menimbang serbuk BAP sebanyak 20 gram lalu masukkan kedalam
erlenmeyer, ditambahkan aquadest sampai tanda 500 ml, aduk sampai merata dan
dipanaskan hingga homogen. Sterilkan larutan di dalam autoklaf tekanan tinggi
dengan suhu 121ºC selama 15 menit. Larutan ditambahkan darah 35 ml dan
dihomogenkan dengan cara digoyang perlahan, kemudian dipindahkan larutan
sebanyak 1 ml ke dalam cawan petri (Yunus et al., 2017)
11. Identifikasi bakteri
11.1 Identifikasi dengan agar darah. Identifikasi dengan media agar
darah bertujuan untuk mengetahui bakteri yang digunakan adalah benar bakteri
S.mutans. Suspensi bakteri digores pada permukaan media menggunakan kapas
lidi steril. Inkubasi bakteri dalam waktu 24 jam dengan temperatur 37°C.
Pengujian bakteri S.mutans menunjukkan hasil positif apabila terbentuk hemolisis
alfa (α) disekitar koloni bakteri yang menghasilkan warna kehijauan (Jawetz et
al., 2007).
30
11.2 Identifikasi dengan pewarnaan Gram. Pewarnaan gram pada
bakteri bertujuan untuk mengetahui bakteri bersifat Gram negatif atau positif.
Pengujian dimulai dengan mempersiapkan jarum ose, bakteri, objek glass, serta
bahan lainnya. Sterilkan jarum ose dengan api bunsen hingga membara merah,
lalu dianginkan sebentar dekat api supaya tetap aseptis. Bakteri diambil
menggunakan ose dan ratakan diatas objek glass yang telah dibersihkan
menggunakan etanol 70%. Bakteri yang berada diatas permukaan objek glass
ditetesi dengan 1 tetes aquadest, kemudian dilewat-lewati di atas api bunsen.
Pewarnaan bakteri dimulai dengan meneteskan gram A (cairan kristal violet
didiamkan selama 1 menit, bilas secara pelan-pelan di air mengalir. Tetesi
menggunakan gram B (Lugol-iodin) didiamkan selama 1 menit, bilas secara
pelan-pelan di air mengalir. Tahap berikutnya tetes menggunakan gram C (alkohol
70%) didiamkan sampai warnanya memudar, lalu tambahkan larutan gram D
(larutan safranin), dikeringkan sekitar bakteri yang diwarnai. Lakukan
pengamatan dibawah mikroskop, objek glass berisi bakteri yang diwarnai ditetes
menggunakan larutan imersi terlebih dahulu. Fungsi larutan imersi adalah agar
bakteri yang diamati akan terlihat lebih jelas serta menghindar terjadinya indeks
bias. Pengamatan menggunakan mikroskop perbesaran 100x. Bakteri Gram positif
terlihat berwarna ungu dan untuk bakteri gram negatif terlihat berwarna merah
muda (Jawetz et al. 2007).
11.3 Identifikasi dengan uji biokimia. Identifikasi biokimia terdiri dari
uji katalase dan koagulase. Pengujian katalase dilakukan dengan cara
mempersiapkan tabung reaksi yang sudah diisi media BHI dan ditanami suspensi
bakteri kemudian ditambahkan dengan H2O2 (hidrogen peroksida) 3%. Pada
identifikasi katalase bakteri S.mutans menunjukkan hasil positif apabila terdapat
gelembung udara pada tabung reaksi. Pengujian koagulase dilakukan dengan cara
200 µl plasma sitrat dimasukkan kedalam tabung reaksi steril secara aseptis
kemudian sebanyak 2-3 ose suspensi bakteri uji dimasukkan kedalam tabung dan
dicampurkan. Tabung reaksi selanjutnya diinkubasi pada suhu 37ºC, diamati pada
4 jam pertama dan sesudah 18-24 jam. Hasil positif ditandai dengan terbentuknya
gumpalan plasma di dasar tabung reaksi (Jawetz et al., 2007).
31
12. Pembuatan suspensi bakteri
Pembuatan suspensi bakteri bertujuan untuk menentukan jumlah bakteri dan
dibandingkan dengan standar Mc Farland 0,5. Pembuatan suspensi dilakukan
dengan cara koloni dari biakan murni ± 2-3 ose dimasukkan pada tabung reaksi
yang sudah berisi media BHI 10 ml, Homogenkan suspensi bakteri, lalu inkubasi
dengan temperatur 37°C selama 5-8 jam di dalam inkubator. Konsentrasi suspensi
bakteri yang digunakan untuk pengujian harus sesuai dengan konsentrasi standar
menurut Mc Farland 0,5, jika konsentrasinya lebih dari standar Mc Farland 0.5,
maka ditambahkan media BHI (Brain Heart Infusion) hingga sama dengan standar
Mc Farland.
13. Pengujian aktivitas bakteri
Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi sumuran.
Teknik ini dilakukan dengan mencelupkan kapas lidi steril kedalam suspensi
bakteri kemudian diinokulasikan pada media MHA menggunakan teknik perataan
(Spread Plate Method). Diamkan media selama 10 menit dengan suhu kamar agar
suspensi biakan berdifusi kedalam media. Cawan petri berisi media yang sudah
memadat dan sudah dioleskan suspensi bakteri dibalik untuk dibuat 5 daerah uji
yaitu 3 konsentrasi sampel, 1 kontrol positif, dan 1 kontrol negatif. Buatlah 5
lubang dengan diameter 8 mm menggunakan alat perforator, lalu ditetesi dengan
sediaan obat kumur ekstrak etanol buah murbei sebanyak 50 μL menggunakan
mikropipet dengan varian konsentrasi masing-masing, yaitu 12,5%, 6,25%, dan
3,125% sebagai sampel uji, 1 kontrol negatif yaitu formula obat kumur tanpa
penambahan ekstrak etanol buah murbei dan 1 kontrol positif menggunakan
larutan obat kumur di pasaran “L”. Inkubasi dalam waktu 18-24 jam temperature
37° C. Setelah inkubasi selesai, amati dan ukur diameter zona bening disekitar
lubang memakai jangka sorong 4 sisi. Diameter zona hambat diakui dengan
satuan mm. Uji daya hambat ekstrak buah murbei (Morus alba L.) terhadap
bakteri S.mutans dilakukan dengan tiga kali pengulangan setiap konsentrasi yang
diujikan (Ditjen POM, 1995).
32
E. Analisis Hasil
Analisis hasil pengujian dari bermacam parameter yaitu pH, viskositas, serta
pengujian difusi dianalisis menggunakan perbandingan hasil yang didapatkan
melalui bermacam literatur yang telah diperoleh serta dianalisis memakai SPSS.
Data yang diperoleh dianalisis dengan menggunakan Kolmogorov Smirnov. Hasil
yang didapatkan bila terdistribusi normal (p>0,05) maka dilanjutkan
menggunakan tahap analysis of variance (ANOVA) One Way pada analisis
statistik stabilitas sediaan agar mengetahui signifikansi stabilitas sediaan tiap
formula dengan taraf kepercayaan 95%. Dilanjutkan pengujian Tukey agar
mengetahui konsentrasi manakah yang mempunyai pengaruh sama ataupun
berbeda antara satu dengan yang lain. Jika hasil tidak terdistribusi normal
(p<0,05) maka lanjutkan pengujian Wilcoxon test agar mengetahui konsentrasi
manakah yang mempunyai pengaruh sama ataupun berbeda antara satu dengan
yang lain.
33
Buah murbei yang sudah matang
Buah Murbei
dibersihkan dengan air mengalir dari
kotoran yang menempel, Buah murbei di
keringkan hingga kering menggunakan
oven, Buah murbei yang sudah kering
kemudian di haluskan dan di ayak
Serbuk kering buah murbei menggunakan ayakan nomor 40
diekstraksi secara maserasi
bertingkat menggunakan
pelarut berturut-turut etanol
95% sebanyak (1:10).
