ANALISISBIOAUTOGRAFI FRAKSI DAUN KACANG PANJANG

(Vignaunguiculata(L.)Walp) TERHADAP
Bacillus subtilisDANEscherichia coliSERTA
KARAKTERISASIDENGAN
SPEKTROFOTOMETERIR

HASIL

Oleh :

RATNA DUMILAH

143110061

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS TULANG BAWANG LAMPUNG
BANDAR LAMPUNG
APRIL 2019
 ANALISIS BIOAUTOGRAFI FRAKSI DAUN KACANG
PANJANG (Vigna unguiculata (L.)Walp) TERHADAP
Bacillus subtilis DANEscherichia coliSERTA
KARAKTERISASI DENGAN
SPEKTROFOTOMETERIR

Oleh :

RATNA DUMILAH
143110061

Hasil
Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Farmasi (S.Farm)

Pada

Jurusan Farmasi
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
143110055

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS TULANG BAWANG LAMPUNG
BANDAR LAMPUNG
APRIL 2019
 ANALISIS BIOAUTOGRAFI FRAKSI DAUN KACANG
PANJANG (Vigna unguiculata (L.)Walp) TERHADAP
Bacillus subtilis DANEscherichia coliSERTA
KARAKTERISASI DENGAN
SPEKTROFOTOMETERIR

Oleh :
RATNA DUMILAH
143110061

Daun kacang panjang merupakan salah satu tanaman yang memiliki khasiat
sebagai antibakteri. Senyawa yang berperan sebagai antibakteri adalah saponin,
polifenol, steroid dan alkalod. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
membuktikan adanya aktivitas antibakteri fraksi etanol dan n-heksan daun kacang
panjang danmengkarakterisasi gugus fungsi senyawa aktif dari daun kacang
panjang (Vigna unguiculata (L.) Walp)dengan spektrofotometer IR.Proses
ekstraksi daun kacang panjang dilakukan dengan metode maserasi menggunakan
pelarut etanol 70%. Ekstrak dilanjutkan dengan proses fraksinasi dengan pelarut
etanol, n-heksan dan kloroform. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan
metode sumuran dengan konsentrasi 100%, kontrol positif ciprofloxacin dan
kontrol negatif DMSO. Uji kandungan senyawa menggunakan metode
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dengan fase diam menggunakan plat silika G60
F254 dan perbandingan fase gerak kloroform :metanol : air (2:5:3) (v/v). Uji
bioautografi menggunakan metode kontak yaitu plat KLT hasil elusi diletakkan
diatas media NA yang berisi suspensi bakteri selama 3 jam. Hasil uji antibakteri
Fraksi etanol daun kacang panjang paling besar yaitu pada konsentrasi 100%
dengan diameter zona hambat sebesar 15,31 pada B. Subtilis sedangkan 12,88
pada E. coli. Hasil KLT menunjukkan adanya senyawa polifenol dengan harga Rf
0,81 dan senyawa alkaloid dengan harga Rf 0,54. Hasil Bioautografi
menunjukkan adanya zona hambat dengan harga Rf 0,81 pada bakteriB.subtilis
dan E. coli yang merupakan senyawa polifenol. Karakterisasi dengan
spektrofotometer IR didapatkan gugus fungsi O-H fenol, C=C aromatik, C-O-C
karbonil.

Kata Kunci :Vigna unguiculata L(Walp). Bacillus subtilis, Escherichia coli,

KLT, Bioautografi dan Spektrofotometer IR.
 Abstracs

BIOAUTOGRAPHY ANALISIS OF FRACTION OF LONG BEAN LEAVES

(Vigna unguiculata L (Walp) ON Bacillus subtilis
and Escherichia coli and characterization
by IR Spectrophotometer

