1. Apa saja macam-macam uji preklinik?

Sumber : DEWA KETUT MELES. 2010. PERAN UJI PRAKLINIK DALAM BIDANG
FARMAKOLOGI: UNAIR

2. Apa manfaat dan tujuan dari uji preklinik?

Manfaat
 uji ini diperoleh informasi tentang efikasi (efek farmakologi), profil
farmakokinetik dan toksisitas calon obat
Tujuan
penelitian terhadap uji pra klinik antara lain adalah untuk mengidentifikasi potensi
terjadinya toksisitas pada manusia; merancang berbagai uji untuk menetapkan
mekanisme toksis lebih jauh; dan memperkirakan toksisitas yang spesifik dan
paling relevan untuk dipantau dalam uji-uji klinis

Hedi R. DewotoPengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi Fitofarmaka,

Departemen Farmakologi, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta.

Termasuk dalam ketentuan yang diatur dalam Peraturan Menteri, antara lain,
adalah pengembangan KomiteKesejahteraan Hewan Nasional untuk membina
komisi kesejahteraan hewan laboratorium di berbagai instansi dalamrangka
pendidikan, pelatihan, penelitian, dan pengembangan.

 Exploratory (penyelidikan) : untuk memahami mekanisme biologis, apakah

termasuk mekanisme dasar yang normal atau mekanisme yang
berhubungan dengan fungsi biologis yang abnormal.
 Explanatory (penjelasan) : untuk memahami lebih banyak masalah biologis
yang kompleks.
 Predictive (perkiraan) : bertujuan untuk menentukan dan mengukur akibat
dari perlakuan, apakah sebagai cara untuk pengobatan penyakit atau
untuk memperkirakan tingkat toksisitas suatu senyawa kimia yang
diberikan.

3. Apa kelebihan dan kekurangan dari uji preklinik?

Kelemahan :
 Uji toksisitas termasuk menyita waktu dan mahal.
 Diperlukan hewan percobaan jumlah besar untuk mendapat data yang valid (pada in
vivo min 30)
 Pada indeks terapoetik (indeks pengobatan : range pada dosis mana dapat berefek
dan pada dosis berapa dia dapat meningkatkan resiko terjadinya toksisitas. Jarak
antara ED50 dan LD50) dan data toksisitas dari hewan ke manusia dapat
memberikan perkiraan sebagian besar toksisitas. Ada syarat tersendiri untuk bisa
dikonversikan ke manusia.
 Untuk kepentingan statistik tidak bisa mengetahui efek samping yang jarang terjadi

Kelebihan :
 Dapat memastikan sebuah OT mempunyai khasiat
 Memberikan keamanan lebih sebelum diberikan ke manusia
 Mengetahui dari ESOT dan toksisitas secara spesifik seperti gejala toksik, cara
kematian.
 (Hedi R. Dewoto. Pengembangan OT Indonesia menjadi Fitofarmaka, FKUI)

4. Apa saja faktor-faktor yang mempengaruhi hasil percobaan?

5. Bagaimana bisa uji preklinik dapat memperkirakan dari tolerabilitas, keamanan,
dan khasiat suatu obat?
 pada kesamaan struktur dan fungsi dari masing-masing organ yang
menyusun tubuh hewan dan manusia khususnya hewan yang berlambung
tunggal ( kuda,gajah,tapir,harimau, anjing,unggas,kucing).
 Bahkan pendekatan secara ultrastruktur dan molekuler terhadap organel
yang menyusun sel termasuk membran sitoplasma, ribosom, mitochondria,
reticulum endoplasmik, golgi aparatus, lisosom, peroksisom antara sel
hewan dan manusia adalah sama. mekanisme biotransformasi dan
mekanisme kerja obat di dalam tubuh hewan dan manusia adalah sama
 pendekatan berdasarkan imunofarmakologi terhadap
 respons obat yang berpengaruh terhadap timbulnya respons imun
 (imunomudolator) pada tubuh hewan dan manusia adalah tidak
Berbeda  peran leukosit polimorfonuklear (PMN) yakni neutrofil,
basofil dan eosinofil, dan peran dari leukosit mononuklear
 seperti monosit dan limfosit dalam pembetukan respons imun yang bersifat
nonspesifik, serta peran sel B dan Sel T dalam pembentukan respons
imum spesifik adalah sama.
 Faktor yang berpengaruh terhadap dosis obat yang diberikan pada
setiap individu hewan dan manusia adalah sama yakni berdasarkan
berat badan, umur, jenis kelamin, kondisi tubuh, adanya toleran, faktor
genetik seperti adanya polimorfisme
• berdasarkan penelitian Paget, G dan Barner, JM sejak tahun 1964 telah meletakan
dasar-dasar ekstrapolasi/konversi dosis obat antara beberapa spesies hewan seperti
mencit, tikus, marmut, kelinci, anjing, kucing, kera dan manusia, yang sampai saat ini
masih dipakai di seluruh dunia khususnya dalam riset tentang obat.
• Artinya dosis obat yang digunakan pada hewan-hewan tersebut dapat dipakai
untuk memprediksi besaran dosis apabila digunakan untuk manusia dengan tujuan
yang sama, demikian pula sebaliknya dosis obat yang telah digunakan pada
manusia dapat pula diprediksi besaran dosis yang akan digunakan pada hewan
dengan tujuan penggunaan yang sama.
DEWA KETUT MELES. 2010. PERAN UJI PRAKLINIK DALAM BIDANG
FARMAKOLOGI: UNAIR