Rendam selama 6 jam
pertama sambil sekali-kali Serbuk Buah murbei
diaduk, kemudian diamkan
selama 18 jam, dilakukan
sebanyak 3x24 jam, dilakukan
penyaringan maserat.
Ekstrak cair
Semua ekstrak cair di Uji aktivitas
pekatkan menggunakan antibakteri
Vacum Rotary Evaporator Uji Alkaloid
Uji Flavonoid
Ekstrak kental
Uji Polifenol
Uji Terpenoid
34
2. Skema pembuatan sediaan obat kumur
Pembuatan Obat kumur
Analisi Data
35
3. Skema pegujian aktivitas antibakteri metode difusi
36
BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
37
semakin banyak air yang hilang dan mengakibatkan nilai susut pengeringan
semakin rendah. Hasil perhitungan rendemen dapat dilihat pada lampiran 2.
Tabel 3. Rendemen bobot kering terhadap bobot basah.
Pemeriksaan Hasil
Bentuk Serbuk halus
Warna merah kecoklatan
Bau khas manis buah murbei
Rasa manis asam
Berdasarkan dari hasil pemeriksaan organoleptik dapat dikatakan bahwa
serbuk buah murbei memiliki bentuk serbuk yang halus, berwarna merah
kecoklatan, bau khas manis buah murbei, dan memiliki rasa yang asam manis.
38
(susut pengeringan) dilakukan dengan alat moisture balance. Hasil pemeriksaan
kelembaban serbuk buah murbei dapat dilihat pada tabel 6.
Tabel 6. Hasil pemeriksaan kelembaban serbuk buah murbei
Replikasi Berat serbuk (g) Volume air (ml) Kadar air (% b/v)
1 10 0,3 3
2 10 0,3 3
3 10 0,4 4
Rata – rata ± SD 3,3 ± 0,5773
Berdasarkan hasil penetapan kadar air dengan metode destilasi serbuk buah
murbei didapatkan dengan rata-rata 3,3 ± 0,5773% , dimana hasil tersebut <10%
sehingga kadar air serbuk buah murbei memenuhi persyaratan (Depkes RI, 2008).
39
dalam simplisia dan tidak bersifat toksik seperti metanol sehingga bisa digunakan
dengan baik untuk pengujian in vitro maupun in vivo. Hasil pembuatan ekstrak
kental buah murbei menghasilkan rendemen sebesar 35%. Hasil ekstrak buah
murbei dan perhitungan rendemen ekstrak buah murbei dapat dilihat pada tabel 8
dan lampiran 5.
Tabel 8. Rendemen bobot ekstrak terhadap bobot serbuk
Pemeriksaan Hasil
Bentuk Ekstrak kental
Warna Coklat kehitaman
Bau Khas buah murbei
Rasa Pahit
Berat
Berat crush crush + Berat
Berat Berat Berat
+ ekstrak ekstrak ekstrak Kadar air
Replikasi crush crush + ekstrak
(setelah di (setelah setelah (%)
kosong ekstrak awal
oven 5 jam) di oven 1 dioven
jam)
I 13,4047 23,4945 10,0898 22,6057 22,6034 9,201 3,783
II 13,9106 23,9187 10,0081 23,0382 23,0366 9,1276 3,6812
III 13,3044 23,361 10,0566 22,4946 22,4928 9,1902 3,7087
40
Rata – rata ± SD 3,72± 0,0526
Hasil yang diperoleh dari penetapan kadar air buah murbei yaitu dengan
rata-rata 3,72%. Kadar air ini ditetapkan untuk menentukan stabilitas dari suatu
ekstrak. Pengujian kadar air ekstrak ini termasuk dalam parameter non-spesifik
yang tidak berkaitan dengan aktivitas farmakologi secara langsung, tetapi
mempengaruhi dari segi keamanan dan stabilitas dari suatu ekstrak. Tinggi dan
rendahnya kadar air dari suatu ekstrak dipengaruhi oleh jenis pelarut yang
digunakan pada proses ekstraksi.
3. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak buah murbei
Identifikasi kandungan kimia ekstrak buah murbei dilakukan dengan tujuan
untuk mengetahui kandungan senyawa di dalam ekstrak menggunakan uji tabung.
Komponen kimia yang teridentifikasi dalam penelitian ini adalah alkaloid,
flavonoid, fenolik, terpenoid, serta saponin. Berdasarkan hasil pengujian,
identifikasi ekstrak buah murbei positif mengandung alkaloid, flavonoid, fenol
dan terpenoid, tetapi negatif terhadap saponin. Tabel 11 di bawah ini
menunjukkan hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak buah murbei.
41
Tabel 11. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak buah murbei
Identifikasi
Reagen yang
No golongan Hasil uji Keterangan Pustaka
digunakan
senyawa
Terdapat endapan
Terdapat
berwarna putih
- Reagen mayer 5 tetes endapan putih
(Reagen mayer)
1 Alkaloid - Reagen Dragendorf 5 (+) dan jingga
Terdapat endapan
tetes (Nastiti et al.,
jingga (Reagen
2019)
Dragendorf t)
Terdapat
Logam Mg Dan HCl Terbentuk warna warna merah
2 Flavonoid (+)
Pekat merah tua (Nastiti et al.,
2019)
Terbentuk
warna hijau
Terbentuk warna
3 Polifenol FeCl3 1% (+) kehitaman
hijau kehitaman
(Nastiti et al.,
2019)
Terbentuk
Terbentuk warna warna merah
4 Terpenoid Liebermann Burchard (+)
merah (Nastiti et al.,
2019)
Terbentuk
Tidak terbentuk
5 Saponin HCl + aquades (-) busa (Nastiti
busa
et al., 2019)
42
Uji senyawa alkaloid memakai reagen Mayer dan Dragendorf. Prinsip
metode ini adalah reaksi pengendapan yang terjadi karena ada penggantian ligan
(Sangi et al., 2012). Atom nitrogen memiliki pasangan elektron bebas pada
alkaloid dapat mengganti ion iod dalam reagen Mayer dan Dragendorf. Pengujian
alkaloid dengan Mayer menunjukkan endapan putih karena nitrogen alkaloid
bereaksi dengan ion logam K+ dari kalium tetraiodomerkurat (II) membentuk
kompleks kalium-alkaloid (Saleh & Marliana, 2011). Pengujian alkaloid dengan
Dragendorff menunjukkan endapan jingga karena nitrogen membentuk ikatan
kovalen koordinat dengan K+ ion logam. Endapan tersebut adalah kalium-alkaloid
(Saleh & Marliana, 2011).
4. Hasil pengujian bebas etanol ekstrak buah murbei
Pengujian bebas etanol dilakukan bertujuan untuk menyakinkan bahwa
ekstrak benar terbebas dari kandungan etanol, sehingga hasil pengujian antibakteri
tidak dipengaruhi oleh adanya kandungan etanol. Pengujian ini dilakukan
menggunakan metode esterifikasi yaitu, ekstrak buah murbei ditambahkan H2SO4
serta CH3COOH lalu dipanaskan dan tidak tercium bau ester. Hasil pengujian
bebas etanol ekstrak buah murbei memperlihatkan bahwa ekstrak tidak
mengandung etanol atau dapat dikatakan bebas dari etanol yang ditandai dengan
tidak tercium bau ester.
43
juga berperan sebagai pengatur kekentalan. Gliserin dipilih karena tidak mudah
teroksidasi sehingga sediaan obat kumur akan tahan lama pada penyimpanan.
Gliserin dalam formula ini digunakan sebanyak 5% karena pada literatur
penggunaan gliserin sebagai humektan dianjurkan kurang dari 30% (Rowe et al.,
2009).
Tween 80, pada formula ini digunakan sebagai surfaktan untuk meningkat
kelarutan sehingga bahan penyusun dalam sediaan obat kumur dapat larut
sempurna dan dapat juga berperan sebagai pengatur kekentalan. Kombinasi tween
80 dan gliserin dapat menghasilkan sediaan obat kumur dengan stabilitas yang
baik. Penggunaan tween 80 pada formula ini sebanyak 1% karena pada literatur
penggunaan tween 80 sebagai surfaktan dianjurkan 1%-15% (Rowe et al., 2009).
