ANALISIS SEMEN

DAN
UJI FUNGSI SPERMA

DR. Restu Syamsul Hadi,M.Kes

PENDAHULUAN
Infertilitas merupakan masalah klinis
yang berpengaruh terhadap :
- Aspek kesehatan
- Psikososial
Statistik infertilitas :
15 % pasangan di AS
25 % faktor pria
(al.Oksidative Stress,kerusakan DNA)

Pada kasus infertilitas dijumpai :

- banyak sperma mengalami kerusakan DNA
- penurunan laju fertilisasi
- penurunan kualitas embrio
(Makker et al., 2009.Indian J.Med Res 129:357-367).

Ada korelasi positif :

Infertilitas pria dengan jumlah apoptosis sperma
(Wang et al.,2003. Fertil Steril. 80: 531 -535 ).

Table
The causes of infertility and their approximate frequency
(adapted from Hull et al 19853)
Cause
Sperm defects or dysfunction

Frequency (%)
30

Ovulation failure (amenorrhoea or

oligomenorrhoea)

25

Tubal infective damage

Unexplained infertility

20
25

Endometriosis (causing damage)

Coital failure or infrequency

Cervical mucus defects or dysfunction

Uterine abnormalities (such as fibroids or

abnormalities of shape)

(<1)

Hull et.al 1985. British Medical Journal 16931697

..gangguan fungsi sperma merupakan penyebab terbesar infertilitas
pada manusia dan dijumpai sekurangnya 50% kasus infertilitas klinis

Analisa Dasar Semen

MAKROSKOPIK SEMEN

MIKROSKOPIK SEMEN

Volume
Warna
Bau
pH
Viskositas

Motilitas
Viabilitas
Morfologi
Densitas

Tujuan Analisa Semen

untuk mengetahui tingkat kesuburan
seorang pria melalui pengukuran :
- Jumlah semen
- Kualitas semen, yang dihasilkan
- Membantu mengatasi masalah infertilitas

Human Semen
Semen can be divided into 4 fractions:
1. Pre-ejaculatory secretion from urethral and
bulbourethral gland (no sperms)
2. Dilute fluid from prostate gland (no sperms)
3. Major portion of sperms from vas deferens and distal
epididymis (volume 5%)
4. Seminal vesicle secretion (few sperms)

Fraction 1, 2, 3 made up of the first portion of the

ejaculate (30% of total volume).

Analisa Dasar Semen

MAKROSKOPIK SEMEN

MIKROSKOPIK SEMEN

Volume
Warna
Bau
pH
Viskositas

Motilitas
Viabilitas
Morfologi
Densitas

Cara koleksi semen

Abstinensi (tidak dikeluarkan)

min. 2 hari max.7 hari
Transportasi < 1 jam
Suhu simpan 20-40 oC
Semen mengalami likuifaksi (mencair
15-20 menit

Methods of collection
1.
2.
3.
4.

Masturbation (the method of choice for all seminal fluid

tests).
By condom: it is not recommended for fertility testing
because the condoms may contain spermicidal agents.
By coitus interrupts: (withdrawal method).
TESA: Testicular sperm extraction (TESE)- Open Testicular
Biopsy: is a highly invasive, open surgical procedure
performed under general anaesthetic. The scrotum and
testes are cut open, before testicular tissues are cut away and
examined for sperm, which, if present can be extracted.

PEMERIKSAAN MAKROSKOPIK

Berdasarkan volume semen :

Aspermia,
jika dia tidak mengeluarkan semen
sewaktu ejakulasi.
hipospermia,
jika volume semennya kurang dari 1 mL.
hiperspermia,
jika volume semen lebih dari 6 mL.
Rata-rata volume semen pria Indonesia,
sekitar 2-5 mL.

Warna Semen
Semen yang normal berwarna putih
keruh/putih mutiara.
Adanya warna putih kekuning-kuningan
kemungkinan adanya leukosit -infeksi
Warna kemerah-merahan dapat
disebabkan adanya pendarahan saluran
reproduksi pria.

pH Semen

Semen normal : pH antara 7,2 8.

pH 7,8 dicurigai adanya infeksi.
pH 7 pada semen azoospermia,
kemungkinan terjadi disgenesis pada
vas deferens, vesika seminalis atau
epididimis.

