JST Kesehatan, Januari 2017, Vol. 7 No.

1 : 72 – 78 ISSN 2252-541

VARIASI PERLAKUAN PENANGANAN SAMPEL SERUM DAN PENGARUHNYA TERHADAP

HASIL PEMERIKSAAN KREATININ DARAH

The Variation of Treatment and Handling of Serum Sample and the Effect on Blood Creatinine Test Result

Zulfikar Ali Hasan,1 Mansyur Arif,2 Uleng Bahrun,3

1
Konsentrasi Kimia Klinik, Program Studi Biomedik, Universitas Hasanuddin (email:fikaroxy@gmail.com)
2
Departemen Kimia Klinik, Fakultas Kedokteran, Universitas Hasanuddin, (email:mansyur_arief@yahoo.com)
3
Departemen Kimia Klinik, Fakultas Kedokteran. Universitas Hasanuddin Makassar, (email:ulengbahrun@yahoo.com)

ABSTRAK

Tahap pra analitik merupakan salah satu fase penting dari pemeriksaan laboratorium yang meliputi pengumpulan
sampel, penanganan dan pengelolaan sampel serta faktor pasien. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh
variasi perlakuan penanganan sampel serum terhadap hasil pemeriksaan kreatinin darah. Penelitian ini merupakan
penelitian eksperimental laboratorium, yang dilaksanakan sejak bulan September sampai Oktober 2016. Digunakan 56
sampel dengan 4 perlakuan penanganan sampel yang berbeda, yaitu prosedur sentrifugasi sampel darah yang didiamkan
terlebih dahulu selama 45 menit dan 3 jam setelah flebotomi suhu 20 - 25ºC, dan penyimpanan sampel serum secara
primary tube dan secondary tube selama 3 hari suhu 4ºC. Kadar kreatinin diukur dengan menggunakan metode
creatinase alat cobas C311. Data yang terkumpul diolah dengan menggunakan uji Mann-Whitney. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa kadar kreatinin dengan variasi perlakuan penanganan sampel serum tidak terdapat perbedaan yang
bermakna. Tidak terdapat perbedaan yang bermakna kadar kreatinin dengan variasi sentrifugasi sampel darah yang
didiamkan selama 45 menit dan 3 jam (p=0.913). Tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara kadar kreatinin
dengan variasi perlakuan penyimpanan sampel serum secara primary tube dan secondary tube (p=0.918). Tidak
terdapat pengaruh yang bermakna terhadap stabilitas kadar kreatinin dengan penyimpanan sampel serum secara primary
tube (p=0.977). Tidak terdapat pengaruh yang bermakna terhadap stabilitas kadar kreatinin dengan penyimpanan
sampel serum secara secondary tube (p=0.941).

Kata kunci: Kreatinin, Variasi Sentrifugasi, Variasi Penyimpanan Sampel Serum

ABSTRACT
Pre-analytical phase is one of the important phases of laboratory tests which includes sample collection, sample
handling and management as well as patient factors. The research aimed at investigating the effect of the treatment and
handling of the serum sample on the blood creatinine test result. This was a laboratory experimental research. The
research was conducted from September to October 2016 using 56 samples with 4 treatments and handlings of the
different samples, namely the blood sample centrifugation procedure being previously stored for 45 minutes and 3 hours
after the phlebotomy in the temperature of 20 - 25°C, and the storage of serum samples by the primary tube and
secondary tube for 3 days in the temperature of 4°C. The creatinine content was measured using by the creatinase
method of cobas device C311. The data collected were processed using Mann-Whitney test. The research result
indicates that there is no significant difference between the creatinine content and the variation of the treatment and
handling of the serum sample. There is no significant difference between the creatinine content and the centrifugation
variation of the blood sample stored for 45 minutes and 3 hours (p=0.913). There is no significant difference between
the creatinine content and the variation of the serum sample storage by the primary tube and secondary tube (p=0.918).
There is no significant difference between the creatinine content stability and the serum sample storage by the primary
tube (p=0.977). There is no significant difference between the creatinine content stability and the serum sample storage
by the secondary tube (p=0.941)

Keywords: Creatinine, centrifugation variation, serum sample storage variation.