Natrium benzoat, pada formula ini berperan sebagai pengawet. Natrium
benzoat digunakan sebanyak 0,1% karena pada literatur penggunaan natrium
benzoat sebagai pengawet dianjurkan 0,1%-0,5%. Natrium sakarin, pada formula
ini berperan sebagai pemanis atau flavoring agent. Natrium sakarin dapat
meningkatkan sistem rasa atau memperbaiki karakteristik rasa yang tidak enak.
Penggunaan natrium sakarin pada formula ini sebanyak 0,1% karena pada literatur
penggunaan natrium sakarin sebagai pemanis atau flavoring agent dianjurkan
0,1%-0,3%.
Peppermint oil, pada formula ini berperan sebagai flavoring agent, pemberi
rasa sejuk, penutup rasa yang tidak enak, dan juga sebagai pemberi aroma segar
pada sediaan obat kumur. Penggunaan peppermint oil pada formula ini sebanyak
0,15%. Aqua destilata, pada formula ini berperan sebagai pelarut dan digunakan
untuk menyesuaikan volume sediaan obat kumur yang diinginkan.
G. Hasil Pengujian Mutu Fisik dan Stabilitas Sediaan Obat kumur Ekstrak
Buah Murbei
Uji mutu fisik sediaan obat kumur yaitu pengujian organoleptis, pengujian
pH, pengujian berat jenis, pengujian viskositas serta pengujian stabilitas
menggunakan metode disimpan pada temperatur kamar pada hari ke 1,7,14, dan
21.
44
1. Hasil Pengujian Organoleptik
Pengujian organoleptik bertujuan agar mengetahui bentuk, warna, bau, dan
homogenitas dari sediaan obat kumur. Uji ini dilakukan melalui pengamatan
langsung dengan indera penglihatan. Sediaan obat kumur diharapkan memiliki
bentuk berupa cairan sehingga nyaman digunakan dan dapat merata pada rongga
mulut, memiliki warna yang menarik, dan bau yang menyenangkan. Hasil
pengujian organoleptik yang diperoleh dapat dilihat pada tabel 12.
Tabel 12. Hasil pengujian organoleptik obat kumur ekstrak buah murbei
Organoleptik
Pengujian Waktu
K- K + F1 F2 F3
1 Cair Cair Cair Cair Cair
7 Cair Cair Cair Cair Cair
Bentuk
14 Cair Cair Cair Cair Cair
21 Cair Cair Cair Cair Cair
Merah
Orange
1 Putih jernih Merah jernih kecoklatan Coklat
jernih
Merah
Orange Merah jernih
7 Putih jernih kecoklatan Coklat
jernih
Warna
Merah
Orange Merah jernih
14 Putih jernih kecoklatan Coklat
jernih
Merah
Orange Merah jernih
21 Putih jernih kecoklatan Coklat
jernih
Bau khas
1 Khas mint Khas mint Khas mint Khas mint
segar
Bau khas
7 Khas mint Khas mint Khas mint Khas mint
segar
Bau
Bau khas
14 Khas mint Khas mint Khas mint Khas mint
segar
Bau khas
21 Khas mint Khas mint Khas mint Khas mint
segar
1 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen
7 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen
Homogenitas
14 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen
21 Homogen Homogen Homogen Homogen Homogen
keterangan :
K- : Kontrol negatif (sediaan obat kumur tanpa ekstrak)
K+ : Sediaan obat kumur listerine siwak
F1 : Formula 1 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 3,125 %
F2 : Formula 2 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 6,25 %
F3 : Formula 3 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 12,5 %
1.1 Pengujian bentuk sediaan obat kumur ekstrak buah murbei.
Pengujian bentuk suatu sediaan perlu dilakukan untuk mengetahui kesesuaian
45
dengan apa yang diharapkan. Sediaan obat kumur diharapkan mempunyai bentuk
berupa larutan agar nyaman dan mudah untuk digunakan dan dapat merata dalam
rongga mulut. Hasil pengujian bentuk sediaan obat kumur dari kelima formula
menunjukan hasil yang seragam atau sama yaitu berupa larutan cair. Hasil
pengujian bentuk sediaan obat kumur dapat dilihat pada tabel 12.
1.2 Pengujian warna sediaan obat kumur ekstrak buah murbei.
Pengujian warna suatu sediaan memiliki peranan penting terhadap tingkat
ketertarikan dan estetika. Hasil pengujian warna sediaan obat kumur ekstrak buah
murbei menunjukkan bahwa semua formula yaitu formula 1 memiliki warna
merah jernih, formula 2 berwarna merah kecoklatan, dan formula 3 berwarna
coklat, kontrol negatif memiliki warna putih jernih, dan kontrol positif memiliki
warna orange jernih. Pada formula 1 warna merah karena mengandung ekstrak
buah murbei yang paling sedikit begitupun untuk formula 2 dan 3 semakin tinggi
ekstrak yang ditambahkan maka akan semakin pekat warna yang dihasilkan.
Warna merah yang terbentuk pada sediaan obat kumur ekstrak buah murbei terjadi
karena buah murbei banyak mengandung pigmen antosianin serta bisa menjadi
sumber potensial pewarna makanan alami dan antioksidan yang tinggi (Handaratri
& Yuniati, 2019). Hasil pengujian warna sediaan obat kumur dapat dilihat pada
tabel 12.
1.3 Pengujian bau sediaan obat kumur ekstrak buah murbei. Pengujian
bau juga memiliki peranan penting dalam penerimaan suatu produk. Bau yang
dihasilkan dari semua formula yaitu memiliki bau khas mint. Bau tersebut berasal
dari kandungan sediaan obat kumur yang terdapat peppermint oil di dalamnya.
Hasil pengujian bau sediaan obat kumur dapat dilihat pada tabel 12.
1.4 Pengujian homogenitas sediaan obat kumur ekstrak buah murbei.
Pengujian homogenitas dilakukan untuk mengetahui apakah suatu sediaan
tercampur secara merata atau tidak, hal tersebut akan berpengaruh terhadap
stabilitas dari suatu sediaan. Pengujian homogenitas ini juga bertujuan untuk
mengetahui ekstrak buah murbei tersebar secara merata pada sediaan obat kumur.
Pengujian homogenitas dilakukan dengan pengamatan langsung menggunakan
indera penglihatan dan disorot dengan lampu. Hasil dari pengujian homogenitas
46
menunjukan bahwa semua formula baik kontrol negatif maupun kontrol positif
dikatakan homogen atau tercampur secara merata karena tidak adanya endapan
ataupun kekeruhan pada sediaan obat kumur ekstrak buah murbei. Hasil pengujian
homogenitas sediaan obat kumur dapat dilihat pada tabel 12.
2. Hasil Pengujian pH
Pengujian pH sediaan obat kumur ekstrak buah murbei menggunakan pH
meter, tujuan dilakukan uji pH agar mengetahui tingkat keasaman sediaan obat
kumur yang telah dibuat, apakah memenuhi standar mutu obat kumur herbal yakni
pH antara 5-7 (Hidayanto et al., 2017). Sedangkan menurut Pradewa tahun 2008
pH mouthwash yaitu 5.71-5.98. Apabila sediaan obat kumur tidak memenuhi pH
standar obat kumur herbal maka sediaan yang telah dibuat tidak memenuhi syarat.
