TUGAS REVIEW JURNAL

Toxic effects of Lambda-cyhalothrin, on the rat thyroid: Involvement of oxidative stress

and ameliorative effect of ginger extrac
(Diajukan untuk memenuhi tugas mata kuliah Fitoterapi)

Dosen Pengampu :

apt.Dina Trianggaluh Fauziah, M.Farm.,

Disusun Oleh :

Silca Hardini A 18040095

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS dr.SOEBANDI JEMBER

2020-2021
 Review Jurnal

Judul Jurnal Toxic effects of Lambda-cyhalothrin, on the rat thyroid: Involvement of

oxidative stress and ameliorative effect of ginger extrac
Nama Jurnal Toxicology Reports, ELSEVIER
Volume Jurnal 5
Tahun 2018
Penulis Wael M. Al-Amoud
Reviewer Silca Hardini Agustin
Tanggal 11 November 2021
Tujuan Penelitian ini bertjuan untuk mengevaluasi efek antioksidan ekstrak jahe terhadap
penelitian toksisitas tiroid yang diinduksi oleh LCT pada tikus albino.
Subjek Subjek penelitian ini menggunakan hewan coba Tikus Albino jantan (Wistar) yaitu tikus
penelitian umur tujuh minggu dengan berat badan rata-rata 160–180 g. Kandang tikus yang
ditempatkan adalah (23-25 ° C) di bawah kondisi laboratorium yang identik. Makanan dan
air diberikan ad libitum di tengah kerangka waktu percobaan/eksperimen (30 hari). Hewan
diberi pelet makanan kering yang dapat diakses secara moneter. Hewan dipelihara dalam
iklim yang terkendali dengan siklus gelap/terang 12 jam pada suhu 22 ± 2 °C. Setelah satu
minggu aklimatisasi, hewan dibagi secara acak menjadi empat kelompok eksperimen (n =
10 di setiap kelompok)
Metode Pada penelitian kali ini menggunakan metode :
penelitian  Studi histologis dan histokimia
Untuk pemeriksaan histopatologi, hewan dibedah dan kelenjar tiroid diangkat dan
difiksasi. Setiap tiroid ditempatkan dalam formalin buffer 10% selama 24 jam dan
ditanamkan dalam lilin parafin menggunakan metode standar. Untuk analisis
 histologis, yang meliputi bentuk dan ukuran folikel, tinggi sel folikel, dan
karakteristik sitoplasma dan koloid intrafolikular, bagian parafin dengan ketebalan
5 m disiapkan dengan mikrotom putar dan diwarnai dengan hematoksilin dan eosin.
Untuk pengukuran histokimia total karbohidrat dalam sel folikel dan koloid, teknik
asam periodik Schiff (PAS) digunakan. Protein total kelenjar tiroid terlihat pada sel
folikel dan koloid menggunakan metode merkuri bromofenol biru.
 Studi morfometrik
Diameter folikel tiroid diperkirakan dalam bagian H dan E menggunakan pengukur
mikrometer okular yang dikalibrasi dengan mikrometer fase untuk memperoleh
perkiraan parameter ini di bawah mikroskop cahaya pada perbesaran 400x.
Pengukuran ini dilakukan di 10 lapangan untuk setiap spesimen. Bagian dari
kelenjar tiroid digunakan untuk memperkirakan luas folikel.
 Analisis biokimia
Untuk analisis biokimia, sampel darah dikumpulkan dalam tabung centrifuge bersih
selama pembedahan dan langsung ditempatkan di atas es. Heparin digunakan
sebagai antikoagulan. Plasma diperoleh dengan sentrifugasi sampel pada 3000 rpm
selama 15 menit, dan sampel disimpan pada -60 ° C sampai analisis.
 Uji elektroforesis gel sel tunggal untuk mendeteksi kerusakan DNA
Pengujian ini, juga disebut pengujian komet. Jaringan tiroid dipotong kecil-kecil,
jaringan dihomogenkan dalam buffer natrium fosfat dingin (50 mmol/L, pH 7,0)
yang mengandung ethylenediamine tetra-acetic acid (EDTA), (0,1 mmol/L).
Jaringan homogenat disentrifugasi pada 1000 rpm (6149G) selama 15 menit pada
suhu 4°C. Semua metode dilakukan di bawah cahaya redup untuk menghindari
degradasi DNA tambahan. Slide diperiksa di bawah mikroskop fluoresensi Leitz
Orthoplan yang dilengkapi dengan filter 515-560 nm dan filter penghalang 590 nm.
Gambar yang diperoleh dianalisis menggunakan perangkat lunak Comet Assay IV-
Perceptive Instruments. Slide dianalisis dan diberi skor pada kisaran 100 sel.
Kerusakan DNA sel diukur dengan menggunakan rasio kandungan DNA ekor
terhadap seluruh kandungan DNA seluler. Kerusakan DNA dihitung sebagai
panjang ekor (TL) dan intensitas ekor (TI)
 Analisis statistic
Hasilnya dikomunikasikan sebagai mean ± SEM., dan perhitungan statistik
dilakukan dengan menggunakan ANOVA satu arah untuk mengevaluasi perbedaan
yang signifikan di antara kelompok perlakuan. Perbedaan dengan P