72
Zulfikar Ali Hasan
PENDAHULUAN
Laboratorium kesehatan adalah sarana
kesehatan yang melaksanakan pengukuran,
penetapan dan pengujian terhadap bahan yang
berasal dari manusia untuk penentuan jenis
penyakit, penyebab penyakit, kondisi kesehatan
atau faktor yang dapat berpengaruh pada
kesehatan perorangan dan masyarakat.
Laboratorium klinik adalah laboratorium
kesehatan yang melaksanakan pelayanan
pemeriksaan di bidang hematologi, kimia
klinik, mikrobiologi klinik, parasitologi klinik,
imunologi klinik, patologi anatomi dan atau
bidang lain yang berkaitan dengan kepentingan
kesehatan perorangan terutama untuk
menunjang upaya diagnosis penyakit,
penyembuhan penyakit dan pemulihan kesehatan
(KMK No 298, 2009).
Dalam proses pengendalian mutu
laboratorium dikenal ada tiga tahapan penting,
yaitu tahap pra analitik, analitik dan pasca
analitik. Pada umumnya yang sering diawasi
dalam pengendalian mutu hanya tahap analitik
dan pasca analitik, sedangkan proses pra analitik
kurang mendapat perhatian (Goswani et al.,
2010). Sekumpulan bukti yang dikumpulkan
dalam beberapa tahun terakhir telah
menunjukkan bahwa sebagian besar kesalahan
berada diluar fase analitik, sedangkan pada fase
pra dan pasca analitik didapatkan lebih rentan
untuk terjadi resiko kesalahan. Kesalahan dalam
fase pra analitik menjadi penyebab 50% - 75%
dari semua kesalahan laboratorium termasuk
kesalahan identifikasi dan masalah sampel
(Mario et al., 2013).
Tahap pra analitik adalah semua proses
yang terjadi sebelum sampel diproses dalam
autoanalyzer. Termasuk permintaan tes-tes yang
tidak tepat, tulisan tangan tidak terbaca pada
formulir permintaan, mempersiapkan pasien,
menerima spesimen, memberi identitas spesimen,
pengambilan sampel yang tidak benar,
penundaan transportasi, dan kesalahan
pengolahan sampel. Tahap analitik yaitu tahap
mulai kalibrasi peralatan laboratorium, sampai
dengan menguji ketelitian-ketepatan dan uji
spesimen. Tahap pasca analitik yaitu tahap mulai
dari mencatat hasil pemeriksaan, interpretasi
hasil sampai dengan pelaporan (Yusida, 2011).
Tahap pra analitik merupakan salah satu
fase penting dari pemeriksaan laboratorium. Fase
73
ISSN 2252-541
ini meliputi pengumpulan sampel, penanganan
dan pengelolaan sampel serta faktor pasien
(Narayanan, 2000). Pada tahapan pra analitik
inilah yang menentukan apakah akan diperoleh
sampel yang baik untuk pemeriksaan
laboratorium tersebut, sehingga fase ini sangat
berpengaruh terhadap kualitas sampel walaupun
tidak dapat dinyatakan secara kuantitas.
Sampel yang buruk akan memberikan
hasil pemeriksaan laboratorium yang tidak valid.
Ada beberapa alasan yang dapat menyebabkan
sampel menjadi tidak layak untuk diperiksa.
Alasan yang paling sering menyebabkan
ditolaknya sampel pemeriksaan adalah sampel
yang membeku untuk tes hematologi dan
koagulasi, volume sampel yang tidak mencukupi