Hasil pengujian pH sediaan obat kumur ada perbedaan antara kontrol negatif dan
F1-F3 dimana pada kontrol negatif nilai pH dari sediaan obat kumur memenuhi
pH standar mutu obat kumur herbal yaitu pH antara 5-7, sementara itu pada F1,
F2, dan F3 nilai pH yang dihasilkan tidak memenuhi pH standar mutu obat kumur
herbal, hal tersebut disebabkan oleh penambahan dari ekstrak buah murbei pada
formula sediaan obat kumur yang bersifat asam. Faktor terjadinya penurunan pH
pada sediaan obat kumur ekstrak buah murbei dapat disebabkan adanya senyawa
flavonoid yang merupakan senyawa fenolik dan antosianin yang bersifat asam
sehingga dapat mempengaruhi pH pada sediaan obat kumur (Hilwiyah, A.2015).
Evaluasi pH sediaan obat kumur dilakukan selama 21 hari. Hasil Pemeriksaan pH
dapat dilihat pada tabel 13.
Tabel 13. Hasil pengujian pH
pH
Formula
Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari-21
K- 5,77 ± 0,0754 5,31 ± 0,0173 5,49 ± 0,0568 5,51 ± 0,0458
K+ 3,83 ± 0,0152 3,32 ± 0,0152 3,34 ± 0,0152 3,38 ± 0,02
F1 3,44 ± 0,0321 3,47 ± 0,0208 2,46 ± 0,0450 2,68 ± 0,0152
F2 3,36 ± 0,0173 3,36 ± 0,0057 2,35 ± 0,0057 2,56 ± 0,0115
F3 3,30 ± 0,0057 3,35 ± 0,02 2,25 ± 0,0152 2,53 ± 0,0208
47
Gambar 3. Grafik stabilitas pH
48
kelembaban udara 58% tidak mempengaruhi stabilitas suatu obat. Faktor
lingkungan lainnya adalah pengendalian cahaya. Cahaya merupakan katalis dalam
reaksi oksidasi dengan cara memindahkan energi dari gelombang cahaya ke dalam
molekul-molekul zat aktif, sehingga menyebabkan molekul tersebut menjadi
reaktif melalui kemampuan menaikkan energi sebagai kewaspadaan terhadap
percepatan reaksi oksidasi. Oleh karena itu, pengemasan larutan dalam botol
berwarna gelap dapat menahan cahaya masuk dan yang terakhir penurunan pH
bisa terjadi karena sensitivitas dari alat pH meter yang digunakan (Soesilo et al.,
2015).
Berat Jenis
Formula
Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari-21
K- 1,011 ± 0,0011 1,012 ± 0 1,011 ± 0,0005 1,012 ± 0
K+ 1,045 ± 0,0015 1,047 ± 0,0005 1,044 ± 0,0035 1,045 ± 0
F1 1,023 ± 0,0005 1,024 ± 0,0005 1,023 ± 0,0005 1,023 ± 0,0005
F2 1,032 ± 0,0005 1,033 ± 0,0005 1,033 ± 0 1,033 ± 0,0005
F3 1,053 ± 0,0005 1,053 ± 0 1,053 ± 0,0005 1,053 ± 0,0005
49
Gambar 4. Grafik stabilitas berat jenis
Data uji stabilitas berat jenis yang didapat kemudian diuji statistik dengan
program SPSS, dari data uji statistik dengan Shapiro wilk diperoleh hasil yang
tidak terdistribusi normal dikarenakan terdapat nilai sig.<0,05 sehingga
dilanjutkan dengan uji non-parametrik Wilcoxon test. Uji statistik Wilcoxon test
menunjukkan perbandingan berat jenis pada hari ke-1 dengan hari ke-7, hari ke-14
dan hari ke-21 tidak terdapat perbedaan yang signifikan, untuk berat jenis pada
hari ke-7 dengan hari ke-14 dan hari ke-21 tidak terdapat perbedaan yang
signifikan, serta perbandingan berat jenis pada hari-14 dengan hari ke-21 juga
tidak ada perbedaan yang signifikan sehingga dapat disimpulkan bahwa berat
jenis sediaan obat kumur stabil. Pada uji statistik non-parametrik menggunakan
metode Wilcoxon test apabila nilai sig.<0,05 maka terdapat perbedaan namun jika
nilai sig.>0,05 maka tidak ada perbedaan yang signifikan. Hasil analisis statistik
dapat dilihat pada lampiran 15.
50
viskositas sediaan mouthwash sebesar 1,27-1,82 cP (Handayani et al., 2018). Jika
dilihat dari tabel 15 dapat diketahui bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak
yang digunakan maka akan semakin tinggi nilai viskositasnya, hal ini disebabkan
karena penggunaan ekstrak buah murbei yang terdiri atas partikel-partikel halus
terlarut, sehingga dapat meningkatkan nilai viskositas pada obat kumur yang
dihasilkan. Selain ekstrak, bahan tambahan yang digunakan seperti gliserin juga
mempengaruhi viskositas sediaan, semakin tinggi konsentrasi gliserin yang
dipakai, akan semakin kental sediaan obat kumur yang dihasilkan. Evaluasi
viskositas sediaan obat kumur dilakukan selama 21 hari. Hasil evaluasi viskositas
sediaan obat kumur pada semua formula mengalami penurunan dari hari ke-1
hingga hari ke-21.Pengujian viskositas sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
dilakukan menggunakan viskometer Ostwald yang termasuk kedalam viskomiter
kapiler. Pada penelitian ini hasil pengujian viskositas dapat dilihat pada tabel 15.
Viskositas
Formula
Hari ke-1 Hari ke-7 Hari ke-14 Hari-21
K- 1,1321 ± 0,0256 1,0182 ± 0,0128 1,0123 ± 0,0110 1,0225 ± 0,0074
K+ 1,5489 ± 0,0117 1,4068 ± 0,0220 1,4307 ± 0,0104 1,4459 ± 0,0211
F1 1,1776 ± 0,0121 1,1165 ± 0,0109 1,0859 ± 0,0269 1,0864 ± 0,0275
F2 1,3316 ± 0,0241 1,3026 ± 0,0737 1,3426 ± 0,0327 1,2933 ± 0,0155
F3 2,1541 ± 0,0376 2,0072 ± 0,0142 2,0348 ± 0,0277 2,0089 ± 0,0303
51
Gambar 5. Grafik stabilitas viskositas
Berdasarkan hasil data uji diatas dilakukan analisis statistik dengan SPSS
metode Shapiro-Wilk menunjukkan hasil bahwa data uji viskositas terdistribusi
normal yang dibuktikan pada nilai sig. dari semua formula pada hari ke-1, ke-7,
ke-14, dan ke-21 adalah > 0,05, lalu dilanjutkan uji statistik menggunakan metode
Paired Sample T-Test, viskositas sediaan obat kumur ekstrak buah murbei pada
K-, F1, F2, dan F3 pada hari ke-1 dengan hari ke-7, hari ke-14, dan hari ke-21
terdapat perbedaan yang signifikan, sedangkan untuk viskositas semua formula
pada hari ke-7 dengan hari ke-14 dan hari ke-21 tidak ada perbedaan yang
signifikan, serta formula pada hari ke-14 dengan hari ke-21 tidak ada perbedaan
yang signifikan, sehingga dapat disimpulkan bahwa viskositas sediaan obat kumur
ekstrak buah murbei tidak stabil. Pada uji statistik menggunakan metode Paired
Sample T-Test apabila nilai sig.<0,05 maka terdapat perbedaan namun jika nilai
sig.>0,05 maka tidak ada perbedaan yang signifikan. Hasil analisis statistik dapat
dilihat pada lampiran 16. Viskositas pada sediaan mengalami penurunan setelah
uji stabilitas, hal ini dapat terjadi karena pengaruh perubahan suhu. Pada
viskositas suhu dapat menyebabkan jarak antara partikel yang semakin besar
sehingga menyebabkan viskositas menurun.
52
1. Identifikasi Streptococcus mutans ATCC 25175 pada media agar darah
Identifikasi dengan media agar darah berfungsi untuk memastikan bahwa
bakteri yang tumbuh benar-benar dan hanya bakteri S.mutans saja, karena media
agar darah adalah media selektif yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri.
