Kami melaporkan catatan pertama larva amphioxus di plankton dari pulau Rapa Nui (Chili).

ABSTRAK

Zooplankton disampel menggunakan jaring Bongo yang miring selama survei oseanografi di
bulan April dan September 2015. Sebanyak empat larva dikumpulkan di wilayah pesisir Rapa Nui
pada bulan April dan 13 pada bulan September. Larva diidentifikasi sebagai Epigonichthys
maldivensis (Forster Cooper, 1903) (Cephalochordata Branchiostomatidae) menggunakan karakter
morfologis dan genetik. Kolom air di daerah ini menyajikan suhu rata-rata 21,2 ° C, salinitas rata-rata
35,7 ‰ dan 4,94 ml / L oksigen terlarut pada bulan April, dan 20 ° C dan 35,75 ‰ salinitas rata-rata
pada bulan September. Amphioxus telah dilaporkan memainkan peran penting dalam jaring
makanan laut mentransfer sejumlah besar produksi mikroba ke tingkat trofik yang lebih tinggi,
karena ini peran mereka dalam plankton dan benthos Rapa Nui sebagai orang dewasa dapat menarik
karena pulau Paskah terletak di pekarangan oligotropik. dari samudera Pasifik Selatan di mana
jaringan trofik mikroba diperkirakan akan mendominasi. Catatan ini meningkatkan keanekaragaman
hayati plankton Rapa Nui dan memperluas distribusi geografis E. maldivensis yang dibatasi hanya
untuk Pasifik Barat dan Tengah dan Samudra Hindia.

PERKENALAN

Amphioxus atau lancelets (Chordata) terdiri dari subphylum Cephalochordata (Schubert et al., 2006);
yang dibentuk oleh tiga genera: Branchiostoma Costa, 1834, Epigonichthys Peters, 1876 dan
Asymmetron Andrews, 1893 (Kon et al., 2007). Amphioxus adalah organisme laut pemakan
penyaring yang saat orang dewasa menggali di dalam pasir, kerikil atau endapan cangkang di
perairan tropis dan / atau iklim sedang di sekitar lautan dunia (Bertrand & Escriva, 2011). Itu

penyaringan dilakukan melalui mulut bersilia tanpa rahang (Vergara et al., 2011). Amphioxus
ditemukan secara umum di perairan dangkal dekat pantai (kedalaman 0,5 hingga 40 m) dan banyak
spesies lebih menyukai habitat pasir kasar dan kerikil (Desdevises et al., 2011). Mereka hidup di
berbagai habitat pantai, muara, laguna pantai, pantai terbuka dan delta sungai (Laudien et al., 2007;

Chen, 2008). Namun, sedikit yang diketahui tentang peran ekologis organisme ini (Vergara et al.,
2011). Selain itu, beberapa amphioxus telah dianggap sebagai spesies yang terancam punah
(Kubokawa et al., 1998). Faktor lingkungan sebagai perubahan suhu dan salinitas merupakan
penentu dalam siklus hidup beberapa spesies amphioxus (Webb, 1956a; Webb, 1956b; Webb & Hill,
1958). Sebagai akibatnya, populasi amphioxus bermigrasi antara musim dingin dan

musim panas (Webb, 1971), dan larva digambarkan terbatas pada perairan dengan salinitas dan
suhu tinggi (Webb & Hill, 1958). Durasi dan waktu musim pemijahan bervariasi antara spesies
(Stokes & Holland, 1996; Holland, 2011). Ketika gamet dilepaskan di dalam air, terjadi fekundasi dan
embrio bertahan di plankton (Bertrand & Escriva, 2011) hingga metamorfosis, ketika mereka
bermigrasi ke pasir dan menjadi dewasa bentik.

Beberapa penulis telah mempelajari zooplankton dan meroplankton di sekitar Pulau Paskah (Castro
& Landaeta, 2002; Palma & Siva, 2006; Mujica, 2006) sebagian besar hasil zooplankton berasal dari
pelayaran kepulauan CIMAR pada November 1999. Namun, tidak ada catatan tentang larva amfibi
atau orang dewasa di daerah tersebut. Dalam karya ini kami menggambarkan keberadaan larva
amphioxus dari Rapa Nui plankton (Chili) untuk pertama kalinya. Larva ditemukan di stasiun dekat
pantai di sekitar pulau pada bulan April dan September 2015.

METODE DAN MATERI

Sampel Zooplankton dan pengukuran hidrografi dikumpulkan di wilayah pantai Pulau Paskah atau
Rapa Nui (27 ° 13 'S - 109 ° 37' W), Chili, pada bulan April dan September 2015. Karakterisasi
hidrografi kolom air dilakukan dengan menggunakan set profil CTD di kedua bulan (Seabird 18).
Sampel Zooplankton dikumpulkan dengan derek miring dari kedalaman 300 m ke permukaan,
menggunakan jaring Bongo dengan jaring 300 μm dan diameter mulut 60 cm. Volume air sampel
diperkirakan menggunakan flowmeter mekanik (General Oceanics) yang terpasang pada jaring.
Sampel diawetkan dalam etanol 96%, sampai identifikasi dan kuantifikasi laboratorium. Dalam
sampel ini ditemukan tujuh belas larva amphioxus. Menimbang bahwa tidak ada informasi tentang
morfologi larva amphioxus tersedia, tiga larva digunakan untuk melakukan identifikasi genetik.
Setelah itu deskripsi morfologis sederhana dari larva juga disediakan.