untuk tes koagulasi, hemolisis, ikterus dan
lipemia pada serum dan plasma yang dapat
menyebabkan interferensi pada pemeriksaan
laboratorium (Pherson & Phincus, 2011).
Tahap pra analitik pada pemeriksaan
kreatinin darah meliputi tahap pengumpulan
sampel, penanganan dan pengelolaan sampel dan
faktor pasien. Pada penanganan dan pengelolaan
sampel ada beberapa hal yang harus diperhatikan
khususnya untuk pemeriksaan kreatinin darah.
Menurut Hardjoeno dkk (2007), salah satu
penanganan dan pengelolaan sampel yaitu pada
saat pemprosesan spesimen, untuk mendapatkan
serum dengan cepat, darah mesti disentrifus
dalam 1 jam setelah pengambilan darah. Bila
sentrifugasi dilakukan setelah 2 jam dapat
menyebabkan perubahan nilai seperti glukosa,
kalium, fosfor, kreatinin, SGOT dan SGPT.
Dijelaskan pula oleh Norbert (1995), bahwa suhu
reaksi > 30°C menyebabkan peningkatan nilai
kreatinin karena efek dari zat mengganggu.
Dengan metode enzimatik, pemisahan yang cepat
dari sel dan serum diperlukan untuk menghindari
produksi ammonia dalam sampel. Berbeda
dengan pendapat dari CLSI (2010), dalam
Procedures for the handling and processing of
blood spesimens; approved guideline-fourth
edition yang mengatakan kreatinin tidak
dipengaruhi oleh waktu kontak pra sentrifugasi
selama 48 jam pada suhu ruangan.
Proses pra analitik yang lain yang juga
masih kurang diperhatikan oleh beberapa analis
di laboratorium yaitu tentang penyimpanan
spesimen darah. Penyimpan spesimen dilakukan
jika pemeriksaan ditunda, spesimen akan dikirim
Kreatinin, Variasi Sentrifugasi, Variasi Penyimpanan Sampel Serum
ke laboratorium lain atau disimpan karena
dikhawatirkan akan ada tambahan pemeriksaan
sehingga pasien tidak akan ditindaki ulang untuk
pengambilan darah kembali.
Penyimpanan spesimen darah sebaiknya
dalam bentuk serum aliquot (Ruth & Tankersly,
2012). Akan tetapi beberapa laboratorium dalam
penyimpanan serum belum sesuai prosedur.
Masih banyak yang menyimpan serum secara
primary tube atau tidak terpisah dengan sel darah
merah atau dalam arti lain penyimpanan serum
masih satu tempat dengan sel darah merah bukan
secara aliquot, sehingga memungkinkan masih
dapat terjadi metabolisme oleh sel – sel hidup
pada spesimen yang dapat mempengaruhi
stabilitas spesimen.
Berdasarkan uraian latar belakang, maka
penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
pengaruh variasi perlakuan penanganan sampel
serum terhadap kadar pemeriksaan kreatinin
darah.
BAHAN DAN METODE
Lokasi dan Waktu Penelitian
Pengambilan Sampel dilakukan di RSUP
DR Wahidin Sudirohusodo dan RS Awal Bros
Makassar, pemeriksaan sampel dilakukan di
Laboratorium Rumah Sakit Awal Bros Makassar
pada bulan September dan Oktober 2016.
Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental laboratorik, yang bertujuan untuk
mengetahui pengaruh variasi perlakuan