Hasil identifikasi bakteri S.mutans dengan media agar darah memperlihatkan
hemolisis terhadap sel darah merah (hemolisis alfa). Hemolisis alfa merupakan
hemolisis parsial yang akan menimbulkan warna hijau di sekitar koloni bakteri.
Warna hijau berasal dari biliverdin yang merupakan produk sampingan dari
pemecahan hemoglobin (Madigan et al. 2006). Hal tersebut merupakan ciri khas
bakteri S.mutans pada media agar darah (Jawetz et al., 2007). Hasil identifikasi
bakteri S.mutans pada media agar darah dapat dilihat pada gambar 6.
53
Bakteri S.mutans memiliki bentuk bulat telur yang tersusun membentuk suatu
rantai. Hasil identifikasi S.mutans dengan pengecatan gram dapat dilihat pada
gambar 7.
54
dalam waktu 4 jam awal serta 18-24 jam setelah inkubasi. Hasil yang didapat
menunjukkan adanya gumpalan plasma di dasar tabung reaksi, gumpalan yang
terbentuk pada uji koagulase ini terjadi akibat adanya kerja enzim koagulase yang
mengubah fibrinogen dalam plasma sitrat menjadi fibrin (Adison, 2010). Hasil
identifikasi uji koagulase bisa dilihat dalam gambar 9.
55
F1 11 10,5 10 10,5 ± 0,5
F2 15,5 15 14 14,83 ± 0,7637
F3 19 20 19,5 19,5 ± 0,5
K- 0 0 0 0
K+ 16 16 17 16,3 ± 0,5773
Keterangan :
K - : Kontrol negatif (sediaan obat kumur tanpa ekstrak)
K + : Sediaan obat kumur listerine siwak
F1 : Formula 1 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 3,125 %
F2 : Formula 2 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 6,25 %
F3 : Formula 3 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 12,5 %
Penelitian ini adalah penelitian eksperimental yang tujuannya untuk
mengetahui ada tidaknya daya hambat sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
(Morus alba L.) terhadap pertumbuhan S.mutans. Media yang digunakan untuk
pengujian aktivitas antibakteri dalam penelitian ini adalah Mueller Hinton Agar
(MHA) dalam cawan petri. MHA digunakan karena memiliki kandungan nutrisi
yang baik untuk kultur kebanyakan bakteri. Selain itu MHA juga bersifat netral,
sehingga tidak menimbulkan pengaruh terhadap prosedur uji antibakteri (Utomo
et al., 2018). Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan cara bakteri
S.mutans dibiakkan pada media MHA yang sudah steril dengan cara goresan
menggunakan kapas lidi steril, kemudian dibuat 5 lubang menggunakan alat
perforator ukuran 8 mm dan diberi sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
(Morus alba L.) pada konsentrasi sebesar 3,125; 6,25; dan 12,5%, kontrol negatif,
serta kontrol positif, kemudian diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 37ºC.
Variasi konsentrasi ekstrak dalam formulasi mempengaruhi aktivitas antibakteri
yang ditunjukkan dengan diameter zona hambat yang terbentuk. Semakin banyak
ekstrak yang ditambahkan, semakin besar diameter zona hambat. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa semua sediaan obat kumur yang diuji mampu menghambat
pertumbuhan bakteri S.mutans.
Diameter zona hambat yang diperoleh dengan rata-rata pada kontrol negatif
adalah 0 mm, kontrol positif adalah 16,3 ± 0,5773 mm, formula 1 adalah 10,5 ±
0,5 mm, formula 2 adalah 14,83 ± 0,7637 mm, dan formula 3 adalah 19,5 ± 0,5
mm. Berdasarkan hasil tersebut menunjukan bahwa sediaan obat kumur ekstrak
buah murbei (Morus alba L.) dengan konsentrasi ekstrak 12,5% (formula 3)
memberikan zona hambat paling tinggi terhadap pertumbuhan S.mutans dengan
56
rata-rata 19,5 ± 0,5 mm dibandingkan dengan formula yang lain zona hambat
tersebut masuk kedalam kategori kuat. Suatu zona hambat dikatakan sangat kuat
apabila diameter zona hambatnya > 21 mm, kategori kuat 11-20 mm, kategori
sedang 6-10 mm, kategori lemah <5 mm (Surjowardojo et al., 2015)
Aktivitas antibakteri yang terjadi pada sediaan obat kumur ekstrak buah
murbei karena adanya kandungan polifenol dan terpenoid dalam ekstrak murbei
menunjukkan bahwa ekstrak murbei berpotensi sebagai agen antibakteri, karena
senyawa polifenol sebagai agen antibakteri berperan sebagai toksin dalam
protoplasma, merusak dan menembus dinding sel serta mengendapkan protein sel
bakteri, sedangkan senyawa terpenoid terbukti dapat menghambat pertumbuhan
bakteri dengan menghentikan pembentukan membran dan/atau dinding sel
sehingga sel bakteri kekurangan nutrisi, mengakibatkan terhambatnya
pertumbuhan bakteri (Nastiti et al., 2019).
Aktivitas antibakteri sediaan obat kumur juga dapat dipengaruhi dari
penambahan bahan pengawet dalam formula seperti natrium benzoate. Natrium
benzoate termasuk ke dalam pengawet organic golongan benzoate yang efektif
bekerja sebagai pengawet antimikroba pada pH rendah, karena pada pH rendah
proporsi asam yang tidak terdisosiasi meningkat, dan asam yang tidak terdisosiasi
merupakan penentu utama peranan pengawet (Cahyadi, 2012). Benzoat efektif
pada kisaran pH 2,5-4,0 (Winarno & Fardiaz, 1980). Mekanisme kerja benzoate
dan garamnya sebagai antimikroba adalah berdasarkan molekul asam yang tidak
terdisosiasi akan mengganggu permeabilitas dari membran sel mikroba. Isi sel
mikroba mempunyai pH yang selalu netral. Bila sel mikroba menjadi asam atau
basa maka akan terjadi gangguan pada organ-organ sel sehingga metabolisme
terhambat dan akhirnya sebagian sel mati (Pujihastuti, 2007).
Hasil uji aktivitas antibakteri metode difusi diuji statistik dengan one way
ANOVA. Bertujuan untuk membandingkan sampel pada setiap konsentrasi. Data
yang dianalisis dengan one way ANOVA adalah formula 1, 2, 3, dan kontrol positif
dari formula sediaan obat kumur ekstrak buah murbei. Hasil data uji statistik
bertujuan untuk membandingkan hubungan antara formula 1, 2, 3, dan kontrol
positif untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan yang signifikan.
57
Data yang didapat, dianalisis dengan SPSS pada hasil uji normalitas pada
Shapiro-Wilk semua formula memberikan nilai sig.>0,05 yang artinya data
terdistribusi normal, selanjutnya data dianalisis homogenitas menggunakan one
way ANOVA, diperoleh nilai signifikansi (>0,05), maka dapat disimpulkan data
homogen. Uji normalitas dan uji homogenitas telah memenuhi persyaratan, maka
dilanjutkan dengan uji one way ANOVA, diperoleh nilai signifikan 0,000 (<0,05),
yang artinya semua formula berbeda secara signifikan sehingga dilanjutkan
dengan uji Post Hoc tukey. Perbedaan yang terjadi karena adanya penambahan
konsentrasi ekstrak yang berbeda pada masing-masing formula, sehingga
menghasilkan daya hambat yang berbeda juga.
Berdasarkan homogeneity of subset menunjukkan bahwa formula 1, formula
2, dan formula 3 memiliki aktivitas antibakteri. Pada formula 1, formula 2, dan,
formula 3 tidak berada dalam satu subset, akan tetapi formula 2 berada dalam satu
subset dengan kontrol positif , yang artinya formula 2 mempunyai daya hambat
sama dengan kontrol positif, sehingga formula 2 sudah termasuk formula yang
efektif pada sediaan obat kumur ekstrak buah murbei. Hasil uji statistik dapat
dilihat pada lampiran 17.
58
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
Pertama,Sediaan obat kumur ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.) bisa
memberikan aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175.