Alat dan  Alat

Bahan 1. Mikroskop cahaya
2. Mikrometer ocular
3. Tabung centrifuge
4. Mikroskop fluoresensi Leitz Orthoplan,
5. Radioimmunoassay
6. Perangkat lunak Comet Assay IV-Perceptive Instruments
7. SPSS statistik versi 16 (SPSS® 4 Inc., USA)3
 Bahan
1. Lambda-cyhalothrin (α-cyano-3-phenoxy -benzyl-3-(2-chloro-3, 3,3-trifluoro-1-
propenyl)-2,2-dimethylcyclopropanecarboxylate)
2. Ekstrak jahe (Z. officinale Roscoe)
3. Hewan coba Tikus albino jantan (Wistar)
Hasil  Hasil penelitian
penelitian 1. Semua tikus selamat selama periode percobaan. Hanya tikus yang diobati secara
dan oral dengan dosis oral rendah (1/100th dari LD50) Lambdacyhalothrin
pembahasa menunjukkan penurunan yang signifikan (ANOVA, uji Duncan, (p <0,5) pada
n berat badan dibandingkan dengan tikus control. Perlakuan dengan kombinasi
Lambda-cyhalothrin dan ekstrak jahe menghasilkan bobot badan yang lebih
tinggi dibandingkan dengan kelompok yang hanya diberi Lambda-cyhalothrin.
Namun, tidak ada perbedaan signifikan dalam berat badan yang diamati antara
kelompok kontrol dan kelompok yang diberi jahe.
2. Hasil histologi
Bagian tiroid dari tikus kontrol menunjukkan struktur histologis yang
sistematis. Folikel tiroid tampak normal dengan susunan berbagai ukuran.
Mereka terutama dilapisi oleh folikel kubik sel dengan inti vesikular bulat serta
beberapa sel para folikuler dan mengandung koloid homogen asidofilik di
tengahnya. Antara folikel, interaksi antar molekul sel folikel dan kapiler darah
sehat.

