A.

REGULASI SIKLUS SEL MITOSIS PADA EUKARIOTA

Pada sel yang sedang tumbuh dan berkembang, membran sel dan sebagian besar
komponen yang ada di sitosol akan mengalami peningkatan dalam hal ukuran dan kuantitas.
Ketika sel mencapai masa kritis maka sel akan mengalami pembelahan dan menghasilkan dua
progeni yang berukuran lebih kecil. Pada kondisi yang sesuai, sel-sel ini akan mengalami
pertumbuhan dan akan membelah. Dalam pembelahan sel ada 2 hal yang penting yaitu materi
genetik harus digandakan dan dua salinan dari materi genetik akan diturunkan pada
keturunannya. Semua sel memiliki siklus sel yang berfungsi untuk mengoordinasi berbagai
aktivitas sel melalui berbagai mekanisme. Jadi ada pengaturan tersendiri untuk sel dapat
memulai replikasi DNA dan waktu sel untuk memulai kondensasi kromosom saat mitosis.
Siklus pembelahan sel dapat dipelajari pada Sacharomycess cerevisae dan pembelahan
embrio pada Xenopus laevis. Dalam proses tersebut menunjukkan ada 2 proses yang dapat
membuat sebuah sel dapat melanjutkan ke tahap siklus sel selanjutnya. Tahap pertama, yaitu
tahap awal yang terjadi di dekat akhir fase G1. Pada tahap awal, sel akan memulai sintesis DNA
dalam waktu yang singkat pada awal fase S pada siklus sel. Sedangkan pada tahap kedua, sel
akan melanjutkan prosesnya melalui adanya kondensai pada kromosom dan pemisahan kromatid
saat terjadi mitosis, dan hal ini terjadi pada awal fase M pada siklus sel. Sebuah faktor mitosis
yang disebut MPF telah ditemukan pertama kali pada Xenopus. Ketika MPF disuntikkan ke oosit
Xenopus, maka MPF akan merangsang oosit untuk memasuki fase M. Hal ini dikarenakan di
dalam MPF ternyata mengandung dua komponen yang sangat penting yaitu
(1) Adanya protein yang disebut siklin yang mengalami siklus sintesis dan akumulasi selama G1
dan G2 dan degradasi selama M fase.
(2) adanya pp34 dimana pp merupakan phosphoprotein yang merupakan sebuah protein yang
memiliki gugus fosfat pada rantai samping asam amino tertentu, dan memiliki berat molekul
sebesar 34.000 bobot molekul). PP34 ini merupakan produk dari gen Cdc2 S. pombe dan
CDC28 gen S. cerevisiae. Adanya pp34 ini akan terlibat dalam awal fase M.

B. KOMUNIKASI ANTAR SEL PADA EUKARIOTA MULTISELULER

Semua pertumbuhan yang ada di dalam tubuh jarus dikoordinasikan secara benar
sehingga dalam proses pembelahan sel harus dikontrol secara tepat dan harus mengikuti
peraturan oleh adanya sinyal-sinyal tertentu dalam suatu organ ataupun jaringan. Setiap jaringan
yang ada di dalam organ dan setiap organ yang ada di dalam tubuh organisme harus tumbuh
dengan ukuran yang tepat.
Pembelahan sel berada di bawah kontrol genetik. Jadi ada gen tertentu yang mengatur
proses pembelahan sel dalam menaggapi respon intraseluler, antarsel dan sinyal lingkungan. Gen
pengatur ini juga dapat dipengaruhi oleh mutasi. Adanya mutasi dapat menghilangkan fungsi gen
regulator sehingga dapat menyebabkan pembelahan sel yang abnormal, baik kemampuan untuk
membagi sama sekali atau ketidakmampuan untuk berhenti membelah.
Pembelahan sel pada hewan dikendalikan oleh suatu kontrol genetik. Akan tetapi saat ini
telah ditemukan adanya virus gen yang disebut dengan oksogen yang dapat menyebabkan
hilangnya kontrol pembelahan sel secara normal. Selain itu juga terdapat suatu protookogen pada
sel normal yang dapat berubah menjadi onkogen selular tumor. Hal ini dikarenakan adanya
mutasi pada suatu gen atau urutanurutan baru pada proses rekombinasi. Pada fungsi sel yang
normal, protoonkogen memiliki mekanisme tertentu untuk mengontrol pembelahan sel.

