2.

Embriogenesis Tanaman Embriogenesis adalah tahap pertama perkembangan organisme baru dari sel
pertamanya bernama zigot, yang muncul sebagai hasil dari pembuahan seksual, yaitu peleburan sel telur
dan sel sperma. Pada tanaman berbunga, perkembangan embrio biasanya terjadi setelah proses yang
dikenal sebagai pembuahan ganda di mana satu inti sel sperma haploid bergabung dengan inti sel telur
haploid untuk menghasilkan zigot diploid yang memulai perkembangan embrio, sedangkan yang lain
bergabung dengan di-haploid. inti sel sentral, memulai perkembangan endosperma, memberikan
makanan untuk embrio yang sedang berkembang. Setelah pembuahan, zigot memasuki masa diam,
yang dapat berlangsung dari beberapa menit hingga beberapa bulan pada spesies tanaman yang
berbeda setelah waktu tersebut zigot kemudian mengalami beberapa pembelahan berturut-turut
sehingga menghasilkan embrio yang matang. Pada hewan, rancangan tubuh dan semua jaringan organ
terbentuk selama embriogenesis, embrio tumbuhan sangat sederhana dan sebagian besar organ
terbentuk setelah embrio dari meristem. Embriogenesis tanaman biasanya dibagi menjadi tiga fase:
Yang pertama melibatkan pembentukan polaritas dan berlangsung hingga tahap embrio bola. Pada
tahap ini yang disebut proembrio (dari zigot hingga embrio bola) memiliki simetri radial. Pada tahap
kedua, peristiwa morfogenetik dalam embrio membentuk pola seluler dasar untuk perkembangan lebih
lanjut, lapisan jaringan primer dan juga pembentukan daerah perkembangan jaringan meristematik
berlangsung. Dan fase ketiga adalah fase postembrionik, yang melibatkan kejadian yang mempersiapkan
embrio untuk pengeringan, dormansi dan perkecambahan. Embrio tanaman dewasa mempunyai simetri
bilateral dan terdiri dari sumbu utama (kotiledon, epikotil, meristem apikal pucuk (SAM), hipokotil,
meristem apikal akar (RAM)). Monokotil merupakan tumbuhan yang hanya memiliki satu kotiledon
sedangkan dikotil memiliki dua. Jumlah sel kritis setelah proembrio masuk pada langkah pertama
diferensiasi, yaitu pembentukan embrioderm, bervariasi dalam famili tumbuhan yang berbeda, mis. Ada
sekitar 500 sel untuk Nelumbo nucifera (Nelumbonacea) (Batygina dan Vasilyeva, 2003) dibandingkan
dengan hanya 16 sel di Arabidopsis thaliana (Brassicaceae) (Howell, 2000). Pada tahap awal
embriogenesis angiospermae embrio memiliki simetri radial yang kemudian digantikan oleh bilateral.
Pertanyaan tentang kontrol genetik dari transformasi simetri masih dalam pembahasan. Ada data yang
mengkonfirmasikan peran transport auksin polar dalam proses ini, yang menunjukkan bahwa penerapan
inhibitor transpor auksin menyebabkan pembentukan embrio yang menyimpang (Geldner et al.,
2001,2003,2004). Di sini kami mempertimbangkan embriogenesis tipe Capsella yang paling umum yang
khas untuk tanaman model dikotil-donosa Arabidopsis thaliana dari famili Brassicaceae (Gbr. 2).
Pembentukan polaritas adalah salah satu langkah paling mendasar dalam penyusunan rencana tubuh.
