racun
Ulasan
Racun Protein Risin dan Toksin Shiga sebagai Alat untuk
Mekanisme Seluler Internalisasi dan Intraseluler
Mengeksplorasi
Transportasi
Kirsten Sandvig1,2,* , Simona Kavaliauskiene 1
Kutipan: Sandvig, K.;
Kavaliauskiene, S.; Skotland, T. Itu
Toksin Protein Risin dan Toksin Shiga
sebagai Alat untuk Mengeksplorasi Seluler lipid; spektrometri massa
Mekanisme Internalisasi dan
Transportasi Intraseluler. Racun 2021,
13, 377. https://doi.org/10.3390/
toksins13060377
Diterima: 19 April 2021
Diterima: 22 Mei 2021
Diterbitkan: 25 Mei 2021
Catatan Penerbit:MDPI tetap netral
sehubungan dengan klaim yurisdiksi di
peta yang diterbitkan dan afiliasi kelembagaan-
iations.
Hak cipta: © 2021 oleh penulis.
Pemegang lisensi MDPI, Basel, Swiss.
Artikel ini adalah artikel akses terbuka
didistribusikan berdasarkan ketentuan dan
ketentuan Creative Commons
Lisensi atribusi (CC BY) (https://
creativecommons.org/licenses/by/
4.0/).
Racun 2021, 13, 377. https://doi.org/10.3390/toxins13060377
Racun 2021, 13, 377
1
dan Merobek Skotland
1
Departemen Biologi Sel Molekuler, Institut Penelitian Kanker, Rumah Sakit Universitas Oslo,
Rumah Sakit Radium Norwegia, 0379 Oslo, Norwegia; simona.kavaliauskiene@medisin.uio.no (S. K.);
toresko@uio.no (T. S.)
2
Departemen Biosains, Universitas Oslo, 0315 Oslo, Norwegia
* Korespondensi: ksandvig@radium.uio.no
Abstrak: Racun protein yang dikeluarkan oleh bakteri dan ditemukan pada tumbuhan dapat menjadi
ancaman bagi kesehatan manusia.
Namun, toksisitas ekstrem mereka juga dapat dieksploitasi dengan cara yang berbeda, misalnya, untuk
menghasilkan racun hibrida
kami pertama-tama menyajikan tinjauan sebagian sejarah, dengan penekanan pada toksin Shiga dan
yang diarahkan melawan sel kanker dan untuk mempelajari mekanisme transportasi dalam sel.
risin, tentang bagaimana hal itu terjadi
Investigasi selama
racun telah digunakan untuk mengkarakterisasi proses dan protein yang penting untuk
beberapa dekade terakhir telah menunjukkan betapa kuatnya molekul-molekul ini sebagai alat dalam
perdagangannya. Pada
penelitian biologi sel. Di sini,
paruh kedua artikel, kami menjelaskan bagaimana seseorang sekarang dapat menggunakan racun untuk
menyelidiki peran kelas lipid
untuk transportasi intraseluler. Dalam beberapa tahun terakhir, menjadi mungkin untuk menghitung
ratusan spesies lipid
menggunakan analisis spektrometri massa. Dengan demikian, sekarang juga dimungkinkan untuk
mengeksplorasi pentingnya
Kata kunci:
spesies lipid dalam transportasi intraseluler. Analisis terperinci dari perubahan lipid yang terlihat dalam
endositosis; transportasi intraseluler; Aparatus golgi; retikulum endoplasma; membran;
kondisi pengangkutan toksin yang terhambat mengungkapkan hubungan yang sebelumnya tidak
diketahui antara sintesis kelas
Kontribusi Utama:
lipid dan menunjukkan kemampuan sel untuk mengkompensasi dalam kondisi tertentu.
Kami membahas bagaimana toksin Shiga dan risin telah digunakan untuk
mempelajari endositosis dan
transpor intraseluler. Kami juga menunjukkan bagaimana analisis spektrometri massa lipid telah
berkontribusi pada
peningkatan pengetahuan tentang proses tersebut dan telah memberikan informasi baru tentang
metabolisme lipid.
1. Pengenalan
Sejumlah racun protein dari tumbuhan atau yang disekresikan oleh bakteri secara efisien
memabukkan
sel dengan mengikat permukaan sel dan, setelah masuk ke dalam sitosol, mereka menghambat
sintesis protein secara enzimatis, sehingga membunuh sel. Beberapa dari racun ini terdiri dari
1]).
dua
Contoh dari dua racun tersebut, toksin tumbuhan risin, yang terdapat pada biji Ricinus
gugus, satu yang mengikat sel dan satu lagi yang memiliki aktivitas enzimatik (untuk ditinjau,
communis, dan toksin bakteri Shiga, yang disekresikan oleh Shigella dysenteriae,
lihat [
ditunjukkan pada Gambar
1. Bagian yang aktif secara enzimatis dapat, dalam kedua kasus,
menonaktifkan
subunit 60S dari ribosom dengan menghilangkan satu adenin dari RNA 28S [ 2,3].
Menariknya, beberapa racun tumbuhan lain memiliki struktur dua rantai serupa yang
dihubungkan oleh
jembatan disulfida. Meskipun racun ini berasal dari tumbuhan yang berbeda, mereka memiliki
kemampuan 1].
yang sama untuk menonaktifkan ribosom dengan cara yang sama. Racun tersebut adalah abrin,
modeccin,viscumin,
dan volkensin [
https://www.mdpi.com/journal/toxins
2 dari 29
Gambar 1.Struktur (A) toksin Shiga (PDB ID: 1DM0 [ 4] dan (B) risin (PDB ID: 2AAI) [ 5]
ditentukan dengan kristalografi sinar-X. Gugus A yang aktif secara enzimatis berwarna merah, dan
gugus B
berwarna hijau. Fragmen A1 dari toksin Shiga berwarna merah lebih gelap daripada fragmen A2.
Jembatan 6] Hak Cipta
 Elsevier 2014.
disulfida yang menghubungkan bagian yang aktif secara enzimatik dengan sisa toksin ditunjukkan
dengan warna kuning dan
Sekitar 40 tahun yang lalu, para peneliti mulai memperoleh informasi tentang bagaimana
racun
ditandai dengan lingkaran biru pada struktur pita. Dicetak ulang dengan izin dari ref. [
ini dapat ditranslokasi ke sitosol. Data yang diperoleh saat itu menunjukkan bahwa
beberapa racun tampaknya memasuki sitosol setelah serapan endositik. Untuk toksin difteri,
toksin bakteri lain mampu menghambat sintesis protein (walaupun dengan ADP-
ribosilasi faktor pemanjangan 2) [
7], ada beberapa bukti untuk transfer ke sitosol setelah
serapan karena amonium klorida, yang diketahui meningkatkan pH lisosom, melindungi sel
dari keracunan [
8]. Pada tahun 1980, diterbitkan bahwa toksin difteri dapat masuk langsung
melalui
membran sel ketika sel-sel dengan toksin difteri sobek yang terikat permukaan terpapar pada
9,10]. Temuan ini membuka jalan untuk penyelidikan serupa terhadap beberapa racun
pH rendah [
lain
yang juga mengalami perubahan konformasi akibat pH rendah dan translokasi berikutnya
1]. Bagaimana dengan racun lain yang tidak memerlukan pH endosom
melalui membran [
rendah
untuk masuk ke dalam sitosol? Apakah endositosis tidak relevan untuk entri sitosol? Struktur
toksin kolera dengan cincin subunit B dan bagian A di tengahnya membuat para ilmuwan
menyarankan bahwa bagian A entah bagaimana dapat tenggelam melalui membran dan
memasuki 2+
kekurangan atau pH 6.0, mabuk
sitosol. Namun, seperti yang kita ketahui saat ini, tidak demikian halnya. Pada tahun 1982,
sel saat perlindungan dilepaskan [ 11]. Ini menunjukkan bahwa toksin
ditunjukkan bahwa risin
endositosis dapat memasuki sitosol, dan penelitian selanjutnya mengungkapkan bahwa
mengalami endositosis dalam kondisi protektif, seperti Ca
beberapa toksin, termasuk
toksin Shiga dan risin, dipindahkan ke Golgi dan UGD sebelum translokasi ke sitosol
(Gambar 2). Sebenarnya, toksin Shiga adalah toksin pertama yang ditemukan untuk diangkut
sepanjang jalan
dari permukaan sel ke Golgi dan RE [ 12]. Kemampuan racun protein ini untuk
ditranslokasi dari permukaan sel dan secara retrograde ke UGD dari mana gugus A
dilepaskan telah menjadikannya alat yang sangat baik untuk mempelajari proses dan langkah
pengangkutan
yang terlibat. Efek akhir mereka pada sintesis protein memberi kita sistem pengujian yang
sangat sensitif
racun protein tidak hanya dapat bermanfaat sehubungan dengan penyakit atau keracunan oleh
untuk kedatangan di sitosol. Dengan demikian, mencari senyawa yang melindungi dari
racun ini tetapi dapat membantu kita untuk memperjelas jalur transportasi dalam sel.
Konstruksi molekul
toksin yang dimodifikasi secara genetik dengan situs sulfasi, yang dimodifikasi di
13,14] telah sangat
trans-Golgi, dan situs glikosilasi yang dapat dimodifikasi di UGD [
membantu dalam mengungkapkan langkah mana yang terpengaruh. Dengan demikian, racun
telah berkontribusi pada pengetahuan kita
tentang transportasi dari permukaan sel ke endosom, ke aparatus Golgi, dan ke
UGD dan selubung inti. Racun juga dapat dieksploitasi untuk menyelidiki bagaimana sel berada

Racun 2021, 13, 377 3 dari 29

dipengaruhi oleh paparan perawatan lain. Misalnya, mereka telah digunakan untuk
menunjukkan bahwa 15].
serapan partikel nano dapat mengubah jalur seluler lainnya [

Gambar 2.
Endositosis dan transportasi retrograde toksin Shiga dan risin. Kedua racun tersebut mengikat
reseptor
permukaan sel. Toksin Shiga berikatan dengan glikosfingolipid Gb3, dan risin berikatan dengan
galaktosa terminal glikolipid atau glikoprotein. Setelah diendositosis, toksin diangkut langsung
dimana bagian-A (fragmen-A1 untuk toksin Shiga) dilepaskan dan ditranslokasi ke sitosol. Sekali dalam
ke aparatus Golgi atau melalui endosom daur ulang sebelum diangkut lebih lanjut ke UGD,
hidup
sitosol, rantai-A aktif menghambat sintesis protein dengan menghilangkan satu adenin dari RNA 28S
dari subunit ribosom 60S. Perhatikan bahwa daur ulang dan pengangkutan ke lisosom tidak
ditampilkan. 16] Hak cipta Springer 2013.
Dicetak ulang dengan izin dari ref. [
Yang penting, racun protein dapat dimanfaatkan dalam pengobatan [
17– 20]. Para peneliti sedang
mencoba menggunakan racun protein untuk membunuh sel kanker secara selektif dengan
membuat konstruksi
yang mengandung setidaknya bagian toksin yang aktif secara enzimatis dan antibodi terhadap
epitop pada sel kanker atau faktor pertumbuhan yang reseptornya sesuai
diekspresikan pada tingkat tinggi. tingkat pada sel target. Sejauh ini, beberapa produk yang
19,21].
mengandung bagian aktif
Glikosfingolipid netral Gb3, yang berfungsi sebagai reseptor toksin Shiga, sebagian besar
toksin difteri dan Pseudomonas exotoxin A telah disetujui untuk digunakan pada manusia [
ditemukan pada sel kanker [
17,18]. Oleh karena itu, toksin ini dapat digunakan untuk mendeteksi
kanker dan menargetkan
obat pada sel kanker. Satu studi yang memanfaatkan pengangkutan toksin ke UGD untuk
22], dan akan menarik untuk dilihat
pelepasan
pengembangan lebih lanjut di bidang penargetan toksin.
obat kankerostatik diterbitkan beberapa tahun lalu [
Seperti dijelaskan di bawah ini, pandangan kami saat ini tentang kompleksitas mekanisme
endositik,
seperti yang diilustrasikan pada Gambar
3, telah dikembangkan sebagian oleh studi racun protein seperti
sebagai risin dan toksin Shiga. Mengenai mekanisme yang terlihat pada Gambar
3, kami mengacu pada
mengikuti artikel baru untuk keterangan lebih lanjut: Endositosis yang bergantung pada klatrin
23,24];
[
Jalur yang bergantung pada Cdc42, yang dapat menyumbang 70% serapan cairan [
25]; diperbarui
tinjauan tentang FEME (Endositosis yang Dimediasi Endofilin Cepat) [ 26]; dan, untuk yang lebih
tinjauan umum, [27].
Racun 2021, 13, 377 4 dari 29

Gambar 3. Tinjauan mekanisme endositik dalam sel non-terpolarisasi (A) dan sel terpolarisasi (B). Kami telah mengindikasikan
beberapa
jalur seperti endositosis yang bergantung pada clathrin, caveolae (sekarang dianggap sebagai struktur yang cukup stabil), Cdc42 /
GRAF1,
dan lainnya. Perlu dicatat bahwa serapan clathrin-independent diatur dengan cara yang berbeda pada sisi apikal dan basolateral
seperti yang dijelaskan dalam teks. Perlu dicatat bahwa pada sel MDCK semua caveolae berada pada sisi basolateral. Dicetak
ulang dari 27].
tinjauan akses terbuka [

2. Jalur Seluler Dieksploitasi oleh Racun

Bagian ini menjelaskan beberapa aspek historis dari kemajuan ilmiah dalam biologi sel
yang melibatkan toksin, dengan penekanan pada toksin risin dan Shiga. Deskripsi tersebut juga
memberikan
latar belakang bagaimana racun dapat digunakan untuk memperjelas pentingnya lipid membran
3.
untuk transportasi intraseluler dan fisiologi sel, yang dibahas pada Bagian
2.1. Mekanisme Endositik dan Daur Ulang
Protein toksin risin mengikat berbagai molekul dengan galaktosa terminal. Seperti
yang dijelaskan dalam ulasan saat ini, toksin telah memberi kita informasi penting tentang
beberapa mekanisme seluler. Lebih dari 40 tahun yang lalu, kami menemukan bahwa risin dapat
dengan mudah diberi
label dengan yodium radioaktif dengan metode enzimatik (laktoperoksidase), yang
28]. Ini kontras dengan
mempertahankan
pelabelan menggunakan kondisi pengoksidasi kuat, yang mengurangi aktivitas risin.
afinitas pengikatannya pada permukaan sel, serta toksisitasnya [
Selanjutnya,
risin dapat dengan mudah dikeluarkan dari permukaan sel dengan penambahan laktosa,
sehingga memudahkan 29] dan, lebih jauh lagi, endositosis cairan itu
penggunaannya dalam studi endositosis. Studi awal mengungkapkan bahwa tidak ada
fase dan risin tergantung pada kepadatan sel [ 30–32]. Kepadatan sel kemudian ditunjukkan
batas suhu yang ketat untuk pengambilan risin [
mempengaruhi komposisi lipid sel [ 33,34]. Lebih lanjut, studi awal ini mengungkapkan bahwa
serapan endositik bukanlah jalan satu arah, karena risin yang diinternalisasi dapat keluar dari
sel lagi dalam bentuk yang utuh [
29,35]. Hal yang sama terjadi pada rantai-B risin, yang
menunjukkan
bahwa daur ulang tidak terkait dengan toksisitas risin. Sejak studi awal
daur ulang risin ini, pengetahuan tentang berbagai mekanisme daur ulang dan molekul yang
terlibat 36].
telah meledak, dan tinjauan tentang kompleksitas proses ini baru-baru ini diterbitkan
Serapan toksin yang tidak bergantung pada clathrin pertama kali disarankan untuk toksin
oleh Weeratunga dkk. [
kolera, yang
dapat diamati dalam caveolae oleh EM [ 37], dan selanjutnya di dalam sel dalam
vesikel endositik. Disarankan bahwa organel-organel ini, yang memiliki penampilan yang khas
sebagai invaginasi berbentuk labu dengan diameter 60-80 nm [
38], bertanggung jawab atas up-
2+
ambil racunnya. Karena toksin kolera dapat menyebabkan Ca transmembran- fluks dan kinase
aktivasi [ 39–41] ada kemungkinan bahwa toksin itu sendiri dapat mempengaruhi cubitan
caveolae.

Racun 2021, 13, 377 5 dari 29

Juga, pada saat itu, tidak dikecualikan bahwa racun itu menempel di lokasi ini dan, pada
paling tidak sampai batas tertentu, dengan cepat diambil oleh mekanisme lain seperti
endositosis yang bergantung
pada klatrin. Studi selanjutnya mengungkapkan bahwa toksin kolera, pada kenyataannya, dapat
diinternalisasi oleh 42– 44]. Serapan dari caveolae biasanya tidak terlalu
mekanisme yang berbeda, dan mekanisme serapan yang bergantung pada clathrin dan clathrin
proses yang efisien [ banyak
45]. Namun, caveolae dapat terjepit, dan isinya kemudian ditransfer
dan dynamin
ke endosom awal. Awalnya diterbitkan bahwa konten dari caveolae berakhir
dapat dilibatkan [
di struktur netral yang disebut "caveosom", dan dari sana, konten tersebut diangkut
ke retikulum endoplasma [ 46]. Namun, caveosom kemudian ditemukan sebagai arte-
fakta [47,48], dan penulis menyarankan agar istilah tersebut tidak digunakan lagi. Meskipun
demikian, para peneliti terus menjelaskan bahwa mereka dapat menargetkan, misalnya, partikel
nano untuk
"peringatan" untuk menghindari degradasi lisosom [
49]. Meskipun virus seperti SV40 dapat
menyebabkan pensinyalan dan masuk melalui peringatan [
50], virus ini juga dapat masuk ke sel oleh orang
 mekanisme endositik [ 51]. Menariknya, telah dibuktikan bahwa caveolin dapat menstabilkan
lain
ligan tertentu pada permukaan sel. Ini adalah kasus, misalnya, untuk autocrine mobility
factor (AMF) dan toksin kolera [ 52]. Perlu dicatat bahwa peran baru caveolae baru
-baru ini telah dikarakterisasi: Caveolae dapat menyediakan membran tambahan pada
tekanan mekanis dan direformasi dengan cara yang bergantung pada ATP [
38,53].
Selama tahun 1980-an, risin memainkan peran penting dalam menunjukkan bukti
keberadaan
endositosis yang tidak bergantung pada klathrin. Ketika sel terkena syok hipotonik dan
penipisan kalium, beberapa jenis sel kehilangan lapisan klathrin pada membran sel [
54]. Setelah
paparan sel terhadap pengobatan semacam itu, risin masih bisa berakhir di kompartemen
intraseluler yang tidak 55]. Demikian pula, ketika
tersedia untuk antibodi, dan selanjutnya memabukkan sel [
sitosol diasamkan-suatu kondisi yang menghalangi terjepitnya lubang berlapis klathrin-risin
diendositosis dalam beberapa jenis sel yang berbeda [
56]. Namun, perkiraan awal menunjukkan bahwa
lubang berlapis clathrin dapat menjelaskan semua serapan ke dalam sel [
57]. Pada saat itu, sejumlah
argumen digunakan untuk menimbulkan keraguan tentang keberadaan serapan clathrin-
independent.
Misalnya, ketika clathrin dilepaskan dari membran setelah deplesi kalium, apakah
masih ada mekanisme serapan yang cukup untuk mempertahankan endositosis dari struktur
Saat Anda menghilangkan lapisan clathrin atau mengasamkan sitosol untuk memblokir lubang
yang sama?
berlapis clathrin
, apakah Anda kemudian menginduksi mekanisme alternatif? Bahkan percobaan dengan sel yang
tidak terganggu,
serapan, sepertinya tidak membantu [
58]. Baru setelah Schmid-lab menunjukkan bahwa
yang menunjukkan bahwa Concanavalin A dan transferin berakhir di vesikel terpisah segera
serapan fase cairan berlanjut bahkan ketika serapan yang bergantung pada clathrin diblokir
setelah itu
oleh ekspresi 59,60] bahwa resistensi terhadap keberadaan
mutan negatif dominan dynamin [
endositosis yang tidak bergantung pada klatrin tampaknya menghilang. Dengan demikian,
perubahan pendapat di
lapangan bisa memakan waktu beberapa tahun. Kemampuan sel untuk mengatur jalur endositik
sebagai respons terhadap
perubahan mekanisme serapan lainnya merupakan tantangan saat mempelajari mekanisme
59,60], dan penelitian selanjutnya telah mengungkapkan pengaturan
tersebut. bersama caveolar
dan endositosis fase cairan yang bergantung pada Cdc42 oleh fosfokaveolin-1 [
61]. Setelah pengurangan
Serapan cairan berlanjut pada kecepatan yang sama setelah blok pada endositosis yang
phosphocaveolin-1, terjadi peningkatan serapan yang bergantung pada Cdc42 dan sebaliknya.
bergantung pada klathrin karena
Cavin
juga telah dilaporkan untuk menurunkan regulasi jalur yang bergantung pada Cdc42 [
62]. Tentu saja, nanti
mekanisme kompensasi [
studi telah menunjukkan kompleksitas mekanisme serapan [ 26,27,63].
Perlu dicatat bahwa endositosis clathrin-independent dalam sel terpolarisasi tunduk
pada regulasi diferensial pada sisi apikal versus basolateral. Ketika risin digunakan untuk
mempelajari serapan dari dua kutub dalam sel MDCK terpolarisasi, endositosis apikal
diregulasi oleh protein kinase A, protein kinase C, siklooksigenase, dan penghambatan
kalmodulin. Dalam kondisi yang sama, tidak ada efek pada serapan basolateral (untuk
ditinjau, lihat [
27]).
Peringatan diketahui bergantung pada kolesterol, dan penghilangan lemak ini atau
penambahan filipin, yang mengikat kolesterol, dengan cepat menghancurkan struktur ini [
64,65].
Namun, percobaan dengan risin dan penambahan metil-cycl-siklodekstrin, yang mengekstrak
kolesterol dari membran sel, menunjukkan bahwa makropinositosis juga sensitif terhadap a

