Pemrofilan Kandungan Kimia Eksudat Mangrove (Avicennia

marina) Dari Berbagai Daerah

Profiling of Exudate Mangrove (Avicennia marina) Chemical
Content from Various Regions
Khairul Anam, Muhamad Makmuri
Laboratorium Kimia Organik, Departemen Kimia, Fakultas Sains dan Matematika,
Universitas Diponegoro, Jalan Prof. Soedarto, SH Tembalang, Semarang 50275, Indonesia
Abstrak
Mangrove api-api (Avicennia marina) yang merupakan salah satu jenis mangrove
yang memiliki banyak manfaat dan digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional.
Mangrove api-api (A. marina) mengandung golongan senyawa metabolit sekunder yang
bermacam-macam dengan bioaktivitas tertentu. Bioaktivitas suatu bahan alam dipengaruhi
oleh senyawa kimia yang terkandung didalamnya baik berupa komponen tunggal maupun
kombinasi dari beberapa komponen lainnya. Namun belum ada kajian yang menjelaskan
karakteristik kandungan kimia eksudat A. marina baik secara kualitatif maupun kuantitatif.
Oleh karena itu, pada penelitian ini akan dilakukan pemrofilan kandungan kimia eksudat A.
marina dari berbagai daerah. Analisa kualitatif dengan KLT menunjukkan bahwa ekstrak
eksudat mangrove A. marina yang berasal dari berbagai daerah tersebut mengandung
senyawa golongan alkaloid, flavonoid, antrakuinon, dan triterpenoid/steroid serta memiliki
kemiripan profil kromatrogram. Berdasarkan waktu retensi, analisa kuantitatif dengan
KLTKT menunjukkan ekstrak eksudat dari demak, semarang, brebes mengandung 5
komponen senyawa sedangkan ekstrak eksudat lampung mengandung 9 komponen senyawa.
Selain memiliki kemiripan profil kromatogram, terdapat 3 puncak utama yang selalu
teridentifikasi dari keempat ekstrak eksudat yaitu pada faktor retensi 0,11cm-0,13cm;
0,21cm-0,26cm; dan 0,59cm-0,66cm.
Kata Kunci: pemrofilan, Avicennia marina, KLTKT, berbagai daerah

