NAMA : WIDYA FERANIKA

NIM : 1701089

MATA KULIAH : ELEKTIF TERATOLOGI

Junal 1

Soal

1. Terjemahkan judul jurnalnya ke b. Indonesia

Jawab :
Profil embriotoksik dan teratogenik tretracycline pada konsentrasi relevan dengan
lingkungan pada Cyprinus carpio

2. Apakah sampel yg digunakan utk Jurnal 1

Jawab :
Tetrasiklin hidroklorida standar yang dibeli dari Sigma-Aldrich (St Louis, MO).
Kemurnian standar adalah 98%, C22H24N2HAI8.HCl, dengan berat molekul 480,90. semua
reagen yang digunakan dalam penelitian ini dibeli dari Sigma-Aldrich (St Louis, MO).
3. Jelaskan bagaimana prosedur yg dilakukan utk jurnal 1
Jawab :
1) Pengadaan dan analisis oosit viabilitas untuk embriotoksisitas dan tes
teratogenisitas. Cyprinus carpio oocytes di peroleh dengan pemupukan alami.
Empat betina dan delapan jantan pada umur reproduksi ditempatkan di kolam
pemupukan. Bagian bawah kolam ditutupi dengan cabang-cabang casuarina
sehingga pembuahan oosit diendapkan untuk memfasilitasi panen. Studi
embriotoksisitas dan teratogenisitas hanya oosit yang dibuahi digunakan
dalam periode blastula pada 2 jam setelah fertilisasi. Oosit pada periode
blastula terpapar lingkungan konsentrasi yang relevan dari TC
2) Paparan
 Konsentrasi TC yang relevan secara lingkungan digunakan dalam penelitian
ini adalah 0, 90, 180, 270, 360, 450, 540, 630, 720, 810 dan 900 μg L−1, dan
sistem kontrol bebas obat
 Sistem pengujian terdiri dari 24-well microplate, yang telah dibuahi secara
acak oosit ditempatkan, untuk membentuk kumpulan 20 oosit untuk setiap
Konsentrasi TC diuji
 Tes dilakukan dalam rangkap tiga . Para mikroplate dipertahankan selama 96
jam pada suhu 24 ± 1 C selama penyinaran gelap terang alami di
laboratorium.
 Pengamatan dibuat pada 12, 24, 48, 72 dan 96 hpf, menggunakan Zeiss
program untuk Windows, dan foto-foto dari malformasi disajikan dalam setiap
telur ikan mas diambil.
3) Evaluasi profil embryolethality
 60 oosit diamati untuk setiap konsentrasi TC yang diuji menggunakan
stereoskopik mikroskop. Pengamatan dilakukan pada 96 hpf, dan kematian
dipertimbangkan ketika oosit terjadi penggumpalan atau ketika detak jantung
tidak terdeteksi.
 Selanjutnya, hidup dan mati dan oosit yang cacat dikuantifikasi menggunakan
data (LC50) konsentrasi yang menyebabkan 50% kematian di oocytes dan
konsentrasi efektif 50 malformasi (EC50) [konsentrasi yang menyebabkan
malformasi pada 50% oosit]
4) Perhitungan LC50 , EC50s dan indeks teratogenik (TI) untuk TC.
 Metode Spearman-Karber yang digunakan untuk menghitung LC50 dan EC50
dengan menggunakan perangkat lunak US-EPA ver 1.5.
 Indeks teratogenik TC dihitung menggunakan hubungan antara LC50 dan EC50
dari malformasi. Jika nilai indeks teratogenik lebih besar dari 1, TC dianggap
sebagai teratogenik dan jika nilainya kurang dari 1 sebagai embryolethal
5) Evaluasi profil embriotoksik dan teratogenik TC
 Embrio Cyprinus carpio diamati di bawah stereomikroskop pada 12, 24, 48,
72 dan 96 jam. Untuk menilai gangguan perkembangan embrionik, skor
ditetapkan oleh Kimmel et al. (1995) dan Hermsen et al. (2011) dengan
 modifikasi untuk Cyprinus carpio oleh Luja-Mondragon et al. (2019)
digunakan.
 Malformasi teratogenik yang disebabkan oleh TC juga diidentifikasi dengan
skala yang sama.
4. Jelaskan apakah parameter yg diukur pada jurnal 1
Jawab:
- Malformasi ekor, scoliosis, modified chorda struktur dan edema pericardial.
- pengembangan mata
- pembentukan somit
- gerakan oosit, pigmentasi kepala dan tubuh
- diamati penetasan, dan perkembangan dada sirip dada
- gerakan larva, mulut yang menonjol,