C. SEL-SEL KANKER: KEHILANGAN KONTROL PEMBELAHAN SEL

Kanker merupakan golongan penyakit yang diakibatkan adanya pertumbuhan dan
pembelahan sel yang tidak terkendali. Dalam suatu sistem jaringan nonsirkulasi, pertumbuhan
sel yang tidak terkendali tersebut akan menghasilkan tumor. Dalam hal ini ada kanker atau tumor
ganas dan kanker atau tumor jinak. Pada kanker atau tumor ganas adalah sel-sel yang dapat
berpisah dan bermigrasi ke bagian tubuh yang lain. Tumor atau kanker ganas akan mengalami
metastasis. Hal ini berbeda dengan kanker atau tumor jinak yang tidak dapat bermetastasis.

D. TUMOR- INDUKSI VIRUS : VIRUS ONKOGEN

Pada retrovirus menyimpan informasi genetik dalam bentuk genom RNA tunggal dan
kemudian dapat diubah menjadi bentuk DNA homolog yang memiliki double strain setelah virus
berhasil menginduksi sel inang. Dengan demikian disini terjadi pembalikan informasi genetik
yang biasanya dari DNA ke RNA. Namun adanya retrovirus ini informasi genetik menjadi dari
RNA ke DNA pada saat transkipsi. Dalam peristiwa ini retrovirus akan mengkode enzim yang
spesifik yang disebut dengan reverse transkriptase yang dapat mengkatalisis sintesi urutan DNA
homolog dengan menggunakan molekul RNA sebagai template.
 Pada genom virus tumor DNA seperti polyomavirus, SV40 dan adenovirus juga
mengandung onkogen yang mampu menginduksi pertumbuhan sel yang tidak terkendali. Namun
dalam onkogen virus DNA ini telah terbukti lebih sulit untuk dipelajarai daripada retrovirus
karena tumor menginduksi sifat virus DNA ini tidak mudah dibedakan dari efek yang disebabkan
oleh replikasi kromosom virus dan ekspresi gen virus lainnya yang mengakibatkan kematian sel
inang yang terinfeksi.

Siklus hidup dari virus Rous sarcoma

Salah satu contoh dari retrovirus adalah virus Rous sarcoma yang menginduksi kanker
pada sel ayam. Ketika virus Rous sarcoma menginfeksi sel, tidak lama kemudian genom RNA
akan direplikasi ke dalam bentuk DNA selama transkripsi balik dan DNA virus akan
diintegrasikan ke dalam DNA kromosom pada sel inang. Dalam keadaan yang terintegrasi ini,
sel inag akan melakukan proses transkripsi dan translasi seperti gen-gen normal yang ada pada
sel inang.
Pada genom virus Rous sarcoma mengandung 4 gen yaitu:
(1) Geg gag, yang mengkode protein kapsid virion.
(2) Gen pol, yang mengkode transkrispi balik.
(3) Gen env, yang mengkode selubung protein virus.
(4) Gen scr onkogen, yang mengkode ikatan membran protein kinase. Gen scr ini berperan dalam
menyebabkan kanker karena adanya salah satu delesi dari gen virus yang menginfeksi dan
bereplikasi.