VISKOSITAS SEMEN
Semen dengan konsistensi tinggi,
kecepatan gerak sperma
akan terhambat.
Semen yang terlalu encer,
jumlah spermanya rendah.
Kedua-duanya dapat menyebabkan
kesuburan pria berkurang.

PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK
SEMEN
Motilitas Sperma
-Katagori a, spermatozoa bergerak cepat
dan lurus ke depan.
-Katagori b, gerak lambat/sulit maju lurus
atau bergerak tidak lurus
-Kategori c, tidak bergerak maju
(bergerak ditempat)
-Kategori d, spermatozoa tidak bergerak
sama sekali

DENSITAS/JUMLAH SPERMA
konsentrasi spermatozoa :
Jumlah sperma terhitung
dalam bidang X
5 X 10.000 (faktor multiplikasi) X
faktor pengencer

Jika sperma terhitung 40

maka konsentrasi sperma adalah :
40 x 5 x10.000 x 20 = 40 juta/ml

SUMBER :
http://www.vivo.colostate.edu/hbooks/pathphys/reprod/semeneval/hemacytometer.html

SAMPLING

1 mm : 4 = 0,25 mm, .luas = 0,25 x 0,25

= 0,0625 mm2

1 mm

1 mm : 5 = 0,2 mm, .luas = 0,2 x 0,2

= 0,04 mm2
0,2 mm : 4 = 0,05 mm.luas = 0,05 x 0,05
= 0,0025 mm2

Berapa
jumlah sel ?

SOAL:
Semen pasien diperoleh setelah ejakulasi sebanyak 3 ml, diambil 0,1 ml, diencerkan dengan
penambahan pelarut sebanyak 9,9 ml.
(0,1 ml : 10 ml = 0,01pengenceran 100 x)
Sampel dihitung dengan hemositometer pada kotak bagian tengah yaitu sebanyak 5 kotak kecil
dari 25 kotak, diperoleh sebanyak 130 sel.
Berapa densitas sperm pasien?
Berapa total sperma pasien per-ejakulatnya?
JAWAB :
Jumlah sel per area : 130 x 5 = 650 sel
Pengenceran
: 100 x
Faktor pengali
: 10.000 = 104
Densitas sperma = 130 x 5 x 100 x 104
= 650 x 106
= 6,5 x 108 sel/ml (650 juta sel/ml)
Jumlah sel per ejakulat = 6,5 x 3 ml x 108 sel/ ejakulat
= 19,5 x 108 sel/ejakulat
= 1,9 x 109 sel/ejakulat (1,9 miliar sel/ ejakulat)

SPERMATOZOA

MIKROSKOPIS (lanjutan)
Viabilitas Sperma
Spermatozoa hidup atau spermatozoa mati.
Pewarnaan supravital yaitu Eosin Y.
dicampurkan satu tetes (10 15 mikroliter) semen segar dengan satu
tetes larutan Eosin 0,5 % pada kaca obyek kemudian ditutup dengan
gelas penutup
Setelah 1 2 menit diamati dengan menggunakan mikroskop biasa atau
beda fase dengan pembesaran 400 X

Mikroskop cahaya,
spermatozoa mati berwarna merah
spermatozoa hidup tidak berwarna

Interpretation - WHO Criteria (1999)

Seminal parameter

Normal Value

Volume

> 2 ml

pH

> 7.2

Sperm concentration

20 million / ml

Motility

50 % a+b

Morphology

15 % (10 %)

ASAB

< 50 %

White blood cells

< 1million / ml

Interpretation - Terminology

Sperma dapat dikelompokkan menjadi :

Polyzoospermia : konsentrasi sperma sangat tinggi
Oligozoospermia : jumlah sperma 20 juta / mL
Hypospermia: volume semen 1,5 mL
Hyperspermia
: volume semen 5,5 mL
Aspermia
: tidak ada semen

Pyospermia : semen ditemukan adanya

leukosit
Hematospermia : semen ditemukan eritrosit
Asthenozoospermia: motilitas sperma 40%
Teratozoospermia : 40% sperma abnormal
Necrozoospermia : tidak ada sperma yang
hidup
Oligoasthenozoospermia: motilitas 8 juta
sperma / mL

Morfologi Sperma

Morfologi sperma abnormal :

-Kepala besar (macrocephalic)

atau kecil (microcephalic), bentuk
seperti tetesan air mata, bundar, tak
berbentuk, ganda
-Leher, midpiece rusak (defect): tebal,
patah, tipis atau asimetris
-Ekor rusak

Morfologi sperma normal :

-Kepala oval
-Leher, midpiece utuh
-Ekor tunggal

Uji Integritas Membran

Uji integritas membran dilakukan dengan
menggunakan Hypoosmotic Swelling Test /
uji HOS, yaitu suatu uji untuk menilai
integritas membran sperma yang terpapar
dalam suatu larutan (medium) hipotonik.