Racun 2021, 13, 377 6 dari 29

pengurangan lipid ini [ 66]. Selanjutnya, invaginasi pit berlapis clathrin dihambat
dengan penambahan metil-β 67,68]. Bahkan dalam kondisi seperti itu, risin dapat
masih diendositosis oleh mekanisme lain (untuk ditinjau, lihat [
27]). Selain itu, literatur
menunjukkan bahwa penghambatan serapan ligan tertentu dengan reduksi kolesterol diambil
sebagai bukti serapan ligan tersebut oleh caveolae. Ketika melaporkan bahwa serapan
partikel nano yang agak besar (jauh lebih besar dari diameter caveolae) terjadi melalui
mekanisme ini
karena pengurangan serapan setelah penambahan metil-β-siklodekstrin, kehati-hatian harus
dilakukan sebelum menarik kesimpulan apa pun.
Toksin Shiga, yang mengikat glikosfingolipid netral Gb3, telah mengajari kita beberapa
pelajaran dalam biologi sel. Toksin dapat diendositosis oleh mekanisme endositik yang berbeda,
dan dapat dengan jelas mempengaruhi penyerapannya sendiri (untuk ulasan, lihat [
69– 72]). Itu adalah racun pertama
terbukti dapat berkumpul dalam lubang berlapis clathrin [
73] meskipun mengikat lipid yang
tampaknya tidak berinteraksi dengan protein permukaan. Studi selanjutnya yang menerapkan
metode berbeda
untuk mengganggu endositosis yang bergantung pada clathrin, termasuk ekspresi
mutan negatif dominan dynamin dan ekspresi RNA antisense
74,75]. Selanjutnya, ekspresi keduanya dominan
yang diinduksi menjadi rantai berat clathrin, telah mendukung temuan ini [
mutan negatif epsin dan eps15 mengurangi serapan toksin Shiga [ 43]. Mekanisme
di balik agregasi toksin dalam lubang berlapis clathrin masih belum diketahui. Meskipun Gb3
tidak melintasi membran, toksin tersebut mampu menginduksi aktivasi kinase [ 76– 78]
dan fosforilasi clathrin [ 76]. Toksin Shiga juga mampu meningkatkan jumlah
lubang berlapis clathrin, dan dapat memengaruhi masa pakai struktur ini [
79]. Lebih lanjut,
perlu dicatat bahwa serapan toksin Shiga meningkat pada konsentrasi toksin yang tinggi di
beberapa jalur sel. Peningkatan ini tergantung pada subunit-A dan tampaknya terjadi melalui
lubang berlapis klathrin, karena tidak terjadi pada sel BHK setelah induksi antisense ke rantai
berat klathrin [
80]. Meskipun toksin Shiga dapat diendositosis dari lubang berlapis klatrin,
fraksi yang menggunakan mekanisme serapan ini kemungkinan besar bergantung pada tipe sel.
Setelah pengurangan
akumulasi toksin Shiga di lubang berlapis clathrin, toksin dapat lebih mudah
diserap oleh mekanisme lain. Selain itu, karena mengganggu serapan yang bergantung pada
clathrin
juga dapat meningkatkan regulasi mekanisme lain, signifikansi serapan yang bergantung pada
clathrin
dengan atau tanpa AP2 [81]? Protein atau modifikasi protein lain mana yang terkait dengan
cenderung diremehkan. Masih ada beberapa pertanyaan yang harus dijawab dalam hal
pit berlapis klatrin yang diperlukan untuk proses ini? Adalah interaksi antara
pengambilan toksin Shiga dari lubang berlapis clathrin: Apakah ini terjadi terutama dari mantel
selebaran membran luar yang mengandung Gb3, dan lipid membran dalam seperti
diperlukan fosfatidilserin (PS) atau fosfatidilinositolfosfat (PIPs)? Spesifik
spesies lipid penting untuk proses ini? Kami baru-baru ini menerbitkan ulasan yang menjelaskan
bagaimana 82]. Baru-baru ini, PS
spesies PS tertentu dapat berperan untuk interaksi dengan protein sitosol [
ditemukan penting untuk pembentukan vesikel berlapis klathrin [ 83]. Pembentukan
kompleks
dan hilangnya PIPs selama pembentukan vesikel berlapis klathrin mungkin
23]. Dengan demikian, penelitian lebih lanjut menggunakan toksin Shiga
juga terlibat [ dalam hubungan ini adalah
kemungkinan akan memberikan lebih banyak informasi tentang biologi sel.
Toksin Shiga bertahun-tahun yang lalu ditemukan mampu menginduksi invaginasi pada
 permukaan sel [
84], dan terbukti diambil dari struktur seperti itu dengan cara yang bergantung
pada dinamin,
kolesterol, dan energi. Kemudian, ditunjukkan bahwa prosesnya
26], meskipun yang terakhir bergantung pada aktivasi faktor pertumbuhan.
bergantung pada endofilin A2 dan aktin dan agak terkait dengan jalur
Penyerapan toksin Shiga, di sisi lain, telah ditemukan bergantung pada perubahan
endositik yang disebut FEME [
kelengkungan yang diinduksi toksin 69].
, sebuah proses yang dipelajari oleh Johannes dan rekan kerjanya dalam beberapa tahun
2.2. Transportasi Endosom ke Golgi
terakhir [
Racun ternyata sangat berguna untuk mempelajari transportasi endosom ke Golgi.
Beberapa racun perlu ditranslokasi ke Golgi dalam perjalanan mereka ke sitosol, dan
alat awal yang berguna yang menunjukkan pentingnya langkah pengangkutan ini untuk
keracunan adalah obat
Brefeldin A (BFA), yang, dalam banyak jenis sel, mengganggu sebagian besar aparatus Golgi
dan

Racun 2021, 13, 377 7 dari 29

menginduksi pengangkutan cisternae Golgi kembali ke UGD [

85–87]. Namun, tidak semua sel memiliki
aparatus Golgi sensitif BFA [ 88– 90], dan obat BFA secara selektif melindungi terhadap
intoksikasi dalam sel dengan aparatus Golgi sensitif BFA [ 90]. Dengan demikian, seseorang
dapat mempelajari
efek dari berbagai molekul atau obat pada intoksikasi sel untuk mempelajari tentang
dengan langkah transportasi ini. Yang penting, modifikasi kimiawi dari hasil rekayasa genetika
interferensi
risin atau rantai-B Shiga dengan sulfat di trans Golgi atau dengan glikosilasi risin di
UGD [13,14] telah memfasilitasi studi kami tentang jalur ini. Selain itu, mikroskop elektron dan
fluoresensi
telah berkontribusi pada sejumlah besar pengetahuan yang kita miliki saat ini tentang
transpor ini. Kombinasi dari metode ini berguna untuk memvalidasi hasil, karena molekul
dapat diamati dalam suatu struktur tanpa harus bergerak melalui struktur tersebut. Di sisi
lain, molekul dapat ditransfer oleh pembawa efisien berumur pendek, yang sulit
untuk diamati. Juga, jika perlakuan sel mengubah tingkat sulfasi atau glikosilasi,
maka tidak ada cara mudah untuk "mengkompensasi" perubahan ini, yang mungkin disebabkan
oleh berkurangnya
pengangkutan molekul seluler melalui sel dan oleh karena itu persaingan yang lebih sedikit
Studi yang dilakukan bertahun-tahun yang lalu dengan risin dan toksin Shiga (atau rantai
untuk sulfasi
Shiga B) telah
. atau glikosilasi. Alternatifnya, bisa jadi karena aktivitas enzim yang terlibat lebih rendah.
mengungkapkan bahwa, dalam perjalanan mereka dari endosom ke aparatus Golgi, molekul
91,92]. Sangat menarik untuk dilihat dalam literatur,
toksin tidak
bahwa
harus diangkut melalui endosom akhir [
rantai Shiga B sekarang disebut-sebut sebagai alat yang mapan untuk mempelajari
pengangkutan ke aparatus Golgi
protein GPP130 diidentifikasi sebagai protein pengikat toksin Shiga yang membantu membawa
. Perbedaan penting antara risin dan toksin Shiga adalah bahwa endosom
toksin ini
ke aparatus Golgi [ 93,94]. Perlu dicatat bahwa GPP130 tidak berinteraksi dengan
toksin mirip Shiga 2 (Stx2), yang penting untuk penyakit yang disebabkan oleh spesies E. coli
yang mensekresi toksin, dan
mekanisme di balik pengangkutan toksin ini ke Golgi tidak diketahui. Selama bertahun-tahun,
kinase yang berbeda, penyortiran nexin, protein Rab, Golgin, dan kompleks SNARE telah
95,96]). Misalnya, dalam kasus
terbukti
Toksin Shiga, Rab6A ' ditemukan diperlukan untuk transportasi endosom ke Golgi [
97,98]. Untuk
terlibat dalam transpor endosom ke Golgi (untuk ulasan, lihat [
risin, Rab6A dan Rab6A ' tampaknya terlibat dalam langkah transpor ini, karena penghambatan
transpor terbaik diperoleh dengan merobohkan kedua isoform [
99]. Yang penting, penelitian
ini juga mengilustrasikan kemampuan sel untuk mengimbanginya. Ketika knockdown Rab6A
antara 40% dan 75%, diamati adanya penghambatan transpor, tetapi jika knockdown lebih baik
dari 75%, maka terjadi peningkatan regulasi Rab6A' dan tidak ada penghambatan transpor.
Eksperimen awal dengan penghambat PI-3 kinase menunjukkan keterlibatan enzim ini untuk
pengangkutan risin ke Golgi [
100], dan ini kemudian dikonfirmasi dalam penelitian dengan mutan
hVps34
dan siRNA [ 101]. Pada waktu yang hampir bersamaan, laboratorium yang berbeda menunjukkan
keterlibatan
menyortir nexin untuk pengangkutan toksin risin dan Shiga ke aparatus Golgi [ 101–103],
dan retromer dan clathrin juga dilaporkan terlibat dalam pengangkutan toksin Shiga [
104].
Toksin Shiga juga menginduksi disosiasi cPLA2a dari kompleks dengan Annexin A1, dan
bentuk bebas aktif dari enzim tersebut kemudian dapat memfasilitasi transpor Golgi [
41]. Kompartemen daur
ulang telah digambarkan sebagai stasiun perantara toksin Shiga dalam perjalanannya ke
Golgi [ 105–108], tetapi karena kompartemen ini tampaknya berbeda secara struktural dalam
berbagai
jenis sel, kepentingannya untuk pengangkutan toksin dapat bervariasi.
2.3. Pengangkutan Toksin Retrograde dari Golgi ke UGD dan Translokasi ke Sitosol
Mekanisme yang dipelajari dengan baik untuk transportasi retrograde dari Golgi ke UGD
adalah COPI-
pengangkutan molekul yang dimediasi yang mengandung urutan KDEL (untuk ditinjau, lihat [
109,110]).
Namun, baik toksin Shiga maupun risin tidak memiliki urutan seperti itu, tetapi masih dapat
berpindah dari 4. Studi dengan
jaringan trans-Golgi ke UGD, seperti yang diilustrasikan untuk toksin Shiga pada Gambar
transpor retrograde toksin Shiga telah menjelaskan kompleksitas transpor retrograde
secara umum, karena toksin Shiga ditemukan diangkut ke UGD melalui jalur COPI-independen
yang bergantung pada Rab6 [
111–113]. Studi selanjutnya tentang toksin Shiga dan risin telah
menggunakan siRNA
atau shRNA untuk menambahkan kandidat lain ke dalam daftar molekul yang mungkin terlibat
114,115]. Ini termasuk kompleks COPII, TRAPP, dan GARP. Namun,
dalam
penting untuk diketahui bahwa beberapa efeknya bisa jadi tidak langsung. Misalnya, salah
transpor retrograde [

Racun 2021, 13, 377 8 dari 29

penyortiran enzim furin, yang terlibat dalam pembelahan dan aktivasi toksin Shiga [
116], mungkin
mengarah pada perlindungan tetapi belum tentu memengaruhi pengangkutan toksin (untuk
pembahasan studi ini
16]). Selanjutnya, perubahan aparatus Golgi, misalnya, terganggunya hal ini
, lihat [
organel karena ekspresi peka suhu ∈- Subunit COP, ditemukan menginduksi
jalur transpor alternatif yang resisten terhadap BFA untuk risin ke UGD, yang menggambarkan
 kemampuan 117].
Beberapa molekul berbeda kini telah diidentifikasi terlibat dalam
sel untuk mengkompensasi blok dalam transpor [
transpor retrograde dan untuk translokasi bagian toksin yang aktif secara enzimatis (untuk
ditinjau,
95,96]). Sekali lagi, penting untuk menyadari kemampuan sel untuk menginduksi
lihat [ kompensasi
proses. Misalnya, Sec61 tidak ditemukan dalam penyaringan untuk molekul yang dapat
melindungi
melawan risin [ 115] tetapi sebelumnya ditemukan dapat berinteraksi dengan risin [
118–120].
Akibatnya, orang mungkin bertanya-tanya apakah mekanisme translokasi alternatif entah
bagaimana beroperasi dalam kondisi tersebut. Namun, skrining menunjukkan pentingnya
derlin, dan ada kemungkinan bahwa beberapa molekul dapat mendukung translokasi ke sitosol.
Ini berbeda dengan toksin Shiga, yang juga telah dilaporkan berada dalam kompleks dengan
Sec61 [121]. Studi skrining juga mendukung gagasan bahwa Sec61 terlibat dalam
transportasi ke sitosol [ 115].

Gambar 4.
Lokalisasi intraseluler dari toksin Shiga endositosis-HRP dalam sel A431. Toksin Shiga
diamati di Golgi cisternae (GO), retikulum endoplasma (ER) dan selubung inti (NE).
12] Hak Cipta 1992 Springer Nature.
Batang skala adalah 0,5 µ Direproduksi dengan izin dari ref. [

Senyawa Retro-2 adalah contoh bagaimana identifikasi senyawa yang melindungi

terhadap risin dan toksin Shiga dapat memberi kita pengetahuan dasar tentang mekanisme
umum. Obat ini memberikan perlindungan yang sangat baik terhadap toksin Shiga, tampaknya
karena kurangnya 122]. Hal ini terkait
pengangkutan GPP130 dari endosom ke aparatus Golgi [
dengan kemampuannya untuk menargetkan komponen ER Sec16A dan mencegah pengangkutan
sintoksin 5
dari UGD ke Golgi [ 122]. Namun, obat tersebut juga melindungi dari risin [
123], tetapi
penjelasan untuk perlindungan ini tidak jelas. Studi di masa depan kemungkinan akan
memberikan informasi lebih
lanjut tentang hubungan syntaxin 5 dengan kompleks SNARE lainnya dan transportasi di
daerah ER-Golgi. Menariknya, Retro-2 dilaporkan menghambat penargetan ER yang dimediasi
124], sebuah temuan yang
ASNA-1
mungkin
dan penyisipan membran protein berlabuh ekor [
terkait dengan perlindungan terhadap risin. Transportasi risin dari endosom ke aparatus Golgi
dilaporkan dihambat hanya sebesar 20% setelah knockdown ASNA-1 [ 125]. Jadi, risin

Racun 2021, 13, 377 9 dari 29

transportasi tampaknya diblokir pada langkah selanjutnya di jalur mundur daripada Shiga toxin.
In 1995, dilaporkan bahwa ekspresi transien mutan GTPase Sar1, ARF1, dan
Rab1, terlindung dari risin, sehingga mengganggu perdagangan ER-Golgi [126]. Apakah
perubahan pensinyalan di UGD yang disebabkan oleh perubahan di lokasi keluar UGD [
127] terkait dengan
perlindungan terhadap risin masih harus dijelaskan.
Racun shiga yang dihasilkan oleh bakteri masih menjadi ancaman bagi kesehatan manusia,
seperti halnya keracunan
dengan risin. Dengan demikian, klarifikasi tentang cara kerja racun, serta pencarian 72],
senyawa yang melindunginya, menjadi penting. Dalam ulasan oleh Kavaliauskiene dkk. [
klorokuin dan hidroksiklorokuin, kedua obat yang digunakan pada manusia, mampu
melindungi dari toksin Shiga dan Stx2. Dalam ulasan terbaru oleh Selyunin dan Mykhopadhyay [
95],
beberapa obat lain, yang semuanya disetujui untuk digunakan pada manusia, juga dijelaskan.
Namun,
tidak jelas apakah semua obat ini bekerja dengan cara yang sama. Klorokuin dapat menghambat
translokasi dari UGD, sedangkan obat-obatan seperti tamoxifen tampaknya menghambat
3.7, kami menjelaskan bagaimana beberapa senyawa lain, seperti analog
transportasi ke
glukosa,
Golgi. Di Bagian
lisolipid, dan prekursor lipid eter, melindungi sel dari toksin Shiga dan Stx2
dengan mengubah perdagangan. Akan menarik untuk melihat apakah obat-obatan semacam itu
mungkin
3. Peran Lipid untuk Fungsi Membran dan Transpor Intraseluler
mulai digunakan sehubungan dengan penyakit menular.
Di sini, kami memberikan latar belakang singkat tentang lipid dan pentingnya lipid untuk
struktur membran, termasuk pentingnya komposisi lipid membran seluler untuk
pengangkutan dan toksisitas toksin Shiga dan risin. Kami kemudian menjelaskan bagaimana
studi yang dilakukan dengan
mengganggu metabolisme lipid telah berkontribusi pada pemahaman kami
tentang transpor membran dan mengungkapkan aspek baru metabolisme lipid.
3.1. Kelas dan Spesies Lipid
Lipid membran dikelompokkan ke dalam kelas yang berbeda berdasarkan kelompok kepala
yang berbeda, seperti
sebagai kelas fosfolipid (PL) utama: Fosfatidilkolin (PC), fosfatidilserin (PS),
fosfatidiletanolamina (PE), fosfatidilinositol (PI), dan asam fosfatidat (PA). Masing-masing
dari kelas PL terdiri dari banyak spesies lipid karena berbagai komposisi
gugus asil lemak, dengan jumlah atom karbon dan ikatan rangkap yang berbeda (Gambar
5). Dengan demikian,
sel
mengandung beberapa ribu spesies lipid yang berbeda. Dengan analisis spektrometri massa
(MS) modern
128,129]. Kebanyakan PLS mengandung gugus asil lemak yang terikat ester, tetapi PLS
 yang terikat eter dapat
, dimungkinkan untuk menghitung beberapa ratus atau hampir seribu spesies lipid dalam satu
sampel [
membentuk 5-20% lipid di beberapa sel dan sering disebut sebagai " lipid yang terlupakan."
Kebanyakan PLS mengandung gugus asil lemak C16 atau C18 dengan ikatan rangkap nol, satu,
atau dua, meskipun
130]. Biosintesis PLS dan sphingolipid dan di mana bagian-bagian yang berbeda dari
rantai karbon yang lebih panjang dengan ikatan rangkap yang lebih banyak (misalnya, 20:4 dan
lipid ini disintesis ditinjau dan diilustrasikan oleh penulis [
22: 6) juga umum di beberapa 131].
kelas PL. Untuk artikel tinjauan terbaru dan terperinci yang menjelaskan keragaman
lipid membran, lihat [