Abstract
Fire-fire mangrove (Avicennia marina) which is one type of mangrove that has many
benefits and is used by the community as traditional medicine. Fire-fire mangrove (A.
marina) contains a group of secondary metabolites which vary with certain bioactivity.
Bioactivity of a natural material is influenced by chemical compounds contained in it in the
form of a single component or a combination of several other components. But there is no
study that explains the characteristics of the chemical content of A. marina exudates both
qualitatively and quantitatively. Therefore, in this study profiling the chemical content of A.
marina exudates from various regions will be carried out. Qualitative analysis with TLC
showed that A. marina exudate extract originating from various regions contained alkaloid,
flavonoid, anthraquinone and triterpenoid/steroid compounds and had similar
chromatographic profiles. Based on retention time, quantitative analysis with TLCT showed
exudate extract from demak, semarang, brebes using 5 component compositions while
Lampung exudate extract contained 9 components of composition. In addition to having a
similar chromatogram profile, there are 3 main peaks that can be identified from exudate
extract, namely the retention factor 0.11cm-0.13cm; 0.21cm-0.26cm; and 0.59cm-0.66cm.
Keyword: profiling, Avicennia marina, HPTLC, various regions
I. Pendahuluan
Indonesia memiliki berbagai macam
tumbuh-tumbuhan yang berkhasiat sebagai
obat-obatan. Salah satunya adalah pohon
mangrove api-api (Avicennia marina) yang
merupakan salah satu jenis mangrove yang
memiliki banyak manfaat dan digunakan
oleh masyarakat sebagai obat tradisional.
Mangrove api-api (A. marina)
mengandung senyawa bioaktif seperti
alkaloid, saponin, glikosida, tanin,
flavonoid, dan triterpenoid (Wibowo dkk.,
2009). Senyawa bioaktif pada tanaman ini
memiliki aktivitas sebagai antiimflamasi,
antioksidan, antibakteri, antivirus dan
antitumor (Withanawasam, 2008). Susilo
(2014) melaporkan bahwa fraksi etil asetat
eksudat A. marina mempunyai aktivitas
inhibisi terhadap xantin oksidase. Eksudat
A.marina yang diinfundasi dengan pelarut
aquadest dan difraksinasi dengan sistem
pelarut dengan komposisi n-heksana : etil
asetat : metanol : air (5 : 5 : 5 : 5)
mempunyai aktivitas untuk menghambat
xantin oksidase (Yanaditia, 2017).
Suatu bahan alam memiliki
bioaktivitas yang dipengaruhi oleh
senyawa kimia yang terkandung
didalamnya baik berupa komponen
tunggal maupun kombinasi dari
beberapa komponen lainnya.
Namun belum ada kajian yang
menjelaskan karakteristik
kandungan kimia eksudat A.
marina baik secara kualitatif
maupun kuantitatif. Oleh karena
itu, pada penelitian ini akan
dilakukan pemrofilan kandungan
kimia eksudat A. marina dari
berbagai daerah.
II. Metode Penelitian
Bahan
Eksudat mangrove dari
Demak, Lampung, Semarang,
Brebes, metanol, kloroform, n-
heksana, amonia 25%, aquades,
kertas saring, asam sulfat 10%,
PES milliopore express®
membrane, Andrographolide 98%
500MG, TLC Silica gel 60 F254.
Alat
Alat gelas standar penelitian,
neraca analitik, syringe, chamber,
CAMAG® UV Cabinet dual
wavelength, 254/366 nm, Krisbow
professional Ultrasonic cleaner,
Cosmos CO-9919 Cosmoven,
CAMAG® TLC Scanner 3.
Persiapan Sampel
Sampel berupa eksudat
mangrove (Avicennia marina)
kering diambil dari Kab. Demak,
Kab. Lampung timur, Kota
Semarang, Kab. Brebes. Kemudian
sampel dibersihkan dari pengotor,
dan dipotong hingga berukuran
kecil-kecil.