5. Jelaskan apakah kesimpulan dari Jurnal 1

Jawab :
Data yang diperoleh dalam penelitian ini menunjukkan indeks teratogenik 3,44,
menunjukkan bahwa TC adalah antibiotik yang mampu menghasilkan embriotoksisitas
dan teratogenisitas. Malformasi utama teridentifikasi oleh pemaparan terhadap TC dalam
konsentrasi yang relevan dengan lingkungan adalah cacat pada ekor, struktur chorda yang
dimodifikasi, perikardis edema, skoliosis dan malformasi jantung. Perubahan ke
perkembangan embrionik dan efek teratogenik adalah waktu dan tergantung konsentrasi.
Hasil memungkinkan kita untuk menyimpulkan bahwa TC pada konsentrasi yang relevan
dengan lingkungan mampu menginduksi efek embriotoksik dan teratogenik,
menghasilkan risiko dalam integritas dari ikan mas bersama C. Carpio

6. Berikan 5 contoh obat lainnya yg memiliki efek teratogen pada janin dan apakah efek
teratogen yg bisa muncul dari masing-masing obat tersebut
Jawab :
 Siklofosfamid = malformasi system syaraf pusat
 Fenitoin = Gangguan SSP
  Litium = eibsten anomali
 Angiotensin-converting-enzime(ACE) inhibitors =
Gagal ginjal berkepanjangan pada bayi, penurunanosifikasi tempurung kepala,
disgenesis tubulus renalis
 Obat anti tyroid(propilio urasil dan metimazol) = Gondok pada janin dan bayi
hipotyroidismus dan aplasiakutis
 Karbamazepin = Defek neural tube

Jurnal 2

1. Terjemahkan judul jurnalnya ke b. Indonesia

Jawab : Investigasi toksisitas perkembangan dan teratogenik dari

siklosporin A, tacrolimus dan kombinasinya dengan prednisolon.
2. sampel yg digunakan utk Jurnal 2
jawab :
- Siklosporin A
- Kombinasi siklosporin A dan β prednisolon
- Tacrolimus
- Kombinasi tacrolimus dan β prednisolon