Racun 2021, 13, 377 10 dari 29

Gambar 5.
Ilustrasi beberapa struktur lipid. Di bagian atas, kolesterol (CHOL) ditampilkan, diikuti
oleh PC 16: 0/16: 0, yang merupakan spesies lipid yang sering digunakan dalam membran model.
Namun, meskipun
spesies PC sangat umum dalam sel, PLS biasanya mengandung sangat sedikit spesies dengan dua
gugus asil lemak jenuh. PS 18: 0/18: 1 adalah contoh PL dengan 1 gugus asil lemak jenuh dan 1
gugus asil lemak tak jenuh, yang merupakan kombinasi gugus asil lemak paling umum di semua kelas
PL. Perhatikan bahwa semua
ikatan rangkap dalam PLS berada dalam konfigurasi cis dan gugus asil lemak tak jenuh paling sering
Sphingolipid SM d18: 1/24: 1 ditunjukkan dengan bagian sphingosine yang ditandai dengan warna
ditemukan pada posisi sn-2. PE-P 18: 0/20: 4 adalah contoh plasmalogen, yaitu lipid eter dengan
merah muda. Perhatikan bahwa
gugus alkenil, dan lipid ini sering mengandung gugus asil lemak tak jenuh ganda pada posisi sn-2.
Gugus asil lemak yang teramidasi-N sangat panjang sehingga secara teoritis dapat menembus kira-kira
setengah
https://www.lipidmaps.org/ (diakses pada 24 Mei 2021)). Dicetak ulang dari akses terbuka
jalan ke selebaran yang berlawanan. Struktur ini dibuat menggunakan alat gambar yang tersedia di
ulasan [132].
Peta Lipid (

Toksin Shiga berikatan dengan glikosfingolipid Gb3. Gb3 disintesis dari ceramide,
dan struktur Gb3 dan prekursor GlcCer dan LacCer ditunjukkan pada Gambar 6.
Seperti yang ditunjukkan pada Gambar
5, sphingolipid berbeda dari PLS, karena mereka memiliki
tulang punggung dasar sphingoid. Sedangkan rantai hidrofobik PLS dihubungkan ke unit
gliserol,
sphingolipid mengandung rantai asil lemak N-amidasi, di mana atom N berasal
dari serin. Gugus asil lemak dari sfingolipid sangat berbeda dari gugus di PLS
133,134]. Spesies glikosfingolipid
dan mengandung gugus asil lemak dengan 16 hingga 26 atom karbon [
yang paling umum
mengandung C16:0, C24:0, dan C24:1 yang tidak teroksidasi (dan beberapa sel
33,82]. Meskipun C16: 0 juga umum di
juga memiliki C22:0 dalam jumlah yang cukup besar) [
PLs, C24: 0 dan C24: 1 belum dilaporkan ada di PLs sepengetahuan kami.
Selain itu, gugus asil lemak tak jenuh tunggal dengan 16-20 atom karbon tampaknya tidak ada
dalam glikosfingolipid [ 6,135]. Namun, sejumlah kecil Gb3 yang mengandung C18: 1
baru-baru ini dilaporkan dalam sel H1299 [
136]. Karena glikosfingolipid biasanya mengandung sangat
sedikit spesies dengan gugus asil lemak C18 dan C20 yang teramidasi-N, glikosfingolipid
memiliki distribusi bimodal mengenai panjang rantai asil lemak [ 82], yang selanjutnya
dibahas di bawah ini.
Racun 2021, 13, 377 11 dari 29

Gambar 6.
Struktur reseptor Shiga Gb3 (A) dan sintesis Gb3 dari prekursornya GlcCer
dan LacCer (B). Huruf dan jumlah simbol struktur karbohidrat menggambarkan sifat
keterkaitan glikosidik. Jadi, β4 mewakili hubungan β1-4 dengan karbohidrat di sebelah kanan, dan Gb3
6] dengan persetujuan dari Elsevier.
adalah Gala1-4galß1-4GlcCer. Digambar ulang dari [

Lipid membran bersifat amfifilik dengan kepala hidrofilik dan ekor hidrofobik.
Mereka membentuk membran bilayer di mana gugus asil lemak berada di tengah, dan
kelompok kepala menghadap ke sekeliling di kedua sisi. Yang penting,
lipid didistribusikan secara asimetris dalam lapisan ganda seluler. Untuk pembahasan saat ini,
distribusi lipid yang asimetris dalam membran plasma (PM) menjadi penting. Di PM, mungkin
semua
glikosfingolipid dan sebagian besar SM dan PC ditemukan di selebaran luar, sedangkan PS, PE,
137,138]. Meskipun mungkin ada
PI, dan PA hampir secara eksklusif terletak di selebaran bagian dalam [
menjadi variasi yang cukup besar antara panjang rantai dan jumlah ikatan rangkap di
berbagai kelas PL, mereka paling sering mengandung gugus asil lemak jenuh pada posisi sn-1
dan gugus asil lemak tak jenuh pada posisi sn-2.
Kolesterol merupakan lipid penting dalam membran biologis, dan dapat membentuk 30-40
mol% lipid dalam PM. Banyak peneliti telah mempelajari interaksi antara
kolesterol dan lipid membran lainnya, serta bagaimana kolesterol didistribusikan di antara
kedua selebaran tersebut. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa hampir semua kolesterol
terletak terutama
di selebaran dalam atau luar PM, sedangkan penelitian lain melaporkan bahwa
kolesterol kurang lebih terdistribusi secara merata di antara kedua selebaran tersebut.
Kesimpulan yang menyimpang ini menunjukkan bahwa beberapa metode yang digunakan untuk
mempelajari distribusi kolesterol
139]. Berdasarkan beberapa laporan bahwa, misalnya, eksosom mengandung lebih dari 40
dalam PM tidak dapat dipercaya. Jadi, kami merujuk pada ulasan yang membahas
mol%
kolesterol [ 140], sulit untuk dipahami bahwa kolesterol terutama hanya dapat ditemukan di
masalah kontroversial ini [
salah satu dari dua selebaran.

3.2. Interleaflet Coupling

Studi simulasi dinamis molekuler telah terbukti sangat berharga untuk mempelajari
struktur membran, termasuk memperkirakan derajat interaksi antara dua leaflet
membran, yang sering disebut sebagai interleaflet coupling atau interdigitasi.
Meskipun kopling interleaflet seperti itu juga diamati pada model bilayer simetris, kopling yang
lebih kuat 141]. Interdigitasi terbesar diamati
diperoleh saat menggunakan model asimetris [
ketika memasukkan sphingolipid rantai sangat panjang, seperti yang memiliki 24 atom karbon,
sebagai
rantai ini dapat melintasi bidang tengah membran dan berlanjut jauh ke
dalam selebaran yang berlawanan, seperti yang diilustrasikan pada Gambar
7 [141– 144]. Seperti disebutkan di atas, glikosfingolipid

Racun 2021, 13, 377 12 dari 29

tunjukkan distribusi bimodal dengan sebagian besar gugus asil lemak N-amida yang
mengandung 16 82] bahwa spesies glikosfingolipid telah
atau 24 atom karbon. Kami baru-baru ini berspekulasi [
mengembangkan cara ini untuk mendapatkan kekuatan yang berbeda dari kopling interleaflet
atau pensinyalan melalui
PM.
 Gambar 7.
Ilustrasi interdigitasi antara 2 selebaran membran. (A) Bilayer multikomponen
dimana SM d18: 1/24: 0 ditampilkan sebagai batang kuning dengan 8 atom karbon terakhir
digambarkan sebagai bola merah.
Lipid pada selebaran luar ditampilkan sebagai kaca biru transparan dan lipid pada selebaran dalam
sebagai
kaca abu-abu transparan. Untuk kejelasan, SM d18: 1/24: 0 hanya ditandai di bagian tengah. (B) Model
bilayer SM d18: 1/16: 0 dan kolesterol pada selebaran luar dan dengan PS 18: 0/18: 1 dan kolesterol
pada selebaran dalam. (C) Mirip dengan (B), tetapi SM d18:1/16:0 telah ditukar dengan SM d18:1/24:0.
Warna biru digunakan untuk leaflet bagian luar dan warna kuning digunakan untuk leaflet bagian
dalam. Perhatikan bahwa gugus 141] dari mana angka ini direproduksi.
asil lemak N-amidasi pada (C) menembus lebih dalam ke selebaran yang berlawanan daripada pada (B).
UntukSelama beberapa tahun terakhir, menjadi mungkin untuk membuat vesikel lipid sintetis
(liposom)
dengan lapisan ganda lipid asimetris. Kami percaya bahwa penggunaan liposom dan molekul
detail selengkapnya, lihat artikel akses terbuka [
tersebut
studi simulasi membran asimetris akan berkontribusi pada pengetahuan baru yang penting
tentang membran sel selama beberapa tahun ke depan. Ini penting, seperti yang dibahas dalam
ulasan terbaru [82], bahwa penelitian tersebut dilakukan dengan menggunakan spesies lipid
yang umum
dalam sel dan dengan distribusi lipid di antara dua selebaran yang meniru yang diamati pada
membran biologis. Sejauh ini, sebagian besar penelitian telah dilakukan dengan menggunakan
lapisan ganda simetris
yang terdiri dari spesies lipid yang tidak umum dalam sel. Meskipun PLS yang mengandung
gugus asil lemak seperti C16: 0, C18:0, C16:1, atau C18: 1 terdapat dalam jumlah yang sangat
berbagai protein. Kita juga harus ingat bahwa membuat liposom simetris standar
rendah di dalam sel,
dengan, misalnya, komposisi lipid "mirip endosom" atau "mirip eksosom", menghasilkan
spesies ini sering menjadi komponen lipid utama dalam liposom yang digunakan untuk
membran
mempelajari interaksi dengan

Racun 2021, 13, 377 13 dari 29

dengan komposisi pada selebaran luar yang sangat berbeda dengan vesikula liposom ini adalah
dimaksudkan untuk meniru.

3.3. Metode yang Digunakan untuk Kuantifikasi Gb3

Kuantifikasi atau estimasi jumlah Gb3 seluler telah dilakukan
dengan menggunakan banyak sistem analitik yang berbeda, dan penelitian semacam itu telah
mengungkapkan perbedaan
besar antara jumlah total Gb3 dan jumlah relatif spesies Gb3 di berbagai
6]. Metode-metode ini termasuk penggunaan analisis MS setelah ekstraksi lipid dari
lini sel [
lisat sel. Protein berlabel fluoresen (toksin Shiga, Shiga B, atau antibodi) dapat digunakan
untuk kuantifikasi langsung pada sel atau fase padat, termasuk setelah pemisahan lipid
dengan kromatografi lapis tipis (TLC). Karena Gb3 biasanya berisi sebagian besar N-amidated
Gugus asil lemak C16 dan C22-24, spesies Gb3 dipisahkan menjadi dua pita pada TLC. Ini
juga dapat dikuantifikasi dengan pewarnaan orsinol pada gugus karbohidrat atau menggunakan
MALDI-
TOF MS langsung di piring. Kami merujuk ke ulasan kami sebelumnya, yang menampilkan
tinjauan menyeluruh
diskusi tentang variasi total Gb3 dan kandungan spesies dari beberapa garis sel dan
metode yang digunakan untuk analisis tersebut [
6]. Kami menyimpulkan bahwa analisis ekstrak MS adalah
metode yang paling
dapat diandalkan untuk kuantifikasi Gb3 dalam sel.
3.4. Situs Pengikatan untuk Gb3 pada Toksin Shiga
Pengikatan toksin Shiga ke glikosfingolipid Gb3 telah dipelajari dengan
berbagai sistem pengujian, termasuk sel, liposom, dan fase padat, seperti yang dibahas secara
menyeluruh
dalam ulasan sebelumnya [
6]. Masing-masing dari lima rantai-B memiliki tiga situs pengikatan untuk
Gb3 yang menghasilkan
total 15 situs pengikatan teoretis pada toksin Shiga untuk Gb3. Dua dari tiga
tempat pengikatan pada setiap rantai-B berikatan dengan Gb3 ketika struktur karbohidrat
tegak lurus dengan permukaan membran, sedangkan satu situs berikatan dengan bagian
diorientasikan mendekati
karbohidrat 8). Hal ini sangat
ketika diorientasikan hampir sejajar dengan permukaan membran (Gambar
menarik karena, dengan tidak adanya kolesterol, glikosfingolipid memiliki struktur karbohidrat
yang mencuat hampir tegak lurus dengan permukaan membran, sedangkan keberadaan
kolesterol yang dekat dengan glikosfingolipid membuat bagian karbohidrat membengkok dan
menjadi hampir sejajar dengan membran. permukaan [
145,146]. Tidak diketahui berapa banyak dari
situs-situs ini, atau situs mana, yang harus diikat oleh toksin Shiga agar dapat diendositosis.
Juga
tidak diketahui bagaimana berbagai spesies Gb3 berkontribusi pada pengikatan dan penyerapan
6]. Seperti disebutkan di atas, spesies Gb3 yang
toksin Shiga; kita
mendominasi
telah membahas ini secara rinci sebelumnya [
dalam sel adalah spesies dengan C16:0, C24:0 dan C24:1. Sedangkan spesies C16:0
diharapkan dapat menembus kira-kira ke bidang tengah membran, spesies C24:0 dan
C24:1 harus dapat mencapai hampir setengah jalan ke selebaran yang berlawanan. Meskipun
jumlah spesies Gb3 bervariasi di antara garis sel dan mungkin mencakup sejumlah kecil spesies
lain selain tiga yang disebutkan, kami merasa luar biasa bahwa C24:1 adalah satu-satunya
spesies 8].
yang mengandung ikatan rangkap dan hadir dalam jumlah tinggi. Dalam sel HEp-2 yang kami
Pentingnya berbagai spesies Gb3 terhadap pengikatan dan penyerapan toksin Shiga,
gunakan untuk
serta mengapa sel memiliki begitu banyak spesies C24:1 yang tidak terionisasi di mana ikatan
sebagian besar penelitian kami, spesies C24: 1 merupakan sekitar 50% dari total Gb3 [
gandanya adalah
ditemukan hampir persis di bidang tengah membran (C24:1 adalah asam nervonat dimana
ikatan rangkap berada antara C15 dan C16), merupakan masalah yang perlu diselidiki lebih
lanjut.
Racun 2021, 13, 377 14 dari 29

Gambar 8.
Situs pengikatan Gb3 ke B-pentamer toksin Shiga ditunjukkan dengan kristalisasi bersama
dengan a
Analog Gb3 (PDB protein bank IBOS) [
147]. Masing-masing dari 5 subunit B toksin Shiga berpotensi
mengikat 3 molekul Gb3. Situs 1 dan 3 mengikat karbohidrat hampir tegak lurus dengan permukaan sel
, sedangkan situs 2 mengikat karbohidrat hampir sejajar dengan permukaan membran. Dicetak ulang
dengan izin dari ref. [ 148] Hak Cipta 2015 Elsevier.

3.5. Rakit Lipid

Rakit lipid biasanya dideskripsikan diperkaya dengan sphingomyelin, kolesterol, dan PLS
dengan gugus asil lemak jenuh, sehingga sebagian besar model rakit lipid hanya mengandung
PLS
dengan dua gugus asil lemak jenuh di selebaran bagian dalam. Kami menantang pandangan
banyak sel telah dijelaskan mengandung sejumlah besar rakit lipid. Pada saat yang sama,
seperti itu karena
studi lipidomik kuantitatif yang dilakukan selama beberapa tahun terakhir telah menunjukkan
bahwa sel
mengandung sangat sedikit PLS dengan dua gugus asil lemak jenuh [
82]. Fakta bahwa daerah dengan
fraksi besar sphingolipid dan kolesterol lebih sedikit cairannya dibandingkan bagian lain dari
membran sel mungkin sebagian karena sphingolipid sering mengandung sangat sedikit
gugus asil lemak N-amida dengan ikatan rangkap dan PLS dengan gugus asil lemak tak jenuh
ganda terutama
ditemukan di daerah membran lainnya. Kami juga bertanya-tanya apakah pandangan bahwa
rakit lipid mengandung sebagian
besar PLS dengan dua gugus asil lemak jenuh berasal dari studi awal dengan
analisis lipidomik kuantitatif terperinci dari membran tahan deterjen (DRM). Dalam
penelitian tersebut, DRM dilaporkan sangat diperkaya dengan PLS jenuh, tetapi pembaca
149].
mungkin
Gb3 dilaporkan ada di domain DRM dan non-DRM dari beberapa sel
telah mengabaikan bahwa penulis mendefinisikan bahwa "fosfolipid dianggap jenuh jika
baris [150]. Ada banyak diskusi tentang DRM sebagai alat untuk mempelajari rakit lipid [
151],
mengandung tidak lebih dari satu ikatan rangkap" [
tetapi komposisi lipid DRM mungkin, setidaknya sampai batas tertentu, mencerminkan
komposisi
rakit tersebut. Berbagai penelitian, termasuk beberapa yang menggunakan DRM, telah
menunjukkan bahwa 152,153]. Nanodomain yang mengandung kolesterol telah
spesies Gb3 yang terdapat dalam fraksi membran orde lipid tinggi terlibat dalam transpor
dilaporkan penting untuk pensinyalan intraseluler yang diinduksi toksin Shiga karena
retrograde
penambahan 77], dan ekstraksi
dan toksisitas toksin Shiga [
zat pengikat kolesterol filipin memiliki efek penghambatan [
kolesterol menggunakan metil-cycl-siklodekstrin mengurangi pengangkutan toksin Shiga ke
aparatus Golgi
154].
[
3.6. Pensinyalan ke dalam Sel karena Pengikatan Toksin Shiga ke Gb3 di Selebaran PM luar
Pengikatan toksin AB5 multivalen ke reseptor glikosfingolipid (toksin Shiga
mengikat Gb3 dan toksin kolera mengikat GM1) pada sel menghasilkan sinyal
intraseluler [
77,79,155–158], seperti yang dibahas di Bagian
2.1, yang menimbulkan pertanyaan tentang
bagaimana pengikatan
racun ke selebaran ekstraseluler PM dapat menghasilkan pensinyalan intraseluler. Dalam

Racun 2021, 13, 377 15 dari 29

selain itu, pengikatan antibodi atau lektin ke glikosfingolipid ini menghasilkan pensinyalan intra-
seluler [ 41,159,160], menunjukkan bahwa efek pensinyalan tersebut disebabkan oleh
pengelompokan
glikosfingolipid. Toksin kolera dapat memicu pensinyalan intraseluler melalui banyak
jalur karena mampu mengikat juga ke glikoprotein permukaan [ 161– 163], sedangkan tidak
ada reseptor lain selain Gb3 yang diketahui mengandung toksin Shiga. Kami baru-baru ini
membahas kemungkinan bahwa
pensinyalan intraseluler setelah pengikatan toksin Shiga ke Gb3 dapat disebabkan oleh
pengelompokan
Gb3 di selebaran luar, yang, pada gilirannya, karena efek interdigitasi, menyebabkan
pengelompokan
lipid di selebaran bagian dalam (mis., PS atau PIPs). Pengelompokan lipid dalam selebaran ini
7), kami berspekulasi bahwa pengelompokan PS seperti itu dapat
dapat menghasilkan
mengakibatkan
pensinyalan intraseluler. Karena tingginya kadar PS di selebaran bagian dalam, tingginya
pengikatan dan aktivasi beberapa dari banyak protein pengikat PS yang diketahui terlibat dalam
82] untuk diskusi yang menyeluruh).
jumlah
pensinyalan intraseluler (lihat [
PS 18:0/18:1 dan interdigitasi yang kuat antara spesies PS ini dan
3.7. Efek pada Endositosis dan / atau Transpor Retrograde akibat Manipulasi Lipidom
rantai sphingolipid yang sangat panjang (Gambar
Laporan awal tentang efek toksin Shiga di berbagai lini sel dan kandungan Gb3
spesies dalam sel-sel ini telah dibahas sebelumnya [6]. Pada bagian ini, kami fokus pada studi
di mana endositosis dan transpor intraseluler toksin Shiga dan risin telah diukur
 setelah manipulasi lipidom seluler dan perubahan lipid telah dikuantifikasi
1.
menggunakan analisis MS. Gambaran umum dari studi ini dapat ditemukan pada Tabel

3.7.1. Konsekuensi dari Penurunan Jumlah GSL

Sepengetahuan kami, studi pertama di mana pengukuran endositosis dan
transpor intraseluler dikombinasikan dengan lipidomik kuantitatif dilakukan pada sel HEp-2
menggunakan dua penghambat sintesis sfingolipid. Fumonisin B1 (10 µ M, penghambat
sintase Cer) dan PDMP (1 µ M, penghambat sintase GlcCer) keduanya menurunkan kadar Gb3
sekitar 50% setelah inkubasi 24 jam dan mengakibatkan penurunan besar
pengikatan/serapan toksin Shiga. Penurunan lebih lanjut dalam pengangkutan dari endosom ke
aparatus Golgi 164], seperti yang dirangkum dalam Tabel
1. Tidak
menghasilkan perlindungan yang besar terhadap toksin ini [
ada perubahan toksisitas risin sesuai dengan laporan bahwa pengangkutan retrograde risin
hasilnya sama baiknya atau sedikit meningkat pada sel yang kekurangan glikosfingolipid [
165,166].