Ekstraksi Padat-Cair
Prosedur persiapan larutan uji sesuai
Kemenkes Republik Indonesia Nomor
261/MENKES/SK/IV/2009 didasarkan
pada metode ekstraksi secara langsung
(direct) sesuai dengan baku mutu standar.
Eksudat sebanyak 1 gram dilarutkan dalam
pelarut (metanol p.a) 10 mL, kemudian
filtrat dimasukkan kedalam labu ukur dan
ditambahkan pelarut sampai tanda batas
lalu digojok (Kemenkes RI, 2008). Larutan
direndam didalam alat dengan penggetar
gelombang ultrasonik untuk
memaksimalkan proses penyarian zat-zat
yang terkandung dalam eksudat.
Selanjutnya dilakukan pemurnian larutan
dengan filter millipore sesuai dengan
manual prosedur yang diterbitkan oleh
ARS International (ARS Aleut Analytical,
2017).
Kromatografi Lapis Tipis
Ekstrak eksudat mangrove
A. marina ditentukan jumlah
komponen dan fasa gerak
terbaiknya menggunakan KLT.
Setelah didapat fasa gerak yang
tepat, selanjutnya disemprot
 dengan penampak bercak universal
(H2SO4 10%).
Identifikasi Kualitatif dengan
KLT Penampak Bercak Spesifik
Untuk menentukan golongan
senyawa kimia apa saja yang
terkandung didalam ekstrak
eksudat diperlukan uji spesifik
dengan pereaksi golongan senyawa
tertentu. Pereaksi penampak noda
golongan senyawa alkaloid adalah
reagen Dragendorf LP dan
antrakuinon adalah reagen KOH
5% (Wagner & Bladt, 1996).
Sedangkan penampak noda
golongan senyawa tanin adalah
reagen FeCl3 5% (Sonam, Singh,
& Saklani, 2017), golongan
senyawa steroid/triterpen adalah
reagen Liebermann-Burchard
(Pascual, Carretero, Slowing, &
Villar, 2003), dan golongan
senyawa flavonoid adalah Uap
Amonia (Sherma & Fried, 2003).
Tahap akhir metode ini adalah
pengamatan dibawah sinar tampak,
UV 354 nm, dan 366 nm.
Identifikasi Kuantitatif dengan
Kromatografi Lapis Tipis
Kinerja Tinggi
Keempat ekstrak eksudat
ditotolkan pada plat KLT dengan
volume 15 µL, jarak antar noda 1
cm, dan dibawah sinar UV 254 nm.
Bersamaan dengan itu, ditotolkan
secara berdampingan ekstrak
eksudat yang telah ditambahkan
dengan larutan standar
andrografolida (1:1).
III. Hasil dan Pembahasan
Ekstraksi Padat-Cair
Hasil ekstraksi yang
diperoleh adalah berupa larutan
berwarna coklat kekuningan.
Ekstrak eksudat mangrove
Avicennia marina dari daerah
demak dan lampung memiliki
konsentrasi sebesar 100ppm (10%),
sedangkan ekstrak eksudat
mangrove Avicennia marina dari
daerah semarang dan brebes
dengan konsentrasi sebesar
500ppm (50%).
Karakter eksudat (simplisia)
yang sulit larut dalam pelarut
mengharuskan dilakukannya
pemecahan partikel eksudat dengan
gelombang ultrasonik agar proses
penyarian zat-zat aktif dalam
eksudat berlangsung maksimal.
Pemurnian dengan filter millipore
dilakukan karena banyaknya zat-
zat pengotor yang tidak diperlukan
dan dapat mengganggu kemurnian
ekstrak. Keempat eksudat memiliki
tingkat kelarutan yang berbeda-
beda karena berasal dari tempat
tumbuh dengan kondisi lingkungan
dan geografis serta ekosistem yang
berbeda-beda pula.
Kromatografi Lapis Tipis
Uji ini bertujuan untuk
menentukan jumlah komponen
masing-masing dan fasa gerak yang
tepat. Berdasarkan prinsip like
dissolve like, pergerakan suatu
senyawa bergantung pada sifat
polaritas dengan fasa geraknya.
Jika fasa gerak polar, senyawa
polar akan cenderung terelusi atau
mengikuti pergerakan fasa gerak,
sedangkan senyawa polar akan
cenderung tertahan dengan fasa
diam yang bersifat polar jika fasa
gerak non polar dan begitu
sebaliknya.
Berdasarkan nilai Rf,
terdapat kemiripan pola noda yang
ditunjukkan dengan adanya