penanganan sampel serum terhadap hasil
pemeriksaan kreatinin darah. Subyek pada
penelitian ini adalah pasien yang melakukan
pemeriksaan kreatinin darah di RSUP DR
Wahidin Sudirohusodo dan RS Awal Bros
Makassar.
Populasi dan Sampel
Populasi penelitian adalah pasien yang
datang memeriksakan diri di Laboratorium RSUP
DR Wahidin Sudirohusodo dan Rumah Sakit
Awal Bros Makassar. Sampel yang digunakan
adalah semua populasi terjangkau yang memenuhi
kriteria penelitian. Perkiraan besar sampel
minimal yang dibutuhkan adalah 56 sampel.
Metode Pengumpulan Data
Penjelasan singkat tentang latar belakang,
tujuan dan manfaat penelitian serta cara
pengambilan sampel darah kepada penderita dan
74
ISSN 2252-541
keluarga, kemudian diminta perkenaannya untuk
menandatangani informed consent yang telah
disediakan. Wawancara atau anamnesa untuk
memperoleh informasi keadaan umum subyek,
misalnya aktivitas fisik, konsumsi obat – obatan,
trauma dan seterusnya sesuai dengan kriteria
inklusi penelitian. Pemeriksaan laboratorium
untuk mengukur kadar kreatinin pada sampel
serum sesuai variasi perlakuan penanganan
sampel.
Analisis Data
Data yang diperoleh diolah melalui
program software statistik. Dilakukan analisis uji
perbandingan non parametrik. Hasilnya
dinarasikan dan diperjelas oleh tabel. Untuk uji
statistik, tingkat kemaknaan (signifikansi) yang
digunakan adalah 5%.
HASIL
Telah dilakukan penelitian eksperimental
laboratorik untuk mengetahui pengaruh variasi
perlakuan penanganan sampel serum terhadap
hasil pemeriksaan kreatinin darah. Penelitian
dilaksanakan di Laboratorium RS Awal Bros
Makassar mulai bulan September – Oktober 2016.
Gambaran Umum Subyek Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan
September – Oktober 2016 melibatkan 56 subyek.
Sampel pada penelitian ini menggunakan serum
pasien dengan melakukan berbagai variasi
perlakuan penanganan sampel. Pada tahap awal
dilakukan pengambilan sampel darah vena dengan
menggunakan 2 tabung plain yang berasal dari
satu pasien dan kemudian dilakukan perlakuan
penanganan sampel yang berbeda pada masing-
masing tabung. Tabung yang pertama didiamkan
selama 45 menit suhu 20 - 25ºC kemudian di
sentrifus lalu serum yang dihasilkan diperiksa
kadar kreatininnya. Tabung yang kedua
didiamkan selama 3 jam disuhu 20 - 25ºC
kemudian di sentrifus lalu serum yang dihasilkan
diperiksa kadar kreatininnya.
Pada tahap selanjutnya variasi perlakuan
penanganan sampel serum yang dilakukan adalah
pada proses penyimpanan sampel. Tabung yang
telah didiamkan selama 45 menit dan disentrifus,
dipisahkan serumnya secara aliquot ke sampel
tube yang baru (secondary tube) dan disimpan
selama 3 hari pada suhu 4ºC. Sisa serum yang ada
pada tabung (primary tube) juga disimpan selama
3 hari pada suhu 4ºC. Pada hari keempat sampel
Zulfikar Ali Hasan ISSN 2252-541