by:
RATNA DUMILAH
143110061

Long bean leaves are one of the plants that have antibacterial properties. Compounds that act as
antibacterial are saponins, polyphenols, steroids and alkaloids. The purpose of this study was to
prove the antibacterial activity of ethanol fraction and n-hexane of long bean leaves and to
characterize functional groups of active compounds from long bean leaves (Vigna unguiculata
(L.) Walp) with IR spectrophotometers.The extraction process of long bean leaves was done by
maceration method using 70% ethanol. The extract was continued with the fractionation process
with ethanol, n-hexane and chloroform solvents. Antibacterial activity testing using a well method
with 100% concentration, positive ciprofloxacin control and negative control DMSO. The
compound content test used the Thin Layer Chromatography (TLC) method with the stationary
phase using silica plate G60 F254 and the comparison of the mobile phase of chloroform:
methanol: water (2: 5: 3) (v / v). The bioautography test using the contact method, namely the
elution TLC plate, was placed on the NA medium containing a bacterial suspension for 3 hours.
Antibacterial test results The biggest ethanol fraction of long bean leaves is at a concentration of
100% with a diameter of inhibitory zone of 15.31 in B. Subtilis while 12.88 in E. coli. The results
of TLC showed the presence of polyphenol compounds at a price of Rf 0.81 and an alkaloid
compound at a price of Rf 0.54. Bioautography results showed a inhibition zone with
a price of Rf 0.81 in B. subtilis and E. coli bacteria which are polyphenol
compounds. Characterization by IR spectrophotometer obtained O-H phenol, C
= C aromatic, C-O-C carbonyl groups.

Keywords: Vigna unguiculata L(Walp). Bacillus subtilis, Escherichia coli, KLT,

Bioautography dan IR Spectrophotometer.
 HALAMAN PERSETUJUAN

Judul Skripsi :Analisis Bioautografi Fraksi Daun Kacang Panjang

(Vigna Unguiculata (L.) Walp)TerhadapBacillus
Subtilis DanEscherichia Coli Serta Karakterisasi
Dengan Spektrofotometer IR
Nama Mahasiswa :Ratna Dumilah
No. Pokok Mahasiswa : 143110061
Jurusan : Farmasi
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

MENYETUJUI

Komisi pembimbing

Pembimbing I, Pembimbing II,

Laila Susanti., M.Si Isbiyantoro.,S.Si., Apt

Ketua Program Studi Farmasi

Akhmad Rokiban, AP., S.Si, Apt

 MENGESAHKAN

1. Tim Penguji

Ketua : Laila Susanti., M.Si …….........................

Sekretaris : Isbiyantoro, S.Si., Apt ………......................

Penguji Utama : Yuli Wahyu Trimulyani, S.Pd., M.Si ………...............

2. Dekan Fakultas MIPA Universitas Tulang Bawang

Lilik Koernia Wahidah, S.Farm., MPH.,Apt

NPP. 179.6.02.11.013

Tanggal Lulus Ujian Skripsi :

 SURAT PERNYATAAN KEASLIAN

Yang bertanda tangan di bawah ini ;

Nama : RATNA DUMILAH

NPM : 143110061
Jurusan : Farmasi
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Menyatakan dengan sebenarnya, bahwa skripsi/karya ilmiah yang saya tulis ini
adalah benar-benar merupakan hasil karya tulis sendiri, dan bukan berasal dari
karya penulis orang lain, ataupun jiplakan dari skripsi orang lain.

Apabila ternyata dikemudian hari terbukti bahwa skripsi ini merupakan plagiat
skripsi lain/menggunakan jasa orang lain dalam pembuatan skripsi/menyalin
sepenuhnya karya skripsi orang lain, maka saya bersedia dikenakan sanksi
akademik berupa pencabutan gelar kesarjanaan.

Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya.

Bandar Lampung,

Yang membuat,

(Ratna Dumilah)
 PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI TUGAS AKHIR UNTUK
KEPENTINGAN AKADEMIK

Sebagai Civitas Akademika Universitas Tulang Bawang (UTB) Lampung, saya

yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Ratna Dumilah

NPM : 143110061
Jurusan : Farmasi
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Jenis Karya : Skripsi

Demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada

Universitas Tulang Bawang (UTB) Lampung, Hak Bebas Royalti Nonekslusif
(Non-Exclusive Royalty Free Right) atas karya ilmiah saya yang berjudul
“Analisis Bioautografi Fraksi Daun Kacang Panjang (Vigna unguiculataL
Walp) Sebagai Antibakteri TerhadapBacillus subtilis Dan Escherichia
coliSerta Karakterisasi Dengan Spektrofotometer IR” beserta perangkat yang
ada (jika diperlukan). Dengan Hak bebas Royalti Noneklusif ini, Univesitas
Tulang Bawang (UTB) Lampung berhak menyimpan, mengalih media/formatkan,
mengelola dalam bentuk pangkalan data (database), merawat, dan
mempublikasikan tugas akhir saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai
penulis/pencipta dan sebagai pemilik hak cipta.

Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya.

Dibuat di : Bandar Lampung,

Pada tanggal :

Yang Menyatakan,

(Ratna Dumilah)
 PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI

Skripsi sarjana farmasi yang tidak dipublikasikan, terdaftarkan dan tersedia di

perpustakaan fakultas dan perpustakaan Universitas Tulang Bawang Lampung
dan terbuka untuk umum dengan ketentuan bahwa hak cipta ada pada Universitas
Tulang Bawang Lampung.Referensi keperpustakaan diperkenankan dicacat tetapi
pengutipan atau peringkasan hanya dapat dilakukan dengan ijin penulis harus
disertai dengan kebiasan ilmiah untuk menyebutkan sumbernya.

Memperbanyak menerbitkan atau sebagian atau seluruh skripsi ini harus seizin
dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tulang
Bawang Lampung. Perpustakaan yang meminjamkan skripsi ini untuk keperluan
anggotanya harus mengisi nama dan tanda tangan peminjaman serta tanggal
peminjaman.
 RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan pada tanggal, 23 Maret 1996 di Pringsewu Lampung, sebagai

anak pertamapasangan Bapak Solikhin (Alm) dan Ibu Wantiyah.

Penulis mengawali masa pendidikan di TK Aisyah Gadingrejo pada tahun 2001-

2002, dilanjutkan di SD N 3 Yogyakarta Gadingrejo pada tahun 2002-
2008lalupenulis melanjutkan pendidikan di Sekolah Menengah Pertama Negeri
3Gadingrejo pada tahun 2008-2011, dan dilanjutkan di Sekolah Menengah Atas
Muhammadiyah 1 Pringsewu pada tahun 2011-2014. Pada tahun 2014 Penulis
tercatat sebagai Mahasiswa di Universitas Tulang Bawang (UTB) Lampung,
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (MIPA), Jurusan Farmasi.

Pada tahun 2017 penulis melaksanakan Kuliah Kerja Lapangan di BBPOM (Balai
Besar Pengawasan Obat dan Makanan) Bandar Lampung, PT Dankos Farma
Jakarta, B2POT Tawangmangu, Fakultas Farmasi Universitas Udayana Bali dan
Nadis Herbal Bali.
 MOTTO

“ Jangan takut ! Semangat! Iringi dengan usaha dan berdoa,

Insyaallah Bismillah”

(Ratna Dumilah)

“Allah tidak membebani seseorang melainkan sesuai dengan

kadar kesanggupannya. “

(Q.S Al-Baqarah: 286)

“Dan janganlah kamu berputus asa dari rahmat Allah.

Sesungguhnya tiada berputus asa dari rahmat Allah melainkan
orang orang yang kufur (terhadap karunia Allah).”

(Q.S Yusuf: 87)

“Barang siapa menelusuri jalan untuk mencari ilmu padanya,

Allah akan memudahkan baginya jalan menuju surga.”

(HR. Muslim)
 PERSEMBAHAN

Bismilahirrahmanirrahiim

“Dia yang memberikan hikmah (ilmu yang berguna) kepada siapa yang
dikehendaki-nya. Barang siapa yang mendapat hikmah itu, sesungguhnya ia telah
mendapat kebajikan yang banyak. Dan tiadalah yang menerima peringatan
melainkan orang-orang yang berakal.”(Q.s Al-Baqarah :269)

Kado Kecilku untuk mereka

Alhamdulillahirabbil’alamin…

Sepercik keberhasilan yang engkau hadiahkan pada hamba ya Rabb semoga

sebuah karya mungil ini menjadi amal shaleh bagiku dan menjadi kebanggaan
bagi keluarga tercinta terutama untuk orang tuaku (Bapak dan Mama).