Kedua, konsentrasi ekstrak etanol buah murbei (Morus alba L.) dalam formulasi
sediaan obat kumur yang memiliki daya hambat yang paling tinggi dalam menghambat
bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175 adalah 12,5%. Akan tetapi ekstrak dengan
konsentrasi 6,25% formulasi sediaan obat kumur sudah optimal dan efektif terhadap
pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175, karena daya hambatnya sama
dengan kontrol positif yang digunakan.
B. Saran
Dari penelitian yang telah dilakukan, disarankan pada peneliti selanjutnya agar
didapatkan hasil yang lebih maksimal sebagai berikut :
Pertama, perlu dilakukan penelitian dengan membuat suatu sediaan yang lain dari
ekstrak buah murbei (Morus alba L.).
Kedua, perlu dilakukan penelitian aktivitas antibakteri ekstrak buah murbei (Morus
alba L.) dikombinasikan dengan tanaman lain untuk bakteri patogen lain.
Ketiga, perlu dilakukan uji aktivitas antibakteri ekstrak dan sediaan obat kumur
(mouthwash) menggunakan metode lain untuk mendapatkan metode pengujian aktivitas
antibakteri yang paling baik.
59
DAFTAR PUSTAKA
Akarin, W., 2011. Pengaruh Konsentrasi Humektan terhadap Stabilitas Formula Obat
Kumur. Jurnal USU, Medan.
Alam, C. (2012). Identifikasi Bakteri Pada Ikan Asin Yang Beredar Di pasar Baruga.
Akademi Analis Kesehatan Bina husada Kendari.
Alamsyah A & Herawati T. S. 2014. Nutritional Screening Method in Hospitals with
MST is More Effective than SGA. JKB Vol. 28 (1).
Andries, Juvensius R., Paulina N. Gunawan, and Aurelia Supit. "Uji Efek AntiBakteri
Ekstrak Bunga Cengkeh Terhadap Bakteri Streptococcus mutans secara in vitro." e-
GiGi 2.2 (2014).
Arlita, Y. (2013). Identifikasi Bakteri E.coli dan Salmonella sp pada Makanan Jajanan
Bakso Tusuk di kota Manado. Universitas Sam Ratulangi Manado.
Aulifa, D. L., Febriani, Y., & Rendo, M. S. (2015). Aktivitas Antibakteri Ekstrak N-
Heksan, Etil Asetat, Dan Etanol Morus Alba L. terhadap Bakteri Penyebab Karies
Gigi. Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology, 4(2), 15–21.
Cahyadi, W., 2005. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan, Penerbit
Bumi Aksara, Jakarta.
Cahyadi, W., 2012. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan, Penerbit
Bumi Aksara, Jakarta.
Devi, B., Sharma, N., Kumar, D., & Jeet, K. (2013). Morus alba Linn: A
phytopharmacological review. International Journal of Pharmacy and
Pharmaceutical Sciences, 5 (SUPPL. 2), 14–18.
Dewi, Z. Y., Nur, A., & Hertriani, T. (2015). Efek Antibakteri dan Penghambatan
Biofilm Ekstrak Sereh (Cymbopogon nardus L.) Terhadap Bakteri Streptococcus
mutans. Majalah Kedokteran Gigi Indonesia, 20(2), 136.
https://doi.org/10.22146/majkedgiind.9120
Handaratri, A., & Yuniati, Y. (2019). Kajian Ekstraksi Antosianin dari Buah Murbei
dengan Metode Sonikasi dan Microwave. Reka Buana : Jurnal Ilmiah Teknik Sipil
Dan Teknik Kimia, 4(1), 63. https://doi.org/10.33366/rekabuana.v4i1.1162
60
Handayani, F., Sundu, R., & Sari, R. M. (2018). Formulasi Dan Uji Aktivitas
Antibakteri Streptococcus mutans Dari Sediaan Mouthwash Ekstrak Daun Jambu
Biji (Psidium guajava L.). Jurnal Sains Dan Kesehatan, 1(8), 422–433.
https://doi.org/10.25026/jsk.v1i8.62
Hidayanto, A., Manikam, A. S., Pertiwi, W. S., & Harismah, K. (2017). Formulasi Obat
Kumur Ekstrak Daun Kemangi (Ocimum Basilicum L) dengan Pemanis Alami
Stevia (Stevia Rebaudiana Bertoni). University Research Colloquium, 189–194.
Lestari, M. W., Priyo Bintoro, V., & Rizqiati, H. (2018). Pengaruh Lama Fermentasi
terhadap Tingkat Keasaman, Viskositas, Kadar Alkohol, dan Mutu Hedonik Kefir
Air Kelapa Effect of Fermentation Time on Acidity, Viscosity, Alcohol
Concentration, and Hedonic Quality of Coconut (Cocos nucifera) Water Kefir.
Jurnal Teknologi Pangan, 2(1), 8–13.
Linde, N. (2005). Mouthwash. Encyclopedia of Toxicology, 05(02), 162–163.
https://doi.org/10.1016/B0-12-369400-0/00649-9.
Madigan, M.T., Martinko, J.M., Dunlap, P.V. & Clark, D.P. (2006) Brock Biology of
Microorganisms. 12th ed. San Francisco: Pearson Education.
Nastiti, D. S., Nurhamidah, N., & Chandra, I. N. (2019). Pemanfaatan Ekstrak Buah
Morus alba L.(Murbei) Sebagai Pengawet Alami Ikan Selaroides leptolepis
(Selar). Alotrop, 3(1), 1–7.
https://ejournal.unib.ac.id/index.php/alotropjurnal/article/viewFile/9019/4423
Noval, Melviani, Novia, Syahrina, D. (2020). Formulasi Dan Evaluasi Sediaan Obat
Kumur ( Mouthwash ) Dari Antiseptik Mulut Mouthwash Formulation and
Evaluation of Bundung Plants ( Actinoscirpus grossus ) Ethanol Extract as a
Mouth Antiseptic Abstrak. Jurnal Surya Medika, 6(1), 112–120.
Pane, M. (2019). Formulasi Sediaan Obat Kumur Ekstrak Teh Hijau (Camellia sinensis
(L.) Kuntze). http://repositori.usu.ac.id/handle/123456789/23590.
Pujihastuti, D.R. (2007). Pengaruh Konsentrasi Natrium Benzoat terhadap Umur
Simpan Minuman Beraroma Apel, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Purwaningsih, P. P. (2016). Analisis Faktor Risiko Yang Mempengaruhi Karies Gigi
Pada Anak Sd Kelas V-Vi Di Kelurahan Peguyangan Kangin Tahun 2015. Journal
of Chemical Information and Modeling, 53(9), 1689–1699.
61
Rosdiana, N., & Nasution, AI (2016). Gambaran daya hambat minyak kelapa murni dan
minyak kayu putih dalam menghambat pertumbuhan Streptococcus mutans. Jurnal
Perhimpunan Kedokteran Gigi Syiah Kuala , 1 (1), 43-50.
Rowe, R.C., Sheskey, P.J., Quinn, M.E. (2009) Handbook of Pharmaceutical
Excipients, 6th ed, 184-185, 550-551, Pharmaceutical Press, London.
Saleh, C., & Marliana, E. (2011). Uji Fitokimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar
Etanol, Fraksi n-Heksana, Etil Asetat dan Metanol dari Buah Labu Air ( Lagenaria
siceraria (Molina) Standl). Jurnal Kimia Mulawarman, 8(2), 63–69.
Sangi, M. S., Momuat, L. I., & Kumaunang, M. (2012). Uji Toksisitas Dan Skrining
Fitokimia Tepung Gabah Pelepah Aren (Arenga pinnata). Jurnal Ilmiah Sains,
12(2), 127. https://doi.org/10.35799/jis.12.2.2012.716.
Soemarno, S., 2000. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Klinik. AAK Yogyakarta.
Yogyakarta.
