Perlakuan pra-analisis

Pengambilan Sampel,
Transport, dan Penyimpanan

Untuk mendapatkan hasil yang valid,

dalam melakukan analisis toksikologi
perlu:
{ mengenali:
z
z
z

I MAG Wirasuta

Memberikan variasi/pengaruh pada hasil

analisis
z
z

Variabel biologis
Pengambilan sampel pada kasus Post-mortem
tidak selalu menggambarkan kondisi pada saat
kematian, karena setelah kematian terjadi
perubahan sifat biologis (sel) yang mungkin
berakibat pada redistribusi analit di dalam
tibuh korban:
{ Penurunan permeabilitas sel dapat
menyebabkan difusi analit dari saluran cerna
ke sistem sistemik atau sebaliknya
{ Difusi analit dari jaringan ke cairan
ekstraselular di luar organ

Variabel yang berpengaruh pada

sampel klinik
Variabel

Contoh Pengaruhnya

i) Phisiologi:

Pendukumentasian dengan lengkap

riwayat dari sampel (sumber, tatacara
pengambilan sampel, penyimpanan, dan
penampilan (organoleptis dari sampel)

Variabel yang berpengaruh pada

sampel klinik

Variasi biologi:
{

sifat dan stabilitas dari analit,

Sifat matrik sampel
Kondisi dimana analisis dilakukan

Variabel

Contoh Pengaruhnya

i) Phisiologi:
Age

Markers of bone turnover such as collagen cross-linkages are

increased in childhood

Sex

Sex hormones

Body weight

Urinary creatinine increases with muscle mass

Recent food
intake

Plasma glucose, triglycerides, and so on, increase after a

normal meal. May delay and/or reduce absorption of some
drugs, but increase absorption of others

Diet

Malnutrition or fasting will reduce serum albumin, urea, and

phosphate, amongst other parameters

Circardian
Variation

Some analytes (e.g. cortisol, iron) show diurnal changes in

plasma concentration

Menstrual
cycle

Plasma concentrations of leutinizing hormone (LH), follicle

stimulating hormone (FSH), oestradiol and progesterone vary
with the cycle

Variabel yang berpengaruh pada

sampel klinik
Variabel

Contoh Pengaruhnya

(ii) Sample/analyte variations

Pregnancy

Plasma concentrations of human chorionic gonadotropin (HCG),

oestradiol, and other biochemicals vary throughout pregnancy

Incorrect
specimen

Psychological
changes

Venepuncture or hospitalization may increase plasma

concentrations of stressrelated compounds such as
catecholamines

Value differences between plasma and serum, venous and

arterial blood, random and 24 h urine samples (e.g. potassium
higher in serum than in plasma)

Incorrect
collection

Physiological
changes

Posture may affect measurements such as plasma aldosterone

and albumin. Exercise can change the blood concentrations of
compounds such as lactate

Drugs

Drug treatment may alter concentrations of some plasma

constituents even in apparently healthy subjects (e.g.
trimethoprim increases serum creatinine)

The absence of an appropriate enzyme inhibitor may allow

continued enzyme action such as catabolism of glucose or
neuropeptides.
Failure to acidify urine will decrease urinary catecholamines.
Collection into EDTA will decrease plasma calcium.
Contamination with ethanol, 2-propanol, or other alcohol used
as a disinfectant prior to venepuncture may invalidate ethanol
assay

Haemolysis

Red cell lysis may lead to changes in plasma constituents,

particularly potassium, phosphate, and some enzymes and may
interfere with the analytical method

Cellular
contamination

The presence of platelets following incorrect centrifugation will

apparently raiseplasma serotonin

Variabel yang berpengaruh pada

sampel klinik
Variabel

Penerokan dan Sampel klinik

Contoh Pengaruhnya

(ii) Sample/analyte variations

Incorrect/excess
ive storage

Collection during Collection near to an infusion site will give misleading

infusion
concentrations of the compound being infused or dilute other
blood constituents
Drug treatment

Some compounds may oxidize even when frozen [e.g.

formation of adrenochrome from 5-hydroxyindoleacetic acid (5HIAA)], or be subject to bacterial degradation (e.g. amino acids
in acidified urine)

Kesehatan dan keamanan

z

Drugs or metabolites may interfere in the assay

Jenis sampel klinik

z
z
z
z

Darah
{

Darah arterial:
z

z
z
z
z

umumnya dari pembuluh vena di lengan atas

biasa dikerjakan dengan tube-vacum
beberapa analit basa lemah (seperti trisiklik
antidipresan, paraquat) dapat terikat pada glas,
agar tidak terjadi hemolisis, jika darah diterok
dengan syring, sebaiknya jarum suntik dilepas
ketika mengeluarkan darah dari spuit menuju vial,
dan dibiarkan darah mengalir dengan lambat