Keragaman onkogen retrovirus

Pada saat ini terdapat 20 onkogen retrovirus yang sudah berhasil ditemukan. Dari hasil
studi menunjukkan bahwa retrovirus yang berbeda akan menyebabkan kanker yang sering
membawa onkogen yang saling terkait. Akan tetapi ada juga onkogen retrovirus yang belum
berhasil ditemukan. Secara total termasuk onkogen virus DNA seluler terdapat 40 gen yang
berbeda dan termasuk ke dalam onkogen.
Produk Onkogen Sebagai Regulator Pembelahan Sel
Onkogen dapat menginduksi pertumbuhan sel yang tidak terkendali dan mengakibatkan
tumor. Akan tetapi hal lain yang juga memungkinkan adalah produk dari gen ini akan bertindak
dalam perangsangan pembelahan sel dalam berbagai cara. Hal ini menunjukkan bahwa produk
gen onkogen ini berperan dalam pengatur pembelahan sel. Misalnya, produk dari onkogen v-sis
dari virus sarkoma pada monyet akan berkaitan erat dengan hormon pertumbuhan polipeptida
yang disebut dengan derifa faktor pertumbuhan platelet (PDGF). PDGF ini diproduksi oleh sel
platelet yang berfungsi untuk prose spenyembuhan luka dan merangsang pertumbuhan sel-sel
yang terluka.
CSF-1 merupakan faktor pertumbuhan yang merangsang pertumbuhan dan diferensiasi
makrofag. Kedua reseptor faktor pertumbuhan ini adalah protein transmembran yang dapat
berikatan dengan domain yang ada di luar sel dan domain protein kinase di dalam sel. Adanya
reseptor ini akan berperan dalam menagkap sinyal yang ada pada transmembran. Pada
transmembran terdapat protein reseptor tirosin kinase yang dapat mentransmisikan sinyal
mitogenik sehingga akan terjadi perubahan dalam struktur dan fungsi protein yang akan berubah
menjadi onkogenik. Jika tidak berfungsi maka sinyal akan memberitahu sel untuk membelah diri,
namun dalam hal ini sel tidak membelah diri sehingga akan menghasilkan informasi tumor.
Produk onkogen adalah protein sederhana yang memainkan peran penting dalam
merangsang pembelahan sel dalam satu atau lebih jenis sel. Dalam beberapa kasus, produk
onkogen dapat berubah karena adanya protein mutan yang memicu pembelahan sel yang
seharusnya sel tidak melakukan pembelahan. Dalam hal ini produk onkogen merangsang
pembelahan sel yang abnormal dengan menghasilkan hasil produksi sel yang berlebihan dan
disintesis dalam jumlah yang banyak dari pada sel yang normal.

E. PROTO ONKOGEN DAN ONKOGEN SELULER

Gen dengan urutan DNA yang sangat mirip dengan onkogen retroviral dan protein
mengkodekan sifat yang sama. Hal ini telah diidentifikasi dalam genom hewan tingkat tinggi
termasuk manusia dengan menggunakan dua pendekatan eksperimental yang berbeda, yaitu
(1) Mencari urutan DNA sel yang akan dihibridisasi dengan onkogen virus hewan.
(2) Melihat langsung sel kanker yang menyebabkan gen dalam genom sel kanker melalui
eksperimen transfeksi. Dalam eksperimen ini DNA sel tumor akan diisolasi dan ditambahkan ke
sel-sel kultur jaringan yang normal untuk melihat adanya perubahan kondisi kanker.

Homologi Dengan Onkogen Virus

DNA genom dari sel normal pada semua hewan yang lebih tinggi berisi urutan DNA
yang di hibridasi dengan semua urutan onkogen retroviral. Dalam beberapa kasus, sekuens
onkogen retroviral yang homolog ditemukan pada eukariota rendah seperti Saccharomyces
cerevisiae. Pada awalnya orang menduga adanya urutan genom DNA yang dihibridasi dengan
onkogen hanya ada pada provirus yang terintegrasi. Akan tetapi ketika urutan genom DNA
diisolasi dari genom, telah ditemukan gen seluler normal dengan struktur yang berbeda dari
onkogen virus yang homolog. Gen-seg seluler yang normal yang homolog dengan onkogen
disebut protoonkogen. Protoonkogen ini dapat bermutasi menjadi bentuk sel yang bisa
merangsang onkogenesis yaitu kemampuan untuk mengubah sel menjadi neoplastik atau kanker.
Dalam bentuk terakhir disebut dengan onkogen selular untuk membedakan mereka dari virus-
virus lainnya, contoh onkogen virus antara lain: v-src, v-sis, dan v-myc.

Experimen Transfeksi
Transformasi adalah deteksi onkogen seluler yang dilakukan melalui eksperimen
transfeksi berdasarkan kemampuan onkogen untuk mengubah pertumbuhan sel normal menjadi
sel yang mengalami pertumbuhan abnormal (kanker). Sel-sel yang normal akan tumbuh dan
berhenti membelah jika sel tersebut melakukan kontak dengan sel tetangga. Peristiwa ini disebut
inhibisi kontak yang nantinya akan membentuk lapisan tunggal sel yang ada di permukaan botol
kultur atau cawan petri tempan sel tersebut tumbuh. Jika sel mengalami perubahan dan tidak
mengalami inhibisi kontak dengan sel tetangga, maka sel tersebut akan terus membelah dan akan
membentuk tumpukan sel-sel atau tumor.
Tingkat transformasi sel dapat diamati jika DNA dari sel normal yang digunakan dalam
percobaan transfeksi dalam tingkat yang rendah namun masih terdeteksi. Hal ini sama jika
frekuensi sel lebih tinggi dari transformasi juga masih bisa diamati. Pada eksperimen transfeksi
juga digunakan untuk menunjukkan adanya onkogen selular yang tejadi secara spontan ataupun
kimia yang menginduksi tumor pada hewan. Sebagian besar onkogen seluler dideteksi melaluo
percobaan transfeksi yang melakukan isolasi dengan teknik DNA rekombinan dan kloning gen.
Ketika onkogen seluler terisolasi tersebut dibandingkan dengan onkogen retrovirus, ternyata
onkogen seluler tersebut homolog dengan salah satu onkogen retroviral.

