LAPORAN PRAKTIKUM BIOLOGI

MATA KULIAH: MIKROBIOLOGI

STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA, ISOLASI BIAKAN MURNI

BAKTERI, PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

OLEH:
NAMA : MANGOMBAR M.T. PAKPAHAN
NIM : 4173141039
JURUSAN : BIOLOGI
PROGRAM : PENDIDIKAN BIOLOGI
KELOMPOK : I (SATU)
Tgl PELAKSANAAN : 11, 18, 25 SEPTEMBER 2019

JURUSAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI MEDAN

2019
I. JUDUL PERCOBAAN : STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA,
ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI, PENGAMATAN KOLONI BAKTERI
DAN JAMUR.

II. TUJUAN PERCOBAAN:

II.I STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA
1. Mengetahui cara melakukan sterilisasi media
2. Mengetahui cara membuat media Nutrien Agar
3. Mengetahi cara membuat media Mueller Hinton Agar
4. Mengetahui cara membuat media Potato Dextrose Agar
5. Menyiapkan media tumbuh mikroorganisme yang steril

II.II ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI

1. Mengetahui beberapa tahapan dalam isolasi bakteri
2. Mengisolasi biakan bakteri dari bakteri campuran menjadi biakan murni
3. Mengenal teknik atau metode gores untuk mengisolasi bakteri
4. Mengetahui kegunaan dilakukan pemurnian biakan bakteri
5. Mengetahui media agar mana yang dapat digunakan dalam melakukan
biakan murni bakteri.

II.III PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

1. Mengetahui morfologi koloni bakteri
2. Mengetahui morfologi koloni jamur
3. Mengetahui faktor-faktor yang memengaruhi pertumbuhan koloni bakteri
4. Mengetahui faktor-faktor yang memengaruhi pertumbuhan koloni jamur
5. Mengetahui perbedaan koloni bakteri dan jamur

2
III. TINJAUAN TEORITIS
A. STERILISASI PEMBUATAN MEDIA
Sterilisasi merupakan suatu proses untuk mematikan semua organisme yang
terdapat pada suatu benda. Proses sterilisasi dapat dibedakan menjadi 3 macam,
yaitu penggunaan panas (pemijaran dan udara panas); penyaringan; penggunaan
bahan kimia (etilena oksida, asam perasetat, formaldehida dan glutaraldehida
alkalin). Sterilisasi dengan uap air panas, bahan yang mengandung cairan tidak
dapat disterilkan dengan oven sehingga digunakan alat ini. alat ini disebut Arnold
steam sterilizer dengan suhu 1000 C dalam keadaan lembab.
Secara sederhana dapat pula digunakan dandang. Mula-mula bahan
disterilkan pada suhu 1000 C selama 30 menit untuk membunuh sel-sel vegetatif
mikrobia. kemudian disimpan pada suhu kamar 24 jam untuk memberi
kesempatan spora tumbuh menjadi sel vegetatif, lalu dipanaskan lagi 1000 C 30
menit. dan diinkubasi lagi 24 jam dan disterilkan lagi, jadi ada 3 kali sterilisasi.
Banyak bakteri berspora belum mati dengan cara ini sehingga dikembangkan
cara berikutnya yaitu uap air bertekanan (Machmud, 2013).
Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrisi (zat makanan)
yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba termaksud bakteri patogen.
Selain untuk menumbuhkan mikrobia medium dapat digunakan pula untuk
isolasi, memperbanyak, pengujian sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah
mikrobia. Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri
dari campuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh
mikroorganisme untuk pertumbuhannya.
Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi di dalam media berupa molekul-
molekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media,
pertumbuhan dapat dilakukan dengan isolasi mikroorganisme menjadi kultur
murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya. Bahan dasar
adalah air (H2O) sebagai pelarut dari agar-agar (rumput laut) dimana agar-agar
tersebut berfungsi sebagai pemadat media (Khaeruni dan Satrah, 2017).

3
 Media biakan yang mampu mendukung optimalisasi pertumbuhan
milroorganisme harus dapat memenuhi persyaratan nutrisi bagi mikroorganisme.
unsur tersebut berupa garam organik, sumber energy (karbon), vitamin dan zat
pengatur tumbuh (ZPT). Selain itu dapat pula ditambahkan komponen lain
seperti senyawa organik dan senyawa kompleks lainnya (Suardani dkk, 2014).

B. ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI

Ada beberapa cara yang digunakan untuk isolasi bakteri, fungi, dan khamir
dengan metode garis, metode tuang, metode sebar, metode penuangan, serta
micromanipulator. Dua diantaranya yang paling sering banyak digunakan adalah
teknik cawan tuang dan cawan gores. Kedua metode ini didasarkan pada prinsip
yang sama yaitu mengencerkan organisme sedemikian rupa sehingga individu
species dapat dipisahkan (Adams, 2000).
Isolasi adalah mengambil mikroorganisme yang terdapat di alam dan
menumbuhkannya dalam suatu medium buatan. Prinsip dari isolasi mikroba adalah
memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal dari
campuran bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan
menumbuhkannya dalam media padat sel-sel mikroba akan membentuk suatu
koloni sel yang tetap pada tempatnya. Isolasi bakteri atau biakan yang terdiri dari
satu jenis mikroorganisme (bakteri) dikenal sebagai biakan murni atau biakan
aksenik. Biakan yang berisi lebih dari satu macam mikroorganisme (bakteri)
dikenal sebagai biakan campuran, jika hanya terdiri dari dua jenis
mikroorganisme, yang dengan sengaja dipelihara satu sama lain dalam asosiasi,
dikenal sebagai biakan dua-jenis.
Mikroorganisme tidakmemerlukan banyak ruangan untuk perkembangannya,
sebab itu media buatan (agar) dapat dimasukkan ke dalam sebuah tabung
percobaan labu atau cawan Petri. Pada permulaannya tabung atau cawan Petri
harus dalam keadaan steril (bebas dari setiap mikroorganisme hidup) lalu setelah
itu dimasukkan mikrobia yang diinginkan, tabung atau cawan harus dilindungi
terhadap kontaminasi dari luar. Sumber utama pencemaran dari luar adalah

4
udara, yang banyak mengandung mikroorganisme yang berterbangan. Bentuk
cawan petri, dengan tutup yang saling menyelubungi, dirancang untuk mencegah
pencemaran udara. Pencemaran tabung atau labu dihindari dengan cara
menyumbat mulutnya dengan penutup yang cocok, biasanya dengan kapas.
Permukaan luar cawan biakan yang menjadi sasaran pencemaran, dan bagian
dalam labu atau tabung akan tercemar bila dibuka untuk memasukkan atau
mengeluarkan bahan. Bahaya ini dapat dihindari dengan cara membakar bibir
atau pinggiran cawan, tabung atau labu dalam api, segera setelah penutup dibuka
dan dibakar sekali lagi pada waktu akan ditutup (Buckle, 2007)

C. PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

Bakteri merupakan salah satu mikroba yang sering dijumpai dalam
kehidupan sehari-hari. Bakteri adalah makhluk mikroskopik yang sangat kecil
dan umumnya bersel tunggal. Struktur selnya sederhana tanpa nukleus (inti sel)
dan jumlahnya banyak. Bentuk bakteri bisa bermacam-macam dan umumnya
berukuran 0,5 - 5 mikrometer. Dalam kehidupan di ekosistem bakteri memiliki
peranan yang menguntungkan dan merugikan. Bakteri yang menguntungkan
dapat dibudidayakan untuk kepentingan manusia, seperti Lactobacillus strain
yang dimanfaatkan untuk pembutan youghurt. Sedangkan Salmonella thyphosa
merupakan penyebab penyakit tifus (Pudji,2000).
Jamur (fungi) banyak kita temukan disekitar kita. Jamur tumbuh subur
terutama di musim hujan karena jamur menyukai habitat yang lembap. Beberapa
ahli mikologi membagi jamur menjadi dua kelompok berdasarkan bentuk
tubuhnya, yaitu kapang (mold) dan khamir (yeast). Kebanyakan jamur masuk
dalam kelompok kapang. Tubuh vegetatif kapang berbentuk filamen panjang
bercabang yang seperti benang disebut hifa. Hifa akan memanjang dan menyerap
makanan dari permukaan substrat (tempat hidup jamur). Sedangkan jamur dalam
kelompok khamir bersifat uniseluler (berinti satu), bentuknya bulat atau oval.
Jamur tidak mempunyai batang, daun, dan akar serta tidak mempunyai
sistem pembulu seperti pada tumbuhan tingkat tinggi. Jamur umumnya

5
 berbentuk seperti benang, bersel banyak, dan semua dari jamur mempunyai
potensi untuk tumbuh, karena tidak mempunyai klorofil yang berarti tidak dapat
memasak makanannya sendiri, maka jamur memanfaatkan sisa-sisa bahan
organik dari makhluk hidup yang telah mati maupun yang masih hidup. (Pracaya,
2007).