beberapa noda yang selalu
teridentifikasi dari masing-masing
ekstrak eksudat. Sejumlah noda
dengan berbagai macam warna
fluoresensi menandakan ekstrak
eksudat mangrove Avicennia
marina memiliki kandungan
senyawa kimia yang beragam dan
kepolaran yang berbeda-beda.
 Asam sulfat (H2SO4)
mampu bertindak sebagai reagen
visualisasi umum, namun sebagian
besar senyawa dapat hangus
karenanya dan ditandai dengan
bintik hitam (Merck, 1980).
Penyemprotan pereaksi penampak
noda universal H2SO4 10% dalam
metanol p.a pada KLT dengan
tujuan komponen yang sulit
terdeteksi dapat terlihat dan mudah
diamati. Setelah penyemprotan
penampak noda dan pegamatan
dengan cahaya tampak, jumlah
noda yang teridentifikasi lebih
banyak. Sedangkan pengamatan
dengan lampu UV 366 nm,
sebagian noda mengalami
peredaman fluoresensi dan atau
menjadi hilang. Asam sulfat yang
bersifat reduktor mampu merusak
gugus kromofor dari zat aktif
simplisia sehingga panjang
gelombangnya akan bergeser ke
arah lebih panjang (UV menjadi
Vis) dan noda menjadi tampak oleh
mata.
Identifikasi Kualitatif dengan KLT
Penampak Bercak Spesifik
Ekstrak eksudat mangrove
Avicennia marina dari demak,
lampung, semarang, dan brebes
mengandung golongan senyawa
antrakuinon, alkaloid,
triterpenoid/steroid, dan flavonoid.
Golongan senyawa tanin tidak
teridentifikasi pada uji ini, akan
tetapi belum dapat disimpulkan jika
sampel tidak mengandung senyawa
tersebut. Diduga pada saat
penyarian simplisia oleh pelarut,
kadar tanin yang terekstrak terlalu
sedikit sehingga sulit
teridentifikasi. Selain itu,
identifikasi dengan kromatografi
lapis tipis adalah metode
pemisahan yang sangat sederahana
dan memiliki limited of detection
sehingga perlu dilakukan
identifikasi lebih lanjut.
Identifikasi Kuantitatif dengan
Kromatografi Lapis Tipis
Kinerja Tinggi
Sumar Hendayana (2008)
menyatakan dalam bukunya bahwa
tujuan utama dari kromatografi cair
kinerja tinggi adalah mendapatkan
pemisahan yang sempurna.
KLTKT memiliki limit of detection
lebih rendah jika dibandingkan
dengan KLT manual terlihat dari
banyaknya komponen senyawa
yang teridentifikasi. Beberapa
komponen senyawa yang
terkandung dalam ekstrak eksudat
mangrove teridentifikasi sebagai
puncak-puncak kromatografi yang
memuat informasi seperti faktor
retensi (Rf).
Ekstrak eksudat mangrove
dari demak, semarang, dan brebes
mengandung sebanyak 5
komponen senyawa, sedangkan
dari lampung mengandung
sebanyak 9 komponen senyawa.
Jika dekolompokkan berdasarkan
faktor retensi, terdapat sebanyak 3
puncak kromatografi utama yang
selalu muncul pada kromatogram
KLTKT ekstrak eksudat mangrove
Avicennia marina dari berbagai
daerah. Ekstrak eksudat mangrove
Avicennia marina dari berbagai
daerah memiliki pola standar
puncak kromatografi kromatogram
KLTKT yang muncul pada kisaran
faktor retensi tersebut. Namun,
keempat sampel memiliki ciri khas
masing-masing, yaitu kadar
komponen setiap kromatogram
berbeda-beda dan beberapa puncak
kromatografi tidak teridentifikasi
seragam untuk semua
kromatogram.
Kesimpulan
 Berdasarkan identifikasi beberapa puncak kromatografi
kualitatif dengan KLT penampak yang hanya muncul pada salah satu
bercak spesifik ekstrak eksudat kromatogram KLTKT saja.
mangrove Avicennia marina dari
demak, lampung, semarang, dan Ucapan Terima Kasih
brebes mengandung senyawa Penulis mengucapkan
golongan antrakuinon, alkaloid, terimakasih kepada Bapak Dr.
terpenoid/steroid, dan flavonoid. Khairul Anam M.Si. selaku dosen
Berdasarkan identifikasi kuantitatif pembimbing, Bu Dewi Kusrini