Ranks
serum yang telah disimpan diperiksa kadar Perlakuan Serum Mean ± SD
Median
(Minimum – n p Kreatinin
Maksimum) ↑ ↔ ↓
kreatininnya. Penyimpanan Serum 0.80
1.0125 ± 1.32584
Variasi perlakuan sampel darah yang didiamkan Secondary Tube (0.40 – 10.50)
56 0.918 6 48 2
Penyimpanan Serum 0.80
selama 45 menit dan 3 jam Primary Tube
1.0196 ± 1.33885
(0.40 – 10.60)
Sumber Data Primer 2016
Dari 56 total sampel darah yang Keterangan :
Mean : Rata-rata; SD: Standar Deviasi; Median: Nilai Tengah; Minimum: Nilai Terendah
disentrifus dengan variasi perlakuan sampel darah Maksimum : Nilai Tertinggi; n: Jumlah Sampel; p: Signifikan; ↑: Peningkatan Kadar Kreatinin
↔ : Kadar Kreatinin yang sama; ↓: Penurunan Kadar Kreatinin
yang didiamkan selama 45 menit dan 3 jam suhu Menggunakan Uji Mann-Whitney

20 - 25ºC, didapatkan ada 7 hasil kreatinin yang

berbeda dan 49 hasil kreatinin yang sama. Dari 7 Stabilitas Kadar Kreatinin Dengan Perlakuan
hasil kreatinin yang berbeda didapatkan 2 hasil Penyimpanan Secara Primary Tube
kreatinin yang mengalami peningkatan kadar, dan Dari total 56 sampel serum yang disimpan
5 hasil yang mengalami penurunan kadar. Tidak pada suhu 4ºC secara primary tube, didapatkan
ada perbedaan yang bermakna antara perlakuan ada 7 hasil kreatinin yang tidak stabil dan 49 hasil
sentrifugasi sampel darah yang didiamkan selama kreatinin yang stabil. Dari 7 hasil kreatinin yang
45 menit dan 3 jam terhadap kadar kreatinin darah tidak stabil didapatkan 2 hasil yang mengalami
(p=0.913) (Tabel 1). penurunan kadar kreatinin dan 5 hasil yang
mengalami peningkatan kadar kreatinin. Tidak
Tabel 1. Variasi perlakuan sampel darah yang ada pengaruh yang bermakna kadar kreatinin
didiamkan selama 45 menit dan 3 jam darah terhadap perlakuan penyimpanan sampel
serum secara primary tube terhadap stabilitas
Perlakuan Serum Mean ± SD
Median
(Minimum – n p
Ranks
Kreatinin
kadar kreatinin (p=0.977) (Tabel 3).
Maksimum) ↑ ↔ ↓
0.80
Sentrifugasi 45 menit 1.0143 ± 1.32465
(0.40 – 10.50)
56 0.913 2 49 5
Tabel 3. Stabilitas Kadar Kreatinin Dengan
Sentrifugasi 3 jam 1.0089 ± 1.32545
0.80
(0.40 – 10.50)
Perlakuan Penyimpanan Secara Primary Tube
Sumber Data Primer 2016
Keterangan :
Mean : Rata-rata; SD: Standar Deviasi; Median: Nilai Tengah; Minimum: Nilai Terendah Median Ranks
Maksimum : Nilai Tertinggi; n: Jumlah Sampel; p: Signifikan; ↑: Peningkatan Kadar Kreatinin Perlakuan Serum Mean ± SD (Minimum – n p Kreatinin
↔ : Kadar Kreatinin yang sama; ↓: Penurunan Kadar Kreatinin Maksimum) ↑ ↔ ↓
Menggunakan Uji Mann-Whitney
0.80
Sentrifugasi 45 Menit 1.0143 ± 1.32465
(0.40 – 10.50)
56 0.977 5 49 2
Penyimpanan Serum 0.80
Variasi Perlakuan Penyimpanan Sampel Serum Primary Tube
1.0196 ± 1.33885
(0.40 – 10.60)
Sumber Data Primer 2016
Secara Primary Tube Dan Secondary Tube Keterangan :
Mean : Rata-rata; SD: Standar Deviasi; Median: Nilai Tengah; Minimum: Nilai Terendah
Dari total 56 sampel serum yang disimpan Maksimum : Nilai Tertinggi; n: Jumlah Sampel; p: Signifikan; ↑: Peningkatan Kadar Kreatinin
↔ : Kadar Kreatinin yang sama; ↓: Penurunan Kadar Kreatinin
pada suhu 4ºC dengan variasi perlakuan Menggunakan Uji Mann-Whitney

penyimpanan sampel secara primary tube dan

secondary tube, didapatkan ada 8 hasil kreatinin Stabilitas Kadar Kreatinin Dengan Perlakuan
yang berbeda dan 48 hasil kreatinin yang sama. Penyimpanan Secara Secondary Tube
Dari 8 hasil kreatinin yang berbeda didapatkan 6 Dari total 56 sampel serum yang disimpan
hasil yang mengalami peningkatan kadar, dan 2 pada suhu 4ºC secara secondary tube, didapatkan
hasil kreatinin yang mengalami penurunan kadar. ada 5 hasil kreatinin yang tidak stabil dan 51 hasil
Tidak ada perbedaan yang bermakna antara kreatinin yang stabil. Dari 5 hasil kreatinin yang
penyimpanan sampel serum secara primary tube tidak stabil didapatkan 3 hasil yang mengalami
dan secondary tube terhadap kadar kreatinin darah penurunan kadar kreatinin dan 2 hasil yang
(p=0.918) (Tabel 2). mengalami peningkatan kadar kreatinin. Tidak
ada pengaruh yang bermakna kadar kreatinin
Tabel 2. Variasi Perlakuan Penyimpanan Sampel darah terhadap perlakuan penyimpanan sampel
Serum Secara Primary Tube Dan Secondary Tube serum secara secondary tube terhadap stabilitas
kadar kreatinin (p=0.941) (Tabel 4).