Polaritas dimulai dari proses awal pembuahan, saat mengikuti fusi sel telur dan sel sperma inti zigot
bermigrasi dari bagian tengah ke kutub sel chalazal. Setelah pembelahan asimetris pertama dari zigot,
sel apikal kecil, yang kemudian menjadi embrio dan sel basal besar, nenek moyang suspensor, terbentuk
(Gbr. 2A a-b). Pembelahan pertama dan beberapa sel apikal menghasilkan proembrio, sedangkan sel
basal yang menempel pada jaringan ibu mengalami beberapa pembelahan membujur yang
menghasilkan suspensor, suatu struktur yang menyediakan nutrisi dari endosperm ke embrio yang
sedang tumbuh dan mengikatnya ke ibu. jaringan. Suspensor terdiri dari sel-sel vakuolasi besar yang
mengandung inti kecil
Gambar 2: Embriogenesis normal (seksual) (embriogenesis dalam Arabidopsis) A - Representasi skematis
dari tahapan embriogenik utama. a - zigot, b - embrio bersel dua, c- proembrio pada tahap kuadran, d-
proembrio globular awal, embrio e-globular, embrio f pada bentuk transisi, embrio berbentuk hati-g, h-
embrio pada kotiledon bengkok tahap, saya- embrio matang (tahap tongkat berjalan). Sel ca apikal, Cb-
sel basal, Pd - protoderm, Hs- hipofit, PE- peoper em- bryo, S - suspensor, Gm - meristem tanah, Pc-
prokambium, C- kotiledon, P- jaringan prokambial, V- vaskular jaringan. B, C, D-dibersihkan benih di
bawah mikroskop cahaya dengan DIC (kontras interferensi diferensial). B - Embrio pada tahap kuadran.
Embrio, Endosperma C - Embrio berbentuk hati awal. Bagian diwarnai biru Toluidine di bawah
mikroskop cahaya. H- turunan dari sel hipofisis; pc, sel prokambial; pd, protoderm; s, suspensor. D -
Embrio kotiledon tongkat dewasa.

kasus Arabidospsis suspensor dewasa memiliki delapan sel dan sel suspensor paling atas disebut
hipofisis. Yang terakhir mengambil bagian dalam tutup akar lateral dan pembentukan RAM dan juga
dianggap terlibat dalam sintesis auksin dan oleh karena itu dalam pemeliharaan polaritas di sepanjang
sumbu utama embrio yang sedang tumbuh. Menariknya, suspensor tidak memiliki koneksi
plasmodesmata (saluran mikroskopis yang melintasi dinding sel yang memungkinkan komunikasi sel dan
transportasi molekuler) ke sel-sel embrio tetapi memiliki karakteristik perkembangan dinding sel yang
rumit dari sel transfer seperti haustorium.

Pembagian pertama sel apikal melintang. Kemudian divisi melintang bergantian dengan longitudinal dan
dengan demikian proembrio melewati tahap dua- (Gambar 2A c), empat- (kuadran Gambar. 2B),
delapan- (oktan), proembrio bersel 16 dan seterusnya sampai ke globular tahap (Gbr. 2A-d, -e) saat
dimulainya histogenesis, yaitu diferensiasi sel embrionik, berlangsung. Pada tahap globular embrio
mengembangkan pola radial dengan lapisan luar sel berdiferensiasi menjadi protoderm (Pd). Dua lapisan
sel dalam embrio globular memiliki nasib perkembangan yang berbeda: sel meristem dasar (Gm)
mengakumulasi protein dan minyak dan memunculkan parenkim kortikal dan sel prokambial (Pc) yang
merupakan nenek moyang sel provaskuler. Sel-sel di lapisan yang berbeda dibedakan oleh pola
pembelahan dan penampilan morfologisnya. Pada tahap globular akhir sel subepidermal mulai divisi
antiklinal menghasilkan kotiledon inisial (daun embrionik pertama), sehingga embrio memasuki tahap
awal berbentuk hati (atau transisi) (Gbr. 2A-f-g, C). Kemudian kotiledon terus tumbuh dengan meristem
apikal pucuk yang membedakan antara kotiledon. Lapisan bawah embrio menghasilkan hipokotil dan
meristem akar. Dari tahap jantung pada embrio memperoleh simetri bilateral. Pembentukan lebih lanjut
dari organ memberikan bentuk pada embrio dan sesuai dengan nama panggung: jantung, torpedo dan
tongkat berjalan (kotiledon bengkok) (Gbr. 2 A g-i, C, D). Jaringan provaskuler dan prokambial
membedakan dari stadium berbentuk hati dan seterusnya.