3.7.2. Studi yang Berkaitan dengan Lipid Eter

Meskipun PLS dengan rantai alkil atau alkenil yang terikat eter (PLS yang mengandung
gugus alkenil sering disebut plasmalogen) membentuk 5-20% lipid di banyak sel,
sejauh ini hanya ada sedikit penelitian yang menunjukkan pentingnya lipid untuk transpor
intraseluler. Rantai tertaut eter
paling sering ditemukan pada posisi sn-1, sedangkan posisi sn-2 sangat
sering mengandung rantai asil lemak tak jenuh ganda (PUFA) seperti asam arakidonat (C20:4).
Rantai yang terhubung dengan eter ditemukan di beberapa kelas PL, tetapi paling sering di PE
dan PC classes. 167–172]. Untuk ulasan tentang fungsi biologis dari
In sebagian besar penelitian, eter PE telah dilaporkan sebagai lipid eter yang dominan, dengan
lipid eter, lihat [ 168,169,173– 175].
alkenil
Penambahan prekursor lipid eter heksadesilgliserol (HG) ke sel HEp-2 menghasilkan
eter mendominasi alkil eter [
peningkatan besar pada lipid eter dan penurunan GSL, dengan
pengurangan total Gb3 sekitar 25% (tidak ada perubahan pada distribusi spesies Gb3) [
176]. Perawatan ini
memberikan perlindungan sel yang sangat kuat terhadap toksin Shiga dan bahkan perlindungan
yang lebih kuat
terhadap Stx2 [177].

Racun 2021, 13, 377 16 dari 29

Tabel 1.Ringkasan studi yang bertujuan untuk mengungkap korelasi antara endositosis, transpor intraseluler, dan lipid seluler. Panah ke atas menandai peningkatan tingkat lipid, pengikatan,
atau langkah
→ Golgi " berarti pengangkutan dari endosom ke aparatus Golgi. "Golgi → ER " berarti pengangkutan dari aparatus Golgi ke retikulum endoplasma.
-langkah yang mengarah ke toksisitas, dan panah ke bawah menandai sebaliknya. Jumlah panah menunjukkan ukuran efek. Kotak kosong berarti tidak diukur, dan tanda untuk yang serupa ( ~
) berarti tidak ada
1 Endo → GlcCer
atau perubahan yang sangat kecil. "Endo
Pengobatan Mengikat Serapan Golgi → ER Toksisitas Cer Gb3 Acyl PL Eter PL Informasi lainnya
Golgi LacCer

2 PE ↑↑
Fumonisin Stx ↓↓ ~ Stx ↓↓↓ Stx ↓↓↓ ↓↓ ↓↓ ↓↓ PE ↑↑ Tidak berpengaruh pada risin
PC ↓
3
PDMP Stx ↓↓ ~ Stx ↓↓↓ Stx ↓↓ ~ ↓↓ ↓↓ ~ ~ Tidak berpengaruh pada risin

4 PI ↑↑ PE ↑↑ 4
HG Stx ↓ ~ ~ Stx ↓↓ Stx ↓↓↓ ~ (↑) ↓↓ ↓↓ Tidak berpengaruh pada risin. Lihat
LPI ↑↑↑ PC ↑↑
juga
5 PA ↑↑ PE ↓
Kepadatan sel Stx ↓↓ ~ ~ ~ Stx ↓↓ ↑ ↑ ↑ Tidak berpengaruh pada toksin difteri
PI + PE↓ PC ↓

6 Lanjutan. 3% ↓1% Menghambat pelepasan toksin Shiga

2-DG ~ ~ ~ ~ Stx ↓(↓) ~ (↑)
2-DG 2-DG A1 di ER
7
FDG Stx ↓ ~ ~ Stx ↓ Stx ↓↓↓ ~ ↓↓↓ ↓↓↓ PI ↑ Menghambat synth GlcCer.
8
Lyso PL
Stx ↓↓ Stx ↓↓↓ Stx ↓↓↓ Kemasan lipid PM↓
(PPI 18: 0)

Polyunsaturated Berbagai efek pada racun lain

Stx ↓ Stx ↓ Stx ↓ Stx ↓↓↓
FA 9 (lihat9)
10 11 11
OHOA ~ ~ Risin ↑↑ ~ Risin ↑↑ ~ ~ ~ (lihat ) ~ (lihat ) Kemasan lipid PM↓

DAG kinase dan

11 ~ Risin ↑↑ ~ Risin ↑ ~ ~ ~ (sebagian besar)
~ Lihat teks untuk DAG, PA, dan PG
PLD
1 2 3
Di kolom ini, tanda serupa ( ~ ) berarti serapan berubah mirip dengan pengikatan Fumonisin B1: 10 µ 164]. DL-treo-1-fenil-2-dekanoylamino-3morfolino-1-propanol: 1 µ
sel [ 164]. 4 sn-1-O-heksadesilgliserol: 20M M, 24 jam, HEp-2 sel. Tidak ada atau hanya sedikit efek pada sitotoksisitas oleh risin, toksin kolera, atau toksin difteri. Tidak berpengaruh pada endositosis transferin. Toksisitas juga
ditunjukkan untuk
Stx2 dalam sel HEp-2, HBMEC dan HBMEC-2 [ 176,177]. 5 Data pada tabel ditunjukkan untuk sel HEp-2 yang ditumbuhkan selama 1, 2, atau 3 hari untuk mendapatkan konfluensi sel sebesar 20-30% pada Hari Ke-1 dan 80-90% pada
Hari ke-3. Data yang diberikan untuk perubahan 33]. 6 2-Deoksi-D-glukosa:
karena peningkatan kepadatan sel. Data toksisitas serupa ditunjukkan pada sel HeLa. Analisis TLC mengungkapkan lebih sedikit Gb3 pada kepadatan tinggi pada sel HeLa dan mendekati jumlah yang sama pada sel HEp-2 [
10 mM, 4 jam dan 24 jam, HEp-2 sel. Beberapa perubahan pada lipidom; 1-3% GSL mengandung 2-DG. Toksisitas serupa diamati dengan Stx2 dan toksin difteri, tetapi tidak ada perubahan toksisitas dengan risin. 2-DG juga
7
dilindungi
Sel HT-20 dan SW480 melawan toksisitas Shiga. 2-DG menurunkan endositosis transferin, tetapi lebih rendah dari toksin Shiga [ 178]. 2-Fluoro-2-deoksi-D-glukosa: 1 mM, 24 jam, sel HEp-2. FDG menghambat sintase GlcCer;
efek pada GSL diamati setelah 24 jam, bukan setelah 4 jam. Perlindungan terhadap Stx2 mirip dengan perlindungan terhadap toksin Shiga pada sel HEp-2, tetapi hanya perlindungan yang sangat lemah terhadap risin dan tidak ada
perlindungan terhadap 179]. 8 Lyso PL: Data ditampilkan untuk banyak lyso PLS yang berbeda, 5-20 menit, 30 menit, Hep-2 sel. Efek terbesar diamati dengan lyso PL
toksin difteri. Perlindungan serupa terhadap toksin Shiga pada sel MCF-7, HT-29, dan HBMEC [
paling
berbentuk kerucut, yaitu efek dengan kelompok kepala terbesar (misalnya, LPI 18: 0 dengan kelompok kepala besar: LPI > LPS > LPC >LPE > LPA). Simbol dalam tabel menunjukkan perubahan dengan LPI 18: 0. Efeknya dibalik
180]. Dalam artikel lanjutan, lyso PLS ini terbukti mengganggu endositosis yang dimediasi clathrin, dengan efek terbesar yang diamati dengan
dengan
lipid dengan kelompok kepala terbesar [ 181]. 9 FA tak jenuh ganda: 50 µ M EPA (20: 5) atau DHA (22:6), 2 hari, HEp-2 sel. Toksisitas berkurang serupa diamati dengan toksin kolera, sedangkan toksisitas sedikit meningkat
10 ®
penambahan metil-β-siklodekstrin. Efek serupa diamati dengan Stx2 [
diamati dengan risin. Hanya sedikit penurunan endositosis transferin [ 182]. Asam 2-hidroksioleat (Minerval ): 12 µ M, 3 h, sel HeLa. OHOA dimasukkan ke dalam ~11% PL terasilasi dan 10% lipid eter.
Toksisitas serupa diamati pada sel HEp - 2 dan U2-OS [ 171]. 11 DAG kinase dan PLD (fosfolipase D): Penggunaan inhibitor dan siRNA untuk mengubah kadar DAG dan PA dalam sel HEp-2. Inhibitor menyebabkan
peningkatan transpor ke Golgi dan peningkatan ukuran endosom dan tubulasi. Efek meningkat dengan menggabungkan inhibitor. Tidak ada perubahan dalam daur ulang atau degradasi risin [
183]. Lihat teks utama untuk rincian lebih lanjut.

Racun 2021, 13, 377 17 dari 29

Pengurangan Gb3 yang diperoleh dengan perlakuan ini terlalu kecil untuk menjelaskan
 perlindungan yang sangat
1). Dengan demikian, peningkatan lipid eter mungkin
kuat yang diamati terhadap racun-racun ini, dan sebagian besar efek ini disebabkan oleh
memberikan efek
berkurangnya
perlindungan terhadap toksisitas Shiga, meskipun penelitian lebih lanjut diperlukan untuk
mekanisme di balik efek ini. Selain itu, peningkatan LPI yang besar diperoleh sebagai
transpor dari Golgi ke UGD (Tabel
memahami
hasil dari perlakuan HG [ 176] mungkin berkontribusi pada perlindungan ini (lihat diskusi
tentang 3.7.5).
penambahan lisolipid ke sel pada Bagian
Kami menemukan itu luar biasa bahwa penghambatan sintesis GSL oleh Fumonisin B1,
tetapi tidak
dengan PDMP, menghasilkan peningkatan kadar lipid eter [
164], dan itu meningkatkan lipid eter
dengan menambahkan prekursor lipid eter HG juga mengakibatkan penurunan GSL [
176]. Penambahan
HG ke sel PC-3 (yang tidak mengandung Gb3 dalam jumlah yang dapat diukur) juga
menghasilkan 170]. Selain itu, perawatan sel PC-3
peningkatan lipid eter dan penurunan GSL [
ini menghasilkan peningkatan kolesterol, yang menunjukkan bahwa kolesterol penting untuk
interaksi
dengan lipid eter, yang telah dijelaskan secara serupa untuk interaksi antara kolesterol
dan sphingomyelin [131]. Yang penting, ketiga studi ini semuanya menunjukkan korelasi terbalik
antara kadar lipid eter dan glikosfingolipid. Di Bagian selanjutnya 3.7.3, perubahan
transpor retrograde dan lipidom sel HEp-2 dengan peningkatan kepadatan sel dibahas.
Menariknya, penelitian ini juga menunjukkan sedikit peningkatan GSL dan sedikit
penurunan lipid eter secara bersamaan [
33], lebih lanjut mendukung pengaturan bersama lipid eter dan
sphingolipid yang nyata ini. Alasan untuk pengaturan bersama seperti itu tidak diketahui, tetapi
perlu dicatat bahwa
perubahan dalam studi kepadatan sel diamati tanpa perawatan sel apa pun, dan sel-sel tersebut
hanya ditanam untuk satu atau dua hari ekstra. Singkatnya, studi yang dibahas dalam paragraf
ini
tunjukkan bahwa penyelidikan pengangkutan toksin Shiga telah mengungkapkan pengaturan
bersama antara
kadar sphingolipid dan lipid eter.
Baru-baru ini, Howard Riezman dan rekannya melaporkan korelasi serupa antara
lipid eter dan sphingolipid dalam empat garis sel dalam sebuah penelitian ekstensif. Mereka
menggunakan
perpustakaan CRISPRi untuk menekan ekspresi 16.000 gen, dikombinasikan dengan analisis
sel yang kekurangan sphingolipid (mereka menggunakan myriocin, penghambat enzim pertama
dalam sintesis sphingolipids
). Mereka melaporkan sedikit peningkatan yang signifikan pada lipid PC eter,
184]. Perlu juga dicatat bahwa tidak ada korelasi yang jelas antara
sehingga memberikan bukti lain untuk pengaturan bersama antara lipid eter dan
amplitudo penurunan sphingolipid dan peningkatan lipid eter pada empat
sphingolipid [
garis sel yang diteliti. Selain itu, alkylhydroxyacetonephosphate synthase (AGPS),
enzim kunci dalam sintesis lipid eter, ditemukan penting dalam meningkatkan kelangsungan
hidup sel-sel yang kekurangan sphingolipid [
184]. Para penulis ini juga menunjukkan bahwa ELOV5, enzim
yang terutama terlibat dalam pemanjangan PUFA, berkontribusi untuk membuat sel mereka
lebih banyak
sensitif terhadap penipisan sphingolipid, sedangkan ELOV6, yang terutama bekerja pada
pemanjangan
asam lemak C16-C18, membuat sel lebih tahan terhadap penipisan sphingolipid.
Hasil ini sesuai dengan perubahan yang diamati dalam studi kepadatan sel yang dibahas
di bagian selanjutnya, di mana lebih sedikit eter yang mengandung PUFA dan lebih banyak eter
33]. Singkatnya, beberapa penelitian dari dua kelompok telah
yang mengandung C18
mendemonstrasikan hubungan terbalik antara lipid eter dan sphingolipid [
33,164,170,176,184].
ditemukan pada peningkatan kepadatan sel [
Selain itu, perubahan tersebut tidak hanya mempengaruhi jumlah total lipid eter, tetapi juga
komposisi
spesiesnya. Namun, ada perbedaan besar antara hasil yang dilaporkan
dari kedua kelompok dalam hal jumlah berbagai lipid eter, dan diperlukan lebih
banyak penelitian untuk memahami perbedaan ini.
Mengenai diskusi tentang PLS terkait eter, menarik bahwa mereka berperilaku
berbeda dari analog terkait ester yang sesuai mengenai bagaimana
rantai hidrofobik memasuki membran. Sekarang sudah 30 tahun sejak analisis spektroskopi
resonansi magnetik
membandingkan PC dengan dua rantai asil dan alkenil eter PE menunjukkan bahwa rantai
hidrofobik
ini memasuki membran secara berbeda. Rantai eter tampak masuk secara tegak lurus ke
dalam membran, sedangkan pada PLS dengan dua gugus asil, dua atom karbon pertama pada
185]. Kemudian, simulasi dinamis molekuler atomistik
posisi sn-1 hampir sejajar dengan membran plasma, sedangkan
rantai asil lainnya membengkok ke dalam membran. membran [

Racun 2021, 13, 377 18 dari 29

studi digunakan untuk mengkonfirmasi perilaku serupa dari alkenil eter PE dan bahwa
konsentrasi lipid
eter ini menghasilkan lapisan ganda yang lebih padat dan lebih tebal daripada PE
dengan dua rantai asil lemak [
186]. Dengan demikian, lipid eter menunjukkan beberapa kesamaan
dengan
sphingolipid mengenai bagaimana rantai hidrofobik memasuki membran sel, berinteraksi
dengan kolesterol, dan berkontribusi pada ketebalan lapisan ganda lipid. Untuk studi masa
depan
lipid eter, penting untuk mengetahui kemungkinan perbedaan antara alkil dan alkenil
eter [ 33,167,184]. Perlu juga dicatat bahwa lipid eter diperlukan untuk pembentukan
protein berlabuh glikosilfosfatidilinositol (GPI), yang dapat terdapat dalam
rakit lipid [
187].

3.7.3. Pengaruh Kepadatan Sel

Beberapa penelitian telah menunjukkan bahwa perubahan kepadatan sel dalam kultur
dapat memodulasi
efek racun tumbuhan dan bakteri, karena toksisitas yang diamati lebih sedikit pada peningkatan
30,188]. Untuk melihat lebih dekat efek ini, sel HEp-2 ditumbuhkan menjadi tiga
kepadatan sel [
kepadatan sel yang berbeda, dari kepadatan 20-30% pada Hari ke-1 hingga kepadatan 80-90%
33].
pada Hari ke-3 [
Seperti yang diharapkan, penurunan toksisitas sel yang diinduksi toksin Shiga diamati dengan
meningkatnya
kepadatan sel. Peningkatan kepadatan sel juga mengakibatkan peningkatan Gb3 (tidak ada
perubahan jumlah
relatif spesies Gb3) dan kolesterol serta penurunan lipid eter, seperti yang dibahas
3.7.2. Hebatnya, sel-sel dengan sedikit peningkatan kadar Gb3 menunjukkan
pada Bagian beberapa
penurunan pengikatan/serapan toksin Shiga, sedangkan pengurangan toksisitas yang lebih kuat
ditemukan karena berkurangnya transportasi dari endosom ke Golgi atau lebih jauh ke
ER (Tabel 1). Sebuah studi lipidomik kuantitatif rinci menunjukkan beberapa perubahan dalam
beberapa PA
dan spesies DAG yang mungkin terkait dengan penurunan toksisitas Shiga [ 33], tetapi
penelitian lebih lanjut diperlukan untuk memahami mengapa toksin Shiga jauh lebih tidak
beracun bagi sel pada kepadatan
sel yang lebih tinggi.
Kelompok Lucas Pelkmans kemudian melaporkan sebuah studi ekstensif tentang
efek kepadatan sel dari fibroblas embrionik tikus baik yang mengekspresikan atau kekurangan
kinase adhesi fokal
(FAK) [ 34]. Mereka melaporkan bahwa lebih dari 1000 gen menyesuaikan kelimpahan transkrip
mereka
dengan kepadatan seluler, di mana 80% di antaranya membutuhkan kehadiran FAK untuk 34]
 beradaptasi. Khususnya, sebagian
berbeda dari yang dilaporkan dalam penelitian dengan sel HEp-2 [ 33]. Dengan demikian,
besar perubahan dilaporkan pada lipidom fibroblas sebagai fungsi dari peningkatan kepadatan
peningkatan
sel [
kepadatan sel dari berbagai garis sel telah dilaporkan menghasilkan perubahan lipidom yang
berbeda, dan diperlukan lebih banyak penelitian untuk memahami bagaimana dan mengapa
3.7.4. Analog Glukosa Menginduksi Perlindungan terhadap Racun Shiga
perubahan tersebut terjadi.
Selama lebih dari 50 tahun, 2-deoksi-glukosa (2-DG) telah digunakan sebagai penghambat
glikolisis. Selama 15 tahun terakhir, 2-DG telah terbukti mempengaruhi beberapa
mekanisme seluler lainnya, seperti autophagy, apoptosis, dan kontrol siklus sel, dan juga telah
terbukti 178]). Hal ini membuat kami
menekan ekspresi Gb3 sintase (referensi dalam [
mempelajari apakah
itu berpengaruh pada toksisitas Shiga pada sel HEp-2. Meskipun 2-DG hanya memiliki efek kecil
pada endositosis dan transpor ke UGD dalam sel HEp-2, ini memberikan perlindungan yang kuat
terhadap toksisitas Shiga, dan efek ini terbukti terutama disebabkan oleh penghambatan
1) [178]. Beberapa persen dari 2-DG didirikan
pelepasan toksin Shiga A1 di UGD (Tabel
menjadi GSL, tetapi pengobatan dengan 2-DG hanya memiliki efek kecil pada kelas lipid lainnya.
2-Fluoro-2-deoksi-glukosa (FDG) adalah analog glukosa lain yang sangat mirip dengan
2-DG (satu H ditukar dengan F), dan [ 18F]FDG adalah agen pencitraan yang paling umum
digunakan
untuk tomografi emisi positron (PET) untuk beberapa jenis kanker [
189,190]. Hebatnya, FDG
ditemukan melindungi sel HEp-2 jauh lebih kuat daripada 2-DG, karena FDG 1 mM memberikan
perlindungan yang serupa dengan yang diperoleh oleh 10 mM 2-DG. Lebih lanjut, perlindungan
dengan FDG 179]. Perlu dicatat bahwa
terbukti terutama disebabkan oleh penghambatan sintase GlcCer [
kedua analog glukosa ini terbukti melindungi juga beberapa garis sel lain terhadap
toksin Shiga, dan bahwa perlindungan yang sangat mirip diamati untuk toksin Shiga dan Stx2,
padahal mereka tidak memiliki efek perlindungan terhadap risin [
178,179].