Yang utama dari segalanya …

Sembah sujud dari syukur Kepada ALLAH SWT.Taburan cinta dan kasih sayang-
Mu telah memberikan kekuatan, membekaliku dengan ilmu serta
memperkenalkan ku dengan cinta.Atas karunia dan kemudahan yang engkau
berikan akhirnya skripsi yang sederhana ini dapat terselesaikan. Sholawat dan
salam selalu terlimpahkan kehariban Rasulullah Muhammad SAW. Dan
kupersembahkan karya sederhana ini kepada:

kedua orang tua ku tercinta yang tak pernah henti memberikan cinta dan kasih
sayang. Bapak Solikhin (Alm) dan ibuWantiyah atas do’a yang tak pernah putus,
semangat, dukungan, dorongan dan bantuan dengan penuh keikhlasan serta
kesabaran kepada penulis selama dalam mengikuti pendidikan ini hingga
penyusunan skripsi ini.

keluarga Besarku terima kasih atas do’a dan motivasi selama ini.
Bapak dan Ibu dosen yang dengan sabar telah membimbingku
Sahabat tercintaku (chicken squad)
Angkatanku 2014

Almamater tercinta UTB Lampung

 UCAPAN TERIMA KASIH

Puji syukur kepada Allah SWT sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi
ini.Penyusunan skripsi ini banyak dibantu oleh banyak pihak. Oleh karena itu,
penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada :

1. Bapak Dr. Agus Mardihartono, M.M. selaku Rektor Universitas Tulang

Bawang Lampung.
2. Ibu Lilik Koerrnia Wahidah, S.Farm.,MPH.,Apt. selaku Dekan Fakultas
MIPA Jurusan Farmasi Universitas Tulang Bawang Lampung.
3. Ibu Laila Susanti.,M.Si. Selaku pembimbing I yang telah banyak
meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan, saran, motivasi dan
pengarahan kepada penulis.
4. Bapak Isbiyantoro.,S.Si.,Apt Selaku pembimbing II yang telah banyak
meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan, saran, motivasi dan
pengarahan kepada penulis.
5. Ibu Yuli Wahyu Trimulyani.,M.Si Selaku dosen pembahas yang telah
memberikan nasehat dan sarannya dalam penulisan hasil penelitian.
6. Ibu Dwi Efayanti.,S.Si.,M.Farm Apt. Selaku dosen undangan yang telah
memberikan nasehat dan pengarahan dalam penulisan hasil penelitian ini.
7. Bapak Subur Widodo, S.Si., M.Farm., Apt., selaku dosen pembimbing
akademik yang telah memberikan nasehat, saran, pengarahan dan semangat
dalam penulisan hasil penelitian ini.
8. Seluruh Dosen Fakultas MIPA Jurusan Farmasi yang telah memberikan
ilmunya tanpa tanda jasa dan semoga bermanfaat bagi penulis.
9. Seluruh staff dan karyawan dalam lingkungan Fakultas MIPA Jurusan
Farmasi UTB Lampung (Kak Eka, Pak Nedi dan Kak Kiki)
10. Ayahanda Solikhin (Alm) dan Ibunda Wantiyah tercinta yang telah sabar
dengan tulus dan ikhlas mendukungku, untuk segala pengertian,
pengorbanan dan do’a yang tidak pernah berhenti tercurahkan sampai saat
ini .
 11. Saudara saudaraku tersayang Mas Undin, mba Veri, mba Yani, Dena, Nala,
Cellin, Rafa, Albi, Alfian, Lela, Lilis, Septi dwi yangselalu memberikan
semangat dan senyum ini.
12. Sahabat terbaikku (Chicken Squad) Nurlelawati, Nindy Sintya M, Umi
Mukaromah, Septiana Simanjuntak, Nahdia Septiyani, Umia ulfa dan Lissa
Elgania P yang selalu memberikan semangat dan selalu menemani selama
ini.
13. Untuk Septiana, Zulfi Ansori, Ridha Musri, Astria Mufi, Purnama, Niddo
Triawan , Iin Novitasari, Latifah Megasari, Mutiara Puspita, Yocha Santika
P, Bagus Sukanada, Rima Indriani S, Risca Orva MRR, dan semua teman-
teman angkatan 2014 Kita bersama karena kita menuntut ilmu dan akan
terpisah karena waktunya kita mencapai cita-cita kita, terima kasih karena
selalu bersama dalam suka dan duka.
14. Seluruh angkatan 2009, 2010, 2011, 2013, 2014, 2015, 2016, 2017, 2018
dan semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian skripsi ini yang
tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, terimakasih atas bantuannya.