Tabel 4. Stabilitas Kadar Kreatinin Dengan

Perlakuan Penyimpanan Secara Secondary Tube

75
Kreatinin, Variasi Sentrifugasi, Variasi Penyimpanan Sampel Serum
Perlakuan Serum Mean ± SD
Median
(Minimum –
Maksimum)
0.80
Sentrifugasi 45 Menit 1.0143 ± 1.32465
(0.40 – 10.50)
56
Penyimpanan
Primary Tube
Serum
1.0196 ± 1.33885
0.80
(0.40 – 10.60)
Sumber Data Primer 2016
Keterangan :
Mean : Rata-rata; SD: Standar Deviasi; Median: Nilai Tengah; Minimum: Nilai Terendah
Maksimum : Nilai Tertinggi; n: Jumlah Sampel; p: Signifikan; ↑: Peningkatan Kadar Kreatinin
↔ : Kadar Kreatinin yang sama; ↓: Penurunan Kadar Kreatinin
Menggunakan Uji Mann-Whitney
PEMBAHASAN
Penelitian ini menunjukkan bahwa tidak
ada pengaruh yang signifikan hasil pemeriksaan
kadar kreatinin darah dengan berbagai variasi
perlakuan penanganan sampel serum. Perbedaan
masing-masing variabel akan dibahas satu persatu
antara variasi perlakuan penanganan sampel
serum dan pengaruhnya terhadap hasil
pemeriksaan kreatinin darah.
Pada tahap awal dilakukan pengambilan
sampel darah vena dengan menggunakan 2 tabung
plain yang berasal dari satu pasien dan kemudian
dilakukan perlakuan penanganan sampel yang
berbeda pada masing-masing tabung. Tabung
yang pertama didiamkan selama 45 menit suhu 20
- 25ºC kemudian di sentrifus lalu serum yang
dihasilkan diperiksa kadar kreatininnya. Tabung
yang kedua didiamkan selama 3 jam disuhu 20 -
25ºC kemudian di sentrifus lalu serum yang
dihasilkan diperiksa kadar kreatininnya. Hasil
yang didapatkan kemudian dilakukan uji analisis
statistik menggunakan uji Mann-Whitney untuk
melihat adanya perbedaan tiap perlakuan, dan
berdasarkan Tabel 1, didapatkan nilai signifikan
0,913 yang menandakan tidak ada perbedaan yang
bermakna antara perlakuan sentrifugasi sampel
darah yang didiamkan selama 45 menit dan 3 jam
terhadap kadar kreatinin darah (p>0,05=tidak ada
perbedaan).
Hal ini sesuai dengan pernyataan CLSI
dalam procedures for the handling and processing
of blood specimens approved guideline fourth
edition yang mengatakan kreatinin tidak
dipengaruhi oleh waktu kontak pre sentrifugasi
selama 48 jam pada suhu ruangan (CLSI, 2010).
Berbeda dengan pendapat prof hardjoeno
dkk dalam buku interpretasi hasil tes laboratorium
diagnostik yang mengatakan bahwa untuk
mendapatkan serum dengan cepat, darah mesti di
sentrifus dalam 1 jam setelah pengambilan darah,
Bila sentrifugasi dilakukan setelah 2 jam dapat
menyebabkan perubahan nilai seperti glukosa,
ISSN 2252-541
Ranks
n p Kreatinin kalium, fosfor, kreatinin, SGOT dan SGPT
↑ ↔ ↓
(Hardjoeno dkk., 2007).
0.977 5 49 2
Pengolahan spesimen mencakup tiga
tahap yang berbeda, yaitu pra sentrifugasi,
sentrifugasi, dan pasca sentrifugasi. Pedoman
yang tepat harus ditetapkan dan dipatuhi oleh
personil laboratorium dalam setiap tahapan
penanganan spesimen untuk memastikan hasil
pemeriksaan yang dapat diandalkan dan bermakna
secara medis. Idealnya, semua pengujian harus
dilakukan dalam waktu 45 menit sampai 1 jam
setelah pengumpulan. Serum paling sering
menjadi pilihan, karena kepraktisan dalam
pengumpulan dan penanganan. Selain itu,
gangguan dari antikoagulan tidak terjadi. Darah
harus tetap berada dalam wadah tertutup aslinya
sampai siap untuk pemisahan untuk mencegah
penguapan air dalam plasma atau serum (Kiswari,
2014).
Variasi perlakuan selanjutnya yaitu
penyimpanan sampel serum pada suhu 4ºC secara
primary tube dan secondary tube (aliquot). Serum