Embrio tumbuhan relatif sederhana dalam morfologi, namun, sejumlah besar gen diekspresikan pada
tahapan yang berbeda selama embriogenesis. Misalnya, dalam Arabidopsis setidaknya 4000 gen penting
untuk terjadinya embriogenesis normal. Menurut konsep pembentukan pola pada embrio hewan dan
tumbuhan, embrio dibagi lagi menjadi segmen atau modul berbeda yang masing-masing memiliki
polaritasnya sendiri dan berinteraksi dengan segmen lain dengan cara tertentu. Hanya segelintir gen
yang merupakan pengatur utama, yaitu yang terlibat dalam pembentukan pola dan mengontrol proses
dasar rencana tubuh embrio. Menurut Jurgens (1991) hanya sekitar 1% dari semua gen yang penting
untuk embriogenesis tanaman adalah regulator utama. Salah satu gen pertama yang diekspresikan
secara selektif setelah pembelahan pertama zigot hanya di sel apikal adalah gen ARABIDOPSIS THALIANA
MERISTEM LAYER1 (ATML1) (Lu et al. 1996). Beberapa gen kunci lainnya mempengaruhi pola pada
Arabidopsis.

Mutasi pada gen GNOM menyebabkan kerusakan embrio dalam membentuk polaritas apikal-basal
(Mayer et al. 1993). Pembagian pertama zigot pada gnom mutan tidak asimetris sehingga menghasilkan
sel apikal dan basal dengan ukuran yang hampir sama. Embrio pada mutan gnom terlihat hampir bulat
yang menyebabkan kematian embrio .... Mutasi pada gen MONOPTEROS menyebabkan penghapusan
daerah basal dan kekurangan hipokotil dan RAM. Dalam monopteros mutan hanya sel dari tingkat atas
proembrio berkembang, sedangkan sel tingkat bawah tetap isodiametrik dan tidak membentuk file linier
(Berleth dan Jurgens, ¨ 1993). Dalam momopteros kotiledon menunjukkan simetri posisi yang kurang
dari embrio tipe liar yang

menunjukkan bahwa daerah basal proembrio tampaknya berpartisipasi dalam pembentukan gradien
hormon. Telah terbukti bahwa meskipun mutan momopteros tidak dapat mengatur tingkat basal
mereka tidak kehilangan kemampuan untuk membentuk akar di bawah perlakuan khusus (Berleth dan
Jurgens, 1993). ¨ Jadi, MONOPTEROS mempengaruhi fenotipe di awal perkembangan embrio, meskipun
lebih lambat dari gnom. Gen GURKE mengontrol pembentukan domain sentral dan apikal dari embrio
yang sedang berkembang. Cacat pada mutan gurke menunjukkan fenotipe yang berbeda pada tahap
awal jantung selama transisi embrio dari simetri radial ke bilateral. Alel GURKE yang rusak
mengakibatkan kegagalan pembentukan kotilod karena misorientasi dan keterlambatan pembelahan
dalam sel yang akan menjadi kotiledon promordia (Torres-Ruitz et al., 1996). Jenis gen pola embrio
lainnya adalah yang terlibat dalam pembentukan sumbu radial. Gangguan gen KNOLLE menyebabkan
cacat simetri radial. Mutan konlle menunjukkan cacat yang jelas pada tahap globular awal diikuti oleh
kurangnya epidermis yang berbeda, yang terganggu dan salah arah. Kloning dan identifikasi fungsi
KNOLLE mengungkapkan bahwa gen tersebut mengkodekan protein yang tampaknya terlibat dalam
target membran plasma untuk vesikula sekretorik (Lukowitz et al., 1996). Garis keturunan sel dalam
embrio terjadi menurut fungsi dugaannya pada pola spasial dan temporal tertentu. Perkembangan
embrio diatur oleh gen pengatur utama tertentu yang diikuti oleh aksi epistatis dari banyak gen pemain
yang lebih kecil. Pembuatan peta nasib sel embrio dilakukan oleh Poethig et al. (1986) untuk jagung
(tanaman monokotil) dan oleh Scheres et al. (1994) untuk Arabidopsis (tanaman dikotil) menggunakan
penanda transgen. Scheres dkk. (1994) mengikuti nasib sel dalam embrio berbentuk hati yang berfokus
pada garis keturunan sel akar dan hipokotil. Pengamatan penting adalah bahwa batas sektor tidak