Racun 2021, 13, 377 19 dari 29

3.7.5. Zat yang Mempengaruhi Fluiditas Membran

Penambahan beberapa lisolipid ke sel HEp-2 mengakibatkan penurunan pengikatan seluler
Toksin Shiga, Stx2, dan IgM anti-Gb3 [
180]. Efeknya meningkat dengan bertambahnya ukuran
grup kepala, yaitu, LPI > LPC > LPS > LPE > > LPA, tanpa efek yang diamati untuk LPA (Tabel
1).
Efeknya juga tergantung pada gugus asil lemak. Efek yang lebih kuat diperoleh dengan
LPC 18: 0 dibandingkan dengan LPC 18:1, semakin membuktikan pentingnya struktur kerucut
untuk efek ini. Sebagian besar penelitian dilakukan dengan menggunakan LPI 18: 0. Percobaan
menunjukkan bahwa
toksin Shiga prebound dilepaskan setelah penambahan lisolipid, dan bahwa LPI
efek diamati baik pada sel tetap atau setelah penipisan ATP, menunjukkan bahwa
efeknya tidak tergantung pada pensinyalan atau pergantian membran. Penambahan LPI
menghasilkan
pembulatan permukaan sel, dengan lebih sedikit philopodia. Selanjutnya, penelitian dengan
probe NR12S, yang diprediksi akan tetap berada di selebaran luar, mengungkapkan bahwa lipid
fluorescent
yang diinduksi LPI
gangguan pada PM. Tidak ada perubahan gangguan lipid setelah penambahan LPE. LPI dan
metil-β-siklodekstrin keduanya meningkatkan gangguan lipid, tetapi menyebabkan efek yang
berlawanan pada
pengikatan toksin, menunjukkan bahwa pengurangan urutan lipid tampaknya tidak penting
untuk
pengikatan. Penambahan metil-β-siklodekstrin tidak mempengaruhi pengikatan toksin Shiga
tetapi
dengan kolesterol, mengikat karbohidrat dan dengan demikian menghambat pengikatan toksin
membalikkan efek LPI, menunjukkan bahwa LPI mengubah konformasi dan/atau
Shiga,
efek yang dibalik dengan penambahan metil-cycl-siklodekstrin. Penambahan LPI
distribusi reseptor Gb3. Penurunan kemasan lipid yang diamati dapat memfasilitasi interaksi
tidak berpengaruh pada pengikatan risin [
180].
Gb3
Dalam studi lanjutan, lisolipid dengan kelompok kepala besar terbukti mengganggu
endositosis yang
dimediasi clathrin. Efeknya tergantung pada sel yang digunakan. Efek terbesar
diamati untuk sel HEp-2, HeLa, dan SUM-159, dan efek yang lebih kecil diamati untuk sel
SK-BR3, U-2 OS, dan PC-3. Lebih sedikit gaya (pengurangan 50%) diperlukan untuk menarik
tubulus
diamati setelah penambahan LPE [ 181]. Selain itu, penambahan LPI menghasilkan
keluar dari sel HEp-2 setelah penambahan LPI, sedangkan tidak ada pengurangan gaya ini
peningkatan masa hidup untuk pit AP-2, dan efeknya pada serapan risin jauh lebih kecil
daripada
transferin, menunjukkan bahwa efek lisolipid lebih besar untuk endositosis yang bergantung
pada klatrin daripada
endositosis yang tidak bergantung pada klatrin. Dalam penelitian ini, efeknya juga lebih rendah
bila menggunakan
lisolipid dengan kelompok kepala yang lebih kecil (LPE dan LPA) atau lipid tak jenuh (LPC 18:1).
191].
Seperti
Dalam studi dengan lisolipid dan racun yang dijelaskan di atas, lipid ini tidak hanya
yang diharapkan, ada efek yang lebih kuat dari Latrunculin B pada endositosis transferin
tampaknya mempengaruhi pengikatan tetapi juga memiliki efek tambahan pada transpor
setelah
retrograde dan toksisitas.
Sebuah penelitian pada ragi menunjukkan bahwa lisolipid memfasilitasi pembentukan vesikel
penambahan LPI, yang sesuai dengan data yang menunjukkan bahwa kebutuhan aktin untuk
COPII dan anterograde
transportasi dari UGD ke Golgi [ 192]. Efek lisolipid pada transpor anterograde dan retrograde
endositosis
mungkin terkait. Dalam kedua penelitian, berspekulasi bahwa struktur kerucut
meningkat pada tegangan membran yang tinggi [
lisolipid penting untuk efek ini, tetapi penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menggambarkan
efeknya
mekanisme yang tepat.
Setelah prainkubasi dengan sel HeLa, obat antitumor asam 2-hidroksioleat (OHOA)
terbukti berpotensi meningkatkan transpor retrograde risin dari endosom ke Golgi
dan selanjutnya ke UGD dan menghasilkan peningkatan besar dalam kepekaan terhadap toksin
ini, sedangkan
pengangkutan toksin Shiga ke Golgi sedikit berkurang seperti yang dievaluasi dengan
171]. Setelah inkubasi sel dengan 12,5 µ M OHOA selama 3 jam, hasil penelitian
pengalaman sulfasi
menunjukkan bahwa
[
6% lipid seluler mengandung gugus asil lemak ini. Selanjutnya, lipid PM yang berkurang
pengepakan diamati serupa dengan yang dijelaskan di atas setelah penambahan lisolipid.
Efek diferensial yang diamati dengan OHOA pada pengangkutan risin dan toksin Shiga sejalan
dengan data yang diperoleh dalam studi sebelumnya tentang pengobatan sel HeLa dengan asam
lemak tak jenuh ganda
asam lemak [182]. Hebatnya, tidak ada efek pada pengangkutan toksin oleh asam oleat.
Tidak diketahui bagaimana gugus OH OHOA dapat berkontribusi pada efek yang begitu besar
seperti yang
diamati setelah penambahan OHOA ke dalam sel. OHOA tidak mempromosikan perekrutan
SNX1 atau SNX2 ke endosom (SNX telah terbukti terlibat dalam transportasi risin
Racun 2021, 13, 377 20 dari 29

dari endosom ke Golgi [ 101]), tetapi peningkatan lokalisasi endosom dari

komponen retromer VPS35 diamati. Dengan demikian, ada kemungkinan bahwa OHOA
meningkatkan transpor risin
dengan meningkatkan afinitas membran terhadap protein yang memediasi transpor retrograde.
Penambahan asam lemak tak jenuh ganda (PUFA, yaitu C20: 5 dan C22: 6) ke sel HeLa
menghasilkan perlindungan 10 kali lipat terhadap toksin Shiga [
182]. Baik internalisasi toksin ini
dan transpor endosom-ke-Golgi dikurangi oleh PUFA, dan pengurangan
ini bersama-sama dapat menjelaskan penurunan toksisitas (Tabel
1). Juga, internalisasi toksin kolera
dikurangi dengan pengobatan PUFA. Sitotoksisitas risin tidak terpengaruh, menunjukkan bahwa
PUFA tidak menyebabkan hambatan umum dalam transpor retrograde ke retikulum
endoplasma.
3.8. Modifikasi Lipidom: Perubahan seperti yang Diharapkan?
Meskipun mengganggu metabolisme lipid menggunakan inhibitor, siRNA, atau dengan
memasok
sel dengan beberapa lipid dapat memberikan informasi penting tentang peran lipid untuk
endositosis dan transpor intraseluler, kami juga ingin memperingatkan bahwa efek yang diamati
setelah perawatan tersebut mungkin disebabkan oleh perubahan lain pada lipidom dari yang
diharapkan. Dengan demikian, analisis yang cermat harus dilakukan untuk memeriksa apakah
perubahan lipidom sesuai
193]. Mereka menggunakan statin, penghambat enzim penentu laju yang diketahui
dengan yang diharapkan. Contoh yang sangat baik dari hal ini adalah studi oleh kelompok
dalam
Clifford
sintesis kolesterol, dan mengamati bahwa pengangkutan mundur toksin Shiga (dan
Lingwood [
toksin kolera) ke Golgi dan UGD terhambat. Dengan melihat dengan cermat apa yang terjadi
dengan sel-
sel ini, mereka mengamati bahwa pengobatan statin menghasilkan relokasi sebagian
sintase GlcCer, peningkatan kadar enzim ini, dan peningkatan kadar GlcCer beberapa kali lipat
di
kesembilan lini sel yang diteliti. Ada juga beberapa perubahan dalam tingkat total beberapa
dengan laporan sebelumnya bahwa penghambatan sintesis kolesterol memicu peningkatan
kelas GSL lainnya tetapi tidak ada perubahan dalam jumlah relatif spesies di setiap kelas.
ekspresi
dari reseptor LDL untuk mempertahankan kadar kolesterol seluler [
194], sedangkan kolesterolnya
Tingkat
kolam di jaringan trans-Golgi menghilang. Mereka menunjukkan bahwa perubahan dalam GSL
kolesterol seluler total tidak terpengaruh oleh pengobatan statin, yang sesuai dengan
dan sintase GlcCer tidak tergantung pada penghambatan sintesis kolesterol, tetapi
kesepakatan
efek ini secara mengejutkan dihasilkan dari prenilasi Rab GTPase yang menyimpang. Dengan
demikian, mereka mengungkapkan
hubungan yang tidak terduga antara prenilasi Rab (geranylgeranyl adalah perantara dalam
biosintesis kolesterol) dan regulasi GSL dan perdagangan retrograde.
Kami baru-baru ini menerbitkan bahwa penghambat diasilgliserol kinase (DAG kinase) dan
fosfolipase D (PLD) sangat meningkatkan transpor retrograde risin dengan mempengaruhi
penyortiran endosom menuju aparatus Golgi [ 183]. Pengobatan dengan inhibitor ini
sangat mempengaruhi morfologi endosom dengan meningkatkan tubulasi dan
ukuran endosom. Studi lipidomik kuantitatif dari sel yang diobati inhibitor menunjukkan lipidom
seperti
yang diharapkan saat menggunakan inhibitor DAG kinase (DAG meningkat), sedangkan inhibitor
PLD
menghasilkan lipidom yang sangat berbeda dari yang diharapkan. Ada sedikit
peningkatan sementara pada PA, tetapi kemudian menurun ke tingkat kontrol setelah 3 jam.
Tanpa diduga, terjadi
peningkatan DAG dan fosfatidilgliserol (PG), dan spesies yang meningkat,
dengan jelas menunjukkan bahwa hal ini disebabkan oleh metabolisme spesies PC. Kami
berspekulasi bahwa
penggunaan penghambat PLD menghasilkan mekanisme kompensasi di mana sel-sel bertujuan
untuk menjaga kadar PA seluler relatif konstan. Jelas, data lipid ini menunjukkan
perlunya melakukan analisis lipidomik kuantitatif sebelum kesimpulan diambil dari
dimana knock-down satu isoenzim DAG kinase menghasilkan peningkatan kadar empat
studi tersebut. Selanjutnya, siRNA digunakan untuk merobohkan isoenzim DAG
isoenzim lainnya [ 183], sehingga menunjukkan mekanisme kompensasi dalam studi tersebut.
kinase dan PLD yang berbeda. Selain menunjukkan bahwa beberapa isoenzim ini
terlibat dalam pengaturan transportasi risin ke Golgi, percobaan mengungkapkan satu kasus
3.9. Perlunya Studi di Masa Depan dan Fokus pada Pentingnya Spesies Lipid
Berdasarkan pembahasan di atas, tidak diragukan lagi bahwa kita harus banyak belajar
pentingnya lipid membran untuk endositosis dan transpor membran intraseluler.

Racun 2021, 13, 377 21 dari 29

Meskipun pengembangan analisis MS yang ditingkatkan selama beberapa tahun terakhir telah
membuka jalan baru
peluang untuk melakukan analisis kuantitatif terhadap ratusan spesies lipid dalam satu sampel,
kami masih dalam proses pembelajaran yang sangat awal tentang pentingnya spesies lipid
dalam
biologi sel. Meskipun banyak yang telah dipelajari tentang pengikatan kolesterol ke berbagai
protein [ 195– 197], pengikatan lipid lain ke berbagai protein transfer lipid [ 131], dan
pengikatan protein ke kelas lipid seperti PIPs, PS, dan PA [ 82,198,199], sangat sedikit yang
diketahui tentang interaksi antara spesies lipid spesifik dan protein. Sepengetahuan kami,
demonstrasi pertama tentang pentingnya satu spesies lipid dalam biologi adalah laporan bahwa
PG 16: 0/18:1 adalah lipid esensial yang dekat dengan O
2- situs pengikatan oksidase sitokrom c.
Hebatnya, C18:1 bukanlah oleat C18:1 (cis) yang sangat umum ∆ 9), tapi yang tidak biasa
C18: 1 vaksinasi (cis-∆ 11), menunjukkan pentingnya satu ikatan rangkap ditempatkan dua
atom karbon lebih jauh dari gugus kepala PG [ 200]. Kemudian, ditunjukkan oleh Brita
BrgerGer dan rekannya bahwa satu spesies SM (SM d18: 1/18: 0) sangat penting untuk
mengikat
domain transmembran dari protein mesin FOTOKOPI p24. Mereka menyarankan peran
spesies SM ini dalam mengatur keseimbangan antara monomer yang tidak aktif dan
bentuk oligomer aktif dari protein ini dalam transpor yang bergantung pada COPI dari Golgi ke
201]. Sejauh ini, sepengetahuan kami, tidak ada contoh lain yang secara jelas menunjukkan
UGD [
efek spesies lipid tertentu, tetapi kami baru-baru ini merangkum beberapa sifat menarik
mengenai PS 18:0/18: 1 dan berspekulasi tentang kontribusi spesies ini terhadap endositosis
dan transportasi intraseluler., termasuk kemungkinan perannya dalam endositosis toksin Shiga [
82].

4. Kesimpulan
 Pemahaman kita tentang bagaimana racun protein bekerja pada sel telah mengalami
perkembangan yang luar biasa selama empat dekade terakhir. Tinjauan ini membahas beberapa
contoh
bagaimana toksin Shiga dan risin telah berkontribusi pada pengetahuan tersebut, serta
pemahaman kita tentang endositosis dan transpor intraseluler secara umum. Selama 10-15
bertahun-tahun, telah terjadi peningkatan yang luar biasa dalam analisis MS dan kemungkinan
menit terakhir
untuk
manfaatkan analisis tersebut untuk mempelajari lebih lanjut tentang mekanisme seluler. Penting
untuk
ditekankan bahwa kita masih dalam proses awal penggunaan studi lipidomik kuantitatif
yang berkaitan dengan fungsi seluler. Menurut pendapat kami, akan sangat mengejutkan jika
lebih banyak
contoh peran biologis spesies lipid spesifik tidak ditemukan selama
tahun-tahun berikutnya. Setiap sel mensintesis beberapa ratus atau ribu spesies lipid. Mengapa
tujuan? Dengan demikian, kami memperkirakan kemajuan besar dalam pengetahuan baru
sel harus menggunakan energi untuk mensintesis begitu banyak lipid jika tidak banyak yang
mengenai pentingnya
spesies lipid untuk transpor membran selama tahun-tahun berikutnya. Untuk tujuan ini, penting
dibutuhkan untuk tujuan tertentu
bahwa metode yang digunakan untuk persiapan sampel dan analisis MS menjadi lebih baik
divalidasi
dan didokumentasikan daripada yang sering terlihat saat ini. Sangat penting bagi para ilmuwan
untuk mempercayai bahwa
data tersebut dapat direproduksi. Penting juga bahwa data kuantitatif semacam itu tersedia
untuk semua orang, karena mungkin perlu beberapa tahun sebelum kami dapat menafsirkan
data tersebut sepenuhnya.
Berdasarkan pengalaman kami, tidak cukup hanya memiliki peralatan MS modern tetapi juga
perlu memiliki pengetahuan yang kuat tentang lipid mana yang dapat ditemukan dalam
sampel biologis. Kami juga berharap studi simulasi molekuler dan penggunaan model sintetik
menjadi penting untuk memperoleh pengetahuan baru di bidang ini. Kami menekankan
pentingnya mendasarkan
Kontribusi Penulis: K. S. menulis draf untuk ringkasan, pendahuluan, dan Seksi 2. T. S.
model seperti itu pada membran asimetris yang terdiri dari spesies lipid yang umumnya tersedia
menulis draf untuk Bagian3. K. S., S. K. dan T. S. membahas isi artikel, menyelesaikan penulisan
dalam sel.
naskah. Semua penulis telah membaca dan menyetujui versi naskah yang diterbitkan.

Pendanaan:
Pekerjaan yang dilakukan oleh para penulis ini didukung oleh Norwegian Cancer Society.

Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan:

Tidak berlaku.

Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan:

Tidak berlaku.

Racun 2021, 13, 377 22 dari 29

Pernyataan Ketersediaan Data: Tidak ada data baru yang dibuat atau dianalisis dalam penelitian ini.
Berbagi data adalah
tidak berlaku untuk artikel ini.

Ucapan terima kasih:

Kami mengakui kontribusi dari banyak rekan kerja selama bertahun-tahun.

Konflik Kepentingan:
Penulis menyatakan tidak ada benturan kepentingan.