3. Pengamatan histokimia
 Tiroid dari tikus kontrol yang diwarnai dengan Periodic acid-Schiff (PAS)
untuk karbohidrat total menunjukkan reaksi sedang pada sel folikel, sedangkan
koloid menunjukkan reaksi yang kuat (Gambar 4A). Reaksi PAS yang lemah
terlihat pada tiroid tikus yang diobati dengan LCT (Gambar 4B), sedangkan
tiroid tikus yang diberi LCT dan jahe menunjukkan peningkatan reaksi PAS
(Gambar 4C). Pemeriksaan bagian tiroid dari tikus kontrol yang diwarnai
dengan mercuric bromphenol blue menunjukkan kandungan protein normal
pada sel folikel dan koloid.Gambar 5A). Sebaliknya, penurunan kandungan
protein yang nyata terlihat pada sel folikel dan koloid tiroid hewan yang diobati
dengan LCT (Gambar 5B). Di sisi lain, tikus yang diberi LCT dan jahe
menunjukkan peningkatan kandungan protein tiroid mereka (Gambar 5C)
4. Hasil morfometrik
Mencermati perlakuan yang diberikan pada tikus dari kelompok yang diberi
LCT, terdapat pengaruh yang signifikan yaitu menyebabkan penurunan yang
cukup signifikan dalam diameter folikel bila dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Namun, tikus yang diobati dengan LCT dan jahe menunjukkan
peningkatan penting dalam diameter folikel rata-rata (Gambar 6). Tingkat
folikel dengan kandungan koloid biasa berkurang pada hewan yang diobati
dengan LCT dan meningkat setelah pengobatan dengan LCT dan jahe (Gambar
7).
5. Hasil biokimia
1. Perubahan T3, T4, dan TSH : Mengobati tikus dengan LCT menyebabkan
penurunan yang signifikan dalam triiodothyronine (T3) (Gambar 8A) dan
tiroksin (T4) serta peningkatan yang signifikan dari hormon perangsang
tiroid (TSH) (Gambar 8B). Pemberian LCT dan jahe menyebabkan
peningkatan T3 dan T4 dan penurunan TSH, sedangkan tidak ada perbedaan
yang signifikan antara kelompok kontrol dan perlakuan jahe.
2. Perubahan penanda peroksidasi lipid dan enzim antioksidanData
di Tabel 1 menunjukkan bahwa pemberian LCT secara signifikan
meningkatkan kadar malondialdehid (MDA) di atas nilai normal. Aktivitas
enzim antioksidan superoksida dismutase (SOD) dan katalase (CAT)
menurun secara signifikan pada serum tikus dari kelompok yang diberi
LCT. Jika dibandingkan dengan kelompok kontrol dan LCT, MDA sangat
menurun dan aktivitas SOD dan CAT meningkat pada tikus yang diobati
dengan LCT dan jahe.
3. Pengaruh pengobatan jahe pada kerusakan DNA yang diinduksi lambda-
cyhalothrin (LCT) : Uji komet menunjukkan bahwa DNA yang
 diinduksi LCT secara signifikan dirugikan / rusak di kelenjar tiroid (Gambar
9B). Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa kelompok LCT mengalami
peningkatan panjang ekor yang signifikan (2,472 ± 0,257 m) dibandingkan
dengan tikus kontrol (P < 0,05) (Meja 2). Selain itu, persentase kerusakan
DNA pada kelompok LCT secara signifikan lebih tinggi (2,143 ± 0,178 m)
jika dibandingkan dengan tikus kontrol (Meja 2). Namun, LCT dalam
kombinasi dengan jahe mengurangi jumlah kerusakan DNA pada sel tiroid,
yang menyebabkan penurunan yang signifikan dalam panjang ekor dan
persentase kerusakan DNA dibandingkan dengan kelompok LCT (1,736 ±
0,153 m dan 1,655 ± 0,244 m, masing-masing; Meja 2; Gambar 9B, C.