didefinisikan sebagai batas morfologis. Ini menunjukkan bahwa garis keturunan sel berkorelasi dengan
tubuh hanya secara umum tetapi tidak persis. Ciri khas tumbuhan tidak seperti pada hewan adalah
bahwa tumbuhan juga dapat bereproduksi secara aseksual atau vegetatif, yaitu kemampuan untuk
bereproduksi dari jaringan somatik tanpa mendahului fusi gamet. Hal ini disebabkan kapasitas tingkat
totipotensi yang tinggi pada sel tumbuhan. Ini termasuk embriogenesis somatik, apomixis dan
perbanyakan vegetatif. Embriogenesis somatik adalah jalur perkembangan di mana sel somatik
konvensional atau sel gametik yang tidak dibuahi berkembang menjadi struktur mirip embrio yang
menyerupai embrio zigotik bipolar (ditinjau oleh Jimenez, 2001). Embrio somatik dikotil melewati tahap
perkembangan yang sama dengan pasangan zigotik, yaitu melalui tahap globular, jantung dan torpedo,
namun embrio somatik tidak menghasilkan suspensors di jaringan somatik. Sejak pertengahan abad ke-
20 embriogenesis somatik berhasil diinduksi dan dipertahankan hingga pembentukan tanaman dewasa
dalam percobaan kultur sel tanaman (kultur suspensi sel atau kultur kalus pada permukaan daun) untuk
sebagian besar spesies tanaman. Meskipun sebagian besar spesies tumbuhan dapat berkembang biak
melalui embriogenesis somatik in vitro, hanya beberapa spesies seperti yang termasuk dalam famili
Crassulaceae, atau genus Citrus yang biasanya membentuk embrio somatik secara in vivo. Misalnya, di
Bryophyllum (Yarbrough, 1932; Batygina, 2006) dan di Malaxis (Taylor 1967), sel somatik di tepi daun
biasanya mengalami embriogenesis aseksual dengan membentuk tunas adventif. Contoh lain
embriognesis somatik in vivo terjadi pada genus Paeonia, di mana zigot tidak secara langsung
menghasilkan embrio seksual dikotil biasa, melainkan membentuk sel ceonocitic.

Gambar 3: Embriogenesis somatik (aseksual) (embriogenesis di Paeonia). Bagian biji diwarnai dengan
warna hijau muda di bawah mikroskop cahaya. A - Inisiasi embrio somatik pada proembrio sel
coenocitic. B - Satu embrio somatik mendominasi yang masih melekat pada proembrio sel coenocitic
menyusut. C - Embrio somatik yang selamat memasuki tahap globular. D - Tahap globular embrio
somatik dan sisa-sisa proembrio sel coenocitic. E - Embrio somatik pada tahap bentuk hati. proembrio.
Setelah menghasilkan sekitar 1500 inti, proembrio ini memulai beberapa embrio somatik lainnya di
permukaannya (Gambar 3A, B). Dalam perjalanan embriogenesis embrio somatik terus berkembang
sementara proembrio secara bertahap menyusut dan menjadi tersingkir. Embrio somatik melewati
tahapan globular (Gambar 3C, D), jantung (Gambar 3E) dan torpedo. Ini khas untuk embrio dikotil.
Meskipun beberapa embrio somatik terbentuk di permukaan proembrio, hanya satu yang bertahan dan
menjadi layak (Brukhin, 1993; Brukhin dan Batygina 1994) (Gambar 3B-E). Secara umum, proses
embriogenesis somatik dapat dibedakan menjadi dua tahap yaitu induksi dan ekspresi. Selama fase
induksi, sel-sel somatik yang terdiferensiasi memperoleh persaingan embriogenik

tence dan berkembang biak sebagai sel embriogenik. Perubahan drastis pada pola ekspresi gen yang ada
dan program perkembangan perlu terjadi sebelum sel dapat memulai perkembangan embriogenik. Sel
harus berdiferensiasi, memperoleh kompetensi embrio, menjadi terinduksi secara embriogenik dan
menjadi ditentukan. Tahapan ini tidak serta merta terjadi dalam urutan yang telah ditentukan, karena
dalam beberapa kasus, perolehan kompetensi, induksi dan pembagian dapat terjadi secara bersamaan.