IV. ALAT LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

IV.I STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA
A. ALAT
NO NAMA ALAT JUMLAH
1 Neraca Analitik 1 buah
2 Kaca Arloji 1 buah
3 Sendok 1 buah
4 Gelas ukur 1 buah
5 Erlenmeyer 1 buah
6 Kapas 100 gram
7 Alluminium foil Secukupnya
8 Tungu Pemanas 1 buah
9 Batang Pengaduk 1 buah
10 Autoklaf 1 buah

B. BAHAN
NO NAMA BAHAN JUMLAH
1 Nutrien Agar 20 gram
2 Muller hinton Agar 20 gram
3 Potato dextrose agar 20 gram
4 Aquades 100 mL

6
IV.II ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI
A. ALAT
NO NAMA ALAT JUMLAH
1 Bunsen 1 buah
2 Jarum Ose 1 buah
3 Korek Api 1 buah
4 Tutup tabung 1 buah

B. BAHAN
NO NAMA BAHAN JUMLAH
1 Biakan campuran Secukupnya
2 Media agar miring Secukupnya
3 Spritus Secukupnya

IV.II PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

A. ALAT
NO NAMA ALAT JUMLAH
1 Cawan Petri 1 buah
2 Bunsen 1 buah
3 Jarum ose 1 buah
4 Inkubator 1 buah
5 Spatula 1 buah
6 Kapas 100 gram
7 Laminar air flow cabinet 1 buah
8 Penangas air 1 buah

7
 B. BAHAN
NO NAMA BAHAN JUMLAH
1 Nutrien Agar 20 gram
2 Muller hinton Agar 20 gram
3 Potato dextrose agar 20 gram
4 Aquades 1000 mL

V. PROSEDUR KERJA
V.I STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA
Tujuan 1 : Sterilisasi Media (Sterilisasi Panas Lembab)
1. Dimasukkan air kedalam autoklaf hingga mencapai batas sarangan
2. Disusun media kedalam keranjang dan dimasukkan kedalam autoklaf
3. Katup autoklaf ditutup rapat dan disambungkan ke sumber listrik
4. Autoklaf dinyalakan dan diatur pada suhu 121°C selama 15 menit dan ditekan
tombol start dan dibiarkan hingga proses sterilisasi selesai
5. Media dikcluarkan dari autoklaf dan diamkan hingga mencapai suhu ruangan
6. Air pada autoklaf dikeluarkan dan dibuang

Tujuan 2 : Pembuatan Media NutrientAgar

1. Ditimbang 20g media Nutrient Agar sintetis diatas neraca analitik dan
dimasukkan kedalam erlenmeyer
2. Ditambahkan aquades 1 liter kedalam erlenmeyer dan tutup erlenmeyer
dengan menggunakan kapas steril
3. Panaskan 1amtan diatas tungku pemanas dan diaduk hingga homogen selama
kurang lebih 30 menit
4. Media siap untuk disterilisasi

8
Tujuan 3 : Pembuatan Media Mueller Hinton Agar
1. Ditimbang 38g media Mueller Hinton Agar sintetis diatas neraca analitik
2. dan dimasukkan kedalam erlenmeyer Ditambahkan aquades 1 liter kedalam
erlenmeyer dan tutup erlenmeyer dengan menggunakan kapas steril
3. Panaskan larutan diatas tungku pemanas dan diaduk hingga homogen selama
lebih kurang 30 menit
4. Media siap untuk disterilisasi

Tujuan 4 : Pembuatan Media Potato Dextrose Agar

1. Ditimbang 39g media Potato Dextrose Agar sintetis diatas neraca analitik dan
dimasukkan kedalam erlenmeyer
2. Ditambabkan aquades 1 liter kedalam erlenmeyer dan lump erlenmeyer
dengan menggunakan kapas steril
3. Panaskan larutan diatas tungku pemanas dam diaduk bingga bomogen selama
lebih kurang 30 menit
4. Media siap untuk disterilisasi

