Mar. Narkoba 2015, 13, 3340-3359; doi: 10.

3390 / md13063340
CC g s
S

laut d r OP EN SEBUAH u ES

ISSN 1660-3397
www.mdpi.com/journal/marinedrugs
Ulasan

Produksi Hidrokoloid Rumput Laut: Pembaruan pada Teknologi Ekstraksi

dan Modifikasi yang Didukung Enzim

Nanna Rhein-Knudsen, Marcel Tutor Ale dan Anne S. Meyer *

Pusat Teknik Bioproses, Departemen Teknik Kimia dan Biokimia, Universitas Teknik Denmark (DTU), Søltofts
Plads, Gedung 229, DK-2800 Lyngby, Denmark; Email- Elektronik : nark@kt.dtu.dk (NR-K.); mta@kt.dtu.dk (MTA)

* Penulis kepada siapa korespondensi harus ditujukan; E-Mail: am@kt.dtu.dk ; Telp .: +

45-4525-2800; Faks: + 45-4593-2906.

Editor Akademik: Paola Laurienzo

Diterima: 28 Februari 2015 / Diterima: 13 Mei 2015 / Diterbitkan: 27 Mei 2015

Abstrak: Agar, alginat, dan carrageenans adalah hidrokoloid rumput laut bernilai tinggi, yang digunakan
sebagai bahan gelasi dan pengental dalam berbagai aplikasi makanan, farmasi, dan bioteknologi. Produksi
global tahunan hidrokoloid ini baru-baru ini mencapai 100.000 ton dengan nilai pasar bruto sedikit di atas US $
1,1 miliar. Sifat-sifat tekno-fungsional dari polisakarida rumput laut sangat bergantung pada struktur uniknya,
terutama derajat dan posisi sulfasi dan keberadaan jembatan anhidro. Teknik ekstraksi klasik termasuk
perawatan alkali panas, tetapi penelitian terbaru menunjukkan hasil yang menjanjikan dengan enzim. Metode
saat ini terutama melibatkan penggunaan campuran enzim yang tersedia secara komersial yang dikembangkan
untuk pemrosesan bahan tanaman terestrial. Penerapan enzim target polisakarida rumput laut memungkinkan
ekstraksi selektif pada kondisi ringan serta modifikasi hidrokoloid yang dibuat khusus untuk mendapatkan fungsi
tertentu. Tinjauan ini memberikan pembaruan fitur struktural terperinci dari κ-, ι-, λ-carrageenans, agars, dan
alginat, dan diskusi menyeluruh tentang ekstraksi yang dibantu enzim dan teknik pemrosesan untuk hidrokoloid
ini.

Kata kunci: rumput laut; karagenan; alginat; agar; hidrokoloid; ekstraksi enzimatik
Mar. Narkoba 2015, 13 3341

1. Perkenalan

Hidrokoloid dapat diartikan sebagai zat yang berinteraksi dengan air membentuk sistem koloid baik dalam bentuk gel
maupun sistem sol partikel terlarut. Dalam prakteknya, viskositas sistem umumnya akan meningkat akibat interaksi antara
hidrokoloid dan air. Polisakarida hidrokoloid memiliki kepentingan yang signifikan, baik secara teknologi maupun ekonomi,
karena digunakan dalam industri makanan, farmasi, obat-obatan, dan bioteknologi karena sifat fisika-kimianya yang
berbeda. Polisakarida hidrokoloid yang saat ini digunakan berasal dari tumbuhan, mikroba, dan rumput laut: pektin,
misalnya, diekstrak dari pomace apel dan kulit jeruk; xanthan gum dibuat dengan fermentasi aerobik dari Xanthomonas
campestris, dan agar, alginat, dan carrageenans diperoleh dari rumput laut coklat dan merah. Hidrokoloid turunan rumput
laut saat ini memiliki nilai global sekitar US $ 1,1 miliar, yang diperkirakan akan terus meningkat [1]. Rumput laut, dengan
demikian, merupakan sumber unik dari polisakarida hidrokoloid bernilai tinggi: agars memiliki harga eceran tertinggi per kg
(18 US $ / kg), sedangkan carrageenans saat ini memiliki total produksi komersial tertinggi (60.000 ton / tahun) dan
memberikan kontribusi tertinggi nilai total US $ 626 juta per tahun, Tabel 1 [1].

Tabel 1. Pasar untuk hidrokoloid turunan rumput laut, agars, alginat, dan carrageenans [1].

Produksi Global Harga eceran Perkiraan Nilai Pasar Bruto

Produk
(ton / tahun) (US $ / kg) (US $ juta / tahun)
Agars 10.600 18 191
Alginat 30.000 12 339
Carrageenans 60.000 10.4 626

Wilayah Asia Pasifik mendominasi produksi budidaya rumput laut, diikuti oleh negara-negara seperti Chile, Tanzania, dan Madagaskar [2].

Di negara-negara ini, budidaya rumput laut memiliki manfaat sosial ekonomi yang positif bagi masyarakat pesisir dengan meningkatkan mata

pencaharian ekonomi dan sosial bagi masyarakat yang tinggal di wilayah pesisir dan telah mengurangi penangkapan ikan berlebihan [3].

Ulasan ini menjelaskan kimia, sifat, dan aplikasi dari tiga hidrokoloid turunan rumput laut, carrageenans, agar, dan alginat,
dengan fokus pada teknik pemrosesan baru yang dibantu oleh enzim. Teknologi enzim adalah alat untuk ekstraksi dan modifikasi
yang ditargetkan yang baru-baru ini mendapat perhatian lebih dalam kaitannya dengan pelestarian ciri struktural dan sifat
fungsional produk target. Selain itu, penggunaan enzim memungkinkan pengurangan bahan kimia dalam ekstraksi hidrokoloid
rumput laut dan dengan demikian memiliki potensi yang sangat besar untuk pembuatan pemrosesan polisakarida rumput laut
yang berkelanjutan.

2. Carrageenans

2.1. Sumber Karagenan Umum

Carrageenans komersial diekstrak dari genera rumput laut merah carrageenophyte Kappaphycus, Gigartina, Eucheuma,

Chondrus, dan Hypnea, di mana carrageenans terdiri hingga 50% dari berat kering [4]. κ-Carrageenan sebagian besar diekstraksi Kappaphycus
alvarezii, dikenal dalam perdagangan sebagai
Eucheuma cottonii, sedangkan ι-carrageeman sebagian besar diproduksi dari Eucheuma denticulatum, juga
Mar. Narkoba 2015, 13 3342

dikenal sebagai Eucheuma spinosum. λ-Karagenan diperoleh dari rumput laut di dalam Gigartina dan
Chondrus genera, yang sebagai tumbuhan sporofit menghasilkan λ-carrageenan sementara mereka membuat hibrid κ / ι sebagai tumbuhan

gametofit [4,5]. Asia Tenggara dan Tanzania adalah produsen utama rumput laut yang berasal dari carrageenans Kappaphycus alvarezii dan Eucheuma

spinosum [ 6].

Meja 2. Ringkasan sumber rumput laut, produk karbohidrat hidrokoloid, struktur kimia (unit struktural
utama), dan aplikasi hidrokoloid carrageenans, agars, dan alginat turunan rumput laut.

Rumput laut Penelitian

Produk Struktur Kimia Utama Aplikasi
Sumber Dilakukan

Agen pembentuk gel

Kappaphycus
κ-Karagenan (kaku dan [7]
alvarezii.dll
gel rapuh)

Eucheuma Agen pembentuk gel

ι-Karagenan [7]
spinosum (gel lembut fleksibel)

Gigartina spp.
λ-Karagenan Pengental [7]
Chondrus spp.

Kappaphycus κ-Karagenan
µ-Karagenan [8]
alvarezii.dll pendahulu

Eucheuma ι-Karagenan
ν-Karagenan [8]
spinosum pendahulu

Mikrobiologi
Gelidiella spp.
Agar / Agarose Agen pembentuk gel [9]
Gelidium spp.
(kuat dan kaku)

Porphyra
Porphyran Prekursor agar [8]
umbilicalis

Laminaria spp.
Alginat Agen pembentuk gel [10,11]
Sargassum spp.

2.2. Struktur Kimia Karagenan

Carrageenans adalah galaktan linier tersulfasi hidrofilik yang terutama terdiri dari D- satuan galaktopiranosa terikat bersama
dengan ikatan α-1,3 dan β-1,4 yang bergantian. Struktur dasar ini konsisten dalam tiga carrageenans komersial utama yang
digunakan, κ-, ι-, dan λ-carrageenan, Tabel 2. Adanya 4-linked
Mar. Narkoba 2015, 13 3343

3,6-anhidro-α- D- galaktopiranosa bervariasi di antara karagenan yang berbeda, seperti halnya substitusi dengan sulfat, yang
terkait dengan ester ke C2, C4, atau C6 dari unit galaktopiranosa, tergantung pada karagenan spesifiknya: κ-, ι-, atau
λ-carrageenan. κ-Karagenan memiliki satu ester sulfat, sedangkan ι-dan λ-karagenan masing-masing mengandung dua dan
tiga sulfat per dimer, Tabel 2. Selain itu, unit galaktopiranosa juga dapat dimetilasi atau diganti dengan misalnya, residu
monosakarida, seperti D- xilosa, 4- HAI- metil- L- galaktosa, dan D- asam glukuronat [12,13]. Hidrolisis asam, spektroskopi
inframerah, dan analisis NMR karagenan komersial biasanya menunjukkan kandungan sulfat 25% -30% untuk κ-carrageenan,
28% -30% untuk ι-karagenan, dan 32% -39% untuk λ-carrageenan, meskipun besar perbedaan dapat terjadi [7,14,15].
Perbedaan kadar sulfat dijelaskan oleh fakta bahwa carrageenans adalah karbohidrat yang sangat heterogen, dengan
perbedaan struktural yang berdampingan dalam jenis karagenan tertentu tergantung pada sumber alga, tahap hidup, dan
metode ekstraksi [16]. Selain itu, karagenan yang terjadi secara alami mengandung jejak prekursor biosintetiknya, μ- dan
ν-karagenan, menambah kompleksitas polisakarida ini, Gambar 1 [7]. Demikian juga, ada karagenan hibrida, yang mewakili
campuran unit pengulangan karagenan yang berbeda [5].

Gambar 1. Konversi pra kursor μ- dan ν-karagenan menjadi κ- dan ι-karagenan.

2.3. Sifat Fisiko-Kimia dari Carrageenans

Karagenan larut dalam air, tetapi kelarutannya bergantung pada kandungan hidrofilik sulfat, yang menurunkan suhu
kelarutan, dan adanya kation terkait potensial, seperti natrium, kalium, kalsium, dan magnesium, yang mendorong agregasi
bergantung kation antara karagenan heliks [17]. Faktor lain yang mempengaruhi sifat fisika-kimia dalam kaitannya dengan
viskositas dan gelasi adalah adanya jembatan anhidro: κ- dan ι-carrageenans memiliki unit 3,6-anhydro-galactopyranose,
sedangkan λ-carrageenan secara eksklusif terdiri dari α-1, 3 galactopyranose dan β-1,4 galactopyranose, Tabel 2.

Kehadiran jembatan anhidro di κ- dan ι-carrageeenan diusulkan sebagai hasil dari eliminasi ester sulfat yang ada pada
prekursornya masing-masing, yaitu, dalam μ- dan ν-karagenan, dan pembentukan jembatan anhidro spontan berikutnya dalam
residu monomer desulfat, Gambar 1. Penghapusan ester sulfat dalam µ- dan ν-karagenan mengurangi hidrofilisitas residu gula
dan membalikkan konformasi kursi dari 1 C 4 untuk 4 C 1, Gambar 1. Perubahan konformasi memungkinkan polisakarida menjalani
Mar. Narkoba 2015, 13 3344

transisi konformasi yang kondusif untuk sifat gelasi dari anhydro-bridge yang mengandung carrageenans [8].

Pembentukan gel termo-reversibel diusulkan terjadi dalam mekanisme dua langkah, tergantung pada suhu dan agen
penginduksi gel. Pada suhu tinggi, yaitu, di atas 75–80 ° C, carrageenans ada sebagai struktur kumparan acak sebagai hasil
tolakan elektrostatis antara rantai polimer yang berdekatan. Setelah pendinginan, rantai polimer mengubah konformasi menjadi
struktur heliks. Pendinginan lebih lanjut dan adanya kation (K +, Ca 2+, Na 2+) mengarah pada agregasi dimer heliks dan
pembentukan jaringan tiga dimensi yang stabil, yang terbentuk melalui interaksi antarmolekul antara rantai karagenan [18,19].
Detail molekuler gelasi karagenan masih belum pasti. Pembentukan heliks ganda sebelum gelasi tidak sepenuhnya terbukti, dan,
pada prinsipnya, pembentukan dupleks melalui interaksi rantai-rantai belum tentu menjadi bukti yang tegas untuk pembentukan
heliks ganda. Namun demikian, berdasarkan data literatur yang tersedia dan penjelasan teoritis, kami menafsirkan bahwa untuk
membentuk gel κ-carrageenan yang kaku, kation, biasanya kalium untuk κ-carrageenan, berfungsi untuk menstabilkan zona
persimpangan antara dua heliks dengan mengikat secara negatif. bermuatan gugus sulfat tanpa menghalangi ikatan silang dari
dua heliks, Gambar 2. Menurut model ini, kalsium, biasanya untuk ι-karagenan, secara analogis berfungsi untuk menghubungkan
silang dua heliks melalui jembatan garam ionik [20]. Ester sulfat yang bermuatan di sisi lain monomer, hadir pada ι-karagenan,
mendorong konformasi yang luas melalui efek tolakan dari SO negatif 3− kelompok dan menghambat gelasi sambil meningkatkan
viskositas dalam larutan [17]. Perbedaan posisi sulfat, proporsinya, dan adanya jembatan anhidro, dengan demikian, memberikan
profil gel khas karagenan: κ-karagenan membentuk gel kuat dan kaku, ι-karagenan membentuk gel lunak, dan λ-karagenan yang
tidak membentuk gel , tetapi masih memberikan peningkatan viskositas dalam larutan, karena struktur yang tidak memungkinkan
pembentukan heliks, Tabel 2. Harus ditekankan bahwa carrageenans alami adalah heterogen, yaitu, memiliki struktur
heteropolimer. Dalam praktiknya, sifat reologi carrageenans mencerminkan bahwa struktur hibrida ada.

2.4. Teknologi Enzim untuk Ekstraksi Carrageenans

Carrageenans diproduksi sebagai carrageenans semi-halus atau halus. Dalam produksi carrageenans semi-halus, carrageenans tidak diekstraksi dari

rumput laut, melainkan dipanaskan (hingga sekitar 75 ° C) dengan larutan alkali potassiumhydroxide. Hidroksida bereaksi dengan ester sulfat pada

prekursor μ- dan ν-karagenan untuk menghasilkan κ- dan ι-karagenan, yang meningkatkan kekuatan gel produk, sementara kalium mengikat karagenan dan

mendorong pembentukan gel dengan mencegah rantai hidrokoloid dari pembubaran. Rumput laut yang mengandung karagenan terikat kalium dicuci,

dikeringkan, dan dicincang menjadi bubuk [21]. Saat memproduksi karagenan olahan, proses ekstraksi karagenan semi halus dilanjutkan lebih lanjut

dengan memanaskan (95–110 ° C) rumput laut yang diolah dengan alkali untuk melarutkan matriks gel dalam pelepah rumput laut. Karagenan ditemukan

dengan pengendapan alkohol atau pengepresan gel [4]. Penyusunan karagenan semi-olahan jauh lebih murah daripada ekstraksi karagenan olahan,

karena biaya yang terkait dengan pemulihan alkohol dan / atau pemulihan karagenan dihindari. Untuk menghindari penggunaan bahan kimia dan dampak

negatifnya terhadap lingkungan, mungkin menarik untuk mengolah rumput laut dengan enzim untuk ekstraksi carrageenans. Selain itu, seperti yang

ditunjukkan untuk fucoidan, polisakarida rumput laut non-hidrokoloid hadir Untuk menghindari penggunaan bahan kimia dan dampak negatifnya terhadap

lingkungan, mungkin menarik untuk mengolah rumput laut dengan enzim untuk ekstraksi carrageenans. Selain itu, seperti yang ditunjukkan untuk fucoidan,

polisakarida rumput laut non-hidrokoloid hadir Untuk menghindari penggunaan bahan kimia dan dampak negatifnya terhadap lingkungan, mungkin menarik

untuk mengolah rumput laut dengan enzim untuk ekstraksi carrageenans. Selain itu, seperti yang ditunjukkan untuk fucoidan, polisakarida rumput laut

non-hidrokoloid hadir
Mar. Narkoba 2015, 13 3345

pada rumput laut coklat, polisakarida juga dapat mengalami degradasi dalam kondisi parah seperti ekstraksi tekanan, suhu
tinggi, dan konsentrasi alkali tinggi [22,23].

Gambar 2. Mekanisme gelasi κ-carrageenan dengan adanya ion kalium.

Literatur melaporkan beberapa contoh ekstraksi enzimatik carrageenans dari rumput laut merah; Blanco-Pascual dkk., ( 2014)

memperoleh hasil karagenan 28,65% dengan menggunakan alcalase (protease yang tersedia secara komersial) untuk ekstraksi hibrida κ

/ ι dari Mastocarpus stellatus. Produk mereka menunjukkan sifat pembentuk gel yang baik dan sebagai tambahan, mereka mengekstraksi

komponen berharga lainnya seperti polifenol, sehingga menambah nilai pada ekstraksi rumput laut [24]. Contoh ini menekankan bahwa

karagenan hibrid dapat diekstraksi secara selektif dengan menggunakan enzim, dan bahwa enzim dapat memungkinkan produksi yang

ditargetkan dari sifat gelasi tertentu karena karagenan hibrida dapat menunjukkan sifat fisik yang unik dan diinginkan. De Araújo dkk., ( 2012)

telah melakukan percobaan ekstraksi ι-karagenan dari Soliera filiformis dengan menggunakan papain (protease yang berasal dari buah

pepaya). Hasil mereka menunjukkan hasil yang lebih rendah bila dibandingkan dengan ekstraksi dengan air panas (sekitar 19%

dibandingkan dengan 33%), tetapi dengan ekstraksi enzimatik, mereka menghindari adanya protein kontaminan, yang hadir saat

mengekstraksi dengan metode tradisional [25]. Varadarajan dkk., ( 2009) telah membandingkan penggunaan selulase, Aspergillus niger, dan

ekstraksi perebusan tradisional karagenan dari Eucheuma cottonii. Mereka mendapatkan rendemen karagenan tertinggi saat

menggunakan selulase Novozyme NS50013: 45% dari berat masing-masing dibandingkan dengan 37% dan 37,5%. Viskositas

karagenan yang diekstraksi selulase

Mar. Narkoba 2015, 13 3346

lebih rendah daripada yang diekstraksi dengan metode tradisional. Penurunan viskositas dapat dijelaskan dengan adanya pengotor yang

terikat pada karagenan karena selulase menyerang dinding sel pada rumput laut untuk melepaskan karagenan dan dengan demikian tidak

merusak struktur karagenan itu sendiri. Begitu juga dengan pengobatan jamur pada rumput laut dengan A. niger mengakibatkan ekstraksi

carrageenans viskositas rendah, kemungkinan besar karena organisme mungkin telah menggunakan carrageenans sebagai sumber

karbon [26]. Perlu ditambahkan bahwa selain ekstraksi polisakarida enzimatik dari rumput laut, literatur juga melaporkan bertujuan untuk

meningkatkan ekstraksi protein dan metabolit dengan degradasi enzimatik: Penelitian ini telah menargetkan degradasi enzimatik dari

karbohidrat dinding sel rumput laut secara bersamaan dengan target degradasi rumput laut yang dibantu enzim hidrokoloid. Fleurence dkk.,

( 1995) sehingga digunakan κ-carrageenase dan agarase yang dikombinasikan dengan selulase untuk ekstraksi protein dari rumput laut

merah. Dalam percobaan mereka, mereka menunjukkan bahwa hasil protein tertinggi dicapai saat menggabungkan selulase dengan

enzim spesifik rumput laut: peningkatan 10 kali lipat untuk ekstraksi protein dari Chondrus crispus dan peningkatan 3 kali lipat dari Gracilaria

verrucosa dibandingkan dengan penggunaan selulase saja [27]. Kulshreshtha dkk., menggunakan karbohidrat dan protease komersial dan

melaporkan peningkatan yang signifikan dalam efisiensi ekstraksi bahan bioaktif dari Chondrus crispus dibandingkan dengan ekstraksi air

[28]. Seperti yang dinyatakan di atas, metode ekstraksi karagenan enzimatik saat ini tidak bertujuan untuk memodifikasi polisakarida

target selama ekstraksi. Namun, ketika mengekstraksi karagenan dengan reaksi enzimatik, prekursor μ- dan ν-karagenan harus diubah

menjadi κ- dan ι-karagenan untuk pencapaian produk yang lebih murni dan kemampuan pembentuk gel yang lebih baik. Genicot-Joncour dkk.,

( 2009) [8] telah mengidentifikasi dan memurnikan sulfurylases yang mampu mengubah ν-karagenan menjadi ι-karagenan, Gambar 1 dan

Tabel 3. Demikian pula, sulfurylases yang bertanggung jawab untuk mengkatalisasi penghapusan sulfat yang menyebabkan konversi

μ-karagenan menjadi κ-carrageenan, Gambar 1 dan Tabel 3, telah diidentifikasi [8].

Penelitian intensif telah dilakukan pada hidrolisis carrageenans dan sejauh ini mikroorganisme yang paling banyak dipelajari

sehubungan dengan ini adalah bakteri laut. Pseudoalteromonas carrageenovora —Dan enzim yang diproduksi oleh organisme ini. Dari

bakteri ini, Potin dkk., ( 1995) memurnikan dan menganalisis κ-carrageenase (EC 3.2.1.83) yang bertanggung jawab untuk pemutusan

hubungan β-1,4, yang termasuk dalam famili glikosida hidrolase (GH) 16, bersama dengan beberapa β-agarase yang bertanggung jawab

untuk degradasi agarosa , Tabel 3 [29]. Pada tahun 2000, Barbeyron dkk., memurnikan ι-carrageenase (EC 3.2.1.157) dari Zolbellia

galactanivorans —Enzim milik keluarga GH 82 bersama dengan ι-carrageenase lain yang dilaporkan, Tabel 3 [30]. Pada tahun 2007,
Guibet dkk., mengisolasi carrageenase lain dari P. carrageenovora, tetapi enzim ini hanya bekerja pada λ-karagenan, Tabel 3 (EC

3.2.1.162). Perbandingan urutan, situs katalitik, dan mekanisme telah mengungkapkan bahwa enzim yang terakhir ini milik keluarga lain

dari glikosida hidrolase, keluarga baru yang belum ditentukan [31].

Pencernaan oleh karagenase menghasilkan oligo-galaktan dengan berbagai ukuran, kemungkinan besar
karbohidrat dengan derajat polimerisasi (DP) 2, 4, dan 6. Alasan produksi DP yang berbeda adalah hasil dari struktur
karagenan heterogen dan mekanisme yang enzim mengikuti. Hubungan bolak-balik α-1,3 dan β-1,4 dalam
carrageenans menghasilkan keterkaitan β-1,4 yang berurutan berada dalam orientasi yang berlawanan dan
karenanya hanya setiap detik disakarida berada pada posisi yang tepat untuk pembelahan [30,32]. Ketiga
carrageenase semuanya memiliki mode aksi endolitik, di mana mereka bekerja pada hubungan di tengah rantai,
menghasilkan pembentukan DP6 [31,33,34]. Produk utama dari pencernaan κ- dan ι-carrageenase adalah DP4 dan
DP2, yang menunjukkan mekanisme prosesif,
Mar. Narkoba 2015, 13 3347

obligasi. Situs aktif berbentuk terowongan, yang ditemukan di κ- dan ι-carrageenases, selanjutnya menunjukkan mekanisme prosesif,

di mana substrat tertutup di situs aktif enzim. Perilaku prosesif ini mendukung pembentukan DP4s dan DP2s [30,33,35].

λ-carrageenase di sisi lain, berlangsung dengan cara yang lebih acak, menghasilkan jumlah DP6 yang lebih tinggi (dan kemungkinan

DP lebih tinggi lainnya sebagai produk) dibandingkan dengan produk dari hidrolisis k- dan ι-carrageenase. Enzim yang bertanggung

jawab atas konversi oligosakarida karagenan yang lebih kecil, sejauh pengetahuan kami, hanya dilaporkan untuk κ-carrageenan DP4,

yang diubah menjadi κ-carrageenan DP2 oleh carratetraose 4- HAI monosulfat β-hidrolase, Tabel 3 [36]. Namun, beberapa penelitian

menunjukkan bahwa carrageenases dapat menyerang ikatan β-1,3 terakhir untuk pembentukan monosakarida dengan waktu inkubasi

yang lama [31,32,34]. Beberapa karagenase telah diidentifikasi sejauh ini, yang semuanya menurunkan substrat karagenan, tetapi

berbeda dalam spesifisitas substrat, mekanisme, prosestivitas, struktur, urutan, dan kelompok enzim. Mekanisme molekuler untuk

hidrolisis ikatan β-1,3 berbeda antara karagenase yang berbeda. Oleh karena itu, κ-carrageenases mempertahankan konfigurasi

anomerik, sedangkan ι- dan λ-carrageenases membalikkan anomer [29,34]. Dari spesifisitas substrat yang ketat, tampaknya

karagenan mengenali pola sulfasi, yang menunjukkan bahwa pembelahan hubungan β-1,4 internal adalah langkah pertama dalam

degradasi carrageenans.

Desulfasi carrageenans menyebabkan mereka kehilangan sifat pembentuk gelnya dan dengan demikian merupakan area yang
kurang dipelajari, ketika aplikasi utamanya tepat karena kualitas ini. Namun demikian, McLean dan Williamson (1979) telah
mengidentifikasi sulfatase dari P. carrageenovora mampu menghilangkan gugus sulfat pada oligosakarida κ-carrageenan, Tabel 3
[37]. Sulfatase ι-karagenan menghilangkan ester sulfat pada posisi 4 di ι-karagenan baru-baru ini telah diidentifikasi dari a Pseudomonas
sp. [38]. Enzim ini tidak bekerja pada sulfat di posisi 4 di κ-carrageenan atau sulfate di posisi 2 di ι-carrageenan, menunjukkan
bahwa secara khusus mengenali sulfat pada 3,6-anhydro- D- galaktopiranosis [38]. Hasil ini menunjukkan bahwa sulfatase sangat
spesifik, seperti kasus carrageenase, tetapi dengan pengetahuan yang terbatas tentang topik tersebut, banyak penelitian masih
diperlukan untuk sepenuhnya memahami dan mengontrol desulfasi katalis enzim pada carrageenans. Penelitian tentang sulfatase
kerja polisakarida lainnya mendukung asumsi spesifisitas substrat: Sebagai contoh, sulfatase 2S-heparan dari

Flavobacterium heparinum tidak aktif pada 6S-heparan sulfat dan sebaliknya 6S-heparan sulfatase tidak mengenali
2S-heparan sulfat [39].

2.5. Aplikasi Carrageenans

Karena sifat fisika-kimiawi dari carrageenans, mereka sering digunakan sebagai penstabil, agen pembentuk gel,
pengemulsi, dan pengental dalam industri makanan dan kue (es krim, keju, selai, adonan roti). Aplikasi lain termasuk
penggunaannya sebagai pengikat dalam pasta gigi, pengental dan penstabil dalam kosmetik, dan sebagai bahan
halus dalam makanan hewan. Tepung karagenan semi-halus diwarnai, dan mungkin memiliki jumlah bakteri yang
tinggi, dan oleh karena itu tidak sesuai untuk konsumsi manusia tetapi digunakan dalam makanan hewan kalengan,
di mana proses pengalengan menghancurkan organisme hidup [40]. Baru-baru ini, karagenan telah menarik
perhatian di industri farmasi, karena telah terbukti bahwa karagenan dapat menghambat penempelan virus seperti
human papillomavirus, virus dengue, dan virus herpes. Sebagai tambahan,
Mar. Narkoba 2015, 13 3348

Tabel 3. Ringkasan enzim yang dilaporkan dalam kaitannya dengan modifikasi carrageenans, agar, dan alginat.

Penelitian
Hidrokoloid Enzim Organisme Reaksi Katalitik
Dilakukan

κ-Carrageenase Endohidrolisis (1,4) -β- D- keterkaitan

Pseudoalteromonas
κ-Karagenan EC 3.2.1.83 antara D- galaktosa 4-sulfat [29]
carrageenovora.dll
GH 16 dan 3,6-anhydro- D- galaktosa

Pseudomonas Menghilangkan sulfat dari D- galaktosa 4-sulfat,

κ-Karagenan Sulfatase [37]
carrageenovora.dll memproduksi D- galaktosa

Hidrolisis (1,4) -β- D- hubungan antara

Carratetraose-4- HAI Pseudomonas
κ-Karagenan antara D- galaktosa 4-sulfat dan [36]
monosulfat-β-hidrolase carrageenovora.dll
3,6-anhidro- D- galaktosa dalam κ-carrageenan DP4

Menghilangkan sulfat dari D- galaktosa

κ-Karagenan Sulfurylase I dan II Chondrus crispus 6-sulfat dari μ-karagenan, [42]

memproduksi 3,6 anhydro- D- residu galaktosa

ι-Carrageenase Endohidrolisis (1,4) -β- D- keterkaitan

ι-Karagenan EC 3.2.1.157 Zolbellia galacta antara D- galaktosa 4-sulfat dan [30]

GH 82 3,6-anhidro- D- galaktosa-2-sulfat

Pseudoalteromonas Menghilangkan sulfat dari D- galaktosa 4-sulfat,

ι-Karagenan Sulfatase [38]
atlantica memproduksi D- galaktosa

Menghilangkan sulfat dari D- galaktosa 6-sulfat

ι-Karagenan Sulfurylases I dan II Chondrus crispus dari ν-karagenan, menghasilkan [8]

3,6 anhidro- D- residu galaktosa

Endohidrolisis (1,4) -β- D- keterkaitan

λ-Carrageenase Pseudoalteromonas
λ-Karagenan antara D- galaktosa 2-sulfat dan [31]
EC 3.2.1.162 carrageenovora.dll
D- galaktosa 2,6-sulfat

Menghilangkan sulfat dari L- galaktosa 6-sulfat

Gal-6-sulfurylase
Agar Porphyra umbilicalis dari porphyran, memproduksi [43]
EC 2.5.1.5
3,6- L- anhidrogalaktosa

Endohidrolisis (1,3) -α- L- keterkaitan

α-Agarase Thalassomonas
Agar antara D- galaktosa dan [44]
EC 3.2.1.158 agarivorans JAMP-A33
3,6-anhidro- L- galaktosa

Hidrolisis (1,4) -β- D- keterkaitan

β-Agarase Alteromonas sp.
Agar antara 3,6-anhydro- L- galaktosa dan [45]
EC 3.2.1.81 SY37-12
D- galaktosa dalam agar

Lyase Mannuronate Pembelahan polisakarida

Alginat Azotobacter chroococcum [46]
EC 4.2.2.3 PL5 dengan β- D- mannuronate

Guluronate lyase Pembelahan polisakarida

Alginat Klebsiella aerogenes [47]
EC 4.2.2.11 PL7 mengandung α- L- guluronate.dll

Epimerisasi β- D- mannuronic
Alginat Epimerase C5 Mannuronan Azotobacter vinelandii [48]
residu asam di C5
Mar. Narkoba 2015, 13 3349

3. Agars

3.1. Sumber Rumput Laut Merah Umum

Agars diproduksi secara industri dari genera rumput laut merah agarophytes Gelidium, Gracilaria, dan

Gelidiella [ 2]. Gelidium rumput laut dipanen dalam jumlah besar di pantai utara Spanyol, di pantai selatan Portugal, dan di pantai
barat Maroko. Gracilaria spesies tersebar luas di perairan yang lebih dingin seperti Chili bagian selatan dan pantai Atlantik
Kanada, dengan beberapa spesies beradaptasi dengan perairan tropis, misalnya di sekitar Indonesia. Budidaya komersial Gracilaria
didirikan menggunakan
Gracilaria chilensis, yang merupakan spesies rumput laut merah asli yang berasal dari pantai selatan Chili. Jumlah yang
signifikan Gracilaria sp. sekarang dibudidayakan di kolam dan muara di Asia, terutama di Cina, di provinsi selatan Guangxi dan
Hainan, dan juga di Indonesia, dan Vietnam, sedangkan
Gelidiella acerosa merupakan sumber utama agar-agar di India [2] Produksi agar-agar global sekitar 10.600 ton / tahun,
dengan perkiraan nilai US $ ~ 191 juta pada tahun 2014, Tabel 1.

3.2. Struktur Kimia Agar

Seperti carrageenans, agars adalah galaktan hidrofilik yang terdiri dari unit galaktopiranosa dengan keterkaitan α-1,3 dan
β-1,4, tetapi, sedangkan galaktopiranosa terkait-α ada di D- konfigurasi di carrageenans, agar terdiri dari L- unit galaktopiranosa.
Beberapa agar mengandung jejak prekursor porphyran:
D- galaktosa dan L- galaktopiranosa 6-sulfat [12]. Kehadiran 3,6-anhydro- L- galactopyranose pertama kali diusulkan oleh Rees
(1961) [49] melalui 3,6-anhydro- L- galactopyranose dengan porphyran from L- galaktosa 6-unit sulfat. Kemudian, berbagai
substitusi yang paling sering adalah satuan galaktosa termetilasi seperti 6- HAI- metil- D- galaktosa dan 4- HAI- metil- L- galaktosa, L- galaktos
metil-pentosa, dan xilosa dijelaskan untuk agar oleh Araki dkk., ( 1967) [50]. Agar-agar diekstrak dari rumput laut merah Laurencia
pinnatifida Lamour diidentifikasi mengandung 2- HAI- metil-3,6-anhidrogalaktosa, 2- HAI- metil- L- galaktosa 6-sulfat, dan D- galaktosa
2-sulfat [51]. 2- HAI- gula anhidro termetilasi sekarang telah dikonfirmasi sebagai gula utama dalam agar dari Gracilaria
eucheumoides Harvey, yang berdampingan dengan 6- HAI- metil- D- galaktosa dan galaktosa 4-sulfat [14,52]. Craigie dan Jurgens
(1989) menetapkan 4- HAI- metil- L- galaktosa terjadi sebagai cabang pada galaktosa di tulang punggung polimer. Agar-agar
termetilasi sebagian besar ditemukan pada agarosa komersial yang mengandung sekitar 6- HAI- dan / atau 2- HAI- unit berulang
bermetilasi [53].

Agarose mengacu pada tulang punggung agar-agar netral yang tidak dimodifikasi, dimana sekitar 20% dari dimer membawa gugus

metil atau sulfat, sedangkan agaropektin adalah bagian dari agar-agar yang dimodifikasi [19]. Kompleksitas struktur agar-agar

merupakan tantangan dalam kaitannya dengan penetapan teknologi pemrosesan standar untuk agar. Namun demikian, sebagian besar

modifikasi kimiawi alami, kecuali prekursor biologis, tidak mempengaruhi konformasi heliks polisakarida agar-agar, tetapi mungkin

memiliki efek pada agregasi heliks dan akibatnya mempengaruhi sifat gelasi [54].

3.3. Sifat Fisiko-Kimia Agar

Sifat pembentuk gel dan kelarutan polisakarida agar menonjol di antara polisakarida hidrokoloid karena
hidrofobisitas relatifnya: Struktur dasar terdiri dari pengulangan
Mar. Narkoba 2015, 13 3350

unit dari 1,3-linked β- D- galaktopiranosa dan 1,4-terkait 3,6-anhidro-α- L- galaktopiranosa yang memungkinkan agar membentuk dimer

heliks menurut mekanisme yang mirip dengan carrageenans yang dijelaskan di atas (Bagian 2.3). Ketika 3,6-anhydrogalactose

digantikan oleh prekursor biologisnya, L- galaktosa 6-sulfat atau L- galaktosa, pembentukan heliks dan pembentukan gel sebagian

dicegah karena “ketegaran”, yaitu,

heliks memiliki unit pemecah yang tidak memiliki jembatan 3,6-anhidrida [49].

Perbandingan sifat fisika-kimiawi agar dan karagenan (diduga κ-karagenan) menunjukkan bahwa kekuatan gel
agar-agar 2–10 kali lebih tinggi daripada karagenan, dan titik leleh agar mendekati titik didih air, sedangkan titik leleh
gel karagenan adalah 50-70 ° C, Tabel 4. Kekuatan gel yang meningkat dan titik leleh gel agar-agar yang lebih tinggi
diyakini terkait dengan kandungan sulfat anionik yang lebih rendah. Namun, viskositas agar dalam larutan pada suhu
60 ° C lebih rendah daripada karagenan, Tabel 4. Perbedaan ini disebabkan oleh massa molar yang lebih rendah
dari agar polisakarida dibandingkan dengan karagenan, untuk sediaan agar komersial, berat molekul rata-rata
biasanya berkisar dari 36 kDa hingga 144 kDa; sebaliknya,

Selain itu, konsentrasi tinggi metoksil dan 3,6-anhidrogalaktosa dalam agar meningkatkan sifat hidrofobiknya,
memungkinkan kelarutan agar dalam larutan panas etanol berair 40% -80% [52]. Sifat fisika-kimiawi membuat gel agar-agar
kuat dan kaku [56], tetapi untuk karagenan, produk alaminya adalah heteropolimer hibrid dan mungkin mengandung subunit
heteropolimer yang berbeda.

Tabel 4. Sifat fisika-kimiawi untuk agar dan carrageenans. Angka-angka itu hanyalah perkiraan. Nilai viskositas diberikan

sebagai (centipoise, cP) yang setara dengan N · s · m −2 [ 56].

Properti Agar Karagenan

Kelarutan Air mendidih Air mendidih
Kekuatan Gel (1,5% pada 20 ° C) 700–1000 g / cm 3 100–350 g / cm 3

Viskositas (1,5% pada 60 ° C) 10–100 centipoise 30–300 sentipoise

Titik lebur 85–95 ° C 50–70 ° C

Titik gel 32–45 ° C 30–50 ° C

3.4. Ekstraksi dan Pengolahan Agar

Prosedur ekstraksi agar-agar tergantung pada spesies rumput laut tertentu, tetapi umumnya terdiri dari perlakuan alkali yang

diikuti dengan ekstraksi air panas. Seperti dijelaskan di atas untuk carrageenans, perlakuan alkali menyebabkan perubahan kimiawi

pada agar (pembentukan 3,6-anhydro-galactopyranose) yang menghasilkan peningkatan kekuatan gel. Ekstraksi air panas

dilakukan pada suhu sekitar 100 ° C selama sekitar 2–4 jam, terkadang di bawah tekanan. Agar larut dalam air, sisa rumput laut

dihilangkan dengan filtrasi, dan agar diperoleh kembali dengan pengendapan alkohol [41]. Persiapan agarosa dilakukan dengan

metode presipitasi fraksional dengan misalnya polietilen glikol 6000 [42], metode adsorpsi dengan misalnya, aluminium hidroksida

[43], atau metode kromatografi seperti kromatografi pertukaran ion [44].

Untuk ekstraksi agar-agar, diperlukan kondisi ekstraksi yang ringan yang dapat meningkatkan kelarutan dan kekuatan gel serta

menghindari efek berbahaya pada lingkungan dan perusakan karbohidrat yang berharga. Seperti kasus carrageenans,

anhydrogalactose bertanggung jawab atas kapasitas pembentuk gel agar, sehingga prekursor porphyran memiliki L- galaktosa 6-sulfat

harus diubah menjadi 3,6-anhidrogalaktosa. Sintesis 3,6-anhydro- L- galaktosa telah dilakukan dengan menggunakan Gal-6-sulfurylase

yang aktivitasnya
Mar. Narkoba 2015, 13 3351

telah dibuktikan oleh Rees (1961) [49]. Saat menginkubasi enzim (0,2%) dan substrat (porphyran, 1%, w / v; 10 mL.)
Pada suhu 35 ° C, reaksi mengarah ke pembentukan 3,6-anhidrogalaktosa, dengan pembebasan sulfat dari ikatan ester
dari porphyran, terjadi. Mekanisme rinci dari desulfasi "reaksi ganda" dan pembentukan 3,6-anhidrogalaktosa ini belum
sepenuhnya dijelaskan, karena
3,6-anhydrogalactose biasanya digabungkan dalam polisakarida melalui posisi 4 dan dalam suatu keterkaitan. Kemungkinan besar file L- unit

prekursor galaktosa 6-sulfat memiliki hubungan yang serupa. De-esterifikasi dari

L- residu galaktosa 6-sulfat, yang diketahui ada dalam porfiria, dapat diproses secara bersamaan dengan 3,6-anhidro- L- pembentukan
galaktosa, karena reaksi kimia analog diketahui [57].
Tidak ada upaya ekstraksi enzimatis agar-agar dari rumput laut merah yang telah dilaporkan, tetapi hidrolisis enzimatis
agars telah dibuktikan beberapa kali. Hidrolisis ini membutuhkan agarase, yang diklasifikasikan menurut mode aksinya:
β-agarase yang mengkatalisis hidrolisis dari ikatan β-1,4 dan α-agarase yang mengkatalisis hidrolisis dari ikatan α-1,3,
Tabel 3 [30] . Enzim α-agarase (EC 3.2.1.158) dari Thalassomonas sp. dapat menggunakan agarose, agarohexaose dan
neo-agarohexaose sebagai substrat. Produk hidrolisis agaroheksaosa adalah dimer dan tetramer, dengan agarotetraose
menjadi produk utama, sedangkan hidrolisis neo-agaroheksaosa menimbulkan dua jenis trimer. Meskipun enzim ini juga
dapat menghidrolisis porfirin agarosa tersulfasi tinggi dengan sangat efisien, enzim ini tidak dapat menghidrolisis senyawa
terkait κ-karagenan (lihat EC 3.2.1.83) dan ι-karagenan (lihat EC 3.2.1.157) [30]. Agarosa 4-glycanohydrolase ( yaitu, β-agarase,
EC 3.2.1.18) mengkatalisis pemutusan hubungan β- (1 → 4) pada agarosa secara acak dengan retensi konfigurasi ikatan
anomerik, menghasilkan anomer β yang secara progresif menimbulkan anomer α ketika mutarotation berlangsung [6].
Produk akhir dari hidrolisis adalah neo-agarotetraose dan neo-agarohexaose dalam kasus AgaA (β-agarase gen A), dari
bakteri laut. Zobellia galactanivorans, dan neo-agarotetraose dan neo-agarobiose dalam kasus (AgaB β-agarase gen B) [58].

3.5. Aplikasi Komersial Agar

Karena sifat fisiokimianya, agar-agar digunakan dalam industri makanan sebagai agen pembentuk gel di,

misalnya, es krim dan selai, dalam kosmetik sebagai, misalnya, pengental dalam krim, dan dalam farmasi sebagai, misalnya, eksipien dalam

pil [56]. Selain itu, agar-agar banyak digunakan dalam media pertumbuhan kultur bakteri untuk penelitian ilmiah. Agarose juga digunakan

dalam aplikasi bioteknologi, terutama dalam elektroforesis gel dan kromatografi berbasis agarosa. Alasan untuk menggunakan agarosa dan

bukan agar terletak pada kenyataan bahwa agaropektin memiliki ikatan kimia tak jenuh dalam substitusi sulfat dan piruvat yang memberikan

penyerapan UV yang tinggi dalam gel agarosa dan mengganggu deteksi asam nukleat setelah elektroforesis [9].

4. Alginat

4.1. Sumber Rumput Laut Coklat Umum dari Alginat

Alginat atau asam alginat dibedakan dengan hidrokoloid rumput laut lainnya karena diekstrak dari rumput laut coklat. Pada
rumput laut coklat, alginat merupakan komponen kunci dari dinding sel rumput laut dan juga tampak hadir dalam matriks ruang
antar sel. Oleh karena itu, alginat tampaknya ada di sebagian besar spesies rumput laut coklat, tetapi jumlahnya bervariasi.
Spesies utama yang digunakan untuk ekstraksi alginat komersial adalah Laminaria spp., Macrocystis spp., Ascophyllum spp., Sargassum
spp.,
Mar. Narkoba 2015, 13 3352

dan Fucales spp. — pada spesies ini, alginat terdiri hingga 40% dari bahan kering [2,4,59]. Laminaria japonica ( alias Saccharina japonica)

berlimpah di China dan dapat bersaing dengan produsen alginat barat. Namun rasio guluronat terhadap asam manuronat rendah (M: G)

sebesar L. japonica dari Cina menghasilkan alginat pembentuk gel yang lemah (lihat di bawah). Masalah ini mendorong produsen alginat

China untuk mengimpor

Lessonia nigrescens dari Chili dan Peru [60]. Itu telah didalilkan Sargassum spp. hanya digunakan jika tidak ada rumput laut coklat
lain yang tersedia karena alginatnya biasanya kualitas ambang dan hasil rendah [2]. Meskipun demikian, telah ditunjukkan bahwa

spesies berbeda Sargassum dan teknologi ekstraksi yang digunakan memberikan hasil dan kualitas alginat yang sangat berbeda

[61]. Alginat juga dapat diisolasi dari bakteri seperti Azotobacteria dan Pseudomonas [ 62], tetapi saat ini produksi alginat bakteri tidak

digunakan secara komersial.

Eropa, AS, dan Jepang adalah produsen utama alginat 30 tahun lalu, tetapi kemunculan produsen alginat Cina telah
mengubah industri alginat dalam beberapa dekade terakhir. Nilai pasar global untuk alginat saat ini diperkirakan mencapai US $
339 juta / tahun, Tabel 1. Pangsa pasar alginat berdasarkan aplikasi telah meningkat sebesar 20% untuk segmen makanan /
farmasi. Kapasitas produksi dunia telah meningkat 25%, terutama di Cina, selama dekade terakhir [60] (walaupun angka yang
dapat diandalkan dari Cina sulit diperoleh).

4.2. Struktur Kimia dan Sifat Fisik-Kimia Alginat

Alginat adalah polimer linier yang dibangun oleh dua asam uronat monomerik, β- D- asam mannuronat (M) dan α- L- asam guluronat

(G). Kedua asam uronat tersebut tersusun dalam pola balok yang tidak teratur dengan proporsi blok MM, MG, dan GG yang

bervariasi, tergantung pada sumber alga, teknik ekstraksi, dan waktu panen. Asam mannuronat membentuk ikatan β-1,4, yang

memberikan blok MM konformasi linier dan fleksibel, sementara asam guluronat menimbulkan ikatan α-1,4, dan memperkenalkan

penghalang sterik di sekitar gugus karboksil, sehingga memberikan lipatan dan struktur kaku yang memastikan kekakuan pada rantai

polimer [59].

Seperti hidrokoloid turunan rumput laut lainnya yang dijelaskan dalam makalah ini, alginat juga memiliki kapasitas pembentukan gel.

Dengan adanya kation divalen, kebanyakan Ca 2+, ion dapat mengikat gugus karboksil dalam alginat dan bertindak sebagai penaut-silang

yang menstabilkan rantai alginat dengan pembentukan jaringan-gel. Seperti yang ditunjukkan oleh Grant dkk. ( 1973), proses gelasi

sebagian besar melibatkan pengikatan kooperatif ion divalen melintasi blok GG dari rantai alginat yang selaras, oleh karena itu rasio M: G

memiliki dampak besar pada sifat fisika-kimia alginat: Alginat dengan rasio M: G rendah ( yaitu, memiliki jumlah residu asam guluronat

yang relatif tinggi) umumnya berupa gel padat dan rapuh, sedangkan alginat dengan rasio M: G tinggi ( yaitu, dengan jumlah residu asam

guluronat yang relatif rendah) menghasilkan gel yang lebih elastis [10,11].

Rasio M: G bervariasi di antara tingkatan taksonomi rumput laut coklat ( yaitu, memesan); khas Ascophyllum nodosum (Fucales) memiliki
alginat dengan rasio M: G sekitar 1,2; sedangkan Laminaria japonica
( Laminariales) memiliki rasio M: G yang lebih tinggi sekitar 2,2, sementara banyak Sargassum (Fucales) alginat memiliki rasio M: G mulai dari

0,8 hingga 1,5 [61].

Mar. Narkoba 2015, 13 3353

4.3. Ekstraksi dan Pengolahan Alginat

Alginat diekstraksi dengan cara berbeda tergantung pada aplikasinya, tetapi prosedur yang paling umum digunakan adalah
yang dijelaskan oleh Calumpong dkk. ( 1999), yang mengandalkan ekstraksi alginat sebagai natrium alginat. Metode ini didasarkan
pada pengubahan kalsium dan magnesium-alginat yang tidak larut yang ada di dalam dinding sel rumput laut coklat menjadi
natrium alginat terlarut yang kemudian dipulihkan sebagai asam alginat atau kalsium alginat. Konversi ini dilakukan dengan
penambahan asam, alkohol, dan natrium karbonat secara berurutan [63]. Teknik ekstraksi yang tersedia untuk ekstraksi alginat
menghadapi beberapa kesulitan, misalnya terkait dengan pemisahan sisa rumput laut yang tidak larut. Karena alginat larut sebagai
natrium alginat, ketebalan larutan menghalangi filtrasi dan larutan harus diencerkan dengan air dalam jumlah besar. Karena sisa
rumput laut sangat halus dan dapat menyumbat filter, alat bantu filter harus disediakan sehingga prosesnya mahal. Sebagai
tambahan, bahan kimia yang digunakan untuk ekstraksi diyakini mempengaruhi sifat fisika-kimia alginat [64]. Untuk menghindari
kesulitan yang dihadapi dalam teknik ekstraksi tradisional dan efek destruktif yang dimilikinya pada sifat fungsional, diperlukan
teknik ekstraksi dan pemrosesan alternatif.

Hidrolisis enzimatik alginat telah dipelajari secara intensif dan keduanya β- D- mannuronate dan α- L- Liase guluronat
yang mengkatalisis degradasi alginat telah diisolasi dari alga laut, moluska laut, dan berbagai mikroorganisme, Tabel
3 [46,47].
Dua lyase alginat mengkatalisis degradasi alginat dengan mekanisme eliminasi β yang menargetkan 1,4 ikatan glikosidik
yang menghubungkan dua monomer asam uronat. Ikatan rangkap terbentuk antara atom karbon di posisi 4 dan 5 di cincin
asam uronat, dari mana 1,4 ikatan glikosidik dihilangkan, menghasilkan produksi 4-deoksi- L- asam
erythro-hex-4-enopyranosyluronic. Meskipun enzim diklasifikasikan menurut spesifisitasnya, mereka biasanya memiliki
prosestivitas sedang hingga rendah untuk epimer lain [65]. Seperti disebutkan di atas, penelitian skala lab telah menunjukkan
bahwa alginat dapat disintesis oleh bakteri yang termasuk dalam genera Azotobacter dan Pseudomonas di mana alginat
disintesis sebagai mannuronan, dan jumlah yang bervariasi dari residu M dalam polimer kemudian diepimerisasi menjadi
residu G oleh mannuronan C-5-epimerases [66]. Dalam studi awal yang dilakukan oleh Haug dan Larsen (1971), mannuronan
C-5-epimerases diisolasi dari kultur cairan Azotobacter vinelandii diperiksa untuk epimerisasi D- residu asam mannuronat ke L- residu
asam guluronat kalsium alginat dibuat dari alga coklat. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kedua blok homopolimer L- asam
guluronat dan blok yang memiliki urutan residu M dan G yang bergantian dibentuk oleh reaksi epimerisasi enzimatik ini [48].
Karena sifat pembentuk gel, pengikatan air, dan imunogenik polimer bergantung pada jumlah relatif dan distribusi urutan
residu M dan G, penelitian yang tersedia menunjukkan bahwa enzim tertentu dapat digunakan untuk produksi alginat dengan
sifat khusus. Namun, sepengetahuan kami, tidak ada laporan yang tersedia yang meneliti penambahan epimerase selama
ekstraksi dan pemrosesan alginat.

Sepengetahuan kami, tidak ada upaya ekstraksi enzimatis alginat dari rumput laut coklat yang telah dilaporkan, tetapi seperti yang

dijelaskan sebelumnya untuk rumput laut merah, protein dan komponen bioaktif telah diisolasi dari rumput laut coklat dengan teknik

ekstraksi yang dibantu enzim juga. Eksperimen ini bertujuan untuk menurunkan dinding sel untuk melepaskan senyawa yang

diinginkan dari sel rumput laut. Hardouin dkk., ( 2013) telah menggunakan karbohidrat dan protease untuk ekstraksi senyawa antivirus

dari rumput laut coklat Sargassum muticum dan menunjukkan bahwa hasil dapat ditingkatkan dengan penggunaan
Mar. Narkoba 2015, 13 3354

enzim jika dibandingkan dengan ekstraksi tradisional [67]. Senyawa antikoagulan telah diekstraksi dari tujuh sumber rumput
laut coklat menggunakan lima karbohidrat oleh Athukorala. dkk., ( 2006) [68] dan Heo dkk., ( 2005) menggunakan lima
karbohidrat komersial dan protease untuk ekstraksi antioksidan dari rumput laut coklat [69].

4.4. Aplikasi Umum untuk Alginat

Alginat digunakan dalam industri makanan sebagai penstabil dan pengental misalnya jeli, minuman, dan makanan penutup. Selain itu, alginat

penting dalam perawatan kesehatan dan industri farmasi di mana mereka digunakan sebagai pembalut luka dan sebagai matriks untuk

membungkus dan / atau melepaskan sel dan obat-obatan [70-72].

Alginat juga telah dilaporkan sebagai substrat yang cocok untuk adsorpsi logam berat dan beberapa penelitian menunjukkan bahwa

rumput laut coklat dapat digunakan untuk penyerapan logam berat. Aplikasi ini dapat dianggap diterapkan sebagai penghilangan

strategis zat beracun dari air limbah saat membudidayakan rumput laut untuk ekstraksi alginat [73].

5. Kesimpulan

Rumput laut adalah sumber unik hidrokoloid berharga yang karena sifat fungsionalnya memiliki kepentingan yang
signifikan dalam industri makanan, obat, dan bioteknologi. Teknik ekstraksi tradisional bergantung pada penggunaan bahan
kimia dalam kondisi yang sulit. Untuk menjaga sifat fungsional polisakarida hidrokoloid yang berharga dan untuk menghindari
penggunaan bahan kimia, diperlukan teknik ekstraksi yang lebih lembut dan lebih selektif.

Literatur saat ini terutama berfokus pada hidrolisis hidrokoloid, dan beberapa enzim spesifik rumput laut telah diidentifikasi yang

mendegradasi polisakarida hidrokoloid dan dengan demikian mengubah kelarutan dan kekuatan gel. Beberapa penelitian telah membahas

penggunaan selulase dan protease komersial yang diturunkan dari mikroba, serta kombinasi keduanya dengan enzim spesifik rumput laut,

untuk ekstraksi hidrokoloid rumput laut. Campuran enzim tersebut juga telah digunakan untuk ekstraksi protein dan komponen lain dari

spesies rumput laut terpilih. Namun, campuran enzim komersial yang digunakan umumnya telah dikembangkan untuk pemrosesan

biomassa tanaman terestrial, dan bukan untuk karbohidrat rumput laut, dan beberapa perlakuan enzim meningkatkan hasil karbohidrat

sambil mempertahankan sifat pembentuk gel dan yang lainnya menurunkan hasil hidrokoloid dan mengganggu kemampuan pembentuk gel

dari hidrokoloid. Ada kebutuhan untuk mengembangkan enzim yang lebih baik yang dirancang untuk pemrosesan polisakarida rumput laut,

karena penggunaan enzim memungkinkan pengurangan bahan kimia dalam ekstraksi hidrokoloid rumput laut sambil memungkinkan sifat

fungsional yang dibuat khusus dan dengan demikian memiliki potensi besar untuk menciptakan pemrosesan polisakarida rumput laut yang

berkelanjutan.

Ucapan Terima Kasih

Makalah tinjauan ini adalah bagian dari Proyek Penelitian Biorefinery Rumput Laut di Ghana (SeaBioGha) yang didukung
oleh kerjasama pembangunan Denmark (Grant DANIDA-14-01DTU), Kementerian Luar Negeri Denmark.
Mar. Narkoba 2015, 13 3355

Kontribusi Penulis

NRK, MTA, AM: Presentasi, interpretasi dan diskusi data yang disajikan di
naskah.

Konflik kepentingan

Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi

1. Situs Gulma Laut: Informasi tentang Alga Laut. Tersedia online: http://seaweed.ie/ using_general /
industrialgums.php (diakses pada 18 Mei 2015).
2. Mchugh, DJ Panduan Industri Rumput Laut; Kertas Teknis Perikanan FAO 441; Organisasi Pangan dan Pertanian
Perserikatan Bangsa-Bangsa: Roma, Italia, 2003.
3. Msuya, F. Dampak budidaya rumput laut terhadap status sosial ekonomi masyarakat pesisir di Zanzibar, Tanzania. Aquac
Dunia. 2011, 42, 45–48. McHugh, D. Produksi dan Pemanfaatan Hasil Rumput Laut Komersial; Kertas Teknis
4. Perikanan FAO 288; Organisasi Pangan dan Pertanian Perserikatan Bangsa-Bangsa: Roma, Italia, 1987. Van De
Velde, F .; Peppelman, HA; Rollema, HS; Hans, R. Tentang struktur κ / ι-hybrid carrageenans. Karbohidrat Res. 2001, 331,
5. 271–283. Valderrama, D .; Cai, J .; Hishamunda, N .; Ridler, N. Dimensi Sosial dan Ekonomi Budidaya Rumput Laut
Karagenan; Makalah Teknis Perikanan dan Budidaya 580; Organisasi Pangan dan Pertanian Perserikatan
6. Bangsa-Bangsa: Roma, Italia, 2013.

7. De Ruiter, GA; Rudolph, B. Bioteknologi Karagenan. Tren Sci Makanan. Technol. 1997, 8,
389–395.
8. Genicot-Joncour, S .; Poinas, A .; Richard, O .; Potin, P .; Rudolph, B .; Kloareg, B .; Helbert, W. Siklisasi cincin
3,6-anhidro-galaktosa iota-karagenan dikatalisis oleh dua
D- galaktosa-2,6-sulfurylases di alga merah Chondrus crispus. Fisiol Tanaman. 2009, 151, 1609–1616. Wang,
9. TP; Chang, LL; Chang, SN; Wang, EC; Hwang, LC; Chen, YH; Wang, YM Persiapan sukses dan karakterisasi
agarose kelas bioteknologi dari pribumi
Gelidium amansii dari Taiwan. Proses. Biochem. 2012, 47, 550–554.
10. Grant, GT; Morris, ER; Rees, DA; Smith, PJC; Thom, D. Interaksi biologis antara polisakarida dan kation
divalen: Model kotak telur. FEBS Lett. 1973, 32, 195–198.
11. Torres, MR; Sousa, APA; Silva Filho, MAKAN; Melo, DF; Feitosa, JPA; de Paula, RCM; Lima, Ekstraksi MGS dan
karakterisasi fisikokimia Sargassum vulgare alginat dari Brazil. Karbohidrat Res. 2007, 342, 2067–2074. Usov, AI
Polisakarida dari ganggang merah. Adv. Karbohidrat Chem. Biochem. 2011, 65, 115–217. Knutsen, SH; Myslabodski,
12. DE; Larsen, B .; Usov, AI Sistem nomenklatur yang dimodifikasi untuk galaktan alga merah. Bot. Merusak. 1994, 37, 163–169.
13.

14. Rochas, C .; Lahaye, M .; Kandungan Yaphe, W. Sulfat karagenan dan agar ditentukan dengan spektroskopi inframerah. Bot. Merusak. 1986,

29, 335–340.
Mar. Narkoba 2015, 13 3356

15. Van de Velde, F .; Knutsen, SH; Usov, AI; Rollema, HS; Cerezo, AS 1 H dan 13 C spektroskopi NMR resolusi tinggi dari
carrageenans: Aplikasi dalam penelitian dan industri. Tren Sci Makanan. Technol. 2002, 13, 73–92. Craigie, dinding sel
JS. Di Biologi Alga Merah; Cole, K., Sheath, R., Eds .; Cambridge University Press: Cambridge, Inggris, 1990; hlm.
16. 221–257.

17. Montero, P .; Pe, M. Pengaruh Na +, K + dan Ca 2+ pada gel yang terbentuk dari daging cincang segar yang mengandung karagenan atau alginat. Hydrocoll

Makanan. 2002, 16, 375–385.

18. Gulrez, SKH; Al-Assaf, S .; Phillips, GO Hydrogels: Metode persiapan, karakterisasi dan aplikasi. Di Kemajuan
dalam Bioteknologi Molekuler dan Lingkungan — Dari Analisis dan Pemodelan hingga Aplikasi Teknologi; InTech:
Rijeka, Kroasia, 2011; Bab 5.
19. Rees, D. Struktur, konformasi dan mekanisme pembentukan gel polisakarida dan jaringan. Adv. Karbohidrat Chem.
Biochem. 1969, 24, 267–332. Wu, P .; Imai, M. Membran Komposit Biopolimer Baru yang Terlibat dengan Perpindahan
20. Massa Selektif dan Permeabilitas Air yang Sangat Baik; InTech: Rijeka, Kroasia, 2012.

21. Bono, A .; Anisuzzaman, SM; Ding, OW Pengaruh kondisi proses terhadap viskositas gel dan kekuatan gel karagenan
semi-halus (SRC) yang dihasilkan dari rumput laut ( Kappaphycus alvarezii).
J. King Saud Univ. Eng. Sci. 2012, 26, 3–9.
22. Ale, MT; Mikkelsen, JD; Meyer, AS Penentu penting untuk bioaktivitas fucoidan: Tinjauan kritis tentang hubungan
fungsi-struktur dan metode ekstraksi untuk polisakarida tersulfasi yang mengandung fucose dari rumput laut coklat. Mar.
Narkoba 2011, 9, 2106–2130.
23. Ale, MT; Meyer, AS Fucoidans dari rumput laut coklat: Pembaruan pada struktur, teknik ekstraksi dan penggunaan enzim sebagai

alat untuk penjelasan struktural. RSC Adv. 2013, 3, 8131–8141. Blanco-Pascual, N .; Alemán, A .; Gómez-Guillén, MC; Montero,

24. MP Ekstraksi dengan bantuan enzim dari κ / ι-hybrid carrageenan dari Mastocarpus stellatus untuk mendapatkan bahan bioaktif

dan aplikasinya untuk pengembangan film aktif yang dapat dimakan. Fungsi Makanan. 2014, 5, 319.

25. De Araújo, IWF; Rodrigues, JAG; Vanderlei, EDSO; de Paula, GA; Lima, TDB; Benevides, NMB
Iota-carrageenans dari Solieria filiformis ( Rhodophyta) dan pengaruhnya pada peradangan dan koagulasi. Acta
Sci. Technol. 2012, 34, 127–135.
26. Varadarajan, SA; Ramli, N .; Ariff, A .; Said, M .; Yasir, SM Pengembangan metode ekstraksi karagenan unggul
dari Eucheuma Cotonii menggunakan selulase dan Aspergillus niger.
Dalam Prosiding Seminar Kimia Bersama UKM-ITB VIII, Bangi, Malaysia, 9–11 Jan 2009; hlm. 461–469.

27. Fleurence, J .; Massiani, L .; Guyader, O .; Mabeau, S. Penggunaan degradasi dinding sel enzimatik untuk perbaikan
ekstraksi protein dari Chondrus crispus, Gracilaria verrucosa dan Palmaria palmata. J. Appl. Phycol. 1995, 7, 393–397.

28. Kulshreshtha, G .; Burlot, A.-S .; Marty, C .; Critchley, A .; Hafting, J .; Bedoux, G .; Bourgougnon, N .; Prithiviraj, B.
Ekstraksi dengan bantuan enzim dari bahan bioaktif dari Chondrus crispus dan Kodium rapuh dan efeknya pada virus
Herpes simpleks (HSV-1). Mar. Narkoba 2015, 13,
558–580.
29. Potin, P .; Richard, C .; Barbeyron, T .; Henrissat, B .; Gey, C .; Petillot, Y .; Hutan, E .; Dideberg, O .; Rochas, C .; Kloareg,

B.Proses dan mekanisme hidrolitik dari κ-carrageenase yang dikodekan cgkA dari Alteromonas carrageenovora. Eur. J.

Biochem. 1995, 228, 971–975.

Mar. Narkoba 2015, 13 3357

30. Barbeyron, T .; Michel, G .; Potin, P .; Henrissat, B .; Kloareg, B. Iota-carrageenases merupakan keluarga baru dari hidrolase

glikosida, tidak terkait dengan kappa-carrageenases. J. Biol. Chem. 2000, 275,

35499–35505.
31. Guibet, M .; Barbeyron, T .; Genicot, S .; Kloareg, B .; Michel, G. Degradasi λ-carrageenan oleh
Pseudoalteromonas carrageenovora λ-carrageenase: Sebuah keluarga baru dari glikosida hidrolase yang tidak berhubungan dengan κ- dan

ι-carrageenase. Biochem. J. 2007, 114, 105–114.

32. Lemoine, M .; Nyvall Collén, P .; Helbert, W. Keadaan fisik kappa-karagenan memodulasi mode aksi
kappa-karagenan dari Pseudoalteromonas carrageenovora. Biochem. J. 2009,
419, 545–553.
33. Michel, G .; Chantalat, L .; Duee, E .; Barbeyron, T .; Henrissat, B .; Kloareg, B .; Dideberg, O. Kappa-carrageenase dari P.

carrageenovora menampilkan situs aktif berbentuk terowongan: Sebuah wawasan baru dalam evolusi hidrolase glikosida
Klan-B. Struktur 2001, 9, 513–25.

34. Henares, BM; Enriquez, EP; Dayrit, FM; Rojas, NRL Iota-karagenan dihidrolisis oleh
Pseudoalteromonas carrageenovora IFO12985. Philipp. J. Sci. 2010, 139, 131–138.
35. Ma, S .; Duan, G .; Chai, W .; Geng, C .; Tan, Y .; Wang, L .; Le Sourd, F .; Michel, G .; Yu, W .; Han, F.Pemurnian,
kloning, karakterisasi dan analisis residu asam amino esensial dari ι-carrageenase baru dari Cellulophaga sp. QY3. PLoS
ONE 2013, 8, e64666. McLean, MW; Williamson, FB Neocarratetraose 4- HAI- monosulfat P- hidrolase dari
36.
Pseudomonas carrageenovora. Eur. J. Biochem. 1981, 456, 447–456. McLean, MW; Williamson, FB Glycosulphatase
37. dari Pseudomonas carrageenovora. Eur. J. Biochem. 1979, 101, 497–505.

38. Préchoux, A .; Genicot, S .; Rogniaux, H .; Helbert, W. Mengontrol struktur karagenan menggunakan sulfatase tergantung
formylglycine baru, an endo- 4S-iota-karagenan sulfatase. Mar. Biotechnol.
2013, 15, 265–274.

39. Raman, R .; Myette, JR; Shriver, Z .; Pojasek, K .; Venkataraman, G .; Sasisekharan, R.Heparin / heparan sulfat
2- HAI- sulfatase dari Flavobacterium heparinum: Sebuah studi struktural dan biokimia dari situs aktif enzim dan
spesifisitas substrat sakarida. J. Biol. Chem.
2003, 278, 12167–12174.

40. Renn, D. Bioteknologi dan industri polisakarida rumput laut merah: Status, kebutuhan dan prospek.
Tren Biotechnol. 1997, 15, 9–14.
41. Li, L .; Ni, R .; Shao, Y .; Mao, S. Karagenan dan aplikasinya dalam pengiriman obat. Karbohidrat Polym. 2014, 103, 1–11.

42. Wong, KF; Craigie, aktivitas JS Sulfohidrolase dan biosintesis karagenan di Chondrus crispus
( Rhodophyceae). Fisiol Tanaman. 1978, 61, 663–666. Rees, DA desulfasi enzimik porphyran. Biochem.
43. J. 1961, 80, 449–453.
44. Ohta, Y .; Hatada, Y .; Miyazaki, M .; Nogi, Y .; Ito, S .; Horikoshi, K. Pemurnian dan Karakterisasi novel
a-agarase dari a Thalassomonas sp. Curr. Mikrobiol. 2005, 50,
212–216.
45. Wang, J .; Mou, H .; Jiang, X .; Guan, H. Karakterisasi β-agarase baru dari laut
Alteromonas sp. SY37-12 dan produknya yang merendahkan. Appl. Mikrobiol. Biotechnol. 2006, 71,
833–839.
Mar. Narkoba 2015, 13 3358

46. Haraguchi, K .; Kodama, T.Pemurnian dan sifat poli (β- D- mannuronate) lyase dari
Azotobacter chroococcum. Appl. Mikrobiol. Biotechnol. 1996, 44, 576–581. Boyd, J .; Turvey, JR Isolasi poly-alpha- L- guluronate
47. lyase dari Klebsiella aerogenes. Karbohidrat Res. 1977, 57, 163–171.

48. Haug, A .; Larsen, B. Biosintesis Alginat: Bagian II. Asam polimannuronat C-5-epimerase dari
Azotobacter vinelandii. Karbohidrat Res. 1971, 17, 297–308. Rees, sintesis enzimik DA dari 3: 6-anhydro- L- galaktosa
49. dalam porphyran dari L- galaktosa unit 6-sulfat. Biochem. J. 1961, 81, 347–352.

50. Araki, C .; Arai, K .; Hirase, S. Studi tentang konstitusi kimia agar-agar. Banteng. Chem. Soc. Jpn. 1967, 40, 1452–1456.

51. Bowker, DM; Turki, JR polisakarida larut dalam air dari alga merah Laurencia pinnatifida
Bagian I. Unit Konstituen. J. Chem. Soc. 1968, 1968, 983–988. Lahaye, M .; Yaphe, W .; Viet, MTP; Rochas, C. 13 Investigasi
52. spektroskopi C-NMR dari oligosakarida agarosa dan polisakarida yang dimetilasi dan diisi. Karbohidrat Res. 1989, 190,

249–265.
53. Craigie, JS; Jurgens, A. Struktur agars dari Gracilaria tikvahiae rhodophyta: Lokasi 4- HAI- metil- L- galaktosa dan
sulfat. Karbohidrat Polym. 1989, 11, 265–278. Lahaye, M .; Rochas, C. Struktur kimia dan sifat fisika-kimiawi
54. agar. Hidrobiologia
1991, 221, 137–148.

55. Rochas, C .; Lahaye, M. Distribusi berat molekul dan berat molekul rata-rata dari agarosa dan polisakarida tipe
agarosa. Karbohidrat Polym. 1989, 10, 289–298.
56. Agargel. Tersedia online: http://www.agargel.com.br/index-en.html (diakses pada 18 Mei 2015). Duff, RB;
57. Perciaval, EG Karbohidrat Sulphuric Ester. Bagian II. Isolasi 3: 6-anhydromethylhexosides dari
methylhexopyranoside sulphatases. J. Chem. Soc. 1941, 1941,
830–833.
58. Macet, M .; Flament, D .; Allouch, J .; Potin, P .; Thion, L .; Kloareg, B .; Czjzek, M .; Helbert, W .; Michel, G .;
Barbeyron, T. The endo- beta-agarase AgaA dan AgaB dari bakteri laut
Zobellia galactanivorans: Dua enzim paralogue dengan organisasi molekuler dan perilaku katalitik yang berbeda. Biochem.
J. 2005, 385, 703–713.
59. Draget, KI; Moe, ST; Skjåk-Bræk, G .; Smidsrød, O. Alginates. Poolysaccharrides Makanan dan Aplikasinya; CRC
Press, Taylor & Francis Grup: Boca Raton, FL, AS, 2006. Bixler, HJ; Porse, H. Satu dekade perubahan dalam industri
60. hidrokoloid rumput laut. J. Appl. Phycol.
2011, 23, 321–335.

61. Davis, TA; Ramirez, M .; Mucci, A .; Larsen, B. Ekstraksi, isolasi dan pengikatan kadmium alginat dari Sargassum spp.
J. Appl. Phycol. 2004, 16, 275–284.
62. Chèze-Lange, H .; Beunard, D .; Dhulster, P .; Guillochon, D .; Cazé, AM; Morcellet, M .; Saude, N .; Junter, GA
Produksi mikroba alginat dalam bioreaktor membran. Mikroba Enzim. Technol.
2002, 30, 656–661.

63. Calumpong, HP; Maypa, AP; Magbanua, M. Populasi dan hasil alginat dan penilaian kualitas empat Sargassum spesies
di Pulau Negros, Filipina tengah. Hidrobiologia 1999,
398–399, 211–215.
Mar. Narkoba 2015, 13 3359

64. Vauchel, P .; Kaas, R .; Arhaliass, A .; Baron, R .; Legrand, J. Sebuah proses baru untuk ekstraksi alginat dari Laminaria
digitata: Ekstrusi reaktif. Technol Bioproses Makanan. 2008, 1,
297–300.
65. Haug, A .; Larsen, B .; Smidsrød, O .; Eriksson, G .; Blinc, R .; Paušak, S .; Ehrenberg, L .; Dumanović, J. Studi
tentang urutan residu asam uronat dalam asam alginat. Acta Chem. Skand.
1967, 21, 691–704.

66. Ertesvåg, H .; Høidal, HK; Schjerven, H .; Svanem, BI; Valla, S. Mannuronan C-5-epimerases dan aplikasinya untuk in vitro dan
in vivo desain alginat baru yang berguna dalam bioteknologi. Metab. Eng. 1999, 1, 262–269.

67. Hardouin, K .; Burlot, AS; Umami, A .; Tanniou, A .; Stiger-Pouvreau, V .; Widowati, I .; Bedoux, G .; Bourgougnon,
N. Aktivitas biokimia dan antivirus hidrolisat enzimatik dari rumput laut Perancis invasif yang berbeda. J. Appl.
Phycol. 2014, 26, 1029–1042.
68. Athukorala, Y .; Jung, WK; Vasanthan, T .; Jeon, YJ Polisakarida antikoagulatif dari hidrolisat enzimatik Ecklonia
cava. Karbohidrat Polym. 2006, 66, 184–191.
69. Heo, SJ; Park, EJ; Lee, KW; Jeon, aktivitas antioksidan YJ ekstrak enzimatik dari rumput laut coklat. Bioresour.
Technol. 2005, 96, 1613–1623.
70. Paul, W .; Sharma, C. Kitosan dan pembalut luka alginat: Tinjauan singkat. Tren Biomater. Artif. Organ 2004, 18, 18–23.

71. Finotelli, PV; da Silva, D .; Sola-Penna, M .; Rossi, AM; Farina, M .; Andrade, LR; Takeuchi, AY; Rocha-Leão, MH
Mikrokapsul dari alginat / kitosan yang mengandung nanopartikel magnetik untuk pelepasan insulin yang terkontrol. Surfing
Koloid. B Biointerfaces 2010, 81, 206–211. Leslie, SK; Cohen, DJ; Sedlaczek, J .; Pinsker, EJ; Boyan, BD; Schwartz, Z.
72. Mengontrol pelepasan sel induk yang diturunkan dari adiposa tikus dari microbeads alginat. Biomaterial 2013, 34, 8172–8184.
Davis, TA; Llanes, F .; Volesky, B .; Mucci, A. Selektivitas logam Sargassum spp. dan alginat mereka dalam hubungannya
73. dengan a- L- kandungan asam guluronat dan konformasi. Mengepung. Sci. Technol.

2003, 37, 261–267.

© 2015 oleh penulis; pemegang lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan
di bawah syarat dan ketentuan lisensi Creative Commons Attribution (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).