3. Jelaskan bagaimana prosedur yg dilakukan utk jurnal 2

Jawab :
a. Ekplantasi Embrio. Embrio dikeluarkan pada hari ke 9,5 kehamilan dengan
pemberian eter-anestesi setelah sampel darah mereka dikumpulkan dari aorta
abdominal. Konseptus dieksplorasi dengan membedah uterus, desidua dan
membran Riechert, dan dikultur dengan metode New Diseksi dilakukan dalam
larutan garam seimbang dalam kondisi aseptik. Embrio diacak dan dipindahkan
ke dalam botol kaca steril (volume 60 ml) yang berisi 1 ml media kultur yang
terdiri dari serum tikus per embrio. Setiap embrio yang rusak dibuang.
b. Culture of embryos. Ada empat atau lima embrio di setiap botol. Serum tikus
dikumpulkan kemudian didistribusikan ke kelompok kontrol dan masing-masing
kultur yang dirawat disiapkan dengan sentrifugasi segera dan inaktivasi panas
pada 56 C selama 30 menit, setelah itu darah dikeluarkan dari tikus hamil. 100
IU / ml penisilin dan 100 mg / ml streptomisin ditambahkan ke media kultur
untuk mencegah kontaminasi Sementara serum tikus normal digunakan pada
kelompok kontrol, kombinasi biner dari prednisolon dengan siklosporin A dan
tacrolimus pada berbagai konsentrasi digunakan dalam serum tikus untuk
kelompok uji. Setidaknya 10 embrio digunakan untuk setiap kondisi
eksperimental. Jika jumlah embrio yang dieksplorasi pada hari yang sama kurang
dari yang dibutuhkan, percobaan direplikasi dengan kontrol dan semua dosis agen
(4 grub) untuk mencapai jumlah yang diperlukan.
 Grup 1; Variasi konsentrasi siklosporin A ditambahkan ke dalam serum tikus
(4 mg / ml, 10 mg / ml, 20 mg / ml, 30 mg / ml, 40 mg / ml).
 Grup 2; Kombinasi biner dari dosis siklosporin A dalam kelompok 1 dan
prednisolon (20 mg / ml) ditambahkan.
 Grup 3; Memvariasikan konsentrasi tacrolimus (1 mg / ml, 5 mg / ml, 10 mg /
ml, 15 mg / ml, 20 mg / ml) ditambahkan.
 Grup 4; Kombinasi biner dari dosis tacrolimus pada kelompok 3 dan
prednisolon (20 mg / ml) ditambahkan.
c. Evaluasi morfometrik dan morfologis
Embrio dievaluasi secara morfologis di bawah microscope setelah 48 jam periode
kultur yang sesuai dengan 11,5 hari kehamilan berdasarkan sistem penilaian. Dalam
sistem ini, evaluasi dilakukan dengan memberikan skor numerik 0 - 5 untuk setiap
parameter morfologis. Parameter morfologi; panjang mahkota-pantat, nomor somites,
fleksi(lengkungan) embrio, perkembangan ke depan, otak tengah, otak belakang dan
tabung saraf kaudal, sistem optik, otic dan olfaktorius, proses rahang atas dan rahang
bawah, batang cabang, batang depan dan belakang dievaluasi . Kelainan yang diamati
pada embrio selama penilaian dicatat dan difoto.
d. Uji tunel
 Untuk teknik TUNEL,menggunakan In-Situ Cell Death Detection Kit dengan
fluorescein. Embrio yang evaluasi morfologisnya selesai setelah kultur embrio
dioleskan ke dalam 3 persiapan berbeda (kontrol negatif, kontrol positif dan
kelompok eksperimen) dengan memotongnya menjadi potongan-potongan dengan
pisau bedah dan mendapatkan suspensi sel terpisah dari masing-masing konsentrasi
obat. Kontrol positif diinkubasi dengan DNase1 selama 10 menit pada suhu kamar
untuk menginduksi istirahat untai DNA. Kontrol negatif diinkubasi dengan solusi
label saja (tanpa terminalase). Setiap persiapan dievaluasi dengan mikroskop
fluoresensi. 500 sel yang diwarnai dengan DAPI (40, 6-diamidino-2-phenylindole)
dihitung pada setiap sampel, dan jumlah sel positif TUNEL (pewarnaan fluorescent
hijau) diberikan sebagai persentase.
e. Analisis statistik
Skor morfologis dan bilangan somit yang tidak terdistribusi normal dianalisis
dengan menggunakan analisis satu arah varians (ANOVA) non-parametrik Kruskalle
Wallis. Jika ada perbedaan signifikan yang ditemukan dalam data, ManneWhitney
U-tes selanjutnya digunakan untuk menunjukkan di mana letak perbedaannya.
Variabel pertumbuhan lainnya seperti diameter kantung kuning telur dan panjang
mahkota pantat dianalisis dengan ANOVA satu arah dan uji rentang ganda
Duncan( didasarkan pada sekumpulan nilai beda nyata yg ukurannya semakin besar)
untuk beberapa perbandingan. Insiden malformasi dianalisis dengan uji eksak Fisher
antara kelompok eksperimen dan kontrol. Data dianggap signifikan secara statistik
pada P <0,05, P <0,01 dan P <0,001.
4. Parameter yang diukur pada jurnal kelompok 7
panjang mahkota-pantat, nomor somites, fleksi(lengkungan) embrio,
perkembangan ke depan, otak tengah, otak belakang dan tabung saraf
kaudal, sistem optik, otic dan olfaktorius, proses rahang atas dan
rahang bawah, batang cabang, batang depan dan belakang dievaluasi.

5. Jelaskan apakah kesimpulan dari Jurnal 2

Jawab :
 Peneliti menarik kesimpulan Bahwa dosis harus ditentukan dengan hati-hati
ketika siklosporin A dan tacrolimus diperlukan untuk diberikan kepada wanita hamil
dengan kombinasi prednisolon, karena prednisolon meningkatkan efek toksik siklosporin
A, dan meningkatkan efek teratogenik dari tacrolimus.

6. 5 contoh obat lainnya yg memiliki efek teratogen PADA janin dan apakah efek teratogen
yg bisa muncul dari masing-masing obat tersebut
Jawab :
 Aminopterin, metotreksat = Malformasi system saraf pusat dan anggota gerak
 Fenitoin = Gangguan SSP
 Angiotensin-converting-enzime(ACE) inhibitors =
Gagal ginjal berkepanjangan pada bayi, penurunanosifikasi tempurung kepala,
disgenesis tubulus renalis
 Obat anti tyroid(propilio urasil dan metimazol) = Gondok pada janin dan bayi
hipotyroidismus dan aplasiakutis
 Karbamazepin = Defek neural tube