6. Bagaimana syarat hewan coba yang digunakan pada uji pre klinik?

Hewan Uji
Ada beberapa cara mengorbankan hewan uji pada uji toksisitas; pada
prinsipnya hewan uji dikorbankan sesuai dengan kaidah-kaidah cara dan
teknik pengorbanan hewan sesuai dengan ethical clearence deklarasi Helsinki
serta tidak mempengaruhi hasil uji toksisitas.

1. Eutanasi
Sebelum hewan uji dikorbankan, dilakukan anestesi terlebih dahulu. Hewan
dipegang secara hati-hati tanpa menimbulkan rasa takut, lalu hewan
dikorbankan dengan salah satu teknik mengorbankan hewan di suatu
tempat terpisah dan dijaga agar tidak ada hewan hidup di sekitarnya.
2. Teknik mengorbankan hewan uji ada beberapa cara antara lain :
a. Cara dislokasi leher untuk hewan kecil seperti mencit, tikus.
b. Cara anestesi secara inhalasi atau penyuntikan.
c. Cara pengeluaran darah melalui vena jugularis atau arteri karotis.

Kriteria Hewan Uji

- Hewan yang digunakan untuk uji toksisitas harus dipertimbangkan
berdasarkan sensitivitas, cara metabolisme sediaan uji yang serupa
dengan manusia, kecepatan tumbuh serta mudah tidaknya cara
penanganan sewaktu dilakukan percobaan.
- Hewan pengerat merupakan jenis hewan yang memenuhi persyaratan
tersebut diatas, sehingga paling banyak digunakan pada uji toksisitas.
- Hewan yang digunakan harus sehat; asal, jenis dan galur, jenis kelamin,
usia serta berat badan harus jelas. Biasanya digunakan hewan muda
dewasa, dengan variasi bobot tidak lebih dari 20%.

Sumber : PerKBPOM__Nomor_7_Tahun_2014_tentang_in_vivo.

 Berat badan lebih kecil dari 1 kg

 Mudah di ambil darahnya dan jumlah darah yang dapat diambil cukup
banyak

 Mudah dipegang dan dikendalikan

 Pemberian materi mudah dilakukan dengan berbagai rute (oral, subkutan)

  Mudah dikembangbiakan dan mudah dipelihara di laboratorium

 Lama hidup relative singkat

 Fisiologi diperkirakan sesuai/identik dengan manusia/hewan yang dituju

Sumber : Kusumawati. 2004. Bersahabat dengan hewan coba. Yogyakarta:

Gadjah Mada University Press

 Bebas dari mikroorganisme pathogen.

Adanya mikroorganisme patogen pada tubuh hewan sangat mengganggu

jalannya reaksi pada pemeriksaan penelitian  segi ilmiah hasilnya kurang
dapat dipertanggungjawabkan.

 Mempunyai kemampuan dalam memberikan reaksi imunitas yang baik. Hal

ini ada hubungannya dengan persyaratan pertama.

 Kepekaan terhadap sesuatu penyakit. Hal ini menunjukkan tingkat

suseptibilitas hewan terhadap penyakit.

 Performa atau prestasi hewan percobaan yang dikaitkan dengan sifat

genetiknya.