Penulis menyadari bahwa masih terdapat kekurangan dalam penyusunan skripsi

ini.Oleh karena itu, kritik dan saran diperlukan untuk hal yang lebih
baik.Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat berguna khususnya bagi
penulis dan para pembaca.

Bandar lampung,

Penulis
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL............................................................................................i
ABSTRAK .........................................................................................................iii
ABSTRAC .........................................................................................................iv
HALAMAN PERSETUJUAN ..........................................................................v
HALAMAN PENGESAHAN............................................................................vi
HALAMAN PERNYATAAN KEASLIAN....................................................vii
PERSETUJUAN PUBLIKASI ......................................................................viii
PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI .........................................................ix
RIWAYAT HIDUP ............................................................................................x
MOTTO .............................................................................................................xi
HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................xii
UCAPAN TERIMAKASIH ...........................................................................xiii
DAFTAR ISI .....................................................................................................xv
DAFTAR GAMBAR.........................................................................................xx
DAFTAR TABEL ...........................................................................................xxi
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................xxii
DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG ...............................................xxiii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang......................................................................................... 1
B. Rumusan Masalah.................................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian..................................................................................... 3
1. Tujuan umum..................................................................................... 3
2. Tujuan khusus.................................................................................... 3
D. Manfaat Penelitian....................................................................................3
E. Hipotesis.......................................................................................................... 4
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Tanaman Daun Kacang Panjang (Vigna unguiculata (L.) Walp).............4
 1. Klasifikasi ............................................................................................4
2. Nama Daerah....................................................................................... 5
3. Morfologi............................................................................................. 5
4. Tempat tumbuh dan penyebaran......................................................... 6
5. Kandungan dan manfaat...................................................................... 6
6. Jenis-jenis Kacang Panjang................................................................. 7
1. Kacang panjang tipe merambat (lanjaran))................................... 7
a. Kacang lanjaran biasa.............................................................. 7
b. Kacang panjang usus hijau ..................................................... 7
2. Kacang panjang tipe agak merambat ............................................ 7
B. Bakteri Bacillus subtilis........................................................................... 8
1. Klasifikasi............................................................................................ 8
2. Morfologi............................................................................................ 8
3. Patogenesis.......................................................................................... 9
C. Bakteri Escherichia coli........................................................................... 9
1. Klasifikasi ............................................................................................ 9
2. Morfologi ........................................................................................... 10
3. Patogenesis......................................................................................... 10
D. Antimikroba........................................................................................... 10
1. Antimikroba yang menghambat sintesis dinding sel......................... 11
2. Antimikroba yang mengganggu keutuhan membran sel.................. 11
3. Antimikroba yang mengambat sintesis protein ............................... 11
4. Antimikroba yang menghambat sintesis asam nukleat.................... 11
E. Metode Pengujian Antimikroba............................................................. 12
1. Metode Difusi.................................................................................. 12
a. Metode Kertas Cakram.......................................................... 12
b. Metode lubang....................................................................... 12
c. Metode parit.......................................................................... 13
F. Antibiotik............................................................................................... 13
1. Penisilin ........................................................................................... 13
2. Tetrasiklin ....................................................................................... 13
3. Aminoglikosida ............................................................................... 13
 4. Makrolida ........................................................................................ 13
5. Fluoroquinolones ............................................................................ 14
6. Sefalosporin .................................................................................... 14
7. Kloramfenikol ................................................................................. 14
G. Simplisia ............................................................................................... 14
1. Simplisia nabati................................................................................. 14
................................................................................................................
2. Simplisia hewani ................................................................................... 15
3. Simplisia pelikan ................................................................................... 15
H. Parameter spesifik simplisia ..................................................................15
1. Parameter spesifik simplisia ............................................................15
2. Parameter non spesifik simplisia .....................................................16
I. Ekstrak .................................................................................................. 16
a. Ekstrak kental................................................................................... 16
b. Ekstrak kering.................................................................................. 17
c. Ekstrak cair...................................................................................... 17
J. Ekstraksi................................................................................................. 17
a. Cara dingin....................................................................................... 17
1. Maserasi ................................................................................... 17
2. Perkolasi .................................................................................... 17
b. Cara panas........................................................................................ 18
1. Reflux .............................................................................................. 18
2. Sokhletasi ........................................................................................ 18
3. Digesti ............................................................................................ 18
4. Infus ................................................................................................ 18
5. Dekok .............................................................................................. 18
K. Fraksinasi .............................................................................................. 18
L. Kromatografi Lapis Tipis ...................................................................... 19
M. Bioautografi .......................................................................................... 20
a. Bioautografi Kontak ........................................................................ 20
b. Bioautografi Overlay........................................................................ 21
c. Bioautografi Langsung..................................................................... 21
N. Spektrofotometer IR............................................................................... 21
 O. Rencana penelitian ................................................................................ 23
1. Prinsip penelitian ............................................................................ 23
a. Variabel bebas............................................................................ 23
b. Variabel terikat........................................................................... 23
c. Variabel terkendali..................................................................... 23
2. Sampel penelitian............................................................................. 23
3. Cara pengambilan sampel................................................................ 23
a. Daun Kacang Panjang yang berwarna hijau.............................. 23
b. Daun Kacang Panjang yang masih segar................................... 23
4. Definisi Operasional........................................................................ 23
a. Daya antibakteri......................................................................... 23
b. Daun kacang panjang................................................................. 24
c. Zona hambat............................................................................... 24
d. Biakkan bakteri.......................................................................... 24
e. Kontrol positif............................................................................ 24
f. Kontrol negatif........................................................................... 24
5. Tempat dan Waktu Penelitian ......................................................... 24
6. Pengumpulan Data........................................................................... 24
7. Analisis Data.................................................................................... 25
BAB III. METODE PENELITIAN
A. Tempat dan waktu Penelitian................................................................. 26
B. Alat dan Bahan Penelitian...................................................................... 26
1. Alat................................................................................................... 26
2. Bahan .............................................................................................. 26
C. Prosedur Penelitian ............................................................................... 27
1. Pengambilan Bahan Uji..................................................................... 27
2. Uji Determinasi................................................................................. 27
3. Pembuatan Simplisia Daun Kacang Panjang.................................... 27
4. Uji Parameter Non Spesifik Simplisia ............................................ 28

