1. Prinsip penentuan kadar iodium dan Prosedur kerja ?

2. Jelaskan tentang indeks diastase, prinsip penentuan dan prosedur kerja penentuan ?
3. Sebutkan komponen utama protein plasma. Prinsip pemisahan protein, prosedur prinsip
penentuan protein plasma ?

Jawaban :

1. Penentuan kadar iodium ialah melalui 2 mekanisme reaksi yaitu :

a. Pembebasan iodin bebas dari garam
Penambahan H2SO4 membebaskan iodin bebas dari iodat dalam sampel garam. KI
berlebih ditambahkan untuk membantu melarutkan iodin bebas, yang tidak larut
dalam air murni dalam kondisi normal.
b. Titrasi iodin bebas dengan tiosulfat
Iodin bebas digunakan oleh natrium tiosulfat pada tahap titrasi. Jumlah tiosulfat
yang digunakan adalah sebanding dengan jumlah iodin bebas yang terbebas dari
garam. Zat tepung ditambahkan sebagai indikator external (tidak langsung) dari
reaksi ini dan bereaksi dengan iodin bebas untuk menghasilkan warna biru. Bila
ditambahkan menjelang akhir titrasi (yaitu, ketika hanya sejumlah kecil iodin
bebas yang tersisa) hilangnya warna biru, atau titik akhir, yang terjadi dengan
titrasi lebih lanjut, menunjukkan bahwa semua iodin bebas yang tersisa telah
digunakan oleh tiosulfat.

Prosedur Kerja
1. Garam dengan berat 10 g, diisi pada Erlenmeyer
2. Larutkan garam dengan 30 ml air suling
3. Tambahkan dengan air suling sampai volume akhir adalah 50 ml
4. Tambahkan dengan 1 ml 2 N H2SO4
5. Tambahkan dengan 5 ml KI 10%. Jika garam tersebut mengandung iodin, warna
larutan akan berubah menjadi kuning
6. Tutup Erlenmeyer dan simpan pada tempat yang gelap sekitar 10 menit
7. Titrasi dengan larutan natrium tiosulfat (Na2S2O3) sampai warnanya menjadi kuning
pucat
 8. Tambahkan dengan sekitar 2 ml larutan zat tepung, warna akan berubah menjadi
ungu tua.
9. Lanjutkan titrasi sampai warna menghilang
10. Volume Na2S2O3 yang digunakan dibandingkan dengan tabel untuk menghitung
konsentrasi iodin

Catatan:
1. Penambahan zat tepung ketika warna larutan adalah kuning pucat
2. Kondisi reaksi harus di bawah 30C karena iodin adalah zat uap

2. Indeks Diastase merupakan jumlah urin yang paling sedikit yang dapat mencerna 2 mL
larutan amilum 10 % pada 37oC dalam waktu 30 menit.

Prinsip penentuan :
Pada beberapa larutan yang mengandung volume zat tepung terlarut yang sama,
tambahkan dengan konsentrasi amilase, pada suhu 37C, selama 30 menit, amilase akan
menguraikan zat tepung menjadi erythrodexin. Pada konsentrasi terkecil, amilase dapat
menguraikan zat tepung menjadi erythrodexin yang disebut indeks diastase. Dalam
percobaan ini kita menggunakan urin sebagai sumber amilase (diastase).

Prosedur Kerja :
1. Semua pipet yangdigunakan, harus ditutupi dengan kapas
2. Siapkan 10 tabung, memberikan nomor dari 1-10
3. Memasukkan urin ke dalam tabung dengan volume yang berbeda pada setiap tabung,
tambahkan dengan air sampai volume akhirnya adalah 1 ml
Catatan:
- Tabung 1-5 isi dengan urin encer (1:10)
- 6-10 tabung isi dengan urin tanpa pengenceran
4. Campur, inkubasi semua tabung dalam water bath 37C selama 30 menit dengan tepat
5. Dinginkan di air 5 menit untuk menghentikan reaksi
 6. Tambahkan 1 tetes larutan iodin ke dalam setiap tabung, campur dan lihat perubahan
warna
7. Ketika warna hilang, tambahkan dengan 1-2 tetes larutan iodin lagi
8. Tabung yang terlihat berwarna pink (bukan biru atau ungu) yang mengandung
amilase cukup di tambahkan 2 ml larutan zat tepung 0,1% untuk diubah menjadi
erythrodextrin
Indeks Diastase Urine (d 37 / 30 ') = Volume terkecil dari urin yang di tambahkan 2
ml larutan zat tepung 0,1% pada 37C selama 30 menit

HASIL
- Indeks diastase dalam urin normal = 5-20
- Dalam beberapa penyakit pankreas, peningkatan nilai mungkin lebih dari 200.

Catatan:

- Ketika nilai yang terlalu tinggi, eksperimen harus diulang lagi dengan urin encer.
- Bila sebelum 30 menit, larutan telah berubah menjadi merah muda; sampel harus
dienceran juga.

3. Komponen Plasma
Plasma darah terdiri dari sekitar 91% air, senyawa organik 8%, dan 1% zat
anorganik. Tiga protein plasma utama adalah albumin, globulin, dan fibrinogen. Plasma
darah terdiri dari sekitar 91% air, senyawa organik 8%, dan 1% zat anorganik. Senyawa
organik terutama protein, dan plasma umumnya digambarkan sebagai larutan koloid
protein dalam air. Tiga protein plasma utama adalah albumin, globulin, dan fibrinogen.
Dalam 100 mililiter (3,3 oz) dari plasma, konsentrasi perkiraan protein ini adalah 4,5
gram (0,16 oz) albumin, 2,5 gram (0,08 oz) globulin, dan 0,3 gram (0,01 oz) fibrinogen.

Prinsip pemisahan Protein

Elektroforesis pada tegangan rendah paling baik digunakan untuk pemisahan
molekul besar (WM> 1000) seperti peptida, protein dan asam nukleat. Pemisahan
semalam rendah senyawa dengan berat molekul biasanya miskin karena difusi yang
berlebihan, sehingga senyawa asam amino tersebut sebaiknya diselesaikan pada tegangan
tinggi. Ada berbagai aplikasi elektroforesis dalam bidang kedokteran dan biokimia klinis,
dan salah satu contohnya adalah analisis protein serum untuk kehadiran normal konstitusi
dan perubahan dalam ransum, globulin albumin dalam penyakit.

Prosedur prinsip penentuan protein plasma

1. Melembabkan strip selulosa asetat (10x2,5 cm) dengan menempatkannya pada

permukaan buffer dalam piring datar dan memungkinkan buffer soal untuk naik dari
bawah
2. Benamkan strip sepenuhnya dengan lembut goyang hidangan, lalu keluarkan dengan
forsep
3. Keringkan strip, kemudian tempatkan di sumbu kertas
4. Beralih pada saat ini dan menyesuaikan diri dengan 0,4 mA per sentimeter lebar strip
5. Oleskan beruntun serum / plasma dari katoda. Hal ini paling baik dilakukan dengan
membimbing aplikasi dengan penggaris ditempatkan di tangki
6. Melakukan elektroforesis untuk 1,5-2 jam
7. Keluarkan strip dan warnai dengan Ponceau S selama 10 menit. Sebelum pemanasan
tidak diperlukan di sini sejak TCA perbaikan protein untuk pewarnaan. Hapus
pewarna kelebihan dari strip dengan mencuci berulang kali dalam asam asetat 5%
sampai latar belakang akan dihapus
8. Biarkan kering dan memeriksa pola yang diperoleh