Jenis sampel klinik

Blood fluids other blood
{
{

Amniotic fluid (cairan ketuban)

Aqueous humour:
z

{
{
{
{
{
{
{
{
{
{

cairan yang berada diruang antara cornea dan iris mata

Breast milk
Gastric aspirate
Lymph
Peritonial fluid
Saliva
Semen
Synovial fluid
Tears
Vaginal fluid
Vitreous humours
z

the transparent, viscous fluid contained behaind the lens in the

eye

darah dan cairannya

cairan tubuh lainnya selain darah
cairan ekskresi/residu
sampel klinik lainnya

Jenis sampel klinik

Blood and related fluids
{

Blood (whole blood): darah total:

z

harus diambil oleh dokter/perawat yang

berngalaman (pengambilan relativ berbahaya)

Darah vena

menghindari infeksi/penularan penyakit dari

pasien ke analist
diperlukan pelatihan kusus bagi analis dalam
hal sample handling

pengambilan darah dilengkapi dengan antikoagulan, dicampur

dengan darah, kemudian dibekukan (dibawah -20 oC) untuk
tujuan merusak sel sebelum melakukan analisis

Sel darah:

Plasma

z
z

sel darah merah dan sel darah putih

bagian cairan dari darah

Serum
z

cairan kuning muda yang diperoleh ketika darah dibiarkan

membeku (komposisinya umumnya sama seperti plasma tanpa
fibrinogen dan faktor2 pembekuan darah

Cerebrospinal fluid (plasma ultra-filtrasi)

Cord blood

z
z

cairan plasma ultrafiltrasi yang mennyelimuti CNS,

darah yang diperoleh dari umbilical cord (tali pusar)

Jenis sampel klinik

Exxretory fluids/residues
{
{

Bile (empedu)
Exhaled (expired) air:
z

{
{
{

umumnya mengandung sedikit oksigen

dan lebih dominan CO2, uap air, dan
metabolit-volatile

Feaces
Sweat
Urine

Jenis sampel klinik

Tatacara pengambilan sampel toksikologi

Other samples
{
{
{
{
{
{

organ
rambut
nasal swabs
oral fluid
isi perut
Muntahan

Penyimpanan dan pengawetan sampel

{

Sampel disimpan dalam wadah (botol) yang

tertutup rapat, dilack (sealed) untuk mencegah
tumpah/bocornya sampel.
z
z

Secara umum sampel biologi harus disimpan pada

suhu 4 oC sebelum diserahkan ke Lab
z

Disimpan dalam tas plastik yang terpisah

Setiap wadah harus dilengkapi dengan identitas
yang jelas
kecuali (padatan yang tidak mudah rusak, spt:
rambut, kuku)

Cairan biologi yang disimpan dalam waktu lama

umumnya disimpan di bawah suhu 20 oC.
z

pada kondisi ini biasanya analit dan materi biologi

berada dalam keadaan stabil

Tatacara pengambilan sampel toksikologi

Pengambilan sampel dikerjakan oleh yang

berkompeten, dengan tatacara yang sudah ditetapkan
dalam prosedur
Sampel ditempatkan dalam wadah yang tepat untuk:

z
z
z
z

menjaga orisinalitas
mencegah kontaminasi antar sampel
mencegah kontaminasi/pengambilan analit oleh wadah
pelabelan sampel dilakukan untuk mencegah tertukarnya
sampel (menjaga Chain of costudy)

Penyimpanan sampel meliputi:

z
z
z

penyimpanan sampel dari tempat sampling menuju lab

penyimpanan sampel di Laboratorium
bertujuan untuk mencegah terjadinya penguraian analit /
matrik sampel yang dapat menggangu proses analisis
atau memberikan hasil analisis yang kurang tepat

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan

Persyaratan penerimaan barang bukti

A. Persyaratan administrasi

surat permintaan pemeriksaan dari penyidik POLRI atau dari

dokter forensik (tanggal dari LP sampai permintaan tidak lebih
dari tujuh hari dan tanda tangan penyidik minimal Kanit/Kepala
Unit) jika berita acara penyitaan lebih dari satu maka surat
permintaan harus ada dan sesuai untuk masing-masing barang
bukti, sesuai nama.
laporan polisi dari satuan kepolisian yang menangani kasus
secara terinci, tidak ada coretan, stempel asli.
berita acara penyitaan barang bukti, stempel asli
berita acara penyisihan (penyisihan sebagian barang bukti
yang dikirim ke laboratorium) dan pengambilan barang bukti
berita acara pembungkusan harus sesuai dengan barang bukti
yang dikirim dan penyegelan barang bukti dari penyidik
berita acara penahanan (asli, ditandatangani oleh tersangka)
laporan kemajuan dilengkapi bila barang bukti berupa cairan
tubuh.
berita acara pengambilan sampel urine atau darah