5. Pembuatan Ekstrak Daun Kacang Panjang....................................... 29

6. Pembuatan Fraksi Daun Kacang Panjang......................................... 29
7. Sterilisasi Alat dan Bahan................................................................. 30
 8. Pembuatan Media.............................................................................. 30
a. Media NA.................................................................................... 30
b. Media NB.................................................................................... 30
9. Penyiapan Biakan Bakteri................................................................ 30
10. Pembuatan Suspensi Bakteri............................................................ 31
11. Uji Daya Antibakteri........................................................................ 31
12. Pemisahan Senyawa Secara Kromatografi Lapis Tipis (KLT)........ 31
13. Pengujian Secara KLT Bioautografi................................................ 32
14. Identifikasi senyawa aktif dengan spektrofotometer FTIR ............. 33

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Determinasi Tanaman ........................................................................... 34
B. Pembuatan simplisia.............................................................................. 34
C. Hasil Uji Parameter Non Spesifik Simplisia.......................................... 34
D. Ekstraksi dan Fraksinasi ........................................................................ 35
E. Hasil uji daya antibakteri....................................................................... 36
F. Pengujian Secara KLT .......................................................................... 40
G. Pengujian Secara KLT-Bioautografi ..................................................... 43
H. Identifikasi gugus fungsi dengan spektrofotometer IR ......................... 45
BAB.V KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ........................................................................................... 47
B. Saran ..................................................................................................... 47
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Daun kacang panjang...............................................................6

