Soal HPLC

Soal
Seorang mahasiswa akan menganalisis kandungan vitamin di dalam sediaan tablet
multivitamineral. Metode yang digunakan adalah kromatografi PLC/KCKT.
Prosedurnya adalah :
Sejumlah 20 tablet yang sudah memenuhi keseragaman bobot tablet, bobot rata-rata
tablet adalah 128,4 mg. Setelah semua tablet digerus sampai homogen, menimbang
24,5 mg untuk analisis. Selanjutnya serbuk dilarutkan kedalam labu takar 100 ml, dan
ditambahkan aquabides hingga tanda. Larutan diambil 1,0 ml diencerkan dengan
aquabidest hingga 100 ml. Selanjutnya sebanyak 10 L larutan sampel dan larutan
standar diinjeksikan ke sistem kromatografi HPLC (insrumen sudah dioptimasi). Data
kurva baku dan sampel seperti dibawah ini :

tR
5,8
5,8
5,7
5,7
5,8

tR

Vitamin B-1
C
LA
(g/ml (mV)
)
2
200
4
250
8
325
10
410
12

tR
3,4
3,6
3,3
3,3

Data kurva baku

Vitamin B-2
C
LA
(g/ml (mV)
)
1
90
2
200
3
385
4
340

tR
2,5
2,4
2.6
2.5

Vitamin C
C
LA
(g/10ml (mV)
)
10
300
20
360
30
410
40
590

520
3,5
5
410
2.6
R tabel untuk N=3 adalah 0,87 dengan P=95%

50

670

Data sampel
LA (mV)

2,6

450

5,7

150

3,5

96

Pertayaan:
1. Apakah parameter kualitatif untuk mengetahui senyawa vitamin C,B-1. Dan B-2?
2. Berapa kadar mg/tablet senyawa diatas?
3. Kemasan tertulis vitamin C mengandung 150 mg/tab, vitamin B-1 mengandung
100 mg/tab dan B-2 menandung 15 mg/tab. Syarat FI ED iv mensyaratkan untuk
vitamin C (98-105%), B-1 (97-101%), B-2 (99-101%). Apakah hasil analisis
memenuhi syarat FI?

Jawab
1. parameter kualitatif : tR
2. kadar mg/tablet
langkah pertama membuat kurva regresi linear antara C (g/ml) vs LA (mV)
Vitamin B-1
C
LA
(g/ml) (mV)
2
200
4
250
8
325
10
410
12

Diperoleh hasil
a : 125
b : 30
r : 0,974
y : 30x + 125
selanjutnya cari kadar untuk vitamin B-1 dengan melihat tR nya.
Karna vit B-1 tR rata2nya adalah 5,76 maka LA (Mv) nya = 150

520

y : 30x + 125
150 : 30x +125
25 : 30x
x : 0,833 g/ml
vt B-1 : kadar vit B-1 x jumlah vol x f.pengenceran
sampel
: 0,833 g/ml x 100 ml x 100
24500
: 0,34
Vitamin B-2
C
LA
(g/ml) (mV)
1
90
2
200
3
385
4
340
5

410

Diperoleh hasil
a : 51
b : 78
r : 0,907
y : 78x + 51
selanjutnya cari kadar untuk vitamin B-1 dengan melihat tR nya.
Karna vit B-2 tR rata2nya adalah 3,42 maka LA (Mv) nya = 96

y : 78x + 51
96 : 78x +51
45 : 78x
x : 0,577 g/ml
vit B-2 : kadar vit B-2 x jumlah vol x f.pengenceran
sampel
: 0,577 g/ml x 100 ml x 100
24500
: 0,235

Vitamin C
C
LA
(g/10ml) (mV)
10
300
20
360
30
410
40
590
50

Diperoleh hasil
a : 175
b : 9,7
r : 0,975
y : 175x + 9,7

670

450 : 175x + 9,7

x : 2,516 g/ml
vit C

: kadar vit C x jumlah vol x f.pengenceran

sampel
: 2,516 g/ml x 100 ml x 100
24500
: 1,027

Kadar masing2 pertablet

Vit B-1: 0,34 x 128,4
: 43,656 mg
Vit B-2: 0,235 x 128,4
: 30,174
Vit C
: 1,027 x 128,4
: 131,87
3. kadar dalam kemasan apakah memenuh syarat FI
untuk mencari kadar tiap zat aktif dalam satu tablet
vitamin : kadar x 100%
bobot dalam produk
Vit B-1 : 43,656 x 100%
100
Vit B-2 : 30,1,74 x 100%
15
Vit C

: 131,87 x 100%
150