Referensi
1. Sandvig, K.; van Deurs, B. Pengiriman ke dalam sel: Pelajaran yang dipetik dari racun tumbuhan dan bakteri. Gene Ther. 2005, 12,
CrossRef] [PubMed]
865–872.
2. Endo, Y.; Mitsui, K.; Motizuki, M.; Tsurugi, K. Mekanisme kerja risin dan lektin toksik terkait pada ribosom eukariotik.
[
Situs dan karakteristik modifikasi pada RNA ribosom 28 S yang disebabkan oleh toksin. J. Biol. Kimia. 1987, 262,
5908–5912. [ CrossRef]
3. Endo, Y.; Tsurugi, K.; Yutsudo, T.; Takeda, Y.; Ogasawara, T.; Igarashi, K. Tempat kerja toksin Vero (VT2) dari Escherichia coli
0157: H7 dan toksin Shiga pada ribosom eukariotik. Aktivitas glikosidase RNA dari racun. Eur. J. Biochem. 1988, 171, 45–50.
[CrossRef] [PubMed]
4. Fraser, ME; Chernaia, M. M.; Kozlov, Y. V.; James, M. N. Struktur kristal holotoksin dari Shigella dysenteriae pada
CrossRef]
resolusi 2,5 A. Nat. Struktur. Biol. 1994, 1, 59–64. [
5. Rutenber, E.; Katzin, B. J.; Ernst, S.; Collins, E. J.; Mlsna, D.; Siap, M. P.; Robertus, J. D. Penyempurnaan kristalografi risin menjadi
2,5
Angstrom. Protein 1991, 10, 240-250. [ CrossRef]
6. Sandvig, K.; Bergan, J.; Kavaliauskiene, S.; Skotland, T. Persyaratan lipid untuk masuknya racun protein ke dalam sel. Prog. Lipid
Res. , 54C, 1-13. [CrossRef]
7. Pappenheimer, A. M., Jr. Toksin difteri. Annu. Pendeta Biochem. 1977, 46, 69–94. [
2014 CrossRef]
8. Kim, K.; Groman, N. B. Cara penghambatan toksin difteri oleh amonium klorida. J. Bakteriol. 1965, 90, 1557–1562. [ CrossRef]
9. Sandvig, K.; Olsnes, S. Masuknya toksin difteri ke dalam sel difasilitasi oleh pH rendah. J. Biol Sel. 1980, 87, 828–832. [
CrossRef]
10. Draper, R. K.; Simon, MI Masuknya toksin difteri ke dalam sitoplasma sel mamalia: Bukti keterlibatan lisosom.
CrossRef]
J. Sel Biol. 1980, 87, 849–854. [
11. Sandvig, K.; Olsnes, S. Masuknya protein toksik abrin, modeccin, risin, dan toksin difteri ke dalam sel. II. Pengaruh pH,
penghambat metabolik, dan ionofor serta bukti penetrasi toksin dari vesikula endositotik. J. Biol. Kimia. 1982, 257, 7504–7513.
[CrossRef]
12. Sandvig, K.; Garred, Ø; Prydz, K.; Kozlov, J. V.; Hansen, S. H.; van Deurs, B. Pengangkutan retrograde toksin Shiga endositosis ke
retikulum endoplasma. Alam 1992, 358, 510-511. [ CrossRef]
13. Rapak, A.; Falnes, PO; Olsnes, S. Transpor retrograde risin mutan ke retikulum endoplasma dengan translokasi berikutnya
CrossRef]
ke sitosol. Proc. Natl. Acad. Sci. Amerika Serikat 1997, 94, 3783-3788. [
14. Johannes, L.; Tenza, D.; Antony, C.; Goud, B. Pengangkutan mundur fragmen B toksin Shiga yang mengandung KDEL. J. Biol.
Kimia. 1997, CrossRef]
15. 272, 19554–19561. [
Tekle, C.; Deurs, B.; Sandvig, K.; Iversen, T. G. Perdagangan seluler biokonjugat titik-ligan kuantum dan induksi
CrossRef]
perubahannya dalam perutean normal ligan tak terkonjugasi. Nano. Lett. 2008, 8, 1858–1865. [
16. Sandvig, K.; Skotland, T.; van Deurs, B.; Klokk, T. I. Pengangkutan retrograde racun protein melalui aparatus Golgi. Histochem.
Sel Biol. 2013, 140, 317–326. [CrossRef]
17. Johannes, L.; Romer, W. Racun Shiga-dari biologi sel hingga aplikasi biomedis. Nat. Pendeta Microbiol. 2010, 8, 105–116.
[CrossRef]
18. Engedal, N.; Skotland, T.; Torgersen, M. L.; Sandvig, K. Toksin Shiga dan penggunaannya dalam terapi dan pencitraan kanker yang
ditargetkan. Microbiol.
Biotechnol. 2011, 4, 32–46. [
CrossRef]
19. Antignani, A.; Ho, E. C. H.; Bilotta, M. T.; Qiu, R.; Sarnvosky, R.; FitzGerald, D. J. Menargetkan Reseptor pada Sel Kanker dengan
Protein
Racun. Biomolekul 2020, 10, 1331. [ CrossRef]
20. Liu, Y.; Tian, S.; Thaker, H.; Dong, M. Racun Shiga: Pembaruan tentang Faktor Inang dan Aplikasi Biomedis. Racun 2021, 13, 222.
[CrossRef]
21. Dhillon, S. Moxetumomab Pasudotox: Persetujuan Global Pertama. Narkoba 2018, 78, 1763-1767. [
CrossRef]
22. El Alaoui, A.; Schmidt, F.; Amessou, M.; Sarr, M.; Decaudin,D.; Florent, J. C.; Johannes, L. Pengiriman retrograde yang dimediasi
toksin Shiga CrossRef] [PubMed]
23. dari prodrug penghambat topoisomerase I. Angew. Kimia. Int. Ed. Inggris. 2007, 46, 6469–6472. [
Kaksonen, M.; Roux, A. Mekanisme endositosis yang dimediasi clathrin. Nat. Pendeta Mol. Sel Biol. 2018, 19, 313–326. [
CrossRef]
24. Chen, Z.; Schmid, S. L. Mengembangkan model untuk merakit dan membentuk lubang berlapis clathrin. J. Sel Biol. 2020, 219. [
CrossRef]
25. Sathe, M.; Muthukrishnan, G.; Rae, J.; Disanza, A.; Thattai, M.; Scita, G.; Parton, R. G.; Walikota, S. GTPase kecil dan domain
BATANG
protein mengatur polimerisasi aktin bercabang untuk endositosis yang tidak bergantung pada klatrin dan dinamin. Nat. Commun.
2018, 9, 1835.
[CrossRef]
26. Casamento, A.; Boucrot, E. Mekanisme molekuler Endositosis yang Dimediasi Endofilin Cepat. Biochem. J. 2020, 477, 2327-2345.
CrossRef]
27. [Sandvig, K.; Kavaliauskiene, S.; Skotland, T. Endositosis independen Clathrin: Tingkat kompleksitas yang meningkat. Histochem.
Sel Biol. 2018, 150, 107–118. [
CrossRef]

Racun 2021, 13, 377 23 dari 29

28. Sandvig, K.; Olsnes, S.; Pihl, A. Kinetika pengikatan lektin beracun abrin dan risin ke reseptor permukaan sel manusia. J. Biol.
Kimia. 1976, 251, 3977–3984. [CrossRef]
29. Sandvig, K.; Olsnes, S. Pengaruh suhu terhadap serapan, ekskresi dan degradasi abrin dan risin oleh sel HeLa. Exp. Sel
Resolusi 1979, 121, 15-25. [
CrossRef]
30. Sandvig, K. Kepadatan sel mempengaruhi pengikatan lektin abrin beracun ke sel HeLa dalam kultur lapisan tunggal. FEBS. Lett.
1978, 89,CrossRef]
31. Kaplan, J. Kontak sel menginduksi peningkatan laju pinositotik pada sel epitel yang dikultur. Alam 1976, 263, 596-597. [
233–236. [ CrossRef]
[PubMed]
32. Snijder, B.; Sacher, R.; Ramo, P.; Damm, E. M.; Liberali, P.; Pelkmans, L. Konteks populasi menentukan variabilitas sel-ke-sel dalam
endositosis dan infeksi virus. Alam 2009, 461, 520-523. [ CrossRef] [PubMed]
33. Kavaliauskiene, S.; Nymark, C. M.; Bergan, J.; Simm, R.; SylväNne, T.; Simolin, H.; Ekroos, K.; Skotland, T.; Sandvig, K. Kepadatan
sel CrossRef] [PubMed]
34. menyebabkan perubahan komposisi lipid dan perdagangan intraseluler. Sel. Mol. Ilmu Kehidupan. 2014, 71, 1097–1116. [
Frechin, M.; Stoeger, T.; Daetwyler, S.; Gehin, C.; Battich, N.; Damm, E. M.; Stergiou, L.; Riezman, H.; Pelkmans, L.
CrossRef]
Adaptasi intrinsik sel dari komposisi lipid terhadap kepadatan penduduk lokal mendorong perilaku sosial. Alam 2015, 523, 88-91. [
35. Sandvig, K.; Olsnes, S.; Pihl, A. Pengikatan, pengambilan, dan degradasi protein toksik abrin dan risin oleh varian sel yang resistan
terhadap toksin CrossRef]
36. . Eur. J. Biochem. 1978, 82, 13–23. [
Weeratunga, S.; Paul, B.; Collins, B. M. Mengenali sinyal perdagangan endosom. Curr. Opin. Sel Biol. 2020, 65, 17–27.
[CrossRef]
37. Montesano, R.; Roth, J.; Robert, A.; Orci, L. Invaginasi membran yang tidak dilapisi terlibat dalam pengikatan internalisasi
racun kolera dan tetanus. Alam 1982, 296, 651-653. [CrossRef]
38. Parton, R. G.; McMahon, K. A.; Wu, Y. Caveolae: Formasi, dinamika, dan fungsi. Curr. Opin. Sel Biol. 2020, 65, 8–16.
[CrossRef]
39. Dixon, S. J.; Stewart, D.; Grinstein, S.; Spiegel, S. Pensinyalan transmembran oleh subunit B toksin kolera: Peningkatan
kalsium bebas sitoplasma pada limfosit tikus. J. Sel Biol. 1987, 105, 1153–1161. [
CrossRef]
40. Gouy, H.; Deterre, P.; Debre, P.; Bismut, G. Pensinyalan kalsium sel melalui gangliosida permukaan sel GM1 dalam garis sel T
Jurkat manusia.
41. J. Immunol. 1994, 152, 3271–3281.
Klokk, T. I.; Kavaliauskiene, S.; Sandvig, K. Ikatan silang glikosfingolipid pada membran plasma: Konsekuensi untuk
pensinyalan dan lalu lintas intraseluler. Sel. Mol. Ilmu Kehidupan. 2016, 73, 1301–1316. [
CrossRef]
42. Torgersen, M. L.; Skretting, G.; van Deurs, B.; Sandvig, K. Internalisasi toksin kolera melalui mekanisme endositik yang berbeda. J.
Ilmu Sel. 2001, 114, 3737–3747. [
CrossRef]
43. Nichols, B. J.; Kenworthy, A. K.; Polishchuk, R. S.; Lodge, R.; Roberts, T. H.; Hirschberg, K.; Phair, R. D.; Lippincott-Schwartz, J.
Siklus Cepat Penanda Rakit Lipid antara Permukaan Sel dan Kompleks Golgi. J. Sel Biol. 2001, 153, 529–542. [ CrossRef]
44. Shogomori, H.; Futerman, A. H. Toksin Kolera Ditemukan dalam Rakit/Domain yang tidak larut dalam Deterjen pada Permukaan
Sel CrossRef]
45. Hommelgaard, A. M.; Roepstorff, K.; Vilhardt, F.; Torgersen, M. L.; Sandvig, K.; van Deurs, B. Caveolae: Domain membran stabil
Neuron Hipokampus tetapi Diinternalisasi melalui Mekanisme yang tidak bergantung pada Rakit. J. Biol. Kimia. 2001, 276, 9182–
9188. [
dengan potensi internalisasi. Lalu lintas 2005, 6, 720-724. [CrossRef]
46. Pelkmans, L.; Kartenbeck, J.; Helenius, A. Endositosis caveolar dari virus simian 40 mengungkapkan transpor vesikular dua
langkah baru
jalan menuju UGD. Nat. Sel Biol. 2001, 3, 473–483. [ CrossRef]
47. Hayer, A.; Stoeber, M.; Ritz, D.; Engel, S.; Meyer, H. H.; Helenius, A. Caveolin-1 ada di mana-mana dan ditargetkan ke
vesikula intralumenal di endolisosom untuk degradasi. J. Sel Biol. 2010, 191, 615–629. [
CrossRef]
48. Parton, R. G.; Howes, M. T. Meninjau kembali perdagangan caveolin: Akhir dari peringatan. J. Sel Biol. 2010, 191, 439–441. [
CrossRef]
49. Wang, X.; Qiu, Y.; Wang, M.; Zhang, C.; Zhang, T.; Zhou, H.; Zhao, W.; Zhao, W.; Xia, G.; Shao, R. Endositosis dan Organel
Penargetan Obat Nano dalam Terapi Kanker. Int. J. Nanomed. 2020, 15, 9447–9467. [ CrossRef]
50. Pelkmans, L.; Puntener, D.; Helenius, A. Polimerisasi Aktin Lokal dan Perekrutan Dinamin dalam Internalisasi Caveolae yang
Diinduksi SV40 CrossRef]
51. . Sains 2002, 296, 535-539. [
Damm, E. M.; Pelkmans, L.; Kartenbeck, J.; Mezzacasa, A.; Kurzchalia, T.; Helenius, A. Clathrin - dan caveolin-1-
endositosis independen: Masuknya virus simian 40 ke dalam sel tanpa caveolae. J. Sel Biol. 2005, 168, 477–488. [
CrossRef]
52. Lajoie, P.; Nabi, I. R. Rakit lipid, caveolae, dan endositosis mereka. Int. Rev. Sel Mol. Biol. 2010, 282, 135–163. [
CrossRef]
53. Del Pozo, M. A.; Lolo, F. N.; Echarri, A. Caveolae: Perangkat Mekanosensing dan mekanotransduksi yang menghubungkan
perdagangan membran CrossRef]
54. dengan adaptasi mekanis. Curr. Opin. Sel Biol. 2021, 68, 113–123. [
Larkin, J. M.; Brown, M. S.; Goldstein, J. L.; Anderson, R. G. W. Penipisan penangkapan kalium intraseluler pembentukan lubang
berlapis dan CrossRef]
55. Moya, M.; Dautry-Varsat, A.; Goud, B.; Louvard, D.; Boquet, P. Penghambatan pembentukan lubang berlapis pada Hep
endositosis yang dimediasi reseptor pada fibroblas. Sel 1983, 33, 273-285. [ 2 sel memblokir
sitotoksisitas toksin difteri tetapi tidak pada risin. J. Sel Biol. 1985, 101, 548–559. [
CrossRef] [PubMed]
56. Sandvig, K.; Olsnes, S.; Petersen, O. W.; van Deurs, B. Pengasaman sitosol menghambat endositosis dari lubang berlapis. J. Sel
Biol.
1987 , 105, 679–689. [CrossRef] [PubMed]
57. Doxsey, S. J.; Brodsky, F. M.; Blank, G. S.; Helenius, A. Penghambatan endositosis oleh antibodi anti-klatrin. Sel 1987, 50, 453-463.
[CrossRef]

Racun 2021, 13, 377 24 dari 29

58. Hansen, S. H.; Sandvig, K.; van Deurs, B. Kompartemen preendosom terdiri dari populasi vesikel endositik berlapis dan tidak
berlapis yang berbeda CrossRef] [PubMed]
59. . J. Sel Biol. 1991, 113, 731–741. [
Damke, H.; Baba, T.; van der Bliek, A. M.; Schmid, S. L. Pinositosis yang tidak bergantung pada Clathrin diinduksi dalam sel
CrossRef] [PubMed]
yang mengekspresikan mutan dynamin yang peka terhadap suhu secara berlebihan. J. Sel Biol. 1995, 131, 69–80. [
60. Damke, H.; Baba, T.; Warnock, D. E.; Schmid, S. L. Induksi dynamin mutan secara khusus memblokir pembentukan vesikel berlapis
CrossRef]
endositik. J. Sel Biol. 1994, 127, 915–934. [
61. Cheng, Z. J.; Singh, R. D.; Holicky, E. L.; Wheatley, C. L.; Marks, D. L.; Pagano, R. E. Pengaturan bersama
CrossRef]
endositosis fase fluida yang bergantung pada caveolar dan Cdc42 oleh phosphocaveolin-1. J. Biol. Kimia. 2010, 285, 15119–15125.
62. [Chaudhary, N.; Gomez, G. A.; Howes, M. T.; Lo, HP; McMahon, K. A.; Rae, J. A.; Schieber, N. L.; Hill, M. M.; Gaus, K.; Yap, A. S.;
dkk.
CrossRef]
Crosstalk endositik: Cavins, caveolins, dan caveolae mengatur endositosis yang tidak bergantung pada klathrin. PLoS Biol. 2014,
63. Renard, H. F.; Boucrot, E. Mekanisme endositik yang tidak konvensional. Curr. Opin. Sel Biol. 2021, 71, 120–129. [
12, e1001832. CrossRef]
64. [
Rothberg, K. G.; Ying, Y. S.; Kamen, BA; Anderson, R. G. Kolesterol mengontrol pengelompokan reseptor membran berlabuh
glikosfingolipid untuk 5-metiltrahidrofolat. J. Sel Biol. 1990, 111, 2931–2938. [ CrossRef]
65. Klein, U.; Gimpl, G.; Fahrenholz, F. Perubahan kandungan kolesterol membran plasma miometrium dengan beta-siklodekstrin
 memodulasi afinitas pengikatan reseptor oksitosin. Biokimia 1995, 34, 13784-13793. [ CrossRef]
66. Grimmer, S.; van Deurs, B.; Sandvig, K. Mengacak-acak membran dan makropinositosis membutuhkan kolesterol. J. Sel Sci. 2002,
115, CrossRef]
67. Rodal, S. K.; Skretting, G.; Garred, Ø; Vilhardt, F.; van Deurs, B.; Sandvig, K. Ekstraksi kolesterol dengan metil-b-siklodekstrin
2953–2962. [
mengganggu pembentukan vesikel endositik berlapis klatrin. Mol. Biol. Sel 1999, 10, 961-974. [
CrossRef]
68. Subtil, A.; Gaidarov, I.; Kobylarz, K.; Lampson, M. A.; Keen, J. H.; McGraw, T. E. Penipisan kolesterol akut menghambat lapisan
klathrin
tunas lubang. Proc. Natl. Acad. Sci. Amerika Serikat 1999, 96, 6775-6780. [
CrossRef]
69. Watkins, E. B.; Majewski, J.; Chi, E. Y.; Gao, H.; Florent, J. C.; Johannes, L. Toksin Shiga Menginduksi Kompresi Lipid: Mekanisme
untuk Menghasilkan Kelengkungan Membran. Nano Lett. 2019, 19, 7365–7369. [
CrossRef]
70. Johannes, L. Toksin Shiga-Model untuk Endositosis yang Bergantung pada Glikolipid dan Digerakkan oleh Lektin. Racun 2017, 9,
CrossRef]
71. 340. [
Bergan, J.; Dyve Lingelem, A. B.; Simm, R.; Skotland, T.; Sandvig, K. Racun Shiga. Toxicon 2012, 60, 1085-1107. [
CrossRef]
72. Kavaliauskiene, S.; Dyve Lingelem, A. B.; Skotland, T.; Sandvig, K. Perlindungan terhadap Racun Shiga. Racun 2017, 9, 44. [
CrossRef]
73. Sandvig, K.; Olsnes, S.; Brown, J. E.; Petersen, OW; van Deurs, B. Endositosis dari lubang berlapis toksin Shiga:
CrossRef]
Protein pengikat glikolipid dari Shigella dysenteriae 1. J. Sel Biol. 1989, 108, 1331–1343. [
74. Schapiro, F. B.; Lingwood, C.; Furuya, W.; Grinstein, S. pH-penargetan retrograde independen glikolipid ke kompleks Golgi.
Am. J. Physiol. 1998, 274, C319–C332. [CrossRef]
75. Lauvrak, S. U.; Torgersen, M. L.; Sandvig, K. Pengangkutan endosom-ke-Golgi toksin Shiga yang efisien bergantung pada dynamin
dan CrossRef] [PubMed]
76. clathrin. J. Sel Sci. 2004, 117, 2321–2331. [
Lauvrak, S. U.; WäLchli, S.; Slagsvold, H. H.; Torgersen, M. L.; Spilsberg, B.; Sandvig, K. Toksin Shiga mengatur masuknya
CrossRef] [PubMed]
dengan cara yang bergantung pada Syk. Mol. Biol. Sel 2006, 17, 1096-1109. [
77. Katagiri, Y. U.; Mori, T.; Nakajima, H.; Katagiri, C.; Taguchi, T.; Takeda, T.; Kiyokawa, N.; Fujimoto, J. Aktivasi
keluarga Src kinase ya yang diinduksi oleh toksin Shiga yang mengikat globotriaosyl ceramide (Gb3/CD77) dalam mikrodomain
berdensitas rendah yang tidak larut CrossRef]
78. dalam deterjen. J. Biol. Kimia. 1999, 274, 35278–35282. [
Mori, T.; Kiyokawa, N.; Katagiri, Y. U.; Taguchi, T.; Suzuki, T.; Sekino, T.; Sato, N.; Ohmi, K.; Nakajima, H.; Takeda, T.; dkk.
Globotriaosyl ceramide (CD77 / Gb3) dalam domain membran yang diperkaya glikolipid berpartisipasi dalam apoptosis yang
dimediasi reseptor sel B CrossRef]
79. dengan mengatur aktivitas lyn kinase dalam sel B manusia. Exp. Hematol. 2000, 28, 1260–1268. [
Utskarpen, A.; Massol, R.; van Deurs, B.; Lauvrak, S. U.; Kirchhausen, T.; Sandvig, K. Toksin Shiga meningkatkan pembentukan
CrossRef]
lubang berlapis klathrin melalui Syk kinase. PLoS ONE 2010, 5, e70944. [
80. Torgersen, M. L.; Lauvrak, S. U.; Sandvig, K. Rantai-A toksin Shiga merangsang serapan toksin yang bergantung pada clathrin.
CrossRef]
FEBS J. 2005.272
81. Pascolutti, R.; Algisi, V.; Conte, A.; Raimondi, A.; Pasham, M.; Upadhyayula, S.; Gaudin, R.; Maritzen, T.; Barbieri, E.; Caldieri, G.;
, 4103-4113. [
dkk. Lubang Berlapis Clathrin yang Berbeda Secara Molekuler Berdampak Berbeda Pada Nasib dan Pensinyalan EGFR. Sel Rep.
2019, 27, 3049-3061.e3046.
CrossRef]
82. [
Skotland, T.; Sandvig, K. Peran PS 18: 0/18: 1 dalam fungsi membran. Nat. Commun. 2019, 10, 2752. [ CrossRef]
83. Varga, K.; Jiang, Z. J.; Gong, L. W. Phosphatidylserine sangat penting untuk pembelahan vesikel selama endositosis yang dimediasi
clathrin. J. CrossRef]
84. Neurochem. 2020, 152, 48–60. [
RöMer, W.; Berland, L.; Chambon, V.; Gaus, K.; Windschiegl, B.; Tenza, D.; Aly, M. R.; Fraisier, V.; Florent, J. C.; Perrais, D.; dkk.
CrossRef]
Toksin Shiga menginduksi invaginasi membran tubular untuk penyerapannya ke dalam sel. Alam 2007, 450, 670-675. [
85. Lippincott-Schwartz, J.; Yuan, L. C.; Bonifacino, J. S.; Klausner, R. D. Redistribusi cepat protein Golgi ke UGD dalam sel
yang diobati dengan Brefeldin A: Bukti siklus membran dari Golgi ke UGD. Sel 1989, 56, 801-813. [ CrossRef]
86. Fujiwara, T.; Oda, K.; Yokota, S.; Takatsuki, A.; Ikehara, Y. Brefeldin A menyebabkan pembongkaran kompleks Golgi dan akumulasi
protein sekretori di retikulum endoplasma. J. Biol. Kimia. 1988, 263, 18545–18552. [ CrossRef]
87. Doms, R. W.; Russ, G.; Yewdell, J. W. Brefeldin A mendistribusikan kembali protein Golgi residen dan keliling ke retikulum
endoplasma. CrossRef]
J. Sel Biol. 1989, 109, 61–72. [