V.II ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI

1. Bunsen dinyalakan dan didekatkan semua alat dan bahan didekat Bunsen
2. Jarum ose di pijarkan dan di dinginkan selama 5:15 detik
3. Diambil koloni bakteri yang akan dimurnikan pada biakan campuran dengan
menggunkan jarum ose secara aseptis
4. Dibuka penutup pada media agar miring dan di bakar sebentar bagian mulut
tabung .
5. Diinokulasikan koloni balctero pada jarum ose dengan menggunakan metode
gores sepanjang permukaan miring media agar jangan sampai mengenai
dinding tabung)
6. Dibakar kembali mulut tabung dan ditutup

9
7. Dibakar kembali jamm ose untuk membunuh bakteri yang tersisa pada jarum
Media disimpan didalam inkubator pada suhu 37 °

V.III PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

1. Media dicairkan di dalam penangas air dan tuang pada cawan petri steril,
diamkan sampai memadat.
2. Jarum ose dipijarkan sampai ujungnya pijar, kemudian pemanasan diteruskan
perlahan-lahan ke arah pegangan jarum sampai batas kawat. Pekerjaan ini
dilakukan scbanyak dua kali. Kemudian jarum didinginkan sesaat sampai 30
detik. Dengan tangan kiri diambil tabung reaksi yang berisi inokula. Kapas
penutup tabung ditarik dengan cara menjepit di antara jari kelingking dan
telapak tangan kanan. Mulut tabung yang telah terbuka dipijarkan dengan
cepat.
3. Jarum ose dimasukkan ke dalam tabung reaksi inokula tanpa menyentuh
dinding untuk mengambil inokula. Kemudian jarum ose ditarik keluar dan
dipegang tetap pada jarak 10 cm sekitar nyala api Bunsen. Mulut tabung
reaksi dipijarkan, kemudian tutup kapasnya dimasukkan kembali ke dalam
mulut tabung. Tabung dikembalikan kc raknya. Ambil cawan petri yang berisi
media steril kemudian pijarkan pinggirannya di nyala api Bunsen kemudian
buka penutupnya. Goreskan inokula pada jarum ose ke setiap bagian dari plat
agar pada cawan petri dengan goresan yang rapat. Bila media berupa agar
tegak dalam tabung reaksi, inokulasi dilakukan dengan cara memasukkan
jarum ose lurus yang telah memuat inokula secara tusukan lurus ke dalam
media, tepat pada poros tengah tabung sampai mendekati dasar tabung,
kemudian ose ditarik kembali perlahan-lahan. Prosedur yang sama juga
dilakukan pada biakan media agar miring.
4. Semua pekerjaan dilakukan secara aseptis (bebas kuman) dengan cara
dikerjakan diatas nyala api lampu spiritus/Bunsen atau di dalam Laminar Air
Flow Cabinet.

10
5. Inkubasikan pada suhu 37 °C selama 2-3 x24 jam di dalam inkubator dan
amati pertumbuhan yang terjadi.
6. Lakukan pengamatan morfologi koloni bakteri yang meliputi : wama koloni,
bentuk koloni, tepi koloni, elevasi koloni, kepekatan koloni, ukuran diameter,
dan mengkilat atau suram.

11
VI. HASIL DAN PEMBAHASAN
VI. I HASIL PENGAMATAN
A. STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA

NO NAMA GAMBAR KETERANGAN

Berbentuk padat, perpaduan

antara bahan ilmiah dan senyawa
kimia, dibuat dari campuran
1 Nutrien Agar
ekstrak daging dan pepton
dengan menggunakan agar
sebagai pemadat.

Digunakan untuk pertumbuhan

Potato dextrose
2 jamur dibuat dari campuran
agar
kentang, dexstrosa dan agar.