Embriogenesis somatik in vitro juga merupakan model yang sangat baik untuk mempelajari teori
embriogenesis tanaman, menentukan ekspresi gen dan mengukur akumulasi zat pada berbagai tahap
embriogenesis. Pada beberapa tumbuhan, seperti pada marga Taraxacum dan Poa, biji dapat diproduksi
dengan program perkembangan tanpa pembuahan seksual dalam proses yang disebut apomixis. Ada
beberapa jenis apomixis yang telah diamati di alam pada spesies tumbuhan yang berbeda. Namun, kelas
yang paling umum diamati didasarkan pada tiga mekanisme berbeda, yaitu embrio diplospori, apospori,
dan adventif (Koltunow, 1993). Secara diplospori, gametofit (kantung embrio) muncul dari sel induk
megaspore yang gagal melakukan pembelahan reduksi. Dengan demikian, semua sel dalam kantung
embrio diplosporik tidak tereduksi dan sel telur diploid memunculkan embrio tanpa pembuahan. Dalam
apospori, kantung embrio terbentuk dari sel somatik diploid dari nukelus tempat embrio berasal. Baik
apomik diplosporik dan aposporik disebut sebagai apomik gametofitik, karena dalam kedua kasus
tersebut produksi gametopit terjadi. Ada bentuk lain dari apomiksis yang disebut apomiksis sporofit,
ketika sel nucellar atau sel integumen (prekursor mantel biji) membentuk embrio adventif mirip dengan
cara pembentukan embrio somatik. Secara total lebih dari 400 spesies tumbuhan dapat berkembang
biak secara apomictically dalam kondisi alam. Apomixis dapat dianggap sebagai fenomena kloning
tumbuhan alami dan mungkin memainkan peran yang sangat penting dalam fiksasi sifat-sifat yang
berguna untuk perbanyakan tumbuhan. Jenis reproduksi aseksual lainnya hanya melalui struktur
vegetatif. Ini dikenal sebagai reproduksi atau perbanyakan vegetatif. Dengan proses ini tanaman baru
diproduksi tanpa menghasilkan biji atau spora. Reproduksi vegetatif adalah jenis perbanyakan klonal. Ini
hanya melibatkan struktur vegetatif, yaitu akar, batang, daun atau modifikasi strukturalnya seperti umbi
bersisik, umbi dan stolon (modifikasi batang). Beberapa tanaman seperti onak dan sebagian besar
spesies bambu menyebarkan batang bawah tanah yang menghasilkan tanaman baru yang tersebar pada
jarak yang cukup jauh dari tanaman aslinya. Daun (atau daun yang dimodifikasi-seperti sulur) dari
beberapa tanaman, mis. strawberry, menghasilkan tunas di bagian tepinya yang kemudian berkembang
menjadi miniatur tanaman yang rontok dan berakar. Kemampuan regeneratif tanaman ini dimanfaatkan
dalam pertanian dan hortikultura melalui teknik seperti perakaran stek dan okulasi serta tunas pohon
buah-buahan. Hal yang sama berlaku untuk memotong tanaman (seperti kentang biasa) menjadi
potongan-potongan yang kemudian ditanam terpisah, masing-masing dengan tunas ("mata"); dan untuk
berbagai teknik lainnya. Perbanyakan vegetatif tanaman yang penting secara ekonomi dan berguna
sekarang begitu meluas sehingga kebanyakan varietas hortikultura modern hanya diperbanyak melalui
kloning. Sebagian besar kasus reproduksi aseksual dan vegetatif ini muncul dari kemungkinan sel
tumbuhan yang berdiferensiasi mengalami dediferensiasi dan kemudian menghasilkan meristem, atau
jika tidak, berperilaku seperti sel induk.