 Pembahasan
Studi ini menyelidiki efek samping insektisida Lambda-cyhalothrin pada dosis yang
jauh di bawah tingkat toksisitas oral akut (1/100th LD50). Namun, tidak ada cukup
bukti untuk mengkonfirmasi bahwa LCT memiliki efek mengganggu tiroid pada
tikus, hasil histologis dan biokimia yang diperoleh dalam penyelidikan ini
menunjukkan bahwa LCT memiliki efek samping negatif pada kelenjar tiroid dan
jahe telah mengurangi efek yang disebabkan oleh LCT. Efek yang diamati
merupakan indikasi stres oksidatif yang parah pada tiroid tikus. Juga, hasil
menegaskan bahwa LCT menurunkan berat badan tikus. Hasil ini sesuai dengan
laporan sebelumnya yang menunjukkan bahwa LCT menyebabkan penurunan berat
badan selain peningkatan berat hati dan limpa. Secara histologis, koloid yang lebih
kecil, penyumbatan pembuluh darah dan degenerasi sel folikel di mana beberapa
perubahan abnormal diamati. Pengamatan ini konsisten dengan hasil serupa dari
tiroid dan sistem reproduksi tikus jantan yang diracuni oleh deltametrin piretroid.
Dalam menganalisis hasil, terlihat bahwa LCT menyebabkan penurunan protein
total. Juga, pada tikus yang diobati dengan LCT, tercatat bahwa tingkat proteinnya
menurun. Namun, ditunjukkan bahwa paparan tikus ke LCT mendorong
peningkatan penting dalam MDA ginjal dan kadar protein. Terlihat juga bahwa
aktivitas katalase (CAT), superoksida dismutase (SOD), glutathione peroxidase
(GPx), glutathione reduktase (GR) dan glutathione-S-transferase (GST) menurun
secara signifikan karena paparan Lambda-cyhalothrin Hasil analisis hormon tiroid
menunjukkan bahwa perlakuan hewan dengan LCT menyebabkan penurunan T3
dan T4, sedangkan TSH meningkat. Demikian pula, penelitian lain melaporkan
bahwa pengukuran LCT yang relatif tinggi mendorong penurunan konsentrasi
tiroksin (T4) dan triiodothyronine (T3), yang disertai dengan peningkatan hormon
perangsang tiroid Deltametrin pada fungsi tiroid. Peneliti melaporkan bahwa
paparan LCT dosis rendah secara signifikan mengganggu fungsi tiroid pada
keturunannya. Ada penurunan konsentrasi T4 dan T3 di semua periode percobaan
keturunan tikus yang menerima LCT, sedangkan kadar TSH secara signifikan lebih
tinggi daripada tikus pada kelompok control. Diasumsikan bahwa penurunan
hormon tiroid mungkin merupakan hasil dari peningkatan aktivitas enzim hati.47],
atau konsekuensi dari dampak sitotoksik langsung pada kelenjar tiroid dari hasil
toksik dari tekanan oksidatif [1]. Hasil ini sesuai dengan hasil lain, ini menunjukkan
bahwa peningkatan signifikan diamati pada beberapa petunjuk biokimiawi dari
tekanan oksidatif, seperti zat reaktif thiobarbiturat dalam darah dan hati, serta
konsentrasi glutathione tereduksi di hati, testis, otak. dan ginjal.
Jahe digunakan dalam penelitian ini sebagai agen anti toksik terhadap efek negatif
LCT. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa jahe memperbaiki efek toksik pada
tiroid yang disebabkan oleh LCT. Perubahan tampilan histologis dan histokimia
 jaringan tiroid diamati pada hewan yang diobati dengan LCT dan jahe serta
kandungan glikogen dan protein. Selain itu, T3 dan T4 meningkat sedangkan TSH
menurun setelah perlakuan dengan ekstrak jahe. Temuan ini menegaskan bahwa
jahe dapat digunakan sebagai agen antioksidan terhadap LCT dan bahan kimia
lainnya. Telah dilaporkan bahwa pemberian jahe meningkatkan perubahan
histopatologi dan meningkatkan kandungan glikogen dan protein dalam hati tikus
yang diberi 7,12-dimetilbenz(a)antrasena (DMBA) dan fungisida Metalaxyl
benzenoid.
Uji komet adalah proses sensitif yang digunakan dalam pengukuran dan identifikasi
DNA yang dikutuk pada tingkat sel. Hasil penelitian ini menegaskan bahwa
pemberian DNA yang diinduksi LCT rusak seperti yang ditunjukkan oleh uji
komet. Hasil ini sesuai dengan hasil yang dilaporkan sebelumnya, yang
menunjukkan bahwa LCT menginduksi fragmentasi DNA pada limfosit tikus dan
oleh cypermethrin di hati tikus. Kelompok yang diobati dengan LCT yang ditambah
jahe menunjukkan lebih sedikit kerusakan DNA dibandingkan dengan kelompok
yang diobati dengan LCT. Oleh karena itu, jahe mungkin bermanfaat dalam
meminimalkan risiko fragmentasi DNA yang disebabkan oleh toksisitas LCT
Kesimpula Dalam penelitian ini, kami fokus pada dampak obat jahe dan komponennya dalam kegiatan
n manajemen stres oksidatif. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa LCT mempengaruhi
fungsi dan struktur tiroid dengan mengganggu kadar normal enzim antioksidan, kadar
hormon tiroid dan menyebabkan susunan histologis abnormal dan kerusakan DNA pada
kelenjar tiroid. Oleh karena itu, penggunaan insektisida ini harus dikontrol. Namun, Ginger
menunjukkan hal yang penting fek dalam penekanan efek samping LCT, yang mengarah
pada peningkatan nyata dalam aktivitas histologis dan biokimia; termasuk enzim anti-
oksidan, tingkat hormon tiroid. Ekstrak jahe dan komponen efektifnya dapat digunakan
sebagai agen yang cocok untuk mengendalikan dan mencegah toksisitas Lambda-
cyhalothrin dan kerusakan DNA akibat genotoksisitas. Penyelidikan ini menegaskan bahwa
jahe mengurangi efek yang disebabkan oleh LCT. Studi tambahan harus menyelidiki
mekanisme aksi komponen alami jahe dan efek antioksidannya