Racun 2021, 13, 377 25 dari 29

88. Hunziker, W.; Whitney, J. A.; Mellman, I. Penghambatan selektif transkitosis oleh brefeldin A dalam sel MDCK. Sel 1991, 67, 617-
CrossRef]
627.
89. [
Ktistakis, N. T.; Roth, M. G.; Bloom, G. S. Sel PtK1 mengandung faktor dominan yang tidak dapat dibedakan yang membuat
aparatus Golgi CrossRef]
90. resisten terhadap Biol Sel brefeldin AJ. 1991, 113, 1009–1023. [
Sandvig, K.; Prydz, K.; Hansen, S. H.; van Deurs, B. Transportasi risin dalam sel yang dirawat di brefeldin A: Korelasi antara
CrossRef]
struktur Golgi dan efek toksik. J. Sel Biol. 1991, 115, 971–981. [
91. Iversen, T.-G.; Skretting, G.; Llorente, A.; Nicoziani, P.; van Deurs, B.; Sandvig, K. Pengangkutan risin dari Endosom ke Golgi
CrossRef]
tidak bergantung pada clathrin dan dari Rab9-dan Rab11-GTPase. Mol. Biol. Sel 2001, 12, 2099-2107. [
92. Mallard, F.; Antony, C.; Tenza, D.; Salamero, J.; Goud, B.; Johannes, L. Jalur langsung dari endosom awal / daur ulang ke aparatus
Golgi terungkap melalui studi pengangkutan fragmen B toksin shiga. J. Sel Biol. 1998, 143, 973–990. [ CrossRef]
93. Mukhopadhyay, S.; Linstedt, A. D. Mangan memblokir perdagangan intraseluler toksin Shiga dan melindungi dari toksikosis Shiga.
Sains 2012, 335, 332-335. [CrossRef]
94. Mukhopadhyay, S.; Redler, B.; Linstedt, A. D. Situs pengikatan toksin Shiga untuk reseptor sel inang GPP130 mengungkapkan
perbedaan yang tidak terduga CrossRef]
95. dalam mekanisme perdagangan toksin. Mol. Biol. Sel 2013, 24, 2311-2318. [
Li, D.; Selyunin, A.; Mukhopadhyay, S. Menargetkan Pengangkutan Endosom - ke-Golgi Awal dari Racun Shiga sebagai Strategi
Terapeutik CrossRef]
96. . Racun 2020, 12, 342. [
Sowa-Rogozinska, N.; Sominka, H.; Nowakowska-Golacka, J.; Sandvig, K.; Slominska-Wojewodzka, M. Transpor Intraseluler
dan Sitotoksisitas Toksin Protein Risin. Racun 2019, 11.350. [ CrossRef]
97. Mallard, F.; Tang, B. L.; Galli, T.; Tenza, D.; Saint-Pol, A.; Yue, X.; Antony, C.; Hong, W.; Goud, B.; Johannes, L.
CrossRef]
Pengangkutan endosom-ke-TGN awal/daur ulang melibatkan dua kompleks JERAT dan isoform Rab6. J. Sel Biol. 2002, 156, 653–
98. 664. [
del Nery, E.; Miserey-Lenkei, S.; Falguieres, T.; Nizak, C.; Johannes, L.; Perez, F.; Goud, B. RAB6A dan Rab6A GTPase memainkan
CrossRef] [PubMed]
peran yang tidak tumpang tindih dalam perdagangan membran. Lalu lintas 2006, 7, 394-407. [
99. Utskarpen, A.; Slagsvold, H. H.; Iversen, T.-G.; WäLchli, S.; Sandvig, K. Pengangkutan risin retrograde diatur oleh Rab6A / A secara
berurutan. Lalu lintas 2006, 7, 663-672. [ CrossRef] [PubMed]
100. Lauvrak, S. U.; Llorente, A.; Iversen, T.-G.; Sandvig, K. Regulasi selektif pengangkutan risin yang tidak bergantung pada Rab9 ke
Golgiaparatus oleh kalsium. J. Sel Sci. 2002, 115, 3449–3456. [
CrossRef] [PubMed]
101. SkåNland, S. S.; WäLchli, S.; Wandinger-Ness, A.; Sandvig, K. Pengangkutan retrograde risin yang diatur Fosfoinositida: Crosstalk
antara hVps34 dan menyortir nexin. Lalu lintas 2007, 8, 297-309. [
CrossRef]
102. Utskarpen, A.; Slagsvold, H. H.; Dyve, A. B.; Skanland, S. S.; Sandvig, K. SNX1 dan SNX2 menengahi transportasi mundur Shiga
racun. Biochem. Biofis. Res. Comm. 2007, 358, 566–570. [CrossRef]
103. Bujny, M. V.; Popoff, V.; Johannes, L.; Cullen, P. J. Penyortiran komponen retromer nexin-1 diperlukan untuk retrograde yang
efisien
pengangkutan toksin Shiga dari endosom awal ke jaringan trans Golgi. J. Sel Sci. 2007, 120, 2010–2021. [ CrossRef]
104. Popoff, V.; Mardones, G. A.; Tenza, D.; Rojas, R.; Lamaze, C.; Bonifacino, J. S.; Raposo, G.; Johannes, L. Kompleks retromer dan
clathrin menentukan situs keluar retrograde endosom awal. J. Sel Sci. 2007, 120, 2022–2031. [
CrossRef]
105. Lieu, Z. Z.; Gleeson, P. A. Identifikasi rencana perjalanan yang berbeda dan komponen retromer untuk pengangkutan endosom-ke-
GolgiTGN38 dan toksin Shiga. Eur. J. Sel Biol. 2010, 89, 379–393. [CrossRef]
106. McKenzie, J. E.; Raisley, B.; Zhou, X.; Naslavsky, N.; Taguchi, T.; Caplan, S.; Sheff, D. Retromer memandu STxB dan CD8-M6PR
dari awal hingga daur ulang endosom, EHD1 memandu STxB dari daur ulang endosom ke Golgi. Lalu lintas 2012, 13, 1140-1159. [
CrossRef]
107. Jing, J.; Junutula, J. R.; Wu, C.; Beban, J.; Matern, H.; Peden, A. A.; Prekeris, R. FIP1/RCP yang mengikat Golgin-97 mengatur
transportasi retrograde dari daur ulang endosom ke jaringan trans-Golgi. Mol. Biol. Sel 2010, 21, 3041-3053. [ CrossRef]
108. Lieu, Z. Z.; Derby, MC; Teasdale, R. D.; Hart, C.; Gunn, P.; Gleeson, PA Golgin GCC88 diperlukan untuk retrograde yang efisien
pengangkutan kargo dari endosom awal ke jaringan trans-Golgi. Mol. Biol. Sel 2007, 18, 4979-4991. [ CrossRef]
109. Arakel, E. C.; Schwappach, B. Sekilas tentang pembentukan vesikel berlapis COPI. J. Sel Sci. 2018, 131. [
CrossRef]
110. Luo, PM; Boyce, M. Mengarahkan Lalu Lintas: Pengaturan Pengangkutan COPI dengan Modifikasi Pasca-translasi. Depan.
Pengembang Sel. Biol.
2019 , 7, 190. [CrossRef]
111. Girod, A.; Storrie, B.; Simpson, J. C.; Johannes, L.; Goud, B.; Roberts, L. M.; Lord, J. M.; Nilsson, T.; Pepperkok, R. Bukti untuk
rute transportasi independen COP-I dari kompleks Golgi ke retikulum endoplasma. Biol Sel Alam. 1999, 1, 423–430.
 [CrossRef] [PubMed]
112. Jackson, ME; Simpson, J. C.; Girod, A.; Pepperkok, R.; Roberts, L. M.; Lord, J. M. Sistem pengambilan KDEL dieksploitasi oleh
Pseudomonas eksotoksin A, tetapi tidak oleh toksin-1 seperti Shiga, selama pengangkutan retrograde dari kompleks Golgi ke
endoplasma
retikulum. J. Sel Sci. 1999, 112, 467–475. [
CrossRef] [PubMed]
113. Putih, J.; Johannes, L.; Mallard, F.; Girod, A.; Panggangan, S.; Reinsch, S.; Keller, P.; Tzschaschel, B.; Echard, A.; Goud, B.; dkk.
Rab6 mengkoordinasikan Golgi baru ke jalur transpor retrograde ER dalam sel hidup. J. Sel Biol. 1999, 147, 743–760. [
CrossRef] [PubMed]
114. Bassik, M. C.; Kampmann, M.; Lebbink, R. J.; Wang, S.; Hein, M. Y.; Masalah sulit, I.; Weibezahn, J.; Horlbeck, M. A.; Chen, S.;
Mann, M.;
et al. Peta interaksi genetik Mamalia yang sistematis mengungkapkan jalur yang mendasari kerentanan risin. Sel 2013, 152, 909-
CrossRef]
922.
115. Moreau, D.; Kumar, P.; Wang, SC; Chaumet, A.; Chew, S. Y.; Chevalley, H.; Bard, F. Layar RNAi seluruh genom mengidentifikasi
[
gen diperlukan untuk keracunan Risin dan PE. Dev. Sel 2011, 21, 231-244. [
CrossRef]

Racun 2021, 13, 377 26 dari 29

116. Garred, Ø; van Deurs, B.; Sandvig, K. Pembelahan yang diinduksi Furin dan aktivasi toksin Shiga. J. Biol. Kimia. 1995, 270, 10817–
10821.
[CrossRef]
117. Llorente, A.; Lauvrak, S. U.; van Deurs, B.; Sandvig, K. Induksi pengangkutan endosom langsung ke retikulum endoplasma pada
Sel ovarium hamster Cina (CHO) (LdlF) dengan defek peka suhu pada protein epsilon-coatomer (epsilon-COP). J. Biol.
Kimia. 2003, 278, 35850–35855. [ CrossRef]
118. Wesche, J.; Rapak, A.; Olsnes, S. Ketergantungan toksisitas risin pada translokasi rantai-A toksin dari retikulum endoplasma
ke sitosol. J. Biol. Kimia. 1999, 274, 3443–3449. [CrossRef]
119. Simpson, J. C.; Roberts, L. M.; Rö
jalur degradasi protein terkait untuk memasuki sitosol ragi. FEBS Lett. 1999, 459, 80–84. [ CrossRef]
120. Slominska-Wojewodzka, M.; Gregers, T. F.; Wä Chli, S.; Sandvig, K. EDEM terlibat dalam translokasi risin dari endoplasma
retikulum ke sitosol. Mol. Biol. Sel 2006, 17, 1664-1675. [ CrossRef]
121. Yu, M.; Haslam, D. B. Toksin Shiga diangkut dari retikulum endoplasma setelah berinteraksi dengan pendamping luminal
HEDJ / ERdj3. Menginfeksi. Immun. 2005, 73, 2524–2532. [
CrossRef]
122. Forrester, A.; Rathjen, S. J.; Daniela Garcia-Castillo, M.; Bachert, C.; Couhert, A.; Tepshi, L.; Pichard, S.; Martinez, J.; Munier, M.;
Sierocki, R.; dkk. Diseksi fungsional penghambat perdagangan toksin Shiga retrograde Retro-2. Nat. Kimia. Biol. 2020, 16,
327–336. [CrossRef]
123. Stechmann, B.; Bai, S. K.; Gobbo, E.; Lopez, R.; Merer, G.; Pinchard, S.; Panigai, L.; Tenza, D.; Raposo, G.; Beaumelle, B.; dkk.
Penghambatan transpor retrograde melindungi tikus dari tantangan risin yang mematikan. Sel 2010, 141, 231-242. [
CrossRef]
124. Morgens, D. W.; Chan, C.; Kane, A. J.; Bendung, N. R.; Li, A.; Dubreuil, M. M.; Tsui, C. K.; Hess, G. T.; Lavertu, A.; Han, K.; dkk.
Retro-2
melindungi sel dari toksisitas risin dengan menghambat penargetan ER yang dimediasi oleh ASNA1 dan penyisipan protein
berlabuh ekor. Elife 2019, 8.
[CrossRef]
125. Norlin, S.; Parekh, Vs; Naredi, P.; Edlund, H. Asna1/TRC40 Mengontrol Fungsi Sel beta dan Homeosta Retikulum Endoplasma-
sis dengan Memastikan Transportasi Mundur. Diabetes 2016, 65, 110-119. [
CrossRef]
126. Simpson, J. C.; Dascher, C.; Roberts, L. M.; Lord, J. M.; Balch, W. E. Sitotoksisitas risin sensitif terhadap daur ulang antara
retikulum endoplasma dan kompleks Golgi. J. Biol. Kimia. 1995, 270, 20078–20083. [ CrossRef]
127. Subramanian, A.; Capalbo, A.; Iyengar, N. R.; Rizzo, R.; di Campli, A.; Di Martino, R.; Lo Monte, M.; Beccari, A. R.; Yerudkar, A.;
Del Vecchio, C.; et al. Pengaturan otomatis Fluks Sekretori dengan Merasakan dan Merespons Muatan Protein yang Terlipat di
Retikulum Endoplasma. Sel 2019, 176, 1461-1476.e23. [ CrossRef]
128. Shevchenko, A.; Simons, K. Lipidomik: Memahami keragaman lipid. Nat. Pendeta Mol. Sel Biol. 2010, 11, 593–598.
[CrossRef]
129. Jung, H. R.; Sylvanne, T.; Koistinen, K. M.; Tarasov, K.; Kauhanen, D.; Ekroos, K. Molekul kuantitatif throughput tinggi
lipidomik. Biochim. Biofis. Acta 2011, 1811, 925-934. [CrossRef]
130. Harayama, T.; Riezman, H. Memahami keragaman komposisi lipid membran. Nat. Pendeta Mol. Sel Biol. 2018, 19,
281–296. [CrossRef]
131. Hanada, K. Protein transfer lipid memperbaiki fluks antar organel dan secara akurat mengirimkan lipid di tempat kontak membran.
J. Lipid Res.
2018 , 59, 1341–1366. [CrossRef]
132. Skotland, T.; Kavaliauskiene, S.; Sandvig, K. Peran spesies lipid dalam membran dan perubahan terkait kanker. Metastasis Kanker
Wahyu 2020, 39, 343-360. [
CrossRef]
133. Merrill, A. H., Jr. Jalur metabolisme Sphingolipid dan glycosphingolipid di era sphingolipidomics. Kimia. Pdt. 2011, 111,
6387–6422. [ CrossRef]
134. Park, J. W.; Park, W. J.; Futerman, A. H. Ceramide synthases sebagai target potensial untuk intervensi terapeutik pada penyakit
manusia.
Biochim. Biofis. Acta 2014, 1841, 671-681. [
CrossRef]
135. Nilsson, O.; Svennerholm, L. Karakterisasi dan penentuan kuantitatif gangliosida dan glikosfingolipid netral pada
hati manusia. J. Lipid Res. 1982, 23, 327-334. [
CrossRef]
136. Brandel, A.; Aigal, S.; Lagies, S.; Schlimpert, M.; Melendez, A. V.; Xu, M.; Lehmann, A.; Hummel, D.; Fisch, D.; Madl, J.; dkk. The
Domain membran plasma CD59/flotillin yang diperkaya Gb3 mengatur invasi sel inang oleh Pseudomonas aeruginosa. Sel. Mol.
Ilmu Kehidupan.
CrossRef]
2021. [
137. Devaux, P. F.; Morris, R. Asimetri transmembran dan domain lateral dalam membran biologis. Lalu lintas 2004, 5, 241-246.
[CrossRef]
138. van Meer, G.; Voelker, D. R.; Feigenson, G. W. Lipid membran: Di mana mereka berada dan bagaimana mereka berperilaku. Nat.
Pendeta Mol. Sel Biol.
2008 , 9, 112–124. [
CrossRef]
139. Steck, T. L.; Lange, Y. Distribusi transversal kolesterol bilayer membran plasma: Memilih sisi. Lalu lintas 2018, 19, 750-760.
[CrossRef]
140. Skotland, T.; Sagini, K.; Sandvig, K.; Llorente, A. Fokus yang muncul pada lipid dalam vesikel ekstraseluler. Adv. Obat Deliv. Pdt.
2020,159, 308–321. [CrossRef] [PubMed]
141. Rog, T.; Orlowski, A.; Llorente, A.; Skotland, T.; Sylvanne, T.; Kauhanen, D.; Ekroos, K.; Sandvig, K.; Vattulainen, I. Interdigitasi
sphingomyelin rantai panjang menginduksi penggandengan selebaran membran dengan cara yang bergantung pada kolesterol.
, 1858, 281–288. [
Biochim. Biofis. Acta CrossRef] [PubMed]
2016