z
z
z
z
z
z
z

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
Persyaratan penerimaan barang bukti
B. persyaratan teknis (Materi biologi)
z

z
z
z

Pengambilan urin minimal 50 mL dalam 1 botol dan langsung

disimpan dalam kulkas ( 4C) sedangkan untuk sampel darah
paling sedikit 10 mL atau serum 5 mL untuk setiap jenis
pemeriksaan.
Urin ditampung dalam pot urin disposible dari bahan yang tidak
mudah pecah dan tidak bereaksi dengan sampel urine / inert,
hindari wadah plastik dan tutup karet karena senyawa non polar
mudah diabsorpsi oleh bahan tersebut.
Pengambilan darah sebaiknya minta bantuan tenaga
medis/dokter atau para medis/mantri kesehatan
Sampel darah dalam tube diberi anti koagulan/ Na sitrat
Wadah tempat spesimen harus tertutup baik, tersegel dan
pastikan tidak bocor. Beri label yang harus menempel pada
wadah urine tidak pada tutupnya serta pastikan integritas
sampel.

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
Persyaratan penerimaan barang bukti
z

persyaratan teknis (bukan Materi biologi)

{
{

{
{

surat permintaan pemeriksaan dari penyidik POLRI atau dari barang

bukti sesuai rincian tercantum berita acara pembungkusan /
penyegelan.
berupa tanaman lengkap/bagian dari tanaman (daun, bunga, biji),
semua dikirim ke laboratorium
Bila berupa sediaan Farmasi (tablet, kapsul, ampul), maka BB
dikelompokkan sesuai dengan bentuk sediaan dan sesuai dengan
nama obat
Bila berupa wadah sediaan farmasi (botol, vial, usahakan yang masih
ada sisa obat jangan dibuang)
Bila berupa peralatan medis atau bahan-bahan sisa penggunaan
(spuit, sisa puntung rokok, abu rokok ), BB dikumpulkan secara
terpisah.
Bila berupa larutan dari satu wadah, jika memungkinkan pipet 10 mL
sampel untuk pemeriksaan; bila dari beberapa wadah, kelompokkan
menurut nomor lot atau karakteristik yang sama, ambil dengan
rumus :Sampel = jumlah total wadah dalam satu karakteristik, dari
setiap wadah ambil 10 mL.

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
Persyaratan penerimaan barang bukti
{
persyaratan teknis (Materi biologi)
z

Label berisikan informasi paling sedikit meliputi:

{
{
{
{
{

z
z
z

*
*
*
*
*

register barang bukti

:
Nama
:
Tanggal dan waktu pengambilan sampel :
Nama petugas pendamping pengambilan sampel/supervisi:
Jenis sampel:

Pengambilan sampel harus di supervisi dan disaksikan oleh petugas yang

berwenang serta terlatih.
Kebutuhan fasilitas kamar mandi/WC untuk tujuan pengambilan urin
harus sudah disediakan sebelum pengambilan urin
Ruangan untuk pengambilan sampel terutama urin harus diperiksa
apakah terdapat zat/barang yang dapat mengurangi validitas hasil
pemeriksaan. Hasil yang tidak tepat juga dimungkinkan bila ada
penambahan zat-zat tertentu pada sampel misalnya dengan
menambahkan cuka, asam askorbat, jus lemon/jeruk nipis,
deterjen/sabun, garam dapur, tetes mata/hidung, pemanis (sakarin),
pemutih pakaian; atau juga dengan cara minum banyak, penggunaan
diuretik, penambahan air pada sampel atau mengganti dengan sampel
lain.

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
Persyaratan penerimaan barang bukti
z

Pengemasan barang bukti :

{
{

BB dikemas dalam wadah yang baik, tidak bocor dan

tersusun rapi serta dibungkus dengan baik dan berlak
segel. Label sampel harus dipasang di wadah bukan di
tutup wadah sampel. Ini akan mencegah
perubahan/penukaran label secara sengaja atau tidak.
Permintaan pemeriksaan untuk mendukung penyidikan
harus diajukan oleh penyidik dari instansi yang berwenang.
Yang dimaksud dengan instansi yang berwenang adalah :
z
z
z

2.Penanganan Barang Bukti Di Laboratorium

(Pra Analisis)

z
z
z
z

z
z
z

{
{

Pengiriman barang bukti :

Darah dan Urin : jangka waktu setelah pengambilan
sampel darah/urin sampai dengan diterima di
laboratorium haruslah tidak melebihi 24 jam,
sampel disimpan dalam suhu dingin / 0C atau
dalam termos dingin yang diberi ice pack selama
pengiriman.