yang telah dipisahkan kemudian disimpan secara
aliquot (secondary tube) pada suhu 4ºC selama 3
hari, Sisa serum yang ada pada tabung (primary
tube) juga disimpan selama 3 hari pada suhu 4ºC.
Pada hari keempat sampel serum yang telah
disimpan diperiksa kadar kreatininnya.
Prosedur yang dilakukan pada hari
keempat sebelum melakukan pemeriksaan
kreatinin yaitu sampel serum yang disimpan
secara secondary tube (aliquot) didiamkan
terlebih dahulu pada suhu ruang (20 - 25ºC)
selama 15 – 30 menit kemudian dilakukan re-
centrifugasi untuk mengendapkan senyawa –
senyawa yang dapat mengganggu pemeriksaan.
Setelah itu baru dilakukan pemeriksaan kreatinin.
Sedangkan perlakuan penyimpanan sampel serum
secara primary tube dilakukan penanganan
dengan cara didiamkan terlebih dahulu pada suhu
ruang (20 - 25ºC) selama 15 – 30 menit, kemudian
serum yang masih kontak dengan darah
dipisahkan serumnya dan disimpan pada tabung
reaksi baru kemudian di re-sentrifugasi selama 10
menit 3000rpm dan setelah itu baru dilakukan
pemeriksaan kreatinin.
Hasil pemeriksaan kreatinin darah dengan
membandingkan perlakuan penyimpanan sampel
serum baik secara primary tube maupun
secondary tube kemudian dilakukan uji analisis
statistik menggunakan uji Mann-Whitney untuk
76
Zulfikar Ali Hasan
melihat adanya perbedaan tiap perlakuan, dan
didapatkan nilai signifikan 0,918 yang
menandakan tidak ada perbedaan yang bermakna
antara penyimpanan sampel serum secara primary
tube dan secondary tube terhadap kadar kreatinin
darah (p>0,05=tidak ada perbedaan).
Selama penyimpanan, konsentrasi
konstituen darah pada spesimen dapat berubah
sebagai hasil dari berbagai proses, termasuk
adsorpsi tabung kaca atau plastik, denaturasi
protein, penguapan senyawa volatil, pergerakan
air kedalam sel yang mengakibatkan
hemokonsentrasi dan aktivitas metabolisme
leukosit dan eritrosit. Perubahan ini terjadi dalam
berbagai tingkat, pada suhu kamar, dan selama
pendinginan atau pembekuan. Studi stabilitas
telah menunjukkan bahwa perubahan analit yang
signifikan secara klinis terjadi jika serum atau
plasma kontak dalam waktu yang lama dengan sel
darah (Kiswari, 2014).
Serum yang disimpan secara primary tube
maupun secondary tube dalam 3 hari suhu 4ºC
tidak menunjukkan perbedaan yang signifikan hal
ini dapat terjadi jika perlakuan penyimpanan
sampel dilakukan sesuai prosedur (SOP). Hal ini
juga sesuai dengan pernyataan Kiswari yang tidak
memasukkan kreatinin sebagai analit yang tidak
stabil, serum dan plasma yang tidak terpisahkan
menghasilkan peningkatan yang signifikan
terhadap bilirubin total, natrium, urea nitrogen,
albumin, kalsium, magnesium dan protein total.
Perubahan ini disebabkan pergerakan air kedalam
sel setelah 24 jam, menyebabkan
hemokonsentrasi. Penelitian lain menemukan
kalium, fosfor dan glukosa menjadi analit yang
paling tidak stabil dalam serum dan tidak hilang
dari bekuan dalam waktu 30 menit. Albumin,
bikarbonat, klorida, C-peptida, kolesterol HDL,
zat besi, kolesterol LDL, dan protein total yang
ditemukan menjadi tidak stabil setelah 6 jam, bila
serum tersebut tidak dipisahkan dari bekuan
(Kiswari, 2014).
Stabilitas kreatinin yang disimpan secara
primary tube dan secondary tube selama 3 hari
pada suhu 4ºC setelah diuji statistik Mann-
Whitney menunjukkan nilai signifikan 0,977 dan
0,941 yang menandakan tidak ada pengaruh yang
bermakna kadar kreatinin darah terhadap
perlakuan penyimpanan sampel serum secara