12
B. ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI
KEGIATAN GAMBAR NAMA BAKTERI
Isolasi Biakan Murni Eschericia coli
bakteri

13
C. PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

MEDIA YANG
NO GAMBAR KETERANGAN
DIGUNAKAN

1 Nutrien Agar Bakteri

Potato dextrose
2 Jamur
agar

14
1. BAKTERI
Jlh
No Kel Pengnceran Sp Bntk Tepian Elvsi Wrna
kln
Tak
Seperti Timb
1 2 10-4 Sp 1 1 beratur putih
wol ul
an
Bundar
dengan Beromb Timb
2 1 10-6 Sp 1 ± 90 Putih
tepian ak ul
timbul
Bundar
Licin,
, tak
Sp 1 38 beromb Tidak
beratur
3 3 10-5 Sp 2 7 ak, tak Datar berwar
an, tak
Sp 3 3 beratura na
beratur
n
an
Tak
beratur Tak
4 4 10-5 Sp 1 ± 68 an beratura datar Cream
menye n
bar
Bundar
Tak
tengah
5 5 10-3 Sp 1 67 beratura Putih Putih
tepian
n
timbul

15
2. JAMUR

Jlh
No Kel Pengnceran Sp Bntk Tepian Elvasi Wrna
kloni
Filitom Tak
Hijau
o beratur
Sp 1 3 Timb tua
1 1 10-6 Berbena an
Sp 2 6 ul Hijau
ng- bercaba
muda
benang ng
Bundar
dengan
tepian
Sp 1 4 menyeb Siliat Timb Hijau,
2 2 10-4
Sp 2 1 ar licin ul biru
Berbena
ng-
benang
Bundar
dengan
1 tepian Bercab
Sp 1
1 menyeb ang- Hijau,
3 3 10-5 Sp 2 Datar
ar cabang putih
Berbena
ng-
benang
Bentuk
4 4 10-5 Sp 1 1 licin datar putih
L
Tidak
5 5 10-3 0 - - - -
ada

16
VI.II PEMBAHASAN
A. STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA
Sebelum melakukan pembuatan media maka perlu dilakukan sterilisasi,
sterilisasi yang dilakukan dapat menggunaakn sterilisasi basah atau sterilisasi
kering. Pada praktikum hari ini sterilisasi yang kita gunakan adalah dengan
menggunanakan autoclave yaitu alat sterilisasi yang memanfaatkan uap atau air.
Pertumbuhan mikroorganisme tergantung dari nutrien media yang dibuat.
Kebanyakan mikroorganisme membutuhkan air. bahan-bahan yang terlarut di
dalam air yang digunakan mikroorganisme untuk membentuk badan sel dan
memperoleh energi yang berasal dari bahan makanan. Perbedaan antara medium
NA dan medium PDA yaitu terdapat pada nutrien penyusunnya. Pada medium
NA, nutrien utama penyusunnya yakni adalah sepotong kaldu sedangkan medium
PDA nutrien utama penyusunnya terdapat pada kentang. Karena itu nutrient ini
dinamakan Potato Dextrose Agar (Fitri, 2014).
Nutrient Agar (NA) merupakan suatu medium yang berbentuk padat, yang
merupakan perpaduan antara bahan alamiah dan senyawa-senyawa kimia. NA
dibuat dari campuran ekstrak daging dan peptone dengan menggunakan agar
sebagai pemadat. Dalam hal ini agar digunakan sebagai pemadat, karena sifatnya
yang mudah membeku dan mengandung karbohidrat yang berupa galaktam
sehingga tidak mudah diuraikan oleh mikroorganisme. Dalam hal ini ekstrak beef
dan pepton digunakan sebagai bahan dasar karena merupakan sumber protein,
nitrogen, vitamin serta karbohidrat yang sangat dibutuhkan oleh mikroorganisme
untuk tumbuh dan berkembang. Medium Nutrient Agar (NA) merupakan
medium yang berwarna coklat muda yang memiliki konsistensi yang padat
dimana medium ini berasal dari sintetik dan memiliki kegunaan sebagai medium
untuk menumbuhkan bakteri.
Medium PDA (Potato Dekstrosa Agar) berdasarkan susunannya merupakan
medium organik semi alamiah atau semi sintetis sebab terdiri dari bahan alamiah
yang ditambah dengan senyawa kimia; berdasarkan konsistensinya merupakan
medium padat karena mengandung agar yang memadatkan medium; berdasarkan

17
kegunaannya merupakan medium untuk pertumbuhan jamur. Medium PDA
terdiri dari kentang yang berfungsi sebagai sumber energi, nitrogen organik,
karbon dan vitamin, dekstrosa sebagai sumber karbon, agar sebagai bahan
pemadat medium dan aquadest sebagai pelarut untuk menghomogenkan medium
dan sumber O2.

B. ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI

Dalam praktikum isolasi bakteri, memerlukan lingkungan dan medium yang
berisi zat hara untuk pertumbuhan sel, sintesis sel, keperluan energi dalam
metabolisme, dan pergerakan yang sesuai dengan mikroorganisme. Medium
biakan yang digunakan untuk menumbuhkan mikrobia dalam bentuk padat, semi
padat, dan cair. Yang digunakan dalam praktikum adalah medium padat yaitu
agar. Agar digunakan sebagai media karena tidak dapat diuraikan oleh mikroba.
Media yang digunakan dalam praktikum adalah NA karena yang akan di biakan
adalah bakteri. Metode yang digunakan dalam praktikum ini adalah metode
goresan (Priyani, 2006).

Metode goresan (streak plate)

Metode goresan terdiri dari penginokulasian biakan murni dalam hal ini
digunakan Bakteri dari makanan yang sudah dibuat dalam acara 1 dengan
medium NA dalam cawan petri. Mula-mula medium NA dengan suhu 45-500C
dituangkan pada cawa petri steril, diratakan dengan cara memutar-mutarkan
cawan setelah itu biarkan hingga dingin dan memadat. Setelah medium NA padat,
ambil 1 ose bakteri dari biakan murni pada acara 1 kemudian goreskan pada
permukaan agar selama menggores tutup cawan dibuka secukupnya. Cara
menggoreskannya yaitu awalnya cawan dibagi menjadi 4 bagian kemudian
goreskan bakteri pada permukaan agar dengan dibuat zigzag menyambung dari
cawan bagian ke-1 sampai ke cawan bagian ke-4 tidak terputus. Pada bagian

18
cawan ke-4 goresan tidak boleh mengenai bagian yang pertama. Setelah
diinkubasi selama 2 hari akan terlihat koloni bakteri berkumpul pada goresan-
goresan tersebut. Nama bakteri yang diisolasi adalah Eschericia colikoloni
berwarna putih dengan gumpalan yang aagak tebal.

C. PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

Bakteri

Bakteri yang telah ditangkap pada suatu medium dapat dikembangbiakan dan
akan membentuk suatu penampakan berupa koloni. Koloni sel bakteri merupakan
sekelompok masa sel yang dapat dilihat dengan mata langsung. Semua sel yang
terdapat pada satu koloni tersebut dianggap progeny satu organisme yang
merupakan suatu keturunan. Menurut Suhardi (2015), isolasi bakteri merupakan
pengambilan atau memindahkan mikroba dari lingkungannya di alam dan
menumbuhkannya sebagai biakan murni dalam medium buatan. Suatu bakteri
yang telah ditumbuhkan dapat dimurnikan agar didapatkan 1 jenis bakteri saja.
Pernyataan tersebut diperkuat oleh Annisah (2015) menyatakan bahwa biakan
murni merupakan biakan yang hanya mengandung satu jenis bakteri.
Bakteri dapat diperoleh hampir disetiap tempat, misalnya: di udara,
diantara helaian rambut, disela-sela gigi, di dalam tanah dan sebagainya. Untuk
mempelajari morfologi koloni bakteri, kita perlu menangkap dan munumbuhkan
pada medium lempeng terlebih dahulu. Pada umumnya koloni bakteri yang
tertangkap pada medium lempeng ini akan tumbuh setelah lebih kurang 1x24 jam.
Bakteri yang akan kita pelajar lebih lanjut sebaikanya juga buat biakan murni
Perbedaan warna tiap koloni tersebut dikarenakan perbedaan gizi dan
kondisi lingkungan dari tempat bakteri tersebut dikembangkan. Populasi bakteri
tumbuh sangat cepat ketika mereka disertakan dengan gizi dan kondisi
lingkungan yang memungkinkan mereka untuk berkembang. Melalui
pertumbuhan ini, berbagai jenis bakteri kadang-kadang akan menghasilkan koloni
yang khas dalam penampilan. Beberapa koloni mungkin akan berwarna, ada yang