Soesilo, D., Rinna, ES., Indeswati, D., 2005, Peranan Sorbitol dalam Mempertahankan
Kestabilan pH Saliva pada Proses Pencegahan Karies. Majalah Kedokteran Gigi
(Dental Journal); 38: 25-28.
Surjowardojo, P., Susilawati, T. E., & Sirait, G. R. (2016). Daya Hambat Dekok Kulit
Apel Manalagi (Malus sylvestrs Mill.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus
aureus dan Pseudomonas sp. penyebab mastitis pada sapi perah. TERNAK
TROPIKA Journal of Tropical Animal Production, 16(2), 40-48.
Timotius, K.H. (1982). Mikrobiologi Dasar, Cetakan I. UKSW, Salatiga.
Toar, A. I., Posangi, J., & Wowor, V. (2013). Daya Hambat Obat Kumur
Cetylpyridinium Chloride Dan Obat Kumur Daun Sirih Terhadap Pertumbuhan
Streptococcus Mutans. Jurnal Biomedik (Jbm), 5(1), 163–168.
https://doi.org/10.35790/jbm.5.1.2013.2639
Total, K., Flavonoid, F., & Etanol, E. (2000). Skrining Fitokimia Dan Uji Aktivitas
Antioksidan Serta Kadar Total Fenol - Flavonoid Ekstrak Etanol Murbei (.
Skrinning Fitokimia Dan Uji Aktivitas Antioksidan Serta Kadar Total Fenol-
Flavonoid Ekstrak Etanol Murbei, skrinning fitokimia, 1–10.
Utomo, S. B., Fujiyanti, M., Lestari, W. P., & Mulyani, S. (2018). Antibacterial Activity
Test of the C-4-methoxyphenylcalix[4]resorcinarene Compound Modified by
62
Hexadecyltrimethylammonium-Bromide against Staphylococcus aureus and
Escherichia coli Bacteria. JKPK (Jurnal Kimia Dan Pendidikan Kimia), 3(3), 201.
https://doi.org/10.20961/jkpk.v3i3.22742.
Wardaniati RA, Setyaningsih S. (2006). Pembuatan Chitosan dari Kulit Udang dan
Aplikasinya untuk Pengawetan Bakso, Jurusan Teknik Kimia, Fakultas Teknik,
Universitas Diponegoro, Semarang.
Winarno, F.G.dan Titi S.R. (1994). Bahan Tambahan Untuk Makanan dan Minuman,
Penerbit PT Pustaka harapan, Jakarta.
Winarno F.G. Srikandi Fardiaz, dan Dedi Fardiaz. 1980. Pengantar Teknologi
Pangan. Gramedia. Jakarta.
Yunus, R., Mongan, R., & Rosnani, R. (2017). Cemaran Bakteri Gram Negatif pada
Jajanan Siomay di Kota Kendari. Medical Laboratory Technology Journal, 3(1),
11. https://doi.org/10.31964/mltj.v3i1.111
63
LAMPIRAN
L
A
M
P
I
R
A
N
64
Lampiran 1. Determinasi tanaman
65
Lampiran 2. Perhitungan bobot kering terhadap bobot basah buah murbei
66
Lampiran 3. Perhitungan rendemen serbuk buah murbei
67
Lampiran 4. Perhitungan persentase kadar air (destilasi) serbuk buah murbei
Replikasi Berat Serbuk (g) Volume Air (ml) Kadar air (%b/v)
1 10 0,3 3
2 10 0,3 3
3 10 0,4 4
Replikasi 1
=3%
Replikasi 2
=3%
Replikasi 1
=4%
68
69
Lampiran 5. Perhitungan persentase rendemen ekstrak buah murbei
70
Lampiran 6. Perhitungan persentase kadar air ekstrak buah murbei
Berat Berat
crush + crush + Berat
Berat Berat Berat
ekstrak ekstrak ekstrak Kadar air
Replikasi crush crush + ekstrak
(setelah di setelah setelah (%)
kosong ekstrak awal
oven 5 di oven dioven
jam) 1 jam)
I 13,4047 23,4945 10,0898 22,6057 22,6034 9,201 3,783
II 13,9106 23,9187 10,0081 23,0382 23,0366 9,1276 3,6812
III 13,3044 23,361 10,0566 22,4946 22,4928 9,1902 3,7087
Rata – rata ± SD 3,72± 0,0526
Replikasi 1 = %
Replikasi 2 =
Replikasi 3 =
71
Lampiran 7. Alat penelitian
72
Uji Homogenitas dengan cahaya lampu
73
74
Uji Berat Jenis
Uji Viskositas
Mikroskop
75
Lampiran 8. Gambar proses ekstraksi
Buah Segar
Simplisia Kering
76
Proses pengentalan ekstrak Ekstrak kental
77
Lampiran 9. Gambar pengujian kandungan senyawa kimia buah murbei
78
Lampiran 10. Sertifikat Bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175
79
Lampiran 11. Identifikasi Bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175
Uji Koagulase
Uji pada media agar darah
Suspensi Bakteri
Sediaan obat kumur
80
Lampiran 12. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak buah murbei metode difusi sumuran
Replikasi 1 Replikasi 2
Replikasi 3
*Keterangan :
K- : Kontrol negatif (DMSO 5%)
F1 : Ekstrak buah murbei konsentrasi 3,125 %
F2 : Ekstrak buah murbei konsentrasi 6,25 %
F3 : Ekstrak buah murbei konsentrasi 12,5 %
Lampiran 13. Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan obat kumur ekstrak buah murbei metode difusi
sumuran
Replikasi 1 Replikasi 2
81
Replikasi 3
*Keterangan :
K- : Kontrol negatif (sediaan obat kumur tanpa ekstrak)
K+ : Kontrol positif (Listerine)
F1 : Formula 1 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 3,125 %
F2 : Formula 2 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 6,25 %
F3 : Formula 3 sediaan obat kumur ekstrak buah murbei konsentrasi 12,5 %
82
Lampiran 14. Hasil uji pH sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
Tests of Normality
pH Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statisti df Sig. Statisti df Sig.
c c
Hari_KE1 K- .219 3 . .987 3 .780
F1 .328 3 . .871 3 .298
F2 .385 3 . .750 3 .000
F3 .385 3 . .750 3 .000
Hari_KE7 K- .385 3 . .750 3 .000
F1 .292 3 . .923 3 .463
F2 . 3 . . 3 .