dengan KLTKT, keempat ekstrak M.Si. selaku kepala laboratorium
tersebut memiliki 3 senyawa utama departemen kimia, Fakultas Sains
yang selalu muncul pada dan Matematika, Universitas
kromatogram KLTKT ekstrak Diponegoro dan orang tua penulis
eksudat mangrove Avicennia atas dukungan moril dan materil
marina dari berbagai daerah. sehingga artikel ini dapat
Pemisahan dengan metode KLTKT diselesaikan.
memiliki limit of detection lebih
rendah dibandingkan dengan KLT
manual dibuktikan dengan
banyaknya informasi senyawa yang
teridentifikasi. Keempat ekstrak
eksudat mangrove Avicennia
marina memiliki perbedaan yaitu
kadar masing-masing komponen Daftar Pustaka
senyawa bervariasi dan terdapat
ARS Aleut Analytical. 2017. How To Use A Syringe. ARS International: 2609 North River
Road Port Allen, LA 70767.
Hendayana, S., Kadarohman, A., Sumarna, AA., & Supriatna, A. 1994. Kimia Analitik
Instrumen. Edisi IKIP Semarang Press, Semarang.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2009. Farmakope Herbal Indonesia (Edisi
Pertama). Nomor 261/MENKES/SK/IV/2009.
Merck, E. 1980. Dyeing Reagents for Thin-Layer and Paper Chromatography. Amines
Amino acids Amino acids. https://doi.org/10.1007/978-3-662-02398-3.
Pascual, M. E., Carretero, M. E., Slowing, K. V., & Villar, A. 2003. Simplified Screening by
TLC of Plant Drugs. Pharmaceutical Biology, 40(2), 139–143.
https://doi.org/10.1076/phbi.40.2.139.5849.
Sherma, J., & Fried, B. 2003. Handbook of thin-layer chromatography. Journal of
Chromatography A, 588(1–2), 365–366. https://doi.org/10.1016/0021-
9673(91)85049-l.
Sonam, M., Singh, R. P., & Saklani, P. 2017. Phytochemical Screening and TLC Profiling of
Various Extracts of Reinwardtia indica. IJPPR, 9(4), 523–527.
https://doi.org/10.25258/phyto.v9i4.8125.
Susilo, D., Anam, K. dan Kusrini, D., 2014. Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase Getah
Mangrove (Avicennia Marina) Dan Kandungan Kimia Fraksi Aktifnya. Semarang,
Skripsi UNDIP.
Wagner, H., & Bladt, S., 1996. Preface to the second edition. Safeguard Measures in World
Trade. https://doi.org/10.4337/9781781956076.00006.
Wibowo, C., Kusmana, C., Suryani, A., Hartati, Y., Oktadiyani, P. 2009. Pemanfaatan Pohon
Mangrove Api-Api (Avicennia spp.) Sebagai Bahan Pangan Dan Obat. Di dalam:
 Prosiding Seminar Hasil-Hasil Penelitian IPB,158–159.
Withanawasam, D., 2002. Preliminary in Vitro Screening of Antibacterial and Anti-Fungal
Compounds of Mangrove Plant Extracts for Pathogens from Different Sources.
Yanaditia, E., 2017. Pengaruh Metode Ekstraksi Terhadap Kandungan Kimia Getah
Mangrove (Avicennia Marina) Dan Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase. SKRIPSI.
Semarang, Uiversitas Diponegoro.

Lampiran
Tabel 1. Hasil uji KLT penampak bercak spesifik
Golongan Reagen Penampak
No. Hasil Positif Keterangan
Senyawa Bercak
1 Antrakuinon KOH 5% Merah (UV 366 nm) +
2 Alkaloid Dragendorf LP Coklat Muda (cahaya tampak) +
3 Tanin FeCl3 5% Hitam (cahaya tampak) -
4 Triterpenoid Merah Kecoklatan (UV 366 nm) +
Liebermant - Bhurcard
5 Steroid Hijau (UV 366 nm) +
6 Flavonoid Uap Amonia Kuning (UV 366 nm) +

Tabel 2. Faktor retensi 3 puncak kromatografi utama

Gambar 1. Profil KLT

Keterangan :
b s l d b s l d b s l d
“d” adalah eksudat demak
“l” adalah eksudat lampung
“s” adalah eksudat semarang
“b” adalah eksudat brebes
Cahay UV 254 UV
Tampak nm 366

Antrakuinon Alkaloid Tanin Steroid/Triterpen Flavonoid

Gambar 2. Kromatogram KLTKT