19
berbentuk lingkaran, sementara yang lain tidak teratur. Karakteristik koloni
(bentuk, ukuran, warna, dll) yang diistilahkan sebagai "koloni morfologi"khas
bagi tiap jenis bakteri.
Koloni bakteri mempunyai bermacam-macam bentuk, diantaranya adalah
berbentuk bundar, bundar dengan tepian kerang, bundar dengan tepian timbul,
keriput, konsentris, tak beraturan dan menyebar, berbenang-benang, bentuk L,
bundar dengan tepian menyebar, filliform, rizoid dan kompleks. Tepian koloni
bakteri ada yang licin, berombak, berlekuk, tak beraturan, sikat, bercabang,
seperti wol, seperti benang dan dan seperti ikat rambut. Sedangkan elevasinya ada
yang datar, timbul, cembung, seperti tombol, berbukit-bukit, tumbuh ke dalam
medium dan seperti kawah. Morfologi koloni bakteri pada praktikum ini diamati
dari bentuk adalah Tak beraturan, bundar dengan tengah timbul dan bundar
dengan tepian timbul, tepiannya Seperti wol, berombak, licin, tak beraturan,
bentuk elevasi Timbul, datar serta variasi warna cream, tidak berwarna dan putih.

Jamur
Morfologi secara harfiah berarti ‘pengetahuan tentang bentuk’ (morphas).
Morfologi jamur merupakan ilmu yang memepelajari tentang bentuk jamur dan
mencakup bagian-bagiannya. Jamur benang yang berukuran kecil dan biasanya
bersifat uniseluler dapat diamati dengan mikroskop. Mikroskop merupakan alat
bantu yang memungkinkan kita dapat mengamati obyek yang berukuran sangat
kecil. Ada dua jenis mikroskop berdasarkan pada kenampakan obyek yang
diamati, yaitu mikroskop dua dimensi (mikroskop cahaya) dan mikroskop tiga
dimensi (mikroskop stereo). Sedangkan berdasarkan sumber cahayanya,
mikroskop dibedakan menjadi mikroskop cahaya dan mikroskop elektron. Pada
praktikum ini, identifikasi jamur dilakukan dengan menggunakan mikroskop
elektrik binokuler dengan mengamati sifta-sifat morfologinya dan fisologinya.
Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan jamur adalah faktor substrat,
kelembapan, suhu, derajat keasaman substrat (pH) dan senyawa-senyawa kimia di
lingkungannya. Substrat merupaan sumber utama nutrien bagi jamur.

20
 Kelembapan dari jamur merupaka faktor yang penting bagi pertumbuhan jamur,
kelmbapann yang diperlukan oleh jamur berbeda-beda tergantung pada jenisnya.
Suhu lingkungan juga berperan penting dalam bagi pertumbuhan, berdasarkan
suhu dapat dikelompokkan menjadai psikofil, mesofil dan termofil. pH substart
sangat penting karena enzim-enzim tertentu hanya akan mengurai substrat sesuai
dengan aktivitasnya pada pH tertentu. Senyawa-senyawa kimia yang tidak
diperlukan lagi akan dikeluarkan kelingkungan sebagai bentuk dari pengamanan
terhadap organisme lain. Morfologi koloni yang diamati saat praktikum pada
jamur dari variasi bentuk dapat berupa filotorm, bundar dengan tepian menyebar
dan berbenang-benang, variasi tepian daapt berupa tak beraturan, siliat, licin,
variasi elevasi dapat berupa timbul dan datar. Sedangkan warnanya mulai dari
biru, hijau muda dan hijau tua serta putih.

VII. SIMPULAN
A. STERILISASI DAN PEMBUATAN MEDIA
1. Sterilisasi media dapat dilakukan dengan menggunakan autoclave
2. Media NA dibuat dengan memanaskan larutan dari 20 gr media NA dan
aquades 1 liter selama ±30 menit
3. Media Mueller Hinton Agar dapat dibaut dengan memanaskan 38 gr media
Mueller Hinton Agar dengan 1 liter aquades selama ±30 menit
4. Media PDA dapat dibuat dengan mealrutkan 39 gr media DPA dengan
aquades sebanyak 1000 mL selama ±30 menit
5. Mikroorganisme harus ditempatkan pada media tumbuh yang steril agar tidak
terkontaminasi.

