BAB II

PEMBAHASAN

2.1 Difinisi Elektroforesis

Elektroforesis adalah suatu cara analisis kimiawi yang didasarkan pada pergerakan
molekul-molekul protein bermuatan di dalam medan listrik (titik isoelektrik). Pergerakan
molekul dalam medan listrik dipengaruhi oleh bentuk, ukuran, besar muatan dan sifat kimia
dari molekul (TITRAWANI 1996). Pemisahan dilakukan berdasarkan perbedaan ukuran berat
molekul dan muatan listrik yang dikandung oleh makro-molekul tersebut. Bila arus listrik
dialirkan pada suatu medium penyangga yang telah berisi protein plasma maka komponen-
komponen protein tersebut akan mulai bermigrasi (RICARDSON dkk. 1986)

RICHARDSON, B. J, P. R. BAVERSTOCK and M. ADAMS 1986. Allozyme Electro-

phoresis. A Handbook for Animal Sys-tematics and Population Studies. Aca-demic Press,
Inc. San Diego : 410 pp.

TITRAWANI 1996. Biodiversiti Kodok Genus. Rana Ditinjau dari Morfologi, Kariotip
dan Pola Protein di Kodya Sawahlunto. Program Pasca Sarjana. Institute Pertanian Bogor:
76 hal.

2.2 SDS-PAGE

Elektroforesis adalah suatu cara untuk memisahkan fraksi-fraksi suatu campuran berdasarkkan
atas pergerakan partikel koloid yang bermuatan dibawah pengaruh medan listrik. Cara elektroforesis
telah diigunaakan untuk analisa virus, asam nnukleat, enzim, dan protein lain, serta molekul-molekul
organik dengan berat molekul rendah seperti asam amino. (Westermeier, 2004)

Sodium Dodecyl Sulphate P olyac rilamide G el Elektroforesis (SDS-PAGE) adalah teknik untuk
memisahkan rantai polipeptida pada proteinberdasarkan kemampuannya untuk bergerak dalam arus
listrik, yang merupakan fungsi dari panjang rantai polipeptida atau berat molekulnya. Hal ini dicapai
dengan menambahkan deterjen SDS dan pemanasan untuk merusak struktur tiga dimensi pada protein
dengan terpecahnya ikatan disulfide yang selanjutnya direduksi menjadi gugus sulfidhihidril. SDS akan
membentuk kompleks dengan protein dan kompleks ini bermuatan negativ karena gugus-gugus anionic
dari SDS (Hemes,1998).