2.2 Bacillus subtilis.....................................................................8
2.3 Escherichia coli.....................................................................9
2.4 Alat spektrofotometer inframerah................................................... 22

2.5 Simulasi cara pengukuran zona hambat terhadap bakteri ............. 24

4.1 Hasil uji antibakteri fraksi etanol daun kacang...................... 37
4.2Hasil uji antibakteri fraksi n-heksan daun kacang panjang... 37

4.3Hasil Penampang Bercak Uji Kromatografi Lapis Tipis Fraksi

Etanol daun kacang panjang...........................................................41
4.4 Hasil Penampang Bercak Uji Kromatografi Lapis Tipis Fraksi
n-heksanDaun kacang panjang ......................................................... 41
4.5 Hasil bioautografi fraksi etanol daun kacang panjang ......... 44
4.6 Hasil spektrum spektrofotometer fraksi etanol daun
Kacang panjang ......................................................................... 45
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman
2.1 Persentase Minimal Parameter Non Spesifik Simplisia............................ 16
4.1 Hasil Uji Parameter Non Spesifik Simplisia.......................................... 35
4.2Diameter zona hambat fraksi etanol terhadap bakteri B.subtilis dan
E.coli....................................................................................................... 38
4.3Hasil Penampang Bercak Kromatografi Lapis Tipis .............................. 42
4.4 Pola serapan spektrofotometer IR ...................................................... 46
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

A. Skema Pembuatan Ekstrak Daun Kacang Panjang............................ 52

B. Skema Pembuatan Fraksi Daun Kacang Panjang............................... 53
C. Skema Uji Daya Antibakteri Fraksi Daun Kacang Panjang Terhadap
Bacillus subtilis dan Escherichia coli..................................................... 54
D. Skema Pembuatan Kromatografi Lapis Tipis.................................... 55
E. Skema Pembuatan Bioautografi.......................................................... 56
F. Skema Pembuatan spektrofotometer IR............................................. 57
G.Besar Sampel Penelitian...................................................................... 58
H. Komposisi dan Pembuatan Media...................................................... 59
I.Perhitungan Kadar Air, Kadar Abu dan Kadar Abu Tidak Larut Asam 60
J. Analisis Data........................................................................................ 62
K. Dokumentasi Alat Alat penelitian........................................................... 65
L. Pembuatan Simplisia Daun Kacang Panjang............................................ 70
M. Proses Maserasi Daun Kacang Panjang.................................................. 72
N. Proses Fraksinasi Daun Kacang Panjang........................................... 75
O. Uji Kadar Air, Kadar Abu, Kadar Abu Larut Dalam Asam.............. 76
P. Uji Daya Antibakteri........................................................................ 77
Q. Uji KLT............................................................................................ 79
R. Uji KLT-Bioautografi........................................................................ 81
S. Identifikasi kandungan senyawa dengan spektrofotometer IR ......... 82
T. Surat Keterangan Penelitian Determinasi...........................................84
U. Surat keterangan penelitian spektrofotometer IR fraksi etanol .......... 85
V. Surat Keterangan Penelitian Analisis Fraksi Etanol Daun Kacang Panjang 86
 DAFTAR SINGKATAN DAN LAMBANG

Singkatan

Dekpes RI : Departemen Kesehatan Republik Indonesia

Kg : Kilogram
mg : Miligram
mL : Milliliter
g : Gram
m : Meter
dpl : Diatas Permukaan Laut
cm : Centimeter
µm : Mikrometer
NA : Nutrient Agar
NB : Nutrien Broth
pH : Power Of Hydrogen
KHM : Konsentrasi Hambat Minimum
KBM : Konsentrasi Bunuh Minimum
Ditjen POM : Direktorat jendral Pengawas Obat dan Makanan
nm : Nano Meter
RAL : Rancangan Acak Lengkap
BNT : Beda Nyata Terkecil
mRNA : Messenger Ribonucleic Acid
tRNA : Transfer Ribonucleic Acid
SM : Sebelum Masehi
Lambang
% : Persen
v/v : Volum Per Volume

± : Lebih Kurang
°C : Derajat Celsius