Hasil uji HOS yang menunjukkan

HOS(+) lebih dari 60%
di dalam semen, kelangsungan
hidup sperma akan lebih lama
di banding dengan semen pada hasil uji
HOS (+) kurang dari 60%.

Uji HOS (lanjutan)

Penetrasi getah serviks

Alat untuk penetrasi sperma yang terdiri dari tabung kapiler dan kaca
penetrasi
Ambil satu tetes semen dengan ependorf tipe blue dan teteskan pada
reservoir
Ambil getah serviks dengan pipet dan masukkan ke dalam tabung kapiler
dengan perlahan
Tutup/sumbat tabung reservoir yang telah diisi sperma dengan
menggunakan plastisin(lilin) dan taruh perlahan
Diinkubasi selama kurang lebih 2 jam
Setelah cukup waktunya dilihat dengan menggunakan skala penetrasi akan
terlihat pergeseran sperma yang ada di dalam tabung kapiler

UJI FUNGSI SPERMA

Semen/ejakulat akan melewati cervix, kemudian uterus, dan

masuk ke oviduct
Sperma akan berenang menembus lapisan pada ovum yang
dikelilingi oleh (cumulus dan corona), dan zona pellucida
Sperma akan bereaksi ketika bagian kepala sperma
menyentuh zona pellusida (acrosome reaction)

REAKSI AKROSOM

Spermatozoa dengan pewarnaan simplified triple stain technique.

1.Sperma hidup, rewaksi akrosom
2.Sperma mati akrosom utuh
3. Sperma mati, rekasi akrosom degenerativ
4. Sperma hidup, akrosom utuh
5 dan 6. Sperma hidup akrosom utuh

Teknik pewarnaan Triple

(Trypan blue, bismark brow, bengal rose)

1. Sperma mati dengan reaksi akrosom (-)

(Post Acrosom kehitaman, acrosom merah muda)

2. Sperma mati dengan reaksi akrosom (+)

(Post Acrosom kehitaman, acrosom putih)

3. Sperma hidup dengan reaksi akrosom (-)

4. Sperma hidup dengan reaksi akrosom (+)
Perhatikan : bagian akrosom
(warna putih/merah muda)
dan post acrosom
(biru kehitaman, coklat muda)

What increases a man's risk of infertility?

High temperature of testicles (testes). Sperm are made in the testes which
are in the scrotum. This is the body's way of keeping the testes slightly cooler
than the rest of the body, which is best for making sperm.
Smoking can affect the sperm count. If you smoke, you should stop
completely for optimum sperm production.
Alcohol: equivalent eight pints of normal strength beer or sixteen small
glasses of wine, may interfere with optimum fertility.
Medicines and drugs. Most do not interfere with sperm production but some
may do. These include: tetracyclines, , colchicine,allopurinol.

 Solusi Infertilitas ? Teknologi Fertilisasi Berbantuan/ assisted reproductive

technology (ART)?
The different types of assisted reproductive technology (ART)?
1.

2.

3.
4.

In vitro fertilization (IVF) means fertilization outside of the body. IVF is the most
effective ART. It is often used when a woman's Fallopian tubes are blocked or when a
man produces too few sperm.

Zygote intrafallopian transfer (ZIFT): is similar to IVF. Fertilization occurs in the

laboratory. Then the very young embryo is transferred to the Fallopian tube instead
of the uterus.
Gamete intrafallopian transfer (GIFT) involves transferring eggs and sperm into the
woman's Fallopian tube. So fertilization occurs in the woman's body.
Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) is often used for couples in which there are
serious problems with the sperm. Sometimes it is also used for older couples or for
those with failed IVF attempts. In ICSI, a single sperm is injected into a mature egg.
Then the embryo is transferred to the uterus or Fallopian tube

ZIFT

Sekian, Wassalam