Polri
POM TNI
PPNS

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
z

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan

Petugas laboratorium yang menerima barang

bukti adalah petugas yang ditunjuk khusus dan
telah mengerti prosedur penerimaan barang bukti.
Pengecekan persyaratan penerimaan barang bukti
(persyaratan teknis dan administrasi)
Registrasi barang bukti
Dokumentasi barang bukti (foto), sebelum dan
sesudah barang bukti dibuka pembungkusnya
Simpan barang bukti di dalam lemari pendingin
(freezer), apabila analisis tertunda belum sempat
dianalisis segera.
Penyisihan barang bukti sebelum dilakukan
analisis
Analisis barang bukti
Interpretasi hasil analisis

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Penyidikan
2.Penanganan Barang Bukti Di Laboratorium (Pra
Analisis) (lanjutan)
z
z
z

z
z

Membuat berita acara pemeriksaan laboratorium

kriminalistik.
Kerahasiaan hasil pemeriksaan
Setiap informasi tentang donor sampel dan hasil analisis
harus tetap terjaga kerahasiaannya. Laporan harus
diberikan hanya kepada petugas yang berwenang.
Keamanan tenaga laboratorium
Semua petugas yang berkaitan dengan pengambilan,
pengiriman dan terutama pemeriksaan sampel harus
mengetahui dan mentaati prosedur keamanan kerja
seperti pemakaian sarung tangan dan alat perlindungan
diri lain terutama dengan adanya penyakit seperti
hepatitis dan AIDS.
Laporan Pemeriksaan pada Permintaan Kepentingan
Penyidikan & Penegakan Hukum

PERSYARATAN ADMINISTRASI
DAN TEKNIS
Diagnosis & Terapi
{

Ada komunikasi yang baik antara tenaga

medis/dokter dengan analis laboratorium.
z

Penyiapan Sampel

Tenaga medis memberi informasi yang mengenai

riwayat keracunan pasien, zat toksik yang dicurigai,
permintaan pemeriksaan laboratorium yang lengkap
untuk keperluan administrasi.

Tenaga medis memberi sampel yang adekuat

untuk dianalisis dan mengambil sampel dengan
cara yang benar.
Pengiriman sampel harus dilakukan segera dan
dokter harus memastikan dipastikan bahwa
sampel telah diambil secara benar.

Diagram skematis langkah

analisis

Tujuan sampel preparasi

Metode preparasi sampel

Modes of sample preparation

Direct analysis/on-line sample preparation

Preparasi sampel sampai analisis analit dilakukan dalam

suatu untaian alur yang tidak terputus

Alkohol/Senyawa volatile dalam materi biologi dengan

GC: Sampel + Internal standard larut air sampel
ditempatkan dalam baki sampling automatis dengan
metode head space sampling analit langsung
ditetapkan

Protein preciptation

Umum dilakukan pada analisis plasma/darah

Efisiensi pengendapan diperlukan untuk menghindari
masalah dalam analisis selanjutnya
Hilangnya

Microdiffusion

Modes of sample preparation

Headspace and purge-and-trap

analysis

Modes of sample preparation

Modes of sample preparation

- LLE

Liquidliquid extraction

Modes of sample preparation

- LLE

Modes of sample preparation

- LLE
Theory of pH-controlled LLE

Fungsi dari:
pH fase air
pKa / pKb analit
Keofisien distribusi analit antara fase
air/organik (F)

Modes of sample preparation

- LLE

APC appearance partition coefficient

analytic

Modes of sample preparation

- LLE

Modes of sample preparation

- LLE

Modes of sample preparation

- Ion-pair extraction

Analit diekstraksi dalam bentuk

pasangan-ion-nya menuju fase organik

Modes of sample preparation

Modes of sample preparation

Liquidliquid extraction columns

Solid-phase extraction

Solid-phase microextraction

Modes of sample preparation

Modes of sample preparation

Liquid-phase microextraction

Supercritical fluid extraction

Measurement of non-bound
plasma concentrations

Hydrolysis of conjugated
metabolites
Incubation with strong mineral acid, such as an

equal volume of 5 mol L-1 hydrochloric acid

(1530 min, 100 .C at atmospheric pressure, or
in a microwave or pressure cooker), is cheap
and gives rapid, but non-selective, hydrolysis of
conjugates.
In contrast, incubation with -glucuronidase
(EC 3.2.1.31) and/or arylsulfatase (EC 3.1.6.1)
(15 h, 35 .C) can give selective hydrolysis of
conjugates under relatively mild conditions.

Extraction of drugs from tissues

Derivatization