Sumber : Hau, J., & Hoosier Jr., G. L. (2003). Handbook of Laboratory Animal
Science Second Edition. Boca Raton: CRC Press

Selain itu pemilihan jenis hewan yg dipilih pun harus tepat menggambarkan
kondisi yg diinginkan. Contohnya :
- untuk obat fertilitas digunakan hewan uji tikus/rat galur Sprague Dowley/SD
bukan Wistar atau jenis tikus lainnya, krn tikus jenis SD memiliki anak banyak shg
pengamatan akan lbh baik dg jumlah sample yg banyak.

- Utk uji painkiller digunakan mencit/mice jika utk menilai nyeri ringan yakni
dengan penyuntikan asam asetat glacial ke peritoneum mencit, tapi jika
sasarannya nyeri tekanan digunakan tikus bias Wistar atau SD, karena tikus akan
dijepit ekornya atau telapak jarinya dengan alat tertentu, sementara kalo nyeri
berupa panas, digunakan boleh mencit atau tikus krn hewan akan diletakkan di
hot plate.

- Utk antidiabetika, seharusnya digunakan babi atau sapi yg pankreasnya

banyak kemiripan dg manusia, namun dengan tikus sudah cukup dengan adanya
keterbatasan subyek uji
- Utk antiemetik/anti muntah digunakan burung merpati, krn bisa dirangsang
utk muntah berkali-kali sbg kuantifikasi, sementara hewan lain hanya muntah
sekali.

- Utk obat antihipertensi, digunakan kucing atau anjing teranestesi, krn system
kardiovaskulernya paling mirip dg manusia

- Utk obat antiinflamasi digunakan baik tikus yang disuntik karagenan di bawah
kulitnya shg melepuh atau telinga mencit disuntik croton oil, bahkan kaki tikus
sering dipotong utk menimbang udem yg terbentuk

- Utk asam urat digunakan ayam/burung yg dikasih makan jus hati ayam (ayam
makan ayam) krn metabolisme asam urat pada manusia mirip dg yg terjadi dg
biokimiawi di keluarga burung.

- Uji stamina digunakan tikus atau mencit, krn tubuhnya kuat dan tahan di
dalam air, hewan diuji dg berenang dan lari di treadmill.

- Uji libido, digunakan tikus dalam keadaan estrus/siap menerima pejantan.

- Utk uji kanker, digunakan punggung tikus yg diimplan dg sel kanker, atau
paru-paru tikus setelah dipejankan benzo(a)pirena

Hasilnya berupa : efek farmakologi, dosis terapi ED50=dosis yang menghasilkan

50% efek maksimum.
Sulaksono, M. E. (1987). Dilema Pada Hewan Percobaan Untuk Pemeriksaan
Produk Biologis. Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan RI.

Cara Penandaan Hewan Uji

Penandaan hewan uji dilakukan dengan cara memberikan larutan asam

pikrat 10% dalam alkohol. Penandaan dilakukan dengan tujuan membedakan
antara hewan satu dengan yang lainnya.

Cara Memegang (Handling) Hewan Uji

Cara memegang hewan uji jenis rodensia berbeda antara tikus dan mencit pada saat
pemberian sediaan uji secara oral. Pemegangan yang benar sangat diperlukan
sewaktu pemberian sediaan uji, karena pemegangan yang salah dapat berakibat
fatal.
Cara pemegangan yang salah dapat menyebabkan antara lain:
- Sediaan uji yang diberikan tidak dapat masuk kedalam lambung tetapi
masuk kedalam paru-paru, sehingga mengakibatkan kematian hewan uji.
- Terjadinya kecelakaan kerja seperti tergigit oleh hewan.

Cara pemegangan hewan yang benar :

Sumber : PerKBPOM__Nomor_7_Tahun_2014_tentang_in_vivo.
7. Apa saja hewan coba yang dapat digunakan dalam uji preklinik?

8. Apa saja kendala dalam pelaksanaan uji preklinik

- Pada uji toksisitas : menyita waktu yg lama dan biaya yang mahal
- Dibutuhkan sampel yang bayak untuk mendapatkan data yang valid
- Ekstrapolasi indeks teraupetik dan data toksisitas dari ewan ke manusia dapat
memberikan perkiraan sebagian bsr toksisitas tetpai tidak seluruhnya.