primary tube dan secondary tube terhadap
77
ISSN 2252-541
stabilitas kadar kreatinin darah (p>0,05=tidak ada
perbedaan).
Hal ini sesuai kit insert reagen kreatinin
pada alat cobas c311 yang mengatakan stabilitas
kreatinin pada suhu 4ºC dapat bertahan selama 7
hari. Serum atau plasma harus disimpan pada suhu
4 – 6ºC jika pengujian harus tertunda lebih dari 4
jam (Kiswari, 2014). Suhu reaksi > 30°C
menyebabkan peningkatan nilai kreatinin karena
efek dari zat mengganggu. Dengan metode
enzimatik, pemisahan yang cepat dari sel dan
serum diperlukan untuk menghindari produksi
ammonia dalam sampel (Norbert, 1995).
Pada spesimen plasma atau serum, kristal
es yang terbentuk menyebabkan efek yang
mengganggu struktur molekul, khususnya pada
molekul protein besar. Lambatnya pembekuan
memungkinkan terbentuknya kristal yang lebih
besar, menyebabkan efek degradatif yang lebih
serius. Dengan demikian, pembekuan secara cepat
direkomendasikan untuk stabilitas yang optimal
(Kiswari, 2014).
KESIMPULAN DAN SARAN
Peneliti meyimpulkan bahwa untuk
pemeriksaan kreatinin darah dengan variasi
perlakuan sentrifugasi sampel darah yang
didiamkan terlebih dahulu selama 45 menit dan 3
jam setelah flebotomi tidak memberikan pengaruh
yang bermakna terhadap kadar kreatinin darah.
Begitu juga dengan variasi penyimpanan sampel
serum secara primary tube dan secondary tube
tidak memberikan pengaruh yang bermakna
terhadap kadar kreatinin darah. Disarankan karena
tidak ada perbedaan kadar kreatinin dengan
variasi sentrifugasi dan penyimpanan sampel
serum, maka sentrifugasi untuk pemeriksaan
kreatinin bisa dilakukan sampai 3 jam setelah
flebotomi, dan penyimpanan sampel serum untuk
pemeriksaan kreatinin dapat dilakukan secara
primary tube dan secondary tube pada suhu 4ºC
tetapi tidak boleh lebih dari 3 hari.
DAFTAR PUSTAKA
CLSI. (2010). Procedures for the Handling and
Processing of Blood Specimens for
Common Laboratory Tests; Approved
Guideline - Fourth Edition. CLSI
document H18-A4. Wayne, PA: Clinical
and Laboratory Standards
Kreatinin, Variasi Sentrifugasi, Variasi Penyimpanan Sampel Serum
Goswani B., Singh B., Chawla R., & Mallika V.
(2010). Identification of The Types of
Preanalytical Errors in the Clinical
Chemistry Laboratory: 1-Year Study at
G.B Pant Hospital. Labmedicine Vol: 41
Number 2 : 89 – 92
Hardjoeno dkk. (2007). Interpretasi Hasil Tes
Laboratorium Diagnostik. Penerbit Buku
Universitas Hasanuddin: Makassar. 7 – 8
Kepmenkes RI No 298/Menkes/SK/III/2008
tentang Pedoman Akreditasi
Laboratorium Kesehatan. Direktorat
Jendral Bina Pelayanan Medik
Departemen Kesehatan Republik
Indonesia. Jakarta. 2009
Kiswari R. (2014). Hematologi dan Transfusi.
Erlangga: Semarang Jawa Tengah
Mario P., Laura S., Ada A., & Maria L C. (2013).
Harmonization of Pre Analytical Quality
78
ISSN 2252-541
Indicators. Biochemia Medica 2014; 24
(1) : 105 – 13
Mc-Pherson R. & Pincus M. (2011). Henry’s
Clinical Diagnosis and Management by
Laboratory Methods. 22 ed. Elsevier
Sanders. 3: 24 – 36201
Narayanan S. (2000). The Pre Analytical Phase –
An Important Component of Laboratory
Medicine. Am J Clin Pathol; 113: 429 –
52.
Norbert W T. (1995). Clinical Guide to
Laboratory Tests. WB Saunders
Company. USA. Third Edition Hal 187
Ruth M C. & Tankersly CM. (2012). Phlebotomy
Essential 5thed. Lippincot Williams &
Wilkin
Yusida N. (2011). Identifikasi Jumlah Dan Jenis
Kesalahan Pra Analitik di Laboratorium
Patologi Klinik RSUD Dr Moewardi.
Surakarta: