SOAL TUORIAL HPLC

1. Which of the following is FALSE for HPLC ?

A. Liquids serve as mobile phases
B. Mobile phase is pumped through the column
C. Applied for the separation of micro and macromolecules
D. Used only for the analysis of water soluble compounds
E. Used either for qualitative, quantitative or for preparative purposes

2. In what HPLC mode, a non polar solvent is pumped through the column of the polar stationary
phase?
A. Normal Phase HPLC (NP-HPLC)
B. Reversed Phase HPLC (RP-HPLC)
C. Supercritical Fluid Chromatography (SFC)
D. Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography (HILIC)
E. Ion-Exchange HPLC (IEC-HPLC)

3. Perhatikan gambar skematis instrumen HPLC di bawah ini.

2 4
3 5

1
Manakah komponen yang paling penting dalam proses pemisahan?
A. [1] D. [4]
B. [2] E. [5]
C. [3] dan [4]

4. Manakah di bawah ini yang BUKAN merupakan persyaratan fase gerak untuk HPLC?
A. Tidak korosif terhadap sistem HPLC
B. Mudah menguap
C. Dapat melarutkan komponen sampel
D. Kemurnian tinggi
E. Viskositas dan toksisitas rendah

5. Manakah di bawah ini yang benar untuk kolom KCKT fase normal?
A. menggunakan fase diam non polar
B. metanol, air dan asetonitril dapat digunakan sebagai fase gerak
C. mekanisme pemisahan adalah adsorpsi
D. Kolom ODS digunakan untuk pemisahan komponen sampel
E. tidak dapat digunakan untuk elusi gradient
6. Manakah campuran pelarut di bawah ini yang TIDAK dapat dipakai sebagai fase
gerak pada RP-HPLC?
A. Metanol + air D. Asetonitril + Dapar Fosfat pH = 2,5
B. Acetonitrile + air (pH 3,0) E. Asetonitril + air
C. Kloroform dan air

7. Di bawah ini adalah kromatogram dari KCKT yang menggunakan kolom RP-18:

X
Y
mAu

0 1 2 3 4 5 6 7
Waktu (menit)

Berdasarkan data tersebut, manakah pernyataan berikut yang benar:

A. Zat X teretensi dalam kolom lebih lama daripada Zat Y
B. Zat Y lebih cepat mencapai detektor setelah disuntikkan
C. Zat X lebih polar daripada zat Y
D. Terhadap fase diam, interaksi Zat X lebih besar daripada zat Y
E. Polaritas zat X = zat Y

8. Di bawah ini adalah data percobaan analisis kofein dalam sampel A dan B menggunakan KCKT
fase terbalik:

Sampel/zat pembanding Waktu retensi Area

puncak
(menit)
Sampel A 3,5 15000
5,2 5000
Sampel B 5,2 10000
6,4 12000
Sampel C 3,5 10000
5,2 5000
6,4
Kofein 3,5 7500

Berdasarkan data tersebut, manakah pernyataan berikut yang benar

A. Hanya sampel A yang mengandung kofein
B. Sampel A dan B mengandung kofein, sedangkan sampel C tidak
C. Kofein terkadung pada sampel A dan C, sedangkan sampel B tidak
D. Kandungan kofein pada sampel A sebesar 150 ppm
E. Kandungan kofein Sampel A > B > C
9. Which type of the following solvents can be used as mobile phase of NP-HPLC?
A. methanol D. Hexane, heptana
B. Acetonitrile E. buffer solution
C. Water

10. Perhatikan kurva hubungan HETP dengan kecepatan alir fase gerak KCKT di bawah ini:

Berdasarkan kurva tersebut, manakah pernyataan di bawah ini yang benar?

A. HETP makin kecil jika ukuran partikel bahan pendukung makin besar
B. Makin kecil ukuran partikel bahan pendukung kolom, HETP relatif tetap berharga minimum
dengan kenaikan kecepatan fase gerak
C. Pada ukuran partikel bahan pendukung yang semakin besar, HETP relatif minimum jika
tekanan pompa diatur semakin tinggi
D. Makin kecil ukuran partikel bahan pendukung, makin kecil jumlah Plat teoretisnya
E. Tidak ada hubungan antara ukuran partikel dengan kecepatan alir fase gerak

11. In HPLC elution technique, steady changes of the mobile phase composition during the
chromatographic run is called:
A. Isocratic D. stepwise elution
B. Gradient E. continuous elution
C. Isothermal

12. What kinds of solvents or reagents are NOT used in Reversed Phase HPLC?
A. Acetonitrile
B. Methanol
C. Water
D. Chloroform
E. inorganic salts

13. Manakah di bawah ini yang BUKAN menunjukkan keunggulan HPLC dibandingkan GC?
A. dapat dilakukan pada suhu kamar
B. dapat digunakan untuk jenis sampel yang sulit menguap
C. lebih sesuai untuk zat yang termolabil
D. Cara pelaksanaan analisis lebih sederhana dengan biaya lebih murah
E. dapat diaplikasikan untuk analisis senyawa makromolekul
14. What useful information can be found from a van Deemter plot for HPLC?
A. The selectivity factor
B. Optimum mobile phase flow rate
C. Optimum column temperature
D. B/u effects are the largest contribution to H
E. Diffusion is usually much more in liquids than in the gas phase

15. Manakah di bawah ini yang berubah-ubah selama analisis dengan KCKT elusi gradien?
A. Volume injeksi sampel D. Panjang gelombang analitik
B. Komposisi fase gerak E. Panjang kolom
C. Temperatur kolom

16. Manakah di bawah ini yang benar untuk Kromatografi Cair Kinerja Tinggi fase terbalik?
1. Air dan metanol dapat digunakan sebagai fase gerak
2. Digunakan kolom berfase diam non polar
3. Dapat dipakai untuk tujuan analisis kualitatif/kuantitatif dan preparatif
4. Tidak dapat digunakan untuk analisis senyawa anorganik

17. Which of the following is true for the HPLC column of 150x4.6 mm Lichrospher RP-18, 5 µm?
1. It contains a non polar stationary phase
2. It has an internal diameter of 4.6 mm
3. It is a column with 15 cm long
4. Modified from silica with the particle size of 5 μm

18. Untuk meningkatkan daya tahan (life time) kolom KCKT, manakah di bawah ini yang perlu
dilakukan?
1. Sampel yang kotor tidak langsung disuntikkan melainkan dimurnikan lebih dahulu
2. Pencucian kolom sebelum dan sesudah pemakaian
3. Bekerja pada pH pada rentang pH yang sesuai spesifikasi kolom
4. Menggunakan guard column

19. Manakah di bawah ini yang merupakan kelebihan elusi gradien dibandingkan isokratik?
1. lebih menguntungkan untuk pemisahan sampel-sampel yang rumit
2. Memiliki resolusi lebih baik untuk pemisahan campuran senyawa dan metabolitnya
3. sesuai untuk pemisahan zat-zat dan cemaran organiknya
4. lebih sederhana dan lebih cepat pelaksanaannya

20. Manakah di bawah ini yang benar untuk kolom KCKT RP-18 monolitik dibandingkan partikulat?
1. Mengandung partikel silika berpori-pori besar
2. Laju alir fase gerak dapat diatur lebih cepat
3. Memungkinkan waktu analisis lebih cepat
4. Tekanan sistem KCKTjauh lebih tinggi daripada kolom partikulat

21. Which of the following is true for the HPLC column of 150x4.6 mm Lichrospher RP-18, 5 µm?
1. It contains a spherical silica as stationary phase
2. It has an internal diameter of 5 μm
3. It is a column with 15 cm long
4. Modified from silica with the particle size of 4.6 mm
22. Penggunaan kolom RP-18 endcapped lebih menguntungkan untuk pemisahan senyawa-senyawa
polar
SEBAB
kolom RP-18 endcapped tidak mengandung gugus-gugus yang polar dari residual silanol

23. Kolom KCKT RP-18 semakin efisien jika kolom semakin pendek
SEBAB
Makin pendek kolom HPLC, maka nila bilangan pelat teoretis semakin besar

24. The mixture of chloroform and water can not be used HPLC mobile phases
BECAUSE
The organic solvents used for HPLC mobile phases must be miscible

25. Pada KCKT, filter membran dari selulosa dapat digunakan untuk penyaringan semua jenis sampel
SEBAB
Filter membran selulosa sangat sesuai untuk penyaringan sampel baik dalam pelarut air maupun
pelarut organik