F3 .175 3 . 1.000 3 1.000
Hari_KE14 K- .282 3 . .936 3 .510
F1 .196 3 . .996 3 .878
F2 .385 3 . .750 3 .000
F3 .253 3 . .964 3 .637
Hari_KE21 K- .253 3 . .964 3 .637
F1 .253 3 . .964 3 .637
F2 .385 3 . .750 3 .000
F3 .292 3 . .923 3 .463
a. Lilliefors Significance Correction
83
- Wilcoxon test
Ranks
N Mean Rank Sum of Ranks
Uji_pH_Hari7 - Negative Ranks 5a 8.20 41.00
Uji_pH_Hari1 Positive Ranks 7b 5.29 37.00
Ties 0c
Total 12
Uji_pH_Hari14 - Negative Ranks 12d 6.50 78.00
Uji_pH_Hari1 Positive Ranks 0e .00 .00
Ties 0f
Total 12
Uji_pH_Hari21 - Negative Ranks 12g 6.50 78.00
Uji_pH_Hari1 Positive Ranks 0h .00 .00
Ties 0i
Total 12
Uji_pH_Hari14 - Negative Ranks 9j 8.00 72.00
Uji_pH_Hari7 Positive Ranks 3k 2.00 6.00
Ties 0l
Total 12
Uji_pH_Hari21 - Negative Ranks 9m 8.00 72.00
Uji_pH_Hari7 Positive Ranks 3n 2.00 6.00
Ties 0o
Total 12
Uji_pH_Hari21 - Negative Ranks 0p .00 .00
Uji_pH_Hari14 Positive Ranks 11q 6.00 66.00
Ties 1r
Total 12
a. Uji_pH_Hari7 < Uji_pH_Hari1
b. Uji_pH_Hari7 > Uji_pH_Hari1
c. Uji_pH_Hari7 = Uji_pH_Hari1
d. Uji_pH_Hari14 < Uji_pH_Hari1
e. Uji_pH_Hari14 > Uji_pH_Hari1
f. Uji_pH_Hari14 = Uji_pH_Hari1
g. Uji_pH_Hari21 < Uji_pH_Hari1
h. Uji_pH_Hari21 > Uji_pH_Hari1
i. Uji_pH_Hari21 = Uji_pH_Hari1
j. Uji_pH_Hari14 < Uji_pH_Hari7
k. Uji_pH_Hari14 > Uji_pH_Hari7
l. Uji_pH_Hari14 = Uji_pH_Hari7
m. Uji_pH_Hari21 < Uji_pH_Hari7
n. Uji_pH_Hari21 > Uji_pH_Hari7
o. Uji_pH_Hari21 = Uji_pH_Hari7
p. Uji_pH_Hari21 < Uji_pH_Hari14
q. Uji_pH_Hari21 > Uji_pH_Hari14
r. Uji_pH_Hari21 = Uji_pH_Hari14
84
Test Statisticsa
Uji_pH_Hari7 - Uji_pH_Hari14 Uji_pH_Hari21 Uji_pH_Hari14 Uji_pH_Hari21 Uji_pH_Hari21 -
Uji_pH_Hari1 - Uji_pH_Hari1 - Uji_pH_Hari1 - Uji_pH_Hari7 - Uji_pH_Hari7 Uji_pH_Hari14
Z -.158b -3.066b -3.065b -2.594b -2.593b -2.938c
Asymp. Sig. .874 .002 .002 .009 .010 .003
(2-tailed)
a. Wilcoxon Signed Ranks Test
b. Based on positive ranks.
c. Based on negative ranks.
85
Lampiran 15. Hasil uji berat jenis sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Hari_KE7 K- . 3 . . 3 .
F3 . 3 . . 3 .
F2 . 3 . . 3 .
Hari_KE21 K- . 3 . . 3 .
86
- Wilcoxon test
Ranks
N Mean Rank Sum of Ranks
Uji_BJ_Hari7 - Negative Ranks 2a 3.00 6.00
Uji_BJ_Hari1 Positive Ranks 5b 4.40 22.00
Ties 5c
Total 12
Uji_BJ_Hari14 - Negative Ranks 2d 3.00 6.00
Uji_BJ_Hari1 Positive Ranks 3e 3.00 9.00
Ties 7f
Total 12
Uji_BJ_Hari21 - Negative Ranks 2g 2.00 4.00
Uji_BJ_Hari1 Positive Ranks 3h 3.67 11.00
Ties 7i
Total 12
Uji_BJ_Hari14 - Negative Ranks 5j 3.50 17.50
Uji_BJ_Hari7 Positive Ranks 1k 3.50 3.50
Ties 6l
Total 12
Uji_BJ_Hari21 - Negative Ranks 3m 2.50 7.50
Uji_BJ_Hari7 Positive Ranks 1n 2.50 2.50
Ties 8o
Total 12
Uji_BJ_Hari21 - Negative Ranks 0p .00 .00
Uji_BJ_Hari14 Positive Ranks 2q 1.50 3.00
Ties 10r
Total 12
a. Uji_BJ_Hari7 < Uji_BJ_Hari1
b. Uji_BJ_Hari7 > Uji_BJ_Hari1
c. Uji_BJ_Hari7 = Uji_BJ_Hari1
d. Uji_BJ_Hari14 < Uji_BJ_Hari1
e. Uji_BJ_Hari14 > Uji_BJ_Hari1
f. Uji_BJ_Hari14 = Uji_BJ_Hari1
g. Uji_BJ_Hari21 < Uji_BJ_Hari1
h. Uji_BJ_Hari21 > Uji_BJ_Hari1
i. Uji_BJ_Hari21 = Uji_BJ_Hari1
j. Uji_BJ_Hari14 < Uji_BJ_Hari7
k. Uji_BJ_Hari14 > Uji_BJ_Hari7
l. Uji_BJ_Hari14 = Uji_BJ_Hari7
m. Uji_BJ_Hari21 < Uji_BJ_Hari7
n. Uji_BJ_Hari21 > Uji_BJ_Hari7
o. Uji_BJ_Hari21 = Uji_BJ_Hari7
p. Uji_BJ_Hari21 < Uji_BJ_Hari14
q. Uji_BJ_Hari21 > Uji_BJ_Hari14
r. Uji_BJ_Hari21 = Uji_BJ_Hari14
87
Test Statisticsa
Uji_BJ_Hari7 - Uji_BJ_Hari14 Uji_BJ_Hari21 Uji_BJ_Hari14 Uji_BJ_Hari21 Uji_BJ_Hari21 -
Uji_BJ_Hari1 - Uji_BJ_Hari1 - Uji_BJ_Hari1 - Uji_BJ_Hari7 - Uji_BJ_Hari7 Uji_BJ_Hari14
Z -1.406b -.447b -.966b -1.633c -1.000c -1.414b
Asymp. Sig. .160 .655 .334 .102 .317 .157
(2-tailed)
a. Wilcoxon Signed Ranks Test
b. Based on negative ranks.
c. Based on positive ranks.
88
Lampiran 16. Hasil uji viskositas sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
89
Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 Uji_Viskositas_Hari1 1.4489 12 .43281 .12494
Uji_Viskositas_Hari7 1.3612 12 .40527 .11699
Pair 2 Uji_Viskositas_Hari1 1.4489 12 .43281 .12494
Uji_Viskositas_Hari14 1.3689 12 .42206 .12184
Pair 3 Uji_Viskositas_Hari1 1.4489 12 .43281 .12494
Uji_Viskositas_Hari21 1.3528 12 .40966 .11826
Pair 4 Uji_Viskositas_Hari7 1.3612 12 .40527 .11699
Uji_Viskositas_Hari14 1.3689 12 .42206 .12184
Pair 5 Uji_Viskositas_Hari7 1.3612 12 .40527 .11699
Uji_Viskositas_Hari21 1.3528 12 .40966 .11826
Pair 6 Uji_Viskositas_Hari14 1.3689 12 .42206 .12184
Uji_Viskositas_Hari21 1.3528 12 .40966 .11826
90
Paired Samples Test
Paired Differences
95% Confidence
Std. Interval of the
Std. Error Difference Sig. (2-
Mean Deviation Mean Lower Upper t df tailed)
Pair 1 Uji_Viskositas_Hari1 .08773 .05848 .01688 .05058 .12489 5.197 11 .000
-
Uji_Viskositas_Hari7
Pair 2 Uji_Viskositas_Hari1 .07994 .06499 .01876 .03865 .12124 4.261 11 .001
-
Uji_Viskositas_Hari14
Pair 3 Uji_Viskositas_Hari1 .09607 .05055 .01459 .06396 .12819 6.584 11 .000
-
Uji_Viskositas_Hari21
Pair 4 Uji_Viskositas_Hari7 -.0077 .03957 .01142 -.03293 .01735 -.682 11 .509
- 9
Uji_Viskositas_Hari14
Pair 5 Uji_Viskositas_Hari7 .00834 .04069 .01175 -.01751 .03420 .710 11 .492
-
Uji_Viskositas_Hari21
Pair 6 Uji_Viskositas_Hari14 .01613 .03477 .01004 -.00596 .03822 1.607 11 .136
-
Uji_Viskositas_Hari21
91
Lampiran 17. Hasil uji aktivitas antibakteri sediaan obat kumur ekstrak buah murbei
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
92
ANOVA
OBAT_KUMUR
Total 128.729 11
OBAT_KUMUR
Tukey HSDa
AKTIVITAS_ANTIBAKTERI N 1 2 3
F1 3 10.5000
F2 3 14.8333
K+ 3 16.3333
F3 3 19.5000
93