Racun 2021, 13, 377 27 dari 29

142. Fujimoto, T.; Parmryd, I. Interleaflet Coupling, Pinning, dan Leaflet Asymmetrism-Pemain Utama dalam Nanodomain Membran
Plasma
Formasi. Depan. Pengembang Sel. Biol. 2017, 4, 155. [
CrossRef] [PubMed]
143. Rog, T.; Vattulainen, I. Kolesterol, sphingolipid, dan glikolipid: Apa yang kita ketahui tentang perannya dalam membran mirip rakit?
Kimia. Phys. Lipid 2014, 184, 82-104. [CrossRef] [PubMed]
144. Nickels, J. D.; Smith, J. C.; Cheng, X. Organisasi lateral, asimetri bilayer, dan penggandengan antar-selebaran membran biologis.
Kimia. Phys. Lipid 2015, 192, 87-99. [CrossRef]
145. Lingwood, D.; Binnington, B.; Rog, T.; Vattulainen, I.; Grzybek, M.; Coskun, U.; Lingwood, CA; Simons, K. Kolesterol
memodulasi konformasi glikolipid dan aktivitas reseptor. Nat. Kimia. Biol. 2011, 7, 260–262. [CrossRef]
146. Yahi, N.; Aulas, A.; Fantini, J. Bagaimana kolesterol membatasi konformasi glikolipid untuk pengenalan optimal beta Alzheimer
peptida amiloid (Abeta1-40). PLoS ONE 2010, 5, e9079. [ CrossRef]
147. Ling, H.; Boodhoo, A.; Hazes, B.; Cummings, M. D.; Armstrong, G. D.; Brunton, J. L.; Baca, R. J. Struktur toksin mirip shiga I
B-pentamer dikomplekskan dengan analog reseptornya Gb3. Biokimia 1998, 37, 1777-1788. [CrossRef]
148. Sandvig, K.; Lingelem, A. B. D.; Skotland, T.; Bergan, J. Racun Shiga: Sifat dan aksi pada sel. Dalam buku sumber Komprehensif
racun Protein Bakteri, Edisi ke-4.; Alouf, J., Ladant, D., Popoff, M. R., Eds.; Elsevier: Amsterdam, Belanda, 2015; hlm
. 267-286.
149. Pike, L. J.; Han, X.; Gross, R. W. Reseptor faktor pertumbuhan epidermal terlokalisasi pada rakit lipid yang mengandung
keseimbangan bagian dalam dan luar
lipid selebaran luar: Studi lipidomik senapan. J. Biol. Kimia. 2005, 280, 26796–26804. [ CrossRef]
150. Legros, N.; Pohlentz, G.; Runde, J.; Dusny, S.; Humpf, H. U.; Karch, H.; Muthing, J. Kolokalisasi reseptor untuk racun Shiga
dengan rakit lipid pada sel endotel glomerulus ginjal primer manusia dan pengaruh D-PDMP terhadap sintesis dan distribusi
reseptor glikosfingolipid. Glikobiologi 2017, 27, 947-965. [ CrossRef]
151. Skotland, T.; Sandvig, K.; Llorente, A. Lipid dalam eksosom: Pengetahuan terkini dan jalan ke depan. Prog. Lipid Res. 2017, 66,
30–41. [CrossRef]
152. Lingwood, CA; Manis, A.; Mahfoud, R.; Khan, F.; Binnington, B.; Mylvaganam, M. Aspek baru regulasi glikosfin-
fungsi reseptor golipid. Kimia. Phys. Lipid 2010, 163, 27-35. [CrossRef]
153. Falguieres, T.; Romer, W.; Amessou, M.; Afonso, C.; Wolf, C.; Tabet, J. C.; Lamaze, C.; Johannes, L. Kumpulan fungsional yang
berbeda dari
Reseptor toksin Shiga, globotriaosyl ceramide, dalam sel HeLa. FEBS J. 2006, 273, 5205-5218. [
CrossRef]
154. Falguieres, T.; Mallard, F.; Baron, C.; Hanau, D.; Lingwood, C.; Goud, B.; Salamero, J.; Johannes, L. Penargetan toksin shiga
b-subunit ke rute pengangkutan retrograde terkait dengan membran tahan deterjen. Mol. Biol. Sel 2001, 12, 2453-2468.
[CrossRef]
155. Takenouchi, H.; Kiyokawa, N.; Taguchi, T.; Matsui, J.; Katagiri, Y. U.; Okita, H.; Okuda, K.; Fujimoto, J. Toksin Shiga mengikat
globotriaosyl ceramide menginduksi sinyal intraseluler yang memediasi remodeling sitoskeleton pada sel turunan karsinoma ginjal
manusia CrossRef]
156. Walchli, S.; Skanland, S. S.; Gregers, T. F.; Lauvrak, S. U.; Torgersen, M. L.; Ying, M.; Kuroda, S.; Maturana, A.; Sandvig, K.
. J. Sel Sci. 2004, 117, 3911–3922. [
Protein Kinase p38 yang diaktivasi Mitogen Menghubungkan Pensinyalan dan Perdagangan yang bergantung pada Toksin Shiga.
CrossRef]
Mol. Biol. Sel 2008, 19, 95-104.
157. Spiegel, S.; Fishman, P. H.; Weber, R. J. Bukti langsung bahwa gangliosida GM1 endogen dapat memediasi proliferasi timosit.
[
Sains 1985, 230, 1285-1287. [ CrossRef]
158. Schnitzler, A. C.; Burke, J. M.; Wetzler, L. M. Induksi peristiwa pensinyalan sel oleh subunit toksin kolera B dalam presentasi
antigen
sel. Menginfeksi. Immun. 2007, 75, 3150–3159. [
CrossRef]
159. Ravichandra, B.; Joshi, P. G. Regulasi pensinyalan transmembran oleh gangliosida GM1: Interaksi anti-GM1 dengan Neuro2a
sel. J. Neurochem. 1999, 73, 557–567. [CrossRef]
160. Wang, J.; Lu, Z. H.; Gabius, H. J.; Rohowsky-Kochan, C.; Ledeen, R. W.; Wu, G. Ikatan silang gangliosida GM1 dengan galektin-1
memediasi aktivitas sel T regulator yang melibatkan aktivasi saluran TRPC5: Kemungkinan peran dalam menekan
ensefalomielitis autoimun eksperimental. J. Immunol. 2009, 182, 4036–4045. [
CrossRef]
161. Wands, A. M.; Fujita, A.; McCombs, J. E.; Cervin, J.; Dedic, B.; Rodriguez, A. C.; Nischan, N.; Bond, M. R.; Mettlen, M.; Trudgian,
D. C.; dkk. Fucosylation dan glikosilasi protein menciptakan reseptor fungsional untuk toksin kolera. Elife 2015, 4, e09545. [
CrossRef]
162. Cervin, J.; Tongkat sihir, A. M.; Casselbrant, A.; Wu, H.; Krishnamurthy, S.; Cvjetkovic, A.; Estelius, J.; Dedic, B.; Sethi, A.; Wallom,
K. L.;et al. GM1 gangliosida-intoksikasi independen oleh toksin Kolera. PLoS Pathog. 2018, 14, e1006862. [CrossRef] [PubMed]
163. Monferran, C. G.; Roth, G. A.; Cumar, F. A. Penghambatan pengikatan toksin kolera ke reseptor membran oleh turunan musin
lambung babi
glikopeptida: Efek diferensial tergantung pada determinan antigenik golongan darah ABO. Menginfeksi. Immun. 1990, 58, 3966–
3972.
CrossRef] [PubMed]
164. Raa, H. A.; Grimmer, S.; Schwudke, D.; Bergan, J.; Wä
[
persyaratan untuk pengangkutan toksin Shiga dari endosom ke Golgi. Lalu lintas 2009, 10, 868-882. [
CrossRef] [PubMed]
165. Grimmer, S.; Spilsberg, B.; Hanada, K.; Sandvig, K. Penipisan sphingolipid memfasilitasi pengangkutan risin dari endosom ke Golgi.
Lalu lintas 2006, 7, 1243-1253. [
CrossRef] [PubMed]
166. Spilsberg, B.; van Meer, G.; Sandvig, K. Peran lipid dalam jalur retrograde intoksikasi risin. Lalu lintas 2003, 4, 544-552.
[CrossRef]

Racun 2021, 13, 377 28 dari 29

167. Pike, L. J.; Han, X.; Chung, K. N.; Gross, R. W. Rakit lipid diperkaya dengan asam arakidonat dan plasmeniletanolamina dan
komposisinya tidak bergantung pada ekspresi caveolin-1: Ionisasi elektrospray kuantitatif / analisis spektrometri massa.
Biokimia 2002, 41, 2075-2088. [ CrossRef]
168. Wallner, S.; Schmitz, G. Plasmalogen spesies lipid pengatur dan pemulung yang terabaikan. Kimia. Phys. Lipid 2011, 164, 573-589.
[CrossRef]
169. Braverman, N. E.; Moser, A. B. Fungsi lipid plasmalogen dalam kesehatan dan penyakit. Biochim. Biofis. Acta 2012, 1822, 1442-
1452.[CrossRef]
170. Phuyal, S.; Skotland, T.; Hessvik, N. P.; Simolin, H.; Overbye, A.; Brech, A.; Parton, R. G.; Ekroos, K.; Sandvig, K.; Llorente, A.
Prekursor Lipid Eter Heksadesilgliserol Merangsang Pelepasan dan Mengubah Komposisi Eksosom yang Berasal dari Sel PC-3
. J. Biol. Kimia. 2015, 290, 4225–4237. [ CrossRef]
171. Torgersen, M. L.; Klokk, T. I.; Kavaliauskiene, S.; Klose, C.; Simons, K.; Skotland, T.; Sandvig, K. Obat anti tumor 2-hidroksioleat
asam (Minerval) merangsang pensinyalan dan transportasi retrograde. Oncotarget 2016, 7, 86871-86888. [
CrossRef]
172. Rother, N.; Yanginlar, C.; Lindeboom, R. G. H.; Bekkering, S.; van Leent, M. M. T.; Buijsers, B.; Jonkman, I.; de Graaf, M.; Baltissen,
M.; Lamers, L. A.; dkk. Hydroxychloroquine Menghambat Respon Imun Bawaan yang Terlatih terhadap Interferon. Sel Rep. Med.
2020, 1,
100146. [ CrossRef]
173. Jimenez-Rojo, N.; Riezman, H. Di jalan menuju penguraian fungsi molekuler lipid eter. FEBS Lett. 2019, 593, 2378–2389.
[CrossRef]
174. Fontaine, D.; Figiel, S.; Felix, R.; Kouba, S.; Fromont, G.; Maheo, K.; Potier-Cartereau, M.; Chantome, A.; Vandier, C. Peran
lipid eter endogen dan PUFA terkait dalam pengaturan saluran ion dan relevansinya dengan penyakit. J. Lipid Res. 2020,61
, 840-858. [ CrossRef]
175. Dean, J. M.; Lodhi, I. J. Peran struktural dan fungsional lipid eter. Sel Protein 2018, 9, 196-206. [
CrossRef]
176. Bergan, J.; Skotland, T.; SylväNne, T.; Simolin, H.; Ekroos, K.; Sandvig, K. Precurson lipid eter heksadesilgliserol menyebabkan
perubahan besar pada lipidom sel HEp-2. PLoS ONE 2013, 8, e75904. [CrossRef]
177. Bergan, J.; Skotland, T.; Dyve Lingelem, A. B.; Simm, R.; Spilsberg, B.; Lindback, T.; sylvä
K. Prekursor lipid eter heksadesilgliserol melindungi dari racun Shiga. Sel. Mol. Ilmu Kehidupan. 2014, 71, 4285–4300. [
CrossRef]
[PubMed]
178. Kavaliauskiene, S.; Skotland, T.; SylväNne, T.; Simolin, H.; Klokk, T. I.; Torgersen, M. L.; Lingelem, A. B. D.; Simm, R.; Ekroos, K.;
Sandvig, K. Aksi baru 2-deoksiglukosa: Perlindungan terhadap racun Shiga dan perubahan lipid seluler. Biochem. J. 2015, 470,23
-37. [ CrossRef]
179. Kavaliauskiene, S.; Torgersen, M. L.; Lingelem, A. B.; Klokk, T. I.; Lintonen, T.; Simolin, H.; Ekroos, K.; Skotland, T.; Sandvig, K.
Efek seluler fluorodeoxyglucose: Perubahan global pada lipidom dan perubahan transpor intraseluler. Oncotarget 2016, 7,79885
-79900. [ CrossRef]
180. Ailte, I.; Lingelem, A. B.; Kavaliauskiene, S.; Bergan, J.; Kvalvaag, A. S.; Myrann, A. G.; Skotland, T.; Sandvig, K. Penambahan
lisofosfolipid dengan kelompok kepala besar pada sel menghambat pengikatan toksin Shiga. Sci. Rep. 2016, 6, 30336. [
CrossRef]
181. Ailte, I.; Lingelem, A. B.; Kvalvaag, A. S.; Kavaliauskiene, S.; Brech, A.; Koster, G.; Dommersnes, P. G.; Bergan, J.; Skotland, T.;
Sandvig, K. Lisofosfolipid eksogen dengan kelompok kepala besar mengganggu endositosis yang dimediasi clathrin. Lalu lintas
CrossRef]
2017, 18, 176-191.
182. Spilsberg, B.; Llorente, A.; Sandvig, K. Asam lemak tak jenuh ganda mengatur transportasi toksin Shiga. Biochem. Biofis. Res.
[
 2007
Commun. , 364, 283–288. [
CrossRef] [PubMed ]
183. Lingelem, A. B. D.; Kavaliauskiene, S.; Halsne, R.; Klokk, T. I.; Surma, M. A.; Klose, C.; Skotland, T.; Sandvig, K. Diasilgliserol
penghambat kinase dan fosfolipase D mengubah lipidom seluler dan penyortiran endosom menuju aparatus Golgi. Sel. Mol.
CrossRef] [PubMed]
Ilmu Kehidupan. 2021, 78, 985–1009. [
184. Jimenez-Rojo, N.; Leonetti, M. D.; Zoni, V.; Colom, A.; Feng, S.; Iyengar, N. R.; Matile, S.; Roux, A.; Vanni, S.; Weissman, J. S.; dkk.
Fungsi Lipid Eter dan Sphingolipid yang Dilestarikan di Jalur Sekretori Awal. Curr. Biol. 2020, 30, 3775–3787.e3777.
[CrossRef] [PubMed]
185. Han, X. L.; Gross, R. W. Lapisan ganda membran plasmenilkolin dan fosfatidilkolin memiliki motif konformasi yang berbeda.
Biokimia 1990, 29, 4992-4996. [ CrossRef]
186. Rog, T.; Koivuniemi, A. Sifat biofisik plasmalogen etanolamina diungkapkan oleh dinamika molekuler atomistik
simulasi. Biochim. Biofis. Acta 2016, 1858, 97-103. [ CrossRef]
187. Kinoshita, T.; Fujita, M. Biosintesis protein berlabuh GPI: Penekanan khusus pada remodeling lipid GPI. J. Lipid Res. 2016, 57,
6–24. [CrossRef]
188. Obrig, T. G.; Del Vecchio, P. J.; Brown, J. E.; Moran, T. P.; Rowland, B. M.; Hakim, T. K.; Rothman, S. W. Aksi sitotoksik langsung
Shigatoksin pada sel endotel vaskular manusia. Menginfeksi. Immun. 1988, 56, 2373–2378. [
CrossRef]
189. Kelloff, G. J.; Krohn, K. A.; Larson, S. M.; Weissleder, R.; Mankoff, D. A.; Hoffman, J. M.; Tautan, J. M.; Guyton, K. Z.; Eckelman, W.
C.; Scher, H. I.; dkk. Kemajuan dan janji pemeriksaan pencitraan molekuler dalam pengembangan obat onkologi. Clin. Kanker Res.
2005,
11, 7967–7985. [ CrossRef]
190. Hofman, MS; Hicks, R. J. Bagaimana Kita Membaca PET/CT FDG Onkologis. Pencitraan Kanker 2016, 16, 35. [
CrossRef]
191. Boulant, S.; Kural, C.; Zeeh, J. C.; Ubelmann, F.; Kirchhausen, T. Dinamika aktin melawan tegangan membran selama clathrin-
endositosis yang dimediasi. Nat. Sel Biol. 2011, 13, 1124–1131. [
CrossRef]

Racun 2021, 13, 377 29 dari 29

192. Melero, A.; Chiaruttini, N.; Karashima, T.; Riezman, I.; Funato, K.; Barlowe, C.; Riezman, H.; Roux, A. Lisofosfolipid
Memfasilitasi pembentukan vesikel COPII. Curr. Biol. 2018, 28, 1950–1958.e56. [
CrossRef]
193. Binnington, B.; Nguyen, L.; Kamani, M.; Hossain, D.; Marks, D. L.; Budani, M.; Lingwood, CA Penghambatan prenilasi Rab oleh
statin menginduksi remodeling glikosfingolipid seluler. Glikobiologi 2016, 26, 166-180. [CrossRef]
194. Cole, S. L.; Grudzien, A.; Manhart, I. O.; Kelly, B. L.; Oakley, H.; Vassar, R. Statin menyebabkan akumulasi amiloid intraseluler
protein prekursor, fragmen yang dibelah beta-sekretase, dan beta-peptida amiloid melalui mekanisme yang bergantung pada
isoprenoid. J. Biol. CrossRef]
195. Sheng, R.; Chen, Y.; Yung Gee, H.; Stec, E.; Melowic, H. R.; Blatner, N. R.; Tun, M. P.; Kim, Y.; Kallberg, M.; Fujiwara, T. K.; dkk.
Kimia. 2005, 280, 18755–18770. [
Kolesterol memodulasi pensinyalan sel dan jaringan protein dengan berinteraksi secara khusus dengan perancah yang
mengandung domain PDZ
protein. Nat. Commun. 2012, 3, 1249. [ CrossRef]
196. Ikon, E. Mekanisme kompartementalisasi kolesterol seluler: Wawasan terkini. Curr. Opin. Sel Biol. 2018, 53, 77–83.
[CrossRef]
197. Bos, K.; Wraight, C.; Stanley, K. K. TGN38 dipertahankan dalam jaringan trans-Golgi oleh motif yang mengandung tirosin dalam
domain sitoplasma. EMBO J. 1993, 12, 2219-2228. [ CrossRef]
198. Stace, C. L.; Ktistakis, N. T. Protein pengikat asam fosfatidat dan fosfatidilserin. Biochim. Biofis. Acta 2006, 1761, 913-926.
[CrossRef]
199. Jungmichel, S.; Sylvestersen, K. B.; Choudhary, C.; Nguyen, S.; Mann, M.; Nielsen, M. L. Kekhususan dan kesamaan dari
proteome pengikat fosfoinositida dianalisis dengan spektrometri massa kuantitatif. Sel Rep. 2014, 6, 578-591. [
CrossRef]
200. Shinzawa-Itoh, K.; Aoyama, H.; Muramoto, K.; Terada, H.; Kurauchi, T.; Tadehara, Y.; Yamasaki, A.; Sugimura, T.; Kurono, S.;
Tsujimoto, K.; dkk. Struktur dan peran fisiologis 13 lipid integral oksidase sitokrom c jantung sapi. EMBO J. 2007,26
, 1713-1725. [ CrossRef]
201. Contreras, F. X.; Ernst, A. M.; Haberkant, P.; Bjorkholm, P.; Lindahl, E.; Gonen, B.; Tischer, C.; Elofsson, A.; von, H. G.; Thiele, C.;
et al. Pengenalan molekuler dari spesies sphingolipid tunggal oleh domain transmembran protein. Alam 2012, 481, 525-529.
[CrossRef]