Onkogen Seluler Berisi Introns-Homolognya Virus Mereka Berupa Ekson Tunggal

Onkogen virus seperti scr merupakan hasil kloning oleh teknik DNA rekombinan dan
digunakan sebagai penyelidikan hibridisasi untuk mencari urutan yang homolog dalam sel inang
normal. Urutan ini berada dalam kromosom sel normal pada hewan normal yang tidak
terintegrasi oleh onkogen virus. Onkogen seluler dan protoonkogen memiliki beberapa ekson
yang dipisahkan oleh intron, sedangkan onkogen virus adalah ekson tunggal.
Gen v-src dan gen c-src berfungsi untuk mengkode protein kinase yang memfosforilasi
residu tirosin. Protein c-src terdiri atas 533 asam amino panjang. Sedangkan protein v-src terdiri
atas 526 asam amino. Perbedaan utama antara kedua protein ini terjadi pada ujung COOH, di
mana 12 asam amino yang terakhir dari protein v-src diganti dengan 19 asam amino yang sama
sekali berbeda di ujung protein c-src. Selain itu adanya 18 pasang nukleotida yang berbeda
diantara kode urutan dari v-src dan c-src yang mengakibatkan 8 perubahan asam amino dalam
produk protein.

Konservasi Protooncogenes Selama Evolusi

Pada lalat buah Drosophila melanogaster mengandung sel normal yang menunjukkan
homologi yang kuat untuk onkogen selular vertebrata c-abl, c-erbB, c-fps, c-raf, c-ras, c-MYB,
selain c-src homologi . Bahkan, genom Drosophila melanogaster berisi dua gen dengan homologi
src dan tiga gen yang homolog dengan ras, seperti genom vertebrata. Sedangkan pada
protoonkogen ras yang ada pada genom ragi Saccharomyces cerevisiae telah ditemukan
mengandung dua sekuens homolog.

Produk Protoonkogen: Regulator Kunci Dari Pembelahan Sel

Di dalam tubuh manusia, ditemukan sekelompok gen yang disebut dengan protoonkogen
dengan banyak variasi, namun seluruh protoonkogen memiliki kesamaan fungsi yakni mengatur
aktivitas pembelahan sel. Protoonkogen diklasifikasikan menjadi 3 jenis, yaitu:
(1) protoonkogen yang mengkodekan faktor pertumbuhan dan reseptor faktor pertumbuhan,
(2) protoonkogen yang mengkodekan protein pengikat GTP dengan aktivitas GTP,
(3) protoonkogen yang mengkodekan protein kinase.
Protein reseptor faktor pertumbuhan bekerja dengan cara mengikat faktor pertumbuhan
pada sisi ekstraselulernya kemudian meneruskan pesan faktor pertumbuhan tersebut melalui
transmisi alosterik. Transmisi alosterik akan mengaktifkan protein kinase dan menginduksi
phosporilasi protein intraseluler. Proses ini akan menyebabkan autophosporilasi protein tirosin
kinase, akhirnya protein tirosin kinase tersebut akan menyalurkan pesan dari faktor pertumbuhan
ke nukleus dan mengaktivasi jalur sintesis protein yang berperan dalam pembelahan seluler.
Protein yang dibentuk oleh protoonkogen ini merupakan dua unit protein yang menempel di sisi
sebelah luar dan dalam membrane sel. Protein yang melekat di sebelah luar membrane sel
berfungsi sebagai reseptor sedangkan protein disisi sebelah dalam berfungsi sebagai protein
tirosin kinase. Terdapat tiga jenis protein seperti ini yakni c-ras, c-fos dan c-jun.