PUSAT PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN

BIOMEDIS DAN TEKNOLOGI DASAR KESEHATAN Nomor IK/

BADAN LITBANG KESEHATAN Halaman 1/2
Tgl. Berlaku
PENATALAKSANAAN EKSTRAKSI RNA Revisi 02

COVID-19

Tujuan : Memperoleh RNA murni yang akan digunakan untuk pemeriksaan PCR
Referensi : Protokol Perusahaan
Nama Kit : Viral Nucleic Acid Extraction Kit II (Geneaid-VR300)

A. Bahan dan Peralatan

Bahan dan Reagen Kondisi

No Keterangan
Habis Pakai Penyimpanan
1 VB Lysis Buffer Suhu Ruang
Tambahkan dengan 180 ml Ethanol
2 AD Buffer Suhu Ruang
Absolut (VR300) sebelum dipakai
3 RNase-free Water Suhu Ruang
4 Alkohol absolute Suhu Ruang
5 W1 Buffer Suhu Ruang
Tambahkan dengan 200 ml Ethanol
6 Wash Buffer Suhu ruang
Absolut (VR300) sebelum dipakai
7 VB column Suhu Ruang
8 1,5 ml eppendorf tube Suhu Ruang
Aerosol Barier Tips (1000 µl, 200
9 Suhu Ruang
µl, 100 µl, 20 µl, 10 µl)

No Peralatan
1 Vortex
2 Sentrifuse
3 Mikro pipet (1000 µl, 200 µl, 100 µl, 20 µl, 10 µl)
4 BSC-II
 PUSAT PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN
BIOMEDIS DAN TEKNOLOGI DASAR KESEHATAN Nomor IK/
BADAN LITBANG KESEHATAN Halaman 2/2
Tgl. Berlaku
PENATALAKSANAAN EKSTRAKSI RNA Revisi 02

COVID-19

B. Cara Kerja : Viral Nucleic Acid Extraction Kit II (Geneaid-VR300)

1. Siapkan VB Lysis Buffer 400 µl di dalam 1.5 ml sentrifuge tube

2. Tambahkan 200 µl specimen
3. Vortex dan Spin down beberapa detik
4. Inkubasi suhu ruang 10 menit

5. Tambahkan 450 µl AD Buffer

6. Vortex dan spin down

Spin column
7. Tranfer 600 µl larutan AD lysis buffer + spesimen ke dalam spin colum
Collection tube 8. Sentrifuse 14.000 g dalam suhu 4-80C selama 1 menit
9. Buang supernatan, pasang kembali collection tube yang sama
10. Ulang prosedur 7 - 8

11. Tambahkan 400 µl W1 Buffer

12. Sentrifuse 14.000 g dalam suhu 4 – 8 0C selama 30 detik

13. Buang supernatan, pasang kembali collection tube yang sama

14. Tambahkan lagi 600 µl Wash Buffer
15. Sentrifuse 14.000 g dalam suhu 4-80C selama 30 detik

16. Buang supernatan, pasang kembali collection tube yang sama

17. Sentrifuse 14.000 g dalam suhu 4-80C selama 3 menit

18. Ganti collection tube dengan 1,5 ml recovery tube

1,5 ml recovery tube 19. Tambahkan 50 µl RNase-free water
20. Diamkan dalam suhu ruang (RT) selama 3 menit

17. Sentrifuse 14.000 g dalam suhu 4-80C selama 1 menit.

18. Buang spin colum dan beri label pada tube