Identifikasi genetik

Tiga larva digunakan untuk analisis genetik. Ekstraksi DNA dilakukan dengan menggunakan Qiagen
QIAamp kit (Mississauga, Kanada). Gen COI mitokondria diamplifikasi menggunakan protokol dan
primer dijelaskan oleh Folmer et al. (1994) dengan 56ºC sebagai suhu anil. Urutan maju dan mundur
dilakukan di Pontificia Universidad Católica de Chile dan disejajarkan dengan mata menggunakan
perangkat lunak ProSeq v.2.9 (Filatov, 2002). Haplotype disimpan di Genbank (Nomor Aksesi:
KU201542). Alat Blast digunakan untuk menentukan kesamaan dengan urutan yang disimpan di
Genbank.

Untuk menentukan hubungan nukleotida di antara lancelet, analisis filogenetik (NJ) yang dilakukan
dengan tetangga dilakukan menggunakan perangkat lunak Mega 6.0 (Tamura et al., 2013).
Menggunakan bootstrap 10.000 ulangan, analisis menguji konsistensi masing-masing cabang di
pohon, mengelompokkan urutan dengan komposisi nukleotida yang serupa. Dengan menggunakan
metode ini, urutan tak dikenal yang diperoleh dalam penelitian ini dapat dikelompokkan dengan
sampel spesifik di wilayah geografis lainnya.

HASIL DAN DISKUSI

Sebanyak 4 larva amphioxus ditemukan di daerah pantai Rapa Nui pada bulan April dan 13
September 2015. Larva diidentifikasi sebagai Epigonichthys maldivensis (Forster Cooper, 1903)
(Cephalochordata Branchiostomatidae) (Gbr. 1). Pada bulan April, di stasiun selatan, larva ditemukan
hingga kedalaman 200 m dan kelimpahannya 0,8 individu per 1000 m3, sementara di stasiun
tenggara, kelimpahan larva E. maldivensis adalah 2 individu per 1000 m3 dan ditemukan antara 300
m kedalaman dan permukaan. Larva amphioxus berarti kelimpahan pada bulan September adalah 2
orang per 1000 m3 dan mereka ditemukan di stasiun selatan. Karakteristik lingkungan dari daerah
tersebut adalah suhu air rata-rata 21,2 ° C, salinitas rata-rata 35,7 ‰ dan 4,94 ml / L oksigen terlarut
pada bulan April, dan 20 ° C dan 35,75 ‰ salinitas rata-rata pada bulan September.

Identifikasi genetik. Satu haplotipe dari 550 bp seperti yang diperoleh untuk larva. Analisis gen COI
menunjukkan hubungan yang jelas setelah kami dengan Epigonichthys maldivensis (Gbr. 2). Analisis
Blast menunjukkan kesamaan 99% dengan satu urutan E. maldivensis (Nomor Aksesi: AB110093.1),
disimpan oleh Nohara et al. (2005) dan diperoleh dari satu individu yang dikumpulkan di Pulau
Kuroshira, Jepang. Kedua urutan hanya berbeda dalam 6 bp. Epigonichthys maldivensis adalah
spesies tropis yang distribusinya hanya terbatas di Pasifik Barat dan Tengah dan Samudra Hindia
(Richardson & McKenzie, 1994; Poss & Boschung, 1996; Lin et al., 2015), hasil ini memperluas
jangkauan geografisnya. spesies ke pulau Rapa Nui. Lancelets menunjukkan tahap larva planktonik
selama satu minggu hingga satu bulan (Wickstead, 1970; Wu et al., 1994; Stokes & Holland, 1996)
dan di Pulau Bagian Timur terdapat pada bulan April dan September 2015. Komunitas bentik dari
Rapa Nui adalah sangat miskin spesies dibandingkan dengan terumbu di Pasifik tengah dan barat
(Friedlander et al., 2013), keberadaan larva amphioxus, menyiratkan bahwa orang dewasa
amphioxus mungkin hidup di benthos yang akan berkontribusi pada kekayaan spesies benthos.
Selain itu, sejarah anekdotal dari nelayan lokal Rapa Nui melaporkan, di beberapa daerah dan
tanggal, keberadaan filamen putih seperti rambut di bagian bawah, cenderung menguatkan temuan
kami; filamen ini bisa menjadi amfibi dewasa. Catatan ini meningkatkan nilai keanekaragaman hayati
Rapa Nui. Selain itu, karena amphioxus telah dilaporkan memainkan peran kunci dalam jaring
makanan laut mentransfer sejumlah penting produksi mikroba ke tingkat trofik yang lebih tinggi
(Chen et al., 2008), peran mereka dalam plankton dan benthos Rapa Nui sebagai orang dewasa bisa
menarik karena pulau Paskah terletak di pilin oligotrofik samudera Pasifik Selatan di mana jaringan
trofik mikroba diperkirakan akan mendominasi. Akhirnya, sekuens genom amphioxus baru akan
sangat penting untuk genomik komparatif pada tingkat antar dan intra spesies.