B. ISOLASI BIAKAN MURNI BAKTERI

1. Tahapan yang perlu dalam isolasi bakteri adalah tahapan sterilisasi alat,
menuang media padat (agar) pada cawan petri, inokulasi sampel atau bahan

21
 pada media padat atau agar, pemindahan inokula untuk diisolasi dan
penyimpanan media ke inkubator dan pensterilan kembali alat.
2. Isolasi biakan campuran menjadi biakan murni dapat menggunakan jarum ose
3. Teknik yang digunakan dalam mengisolasi bakteri dapat menggunakan
metode zig zag, kuadrat dan metode goresan sinambung.
4. Kegunaan dilakukan isolasi bakteri adalah untuk mendapatkan biakan murni
yang hanya terdiri dalam satu spesies
5. Dalam biakan murni bakteri yang digunakan adalah Nutrien Agar Sedangkan
jamur adalah PDA.

C. PENGAMATAN KOLONI BAKTERI DAN JAMUR

1. Morfologi koloni bakteri pada praktikum ini diamati dari bentuk adalah Tak
beraturan, bundar dengan tengah timbul dan bundar dengan tepian timbul,
tepiannya Seperti wol, berombak, licin, tak beraturan, bentuk elevasi Timbul,
datar serta variasi warna cream, tidak berwarna dan putih.
2. Morfologi koloni pada jamur dari variasi bentuk dapat berupa filotorm,
bundar dengan tepian menyebar dan berbenang-benang, variasi tepian daapt
berupa tak beraturan, siliat, licin, variasi elevasi dapat berupa timbul dan
datar. Sedangkan warnanya mulai dari biru, hijau muda dan hijau tua serta
putih.
3. Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri adalah media agar yang
digunakan serta proses melakukan isolasi.
4. Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan jamur adalah media agar yang
digunakan serta proses melakukan isolasi.
5. Perbedaan koloni jamur dan bakteri dapat diamati dari variasi bentuk, tepian,
elevasi dan warna.

22
 MEDAN, 02 OKTOBER 2019

ASISTEN LABORATORIUM PRAKTIKAN

Nabiilah Hanafiah
Mangombar M.T. Pakpahan
4153220012
4173141039

23
 DAFTAR PUSTAKA

Adams, M.R. (2000). Food Microbiology. New York: University of Surrey Guildford.

Annisah; Rahayu. (2015). Media Alternatif Untuk pertumbuhan Bakteri

Menggunakan Sumber Karbohidrat Yang Berbeda. Jurnal Pendidikan
Biologi. 2(1): 1-12

Buckle. (2007). Mikrobiologi Terapan. Yogyakarta: Universitas Gajah Mada

Fitri, A., ddk. (2014) Peralatan Sterilisasi dan Media Pertumbuhan Mekroba. Jurnal
Praktikum Mikrobiologi Dasar. 2(1):12-34.

Khaeruni, Andi dan Vit Neru Satrah. (2017). Penuntun Praktikum Mikrobiologi
Pangan. Kendari: Universitas Halu Oleo.

Machmud, M. 2013. Teknik Penyimpanan dan Pemeliharaan Mikroba. Bogor: Balai

Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan.

Pracaya. (2007). Hama Dan Penyakit Tanaman. Jakarta: Penebar Swadaya

Priyani, S. (2006). Pengelolaan Cipta Digital dan Analisis Kuantitatif dalam

Karakterisasi Citra Mikroskopik. Jurnal Mikroanalisis. 13(1): 1-13.

Suardani, dkk. (2014). Identifikasi E Colli 0157:H7 dari Feses Ayam dan Uji Profil
Hemolisisinya Pada Media Agar Darah. Jurnal kedokteran hewan. 8(1): 83-
92.

24
Suhardi, S.H., Koesnandar, D. K. Indriani, H. Arnaldo. (2015). Pedoman
Keselamatan Kerja di Laboratorium Mikrobiologi dan Rumah Sakit. PT.
Multazam Mitra Prima. Jurnal Biosafety. 2(1): 17-32.

Winiati Pudji. (2000). Aktivitas Antimikroba Bumbu Masakan Tradisional Hasil

Olahan Industri terhadap Bakteri Patogen dan Perusak. Buletin Teknologi
dan Industri Pangan. 11(2):117-131.

25